CN110938133A - 一种造血干细胞生长因子 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种造血干细胞生长因子，包括胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物；本发明中造血干细胞生长因子为胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物，有效提高造血干细胞生长；本发明中造血干细胞生长因子还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物，进一步提高造血干细胞的生长促进效果；本发明中，还包括氨基酸混合液，所述氨基酸混合液为赖氨酸和蛋氨酸的1:1混合液，赖氨酸和蛋氨酸有助于造血干细胞生长需要，进一步提高造血干细胞的生长促进效果；本发明中采用基因工程的方式获得各细胞关于生长因子的基因，随后诱导表达生长因子；大大提高生产效率。
Description
技术领域
本发明属于细胞培养技术领域，具体为一种造血干细胞生长因子。
背景技术
干细胞生长因子是美国联合哈弗大学、宾夕法尼亚大学、匹兹堡大学、麻省理工大学等机构共同开放的一种具有刺激自体内源性干细胞生长的高效蛋白质、酶组合，也是体外培养干细胞必不可少的各种细胞生长因子的组合，富含表皮生长因子(EGF)、纤维细胞生长因子(FGF)、神经生长因子(NGF)、肝细胞生长因子(HGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、血小板源性生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF)等多重有效成分。临床实验由美国哈弗大学麻省理工大学进行的临床实验，156名Stem Cell GrowthFactors(干细胞生长因子)受试者中有147名出现与对照组明显的差异，证明Stem CellGrowth Factors(干细胞生长因子)可以提高记忆、延缓衰老。动物实验证明Stem CellGrowth Factors(干细胞生长因子)可以快速激活休眠的干细胞并促使其生长，同时可以调节机体内微环境，为干细胞提供有利的生长条件。
然而传统的干细胞生长因子大多从细胞上直接提取，活性低，尤其对于促进造血干细胞生长效果不太理想。
发明内容
本发明的目的在于：为了解决造血干细胞生长因子活性低且效果差的技术问题，提供一种造血干细胞生长因子。
本发明采用的技术方案如下：
一种造血干细胞生长因子，包括胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物；所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为1:1～2:1。
优选的，所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为1.8:1。
优选的，还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物。
优选的，所述骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物按10%～20%的比例添加。
优选的，还包括氨基酸混合液。
优选的，所述氨基酸混合液包括赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和缬氨酸两种或两种以上任意的氨基酸混合液。
优选的，所述氨基酸混合液为赖氨酸和蛋氨酸的1:1混合液。
一种造血干细胞生长因子，其制备方法如下：
步骤1：传代培养；分别取胚胎干细胞和肝细胞置于细胞培养基进行传代培养;
步骤2：获得步骤1中两种细胞的生长因子基因片段和大肠杆菌质粒；
步骤3：分别将两种细胞的生长因子基因片段与大肠杆菌质粒重组；
步骤4：将重组质粒导入受体大肠杆菌体内；
步骤5：对受体大肠杆菌进行培养；
步骤6：诱导表达，诱导大肠杆菌表达生长因子；
步骤7：分离提纯，获得两种细胞关于生长因子的基因表达物；
步骤8：将上述两种细胞关于生长因子的基因表达物按1:1～2:1的混合比例混合得到造血干细胞生长因子。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1、本发明中造血干细胞生长因子为胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物，活性高，有效提高造血干细胞生长。
2、本发明中造血干细胞生长因子还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物，进一步提高造血干细胞的生长促进效果。
3、本发明中，还包括氨基酸混合液，所述氨基酸混合液为赖氨酸和蛋氨酸的1:1混合液，赖氨酸和蛋氨酸有助于造血干细胞生长需要，进一步提高造血干细胞的生长促进效果。
4、本发明中采用基因工程的方式获得各细胞关于生长因子的基因，随后诱导表达生长因子；大大提高生产效率。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例一，一种造血干细胞生长因子，包括胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物；所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为0.5：1。
优选的，还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物；所述骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物按8%的比例添加。
优选的，还包括氨基酸混合液。所述氨基酸混合液由赖氨酸、色氨酸两种氨基酸按1:1混合得到混合液。
一种造血干细胞生长因子，其制备方法如下：
步骤1：传代培养；分别取胚胎干细胞和肝细胞置于细胞培养基进行传代培养;
步骤2：获得步骤1中两种细胞的生长因子基因片段和大肠杆菌质粒；
步骤3：分别将两种细胞的生长因子基因片段与大肠杆菌质粒重组；
步骤4：将重组质粒导入受体大肠杆菌体内；
步骤5：对受体大肠杆菌进行培养；
步骤6：诱导表达，诱导大肠杆菌表达生长因子；
步骤7：分离提纯，获得两种细胞关于生长因子的基因表达物；
步骤8：将上述两种细胞关于生长因子的基因表达物按0.5:1的混合比例混合得到造血干细胞生长因子。
实施例二，一种造血干细胞生长因子，包括胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物；所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为1：1。
优选的，还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物；所述骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物按10%比例添加。
优选的，还包括氨基酸混合液；所述氨基酸混合液包括苯丙氨酸、蛋氨酸、两种氨基酸按1：1混合得到混合液。
一种造血干细胞生长因子，其制备方法如下：
步骤1：传代培养；分别取胚胎干细胞和肝细胞置于细胞培养基进行传代培养;
