CN110831571A - 用于皮肤健康的化妆品组合物及其使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明的局部用化妆品组合物和方法可用于治疗和/或预防多种皮肤状况，包括例如老年斑、痤疮、疤痕、体臭、与衰老相关的状况(例如皱纹、松弛和干燥)和头皮问题(例如头皮屑、脂溢性皮炎和脱发)。在优选的实施方式中，根据本发明的组合物包含由微生物产生的生物两亲性分子。

Description

用于皮肤健康的化妆品组合物及其使用方法

相关申请的交叉引用

本申请要求以下美国临时申请的权益：2017年5月7日提交的序列号为62/502,714；和2017年7月26日提交的序列号为62/537,057；其中的每一篇均以引用的方式整体并入本文。

背景技术

皮肤或外皮是人体最大的器官。它由包括表皮、真皮和皮下组织的层组成。在某种程度上，由于皮肤的外部性质以及其暴露于大量环境因素的影响，皮肤可能会受到多种状况的影响，其中某些状况比其他状况更为严重。

一种皮肤状况，光化性角化病(通常称为老年斑或肝斑)，包含在皮肤上扁平的棕褐色、棕色或黑色斑。这些斑的大小可能会有所不同，并且通常会出现在脸、手、肩膀和手臂上。虽然老年斑有时指肝斑，但其病因实际上与肝问题无关。相反，老年斑是色素黑色素过量产生的结果。

关于为什么老年斑会形成还没有明确的定义。但是，当前已被广泛接受的是皮肤老化、阳光照射或其他形式的紫外线(UV)照射诸如晒黑床，可能是造成这种情况的原因。此外，一些研究表明，其他因素诸如病毒和真菌感染因素、皮肤的免疫变化以及由多种ROS(活性氧类)分子引起的氧化应激，也可以在导致角化病的过程中发挥作用。

老年斑的颜色范围从浅棕色到黑色。通常，它们的纹理类似于皮肤其余部分的纹理，并且它们位于皮肤的阳光照射区域。有时，这些斑可能具有更主要的结构，并且在正常皮肤表面看起来“阴暗”。在很多情况下，老年斑无痛、没有危险，并且不会造成健康问题。但是，一些老年斑会发展成皮肤癌。由于这个原因，以及它们不期望的外观，许多人都试图去除老年斑。

临床上，光化性角化病以红斑性角化病斑、丘疹和斑块存在。大多数患者有多个斑或病变，并且由于例如过去的紫外线诱导的DNA损伤以及持续不断的紫外线照射而引起的皮肤的免疫抑制，将继续发展新的病变。

在组织学上，观察到光化性角化病是异常角质形成细胞的上皮内增殖。如果这些细胞延伸超过基底膜，则斑可能变为恶性并转化为浸润性鳞状细胞癌。

光化性角化病最具有侵略性的形式是角化性唇炎，它出现在嘴唇上，并且通常转变成鳞状细胞癌。鳞状细胞癌和光化性角化病具有流行病学、细胞学和分子学特征。流行病学数据表明，至少10％的光化性角化病可能会在10年内发展为鳞状细胞癌，并且60％的鳞状细胞癌是由临床诊断的光化性角化病引起的。由于癌症、化学疗法、艾滋病或器官移植而受到免疫抑制的个体也处于较高的风险中。

角化病的另一种形式，脂溢性角化病(SK)是一种由于皮肤共同生长而引起的皮肤状况。SK是出现在中年和老年人中的最常见的皮肤病变，并且影响了约8300万美国人。这种类型的角化病大多是良性的，但在极少数情况下，有脂溢性疣内形成黑色素瘤的报道。

脂溢性角化病尽管最常见于颈部、面部和躯干，但几乎可以在皮肤上的任何地方形成。生长物通常为圆形或椭圆形，并表现为皮肤上的扁平或轻微凸起的斑，其颜色范围从白色到黑色和棕色。这些斑起初是小的粗糙的隆起，其变厚以看起来像疣、痣、光化性角化病或皮肤癌。脂溢性角化病通常具有蜡状的“粘贴在皮肤上”的外观。

脂溢性角化病很少引起任何严重的医学问题，而光化性角化病通常会发展为皮肤癌。尽管可能需要进行皮肤活检以明确诊断皮肤问题，但这两种皮肤问题通常可以基于病变的外观加以区分。尽管如此，无论可能的结果如何，两种皮肤状况对于许多人来说在美容上都是不希望的，而且还会变得发炎且不舒服。

确实存在用于治疗老年斑和其他与色素沉着有关的皮肤状况的处方药。有些人使用漂白霜剂逐渐淡化老年斑。这些处方霜剂通常包含具有或不具有类视黄醇的对苯二酚，类视黄醇诸如是维A酸。漂白霜剂通常需要几个月才能褪去老年斑。其他局部用处方霜剂，诸如咪喹莫特、5-氟尿嘧啶和双氯芬酸基索拉唑(diclofenac-based Solaraze)，可通过直接攻击癌前细胞或间接刺激人体的免疫系统识别癌前细胞发挥作用。然而，这些霜剂会产生许多不期望的副作用，包括皮肤发红、斑疤和结硬皮、酸痛、发烧、关节疼痛和口疮。

有时，可以对老年斑和/或色素沉着进行程序医治。用于治疗光化性和脂溢性角化病的医疗程序的实例包括激光治疗以破坏产生黑色素的细胞；化学剥皮以燃烧皮肤的外层，并使新的皮肤在其位置生长；擦皮术，它能打磨皮肤的外层，使新的皮肤可以在其位置生长；及冷冻术，用液氮冷冻老年斑。与处方药一样，这些医疗程序的每一个都具有副作用和并发症的风险。

市场上也有许多非处方药和化妆品制剂和霜剂，用于减轻色素沉着过度的皮肤和老年斑。这些霜剂不如处方霜剂有效，并且绝大多数可能无法有效去除过多的皮肤色素沉着。这些霜剂主要包含氢醌、脱氧熊果苷、羟基乙酸、α-羟基酸或曲酸。

如果老年斑成为恶性，为了避免可能需要更多的浸润性和广泛的治疗，预防大型、多发或发炎的光化性角化病转化为鳞状细胞癌很重要。此外，从皮肤外观的角度来看，许多人将付出巨大的代价来掩盖或试图减轻光化性和脂溢性角化病二者以及许多其他色素沉着状况的出现。

另一个常见的皮肤状况是痤疮或者寻常的痤疮，其是由荷尔蒙和其他杂质作用于皮肤的脂腺和毛囊而引起的。这种状况在一定程度上影响着大约85％的人在他们的一生中。痤疮是由皮脂腺和毛囊阻塞引起的系统性炎性疾病，皮脂腺和毛囊可能会被细菌痤疮丙酸杆菌(Propionbacterium acnes:P.acnes)感染。皮脂为痤疮丙酸杆菌提供了营养源，因此为细菌繁殖并导致粉刺或“脓疱”的产生创造了理想的环境。

通常使用含有活性药物材料的霜剂或软膏来治疗粉刺，诸如皮脂分泌抑制剂、角质化抑制剂、抗微生物剂和/或抗炎剂；然而，这些药物中有许多具有副作用。例如，轻度炎症性痤疮通常是非处方(OTC)局部用药，包括过氧化苯甲酰、水杨酸或类视黄醇治疗。过氧化苯甲酰可以使皮肤不透明或发白，并且会极度干燥。此外，过氧化苯甲酰可漂白接触治疗区域的衣物和亚麻布。此外，世界各地的一些政府法规由于其潜在的毒性而限制或排除了其的使用。

过氧化苯甲酰的替代品是已知的，但也与某些负面副作用有关。例如，可以为妇女开处方制剂，该制剂含有雌激素和类似雌激素的化合物，诸如乙炔雌二醇，它们通常是避孕药的形式。这些药物通常可作为皮脂分泌抑制剂有效，但其使用可能与恶心、头痛、体重增加、情绪波动、抑郁和其他副作用有关。

此外，某些痤疮治疗使用的抗菌成分包括葡萄糖酸洗必太和苯扎氯铵。这些抗菌剂会引起皮肤刺激和极度的干裂。此外，抗菌剂可导致在野生型动物群中产生耐药菌株。

粉刺消融剂，诸如水杨酸、AHA和这两种酸的盐，广泛用于剥脱死皮细胞并打开和排干毛孔。粉刺消融剂有一定的局限性，并且在高浓度且酸性很强的pH值下，它们会引起显著的刺激。粉刺消融剂在通过抗菌活性预防痤疮丙酸杆菌的增殖中也显示出有限的作用，并且对直接减轻炎症的影响有限，如果有的话。

皮肤健康对于长期健康的生活至关重要。此外，皮肤健康通常是美丽和青春的外在表现。有各种各样的产品和治疗选择用于治疗和/或预防各种皮肤状况。然而，这些治疗中的许多利用具有负面副作用的苛刻处方或程序。其他更温和的选择对所有人都无效。因此，需要能够治疗和/或预防多种皮肤状况，包括例如老年斑和痤疮的安全和有效的化妆品溶液。

发明内容

本发明提供基于微生物的产品及其在局部用化妆品组合物中的使用方法。更具体地，本发明提供使用局部用化妆品组合物用于治疗皮肤的某些状况的材料和方法。有利地，本发明的局部用组合物和方法是环境友好的、无毒的、非药物的和成本有效的。

在某些实施方式中，皮肤状况是光化性角化病或老年斑。本发明通过使用产生生化物质的微生物和/或其生长副产物提供用于治疗、预防、去除和/或减轻老年斑和其他皮肤色素沉着状况的外观的材料和方法。

在某些实施方式中，皮肤状况是皮肤痤疮。本发明通过使用产生生化物质的微生物和/或其生长副产物提供用于治疗、预防、去除和/或减轻痤疮和其他引起皮肤瑕疵的状况的材料和方法。

在某些实施方式中，皮肤状况是另一种皮肤状况，诸如作为示例的，疤痕、体臭、与衰老相关的状况(例如，皱纹、松弛和干燥)、头皮状况(例如，头皮屑、脂溢性皮炎和脱发)，并且通常会因化妆品、油、污染和其他杂质而损坏。

在优选的实施方式中，本发明利用微生物和/或其生长副产物。例如，本发明的实施方式提供用于治疗皮肤状况的局部用组合物，其中所述组合物包含微生物产生的生物两亲性分子(例如生物表面活性剂)和/或酶。在一些实施方式中，微生物生长副产物可具有抗微生物性质。

