CN110859823A

CN110859823A - 光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球及其制备方法

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Publication number: CN110859823A
Application number: CN201911157771.0A
Authority: CN
Inventors: 杨子明; 李普旺; 陈煜�; 冯长根; 周闯; 何祖宇; 王超; 刘显武; 吕明哲; 刘运浩
Original assignee: Beijing Institute of Technology BIT; Agricultural Products Processing Research Institute of CATAS
Current assignee: Beijing Institute of Technology BIT; Agricultural Products Processing Research Institute of CATAS
Priority date: 2019-11-22
Filing date: 2019-11-22
Publication date: 2020-03-06

Abstract

本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，该纳米载药微球以聚合物羧甲基壳聚糖/N‑异丙基丙烯酰胺为骨架，负载腙键结合的纳米金‑盐酸阿霉素于所述骨架表面形成的纳米微球。本发明还提供了上述纳米载药微球的制备方法。本发明所提供的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，不仅解决了壳聚糖难溶于水的问题，同时通过改变近红外光照和温度的条件，使纳米微球材料发生相变，亲水链崩塌，溶剂化层被破坏，缓慢释放药物，提高药物的载药率，把控药物精准释放。

Description

光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球及其制备方法

技术领域

本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球及其制备方法。

背景技术

敏感型纳米载体是一类能对外界物理化学刺激(如光、超声、磁场、pH等)做出反应，通过改变其结构、性能继而促进或抑制药物释放的纳米材料，可大幅度减少单纯化疗的副作用，已成为新型的肿瘤靶向药物转运的方式。运用敏感型纳米载体作为控释药物载体已成为热潮，而大部分控释药物载体由于材料的选择不当、制备方法复杂及制备过程中的不当操作，缓释把控和载药能力大不如人意。

在材料的选择上，羧甲基壳聚糖因其具有良好的水溶性、生物相容性和可降解性，被广泛引用于药物载体材料；聚N-异丙基丙烯酰胺(PNIPAm)因其有一特殊的相转变温度成为良好的温敏材料，其低临界溶解温度(LCST)约32℃；纳米金粒子通过修饰基团获得对肿瘤细胞的靶向性，将抗肿瘤药物高浓度的聚集于肿瘤细胞，发挥杀肿瘤作用。

但在实际研究和应用中发现，纳米金粒子制备过程中其表面修饰的配体导致其具有细胞毒性，而且在体内容易聚集，因此需要将其与生物相容性聚合物凝胶体系进行复合，或对其表面进行无毒化修饰来保证其在生物体内的应用，但现有技术中负载纳米金的载体载药量低，在实际应用中受限；再如，专利CN105566538A公开一种基于金纳米粒子和微凝胶的光热响应型复合药物载体的制备方法，虽然可以通过简单有效的温度控制药物靶向释放，但是金纳米粒子制备过程中，其表明修饰的配体具有细胞毒性。而且，现有的研究报道以N-异丙基丙烯酰胺、纳米金或N-异丙基丙烯酰胺、羧甲基壳聚糖为原材料制备的敏感型材料，实际制备过程中，存在制备的纳米微球载药量低、缓释效果不佳、成本高、毒副作用较大的问题。

因此，如何通过简单有效的合成方法，构建具有光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球载药体系提高载药量和缓释效果，是亟需解决的困难和挑战。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有中空结构的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，以解决目前载药材料存在的载药量低、缓释效果不佳。

本发明的另一个目的在于提供上述光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备方法，通过均质乳化机、简化制备方法并将纳米金与生物相容性良好的羧甲基壳聚糖结合降低了毒副作用，将负载技术进一步简单化，以解决部分技术中因未改性壳聚糖需要用酸溶液进行溶解从而对机体造成刺激和毒副作用的问题，以及克服负载纳米金-阿霉素技术步骤的复杂化的问题。

根据本发明的一个方面，提供了一种光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，以聚合物羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺为中空骨架，负载腙键结合的纳米金-盐酸阿霉素于骨架表面形成的纳米微球。

羧甲基壳聚糖与壳聚糖的理化性质等极为相似，但由于羧甲基的引入，其结晶度被显著降低，因而具有较好的水溶性；同时，羧甲基壳聚糖作为作为天然的高分子材料，具有良好的生物相容性、可降解性等优异的生物学特性，利用化学改性，将温敏材料N-异丙基丙烯酰胺接枝到羧甲基壳聚糖上，制备成温敏型壳聚糖衍生物，当外界温度高于LCST时，NIPAm表现为疏水性，收缩而释放药物。

