KR102161942B1 - 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법에 관한 것으로, 레스베라트롤에 더해 설견초 추출물, 모링가씨, 어성초추출물을 유효성분으로 포함함으로서 현저한 항 여드름균 효과를 얻을 수 있고, 레스베라트롤을 포함하여 설견초 추출물, 모링가씨, 어성초 추출물을 혼합한 혼합제제를 단순 혼합이 아닌 고압균질기를 이용한 나노에멀젼으로 안정화하여 단순 혼합제제에 비해 더욱 피부 침투가 용이하고 여드름 피부 개선에도 더욱 효과적인 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법을 제공한다.

Description

항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법 {Anti-acne cosmetic composition and method for manufacturing the same}
본 발명은 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법에 관한 것으로, 좀더 상세하게는 레스베라트롤, 모링가씨 추출물, 설견초 추출물 및 어성초 추출물을 함유하여 항여드름 효과가 우수하면서 안정성이 뛰어난 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법에 관한 것이다.
여드름은 호르몬의 변화, 세균 감염, 유전성 요인 등이 관련된 것으로 생각되나 정확한 원인은 아직 모르는 상태다. 대체로 사춘기에 나타나는 여드름은 안드로겐이라는 남성호르몬의 자극에 의해 피지를 과다하게 내보내기 때문에 발생 하지만 성인 여드름의 경우는 여성에게서 많이 나타나며 생리 전 주기적으로 악화되는 것을 볼 수 있다. 이는 프로게스테론이라는 황체호르몬, 지나치게 기름이 많거나 털구멍을 밀폐시키는 화장품 등이 원인 또는 악화 인자가 될 수 있다. 또한 정서적 긴장이나 스트레스, 수면 부족 등으로 부신피질 호르몬이 분비되어 피지선을 자극하여 발생하기도 한다.
또한, 여드름은 염증을 수반하고 있고 특히, 화농성 염증성 여드름의 경우, 사춘기 이후 성인에서까지 피부에 영구적인 흔적을 남기기 때문에 여드름의 바람직한 치료를 위해서는 염증 반응을 억제해주는 것도 반드시 필요하지만, 주로 항균 효과에 의존한 제품이 대부분이다.
종래에는 여드름 치료를 위하여 레티노이드(retinoid), 과산화벤조산(perbenzoic acid), 항생제 등을 바르거나 이소트레티노인(isotretinoin)을 복용하는 방법을 사용하여 피지의 과다 분비 또는 모공의 지나친 각화와 여드름균(P. acnes)에 의해 유발된 염증을 치료하거나 에리스로마이신, 베조일퍼록사이드 등의 항생제를 이용하여 여드름 균을 억제하거나, 트리클로산, 살리실산 등을 이용하여 여드름균을 제거하는 방법이 사용되고 있지만, 피부 정상균층을 파괴하고 항생제 내성균을 증식시키며 여드름의 주원인 중 하나인 과도한 피지분비를 조절 할 수 없으므로 근본적인 여드름 치료방법으로서는 한계가 있다.
한편, 화학식 C14H12O3의 구조를 갖는 레스베라트롤은 스틸벤(Stilbene)의 한 종류로서 스틸벤 합성 효소(Stilbene synthese:STS)에 의해 생성되며, 트랜스와 시스으 이성질체로 존재하여 포도주, 땅콩, 라스베리, 호장근 등의 여러 식물에서 발견되고 있다. 레스베라트롤은 항암 및 강력한 항산화 작용을 하며, 혈청 콜레스테롤을 낮춰 주는 역할로 작용할 뿐 아니라, 항바이러스(antiviral), 신경보호작용(neuroprotective), 항염증작용(anti-inflammatory), 항노화(anti-aging) 등의 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
이러한 레스베라트롤(resveratrol)은 나자식물 및 쌍자엽식물에 널리 분포되어 있으며 식물체중에서 유리상태로 존재하기도 하나 , 대부분 당류와 결합된 배당체의 형태로 존재한다(Gorham, J.,Prog.Phytochem.,6:203-209, 1980). 그리고 레스베라트롤은 시스형과 트랜스형이 있으며, 자연계에서는 몇몇을 제외하고는 대부분 안정한 트랜스 이성질체로 존재한다.(Trela, B.C. & Waterhouse, A,L.,J.Agric. Food Chem.,44(5): 1253-1257, 1996). 즉, 포도 및 특히 포도 껍질, 씨, 줄기 및 포도 잎, 특히 비티스 비니페라(Vitis vinifera), 비티스 로툰디폴리아(rotundifolia) 및 비티스 라브루스카(labrusca) 포도, 및 두드러지게는 이들 포도로부터 얻은 포도주 및 상기 언급한 천연 산물의 추출물 및 분말에서 발견되어지며 또한 다수의 폴리고눔(Polygonum)종 (폴리고나세아(Polygonaceae)과), 예를 들어 폴리고눔 쿠스피다툼(cuspidatum) 및 폴리고눔 물티플로룸(multiflorum)의 뿌리에 존재한다.
