CN110772473B - 一种合适于糖尿病病人皮肤的护肤品 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种含美洲大蠊提取物合适于糖尿病病人皮肤的护肤品,属于化妆品技术领域。本发明所保护护肤品的有效成分为美洲大蠊提取物、滇重楼提取物和日用化妆品、护肤品中所用的辅料。本发明的有效成份美洲大蠊和滇重楼原料作为美容滋润的有效成分对糖尿病病人的皮肤效果显著,特别是滇重楼提取物有效成份的加入,使得美洲大蠊提取物以及基质的协同作用下,透皮吸收性更好,抑菌效果更强,皮肤修复效果更好,对糖尿病病人皮肤色素性凹陷性疤痕有非常好的疗效,很大程度上缓解了美洲大蠊单独使用或过量使用,引起的皮肤创面疤痕的副作用,具有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明公开一种用于糖尿病患者皮肤护理的化妆品,具体地说,是一种含美洲大蠊提取物合适于糖尿病病人皮肤的护肤品,属于化妆品技术领域。
背景技术
根据国际糖尿病联盟公布的最新数据,全球糖尿病患者已达到4.25亿,预计到2045年,糖尿病患者可能达到6.29亿。而中国糖尿病患者数量约1.144亿,已成为患者数量最多的国家。世界卫生组织已将“糖尿病”列为三大疑难病之一,其防治已成为全球医学研究的重点和热点领域之一。糖尿病皮肤病变(diabetic dermopathy)作为糖尿病最常见的并发症之一,发生于糖尿病的各个时期,可损害全身任何部位的皮肤,具有病变范围广、种类多的特点。
统计结果显示,有30%的糖尿病患者会出现皮肤病变,更多比例的患者伴有潜在的皮肤病变。糖尿病皮肤病变皮损通常呈皮肤疱疹、颈部毛囊炎、难忍的瘙痒、出汗反常、黄色瘤等,患者面部常常出现皮肤瘙痒、感觉异常、干燥及开裂等症状。因此,皮肤病变可加重糖尿病的病情,并因糖尿病的不良控制而加重。因此,随着全球糖尿病患者人数的不断攀升,糖尿病皮肤问题的日益凸显,对糖尿病皮肤护理的需求也将急剧增加。
糖尿病性皮疹为糖尿病最常见的皮肤损害。发生在小腿前部,也可发于别处,开始为圆形或椭圆形暗红色,直径只有0.3厘米左右,扁平丘疹。非对称分布,呈疏散或聚集分布。表面上有皮屑,皮疹消退后遗留小的、色素性凹陷性疤痕,常伴有糖尿病性微血管病。糖尿病性微血管病最严重的结局为坏疽,多发生于足部或小腿前部,患处疼痛,温觉消失,干燥易裂,发生溃疡,创口化脓、坏死、愈合困难,甚至发生足穿孔症。因此,对于糖尿病病人控制血糖为根本,但因糖尿病为慢性长期性疾病,对于其并发症的预防及治疗也迫在眉睫。为顺应当前医疗形势的发展,治病是关键,提高患者生存质量也是我们目前急需重点关注的方面。
遗憾的是,尽管各类护肤品层出不穷,针对糖尿病皮肤护理的产品仍然是一个断层,相关的护肤品屈指可数。专利号为CN02137658.1,一种治疗糖尿病的降血糖护肤霜及其生产方法的专利,和专利号为CN02112197.4,适合于II型糖尿病人外用的降血糖护肤霜及其生产方法,都在护肤霜基质里含有0.1-2.8%质量百分比的磺酰脲类降糖药物或/和0.1-2.8%质量百分比的双胍类降糖药物或/和0.06-1.6%质量百分比的促胰岛素分泌剂降糖药物或/和及0.2-8%质量百分比的植物/中药提取物和1-10%质量百分比透皮组分。而众所周知,磺酰脲类降糖药物有严重的副作用。如低血糖是磺酰脲类药物常见的严重副作用,而且中长效的磺酰脲类药物如优降糖,常会导致难以纠正的低血糖,且纠正后还会再次发生;造成食欲减退、恶心呕吐、上腹部不适、腹胀腹痛、腹泻等、白细胞、中性粒细胞、血小板或全血细胞减少、溶血性贫血等,皮肤瘙痒、荨麻疹、红斑、皮炎等。然而,皮肤护理产品天天使用,而其中的成分累积会引起不适,甚至是皮肤病反复发作的原因之一。