在某些实施方式中，该组合物包含治疗有效量的生物表面活性剂，所述生物表面活性剂选自一种或多种糖脂，诸如甘露糖基赤藓糖醇脂(mannosylerythritol lipid:MEL)、槐糖脂(SLP)、鼠李糖脂(RLP)和海藻糖脂；和/或一种或多种脂肽，诸如表面活性素(surfactin)、伊枯草菌素(iturin)和泛革素(fengycin)。在某些实施方式中，根据本发明的生物表面活性剂能够增强组合物中其他活性和非活性成分的真皮渗透性；因此，生物表面活性剂本身可以作为活性成分，同时可以增强治疗的有效性。

在一些实施方式中，该局部用组合物还包含治疗有效量的白藜芦醇、质酸和/或抗粉刺剂，以及已知的其他药剂，例如以任何方式治愈、补充、使复原、保湿、保护和/或改善皮肤的外观和/或健康(例如减轻疤痕的外观)。

在一些实施方式中，局部用组合物可还包含局部用可接受的媒介物，诸如油包水或水包油乳剂或水性血清。

在一些实施方式中，局部用化妆品组合物可以还包含通常在化妆品组合物中发现的另外的化妆品佐剂和添加剂，诸如作为示例的有机溶剂、硅酮、抗菌剂、稳定剂、增稠剂、柔软剂、防晒霜、保湿剂或香料。在一个实施方式中，局部用组合物还包含聚合稳定剂，诸如作为示例的聚(丙烯酸)。

可以将局部用组合物配制成悬浮液、乳剂、水凝胶、多相溶液，泡状分散剂或其他已知形式的局部用化妆品(例如洗剂、霜剂、凝胶或软膏)。另外，该局部用组合物是可递送的，例如处于挤压管或化妆品罐中而经由笔状物、棒状物、喷雾、擦拭或滴管递送。

在一个实施方式中，本发明提供了治疗皮肤状况的方法，其中将局部用化妆品组合物直接施用于存在这种状况的皮肤区域。在一些实施方式中，“施用”组合物可以包括将组合物留在皮肤上，和/或将其擦入皮肤中以在皮肤中被吸收。在一些实施方式中，可以将所述组合物施用于皮肤上治疗有效量的时间，并且然后使用例如水从皮肤上冲洗掉。

在某些实施方式中，例如，每隔一天、每天一次或每天两次施用局部用化妆品组合物。在一些实施方式中，局部用组合物每隔一天、每天一次或每天两次施用无限期，例如至少一周、二周、三周或更长时间，以达到和/或保持皮肤状况的治疗。

本发明的局部用化妆品组合物和方法可用于治疗和/或预防各种皮肤状况，包括例如老年斑、痤疮、疤痕、体臭、与衰老相关的状况(例如皱纹、松弛和干燥)和/或头皮状况(例如头皮屑、脂溢性皮炎和脱发)。此外，局部用化妆品组合物还可以用作清洁剂，以去除脸和皮肤上的化妆品和其他杂质。

在某些实施方式中，本发明提供包含培养的微生物和/或其生长副产物的基于微生物的组合物。还提供产生微生物及其生长副产物的方法。

在某些实施方式中，该微生物是产生生物表面活性剂的细菌(例如，枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、红串红球菌(Rhodococcus erythropolis)、绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa))或酵母(例如，蚜虫拟酵母(Pseudozymaaphidis)、毕赤酵母的某些种(pichia spp.)或球拟假丝酵母(Starmerellabombicola))。在一个实施方式中，微生物是所期望的菌株或物种的突变体。

在一个实施方式中，本发明提供通过在适于生长和生物表面活性剂、酶和/或蛋白质生产的条件下培养本发明的微生物菌株来生产生物表面活性剂、酶和/或其他蛋白质；并纯化生物表面活性剂、酶和/或其他蛋白质的方法。培养过程可以是例如浸没培养、固态发酵(SSF)和/或其组合。

附图说明

图1A-1B显示了受试者的额头和头皮上的老年斑外观的实例。

图2显示了皮肤上的鳞状细胞癌外观的实例。

图3显示了皮肤上的脂溢性角化病的外观的实例。

具体实施方式

本发明提供基于微生物的产物及其在局部用化妆品组合物中的使用方法。更具体地，本发明提供使用包含微生物生长副产物的局部用化妆品组合物用于治疗某些皮肤状况诸如作为示例的老年斑和/或痤疮的材料和方法。

本发明的局部用化妆品组合物和方法还可以用于治疗和/或预防多种其他皮肤状况，包括例如疤痕；体臭；与衰老相关的状况(例如，皱纹、松弛和干燥)；及头皮问题(例如，头皮屑、脂溢性皮炎和脱发)。另外，局部用化妆品组合物还可以用作清洁剂，以去除脸和皮肤的化妆品和其他杂质(例如，污垢和污染)。

有利地，本发明的局部用组合物和方法是环境友好的、无毒的、非药物的和成本有效的。

选定的定义

如本文所用，术语“皮肤状况”涵盖影响皮肤的人和动物状况、病症或疾病。此类皮肤状况包括但不限于涉及表皮、真皮(包括结缔组织、皮脂腺和毛囊)和下皮组织(下皮)的状况。皮肤状况的症状可包括，例如痤疮样症状、色素沉着或其脱落、潮红、炎症、皱纹、干燥、松弛、增厚、剥落、疤痕、剥落、皮疹、荨麻疹、水泡、溃疡、脱屑、脱发和皮肤外观的其他变化。在某些实施方式中，可以使用本文所描述的组合物、产物和方法治疗和/或预防的皮肤状况包括但不限于：痤疮、瑕疵、酒渣鼻、毛囊炎、癌、黑色素瘤、口周皮炎、蜂窝组织炎、痈、光损伤、皮肤老化(例如，皱纹和干燥)、老年斑、疤痕、狼疮、牛皮癣、鱼鳞癣、过敏性皮肤炎、慢性伤口、褥疮、毛发角化病、皮脂囊肿、白癜风、黄褐斑、疣、炎症性皮肤病、炎症后色素沉着、角化病、湿疹、干燥病、瘙痒症、扁平苔藓、结节性痒疹、微生物感染、体臭、头皮状况和痱子。

如本文所用，术语“受试者”是指接受医学治疗，包括非处方医学治疗和预防性护理的动物，特别是哺乳动物。在本发明的上下文中，优选的受试者是人类患者。受试者可以是任何年龄或发育阶段，包括婴儿，幼儿，幼童，青春期前的孩子，青少年和成人。受试者可以是任何性别。

如本文所用，“美容上可接受的”、“局部可接受的”和“皮肤病学可接受的”可互换使用，并且意指特定的成分用于对人体外皮(例如皮肤)的在使用水平的施用是安全并且无毒。在一个实施方式中，组合物的成分被认为是通常被认为是安全的(GRAS)。

如本文所用，术语“治疗有效量”、“有效量”和“有效剂量”用于指能够治疗受试者的状况和病症的某物(例如，化合物、组合物、时间)的量。实际量将取决于许多因素，这些因素包括但不限于受试者的所治疗的特定状况或病症、状况的严重程度、尺寸、年龄和健康状况以及给药途径。

如本文所用，术语“治疗”是指在任何程度上根除、减轻、改善或逆转状况或病症体征或症状的程度，并且包括但不要求完全治愈状况或病症。治疗可以治愈、改进或部分改善病症

如本文所用，“预防”状况或病症是指避免、延迟、预防或最小化该状况或病症的特定体征或症状的发作。预防可以但不是必须是绝对的或完整的，这意味着该体征或症状可能在以后仍会出现。预防可以包括减轻这种状况或病症发作的严重性，和/或抑制状况或病症发展为更严重的状况或病症。例如，在一个实施方式中，预防色素沉着可以指避免、延迟、预防或最小化与皮肤色素沉着相关的一种或多种不想要的特征，诸如减轻最终形成的色素沉着区域的暗度或大小。作为另一实例，在一个实施方式中，预防痤疮可以指避免、延迟、预防或最小化与痤疮相关的一个或多个不想要的特征，诸如减少最终发展的粉刺的数量、暗度和/或大小，减轻最终发展的痤疮的严重程度，和/或完全或几乎完全预防痤疮丙酸杆菌的生长、痤疮瑕疵的发展以及痤疮的其他症状

如本文中使用的，“基于微生物的组合物”意指包含作为微生物或其他细胞培养物生长的结果所产生的成分的组合物。因此，基于微生物的组合物可以包含微生物本身和/或微生物生长的副产物(例如，生物表面活性剂、溶剂和/或酶)。细胞可以处于营养状态、孢子形态或两者的混合物。细胞可以为浮游生物或生物膜形态，或者二者的混合物。细胞可以是完整的或裂解的。细胞可以以例如每毫升组合物1×10⁴、1×10⁵、1×10⁶、1×10⁷、1×10⁸、1×10⁹、1×10¹⁰或1×10¹¹个或以上细胞的浓度同其生长的培养液一起存在。在一个实施方式中，基于微生物的组合物可以仅包含其中生长细胞并且细胞被去除的培养液。生长的副产物可以存在于培养液中，并且可以包括例如代谢产物、细胞膜成分、表达的蛋白质和/或其他细胞成分。

本发明进一步提供“基于微生物的产物”，其是在实践中要被施用以获得所期望的结果的产物。基于微生物产物可以仅仅是从微生物培养过程收获的基于微生物的组合物。可选地，基于微生物产物可以包含已经添加的其他成分。这些另外的成分可以包括例如稳定剂、缓冲剂、恰当载剂诸如水、盐溶液，或者任何其他恰当载剂、添加的营养物以支持进一步的微生物生长、非营养物生长促进剂，和/或有利于微生物和/或已施用其的环境中的组合物的追踪的制剂。基于微生物产物还可以包含基于微生物的组合物的混合物。基于微生物产物还可以包含已经以某种方式诸如但不限于过滤、离心、裂解、干燥、纯化等处理的基于微生物的组合物的一种或多种成分。

“代谢物”是指由代谢产生的任何物质或参与特定代谢过程所必需的物质。代谢物可以是有机化合物，其是起始原料(例如葡萄糖)、中间体(例如乙酰-辅酶A)或代谢的终产物(例如正丁醇)。代谢物的实例可包括但不限于酶、毒素、酸、溶剂、醇、蛋白质、碳水化合物、维生素、矿物质、微量元素、氨基酸、聚合物和表面活性剂。

如本文所用，当与生物或天然材料诸如核酸分子、多核苷酸、多肽、蛋白质、有机化合物诸如小分子、微生物细胞/菌株或宿主细胞结合使用时，术语“分离的”或“纯化的”意指基本上不含与其天然相关的其他化合物，诸如细胞材料的材料。即，与在天然材料中发现的那些相比，所述材料没有这些其他化合物就不会自然产生和/或具有不同或独特的特性。

