CN110940663A - 一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种尿5‑羟吲哚乙酸检测试剂，该检测试剂是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中硝酸汞的浓度为0.12‑0.35mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.56‑1.15mol/L，硝酸锌的浓度为0.25‑1.37mmol/L，磷钼酸的浓度为0.63‑3.10mmol/L，硅钨酸的浓度为2.19‑8.20mmol/L。本发明还提出了尿5‑羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，是将制备好的硝酸汞溶液、硝酸亚汞溶液、硝酸锌溶液、磷钼酸溶液和硅钨酸溶液按一定比例混合制得。本发明尿5‑羟吲哚乙酸检测试剂的制备过程简单，检测结果准确度高，特异性好，检测过程方便快捷，用于癌症检测具有普适性，适于大规模推广。

Description

一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及生化检测领域，尤其涉及一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂及其制备方法。
背景技术
世界卫生组织2018年数据指出，癌症成为全球第二大死因，近六分之一的死亡由癌症造成。根据国际癌症研究署预测，如不采取有效措施，我国癌症发病数和死亡数到2020年将上升至400万人和300万人；2030年将上升至500万人和350万人。迄今，世界各国投入了大量的人力、物力用于肿瘤的预防、诊断和治疗，早期诊断和治疗对于提升肿瘤病人生存率具有至关重要的意义。临床常用如：X线、超声、PET-CT、核磁共振成像等影像方法诊断肿瘤，存在检测费用高、放射性强、耗时长等缺点均不适合作为广泛人群肿瘤早期检测。
5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindole acetic acid,5-HIAA)是单胺类中枢神经递质的一种，是5-羟色胺(5-HT)生成的无活性的酸性代谢终产物，是脑内5-HT的主要代谢途径。5-HT经A型单胺氧化酶(MAO)作用生成5-羟吲哚乙醛，后者在醛脱氢酶的催化下生成5-HIAA，从尿液中排出。5-HIAA是人体内重要的神经递质代谢产物，增高或降低都会间接反映体内某些病理改变，如消化系统粘膜损伤、婴儿脑积水、无先兆偏头疼和妊娠高血压等神经内分泌肿瘤伴类癌综合征时，尿中5-HIAA的水平明显升高，检测24小时尿液中5-HIAA的含量可用于类癌综合征病情的监测及治疗疗效的评估。临床上将5-HIAA的过度分泌作为类癌瘤的最为特异性的生化指征。因此快速有效地检测人尿液中的5-HIAA的含量对类癌综合征病情的评价有着重要的意义。
比色法是目前常用的尿液中5-羟吲哚乙酸的检测方法，检测试剂可以与人体尿液中的5-羟吲哚乙酸发生显色反应，而人体代谢物的排泄受诸多生理或病理因素影响使得尿液成分复杂，某些微量成分或者因其他病因导致的代谢异常产物同样会与检测试剂中的汞离子、亚汞离子结合生成颜色沉淀，会严重干扰检测结果的准确性，常出现假阳性的问题，造成误诊，限制了其应用价值。
发明内容
有鉴于此，本发明提出了尿5-羟吲哚乙酸检测试剂及其制备方法，对5-羟吲哚乙酸有较高的特异性，提高了检测准确性。
本发明的技术方案是这样实现的：
第一方面，本发明提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，其是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液。
在以上技术方案的基础上，优选的，所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂中硝酸汞的浓度为0.12-0.35mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.56-1.15mol/L，硝酸锌的浓度为0.25-1.37mmol/L，磷钼酸的浓度为0.63-3.10mmol/L，硅钨酸的浓度为2.19-8.20mmol/L。
类癌综合征患者往往代谢异常，尿液中5-羟吲哚乙酸的水平较常人明显升高，本发明通过试剂中的硝酸亚汞与5-羟吲哚乙酸反应产生红色、类红色沉淀，从而初步进行癌症筛查。本发明检测试剂中适宜的硝酸汞、硝酸锌能与尿液中其它阴离子如卤素离子、亚硝酸根离子等产生白色沉淀，有效排除阴离子的干扰；因为汞离子和亚汞离子易水解或随温度变化导致二者比例发生变化，让硝酸汞和硝酸亚汞存在于硝酸和磷酸的混酸环境中能使汞离子和亚汞离子更稳定，同时可以避免某些共存离子如铁离子、锌离子和亚汞离子竞争，与5-羟吲哚乙酸反应生成络合物，影响试剂反应的灵敏度；磷钼酸和硅钨酸可以与尿液中的生物碱反应，有效排除其干扰，防止假阳性的结果，但如果浓度太高则可能与试剂中亚汞离子反应，使亚汞离子不能与5-羟吲哚乙酸反应造成假阴性结果。本发明尿5-羟吲哚乙酸检测试剂特异性强，灵敏度和准确性高。
第二方面，本发明提供了第一方面所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的3-6倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
在以上技术方案的基础上，优选的，所述A溶液中硝酸汞浓度为0.16-0.32g/mL。
在以上技术方案的基础上，优选的，所述B溶液中硝酸亚汞浓度为0.79-1.10g/mL。
在以上技术方案的基础上，优选的，所述C溶液中硝酸锌浓度为0.91-2.56mg/mL。
在以上技术方案的基础上，优选的，所述D溶液中磷钼酸浓度为18.43-55.30mg/mL。
在以上技术方案的基础上，优选的，所述E溶液中硅钨酸浓度为0.12-0.18g/mL。
在以上技术方案的基础上，优选的，所述步骤S7中，A、B、C、D和E溶液按照1:(1.2-2.0):(0.2-0.25):(0.8-1.0):(0.25-0.3):(0.2-0.4)体积比混合。
本发明的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂及其制备方法相对于现有技术具有以下有益效果：
(1)本发明检测试剂在硝酸和磷酸混酸介质中检测5-羟吲哚乙酸，能使检测试剂中汞离子和亚汞离子更稳定，同时可以避免某些共存离子的干扰，同时检测试剂包含适量的硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸，能有效地防止假阳性和假阴性结果；
(2)本发明检测试剂的组成成分均是市售常见试剂，制备成本低廉，引入杂质少，检测结果更准确，增强了试剂的灵敏度，操作方便快捷，适宜推广。
具体实施方式
下面将结合本发明实施方式，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式仅仅是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。
如果没有特殊说明，下面实施例所用的原料均为市售。
实施例1