纳米金稳定性差，暴露在阳光下极易被分解，将纳米金封装在温敏型羧甲基壳聚糖纳米微球中，不仅提高了纳米金的稳定性，同时也为改性羧甲基壳聚糖引入了崭新的物化性质，当其受到合适波长的近红外光照射时可以转换释放大量热能，而释放的热能可以使肿瘤组织温度上升到有效的治疗温度，并维持一段时间，从而杀伤肿瘤细胞。同时，纳米金吸收红外线而产热的特点也可以用来对阿霉素进行控释，使阿霉素脉冲式释放发挥抗肿瘤作用；当纳米金吸收红外线而产热、热量高于LCST时，NIPAm表现为疏水性，收缩而释放药物。

由此，骨架材料羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺具备良好的温度敏感性能，可以通过调控温度把控药物释放，纳米金可吸收近红外光，将光能转化为热能，在2～6min内使体系温度上升至80～90℃；将温敏材料和光敏材料二者结合，表现出良好的光热敏感效果，可以通过调控近红外光和温度条件来控制释放药物，实现在机体特定部位精准释放药物，达到光热治疗和化疗协同治疗效果，形成了一种光热转化效果优秀的药物载体材料，为联合治疗癌症提供思路；同时纳米微球比表面积大，有效提高了药物的包埋率和载药量。

在一些实施方式中，微球粒径大小为10～100nm，包埋率为86.45％～97.23％，载药量为19.50％～30.50％。由此，以纳米微球作为纳米金和阿霉素的载体，起到长效缓释作用。

在一些实施方式中，羧甲基壳聚糖的分子量为10～20万、脱乙酰度为90～95％，羧化度为80～90％。

本发明所提供的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，不仅解决了壳聚糖难溶于水的问题，同时通过改变近红外光照和温度的条件，使纳米微球材料发生相变，亲水链崩塌，溶剂化层被破坏，缓慢释放药物，提高药物的载药率，把控药物精准释放。本发明的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，以羧甲基壳聚糖结合温敏材料N-异丙基丙烯酰胺和光敏剂纳米金形成微球，在生物医学和功能材料领域有着广泛的应用。

根据本发明的一个方面，提供了上述光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备方法，步骤如下：

(1)将聚合物羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺溶于水配成浓度为0.5～2.0wt％的聚合物溶液，向该聚合物溶液中加入定量0.5mg/mL的纳米金溶液和0.5mg/mL盐酸阿霉素溶液，然后向聚合物溶液中加入吐温-80配成聚合物-吐温溶液；

(2)将液体石蜡和司班-80混合作为油相，向该油相中滴加步骤(1)制得的聚合物-吐温溶液，经剪切制得油包水乳液；

(3)将步骤(2)制得的乳液调pH至4.0～6.0，在0～7℃下向乳液中缓慢滴加1～3mL的香草醛液体固化0.5～1.0h后，移入40～50℃条件下反应3～4h，得光热敏感型纳米微球悬浮液，将悬浮液离心洗涤后冷冻干燥，即得。

在一些实施方式中，步骤(1)中聚合物羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺通过如下方法制备得到：

将羧甲基壳聚糖和N-异丙基丙烯酰胺分散于去离子水中溶解，在氮气氛围下加热到60～70℃，加入过硫酸钾反应，离心纯化后真空干燥即得。由此，将N-异丙基丙烯酰胺接枝到羧甲基壳聚糖上形成共聚物，一方面可以改善壳聚糖难溶于水的问题；另一方面，共聚物具备良好的温度敏感性能，可以通过调控温度把控药物释放。步骤(1)的反应式如下：

上述反应式中，式(I)所示的CMCS为分子量10～20万、脱乙酰度90～95％、羧化度80～90％的羧甲基壳聚糖；式(II)所示的化合物为羧甲基壳聚糖与过硫酸钾引发剂在氮气氛围下作用形成的中间产物；式(III)所示的化合物为式(II)所示的化合物与NIPAm(N-异丙基丙烯酰胺单体)在氮气氛围下反应后所得产物，即羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺(CMCS-NIPAm)。

具体地，羧甲基壳聚糖与N-异丙基丙烯酰胺质量比为1：1，过硫酸钾用量为8～10mg。

在一些实施方式中，步骤(1)中纳米金的用量为聚合物溶液用量的0.01～0.1wt％，吐温-80的用量为聚合物溶液用量的1.0～5.0wt％。

在一些实施方式中，步骤(2)中水相滴加到油相中时在500～700r/min搅拌下进行，然后在6000～8000r/min下剪切10～15min，所述司班-80的用量为聚合物溶液用量的1.0～5.0wt％。

