CN110835620A - 一株植物乳杆菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一株植物乳杆菌L.P JL01，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2019年7月1日，保藏编号为CGMCC NO.18056。本发明还公开了其在抗鼠伤寒沙门菌方面、提高仔猪增重和调节免疫反应方面的应用。植物乳杆菌L.P JL01能够抵抗鼠伤寒沙门菌感染，也能够提高仔猪增重，在调节体液和细胞免疫以抵御病原菌感染方面具有潜在的益生作用。

Description

一株植物乳杆菌及其应用
技术领域
本发明涉及微生物工程技术领域，具体涉及一株植物乳杆菌L.P JL01及其应用。
背景技术
沙门菌是一类革兰阴性的胞内寄生菌，是食源性人兽共患细菌性传染病的重要病原，每年近340万人感染该病原，因此防御和控制沙门菌感染具有重要的公共卫生意义。沙门菌可以通过污染的水或食物造成人和动物胃肠道系统疾病。传统的抗生素治疗在该病的治疗中发挥了重要作用，然而抗生素滥用也造成了沙门菌的多重耐药问题日趋严重，因此寻求更为安全有效的防治策略势在必行。
乳酸菌作为益生菌重要成员，对人和动物健康具有重要益生作用，具有绿色、安全、无污染的特点，在预防和治疗肠道病原菌感染等引起的各种肠炎和腹泻方面优势突出。其一方面通过调节肠道菌群平衡、释放有机酸、细菌素等抗菌物质而抑制肠道致病菌的生长；另一方面，乳酸菌还能调节肠道黏膜免疫效应、激活免疫细胞的功能等发挥其对肠道病原的免疫防御作用。然而乳酸菌种类众多，其益生效果具有较强的菌株依赖性，因此，有必要明确菌株的益生作用和优势，为益生菌菌种库的开发奠定基础。
发明内容
本发明的目的是提供一株植物乳杆菌L.P JL01及其应用，以解决现有技术的不足。
本发明采用以下技术方案：
本发明第一方面提供了一株植物乳杆菌L.P JL01，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2019年7月1日，保藏编号为CGMCC NO.18056。
进一步地，植物乳杆菌L.P JL01其16SrRNA的基因序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明第二方面提供了植物乳杆菌L.P JL01在抗鼠伤寒沙门菌方面的应用。
本发明第三方面提供了植物乳杆菌L.P JL01在提高仔猪增重和调节免疫反应方面的应用。
本发明的有益效果：
本发明从健康仔猪肠道中筛选到了一株能够抵抗鼠伤寒沙门菌感染的植物乳杆菌L.P JL01菌株，且其也能够提高仔猪增重，在调节体液和细胞免疫以抵御病原菌感染方面具有潜在的益生作用。
附图说明
图1为植物乳杆菌L.P JL01 Blast分析比对图。
图2为植物乳杆菌L.PJL01耐酸和耐胆盐检测。
图3为植物乳杆菌L.PJL01对鼠伤寒沙门菌的体外抑菌活性的检测。
图4为植物乳杆菌L.P JL01对鼠伤寒沙门菌感染小鼠体重的影响。
图5为植物乳杆菌L.P JL01对鼠伤寒沙门菌感染小鼠存活率的影响。
图6为不同组小鼠结肠的病理变化。
图7为鼠伤寒沙门菌在体内器官定植分布数量检测。
图8为不同组小鼠肠黏膜SIgA分泌水平检测。
图9为不同组小鼠肠黏膜内毒素的分泌水平检测。
图10为不同组仔猪体重增长情况监测。
图11为不同组仔猪血清抗体水平的检测。
图12为不同组仔猪血清中细胞因子的检测。
图13为仔猪肠上皮细胞细胞因子的分泌检测。
生物材料保藏信息