특히 최근에 트랜스-레스베라트롤은 여성호르몬 에스트로겐 유사작용이 밝혀지면서 피토에스트로겐으로서 각광을 받고 있다.(Gehm, B.D. et al., Proc.Nasl.Acad.Sci.,94:14138-14143, 1997) 또한 화장료로는 포도추출물을 함유하는 화장제 조성물로는 일본공개특허 JP 2006-528239호 이외에 미국특허 제5683683호, 미국특허 제5439672호, 미국특허 제5171577호 등이 제안된 바 있고, 정확하게 레스베라트롤을 사용한 화장료 용도로는 PCT 2004-103265호에 언급된 각질세포 증식 또는 분화를 억제한다거나 또는 알파-하이드록시산에 의해 야기되는 피부자극을 조절한다는 화장제 조성물이 제안된 바 있다. 아울러 상기 언급된 기술에는 단지 레스베라트롤 함량이 증가된 호장근 추출물이 두피 비듬을 유발시키는 진균에 대한 항진균력이 있어 비듬을 예방 또는 개선하는 조성물 특허인 등록특허 제10-1951649호가 제안된 바 있고, 등록특허 제10-1893970호에는 레스베라트롤을 함유하여 각질 제거 및 피부 재생에 도움을 주는 조성물 특허가 있으나 여드름성 피부를 개선한다거나 항균효과가 있는 것을 교시하고 있지 않다.
하지만, 레스베라트롤은 우수한 항균 및 항산화 효과에도 불구하고, 물에 대한 용해도가 낮고, 폴리올이나 에탄올에 미량 용해되기 때문에 고함량을 사용 하는 것이 어렵고 저온에서 쉽게 석출되어 장기간 경시 안정성을 보장하기가 어려운 문제점이 있기 때문에 레스베라트롤은 화장료 제형에 적용시 용해성 및 분산성으로 불안정한 문제를 보여 주고 있다.
또한, 최근에는 각종 천연물에서 추출하고 분리한 물질들이 보통 피부에 자극이 적고 수렴작용, 항균작용과 같은 기타의 약리작용을 가지고 있다는 사실이 널리 알려짐에 따라 천연물을 이용하여 화장료 조성물을 제조하는 다양한 시도가 연구되고 있지만 여드름 치료에 효과적인 화장료 조성물에 관한 연구가 여전히 미진한 상태이다.
참고문헌 1 : 일본 공개특허 JP 2006-528239호. 참고문헌 2 : 미국 등록특허 제5683683호. 참고문헌 3 : 미국 등록특허 제5439672호. 참고문헌 4 : 미국 등록특허 제5171577호. 참고문헌 5 : PCT 2004-103265호. 참고문헌 1 : 대한민국 등록특허 제10-1951649호. 참고문헌 2 : 대한민국 등록특허 제10-1893970호
따라서 이와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위해 본 발명은 화장품 원료로써 레스베라트롤(resveratrol)을 사용시 화장료에서 난용성 및 불안전성을 개선하면서 동시에 레스베라트롤을 포함하여 설견초 추출물, 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물을 유효성분으로 혼합하여 현저한 항 여드름균 효과를 얻을 수 있는 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법을 제공하는데 그 목적이 있다.
특히 본 발명은 레스베라트롤에 설견초 추출물, 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물을 혼합함으로서 각각의 제제가 갖는 효능에 비해 항 여드름균 효과가 더욱 극개화된 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법을 제공하는데 그 목적이 있다.
아울러 본 발명은 레스베라트롤에 설견초 추출물, 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물을 단순 혼합이 아닌 고압균질기를 이용한 나노에멀젼으로 안정화하여 피부 침투가 용이하고 여드름 피부 개선에도 더욱 효과적인 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법을 제공하는데 목적이 있다.
이와 같은 기술적 과제를 해결하기 위해 본 발명은;
설견초 추출물과 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물의 혼합물과, 레스베라트롤을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항여드름성 화장료 조성물을 제공한다.
이때 상기 레스베라트롤 0.01 ~ 5.0 중량부를 기준으로 상기 혼합물은 1.0 ~ 30중량부를 포함하는 것을 특징으로 한다.
특히 상기 혼합물은 설견초 추출물과 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물이 2:1:2의 중량비로 혼합한 것을 특징으로 한다.
그리고 상기 혼합물과 레스베라트롤은 전체 화장료 조성물의 총 중량 대비 0.1 ~ 50중량%를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.
아울러 상기 항여드름성 화장료 조성물은 수렴화장수, 유연화장수, 로션, 크림, 에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 크림, 샴푸, 린스, 헤어토닉, 마사지크림으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.