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.12mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.75mol/L，硝酸锌的浓度为0.36mmol/L，磷钼酸的浓度为0.75mmol/L，硅钨酸的浓度为4.17mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的3倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.16g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为0.79g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为0.91mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为18.43mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.12g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:2:0.3:0.3:0.4体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例2
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.31mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.56mol/L，硝酸锌的浓度为1.27mmol/L，磷钼酸的浓度为2.81mmol/L，硅钨酸的浓度为7.82mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的4倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.32g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为0.79g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为2.56mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为55.30mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.18g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:1.2:0.3:0.3:0.4体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例3
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.20mol/L，硝酸亚汞的浓度为1.07mol/L，硝酸锌的浓度为0.25mmol/L，磷钼酸的浓度为1.46mmol/L，硅钨酸的浓度为5.70mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的5倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.25g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为1.10g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为0.91mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为35.00mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.16g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:2:0.2:0.3:0.4体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例4
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.16mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.82mol/L，硝酸锌的浓度为0.80mmol/L，磷钼酸的浓度为0.63mmol/L，硅钨酸的浓度为5.28mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的6倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.20g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为0.85g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为2.00mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为18.43mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.15g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:2:0.3:0.25:0.4体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例5
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.23mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.95mol/L，硝酸锌的浓度为0.92mmol/L，磷钼酸的浓度为1.93mmol/L，硅钨酸的浓度为2.19mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的4倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.28g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为0.95g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为2.20mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为45.00mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.12g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:2:0.3:0.3:0.2体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例6