在某些实施方式中，纯化的化合物按重量计为目标化合物的至少60％。优选地，制剂按重量计为所期望化合物的至少75％、更优选至少90％、并且最优选至少99％或100％(w/w)。通过任何合适的标准方法测量纯度，例如，通过柱色谱、薄层色谱或高效液相色谱(HPLC)分析。

如本文所用，“表面活性剂”是指降低两种液体之间或液体和固体之间的表面张力(或界面张力)的化合物。表面活性剂用作洗涤剂、润湿剂、乳化剂、发泡剂和/或分散剂。“生物表面活性剂”是指由活细胞产生的表面活性物质。

与“包括”或“含有”同义的过渡术语“包括”是包含性的或开放性的，并且不排除另外的、未列举的要素或方法步骤。相反，过渡短语“由......组成”排除了权利要求中未指定的任何要素、步骤或成分。过渡短语“基本上由......组成”将权利要求的范围限制于指定的材料或步骤“和那些不会对要求保护的发明的基本和新颖特性(一个或多个)产生实质影响的材料或步骤”。

除非特别说明或从上下文中显而易见，否则如本文所用，术语“或”应理解为包括在内。除非特别说明或从上下文中显而易见，否则如本文所用，术语“一”、“一个”和“该(the)”应理解为单数或复数。

除非特别说明或从上下文中显而易见，否则如本文所用，术语“约”应理解为在本领域的正常耐受范围内，例如，在平均值的2个标准偏差内。“约”可以理解为在所述值的10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％、0.05％或0.01％之内。

本文中对变量的任何定义中的化学基团列表的叙述包括该变量作为任何单个组或所列组的组合的定义。本文对变量或方面的实施方式的叙述包括作为任何单个实施方式或与任何其他实施方式或其部分组合的实施方式。

本文提供的任何组合物或方法可以与本文提供的任何其他组合物和方法中的一种或多种组合。

本发明的其他特征和优点将从以下对其优选实施方式的描述和权利要求中变得显而易见。本文引用的所有参考文献均通过引用并入本文。

局部用化妆品组合物

本发明提供皮肤护理组合物及其使用方法。特别地，本发明提供可以治疗和/或预防皮肤状况——包括老年斑、痤疮、疤痕、体臭、与衰老相关的状况、头皮状况和/或本文所述的其他状况——的皮肤护理和化妆品产品。

在某些实施方式中，本发明利用微生物生长副产物。特别地，本发明的实施方式提供用于治疗人皮肤状况的局部用组合物，其中所述组合物包含通过培养产生生化物质的微生物而产生的生物两亲性分子(例如，生物表面活性剂)。在一些实施方式中，生物两亲性分子以粗制形式被利用，其中该分子存在于培养微生物的培养液中，并且无需纯化即可从中收集。粗制形式可以包含例如在培养液中的至少20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％的两亲性分子。在一些实施方式中，已经从培养产物中纯化了生物两亲性分子。

在某些实施方式中，该组合物可包含治疗有效量的糖脂，诸如甘露糖基赤藓糖醇脂(MEL)、槐糖脂(SLP)、海藻糖脂(TL)和鼠李糖脂(RLP)；和/或脂肽，诸如表面活性素、伊枯草菌素A和泛革素。在一个实施方式中，组合物可以包含这些生物表面活性剂中的任何的组合。

根据本发明的生物两亲性分子具有以下一种或多种能力：杀死皮肤中的致病因素、调节皮肤的免疫系统、杀死黑素细胞以允许替代细胞生长、减轻氧化应激、增强角质形成细胞和成纤维细胞的增殖和功能，并增强组合物中例如生物表面活性剂和一种或多种其他活性成分二者的真皮渗透性。因此，在自身提供治疗益处的同时，这些有益分子还可以增强局部用组合物在与例如色素沉着或微生物剂的存在有关的治疗皮肤状况中的整体有效性。

MEL和SLP是由多种酵母产生的糖脂类生物表面活性剂的一部分。MEL主要由假酶(Pseudozyma)酵母属产生，由每个种产生的MEL结构之间存在显著差异。MEL无毒，并且在宽温度和pH范围内稳定。此外，可以使用MEL，而无需任何其他防腐剂。

在优选的实施方式中，MEL在局部用化妆品组合物中的浓度范围为按重量计总组合物的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％，并且优选0.1％至2.0％。

SLP由几种非致病酵母种大量生产，其中研究最多的是球拟假丝酵母。在广泛的温度、pH和盐度条件范围下，SLP具有环境相容性、高生物降解性、低毒性、高选择性和比活性。

在优选的实施方式中，SLP在局部用化妆品组合物中的浓度范围为按重量计总组合物的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％，并且优选0.1％至2.0％。在一个实施方式中，局部用组合物包含酸性形式的SLP。

RLP是主要由假单胞菌细菌产生的糖脂。它们是天然乳化剂，并且可以根据本发明被用于化妆品组合物中代替非生物表面活性剂，诸如月桂基磺酸钠(sodium laurylsulfate)、十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate)和月桂基硫酸钠(sodium laurethsulfate)。此外，可以配制RLP来增加水分保持力或润滑皮肤，最小化皱纹的出现并增加皮肤的光滑度。甚至进一步，RLP可用作抗菌剂(革兰氏阳性)和抗真菌剂。

在优选的实施方式中，RLP在局部用化妆品组合物中的浓度范围为按重量计总组合物的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％，并且优选0.1％至2.0％。

海藻糖脂(TL)是由例如细菌红串红球菌产生的糖脂。TL具有乳化和分散特性。它们表现出提高的表面活性水平，并具有一定的抗病毒和抗菌性质。

在优选的实施方式中，TL在局部用化妆品组合物中的浓度范围为按重量计总组合物的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％，并且优选0.1％至2.0％。

表面活性素是由某些细菌菌株，主要是枯草芽胞杆菌，产生的脂肽。表面活性素具有高水平的表面活化功能，并且具有极强的亲水性，与其他生物表面活性剂相比，可在更宽的浓度范围内形成透明凝胶。该生物表面活性剂可以用作化妆品产品的皮肤渗透剂、起泡剂和乳化剂。此外，表面活性素表现出有效的抗菌(革兰氏阴性)、抗真菌和抗病毒性质。

在优选的实施方式中，局部用化妆品组合物中表面活性素的浓度范围为按重量计总组合物的0.001％至90％、0.01％至50％、0.05％至10％、0.1％至5.0％，并且优选0.01％至2.0％。

根据本发明有用的其他生物两亲性分子包括甘露糖蛋白、β-葡聚糖和其他具有生物乳化和表面/界面张力减轻性质的代谢物。

在一些实施方式中，局部用化妆品组合物可以包括治疗有效量的酶和/或由微生物产生的蛋白质。例如，可以包括按重量计约0.001％至约20％，优选按重量计约0.01％至约15％，或按重量计约0.05％至约10％的一种或多种酶和/或蛋白质。这些可以包括但不限于有益于改善皮肤健康的外切-β-1,3-葡聚糖酶、“嗜杀因子”、壳多糖酶、酯酶、脂肪酶、糖苷酶、淀粉酶和蛋白酶。

在一些实施方式中，局部用组合物还包含治疗有效量的白藜芦醇。在某些实施方式中，白藜芦醇的量相对于本发明局部用组合物的总重量的范围为按重量计0.001-5.0％，更优选为按重量计0.05-2.0％，并且最优选为按重量计0.2-1.0％。

白藜芦醇是在水果诸如葡萄、蓝莓、覆盆子和桑葚的皮中发现的天然存在的物质。据报道，它是一种非常有效的抗氧化剂、通过信号转导的基因表达调节剂、炎性介质的抑制剂，并且它通过同时作用于多种机制，在相关癌症预防和治疗中已被强调为一种有前途的、多靶点的抗癌剂。此外，白藜芦醇具有独特的皮肤漂白能力，因为它减轻黑色素的合成。

在一个实施方式中，局部用组合物可还包含聚合稳定剂，诸如作为示例的约0.01％至约5.0％，或约0.05％至约2.0％，或约0.5％至约1.0％的聚丙烯酸。聚丙烯酸有助于预防白藜芦醇的结晶。

在一些实施方式中，局部用组合物还包含治疗有效量的质酸。质酸是在人皮肤的成纤维细胞中天然产生的，并且可用于皮肤伤口诸如烧伤和溃疡的痊愈，以及用作皮肤保湿剂。质酸可以帮助水分保持、组织修复以及将构成皮肤结构成分的胶原蛋白和弹性蛋白结合在一起。它还可以帮助创建针对不良微生物的保护性屏障。

在一个实施方式中，局部用组合物包含按重量计约0.01％至约10.0％，或约0.05％至约8.0％，约0.5％至约5.0％，或约1.0％至约3.0％的质酸。

在一些实施方式中，局部用组合物可以还包含局部地或美容上可接受的媒介物。

美容上可接受的媒介物可以是乳剂形式。合适的乳剂的非限制性实例包括油包水乳剂、水包油乳剂、水包硅酮乳剂、硅酮包水乳剂、水包蜡乳剂、水-油-水三重乳剂，或具有霜剂、凝胶或微型乳剂外观的类似物。

如本文所用，除非另外指出，否则术语“油”包括硅酮油。乳剂可以包括量通常为按重量计约0.001％至约5％的乳化剂，诸如非离子、阴离子或两性表面活性剂或没食子酸酯(gallant)。

美容上可接受的媒介物可包括水；植物油；矿物油；酯油诸如棕榈酸辛酯(octalpalmitate)、豆蔻酸异丙酯(isopropyl myristate)和棕榈酸异丙酯(isopropylpalmitate)；醚，诸如二辛醚(dicapryl ether)和异山梨醇二甲酯(dimethylisosorbide)；醇，诸如乙醇和异丙醇；脂肪醇，诸如鲸蜡醇(cetyl alcohol)、鲸蜡硬脂醇(cetearyl alcohol)、硬脂醇(stearyl alcohol)和二十二醇(behenyl alcohol)；异链烷烃(isoparaffins)，诸如异辛烷、异十二烷(IDD)和异十六烷；硅酮油，诸如环甲硅油、二甲硅油、聚二甲基硅氧烷交联聚合物(dimethicone cross-polymer)、聚硅氧烷及其衍生物，优选有机改性的衍生物，包括PDMS、聚二甲基硅氧烷共聚多元醇(dimethicone copolyol)、聚二甲基硅氧烷醇(dimethiconol)和氨基二甲基硅氧烷醇(amodimethiconol)；烃油，诸如矿物油、凡士林、异二十烷，和聚烯烃，例如(氢化)聚异丁烯；多元醇，诸如丙二醇、甘油、丁二醇、戊二醇、己二醇、辛二醇；蜡，诸如蜂蜡、巴西棕榈蜡、石蜡、微晶蜡、聚乙烯蜡和植物蜡；或任意组合或上述物质的混合物。含水媒介物可以包括一种或多种与水混溶的溶剂，包括低级醇，诸如乙醇、异丙醇等。该媒介物可占组合物按重量计的约1％至约99％、10％至约85％、25％至75％或50％至约65％。