또한 본 발명은;
레스베라트롤 0.01 ~ 5.0중량%를 포함하는 유상파트를 70 ~ 80℃에서 교반하여 혼합하는 제1단계; 설견초 추출물과 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물이 2:1:2의 비율로 혼합한 혼합물 1.0 ~ 30.0중량%를 포함하는 수상파트를 70 ~ 80℃에서 교반하여 혼합하는 제2단계; 상기 유상파트와 수상파트를 혼합하고 호모믹서로 교반하여 1차 에멀젼을 제조하는 제3단계; 및 상기 1차 에멀젼을 1,000 ~ 1,500bar의 압력하에 고압균질기(Micro Fluidizer)에 2~3회 통과시키고 냉각시켜 나노에멀젼을 제조하는 제4단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 항여드름성 화장료 조성물의 제조 방법도 제공한다.
본 발명에 따른 항여드름성 화장료 조성물은 레스베라트롤에 더해 설견초 추출물, 모링가씨, 어성초추출물을 혼합한 혼합물(복합제제)를 유효성분으로 포함함으로서 여드름을 유발하는 주요 원인균인 프로피오니박테리움 아크네와 스트렙토코키스 아우레우스에 대한 우수한 항균력을 확인할 수 있고, 이러한 항여드름성 화장료 조성물은 항여드름균활성 및 항염증에도 효과가 있다.
또한 본 발명에 따른 항여드름성 화장료 조성물은 레스베라트롤을 포함하여 설견초 추출물, 모링가씨, 어성초 추출물을 혼합한 혼합제제를 단순 혼합이 아닌 고압균질기를 이용한 나노에멀젼으로 안정화하여 단순 혼합제제에 비해 더욱 피부 침투가 용이하고 여드름 피부 개선에도 더욱 효과적이다.
도 1은 본 발명에 따른 항여드름성 화장료 조성물의 실시예 1 ~ 4 와 비교예 1 ~ 4에 따른 화장료 조성물을 디스크 확산법으로 여드름 원인균에 대한 항균활성 평가한 결과를 도시한 사진이다.
도 2는 본 발명에 따른 항여드름성 화장료 조성물의 제조 실시예 1을 임상실험 대상자에게 도포하여 사용전, 사용 2주 후 및 4주 후의 여드름 개선 정도를 쵤영한 사진이다.
이하 본 발명에 따른 항여드름성 화장료 조성물 및 그 제조 방법을 첨부된 도면을 참고로 하여 상세히 기술되는 실시 예들에 의해 그 특징들을 이해할 수 있을 것이다.
본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 형태를 가질 수 있는바, 실시 예들을 본문에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나 이는 본 발명을 특정한 개시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명에 따른 항여드름성 화장료 조성물은 레스베라트롤을 단독으로 사용하는 경우에 비해 레스베라트롤, 설견초 추출물, 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물을 유효성분으로 함유하여 여드름 치료에 더욱 효과적이고, 용해도가 낮고 불안정한 레스베라트롤을 안정화하고 피부침투를 용이하게 하도록 고압균질기를 사용하여 나노에멀젼으로 안정화하여 여드름 피부 개선에도 더욱 효과적이어야 한다.
이와 같은 본 발명의 화장료 조성물은 레스베라트롤와 설견초 추출물, 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물을 유효성분으로 함유하여 항여드름균 효과를 나타낸다.
우선 레스베라트롤(resveratrol, 3,4',5-trihydroxystilbene)은 하기 C14H12O3의 화학식 구조로 표현되는 물질로서, 포도 및 여러 식물에서 발견된 피토알렉신(phytoalexin) 화합물이며, 항산화 효능 및 항염증 활성 등 여러 가지 생리/약학적 작용을 지니고 있다.
그리고 설견초(Salvia plebeia R. Br.)는 배암차즈기, 봉안초, 뱀배추 등으로 불리우며 다년생 초본생으로 높이는 40 ~ 50 cm, 줄기는 네모지고 잎은 대생, 타원형의 모양이며 국내에 고산지대에 서식하며, 기침을 멎게하고 가래를 삭이며 온갖 균을 죽이는 작용이 있어 항산화, 항균 및 항염효과가 우수하다.
또한 모링가씨는 모링가 나무의 씨앗으로서 모링가 나무는 모링가과(Moringaceae Family), 모링가속(Moringa Genus)의 식물로서 학명은 Moringa Oleifera(이명 Moringa Pterygosperma)이며, 콩과식물로 나뭇잎과 열매는 물론 나무전체를 식용으로 하는 열대성 나무이며, 다량의 아미노산, 무기질, 비타민 등 90가지 이상의 영양소를 함유하고 있다.
또한, 어성초(Houttuynia cortata)는 옛날부터 물고기의 냄새가 나는 풀이라고 하여 피부질환에 효과가 좋고 바이러스에 대한 억제 효능이 있으며 항산화 효과 및 항염증 작용, 파킨슨에도 효과가 있는 것으로 여드름 개선용 화장품으로도 개발되고 있다. 이러한 어성초에는 플라보노이드(Flavonoid) 성분을 풍부하게 함유하고 있어 항산성, 항균, 항염 등 인체에 매우 유익한 효능을 보여준다는 것이 현재까지의 연구 결과에 의해 보고되고 있다. 이 밖에도 어성초 추출물은 혈관 평활근 세포의 이주 및 증식을 억제하는 효능이 있음이 연구되고 있다.