在一些实施方式中，步骤(3)中使用1.0～5.0wt％盐酸调节pH至4.0～6.0，调节pH后搅拌10～20min，冷冻干燥温度为-60～-70℃，干燥时长24～48h。

本发明的纳米微球以羧甲基壳聚糖接枝N-异丙基丙烯酰胺共聚物与纳米金-阿霉素复合为水相，用司班-80的液体石蜡作为油相通过香草醛交联作用形成油包水型光热敏感型纳米微球；通过自由基组合法制备温敏聚合材料，随后通过乳化交联的方法，包载纳米金-阿霉素制备成油包水型光热敏感型羧甲基壳聚纳米微球，其比表面积大，有利用提高药物的负载率。

根据本发明的一个方面，提供了上述光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球作为药物载体的应用，具体地，光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球材料可以用于制备药物载体等。

本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：

1.本发明的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，以聚合物羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺形成中空结构的骨架，增加了微球比表面积，大大提升了纳米金-阿霉素药物的负载率；同时，通过将温敏材料N-异丙基丙烯酰胺接枝到羧甲基壳聚糖上形成温敏型壳聚糖衍生物、将纳米金封装在温敏型羧甲基壳聚糖纳米微球中，不仅解决了纳米金不稳定的问题，而且由于纳米金良好的光热效应作用显著提高羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺共聚物光热敏感性能，具有良好温度释放和近红外光可控释放性能，实现近红外光和温度敏感双重调控药物有效释放，大大改善缓释效果，达到光热治疗和化疗联合治疗癌症的理想效果。

2、本申请的原料采用的是天然高分子羧甲基壳聚糖，具有良好生物相容性，生物可降解、无毒等特性。羧甲基壳聚糖水溶性效果好，采用去离子水即可溶解改性羧甲基壳聚糖，而单纯的壳聚糖需要使用酸溶液进行溶解，避免了引入对机体有损害的酸性物质，因而，对人体具有很好的安全性。而且，利用生物相容性好的羧甲基壳聚糖与纳米金结合，通过纳米金与羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺共聚物的复合降低纳米金的毒副作用。

3.本发明制备的羧甲基壳聚糖纳米微球分散性好，粒径较小，分布均匀，比表面积大，包埋率、载药量高，能够很好地共负载纳米金和盐酸阿霉素。

4.本发明以羧甲基壳聚糖溶液为水相、液体石蜡为油相形成油包水型乳液，以香草醛为交联剂，采用乳化交联法制得的羧甲基壳聚糖微球具有光热转化效果突出、无毒副作用、操作简单等特点。

附图说明

图1为光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球材料SEM图；

图2为光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球材料粒度大小与分布图；

图3为0.5mg/mL光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球溶液在近红外光照射10min条件下的光热转化效果图；

图4为羧甲基壳聚糖接枝N-异丙基丙烯酰胺共聚物傅里叶红外表征图；

图5为光热敏感型纳米微球溶液和羧甲基壳聚糖微球溶液在有无近红外光照条件下阿霉素体外缓释图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细的说明。若无特殊说明，以下化学试剂均为市购。

实施例1油水比为10:1的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备1、CMCS-NIPAm共聚物的制备

将质量比为1:1的0.24g羧甲基壳聚糖与0.24g N-异丙基丙烯酰胺溶于20mL去离子水中，磁力搅拌加速溶解，氮气保护下加热到70℃，缓慢滴加5mg/mL的过硫酸钾2mL引发聚合反应，氮气氛围下保持70℃反应3h，用丙酮沉淀在10000r/min的转速下离心10min后，40℃真空干燥得羧甲基壳聚糖接枝N-异丙基丙烯酰胺聚合物(CMCS-NIPAm共聚物)。

对实施例1所制备的CMCS-NIPAm共聚物进行傅里叶红外表征，扫描结果如图4所示，CMCS的光谱特征如下：3427cm^-1为O-H和N-H伸缩，1608cm^-1为C＝O伸展酰胺基，1418cm^-1为N-H酰胺基的平面弯曲振动，1303cm^-1是甲基和亚甲基的C-H弯曲振动，1080cm^-1归因于CMCS中烷氧基键的C-O伸缩。NIPAm的光谱特征如下：3309cm^-1和3076cm^-1是PNIPAm中的N-H伸缩，2967cm^-1和2935cm^-1是甲基、亚甲基和甲烷的C-H伸缩，1649cm^-1和1541cm^-1是特征性的宽酰胺带吸收峰，1457cm^-1和1374cm^-1是甲基，亚甲基和甲烷的C-H弯曲振动。从CMCS-NIPAm的FTIR光谱图可以看出这些出现在NIPAm的FTIR光谱中的吸收峰也显示在CMCS-NIPAm共聚物的光谱中。与CMCS的光谱图相比，CMCS-NIPAm共聚物光谱图在3600-2900cm^-1范围内增加了两个特征峰，这是由于CMCS与NIPAm反应，产物中引入的甲基、亚甲基和甲烷的C-H伸缩吸收峰，同时1654cm^-1和1546cm^-1宽酰胺带的接入，表明NIPAm接枝到CMCS上，成功合成CMCS-PNIPAm共聚物。