在一些实施方式中，局部用化妆品组合物可还包含化妆品组合物中通常包括的另外的化妆品佐剂和添加剂，诸如作为示例的有机溶剂、稳定剂、硅酮、增稠剂、柔软剂、防晒霜、保湿剂或香料。每种成分，无论是活性的还是非活性的，其量都是化妆品领域中为实现其预期目的而常规地使用的量，并且通常范围为组合物的约0.0001％至约25％，或约0.001％至约20％，但该量可能落在这些范围外。这些成分的性质及其量必须与本公开的组合物的生产和功能相容。

在一个实施方式中，该组合物可以包括另外的皮肤活性物质，包括但不限于类视黄醇、植物药、角质层分离剂、脱皮剂、角质形成细胞增殖促进剂、胶原蛋白酶抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、脱色剂、抗炎剂、类固醇、抗痤疮剂、抗氧化剂和高级糖化终产物(advancedglycation end-product:AGE)抑制剂，仅举几例。

在一个实施方式中，该组合物可包括另外的抗衰老成分，包括但不限于植物药(例如，奇诺树提取物(Butea frondosa extract)，芦荟提取物)；叶绿醇；植酸(phytonicacid)；磷脂；硅酮；凡士林；甘油三酯；ω-脂肪酸；类视黄醇；羟基酸(包括α-羟基酸和β-羟基酸)、水杨酸和烷基水杨酸酯；剥脱剂(例如，羟基乙酸、3,6,9-三氧杂十一烷二酸(3,6,9-trioxaundecanedioic acid)等)、刺激雌激素合成酶的化合物(例如，咖啡因及其衍生物)；能够抑制5-α-还原酶活性的化合物(例如亚麻酸、亚油酸、非那雄胺及其混合物)；和屏障功能增强剂(例如神经酰胺、甘油酯、胆固醇及其酯、α-羟基和ω-羟基脂肪酸及其酯)。

示例性的类视黄醇包括但不限于视黄酸(例如全反式或9-顺式或13-顺式)及其衍生物、视黄醛、视黄醇(维生素A)及其酯，诸如棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯和丙酸视黄酯及其盐。当存在时，类视黄醇的含量通常为按重量计约0.0001％至约5％，按重量计约0.01％至约2.5％，或按重量计约0.1％至约1.0％。根据本实施方式的组合物通常将包括抗氧化剂诸如抗坏血酸和/或BHT和/或螯合剂诸如EDTA或其盐(例如EDTA二钠)。

在另一个实施方式中，本发明的局部用组合物还可包含以下一种或多种：皮肤渗透性增强剂；润肤剂，诸如豆蔻酸异丙酯、凡士林、挥发性或非挥发性硅酮油(例如甲硅油、二甲硅油)、酯油、矿物油和脂肪酸酯；湿润剂，诸如甘油、己二醇或辛二醇；皮肤丰满物质，诸如棕榈酰寡肽、胶原蛋白、胶原蛋白和/或糖胺聚糖(glycosaminoglycan:GAG)增强剂；防晒霜，诸如阿伏苯宗或甲氧基肉桂酸辛酯；剥脱剂；和抗氧化剂。

合适的剥脱剂包括，例如，α-羟基酸、β-羟基酸、草酸、草二酸及其衍生物，诸如酯、酸酐和其盐。合适的羟基酸包括，例如，羟基乙酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、2-羟基链烷酸、扁桃酸、水杨酸及其衍生物。一种示例性的剥脱剂是羟基乙酸。当存在时，剥脱剂可占组合物按重量计的约0.001％至约20％。

可用于本发明组合物中的抗氧化剂的实例包括具有酚羟基官能团的化合物，诸如抗坏血酸及其衍生物/酯；β-胡萝卜素；儿茶素；姜黄素；阿魏酸衍生物(例如阿魏酸乙酯、阿魏酸钠)；没食子酸衍生物(例如没食子酸丙酯)；番茄红素；还原酸；迷迭香酸；单宁酸；四氢姜黄素；生育酚及其衍生物，包括生育酚乙酸酯；尿酸；或它们的任意混合物。其他合适的抗氧化剂是具有还原或非还原形式的一种或多种硫醇官能团(-SH)的那些，诸如谷胱甘肽、硫辛酸、巯基乙酸和其他巯基化合物。抗氧化剂可以是无机的，诸如亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、亚硫酸盐或其他含有硫的无机盐和酸。抗氧化剂可单独或共同构成组合物总重量的约0.001％至约10％(w/w)，或约0.01％至约5％(w/w)。

非生物表面活性剂也可以添加到制剂中。表面活性剂的实例包括但不限于烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐(例如月桂基磺酸钠钠/铵和月桂基硫酸钠/铵)、两性物质(例如两性乙酸盐(amphoacetate)和两性丙酸盐(amphopropionate))、磺基琥珀酸酯、烷基多葡糖苷、甜菜碱(例如，椰油酰胺丙甜菜碱(cocamidopropul betaine:CAPB))、磺基甜菜碱、鼠尾草酸酯(sacrosinate)、羟乙基磺酸盐、牛磺酸盐、乙氧基化脱水山梨糖醇酯、烷醇酰胺和基于氨基酸的表面活性剂。

粘度改性剂也可加入到组合物中，包括，例如，椰油酰胺DEA、油酰胺DEA、氯化钠、纤维素聚合物、聚丙烯酸酯、乙氧基化的酯、醇、二醇、二甲苯磺酸盐、聚山梨醇酯20、烷醇酰胺和纤维素衍生物(例如，羟丙基甲基纤维素和羟乙基纤维素)。

聚合物也可以加入，包括，例如，黄原胶、瓜尔胶、聚季铵盐-10、PEG-120甲基葡萄糖二油酸酯、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-150聚甘油基-2-三硬脂酸酯和PEG-150季戊四醇四硬脂酸酯

其他添加剂包括：维生素，诸如生育酚和抗坏血酸；维生素衍生物，诸如抗坏血酸单棕榈酸酯、生育酚乙酸酯和维生素E棕榈酸酯；增稠剂，诸如羟烷基纤维素、羧甲基纤维素、卡波姆，以及植物胶，诸如黄原胶；胶凝剂，诸如酯封端的聚酯酰胺；结构剂；金属螯合剂，诸如EDTA或其盐；颜料；着色剂；蛋白质，诸如乳铁蛋白；和pH调节剂(柠檬酸、乙醇胺、氢氧化钠等)。

所述组合物可以任选地包含本领域技术人员已知的其他组分，包括但不限于成膜剂、保湿剂、矿物质、粘度和/或流变改性剂、抗痤疮剂、驱虫剂、皮肤冷却化合物、皮肤保护剂、润滑剂、香料、防腐剂、稳定剂及其混合物。除前述之外，本发明的化妆品组合物可包含用于治疗皮肤状况或病症的任何其他化合物。

另外，本公开内容预期的组合物可包括技术人员通常使用和已知的一种或多种相容的美容上可接受的佐剂，诸如着色剂、珍珠、颜色剂(chromalite)、云母、颜料、染料、香料、润肤剂、湿润剂、防腐剂、护发素、维生素、螯合剂、增稠剂、麻醉剂、抗过敏剂、抗真菌剂、抗菌剂、其他抗炎剂、抗氧化剂、消毒剂、脱色剂、成膜剂、驱虫剂、药剂、光稳定剂、防晒霜、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度改性剂和植物药。本公开的局部用组合物还可包括皮肤渗透性增强剂、表面平滑剂、皮肤丰满剂、光学扩散剂、剥脱促进剂和抗氧化剂。关于这些以及其他合适的化妆品成分的详细信息，可以在“International Cosmetic IngredientDictionary andHandbook,”10th Edition(2004),published by the Cosmetic,Toiletry,andFragrance Association(CTFA),at pp.2177-2299中找到，其全部内容通过引用并入本文。这些各种物质的量是化妆品或药物领域中常规使用的那些，例如，它们可以占组合物总重量的约0.01％至约20％。

可以包括防晒霜或防晒霜的组合，以保护皮肤免受UVA和UVB二者射线的伤害。可用于本发明组合物的防晒霜包括阿伏苯宗、肉桂酸衍生物(诸如甲氧基肉桂酸辛酯)、水杨酸辛酯、羟苯甲酮、奥克立林、二氧化钛、氧化锌或它们的任何混合物。防晒霜可以以组合物总重量的约1wt％至约30wt％的量存在。

另外，该组合物可以含有能够使角化病变深和淡红的颜色漂白的化合物，以及可以改善皮肤的饱满(turgor)并增加其他化合物向皮肤深层的渗透性的化合物。

该组合物可以配制成悬浮液，乳剂，水凝胶，多相溶液，泡状分散剂或以任何其他已知形式的化妆品局部用皮肤组合物。

在某些实施方式中，可以配制局部用化妆品组合物，以便可以例如通过毛杆、试管、瓶子、刷子、棒、海绵、棉签、小毛巾(擦拭剂)、喷雾器、滴管、手或手指使用局部用化妆品组合物。

该组合物可以配制成多种产品形式，诸如作为示例的，洗剂、霜剂、血清、喷雾剂、气溶胶、液体块、软膏、香精、凝胶、糊剂、膏药、笔、粉末、毛巾、肥皂、洗发剂、护发素、棒、泡沫、摩丝、酏剂或浓缩液。在优选的实施方式中，配制组合物使得其特别适合于局部施加于皮肤。

该组合物可以在很宽的pH水平范围内配制。在一个实施方式中，局部用组合物的pH范围为1.0至13.0。在一些实施方式中，局部用组合物的pH范围为2.0至12.0。适用于本发明组合物的其他pH范围包括3.5至7.0或7.0至10.5。可以添加合适的pH调节剂，诸如氢氧化钠、柠檬酸和三乙醇胺以使pH在所期望的范围内。

微生物的生长和微生物生长副产物的生产

本发明提供用于培养微生物和生产微生物代谢物和/或微生物生长的其他副产物的方法。微生物培养系统通常使用浸没培养物发酵；然而，也可以使用表面培养物和混合系统。如本文所用，“发酵”是指在受控条件下细胞的生长。生长可能是有氧的或厌氧的。

在一个实施方式中，本发明提供用于生产生物质(例如，活细胞材料)、细胞外代谢物(例如小分子和排泄蛋白)、残留营养物和/或细胞内组分(例如酶和其他蛋白质)的材料和方法。