이러한 화장료 조성물 중에서 설견초, 모링가씨 및 어성초는 물, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 이소프로판올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3-부틸렌글라이콜로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 추출 용매로 추출한 추출물일 수 있으며, 바람직하게 본 실시예의 추출용매는 1,3-부틸렌글라이콜일 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 실시 예에 있어서 상기 화장료 조성물은 여드름균의 활성을 제어함으로서 여드름성 피부 개선에도 효과가 있어 여드름성 피부를 개선하는데에도 유용다.
이러한 본 발명의 화장료 조성물은 항여드름균 효과를 높히기 위해 유효성분으로 레스베라트롤을 0.01 ~ 5.0 중량부를 기준으로, 설견초 추출물 1 ~ 2 중량부, 모링가씨추출물 1 ~ 2 중량부 및 어성초추출물 1 ~ 2 중량부로 이루어진 혼합물(혼합제제)를 함유한다.
이 경우 상기 유효성분 중 혼합물인 설견초 추출물과 모링가씨추출물 및 어성초추출물은 2 : 1 : 2의 중량비로 함유하는 것이 보다 바람직하다. 이는 이러한 범위에서 항균 및 항염 효과가 가장 큰 것으로 나타나기 때문이다. 이에 대한 보다 상세한 설명은 후술하는 실시예 및 실험예를 통하여 확인할 수 있다.
아울러 이러한 본 발명의 항여드름균 화장료 조성물에 포함되는 레스베라트롤, 설견초 추출물, 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물은 적용되는 전체 화장료 조성물의 총 중량(100중량%기준)에서 0.1 ~ 50중량%, 바람직하게는 1.0 ~ 20.0중량%를 유효성분으로 함유할 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 이때, 본 발명의 유효성분을 전체 화장료 조성물 총 중량의 0.1중량% 미만으로 포함할 경우에는 기대하는 항균 및 항염효능에 영향을 미치지 못할 수 있으며, 유효성분을 전체 화장료 조성물 총 중량의 50 중량%를 초과하여 포함할 경우에는 피부자극이 우려될 수 있고, 화장품 제형으로 불안정 하게 만들 수 있다.
이러한 본 발명의 일 실시 예의 화장료 조성물은 다양한 화장품 제형에 사용할 수 있다. 예를 들어 수렴화장수, 유연화장수, 로션, 크림, 에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 크림, 샴푸, 린스, 헤어토닉, 마사지크림으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 제형으로 형성될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 상기 혼합제제를 단순 혼합이 아닌 고압균질기를 이용한 나노에멀젼으로 안정화하여 피부 침투가 용이하고 여드름 피부 개선에도 더욱 효과적인 화장료 조성물을 제공하기 위해, (A) 레스베라트롤 0.01 ~ 5.0중량%를 포함하는 유상파트를 70 ~ 80℃에서 교반하여 혼합하는 단계; (B) 설견초 추출물과 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물이 2:1:2의 비율로 혼합된 혼합물 1.0 ~ 30.0중량%를 포함하는 수상파트를 70~80℃에서 교반하여 혼합하는 단계; (C) 상기 유상파트와 수상파트를 혼합하고 호모믹서로 교반하여 1차 에멀젼을 제조하는 단계; 및 (D) 상기 1차 에멀젼을 1,000 ~ 1,500bar의 압력하에 고압균질기(Micro Fluidizer)에 2 ~ 3회 통과시키고 냉각시켜 나노에멀젼을 제조하는 단계;를 통해 항여드름성 화장료 조성물을 제조한다.
이하, 본 발명에 따른 화장료 조성물의 항여드름균 효능 실험에 대해 설명한다.
<실험예 1> 레스베라트롤 및 천연 추출물의 항균력 시험
- 천연 추출물 제조(설견초, 모링가씨 및 어성초 추출물 제조)
㉠ 설견초 추출물의 제조
잘 건조된 설견초를 준비한 다음, 물, 에탄올, 부틸렌글리콜 또는 이들의 혼합용매에 1:10(W/W) 내지 1:100(W/W)의 비율로 1일 내지 5일동안 60℃에서 추출하여 수득하였다.
㉡ 모링가씨 추출물의 제조
잘 건조된 모링가씨를 준비한 다음, 물, 에탄올, 부틸렌글리콜 또는 이들의 혼합용매에 1:10(W/W) 내지 1:100(W/W)의 비율로 1일 내지 5일동안 60℃에서 추출하여 수득하였다.
㉢ 어성초 추출물의 제조
잘 건조된 어성초 줄기, 뿌리를 준비한 다음, 물, 에탄올, 부틸렌글리콜 또는 이들의 혼합용매에 1:10(W/W) 내지 1:100(W/W)의 비율로 1일 내지 5일동안 60℃에서 추출하여 수득하였다.
이하에서는 본 발명에 따른 화장료 조성물의 항여드름균 효능을 확인하기 위해 레스베라트롤과 설견초 추출물, 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물을 하기 [표 1] 및 [표 2]와 같은 배합비율로 섞어 다양한 배합비율의 혼합조성물을 제조하여 실험하는 것에 대해 설명한다.