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.35mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.80mol/L，硝酸锌的浓度为0.78mmol/L，磷钼酸的浓度为2.47mmol/L，硅钨酸的浓度为3.41mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的5倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.32g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为1.00g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为2.10mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为52.00mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.14g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:1.2:0.2:0.25:0.2体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例7
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.25mol/L，硝酸亚汞的浓度为1.15mol/L，硝酸锌的浓度为0.28mmol/L，磷钼酸的浓度为0.76mmol/L，硅钨酸的浓度为2.47mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的3倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.30g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为1.10g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为0.98mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为20.50mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.13g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:2:0.2:0.25:0.2体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例8
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.19mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.76mol/L，硝酸锌的浓度为1.37mmol/L，磷钼酸的浓度为2.48mmol/L，硅钨酸的浓度为4.00mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的6倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.18g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为0.98g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为2.56mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为54.00mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.17g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:1.2:0.3:0.25:0.2体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例9
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.23mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.68mol/L，硝酸锌的浓度为0.79mmol/L，磷钼酸的浓度为3.10mmol/L，硅钨酸的浓度为3.35mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的5倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.22g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为0.86g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为2.18mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为55.3mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.14g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:1.2:0.2:0.3:0.2体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例10
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.26mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.66mol/L，硝酸锌的浓度为0.85mmol/L，磷钼酸的浓度为1.16mmol/L，硅钨酸的浓度为8.20mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的3倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.26g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为0.88g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为2.46mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为26.00mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.18g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:1.2:0.2:0.25:0.4体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
实施例11
本实施例提供了一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液，其中，硝酸汞的浓度为0.28mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.90mol/L，硝酸锌的浓度为1.02mmol/L，磷钼酸的浓度为12.7mmol/L，硅钨酸的浓度为4.68mmol/L。