根据本发明使用的微生物生长器皿可以是用于工业用途的任何发酵罐或培养反应器。在一个实施方式中，该器皿可具有功能控制器/传感器或可连接至功能控制器/传感器以测量培养过程中的重要参数，诸如pH、氧气、压力、温度、搅拌轴功率、湿度、粘度和/或微生物密度和/或代谢物浓度。

在进一步的实施方式中，所述器皿还能够监测器皿内微生物的生长(例如细胞数和生长期的测定)。可选地，可以从器皿中取出每日样品，并通过本领域已知的技术诸如稀释涂布技术进行计数。稀释涂布是一种简单的用于估算样品中微生物数量的技术。该技术还可以提供用以比较不同环境或处理的指标。

在一个实施方式中，所述方法包括给培养补充氮源。例如，氮源可以是硝酸钾、硝酸铵、硫酸铵、磷酸铵、氨、尿素和/或氯化铵。这些氮源可以单独使用，或可以两种或以上组合使用。

所述方法可为生长培养物提供氧化作用。一个实施方式利用空气的慢速运动来去除低氧含量的空气并引入含氧空气。含氧空气可以是每天通过机械补充的环境空气，所述机械包括用于机械搅动液体的叶轮以及用于将气体的气泡供应到液体中以将氧气溶解到液体中的空气喷布器。

该方法可还包括给培养补充碳源。所述碳源通常是碳水化合物诸如葡萄糖、蔗糖、乳糖、果糖、海藻糖、甘露糖、甘露醇和/或麦芽糖；有机酸，诸如乙酸、富马酸、柠檬酸、丙酸、苹果酸、丙二酸和/或丙酮酸；醇诸如乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、己醇、异丁醇和/或甘油糖原；脂肪和油类诸如大豆油、米糠油、橄榄油、玉米油、芝麻油和/或亚麻籽油等。这些碳源可单独使用或两种或以上组合使用。

在一个实施方式中，培养基包括微生物的生长因子和痕量营养物。当生长的微生物不能产生它们所需要的所有维生素时，这是尤其优选的。培养基也可包括无机营养物，其包括诸如铁、锌、铜、锰、钼和/或钴的痕量元素。此外，维生素、必需氨基酸和微量元素的来源可以包括，例如，面粉或膳食，诸如玉米粉的形式，或提取物的形式，诸如酵母提取物、马铃薯提取物、牛肉提取物、大豆提取物、香蕉皮提取物等，或纯化形式。还可以包括氨基酸，诸如作为示例的，可用于蛋白质生物合成的氨基酸，例如L-丙氨酸。

在一个实施方式中，亦可包括无机盐。可用无机盐可以是磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、硫酸镁、氯化镁、硫酸铁、氯化铁、硫酸锰、氯化锰、硫酸锌、氯化铅、硫酸铜、氯化钙、碳酸钙和/或碳酸钠。这些无机盐可单独使用或以两种或以上的组合使用。

在一些实施方式中，培养方法可以还包括在培养过程之前和/或在培养过程期间在液体培养基中添加另外的酸和/或抗菌剂。抗菌剂或抗生素用于保护培养物免受污染。此外，还可以添加消泡剂，以防止在培养期间产生气体时泡沫的形成和/或积聚。

混合物的pH应适合目标微生物。缓冲剂和pH调节剂，诸如碳酸盐和磷酸盐，可用于将pH值稳定在优选值附近。当金属离子以高浓度存在时，可能需要在液体培养基中使用螯合剂。

用于培养微生物和产生微生物的副产物的方法和设备可以分批的、准连续的或连续的过程进行。

在一个实施方式中，微生物培养方法是在约5℃至约100℃下执行，优选在15至60℃下执行，更优选在25至50℃下执行。在进一步的实施方式中，培养可以在恒定温度下连续执行。在另一个实施方式中，培养可以经受变化的温度。

在一个实施方式中，该方法和培养过程中使用的是无菌设备。诸如反应器/器皿的培养设备可与消毒单元例如高压釜分离但与消毒单元相连。培养设备还可具有在接种开始之前就地消毒的消毒单元。可以通过本领域已知的方法对空气进行消毒。例如，可使环境空气在被引入器皿之前通过至少一个过滤器。在其他实施方式中，可以对培养基进行巴氏消毒，或者任选地完全不加热，以利用低水活性和低pH来控制细菌生长。

在一个实施方式中，本发明提供了通过在适合生长和生物表面活性剂、酶和/或蛋白质生产的条件下培养本发明的微生物菌株来生产生物表面活性剂、酶和/或其他蛋白质的方法；以及纯化生物表面活性剂、酶和/或其他蛋白质的方法。

在一个实施方式中，本发明进一步提供用于生产其它微生物代谢物的方法，所述微生物代谢物诸如乙醇、乳酸、β-葡聚糖、蛋白质、肽、代谢中间体、多不饱和脂肪酸和脂质。通过该方法产生的代谢物含量可以是，例如，至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。

发酵培养液的生物质含量可以是例如5g/L至180g/L或更高。在一个实施方式中，培养液的固体含量为10g/L至150g/L。

由目标微生物产生的微生物生长副产物可保留在微生物中或分泌到液体培养基中。在另一个实施方式中，用于产生微生物生长副产物的方法可以还包括浓缩和纯化目标微生物生长副产物的步骤。在进一步的实施方式中，液体培养基可含有稳定微生物生长副产物活性的化合物。

在一个实施方式中，在培养完成后(例如在达到培养液中所需细胞密度或特定代谢物密度后)去除所有微生物培养组合物。在该批次程序中，收获第一批产物后开始一个全新的批次。

在另一个实施方式中，在任何一次仅去除发酵产物的一部分。在本实施方式中，具有活细胞的生物质作为新培养批次的接种剂保持在器皿中。去除的组合物可以是无细胞培养液或含有细胞。以这种方式就形成了一个准连续系统。

有利地，该方法不需要复杂的设备或高能耗。目标微生物可以以小规模或大规模地在现场培养和被利用，甚至可以与它们的培养基混合。类似地，微生物代谢物也可以在需要的地点大量生产。

根据本发明的系统和方法微生物生长可以是例如细菌、酵母和/或真菌。这些微生物可以是天然的或遗传修改的微生物。例如，微生物可以用特定基因转化以展现特定特征。微生物也可以是所需菌株的突变体。如本文所用，“突变体”意指参考微生物的菌株、遗传变体或亚型，其中该突变体与参考微生物相比具有一种或多种遗传变异(例如，点突变、错义突变、无义突变、缺失、复制、移码突变或重复扩展)。制备突变体的方法在微生物学领域中是众所周知的。例如，为此目的广泛使用紫外突变作用和亚硝基胍。

在优选的实施方式中，微生物是产生生物表面活性剂和/或产生酶的微生物。在一个实施方式中，微生物是酵母或真菌。根据本发明适于使用的酵母和真菌种类，包括例如，念珠菌(Candida)、酵母属(Saccharomyce)(酿酒酵母(S.cerevisiae)、布拉迪酵母(S.boulardii sequela)、圆酵母(S.torula))、克鲁斯酵母(Issatchenkia)、克鲁维氏酵母(Kluyveromyce)、毕赤酵母(pichia)、威克汉姆酵母(Wickerhamomyce)(例如，异常威克汉姆酵母(W.anomalus))、球拟酵母属(Starmerella)(例如，球拟假丝酵母(S.bombicola))、菌根(Mycorrhiza)、被孢霉(Mortierella)、须霉(Phycomyces)、布拉氏霉(Blakeslea)、破囊壶菌(Thraustochytrium)、腐霉(Phythium)、虫霉(Entomophthora)、出芽短梗霉菌(Aureobasidium pullulan)、蚜虫拟酵母(Pseudozyma aphidis)、曲霉菌(Aspergillus)和/或根霉属的某些种(Rhizopus spp.)。

在一个实施方式中，微生物是嗜杀酵母。如本文所用，“嗜杀酵母”是指特征在于通过分泌毒性蛋白或糖蛋白而毒性蛋白或糖蛋白对菌株自身免疫的酵母菌株。嗜杀酵母分泌的外毒素能够杀死酵母、真菌或细菌的其他菌株。例如，可以被嗜杀酵母控制的微生物包括镰孢霉属(Fusarium)和其他丝状真菌。此类酵母可包括但不限于威克汉姆酵母(例如，异常威克汉姆酵母)、毕赤酵母(例如，异常毕赤酵母(p.anomala)、季也蒙毕赤酵母(P.guielliermondii)、香柏毕赤酵母(P.occidentalis)、库德毕赤酵母(P.kudriavzevii))、汉逊酵母(Hansenula)、酵母属(Saccharomyce)、孢汉逊酵母(Hanseniaspora)(例如，葡萄有孢汉逊酵母(H.uvarum)、玉米黑穗病菌(U.maydis)、汉斯德巴氏酵母(Debaryomyces hansenii)、念珠菌、隐球酵母(Cryptococcus)、克鲁维氏酵母(Kluyveromyces)、球拟酵母(Torulopsis)、黑穗病菌(Ustilago)、拟威尔酵母(Williopsis)、接合酵母(Zygosaccharomyce)(例如拜氏接合酵母(Z.bailii))等。

在一个实施方式中，用于本发明的微生物是蚜虫拟酵母。蚜虫拟酵母是甘露糖基赤藓糖醇脂(MEL)的有效生产者。

在一个实施方式中，微生物可以选自嗜杀酵母的菌株。在甚至更优选的实施方式中，微生物是毕赤酵母菌株，包括，例如，异常毕赤酵母(异常威克汉姆酵母)、库德毕赤酵母(库德威克汉姆酵母(Wickerhamomyces kudriavzevii))和/或季也蒙毕赤酵母(P.guilliermondii)(季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii))。

在一个实施方式中，微生物菌株是球拟假丝酵母，其是槐糖脂(SLP)的有效生产者。

在一个实施方式中，微生物是包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的细菌。细菌可以是例如放射形土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter)、节杆菌属(Arthrobacter)、固氮菌(Azobacter)(例如，定氮菌(A.vinelandii)、褐色球形固氮菌(A.chroococcum))、巴西固氮螺菌(Azospirillum brasiliensis)、芽孢杆菌(Bacillus)(例如，枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)、坚强芽孢杆菌(B.firmus)、侧孢芽孢杆菌(B.laterosporus)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquifaciens)、梭菌(Clostridium)(例如，丁酸梭菌(C.butyricum)、酪丁酸梭菌(C.tyrobutyricum)、醋酪酸梭菌(C.acetobutyricum)、梭菌NIPER 7和拜氏梭菌(C.beijerinckii))、山枇花属(Gordonia)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、奴卡菌(Nocardia)、假单胞菌(Pseudomonas)(例如，绿针假单胞菌亚种(克吕沃尔氏菌属)(P.chlororaphis subsp.aureofaciens(Kluyver)、绿脓假单胞菌(P.aeruginosa))、富养罗尔斯通氏菌(Ralslonia eulropha)、红球菌属(Rhodococcus)(例如，红串红球菌(Rhodococcus erythropolis))、深红红螺菌(Rhodospirillum rubrum)、根瘤菌属(Rhizobium)、和/或少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)。