레스베라트롤의 중량비
구분 R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7
정제수 To 100
1,3-부틸렌글라이콜 30.0
1,2-헥산디올 2.0
레스베라트롤 - 0.01 1.0 5.0 10.0 - -
살리실산 - - - - - 0.01 5.0
추출물들의 혼합 중량비
구분 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10 A11 A12
설견초추출물 1 - - 1 2 1 1 2 2 1 2 -
모링가씨추출물 - 1 - 1 1 2 1 2 1 2 2 -
어성초추출물 - - 1 1 1 1 2 1 2 2 2 -
# 시험예 1: 항여드름균 효과 측정
항균효과 평가에 사용된 균주인 항균력 효과 검정시험으로 Paper disc method법에 의하여 항균시험을 실시하였다. 실험균주로 P. acnes, S. aurus는 한국생명공학연구원 생명자원센터에서 분양받아 사용하였다. P. acnes는 37℃, 혐기성 환경, DifcoTM Reinforced Clostridial Medium (BD, USA)에서 배양되었고, 혐기성환경은 GasPak EZ Anaerobic Container System(BD, USA)을 이용한 혐기성 병에서 조성되었다. S. aureus는 37℃, BactoTM Tryptic Soy Broth(BD, USA)에서 배양되었다.
Paper Disc 확산법을 통해 추출물의 항균활성을 평가하였다. 각 균주를 액체 배양 배지에 접종한 후 분광광도계를 이용한 흡광도 측정시 600nm에서 optical density(O.D) 0.5가 될 때까지 배양하였다. 1/100 희석한 배양액 100 ㎕를 한천 배지에 도포하고 8mm의 멸균된 Paper Disc를 배지위에 올린 후 농도별로 표1 및 표2의 시료를 각각 20㎕씩 처리하였다. P. acnes의 경우 혐기성 병에 넣어 37℃에서 3일간 배양하고, S. aureus는 37℃ 배양기에서 1일간 배양하여 Paper Disc 주위 투명환의 지름을 측정한 결과를 하기의 [표 3]에 나타내었다. 대조군으로는 항여드름균활성이 뛰어난 살리실산과 비교 측정하였다.
시료 Clear Zone(mm)
P. acnes S. aureus
R1 10.5 9.5
R2 19.4 6.2
R3 20.6 7.5
R4 30.4 15.5
R5 31.5 17.0
R6 15.5 14.7
R7 31.0 25.5
A1 2.2 1.5
A2 0.5 0.8
A3 1.7 2.0
A4 3.5 2.1
A5 1.7 1.4
A6 2.3 1.9
A7 5.5 4.7
A8 8.0 6.8
A9 11.7 10.8
A10 9.7 7.5
A11 12.1 10.7
A12 0.0 0.0
상기 [표 3]의 결과로부터 R4와 A9의 조성물의 경우 여드름 원인균인 프로피오니박테리움(P. acnes)균과 스테피로코쿠스 아우레우스(S. aurus)균에 대하여 우수한 항균활성을 확인하였다. 즉, 레스베라트롤의 경우 총 중량(100중량%기준)에서 5.0중량% 이상부터는 동일한 항균력을 보였으며, 설견초 추출물과 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물은 2:1:2의 중량비율로 배합하였을 때 최적의 항균효과를 나타내었다.
<실험예 2> 복합제제의 항균력 시험 및 나노에멀젼 제조
상기 <실험예 1>에서 얻은 결과를 토대로 조성물 R4와 A9의 추출물을 가지고 하기 [표 4]와 같은 화장료 조성물(실시예 1 ~ 4 및 비교예 1 ~ 4)을 각각 제조하여 항여드름균 효능 실험 결과를 설명한다.
구분 비교예1 비교예2 비교예3 비교예4 실시예1 실시예2 실시예3 실시예4
유상 식물성 오일 20.0
부틸렌글라이콜 10.0
하이드로제네이티드레시친 3.0
레스베라트롤 0.1 5.0 - - 0.1 0.1 5.0 5.0
수상 글리세린 5.0
복합추출물(A9) - - 1.0 30.0 1.0 1.0 30.0 30.0
디소듐이디티이에이 0.02
1,2-헥산다이올 2.0
정제수 To 100
성상
M/F 처리 X X X X X O X O
저온(-5℃) 4주경과 양호 석출 양호 양호 양호 석출 양호 양호
실온(20℃) 4주경과 양호 양호 양호 양호 양호 양호 양호 양호
고온(45℃) 4주경과 양호 양호 양호 양호 양호 양호 양호 양호
# 시험예 2: 성상 및 안정성 평가
상기 [표 4]의 실시예 및 비교예에서 제조된 에멀젼의 성상 및 안정성을 확인하기 위하여 고온 안정도는 45℃에서 4주간 변색, 변취, 산화 및 분리여부를 육안관찰 및 현미경으로 입자를 관찰하여 기록하였으며, 저온 안정도는 -5℃에서 4주간 변색, 변취, 산화, 결정 및 석출여부를 육안으로 관찰하여 상기 표 4에 나타내었다.