植物乳杆菌L.P JL01分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期为2019年7月1日，保藏编号为CGMCC NO.18056。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明做更进一步地解释。下列实施例仅用于说明本发明，但并不用来限定本发明的实施范围。
1.猪源植物乳杆菌L.PJL01的分离鉴定及体外抑菌活性检测
1.1研究方法
1.1.1猪源植物乳杆菌菌株的分离
无菌采集未断奶25日龄的健康仔猪肠道(空肠、回肠和结肠)样品，剪碎、研磨后取10g加入90mL灭菌预冷(4℃)的磷酸缓冲盐溶液(PBS，pH7.4)进行10倍稀释，充分混匀后倍比稀释至10-4、10-5和10-6制成混合悬液；吸取100μL处理好的细菌悬液涂布于LBS固体平板上，倒置置于厌氧罐中，37℃静止培养基48h。挑取单个菌落以革兰染色和过氧化氢酶实验进行初步筛选，将革兰染色为阳性、过氧化氢酶实验为阴性的菌株，送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行细菌16s rRNA序列测定。将测得的序列与Genbank公布的序列进行分析比对，筛选确定为乳酸杆菌属成员进行以下研究。
1.1.2筛选菌株的耐酸、耐胆盐稳定性分析
将筛选得到的菌株活化后，以2％接种量分别接种于MRS液体培养基(以0.1M HCl调节培养基pH为3.0、3.5和4.0)，37℃置于厌氧罐中静止培养3h。同时，将筛选得到的菌株以2％接种量接种于含0.3wt％胆盐的MRS液体培养基中，37℃置于厌氧罐中静止培养3h。酸和胆盐处理后的菌液分布涂布于MRS固体琼脂平板上，检测分离菌株存活情况，进一步筛选可以耐受酸(pH为3)和胆盐(0.3wt％)的菌株。
1.1.3筛选菌株的理化特性
经进一步筛选能够耐受酸、胆盐菌株，参照《伯杰氏细菌鉴定手册》第8版，将分离得到的菌株进行分解葡萄糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、木糖、纤维二糖、鼠李糖、山梨醇、果糖的检测，此外还进行了明胶液化、吲哚实验、靛基质(VP)实验、H2S实验和过氧化氢酶反应的理化特性检测。
1.1.4筛选菌株的体外抑菌活性
为进一步检测筛选菌株对鼠伤寒沙门菌的体外抑菌效果。将1×108CFU鼠伤寒沙门菌涂布于LB固体培养基上，待菌液彻底吸附后，取牛津杯如图3打孔后，清除孔内琼脂，在酒精灯外焰上轻轻加热封底后，分别加入含有1×109CFU筛选菌株的菌体沉淀(4000r/min离心5min后，加入100μL无菌PBS重悬)、同等菌数的细菌培养上清液(除去菌体沉淀)以及同等菌数的菌体沉淀和细菌培养上清的混合液(菌液)，正置于37℃恒温培养箱培养过夜后，测量通过牛津杯孔的抑菌圈直径(单位：mm)。比较抑菌环的直径进而明确其抑菌效果。
1.2结果
1.2.1猪源植物乳杆菌的分离筛选与测序鉴定
经LBS选择培养筛选，分离得到圆形、边缘整齐、湿润且有光泽的乳白色菌落。经革兰染色初步鉴定呈阳性、短杆菌、成对或成链状排列、无芽孢结构，且过氧化氢酶反应为阴性。经16s rRNA测序后，经Blast分析比对(图1，Query:为待比对序列，即植物乳杆菌L.PJL01序列；Sbjct：为目标序列，是Genbank中已经公开的植物乳杆菌序列，即Lactobacillusplantraum strain BAL-03-ITTG序列)，与Genbank中登录的植物乳杆菌(BAL-03-ITTG)同源性可达99.42％，鉴定为植物乳杆菌，命名为L.PJL01。
1.2.2猪源植物乳杆菌耐酸和耐胆盐稳定性检测