在一个实施方式中，所述微生物是假单胞菌(例如绿脓假单胞菌)的非致病菌株。优选地，该菌株是鼠李糖脂生物表面活性剂(RLP)的生产者。

在一个实施方式中，微生物是红串红球菌，其是海藻糖脂(TL)的有效生产者。

在一个实施方式中，微生物是枯草芽孢杆菌的菌株，诸如作为示例的枯草芽孢杆菌位点B1或B2变种，它们是例如表面活性素和伊枯草菌素(iturin)的有效生产者。在与本文公开的教导相一致的程度上，该说明书通过引用并入国际公开序列号WO2017/044953A1。

在另一个实施方式中，微生物是解淀粉芽孢杆菌的菌株，其也是表面活性素的有效生产者。

根据本发明，可以使用其他微生物菌株，包括例如能够积累大量例如糖脂生物表面活性剂或脂肽生物表面活性剂的其他菌株。根据本发明有用的其他代谢物包括甘露糖蛋白、β-葡聚糖和具有生物乳化和降低表面/界面张力性质的其他生物两亲分子。

基于微生物的产物的制备

本发明的一种基于微生物的产物仅仅是包含微生物和/或由微生物产生的微生物代谢物和/或任何残留营养物的发酵培养液。发酵产物可以直接使用而无需提取或纯化。

然而，使用文献中描述的标准提取和/或纯化方法或技术可以容易地实现提取和纯化。例如，在某些实施方式中，基于微生物的产物仅包括粗制或纯化形式的微生物生长的副产物。在特别的实施方式中，副产物是由根据本发明生长的微生物产生的生物表面活性剂。

可以将由微生物生长产生的微生物和/或培养液从生长器皿中移出，并经由例如管道输送转移用于立即使用。

在其他实施方式中，可以将组合物(微生物、培养液或微生物和培养液)置于适当大小的容器中，并考虑例如预期的用途、预期的应用方法、发酵罐的尺寸以及从微生物生长设施到使用地方的任何运输方式。因此，放置基于微生物的组合物的容器可以是例如1加仑至1,000加仑或更多。在其他实施方式中，容器是2加仑、5加仑、25加仑或更大。

在某些实施方式中，本发明的组合物具有优于例如单独的生物表面活性剂的优点，所述生物表面活性剂包括以下一种或多种：高浓度的甘露糖蛋白作为酵母细胞壁外表面的一部分(甘露糖蛋白是一种高效的生物乳化剂，能够达到高达80％的乳化指数)；酵母细胞壁中存在生物聚合物β-葡聚糖(一种乳化剂)；培养物中存在的生物表面活性剂能够减轻表面和界面张力二者；以及代谢产物(例如乳酸、乙醇等)的存在。

当从生长容器中收获基于微生物的组合物时，当将收获的产物放入容器和/或通过管道输送(或以其他方式运输使用)时，可以添加其他成分。添加剂可以是，例如，缓冲剂、载剂、在相同或不同设施中生产的其他基于微生物的组合物、粘度调节剂、防腐剂、用于微生物生长的营养物、跟踪剂、溶剂、杀菌剂、其他微生物和其他特定于预期用途的成分。

可以包含在根据本发明的制剂中的其他合适的添加剂包括通常用于此类制剂的物质。这样的添加剂的实例包括表面活性剂、乳化剂、润滑剂、缓冲剂、溶解度控制剂、pH调节剂、防腐剂、稳定剂和抗紫外线剂。

在一个实施方式中，该组合物可还包含缓冲剂，其包括有机和氨基酸或其盐，以使pH稳定在接近优选值附近。合适的缓冲剂包括但不限于柠檬酸盐、葡糖酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、乙酸盐、乳酸盐、草酸盐、天冬氨酸盐、丙二酸盐、葡庚糖酸盐、丙酮酸盐、半乳糖酸盐、葡糖二酸盐、酒石酸盐、谷氨酸盐、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、蛋氨酸、半胱氨酸、精氨酸及其混合物。也可以使用磷酸和亚磷酸或其盐。适合使用合成缓冲剂，但优选使用天然缓冲剂，诸如上面列出的有机和氨基酸或它们的盐。

在进一步的实施方式中，pH调节剂包括氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钾或碳酸氢钾、盐酸、硝酸、硫酸及其混合物。

在一个实施方式中，制剂中可以包括其他成分诸如如聚质子酸盐的水性制剂，诸如碳酸氢钠或碳酸钠、硫酸钠、磷酸钠、磷酸二氢钠。

有利地，根据本发明，基于微生物的产物可以包括其中生长有微生物的培养液。产物可以是例如至少按重量计1％、5％、10％、25％、50％、75％或100％的培养液。产物中生物质的量按重量计可以例如为0％至100％，包括其间所有百分比。

任选地，产物可在使用前储存。储存时间优选短。因此，储存时间可以少于60天、45天、30天、20天、15天、10天、7天、5天、3天、2天、1天或12小时。在优选的实施方式中，如果产物中存在活细胞，则将产物储存在较冷的温度下，诸如作为示例的低于20℃、15℃、10℃或5℃。另一方面，生物表面活性剂组合物通常可以在环境温度下储存。、

实施例

从以下通过说明的方式给出的实施例可以更好地理解本发明及其许多优点。以下实施例说明了本发明的一些方法、应用、实施方式和变异体。它们不应被视为限制本发明。可以对本发明进行许多改变和修饰。

实施例1：用于生产个人护理组合物的毕赤酵母属物种的培养

毕赤酵母可用于生产各种个人护理组合物，因为它们的细胞衍生物可消除污染皮肤的真菌，减轻致病酵母在皮肤和粘膜表面的生长，减少细菌对皮肤和粘膜的污染，并刺激皮肤细胞中胶原蛋白和弹性蛋白的产生(仅举几例)。

用于产生异常毕赤酵母(异常威克汉姆酵母)、库德毕赤酵母、和季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii和Meyerozyma guilliermondii)的基本培养基对于所有三个物种是相同的。培养基包含2％葡萄糖、1％酵母提取物、1％芥花籽油、5％甘油糖原和50mM柠檬酸盐缓冲液。如果正在培养季也蒙毕赤酵母以生产壳多糖酶，则添加0.1％的微粒几丁质。如果化妆品需要有机状态，则不使用无机盐，并且所有营养培养基成分都必须经过有机状态认证。

发酵温度范围为25-30℃，并且初始pH范围为5.5-6.0。饱和氧气的范围为15-25％(100％的环境空气)。总发酵时间可以长达72小时(取决于达到固定相的时间)。

一旦产生培养物，应立即将其冷却至5-10℃，以防止上清液中活性物质可能降解。然后经由离心或通过0.1微米过滤器的微滤(或其组合)将酵母生物质和酵母上清液分离，同时将过程保持在不高于10℃的温度下。

蛋白分子可使用盐析技术来沉淀。通过增加盐即硫酸铵的浓度将蛋白质盐析。将蛋白质浓缩10至20倍(或更多，取决于最终个人护理产品所需的浓度)后，将它们收集并用冷盐溶液洗2至3次(每次持续混合1小时)。

通过将浓缩产物与海藻酸钠混合至终浓度为1％海藻酸钠，或将其与黄原胶混合至终浓度为0.5％黄原胶，可以使浓缩产物的酶活性稳定。

可以测试最终所得底物的抗菌或抗真菌活性。可以用(具有临床意义)的念珠菌酵母和马拉色氏霉菌(Malassezia fungus)通过孔板检测来测试抗真菌能力，而对于抗菌活性，可以使用大肠杆菌和绿脓假单胞菌的培养物。应使用孔周围数毫米内的抑制直径来测量生长抑制。

一旦进行了测试，所得组合物可用于生产各种个人护理产品，包括化妆品软膏、霜剂、洗发剂、肥皂、浴盐、消毒液和用于手和足的油、洗面奶和面霜等。

这些培养方法产生的酵母生物量可用于制备其他产品，包括动物和鱼类饲料，该产品作为蛋白质、植酸酶、维生素和矿物质的来源，以及其他可使用活性或非活性酵母细胞的任何应用，例如，用于农业和园艺业的土壤改良剂，以及用于石油钻井作业中提高石油采收率。

实施例2：在550加仑反应器中发酵球拟假丝酵母用于生产槐糖脂(SLP)

一种专为酵母生长和生物表面活性剂生产而设计的便携式全封闭反应器，由PLC操作，并且包括水过滤、温度控制单元、叶轮和微量喷雾器。当生长用于SLP生产的球拟假丝酵母时，反应器的工作容积为500加仑。

在优选的实施方式中，用于SLP生产的营养物包括葡萄糖、尿素、酵母提取物和用过的植物烹饪油。

用在另一个反应器中生长的50升液体培养物接种该反应器。在25℃和pH 3.5下，SLP生产的培养周期为5天。SLP的最终浓度为约工作容积的10-15％，其包含70-75加仑的SLP。

可以将培养物收集到单独的罐中。在SLP沉淀到罐底部之后，可以根据需要将其移出并进行处理。罐中剩余的(约)420加仑培养物可包含3-5g/L的残留SLP。

实施例3：治疗皮肤状况的方法

在一个实施方式中，本发明提供治疗皮肤状况的方法，其中所述局部用化妆品组合物被直接施用于存在这种状况的皮肤区域，即外皮。该组合物可以例如施用于面部、耳朵、头皮、颈部、后肩、手臂、手、胸部、胃、腋下、脚、臀部和腿的皮肤。

在一些实施方式中，“施用”所述组合物可以包括将所述组合物散布在皮肤区域上并且将所述组合物留在皮肤上，和/或将其擦入皮肤直到其被完全吸收。在一些实施方式中，可以将组合物施用于皮肤一定时间，并且然后用例如水将其从皮肤上冲洗掉。

在某些实施方式中，将局部用化妆品组合物每隔一天，每天一次或每天两次施用。在一些实施方式中，局部用组合物每隔一天，每天一次或每天两次施用无期限的时间，例如至少一、二、三周或更长时间，以达到和/或维持皮肤状况的治疗。

在一个实施方式中，可以以每cm²皮肤约0.001至约100mg，更典型地约0.01至约20mg/cm²，或约0.1至约10mg/cm²的量将组合物施用于皮肤。然而，取决于要治疗的皮肤区域的大小，可以使用或多或少地的组合物。