因此,开发一款合适于糖尿病病人皮肤的护肤品又无副作用将有非常广阔的市场前景。
美洲大蠊(Periplaneta americana)属昆虫纲蜚蠊科,是中医“蜚蠊”的主要品种。《神农本草经》记载蜚蠊“味咸寒,治血痰症坚,寒热,破积聚,喉咽痹,内寒无子”,《本草纲目》明确蜚蠊“能主治瘀血,癥坚,寒热,下气,利血脉”,清代《陆川本草》认为蜚蠊“驱风解热,通血脉,治肿疡(外敷)”。成分分离及研究发现,美洲大蠊含有丰富的氨基酸及多糖,并且含有矿物元素、维生素、脂肪与脂肪酸等。相关研究认为其药用有效成分为粘糖氨酸、腺苷、多元醇类及肽类等,具有修复皮肤损伤及抗菌的作用。美洲大蠊含有丰富的氨基酸及多糖,并且含有矿物元素、维生素、脂肪与脂肪酸等。美洲大蠊干燥虫体提取物,含有WHF(多元醇类、表皮生长因子)、粘氨酸、粘糖氨酸及多种氨基酸等活性物质,具有抗炎、消肿、促进细胞增殖和新生肉芽组织增长,加速病损组织修复,加快坏死组织脱落,提高机体免疫功能等作用;其中药用有效成分粘糖氨酸、腺苷、多元醇类及肽类具有通过调控血管内皮细胞功能改善皮肤血管功能,从而改善皮肤屏障,具有修复皮肤损伤的作用。
而滇重楼为多年生草本植物,又名独角莲,有清热解毒、消肿止痛、活血化瘀的功效,可以用于痈肿、跌打伤痛等症状。通过成分分析,已从中分离并鉴定了50余种化合物,主要包括脂肪酸酯、甾醇及其甙、黄酮苷、C27甾体皂甙、C21孕甾烷甙及多糖,均有很强的抗炎活性。
创伤愈合的过程十分复杂,包含多种细胞,多种细胞因子的参加,相互影响,相互作用。总的来说,表皮的重建,肉芽组织的形成是伤口愈合过程中极其重要的过程,而胶原纤维的沉积又影响到愈后瘢痕的大小。本发明研究发现:美洲大蠊提取物组用于皮肤创伤修复时,虽然也有新生的表皮,但其新生表皮的胶原纤维增生明显,排列紊乱;肉芽组织中还具有较丰富的毛细血管,仍处于增生反应阶段,肉芽组织厚度较厚;从Masson染色的结果看,使用美洲大蠊提取物的皮肤会表现出过度的胶原纤维沉积(见图3)。肉芽组织过度增生和胶原的过度沉积是导致肥厚性瘢痕产生的重要原因。这说明虽然美洲大蠊提取物可以改善并滋润皮肤,但是实践中发现,频繁过量使用含美洲大蠊提取物天然成分产品会产生副作用,会使肉芽组织的过度增生和胶原纤维沉积如图3(A),从而使皮肤疤痕形成。特别对于糖尿病患者皮肤来说,本来就容易复发,感染,不易愈合,皮疹消退后色素性凹陷性疤痕,而其黑色素沉积,更让皮肤疤痕雪上加霜。
研究发现:滇重楼提取物有效成分可中和因单纯添加或长期使用美洲大蠊提取物所带来的副作用,改善糖尿病病人微血管循环障碍,促进伤口快速平整愈合,抑制黑色素产生和沉着。因此,本发明创造性地将美洲大蠊提取物与滇重楼提取物配合使用,对糖尿病病人的皮肤色素性凹陷性疤痕有很好的疗效。
发明内容
为解决现有技术中存在的上述问题,本发明提供一种含美洲大蠊和滇重楼提取物合适于糖尿病病人皮肤的护肤品,达到抗炎、消肿、抑菌、保湿、促进伤口愈合、抑制色素沉着、缓解瘙痒,无疤痕产生的作用,从而可以改善改善糖尿病患者的皮肤,提高糖尿病病人的生存质量。
本发明提供如下技术方案:
本发明保护美洲大蠊提取物、滇重楼提取物在合适于糖尿病病人皮肤的护肤品方面的应用。
优选地,所述的美洲大蠊提取物的质量百分比为0.5-4%,滇重楼提取物:0.5-3%。
进一步地,所述的护肤品为面霜,其由以下重量份的原料制备而成:美洲大蠊提取物:0.5-4%,滇重楼提取物:0.5-3%,硬脂醇:3-5%,辛酸/癸酸甘油三酯:3-5%,鲸蜡硬脂醇:1-3%;角鲨烷:1-4%,甘油三酯:1-3%,聚二甲基硅氧烷:0.1-0.5%,乙二胺四乙酸二钠:0.05-0.1%,卡波姆:0.5-1%,透明质酸钠:0.05-2%,1,3-丙二醇:1-5%,甘油:2-4%,L-精氨酸:0.1-0.5%,尿囊素:0.1-0.3%,甘草酸二钾:0.1-0.2%,去离子水补齐余量;上述各组分的总和为100%。
进一步地,所述的护肤品为精华液,其由以下重量份的原料制备而成:美洲大蠊提取物0.05-2%,滇重楼提取物:0.5-3%,丁二醇40-60%,丙二醇0.5-2%,甘油7.5-15%,羟基乙酸0.05-0.15%,乙基己基甘油0.05-0.1%,PEG-60氢化蓖麻油0.05-0.15%,甘油辛酸酯0.01-0.05%,六脒二异氰酸酯0.01-0.1%,神经酰胺0.1-1%,余量为水,上述各组分的总和为100%。
进一步地,所述的护肤品为体乳,其由以下重量份的原料制备而成:美洲大蠊提取物:0.5-4%,滇重楼提取物:0.5-2%,鲸蜡硬脂基葡糖苷:1-2%,氢化椰油甘油脂类辛:1-2%,鲸蜡硬脂醇:1-3%,三庚精:1-2%,硬脂酸甘油酯:1-3%,可可仔酯:0.5-1%,精炼乳木果油:0.1-0.5%,EDTA-2Na:0.05%,维生素E:0.5-1%,苯氧乙醇:0.1-0.6%,羟苯甲酯:0.5-1%,1,3丁二醇:1-3%,辛基十二醇:0.1-0.5%,尿囊素:0.1-0.5%,去离子水补齐余量;上述各组分的总和为100%。
进一步地,所述的美洲大蠊提取物的提取方法如下:选择虫体饱满的美洲大蠊成虫,烘干机内60-80℃条件下烘干;8-10倍量95%乙醇作为溶剂浸泡2-8周;乙醇回流提取3次,每次提取时间1-4h,所剩浸膏加8-10倍体积量水溶液浸泡4-8h,然后提取2次,两次提取时间分别为1-4h,合并水提溶液,减压浓缩并干燥得水提物,即美洲大蠊提取物。
进一步地,所述的滇重楼提取物的提取方法如下:将滇重楼根茎粗粉用95%的乙醇浸泡12-48h,经减压蒸馏,得到滇重楼醇提液和残渣,滇重楼醇提液经超声提取2-4h得到提取液,残渣中加入8倍体积量的浓度为75%的乙醇进行超声波提取1-4h,合并提取液经减压浓缩成浸膏状,即得滇重楼提取物。
进一步地,所述的面霜制作方法如下:
(1)按照面霜所述的质量百分比准备原料:
(2)将透明质酸钠、1,3-丙二醇及甘油置于乳化锅内,开启搅拌,转速35~45r/min,然后加入总组分50%的水至乳化锅内,将卡波姆在搅拌下缓慢撒入锅中,保持搅拌,直至溶胀均匀;
(3)开启真空泵,抽真空至真空度-0.08MPa;关闭真空泵,保持真空状态开启加热,使体系升温至75-80℃;
(4)将硬脂醇、辛酸/癸酸甘油三酯、鲸蜡硬脂醇、角鲨烷、甘油三酯、聚二甲基硅氧烷和乙二胺四乙酸二钠,依次加入油相锅中,开启搅拌和加热,使油相温度升至75-80℃;