# 시험예 3 : 항염증(항여드름균) 및 세포생존율 평가
상기 화장료 조성물이 세포 생존율에 미치는 영향을 확인하고자, 세포배양은 10% fetal bovine serum(F BS)를 첨가한 Dulbeco' modified eagle' medium(DMEM)배지를 사용하였으며, 37℃, 5% CO2 incubator에 적응시켜 계대배양하였다.
세포생존율 측정은 macrophage(Raw264.7) cell을 96 well plate에 1X106cell/ml이 되게 seeding하고 24시간 뒤 특정 농도(1, 10, 50, 100, 500 μg/ml)의 시료를 20 μl 첨가한 후 37 ℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양하였다. 대조군은 시료와 동량의 멸균수를 첨가하여 동일한 조건으로 배양하였다. 무혈청 배지로 교 체한 후 MTT(5mg/mL) 용액 20 μl를 첨가하여 4시간 배양한 다음, 배양액을 제거하고 각 well당 DMSO : Ethanol (1 : 1) 150 μl를 가하여 실온에서 30분간 반응 시킨 뒤, ELISA reader로 550 nm에서 흡광도를 측정 하였다. 세포 생존율 측정은 시료 용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.
상기에 따라, 실험예 2의 세포 독성을 평가한 결과, 처리농도 10 μg/ml 일 때 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 4 의 세포 생존률(%) 결과는 하기의 표 5 및 도 1에서와 같다.
구분 세포 생존률(%) 구분 세포 생존률(%)
실시예1 100.0 비교예1 99.9
실시예2 99.5 비교예2 98.8
실시예3 100.0 비교예3 97.8
실시예4 99.5 비교예4 98.9
# 시험예4 : 항염증 평가(항균효과 측정)
이상의 실시예1 ~ 4 및 비교예 1 ~ 2의 조성물을 1 ml을 1,3-부틸렌 글리콜 수용액 9 ml에 녹이고, 이 용액 30 ㎕을 취하여 직경 5 mm의 페이퍼 디스크에 점적한 후 여러 종류의 세균에 대해 하기와 같은 조건으로 배양하였다. 배양 후 페이퍼 디스크 주변에 나타나는 청정구역(clear zone)의 직경을 측정하였다.
- 칸디다 알비칸(Candida albicans, ATCC 10259): 영양한천배지를 사용하고 37℃, 호기성 조건에서 48시간 배양하였다.
- 대장균 (Escherichia coli, ATCC 25922): 트립틱 소이 아가를 배지로 사용하고 37℃, 호기성 조건에서 48시간 배양하였다.
- 스트렙토코커스 아우레어스 (Staphylococcus aureus, ATCC 29737): 영양한천배지를 사용하고 37℃, 호기성 조건에서 48시간 배양하였다.
- 바실러스 섭틸리스 (Bacillus subtilis, ATCC 6633): 영양한천배지를 사용하고 37℃, 호기성 조건에서 48시간 배양하였다.
- 여드름균 (Propionibacterium acne, ATCC 6919): 보강 클로스트리얼 아가 (reinforced clostridial agar)를 배지로 사용하고 37℃, 혐기성 조건에서 72시간 배양하였다.
- 각각의 배지에 세균을 배양한 후, 페이퍼 디스크 주변에 나타나는 청정구역(Clear zone)의 직경을 측정한 결과는 하기의 [표 6]에서와 같다.
구분 칸디다알비칸 대장균 바실러스 섭틸리스 스트렙토코커스아우레어스 여드름균
비교예1 1.1 2.1 0.5 1.9 2.2
비교예2 4.2 4.1 0.5 4.9 5.1
비교예3 3.5 1.2 0.4 0.5 2.6
비교예4 4.5 4.1 0.8 4.9 5.3
실시예1 0.5 2.8 0.2 1.6 3.9
실시예2 2.5 2.9 4.9 5.5 11.4
실시예3 0.8 1.2 0.6 2.7 6.4
실시예4 1.8 3.5 4.7 7.4 9.8
상기 [표 5]에서와 같이 실시예 1 ~ 4 및 비교예 1 ~ 4 의 경우 세포독성이 거의 없는 것을 확인 할 수 있었고, [표 6]에서와 같이 전반적으로 일반 세균 및 진균보다 여드름 원인균인 프로피오니박테리움(P. acnes)균과 스테피로코쿠스 아우레우스(S. aurus)균에 대하여 우수한 항균활성을 확인하였다. 특히 비교예 1 ~ 4의 항여드름균 활성보다 실시예 1 ~ 4의 값이 더 큰 것으로 나타났다. 즉, 레스베라트롤 및 설견초추출물, 모링가씨추출물, 어성초추출물을 모두 포함할 때, 항여드름균효과도 향상됨을 알 수 있었다. 또한, 실시예 1. 3에서 나타나듯이 동일 함량에서 고압균질기를 통과한 조성물이 일반 혼합물보다 항여드름균 효과가 더 뛰어남을 알 수 있었으며, 안정성 평가 결과 난용성 성분인 레스베라트롤을 5.0중량% 함유하여 일반 에멀젼으로 제조시 4주후에 저온에서 석출 현상이 있었으나 고압균질기로 처리한 실시예 3의 경우 석출현상 없이 양호한 상태를 유지할 수 있었다.