耐酸和耐胆盐检测结果表明，L.PJL01该菌株能够耐受pH为3的酸性和0.3wt％胆盐的环境，稳定生长，表明其可耐受仔猪肠道生理环境、有稳定定植的潜能，结果如图2所示。
1.2.3猪源植物乳杆菌的理化特性检测
猪源植物乳杆菌L.PJL01经理化实验检测结果显示，该菌株能发酵葡萄糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、纤维二糖、鼠李糖、山梨醇和果糖(见表1)，不能发酵木糖。不能液化明胶，吲哚实验、H2S实验和过氧化氢酶实验均为阴性，VP实验为阳性。生理生化指标检测也符合植物乳杆菌的理化特性。
表1植物乳杆菌L.P JL01理化实验鉴定
Figure BDA0002318887430000041
注：+表示反应阳性，-表示反应阴性
1.2.4植物乳杆菌体外抑菌活性检测
植物乳杆菌L.P JL01对鼠伤寒沙门菌的体外抑菌效果显示，该分离株对鼠伤寒沙门菌表现出较好的抑菌活性，其培养上清液、菌液(含菌体沉淀和上清液)的抑菌环直径均为22mm，而菌体沉淀本身抑菌环直径为15mm，说明植物乳杆菌L.P JL01主要通过其分解代谢产物而发挥对鼠伤寒沙门菌的直接抑菌作用(见表2、图3)。
表2植物乳杆菌L.PJL01对鼠伤寒沙门菌的体外抑菌环直径(单位：mm)检测
2.植物乳杆菌L.P JL01对鼠伤寒沙门菌感染的防御效果检测
2.1实验方法
2.1.1实验分组与设计
将6-8周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠随机分为4组，每组10只，分别为生理盐水对照组(Saline组)、植物乳杆菌对照组(L.p组)、鼠伤寒沙门菌感染模型组(S.Typhimurium组)及植物乳杆菌干预组(L.p+S.Typhimurium组)。各组具体处理如表3所示。实验期间各组小鼠正常喂食、喂水一致，其中，鼠伤寒沙门菌感染模型组及植物乳杆菌干预组在口服S.Typhimurium SL1344前需将小鼠禁食禁水4h。
表3实验分组及处理
Figure BDA0002318887430000051
2.1.2体重及存活率监测
按2.1.1方法处理小鼠后，监测小鼠体重并观察小鼠一般状态及记录死亡情况。绘制小鼠体重曲线及存活率曲线。
2.1.3肠道病理分析
鼠伤寒沙门菌感染3天后，无菌采集各组小鼠结直肠组织，用提前预冷(4℃)的PBS(pH7.4)和1mL一次性注射器将肠道中的内容物冲洗干净，并用浓度为4wt％的多聚甲醛在2mL平底离心管中固定盲肠24h，用蒸馏水仔细冲洗，然后修理盲肠组织，采用H&E染色检测肠道病理损伤情况，具体步骤如下：(1)脱水：将收取的样品在浓度为70v/v％、80v/v％、85v/v％的酒精溶液中依次放置2h，在90v/v％的酒精溶液中浸泡过夜，第二天在浓度为95v/v％的酒精溶液Ⅰ、Ⅱ中分别浸泡放置1.5h左右，之后在浓度为100％的酒精Ⅰ、Ⅱ中分别浸泡1h左右；(2)透明：将二甲苯分为：100％的二甲苯Ⅰ、100％的二甲苯Ⅱ，在二甲苯Ⅰ、Ⅱ中分别放置3min左右；(3)浸蜡：为保证石蜡纯度，石蜡分为两个槽：石蜡Ⅰ、Ⅱ，加热融化，样品组织要在石蜡Ⅰ和石蜡Ⅱ中分别浸45min左右；(4)包埋：将组织切成3μm的厚度，在42℃水浴锅中进行展片并用载玻片将组织片贴于其上，烘干；(5)脱蜡：脱蜡这一过程所需要使用的试剂为二甲苯，为保证二甲苯纯度，同为100％浓度分为两罐，如下：100％的二甲苯Ⅰ、100％的二甲苯Ⅱ，在二甲苯Ⅰ、Ⅱ各放置约8min；(6)水化：这一过程需要的试剂为100％的酒精Ⅰ、100％的酒精Ⅱ、90v/v％的酒精溶液、80v/v％的酒精溶液、70v/v％的酒精溶液，依次在