上述检测试剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的4倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液，A溶液中硝酸汞浓度为0.30g/mL；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液，B溶液中硝酸亚汞浓度为1.05g/mL；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液，C溶液中硝酸锌浓度为2.30mg/mL；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液，D溶液中磷钼酸浓度为30.00mg/mL；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液，E溶液中硅钨酸浓度为0.15g/mL；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液按照1:1.5:0.28:0.26:0.3体积比混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
对比例1
本对比例检测试剂制备方法如下：将浓硝酸1份用水稀释成3份，冷却至室温；称取一定量的硝酸汞溶于上述硝酸溶液中，其中硝酸汞浓度为0.5g/mL；称取一定量的硝酸亚汞溶于上述硝酸溶液中，其中硝酸亚汞浓度为2g/mL；将上述制备的硝酸汞溶液和硝酸亚汞溶液按照1:1.5体积比混合，即得对比例1的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
对比例2
本对比例检测试剂制备方法如下：将浓硫酸1份用水稀释成3份，冷却至室温，称取一定量的硫酸汞溶于上述硫酸溶液中，其中硫酸汞浓度为0.5g/mL；将浓硝酸1份用水稀释成3份，冷却至室温，称取一定量的硝酸亚汞溶于上述硝酸溶液中，其中硝酸亚汞浓度为2g/mL；将上述两种溶液按照1:1.2体积比混合，即得对比例2的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
对比例3
本对比例检测试剂制备方法如下：将浓硫酸1份用水稀释成3份，冷却至室温，称取一定量的硫酸汞溶于上述硫酸溶液中，其中硫酸汞浓度为0.5g/mL；将浓硝酸1份用水稀释成3份，冷却至室温，称取一定量的硝酸亚汞溶于上述硝酸溶液中，其中硝酸亚汞浓度为2g/mL；称取一定量的硝酸镍溶于去离子水中，其中硝酸镍浓度为0.1g/mL；将上述三种溶液按照1:1.2:0.5体积比混合，即得对比例3的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
性能测试
S1、试验对象
(1)经临床确诊为恶性肿瘤的患者共800名，年龄在20-80岁之间，男女各占一半，其中确诊的癌症有胃癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌、直肠癌、鼻咽癌；
(2)非肿瘤良性疾病组共800名，年龄在20-80岁之间，男女各占一半；
(3)正常健康人共1000名，均体检为健康，年龄在20-80岁之间，男女各占一半。
所有试验对象在测试前一天要求均未饮酒，且未服用氨基酸、激素类药物。
S2、试验方法
所有试验对象均取新鲜洁净尿液3mL加入装有0.5mL检测试剂的安瓿瓶中，稍加振荡静置3-5min(若温度低于20℃，在37℃水浴中加热)，将沉淀颜色与标准比色板对照观察，记录结果。
检测尿5-羟吲哚乙酸判定标准如下：
沉淀呈红色或砖红色判定为阳性；沉淀呈粉红色判定为弱阳性；沉淀呈浅黄色或白色判定为阴性。检测结果如表1所示。
表1三个不同组别检测结果
Figure BDA0002338122490000141
Figure BDA0002338122490000151
Figure BDA0002338122490000161
分别选用实施例1、实施例2、实施例9、实施例11、对比例1、对比例2、对比例3分别对200名胃癌、200名肝癌、200名宫颈癌、200名乳腺癌、200名直肠癌、200名鼻咽癌患者测试阳性检出率，测试结果如表2。
表2六种不同癌症检出率
Figure BDA0002338122490000162
由表1和表2可见，本发明各实施例提供的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂均比对比例1-3的检测结果准确率更高，对5-羟吲哚乙酸特异性更强，大大降低了假阳性和假阴性的概率。
以上所述仅为本发明的较佳实施方式而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，其特征在于：所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂是包括硝酸、磷酸、硝酸汞、硝酸亚汞、硝酸锌、磷钼酸和硅钨酸的水溶液。
2.如权利要求1所述的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂，其特征在于：所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂中硝酸汞的浓度为0.12-0.35mol/L，硝酸亚汞的浓度为0.56-1.15mol/L，硝酸锌的浓度为0.25-1.37mmol/L，磷钼酸的浓度为0.63-3.10mmol/L，硅钨酸的浓度为2.19-8.20mmol/L。
3.权利要求1所述的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、混酸溶液的制备：将浓硝酸与浓磷酸等体积混合，加水稀释至混合体积的3-6倍，冷却至室温备用；
S2、A溶液的制备：称取硝酸汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到A溶液；
S3、B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于步骤S1所述混酸溶液中得到B溶液；
S4、C溶液的制备：称取硝酸锌溶于去离子水中得到C溶液；
S5、D溶液的制备；称取磷钼酸溶于去离子水中得到D溶液；
S6、E溶液的制备：称取硅钨酸溶于去离子水中得到E溶液；
S7、将步骤S2、S3、S4、S5和S6中制备的A、B、C、D和E溶液混合，即得所述尿5-羟吲哚乙酸检测试剂。
4.如权利要求3所述的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，其特征在于：所述A溶液中硝酸汞浓度为0.16-0.32g/mL。
5.如权利要求3所述的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，其特征在于：所述B溶液中硝酸亚汞浓度为0.79-1.10g/mL。
6.如权利要求3所述的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，其特征在于：所述C溶液中硝酸锌浓度为0.91-2.56mg/mL。
7.如权利要求3所述的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，其特征在于：所述D溶液中磷钼酸浓度为18.43-55.30mg/mL。
8.如权利要求3所述的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，其特征在于：所述E溶液中硅钨酸浓度为0.12-0.18g/mL。
9.如权利要求3所述的尿5-羟吲哚乙酸检测试剂的制备方法，其特征在于：步骤S7中，所述A、B、C、D和E溶液按照1:(1.2-2.0):(0.2-0.3):(0.25-0.3):(0.2-0.4)体积比混合。
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