步骤2：获得步骤1中两种细胞的生长因子基因片段和大肠杆菌质粒；
步骤3：分别将两种细胞的生长因子基因片段与大肠杆菌质粒重组；
步骤4：将重组质粒导入受体大肠杆菌体内；
步骤5：对受体大肠杆菌进行培养；
步骤6：诱导表达，诱导大肠杆菌表达生长因子；
步骤7：分离提纯，获得两种细胞关于生长因子的基因表达物；
步骤8：将上述两种细胞关于生长因子的基因表达物按1：1的混合比例混合得到造血干细胞生长因子。
实施例三，一种造血干细胞生长因子，包括胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物；所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为1.5：1。
优选的，还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物；所述骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物按15%的比例添加。
优选的，还包括氨基酸混合液；所述氨基酸混合液由苏氨酸和异亮氨酸两种氨基酸按1:1比例混合得到氨基酸混合液。
一种造血干细胞生长因子，其制备方法如下：
步骤1：传代培养；分别取胚胎干细胞和肝细胞置于细胞培养基进行传代培养;
步骤2：获得步骤1中两种细胞的生长因子基因片段和大肠杆菌质粒；
步骤3：分别将两种细胞的生长因子基因片段与大肠杆菌质粒重组；
步骤4：将重组质粒导入受体大肠杆菌体内；
步骤5：对受体大肠杆菌进行培养；
步骤6：诱导表达，诱导大肠杆菌表达生长因子；
步骤7：分离提纯，获得两种细胞关于生长因子的基因表达物；
步骤8：将上述两种细胞关于生长因子的基因表达物按1.5:1的混合比例混合得到造血干细胞生长因子。。
实施例四，一种造血干细胞生长因子，包括胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物；所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为1.8：1。
优选的，所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为1.8:1。
优选的，还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物；所述骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物按10%的比例添加。
优选的，还包括氨基酸混合液；所述氨基酸混合液包括亮氨酸和缬氨酸两种氨基酸按1:1混合得到氨基酸混合液。
一种造血干细胞生长因子，其制备方法如下：
步骤1：传代培养；分别取胚胎干细胞和肝细胞置于细胞培养基进行传代培养;
步骤2：获得步骤1中两种细胞的生长因子基因片段和大肠杆菌质粒；
步骤3：分别将两种细胞的生长因子基因片段与大肠杆菌质粒重组；
步骤4：将重组质粒导入受体大肠杆菌体内；
步骤5：对受体大肠杆菌进行培养；
步骤6：诱导表达，诱导大肠杆菌表达生长因子；
步骤7：分离提纯，获得两种细胞关于生长因子的基因表达物；
步骤8：将上述两种细胞关于生长因子的基因表达物按1.8：1的混合比例混合得到造血干细胞生长因子。。
实施例五，一种造血干细胞生长因子，包括胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物；所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为2：1。
优选的，所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为2：1。
优选的，还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物。
优选的，所述骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物按20%的比例添加。
优选的，还包括氨基酸混合液。
优选的，所述氨基酸混合液包括赖氨酸和蛋氨酸两种氨基酸按1:1的混合比例混合得到氨基酸混合液。
一种造血干细胞生长因子，其制备方法如下：
步骤1：传代培养；分别取胚胎干细胞和肝细胞置于细胞培养基进行传代培养;
步骤2：获得步骤1中两种细胞的生长因子基因片段和大肠杆菌质粒；
步骤3：分别将两种细胞的生长因子基因片段与大肠杆菌质粒重组；
步骤4：将重组质粒导入受体大肠杆菌体内；
步骤5：对受体大肠杆菌进行培养；
步骤6：诱导表达，诱导大肠杆菌表达生长因子；
步骤7：分离提纯，获得两种细胞关于生长因子的基因表达物；
步骤8：将上述两种细胞关于生长因子的基因表达物按2：1的混合比例混合得到造血干细胞生长因子。
将实施例一～五中的造血干细胞生长因子分别随造血干细胞进行培养，经过实验得到实施例四中，造血干细胞生长指标高，体积大，活性和分裂能力强；故选择实施例四为最优实施例。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种造血干细胞生长因子，其特征在于：包括胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物。
2.如权利要求1所述的一种造血干细胞生长因子，其特征在于：所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为1:1～2:1。
3.如权利要求2所述的一种造血干细胞生长因子，其特征在于：所述胚胎干细胞关于生长因子的基因表达物和肝细胞的关于生长因子的基因表达物的混合比例为1.8:1。
4.如权利要求2所述的一种造血干细胞生长因子，其特征在于：其制备方法如下：
步骤1：传代培养；分别取胚胎干细胞和肝细胞置于细胞培养基进行传代培养;
步骤2：获得步骤1中两种细胞的生长因子基因片段和大肠杆菌质粒；
步骤3：分别将两种细胞的生长因子基因片段与大肠杆菌质粒重组；
步骤4：将重组质粒导入受体大肠杆菌体内；
步骤5：对受体大肠杆菌进行培养；
步骤6：诱导表达，诱导大肠杆菌表达生长因子；
步骤7：分离提纯，获得两种细胞关于生长因子的基因表达物；
步骤8：将上述两种细胞关于生长因子的基因表达物按1:1～2:1混合比例混合得到造血干细胞生长因子。
5.如权利要求1所述的一种造血干细胞生长因子，其特征在于：还包括骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物。
6.根据权利要求5所述的美容用表皮干细胞生长因子制备方法，其特征在于，所述骨髓干细胞关于生长因子的基因表达物按10%～20%的比例添加。
7.如权利要求1所述的一种造血干细胞生长因子，其特征在于：还包括氨基酸混合液。
8.如权利要求7所述的一种造血干细胞生长因子，其特征在于：所述氨基酸混合液包括赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和缬氨酸两种或两种以上任意的氨基酸混合液。
9.如权利要求8所述的一种造血干细胞生长因子，其特征在于：所述氨基酸混合液为赖氨酸和蛋氨酸的1:1混合液。
10.一种包含权利要求1-9任一所述造血干细胞生长因子的细胞生长促进物。
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