每个浓度酒精中水化，在每个浓度的酒精中需要放置约5min，具体放置的时间可以依据组织状态调整；水化完毕后将切片冲洗2次即可；(7)苏木精染色：将处理好的切片用苏木精进行染液，此过程约进行4min，冲洗2次即可；(8)分化：分化时使用1v/v％盐酸酒精，切片需要在其中分化约30s，之后再仔细用蒸馏水对分化的组织切片反复冲洗3次左右；(9)返蓝：用浓度为0.5wt％氨水对切片进行返蓝，控制时间在30s左右，时间可依据具体情况调整，冲洗；(10)伊红染色：用伊红染色液浸染组织切片，控制染色的时间在4min左右，蒸馏水冲洗切片大概3次，蒸馏水没有颜色时即可；(11)脱水：这一过程需要的试剂为80v/v％的酒精溶液、95v/v％的酒精溶液、100％的酒精Ⅰ、100％的酒精Ⅱ，依次在每个浓度酒精中脱水，每个浓度的酒精要放置约5min，时间可以依据组织状态调整；(12)二甲苯透明：这一过程需要的试剂为二甲苯，为保证二甲苯纯度，同为100％浓度分为两罐，如下：100％的二甲苯Ⅰ、100％的二甲苯Ⅱ，在二甲苯Ⅰ、Ⅱ各放置约5min；(13)中性树胶封片。
2.1.4器官活菌数检测
无菌取脾脏、肝脏样品，称重后将样品用预冷(4℃)PBS(pH7.4)进行研磨，进行倍比稀释，取10-5、10-6和10-7三个稀释度，每个稀释度各取100μL稀释好的样品涂布浓度于含20mg/mL硫酸链霉素的LB琼脂板上，每个稀释度作3个重复，37℃静置培养过夜，最后观察菌落状态并计数(统计3个重复的平均值)，以检测组织样品中S.Typhimurium SL1344的活菌数量。
2.1.5植物乳杆菌L.PJL01对肠黏膜SIgA分泌水平的影响
无菌采集小鼠结肠，沿肠管纵向剪开后，用1mL无菌预冷(4℃)的PBS(pH7.4)反复冲洗管腔，并轻刮肠黏膜，此后收集肠黏膜粘液，12 000r/min离心5-10min后收集上清，采用ELISA试剂盒检测肠黏膜SIgA的分泌水平。
2.1.6植物乳杆菌L.PJL01对内毒素分泌的影响
为评价植物乳杆菌L.PJL01潜在的毒性作用，我们采用鲎试剂进一步分析了结肠段黏膜样品中分泌的内毒素水平，肠黏膜样品的处理同2.1.5。
2.1.7植物乳杆菌L.PJL01对仔猪体重增长及血清抗体、细胞因子分泌水平的影响
将28日龄的外三元仔猪分为3组，分别对照组(命名为PBS组)、植物乳杆菌L.PJL01(命名为LP组)和鼠李糖乳杆菌(命名为LGG组)。为减少应激，LP组和LGG组仔猪每天分别将含有植物乳杆菌L.PJL01(1×1010CFU)和鼠李糖乳杆菌(1×1010CFU)的1mL菌液拌入饲料中进行逐头投喂(将伴有菌液的饲料放入小勺内，待其全部主动采食完后，再在饲槽内添加饲料由仔猪自由采食)，分别连续饲喂28天；对照组将1mL PBS拌入饲料中，同实验组处理后，再由仔猪自由采食；监测仔猪的初始体重和终末体重，并计算其日增重情况。28天后采集仔猪外周血，利用间接ELISA检测其血液中IgA、IgG的分泌水平，并进一步检测血液中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IFN-γ的分泌水平影响。
2.1.8植物乳杆菌L.PJL01对猪肠上皮细胞(IPEC-J2)分泌细胞因子的影响
将猪肠上皮细胞(IPEC-J2)接种于6孔细胞培养板中，调整细胞浓度为1×106个/孔，置于1mLRPMI-1640完全培养基(含10％FBS和1％双抗)中培养过夜，取1mL PBS清洗两次后，按照MOI(细菌数：细胞数)为10：1和100：1的比例分别加入植物乳杆菌L.PJL01菌株(对照组加入等体积的PBS)，离心使菌和细胞充分接触后置于37℃温箱中孵育1h，加入预温(37℃)PBS，轻摇培养板，洗两次后，再添加含10％FBS、1％双抗及1％硫酸庆大霉素RPMI-1640培养基中继续孵育24h，收集细胞上清液，采用ELISA试剂盒检测植物乳杆菌L.P JL01对促炎因子(TNF-α)及抑炎因子(IL-10)的分泌水平影响。