在优选的实施方式中，该组合物包含一种或多种选自糖脂(例如SLP、MEL、TL和RLP)和脂肽(例如表面活性素、伊枯草菌素和泛革素)的生物表面活性剂。在另外的实施方式中，所述组合物优选包含治疗有效量的微生物产生的酶和/或蛋白质，诸如作为示例的有益于改善皮肤健康的外切-β-1,3-葡聚糖酶、壳多糖酶、酯酶、脂肪酶、糖苷酶、淀粉酶和蛋白酶。

取决于治疗的皮肤状况，可将有助于改善皮肤健康的其他成分与该组合物一起施用。

本发明的局部用化妆品组合物和方法可用于治疗和/或预防多种皮肤状况，包括例如老年斑(例如，色素沉着)、痤疮、疤痕、体臭、与衰老相关的状况(例如皱纹、松弛和干燥)和头皮问题(例如头皮屑、脂溢性皮炎和脱发)。此外，局部用化妆品组合物还可以用作清洁剂，以去除脸部和皮肤上的化妆品和其他杂质。该方法可根据以下任何实施例施用，虽然它并不旨在限于此。

例4：色素沉着的条件

在一些实施方式中，提供了用于在受试者的皮肤上治疗老年斑或其他色素沉着状况的方法，其中将所述局部用组合物直接施用于该状况存在足够长的时间的皮肤区域以实现所需的色素沉着减轻。在优选的实施方式中，局部用化妆品组合物包括MEL和SLP的组合。在一个实施方式中，将所述组合物配制成洗剂、凝胶或霜剂。

在某种实施方式中，将该组合物每天至少施用一次或两次，持续至少一、二、三周或更长时间。在一些实施方式中，将该局部用组合物每天施用持续无期限，以达到和/或维持皮肤色素沉着的减轻的水平。

在某些实施方式中，本发明通过将本发明的局部用化妆品组合物施用于需要治疗的皮肤，提供了治疗皮肤的光化性角化病、脂溢性角化病和其他色素沉着状况的方法，包括治疗、改善、减轻这种状况的外观，或防这种状况。

在某些实施方式中，该方法还用于减轻另外不需要的色素沉着，诸如使皮肤整体亮白，以及改善环境、与年龄相关或与紫外线相关的皮肤老化的迹象。

如本文所用，“色素沉着状况”是指皮肤上发生变色或异常变色的生长的皮肤的任何状况或病症。色素沉着可包括过多或不需要的色素沉着。相对于受试者的基线色素沉着，色素沉着可能是由一种或多种不同类型的生物合成的黑色素在皮肤和/或毛囊中存在量增加并沉积在头发或皮肤中而导致的。诸如老化、环境压力和紫外线照射等因素可能是色素沉着发展的潜在原因。色素沉着状况的实例包括但不限于老年斑、肝斑、雀斑、斑驳和不连续的色素沉着、黑斑病等。

色素沉着或色素沉着的皮肤或头发的治疗是指根除、减轻、改善、逆转或预防与色素沉着相关的一种或多种不需要的特征，诸如使受影响区域的皮肤或头发明显变亮。在一个实施方式中，在减轻老年斑；减轻晒黑；均匀或优化肤色，例如在雀斑色素沉着区域；在治疗黑斑病斑片和黄褐斑斑片、雀斑和损伤后色素沉着时，期望的是使皮肤的色素沉着的区域变亮。

在本发明方法的一些实施方式中，将组合物直接施用于皮肤上色素沉着的部位(即直接施用于老年斑上)。在一些实施方式中，将组合物每天施用以实现和/或维持皮肤色素沉着的减轻。

局部用组合物可以保留在需要变亮的受影响的区域，或者可以冲洗掉或以其他方式去除，这取决于施用的方式。

在某些实施方式中，局部用化妆品组合物的施用可以重复一段足够的时间，以实现施用区域的色素沉着减轻。为了保持期望的效果，可以持续该方法直到效果是期望的即可。这可能需要每天至少一次，持续至少一周、至少两周、至少四周、或者至少八周或更长时间的局部施用。一旦局部用组合物的施用中断，色素沉着的所期望的减轻也可能减弱。

该方法可预防性地用于防止皮肤上色素沉着状况的发展。

在一些实施方式中，所述组合物和方法可用于亮白皮肤，包括根除，减轻，改善和/或逆转受试者色素沉着的基线度。可以通过观察受试者的菲茨帕特里克(Fitzpatrick)量表值来测量皮肤亮白。菲茨帕特里克量表、菲茨帕特里克皮肤分型测试或菲茨帕特里克照相分型量表是用于皮肤颜色的数字分类方案，并且仍然是皮肤颜色的皮肤病学研究的公认工具。

菲茨帕特里克量表测量几个组成，包括遗传倾向、对阳光照射的反应和晒黑习惯，并将皮肤分为六种类型：I型(评分0-7)是指白色、非常白皙的皮肤，雀斑，典型的白化皮肤，其总是灼伤，从不晒黑；II型(评分8-16)是指白色、白皙的皮肤，其通常灼伤或晒黑困难；III型(评分17-24)指的是米色，其很常见，并且有时会遭受轻微的灼伤，逐渐晒成浅棕色；IV型(评分25-30)是指具有褐色的色调的米色的皮肤，其是地中海高加索人皮肤的典型特征，并且很少灼伤，容易晒黑成中度褐色；V型(评分超过30)是指深棕色皮肤，其很少灼伤，很容易晒黑；VI型是指不容易灼伤，容易晒黑且色素沉着的黑色皮肤。

在本发明的一些实施方式中，治疗能够以菲茨帕特里克量表上的至少一种或两种皮肤类型改变皮肤的治疗区域。当亮白皮肤时，可能希望将组合物施用于大面积的皮肤上(例如，整个脸部皮肤)。

对于本发明的组合物可能有用的皮肤包括但不限于变色或不均匀的皮肤、深色肤色、色素沉着的皮肤、损伤后色素沉着的皮肤、眼睛下方的黑眼圈、炎症后色素沉着的皮肤、具有老年斑、肝斑、黑斑病、黄褐斑或雀斑的皮肤、黄色皮肤、沾污的指甲或需要亮白或减轻肤色的皮肤、头皮、腿、脸或其他区域。

可以实现的具体益处包括但不限于：减轻深色或色素沉着的皮肤的色素沉着；减轻老年斑或肝斑；减轻胎记、晒伤、晒黑和色素痤疮的痕迹；均匀或优化皮肤变色；减少眼睛下方黑眼圈的出现；治疗黑斑病、黄褐斑、雀斑、皮肤发黄和发炎和损伤后色素沉着；在需要亮白和减轻肤色的头皮、腿、脸和其他区域上亮发；并去除或减轻指甲的沾污。

实施例5：光化性角化病(使用1％SLP水和霜剂溶液)

在受试者面部的扁平褐色斑上测试了按重量计1％SLP的水溶液。最初，该斑在右眼附近有两个大的子斑，每个子斑大小为一角硬币。每天施用溶液两个月后，上部子斑几乎消失，并且下部子斑显著变轻。

通过将SLP与市售保湿霜剂混合来制备包含按重量计的1％SLP的霜剂组合物。通过在三个光化性角化病斑上施用霜剂进行治疗。将霜剂每天两次施用。其中一个斑开始膨大，变得更扁平并且颜色变浅。另一个班开始扁平，变浅，并且分为两个斑点，中间是浅肤色。第三个斑亮白变成浅褐色。

实施例6：寻常的痤疮

在某些实施方式中，本发明的组合物和方法可用于治疗选自痤疮和/或其他引起瑕疵状况的皮肤状况。痤疮的治疗可以包括预防、去除和/或减轻皮肤的痤疮和/或其他瑕疵的外观。

在一个实施方式中，治疗痤疮的方法包括将本发明的局部用化妆品组合物施用于受试者的皮肤，其中所述局部用化妆品组合物包含MEL、SLP或其组合。在一个实施方式中，将MEL以按重量计约0.5％至2.0％，优选约1.0％的量添加入组合物。在一个实施方式中，SLP以按重量计约0.1％至1％，优选约0.5％的量添加。

在一个实施方式中，所述组合物被配制成凝胶、洗剂或霜剂。在另一个实施方式中，所述组合物被配制为清洁剂或肥皂。

治疗痤疮的方法可以还包括施用治疗有效量的已知粉刺消融剂或抗痤疮剂。例如，施用按重量计约0.001％至约5.0％的羟基酸、羟基乙酸、乳酸、水杨酸、类视黄醇、过氧化苯甲酰、红霉素、维A酸、他扎罗汀、壬二酸、阿达帕林、氨苯砜和氯林可霉素。也可以使用这些化合物的盐形式。

痤疮或类似痤疮的症状包括但不限于各种类型的皮肤瑕疵(例如，病变、粉刺、斑疹、白头、黑头、脓疱、丘疹、结节和囊肿)的出现，这会导致诸如炎症、疼痛、发红、肿胀、隆起、瘢痕，斑疤和感染。

术语“病变”通常用于表示受感染或患病的皮肤斑块。病变可能涉及被感染的皮脂腺。一些病变比其他病变更为严重。皮肤病变的实例是粉刺、斑疹、丘疹、脓疱、结节和囊肿。术语“粉刺”用于描述皮脂囊，其中充满了污垢、其他细胞、细小的毛发或细菌。粉刺包括所谓的“黑头”，也可以称为“开放粉刺”，其斑或表面看起来呈黑色。粉刺还包括皮肤发红的轻微隆起，以及“白头”，其斑或表面看起来是白色的。术语“斑疹”通常是指颜色改变的皮肤的扁平斑或区域，诸如红斑。术语“脓疱”通常用于指发炎、充满脓液的病变或充满脓液的皮肤发炎的隆凸。术语“丘疹”通常用于指不含脓液的皮肤的小而坚实的通常炎症性的隆凸。术语“结节”通常用于表示类似于丘疹但为白色且呈圆顶状的皮肤隆凸。通俗地讲，丘疹、脓疱或结节可称为“疙瘩”或“青春痘”。术语“囊肿”通常是指含有液体或半液体物质的异常膜囊，所述液体或半液体物质含有白细胞、死细胞和细菌。囊肿可能会很疼痛，并延伸到皮肤深层。

根据严重程度，痤疮可以是轻度、中度或重度。轻度痤疮通常根据黑头和白头的出现进行分类，但也可以包括丘疹和脓疱。中等程度的痤疮通常特征在于表现为更疼痛、根深蒂固、发炎的病变，这可能导致瘢痕。严重的痤疮特征在于出现根深蒂固的炎症性病变，包括囊肿和结节，这些会是疼痛的并且会产生瘢痕。聚合性痤疮是一种痤疮，其特征在于在皮肤下与脓疮连通且钻穿窦道的高度炎症性囊肿。