2、光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备

1)配置四种溶液：取0.5g CMCS-NIPAm共聚物溶于50mL水中，配制成质量分数为1％的CMCS-NIPAm共聚物溶液；取5mg纳米金溶于10ml水中，配制成0.5mg/mL的纳米金溶液，全程避光；取5mg盐酸阿霉素溶于10ml水中，配制成0.5mg/mL的盐酸阿霉素溶液，全程避光；配制质量分数为10％的香草醛丙酮溶液10ml；

2)取100mL液体石蜡于250mL三口烧瓶中，分别加入0.3mL的司班-80和吐温-80，于600r/min的转速下搅拌均匀作为油相；

3)在600r/min的搅拌速度和50℃温度条件下把10mL CMCS-NIPAm共聚物溶液、1mL纳米金溶液和1mL盐酸阿霉素溶液混合液缓慢滴加到三口烧瓶的油相中，乳化1h后，在8000r/min的转速下剪切乳化10min，用1％的盐酸溶液调pH至5.0；

4)在4℃冰浴下向三口烧瓶中缓慢滴加2mL香草醛丙酮溶液，固化0.5h后移入50℃条件下反应4h即得纳米微球悬浮液，将纳米微球悬浮液分别用石油醚、异丙醇和水各洗三次，冷冻干燥得纳米微球固体。

对实施例1所制备的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球进行电镜扫描，扫描结果如图1所示，从图中可以清晰看出纳米微球呈微球结构；

对实施例1所制备的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球经激光衍射法粒度分析仪检测，检测结果如图2所示，其粒度达到纳米级别，粒径分布在10nm～100nm。

将实施例1制备得到的纳米微球固体溶于水，配成0.5mg/mL光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球溶液，将其置于在近红外光照射10min，观察光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球光热转化效果，结果如图3所示，由图3可知，本实施例制备得到的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球表现出很好的光热转化效果。

实施例2油水比为20:1的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备1、CMCS-NIPAm共聚物的制备

同样，通过对实施例2所制备的CMCS-NIPAm共聚物进行傅里叶红外表征，以确保N-异丙基丙烯酰胺成功接枝到羧甲基壳聚糖上。

2、光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备

2)取200mL液体石蜡于250mL三口烧瓶中，分别加入0.3mL的司班-80和吐温-80，于600r/min的转速下搅拌均匀作为油相；

3)在600r/min的搅拌速度和50℃温度条件下把10mL CMCS-NIPAm共聚物溶液、1mL纳米金溶液和1mL盐酸阿霉素溶液混合后缓慢滴加到三口烧瓶的油相中，乳化1h后，在8000r/min的转速下剪切乳化10min，用1％的盐酸溶液调pH至5.0；

对实施例2所制备的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球进行电镜扫描和粒度大小分析，其形态也呈微球结构，其粒度达到纳米级别，粒径分布在10nm～100nm。

实施例3油水比为30:1的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备

1、CMCS-NIPAm共聚物的制备

将质量比为1:1的0.24g羧甲基壳聚糖与0.24gN-异丙基丙烯酰胺溶于20mL去离子水中，磁力搅拌加速溶解，氮气保护下加热到70℃，缓慢滴加5mg/mL的过硫酸钾2mL引发聚合反应，氮气氛围下保持70℃反应3h，用丙酮沉淀在10000r/min的转速下离心10min后，40℃真空干燥得羧甲基壳聚糖接枝N-异丙基丙烯酰胺聚合物(CMCS-NIPAm共聚物)。

同样，通过对实施例3所制备的CMCS-NIPAm共聚物进行傅里叶红外表征，以确保N-异丙基丙烯酰胺成功接枝到羧甲基壳聚糖上。

2、光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备

2)取300mL液体石蜡于500mL三口烧瓶中，分别加入0.3mL的司班-80和吐温-80，于600r/min的转速下搅拌均匀作为油相；

对实施例3所制备的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球进行电镜扫描和粒度大小分析，其形态也呈微球结构，其粒度达到纳米级别，粒径分布在10nm～100nm。