2.2研究结果
2.2.1植物乳杆菌L.PJL01对鼠伤寒沙门菌感染小鼠体重及存活率的影响
如图4所示，植物乳杆菌L.PJL01干预下，即L.p+S.Typhimurium组，在鼠伤寒沙门菌感染第6天体重下降趋势较S.Typhimurium组明显得到缓解(p<0.05)，且接近于Saline组和L.p组；此外，如图5所示，L.p+S.Typhimurium组小鼠存活率较S.Typhimurium组相比也有明显提高，存活率达50％。初步显示了植物乳杆菌L.PJL01株能够保护小鼠抵御鼠伤寒沙门菌的感染。
2.2.2植物乳杆菌L.PJL01对鼠伤寒沙门菌引起小鼠肠道损伤的缓解作用
鉴于鼠伤寒沙门菌感染主要引起结肠病变，故比较了鼠伤寒沙门菌感染后各组结肠的病变情况。结果可见S.Typhimurium组肠黏膜明显脱落变薄、结构不完整、腺体结构崩解；而植物乳杆菌L.PJL01干预后(L.p+S.Typhimurium组)这些病理损伤得到明显的缓解，肠黏膜部分腺体结构崩解、且见有炎性细胞浸润、结肠整体结构清晰可见；L.p组可见肠道各部分结构清晰完整，优于Saline组。H&E染色表明植物乳杆菌L.PJL01对肠道具有很好的益生优势，植物乳杆菌L.PJL01能够抑制鼠伤寒沙门菌的局部感染，对鼠伤寒沙门菌引起的肠道损伤有明显的缓解作用(图6)。
2.2.3植物乳杆菌L.P JL01对鼠伤寒沙门菌引起的全身感染的抑制作用检测
为进一步明确植物乳杆菌L.P JL01能够抑制鼠伤寒沙门菌突破肠道屏障而引起的全身性感染，检测脾脏、肝脏以及肠系膜淋巴结中的S.Typhimurium SL1344菌株的活菌数(如图7所示)。检测结果表明，植物乳杆菌L.P JL01干预后(L.p+S.Typhimurium组)脾脏、肝脏和肠系膜淋巴结中S.TyphimuriumSL1344活菌数显著低于S.Typhimurium组(p<0.01)；且Saline组及L.p组中均未查见活的S.TyphimuriumSL1344菌株。说明植物乳杆菌L.P JL01一定程度上可以抑制鼠伤寒沙门菌向脾脏、肝脏以及肠系膜淋巴结等器官侵袭，限制其引起的全身性感染。
2.2.4.植物乳杆菌L.P JL01对鼠伤寒沙门菌感染后的肠黏膜SIgA分泌水平的影响
小鼠肠黏膜sIgA分泌水平检测结果显示(如图8)，鼠伤寒沙门菌感染后第3天，S.Typhimurium组和L.p组均不同程度地刺激了SIgA分泌，略高于Saline组(差异不显著)；而在鼠伤寒沙门菌感染第6天，则可见L.p+S.Typhimurium组SIgA分泌水平极显著高于S.Typhimurium组和Saline组(p<0.01)，且也显著高于L.p组(p<0.05)。L.p组也见有SIgA的分泌增多，表明植物乳杆菌L.P JL01对以鼠伤寒沙门菌为代表的肠道病原菌的感染具有潜在的防御优势。
2.2.5植物乳杆菌L.P JL01对肠内毒素的分泌影响
采用鲎试剂检测肠黏膜内毒素的分泌水平，结果显示(如图9)，S.Typhimurium组肠黏膜内毒素分泌水平显著高于Saline组，进一步证明鼠伤寒沙门菌对肠道的毒性作用；而L.p+S.Typhimurium组其内毒素的分泌则显著降低，表明植物乳杆菌L.P JL01能够较好地保护肠黏膜限制鼠伤寒沙门菌对肠道的毒性作用；此外，L.p组其本身亦可较好地抑制肠道内毒素的分泌，对肠道组织具有潜在的保护作用。