(5)保持搅拌,转速30~40r/min,开启均质,均质转速1500r/min,将溶解完全的油相真空抽入搅拌锅中参加乳化,油相需缓慢而均匀的抽入,保持均质速率,每均质3~5min,间隔2~3min后再次均质,如此反复,均质3~5次,均质完成后保温搅拌20min,将L-精氨酸溶解均匀后加入到乳化体系中搅拌均匀,乳化完成后开始降温;
(6)待温度降至45℃,将美洲大蠊提取物,滇重楼提取物,尿囊素及甘草酸二钾,通过加料口加至乳化锅内,调节pH值至5-6;
(7)充分搅拌15~20min,停止搅拌,破真空,出料。
进一步地,所述的精华液的制备方法如下:
(1)按上述精华液所述质量分数备料;
(2)将去离子水进行灭菌并加热至80-90℃;向加热的去离子水中依次加入,丁二醇、丙二醇、甘油;均质3-5min至分散均匀,然后继续搅拌10-15min至所有成分充分溶解;
(3)降温并维持温度45-50℃,然后分别加入剩余的组分,每加入一种组分后搅拌3-5min,待其完全溶解之后再加入下一组分;所有组分溶解后就得到含美洲大蠊提取物精华液。
进一步地,所述的体乳的制备方法如下:
(1)按上述体乳所述质量分数备料;
(2)将50%去离子水进行灭菌并在集热式恒温加热磁力搅拌器中加热至75-80℃;
(3)依次将鲸蜡硬脂基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、硬脂酸甘油酯、氢化椰油甘油脂类、三庚精、可可仔酯及精炼乳木果油加入油相锅中,开启搅拌和加热,使油相温度升至75-80℃;然后开启均质,将溶解完全的油相真空抽入搅拌器中参加乳化;
(4)均质完成后保温搅拌20min,称取1,3丁二醇、EDTA-2Na、苯氧乙醇、羟苯甲酯、辛基十二醇,溶解均匀后加入到乳化体系中搅拌均匀,乳化完成后开始降温;
(5)待温度降至45℃,将美洲大蠊提取物,滇重楼提取物,维生素E及尿囊素通过加料口加至乳化锅内;
(6)充分搅拌15~20min,停止搅拌,出料
本发明有益效果:
1)本发明的护肤品具有抗炎、消肿、促进皮肤愈合、改善微循环、美白达到抑菌、保湿、促进伤口愈合、抑制色素沉着、缓解瘙痒,无疤痕产生的作用,从而可以改善糖尿病患者的皮肤,具有巨大应用价值。
2)本发明创造性地将美洲大蠊和滇重楼提取物应用于调理糖尿病病人皮肤的护肤品中,对糖尿病患者皮肤中黑色素沉积,伤口难愈合,易形成色素性凹陷性疤痕有非常好的疗效。经实验验证,该护肤品对糖尿病病人的皮肤效果显著,特别是滇重楼提取物有效成份的加入,使得美洲大蠊提取物以及基质的协同作用下,透皮吸收性更好,抑菌效果更强,皮肤修复效果更好,对糖尿病病人皮肤色素性凹陷性疤痕有非常好的疗效,抵消了美洲大蠊单独使用或过量使用,引起的皮肤创面疤痕的副作用,具有良好的应用前景。
3)本发明具有强抑制细菌作用,可以有效地抗感染和控制感染,不用对病人长期大量使用抗生素,既有利于组织修复再生,提高病人的生存质量,也可减轻病人的经济负担。
附图及附图说明
图1为美洲大蠊提取物体对内皮细胞的增殖作用图;
图2为美洲大蠊滇重楼提取物促进糖尿病大鼠全层皮损创伤的创面修复比较图;
图3为美洲大蠊提取物与美洲大蠊提取物+滇重楼提取物处理伤口,Masson染色比较图,其中图3(A)为美洲大蠊提取物的面霜伤口后Masson染色图,图3(B)为美洲大蠊提取物+滇重楼提取物的面霜伤口后Masson染色图。
具体实施方式
实施例1原料制备
1.1美洲大蠊提取物的制备
1.1.1美洲大蠊提取物的提取1