试验1光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球载药量和包埋率的测定试验1、试验对象：实施例1～3所制备的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球及羧甲基壳聚糖微球材料。

2、试验方法

分别精密称取10mg的干燥光热敏感型纳米微球和羧甲基壳聚糖微球，记为A组和B组，依次加入20mL去离子水，搅拌20min，使其充分分散于水中，连续震荡24小时充分提取阿霉素后，过滤取澄清液在480nm条件下测定两组微球的吸光度值，对照阿霉素溶液的标准曲线，根据如下公式计算得到两组微球的包埋率和载药率。

载药率(DL)＝W_e/W_m×100％；

包封率(EE)＝(W_e-W_o)/W_e×100％。

式中：W_e指纳米微球包裹的药物质量；

W_o指体系游离的药物质量；

W_m指纳米微球总质量。

3、试验结果

试验结果记录于表1，由表1可看出，实施例1-实施例3制备得到的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球包埋率分布在86.45％～97.23％，载药量分布在为19.50％～30.50％之间，而单纯的羧甲基壳聚糖纳米微球包埋率分布在68.78％～79.41％，载药量分布在为12.78％～16.95％之间，相比而言，实施例1-实施例3制备得到的纳米微球载药量和包封率均大大提高。

表1实施例1～3与羧甲基壳聚糖微球包埋率和载药量对比

试验2光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球体外释放测定试验

1、试验对象：实施例1～3所制备的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球及羧甲基壳聚糖微球材料。

2、试验方法

依次精密称取两组10mg负载纳米金-阿霉素后的光热敏感型羧甲基纳米微球记为A₁、A₂组，称取10mg负载纳米金-阿霉素后的羧甲基壳聚糖纳米微球记为B组放入PBS缓冲液中，三组样品均放置在室温下暗处，A₁组、B组经近红外光照射处理，A₂组未经近红外光照射处理，然后每隔0.5h移取3mL的释放溶液，同时补充相同量的空白PBS缓冲溶液，以维持释放体系的溶液体积不变，在此条件下累积释放24h。用紫外分光光度计测定其在阿霉素溶液的紫外最大吸收波长，每隔0.5h测定其吸光度。

3、试验结果

在累积释放24h后，A₂组和B组释放量为38.15％、47.14％，而近红外光照射A₁组因为纳米金吸收近红外光，将光能转化为热能，材料发生相变，加速药物释放，释放量为90.26％，释放量显著提高，释放结果如图5。

以上所述的仅是本发明的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims

1.光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，其特征在于，以聚合物羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺为骨架，负载腙键结合的纳米金-盐酸阿霉素于所述骨架表面形成的纳米微球。

2.根据权利要求1所述的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，其特征在于，所述微球粒径大小为10～100nm，包埋率为86.45％～97.23％，载药量为19.50％～30.50％。

3.根据权利要求1所述的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球，其特征在于，所述羧甲基壳聚糖的分子量为10～20万、脱乙酰度为90～95％，羧化度为80～90％。

4.权利要求1-3任一项所述的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(3)将步骤(2)制得的乳液调pH至4.0～6.0，在0～7℃下向乳液中缓慢滴加1～3mL的香草醛液体固化后，移入40～50℃条件下反应3～4h，得光热敏感型纳米微球悬浮液，将悬浮液离心洗涤后冷冻干燥，即得。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中聚合物羧甲基壳聚糖/N-异丙基丙烯酰胺通过如下方法制备得到：

将羧甲基壳聚糖和N-异丙基丙烯酰胺分散于去离子水中溶解，在氮气氛围下加热到60～70℃，加入过硫酸钾反应，离心纯化后真空干燥即得。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述羧甲基壳聚糖与N-异丙基丙烯酰胺质量比为1：1，过硫酸钾用量为8～10mg。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述纳米金的用量为聚合物溶液用量的0.01～0.1wt％，所述吐温-80的用量为聚合物溶液用量的1.0～5.0wt％。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中水相滴加到油相中时在500～700r/min搅拌下进行，然后在6000～8000r/min下剪切10～15min，所述司班-80的用量为聚合物溶液用量的1.0～5.0wt％。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中使用1.0～5.0wt％盐酸调节pH至4.0～6.0，调节pH后搅拌10～20min，冷冻干燥温度为-60～-70℃，干燥时长24～48h。

10.权利要求1所述的光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球作为载体的应用，其特征在于，光热敏感型羧甲基壳聚糖纳米载药微球为药物载体。