2.2.6植物乳杆菌L.P JL01对仔猪体重增长情况的影响
植物乳杆菌L.P JL01饲喂仔猪后，LP组仔猪体重增长较PBS组相比有了明显提高(P<0.05)；而LGG组其仔猪增长也高于PBS组，且LP组仔猪体重增长效果优于LGG组。仔猪日增重监测结果也表明，LP组仔猪日增重可接近0.6kg，优于LGG组仔猪的日增重且与PBS相比差异显著(P<0.05)(如图10所示)。初步表明LP菌株对仔猪增重效果较好。
2.2.7植物乳杆菌L.PJL01对仔猪血清抗体水平的分泌影响
ELISA检测仔猪血清非特异性抗体IgG和IgA表达水平结果显示(如图11)，LP组血清IgG和IgA表达水平均明显高于PBS组(P<0.05)，且LP组血清IgG和IgA抗体水平与LGG组菌株相比略有上升，但差异不显著。说明植物乳杆菌L.PJL01能较好地促进仔猪机体的产生体液免疫反应，提高仔猪防御病原菌感染的能力。
2.2.8植物乳杆菌L.P JL01对仔猪血清中细胞因子分泌的影响
采用ELISA试剂盒检测仔猪外周血中IL-1β、TNF-α、IL-6及IFN-γ的表达情况(如图12)。结果显示植物乳杆菌L.P JL01可以较好地促进IL-1β的分泌，与PBS组相比差异显著(P<0.05)、且优于LGG组；LP组仔猪血清中的TNF-α含量较PBS组显著升高(P<0.05)，但与LGG组相比略有下降趋势；而植物乳杆菌L.P JL01对IL-6的分泌影响不大，三者之间无明显差异。此外，IFN-γ检测可见，LP组血清中IFN-γ的含量较LGG组和PBS组相比均有下降趋势，且与PBS组相比差异显著(P<0.05)。因此，植物乳杆菌L.PJL01在保护仔猪抵抗细菌性感染方面具有潜在优势。
2.2.9植物乳杆菌L.P JL01对猪肠上皮细胞分泌细胞因子的影响
体外试验检测植物乳杆菌L.P JL01在不同MOI值下对猪肠上皮细胞分泌炎性细胞因子(TNF-α)和抑炎性细胞因子(IL-10)分泌水平的影响，如图13所示。TNF-α检测结果表明无论植物乳杆菌L.P JL01：细胞为10:1或100:1时，植物乳杆菌L.P JL01均能显著地刺激猪肠上皮细胞分泌TNF-α；IL-10检测结果可见IL-10分泌整体上未见上升趋势，而主要以分泌表达下调为主，特别是共培养2h后IL-10下调现象尤为明显。说明植物乳杆菌L.P JL01在调节机体免疫平衡方面具有潜在作用，其能够调节Th1免疫反应，抑制Th2免疫反应。
综上，本发明从未断奶25日龄的健康仔猪肠道样品中分离1株耐酸(pH＝3.0)、耐胆盐(胆盐0.3wt％)的乳酸杆菌菌株，经16s rRNA序列测定鉴定为植物乳杆菌，命名为L.PJL01。体外抑菌活性检测其对鼠伤寒沙门菌表现出较好的抑菌活性。且对C57BL/6小鼠灌服植物乳杆菌后，再攻以鼠伤寒沙门菌，检测结果发现，植物乳杆菌能够有效抑制沙门菌引起的局部和全身性感染，减缓因沙门菌感染引起的体重下降，提高小鼠的存活率。此外，植物乳杆菌还可以提高沙门菌感染小鼠肠黏膜SIgA的水平、降低其内毒素的分泌，保护小鼠抵御鼠伤寒沙门菌的感染。植物乳杆菌饲喂仔猪后，依然可以检测其能够有效提高仔猪的增重，在调节体液和细胞免疫以抵御病原菌感染方面具有潜在的益生作用。
序列表
<110> 吉林农业大学
<120> 一株植物乳杆菌其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1050
<212> DNA
<213> 植物乳杆菌L.P JL01(Lactobacillus plantarum)
<400> 1