美洲大蠊提取物的提取方法如下:选择虫体饱满的美洲大蠊成虫,烘干机内60℃条件下烘干;10倍量95%乙醇作为溶剂浸泡2周;乙醇回流提取3次,每次提取时间1h,所剩浸膏加10倍体积量水溶液浸泡4h,然后提取2次,两次提取时间分别为1h,合并水提溶液,减压浓缩并干燥得水提物,即美洲大蠊提取物。
1.1.2美洲大蠊提取物的提取2
与1.1.1不同之处在于:烘干温度为80℃,8倍量95%乙醇作为溶剂浸泡8周,乙醇回流提取3次,每次提取时间4h,所剩浸膏加8倍体积量水溶液浸泡8h,然后提取2次,两次提取时间分别为4h。
1.2滇重楼提取物的制备
1.2.1滇重楼提取物的制备1
将滇重楼根茎粗粉用95%的乙醇浸泡48h,经减压蒸馏,得到滇重楼醇提液和残渣,滇重楼醇提液经超声提取2h得到提取液,残渣中加入8倍体积量的浓度为75%的乙醇进行超声波提取1h,合并提取液经减压浓缩成浸膏状,即得滇重楼提取物。
1.2.2滇重楼提取物的制备2
与1.2.2不同之处在于:将滇重楼根茎粗粉用95%的乙醇浸泡12h,经减压蒸馏,得到滇重楼醇提液和残渣,滇重楼醇提液经超声提取4h得到提取液,残渣中加入8倍体积量的浓度为75%的乙醇进行超声波提取4h。
实施例2:美洲大蠊提取物影响血管内皮细胞划痕愈合实验
为了观察美洲大蠊提取物对血管内皮细胞增殖及血管生成的影响,以2.0×106个细胞/mL的密度接种血管内皮细胞系——人脐静脉内皮细胞(HUVEC)于六孔板中,每孔2ml含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的F-12K培养基,并在细胞培养箱中孵育。细胞贴壁后,使用无菌10μl移液管的尖端制备细胞划痕,并用PBS轻柔地洗去划痕处飘起的细胞。使用不同浓度的美洲大蠊提取物处理细胞并观察其对划痕的愈合作用,以不含样品的无血清培养基作为空白对照。使用倒置显微镜在0、12及24h拍摄划痕照片,并在随机选择的四个点进行宽度测量。
实验结果显示HUVEC细胞划痕12h及24h后,与对照组相比,美洲大蠊提取物处理时,划痕距离明显减小(p<0.05),提示美洲大蠊提取物可促进HUVEC细胞的增殖和迁移。同时,也说明这些天然成分的使用,可能会带来一些副作用,如美洲大蠊提取物可促进HUVEC细胞的增殖,从而引起因长期或大量使用,导致疤痕的产生。
实施例3面霜的制备以及对糖尿病患者皮肤护理功效测试
3.1面霜的制备方法
3.1.1面霜的制备1
(1)按质量百分比准备原料:美洲大蠊提取物:4%,滇重楼提取物:0.5%,硬脂醇:5%,辛酸/癸酸甘油三酯:3%,鲸蜡硬脂醇:3%;角鲨烷:4%,甘油三(乙基己酸)酯:3%,聚二甲基硅氧烷:0.5%,乙二胺四乙酸二钠:0.1%,卡波姆:1%,透明质酸钠:0.05%,1,3-丙二醇:5%,甘油:4%,L-精氨酸:0.5%,尿囊素:0.3%,甘草酸二钾:0.1%,去离子水补齐余量;上述各组分的总和为100%;
(2)将透明质酸钠、1,3-丙二醇及甘油置于乳化锅内,开启搅拌,转速35~45r/min,然后加入总组分50%的水至乳化锅内,将卡波姆在搅拌下缓慢撒入锅中,保持搅拌,直至溶胀均匀;
(3)开启真空泵,抽真空至真空度-0.08MPa;关闭真空泵,保持真空状态开启加热,使体系升温至75-80℃;
(4)将硬脂醇、辛酸/癸酸甘油三酯、鲸蜡硬脂醇、角鲨烷、甘油三(乙基己酸)酯、聚二甲基硅氧烷和乙二胺四乙酸二钠,依次加入油相锅中,开启搅拌和加热,使油相温度升至75-80℃;