# 시험예 5 : 여드름에 대한 개선 정도 측정
본 발명의 여드름 개선효과를 확인하기 위해, 실시예 3의 화장료조성물을 10.0중량% 함유한 로션을 만들어 만19 ~ 40세 경증 여드름 및 붉은기를 보유한 여성 20명을 4주간 통원치료가 가능한 환자를 대상으로 실시하였다.
가. 임상시험에 사용된 제품
아래 [표 7]의 화장료 조성물(여드름 개선 로션)을 시험번호, 제품명, 저장방법, 사용설명서가 명시된 라벨을 부착하여 4주간 사용량을 피험자에게 지급하였다.
구분 제조실시예1 기능
정제수 To 100 용제
부틸렌글라이콜 7.00 보습제
글리세레스-26 5.00 보습제
글리세린 4.00 보습제
1,2-헥산디올 2.00 보습제
쌀겨왁스 2.00 유연제
세틸알코올 1.50 유연제
폴리글리세릴-2스테아레이트 1.50 유화제
글리세릴스테아레이트 1.00 유화제
스테아릴알코올 1.00 유연제
아크릴레이트/C10-30알킬아크릴레이트크로스폴리머 0.50 점증제
마카다이아씨오일 0.60 유연제
트로메타민 0.05 pH조절제
다이소듐이디티에이 0.02 금속이온봉쇄제
향료 0.15 착향제
실시예3의 화장료 조성물 10.0 주름개선제
나. 사용법 : 임상 시험 제품은 1일 2회 아침과 저녁으로 나누어, 세안 후 얼굴에 도포
다. 시험방법
- 피부 유분함유량 측정 : Sebumeter SM815(Courage-Khazaka eletronic GmbH, Germany)를 사용하여 T존 부위 중 미간 사이를 측정하였다. 피부에 접촉시킨 후 약 20초동안 획득되는 피지량을 광학적 반사원리로 단위면적당 유분량(ug/cm)으로 측정하는 장비로써, 측정값과 피지량은 비례한다.
- 피부 붉은 기 측정 :Visia-CR (Canfiel Imaging Systems, USA)을 이용하여 촬영한 이미지를 Image-pro plus로 분석하여 실시하였다. 이미지에 특정 영역을 지정한 다음, 피부 붉은기를 a값으로 정하여 붉은기가 개선될수록 a값이 작아지게 된다.
- 피부과 전문의에 의한 육안평가 : 피험자의 여드름 정도는 피부과 전문의 2인을 시험자로 하여 인체적용 시험 시작전(0주), 2주, 4주 경과 후에 연구소를 방문한 시험대상자들을 대상으로 평가하였다. 피부과 전무의 2인의 평가에 차이가 있을 경우 많은 개수를 선택한다. 코와 턱부위를 제와한 안면의 패쇄면포와 개방면포의 개수를 세어 평가자료로 사용한다.(표 8;면포성 여드름의 분류)
폐쇄면포 흰색깔을 띠며 모낭 속에 고여 딱딱해진 피지를 의미한다.
개방면포 멜라닌의 침착으로 검은 색깔을 띠며 모낭 속에 고여 딱딱해진 피지를 의미한다.
라. 시험결과
- 피험자 정보 : 본 임상시험에 참여한 피험자 20명의 평균 연령은 만 23.7세로 20대 15명, 30대 5명으로 구성되었으며 성별은 모두 여성이다.
- 피부 유분함유량 변화는 하기의 [표 9]에 나타난 것처럼 사용후 2주, 4주 후 모두 통계적으로 유의하게 감소함을 알 수 있었다.
방문 유분함류량 ( Mean ±SD)
0주
2주
4주		 103.30 ±42.47
83.48 ±31.52
77.39 ±22.95
- 피부 붉은기 변화는 하기의 [표 10]에서처럼 시험제품 사용 전과 비교하여 사용 2주 후, 4주 후 모두 통계적으로 유의하게 감소함을 알 수 있었다.
방문 유분함류량 ( Mean ±SD)
0주
2주
4주		 16.54 ±2.03
15.29 ±2.07
14.88 ±1.65
- 피부 전문가에 의한 육안 평가 : 개방형 면포 개수 및 폐쇄형 면포개수의 변화를 시험제품 사용 전과 비교하여 [표11] 및 [도 2] 에 나타난 것처럼 사용 2주 후, 4주 후 모두에게 통계적으로 피부(1)에서 유의미하게 감소함을 알 수 있었다.