具体而言，对痤疮或其相关症状的治疗是指根除、减轻、改善、逆转或预防一种或多种与痤疮相关的不需要的特征，诸如以减轻受影响区域的粉刺的泛红、疼痛、发炎和整体外观。痤疮的治疗还可以使得患者的痤疮的严重性减轻。

本发明的组合物和方法可用于治疗由轻度、中度、重度和囊肿痤疮引起的瑕疵。在一个实施方式中，所述方法包括将所述组合物每天至少一次或两次施用，持续至少一、二、三周或更长时间。该组合物可以每天无期限地施用，以实现和/或保持对瑕疵和相关症状的减轻。

例7–皮肤补充

在某些实施方式中，本发明组合物和方法可用于补充皮肤。在一个实施方式中，提供了通过将本发明的局部用化妆品组合物施用于皮肤用于补充有需要的皮肤的方法，其中所述组合物包含MEL。在优选的实施方式中，组合物中的MEL的量为按重量计约0.5％至2.0％，优选约1.0％。该组合物可以配制为例如凝胶、洗剂或霜剂。

如本文所用，需要补充的皮肤是患有选自以下皮肤状况的皮肤：干燥、粗糙、脆弱、松弛、缺乏柔软、暗哑、皱纹、任何与衰老相关的皮肤状况或由环境因素，诸如作为示例的太阳、风、热、冷、化妆、油、污垢或污染引起的任何皮肤状况。

在一个实施方式中，所述补充皮肤的方法还包括施用治疗有效量的已知补充皮肤的化合物。例如，可以添加按重量计约0.001％至约5.0％的质酸、神经酰胺、PCA钠、甘油、甘油糖原、胆固醇和/或磷脂，以及硅酮、凡士林、甘油三酯、ω-脂肪酸、AHA(例如，羟基乙酸)和/或BHA(例如，水杨酸)。

在一个实施方式中，补充皮肤的方法可以还包括将蛋白质乳铁蛋白施用于皮肤。

该方法可预防性地用于防止皮肤衰老，包括在未表现出皮肤衰老迹象的个体中，例如在年龄为25岁以下的个体中。一旦表明在25岁以上的人群中很常见，该方法还可以逆转或治疗衰老迹象，或者减缓此类患者的皮肤病学老化进程。

例8：头皮和头发的健康

在某些实施方式中，本发明组合物和方法可用于治疗头皮状况或头发状况。在一个实施方式中，提供了通过将本发明的局部用化妆品组合物施用于头皮和/或头发，用于治疗头皮和/或头发状况的方法，其中所述组合物包含MEL和酸性形式的SLP。在一个实施方式中，所述组合物中的MEL的量为按重量计约0.1％至约1.0％，优选约0.2％。在一个实施方式中，组合物中酸性形式的SLP的量为约0.01％至1.0％，优选为约0.1％。

如本文所用，术语“头皮状况”和“头发状况”包括影响头皮和/或头发的人类和动物状况、病症或疾病。此类状况包括但不限于例如，由马拉色氏霉菌引起的干燥的头发或头皮、稀疏的头发、易断的头发、脱发、男性型秃头、脱毛、癣、脂溢性湿疹、脂溢性皮炎、乳痂、痤疮、牛皮癣、头虱、结节性脆发病、头皮屑、例如由金黄色葡萄球菌引起的毛囊炎等。

在一个实施方式中，将局部用化妆品组合物配制成洗发剂、护发素、摩丝、发胶或头发洗剂。在一个实施方式中，组合物可以还包含某些添加剂，包括例如蛋白质(例如，水解植物蛋白、水解小麦蛋白、水解乳蛋白、水解丝和水解胶原蛋白)、维生素(例如泛醇、生物素、维生素E醋酸盐、维生素A和D棕榈酸酯)、保湿剂//湿润剂(例如，甘油、丙二醇、PCA钠、基于氨基酸的表面活性剂和HLA)、润肤剂(例如酯、豆蔻酸异丙酯、油酸癸酯、苯甲酸C12-15烷基酯)、油(例如椰子油、西蒙得木油、芦荟、红花、杏仁、argon油)、植物药(例如母菊、芦荟、迷迭香)和香水(例如，薰衣草、夷兰、广藿香)，以及防腐剂、染料、pH调节剂和螯合剂。

该方法可以包括将约10ml，或2茶匙至2汤匙的组合物施用于头皮和/或头发(例如，通过在其上擦入组合物和/或使组合物起泡沫)，使组合物静置1分钟至5分钟，并且然后用水冲洗组合物。在一个实施方式中，将组合物擦入和/或起泡沫到头皮和/或头发中而不冲洗。施用于头皮和/或头发的组合物的量可取决于受试者头发的长度、数量和厚度。

实施例9：体臭

在某些实施方式中，本发明组合物和方法可用于治疗体臭。

体臭通常是由于革兰氏阳性丙酸杆菌和葡萄球菌表皮的存在所致，它们生活在皮脂腺的导管中并产生丙酸和异戊酸。这些化合物会产生不期望气味。

在一个实施方式中，提供了通过将本发明的局部用化妆品组合物施用于体臭的来源例如腋下皮肤用于治疗体臭的方法。局部用化妆品组合物可以包含MEL和SLP。在一个实施方式中，组合物中的MEL的量可以为按重量计约0.01％至约1.0％，优选为约0.1％。在一个实施方式中，组合物中SLP的量可以为按重量计约0.01％至约1.0％，优选为约0.1％。

在一个实施方式中，所述组合物被配制成液体、棒、凝胶、喷雾剂或擦拭剂。

该组合物可以进一步与例如载剂(例如，丙二醇、二丙二醇和水)、胶凝剂(例如，硬脂酸钠、棕榈酸钠、花生酸钠、二十二酸钠)、澄清剂(例如，非离子表面活性剂)、香料、螯合剂(例如EDTA二钠或四钠盐)、pH调节剂(例如氨甲基丙醇、泊洛沙明、氢氧化钠)、抗氧化剂(例如BHT)和着色剂(例如水溶性和/或醇溶性染料)。

例10：疤痕减轻

在某些实施方式中，本发明组合物和方法可用于减轻真皮疤痕的外观，例如，由损伤、痤疮或包括整形/重建手术的手术引起的疤痕。疤痕通常是由改性的真皮成纤维细胞或肌成纤维细胞过度生产胶原蛋白而引起的。在正常皮肤中，成纤维细胞产生胶原蛋白纤维，胶原蛋白纤维排列形成一个随机的“篮子编织”图案。

响应伤口，成纤维细胞可能会被炎症刺激物转化为成肌成纤维细胞。肌成纤维细胞以交联的方式沉积胶原蛋白，其中胶原蛋白纤维在平行于皮肤的单方向上排列。此外，与正常组织相比，疤痕中的胶原蛋白密度更高，并且纤维尺寸更大。丰富的肌成纤维细胞无法进行凋亡，并胶原蛋白基质继续循环，产生新的胶原蛋白，并导致新的皮肤变硬和收缩。

在一个实施方式中，提供了通过将本发明的局部用化妆品组合物施用于疤痕用于减轻疤痕的外观的方法，其中所述组合物包含MEL和SLP，和/或其他用于皮肤健康的试剂。在一个实施方式中，该组合物可以配制为凝胶或霜剂。在优选的实施方式中，组合物还包含例如凝胶形式的芦荟提取物。

在一个实施方式中，组合物中的MEL的量为按重量计约0.1％至2.0％，优选约1.0％。在一个实施方式中，组合物中SLP的量为按重量计约0.01％至约1.0％，优选约0.5％。

有利地，在一个实施方式中，本发明的组合物可以帮助溶解形成真皮疤痕的错位的胶原蛋白基质，以及抑制存在于真皮中的肌成纤维细胞的数量，以减轻疤痕的外观。

Claims (24)

1.一种用于治疗和/或预防皮肤状况的局部用化妆品组合物，所述组合物包含治疗有效量的一种或多种微生物生长副产物、以及局部可接受的媒介物。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述一种或多种微生物生长副产物是生物两亲性分子、酶和/或蛋白质。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述生物两亲性分子是选自糖脂和脂肽的生物表面活性剂，其中所述糖脂选自甘露糖基赤藓糖醇脂(MEL)、槐糖脂(SLP)、海藻糖脂(TL)和鼠李糖脂(RLP)；并且其中所述脂肽选自表面活性素、伊枯草菌素和泛革素。

4.根据权利要求2所述的组合物，其中所述酶和/或蛋白质选自外切-β-1,3-葡聚糖酶、酯酶、脂肪酶、糖苷酶、淀粉酶、蛋白酶和壳多糖酶。

5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含由微生物产生的氨基酸和/或肽。

6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含治疗有效量的白藜芦醇、质酸和聚丙烯酸。

7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含治疗有效量的已知粉刺消融剂或抗痤疮剂。

8.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含治疗有效量的芦荟提取物。

9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含化妆品佐剂和/或添加剂。

10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述佐剂和/或添加剂选自有机溶剂、硅酮、pH调节剂、螯合剂、胶凝剂、蛋白质、维生素、润肤剂、油、羟基酸、剥落剂、粘度改性剂、聚合物、矿物质、驱虫剂、润滑剂、防腐剂、植物药、澄清剂、非生物表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂、柔软剂、防晒霜、保湿剂、着色剂和香料。

11.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物被配制为液体、霜剂、凝胶、软膏、擦拭剂、洗剂、肥皂、洗发剂、护发素、喷雾剂，并且其中所述制剂适于直接施用于人的外皮。

12.一种用于治疗和/或预防皮肤状况的方法，其中所述方法包括将根据权利要求1-11所述的组合物直接施用于具有所述皮肤状况的人的皮肤。

13.根据权利要求10所述的方法，其中所述皮肤状况是光化性角化病。

14.根据权利要求10所述的方法，其中所述皮肤状况是寻常的痤疮。

15.根据权利要求10所述的方法，其中所述皮肤状况是体臭。

16.根据权利要求10所述的方法，其中所述皮肤状况是选自头皮屑、脂溢性皮炎和脱发的头皮状况。

17.根据权利要求10所述的方法，其中所述皮肤状况是选自皱纹、松弛和干燥的与衰老相关的状况。

18.根据权利要求10所述的方法，其中所述皮肤状况是疤痕。

19.根据权利要求10所述的方法，其中所述组合物每天被施用一次或两次。

20.根据权利要求10所述的方法，其中将所述组合物擦入皮肤。

21.根据权利要求10所述的方法，还包括从皮肤冲洗所述组合物。

22.一种用于减轻疤痕外观的方法，其中所述方法包括将包含MEL和SLP的组合物施用于所述疤痕。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述组合物包含按重量计约1.0％的MEL和按重量计0.5％的SLP。

24.根据权利要求22所述的方法，还包括将芦荟提取物施用于所述疤痕。

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