ccaaacttct tgtccccctt aggcggctgg ttcctaaaag gttaccccac cgactttggg 60
tgttacaaac tctcatggtg tgacgggcgg tgtgtacaag gcccgggaac gtattcaccg 120
cggcatgctg atccgcgatt actagcgatt ccgacttcat gtaggcgagt tgcagcctac 180
aatccgaact gagaatggct ttaagagatt agcttactct cgcgagttcg caactcgttg 240
taccatccat tgtagcacgt gtgtagccca ggtcataagg ggcatgatga tttgacgtca 300
tccccacctt cctccggttt gtcaccggca gtctcaccag agtgcccaac ttaatgctgg 360
caactgataa taagggttgc gctcgttgcg ggacttaacc caacatctca cgacacgagc 420
tgacgacaac catgcaccac ctgtatccat gtccccgaag ggaacgtcta atctcttaga 480
tttgcatagt atgtcaagac ctggtaaggt tcttcgcgta gcttcgaatt aaaccacatg 540
ctccaccgct tgtgcgggcc cccgtcaatt cctttgagtt tcagccttgc ggccgtactc 600
cccaggcgga atgcttaatg cgttagctgc agcactgaag ggcggaaacc ctccaacact 660
tagcattcat cgtttacggt atggactacc agggtatcta atcctgtttg ctacccatac 720
tttcgagcct cagcgtcagt tacagaccag acagccgcct tcgccactgg tgttcttcca 780
tatatctacg catttcaccg ctacacatgg agttccactg tcctcttctg cactcaagtt 840
tcccagtttc cgatgcactt cttcggttga gccgaaggct ttcacatcag acttaaaaaa 900
ccgcctgcgc tcgctttacg cccaataaat ccgggacaac gcttgccacc tacgtattac 960
cgcggctgct ggcacgtagt tagccgtggc tttctggtta aataccgtca tacctgaaca 1020
gttactctca gatatgttct tctttacaca 1050

Claims (4)

1.一株植物乳杆菌L.P JL01，其特征在于，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2019年7月1日，保藏编号为CGMCC NO.18056。
2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌L.P JL01，其特征在于，其16SrRNA的基因序列如SEQ ID NO.1所示。
3.权利要求1所述的植物乳杆菌L.P JL01在抗鼠伤寒沙门菌方面的应用。
4.权利要求1所述的植物乳杆菌L.P JL01在提高仔猪增重和调节免疫反应方面的应用。
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