방문 개방형 면포 개수 폐쇄형 면포 개수
0주
2주
4주		 6.00 ±0.43
4.22 ±0.16
4.35 ±0.20		 22.65 ±0.03
20.09 ±0.65
20.52 ±0.39
<제조 실시예 1> 유연화장수의 제조
상기 실시예 3의 화장료 조성물을 유효성분으로 함유하는 유연화장수의 조성은 하기의 [표 12]과 같다.
구분 제조실시예2 기능
정제수 To 100 용제
글리세린 5.00 보습제
부틸렌글라이콜 10.00 보습제
디소듐이디티에이 0.02 금속이온봉쇄제
소듐하이알루로네이트 0.05 보습제
에탄올 5.00 수렴제
폴리글리세릴-10 스테아레이트 1.00 가용화제
토코페릴아세테이트 0.10 항산화제
향료 0.10 착향제
카프릴릴글라이콜 0.05 보습제
에칠헥실글리세린 0.05 보습제
실시예3의 화장료 조성물 10.0 주름개선제
<제조 실시예 2> 영양 크림
상기 실시예 3의 화장료 조성물을 유효성분으로 함유하는 영양크림의 조성은 하기의 [표 13]와 같다.
구분 제조실시예3 기능
정제수 To 100 용제
글리세린 3.00 보습제
부틸렌글라이콜 7.00 보습제
디소듐이디티에이 0.01 금속이온봉쇄제
비헤닐알코올 3.00 점증제
피이지-100스테아레이트 1.00 유화제
글리세릴스테아레이트 1.00 유화제
폴리글리세릴-10스테아레이트 1.30 유화제
소르비탄세스퀴올리에이트 0.30 유화제
스쿠알란 3.00 유연제
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 4.20 유연제
에칠헥실이소노나노에이트 8.00 유연제
디메치콘 0.50 유연제
토코페릴아세테이트 0.10 항산화제
스테아릭애씨드 2.00 유연제
폴리아크릴레이트-13 0.1 점증제
폴리이소부텐 1.00 점증제
폴리소르베이트20 0.75 유화제
카프릴릴글라이콜 0.35 보습제
에칠헥실글리세린 0.35 보습제
실시예3의 화장료 조성물 10.0 주름개선제
<제조 실시예 4> 샴푸
상기 실시예 3의 화장료 조성물을 유효성분으로 함유하는 로션의 조성은 하기 [표 14]와 같다.
구분 제조실시예4 기능
정제수 To 100 용제
소듐라우레스 설페이트 30.00 계면활성제
소듐라우릴 설페이트 15.00 계면활성제
라우릴글루코사이드 10.00 계면활성제
소듐코코일글루코사이드 5.00 계면활성제
데실글루코사이드 2.00 계면활성제
프로판다이올 1.00 보습제
폴록사머407 0.70 점증제
판테놀 0.50 피부개선제
폴리쿼터늄-10 0.30 점증제
하이드록시아세토페논 0.10 보존제
다이소듐이디티에이 0.02 금속이온봉쇄제
향료 0.15 착향제
글리세린 0.50 보습제
실시예3의 화장료 조성물 10.00 피부개선제
이상과 같이 본 발명의 실시 예에 대하여 상세히 설명하였으나, 본 발명의 권리범위는 이에 한정되지 않으며, 본 발명의 실시 예와 실질적으로 균등의 범위에 있는 것까지 본 발명의 권리범위가 미친다.
1: 피부

Claims (6)

  1. 설견초 추출물과 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물의 혼합물과, 레스베라트롤을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항여드름성 화장료 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 레스베라트롤 0.01 ~ 5.0 중량부를 기준으로 상기 혼합물은 1.0 ~ 30중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는 항여드름성 화장료 조성물.
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 혼합물은 설견초 추출물과 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물이 2:1:2의 중량비로 혼합한 것을 특징으로 하는 항여드름성 화장료 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 혼합물과 레스베라트롤은 전체 화장료 조성물의 총 중량 대비 0.1 ~ 50중량%를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항여드름성 화장료 조성물.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 항여드름성 화장료 조성물은 수렴화장수, 유연화장수, 로션, 크림, 에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징 크림, 샴푸, 린스, 헤어토닉, 마사지크림으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 항여드름성 화장료 조성물.
  6. 레스베라트롤 0.01 ~ 5.0중량%를 포함하는 유상파트를 70 ~ 80℃에서 교반하여 혼합하는 제1단계;
    설견초 추출물과 모링가씨 추출물 및 어성초 추출물이 2:1:2의 중량비로 혼합한 혼합물 1.0 ~ 30.0중량%를 포함하는 수상파트를 70 ~ 80℃에서 교반하여 혼합하는 제2단계;
    상기 유상파트와 수상파트를 혼합하고 호모믹서로 교반하여 1차 에멀젼을 제조하는 제3단계; 및
    상기 1차 에멀젼을 1,000 ~ 1,500bar의 압력하에 고압균질기(Micro Fluidizer)에 2~3회 통과시키고 냉각시켜 나노에멀젼을 제조하는 제4단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 항여드름성 화장료 조성물의 제조 방법.
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