(5)保持搅拌,转速30~40r/min,开启均质,均质转速1500r/min,将溶解完全的油相真空抽入搅拌锅中参加乳化,油相需缓慢而均匀的抽入,保持均质速率,每均质3~5min,间隔2~3min后再次均质,如此反复,均质3~5次,均质完成后保温搅拌20min,将L-精氨酸溶解均匀后加入到乳化体系中搅拌均匀,乳化完成后开始降温;
(6)待温度降至45℃,将美洲大蠊提取物,滇重楼提取物,尿囊素及甘草酸二钾,通过加料口加至乳化锅内,调节pH值至5-6;
(7)充分搅拌15~20min,停止搅拌,破真空,出料。3.1.2面霜的制备2
与3.1.1不同之处在于:按质量百分比准备原料:美洲大蠊提取物:0.5%,滇重楼提取物:3%,硬脂醇:3%,辛酸/癸酸甘油三酯:3%,鲸蜡硬脂醇:1%;角鲨烷:1%,甘油三酯:3%,聚二甲基硅氧烷:0.1%,乙二胺四乙酸二钠:0.05%,卡波姆:0.5%,透明质酸钠:2%,1,3-丙二醇:1%,甘油:2%,L-精氨酸:0.1%,尿囊素:0.1%,甘草酸二钾:0.2%,去离子水补齐余量;上述各组分的总和为100%。
3.2面霜对糖尿病患者皮肤护理功效测试
3.2.1面霜对糖尿病患者皮肤的测试
从糖尿病患者中募集受试者,纳入132位面部皮肤出现瘙痒、干燥泛红,轻微破溃的患者,随机分为3组:含美洲大蠊及滇重楼提取物面霜治疗组(46人),市售含美洲大蠊提取物润肤霜对照组(45人),对照组(41人,外用市售的普通面霜)。两组间性别、病情程度经统计学处理无显著性差异(p>0.05)。
患部外擦美洲大蠊及滇重楼提取物面霜,每位患者试用28天,3次/天;
患部外擦市售美洲大蠊提取物面霜,每位患者试用28天,3次/天;
对照组外擦市售的普通面霜,每位患者试用28天,3次/天。
疗效评价标准:
皮损瘙痒、干燥症状缓解或消失,色素沉着减轻、创面平整为有效,否则无效。
试验结果:
含美洲大蠊及滇重楼提取物面霜治疗7天(7d)、14天(14d)、21天(21d)及28天(28d)疗效明显高于市售面霜组及市售普通美洲大蠊提取物面霜组。
表1面霜的功效检测
3.2.2面霜的透皮吸收试验
取220-250gSD大鼠,腹部皮肤用脱毛剂8%Na2S溶液脱毛,清水洗净皮肤表面,饲养24h后断颈处死,剪下腹部皮肤,剥离皮下脂肪及粘液组织,用蒸馏水反复洗净,再用生理盐水漂洗后,浸于生理盐水中,4℃冰箱中短期保存,备用。
体外透皮吸收试验测定:采用ZTY智能透皮试验仪,取制备好的鼠皮,剪成适当大小的3片(3.4cm2),分别置于透皮试验仪的3个供给池与接收池之间,角质层面向供给池,真皮层面向接收池,使皮肤结合紧密勿有气泡。取0.5g面霜与不同浓度的透皮促进剂混合均匀后,贴在鼠皮表皮,接受室内为15ml接收液(PEG400:95%甲醇:生理盐水=1:3:6)。开动恒温水浴循环(37±1)℃和磁力加热搅拌器(300r/min),开始计时,随时排除接收池中气泡,在设定时间点1h、2h、3h、4h、5h及6h分别从接收池取样1ml,并立即补充等体积接收液。取出样品用0.45μm微孔滤膜过滤后,HPLC测定浓度。对照组1是普通基质面霜组,对照组2是市面上含美洲大蠊提取物面霜,实验组是实施例中本发明所制备的面霜。面霜的透皮吸收实验选取腺苷和黄酮苷作为标准品,采用HPLC测定浓度检测,经质量换算后结果如表2和表3。
结果显示:本发明含滇重楼提取物和美洲大蠊提取物的面霜透皮吸收率最高,市售含美洲大蠊提取物的面霜透皮吸收率次之;可以看出本发明含滇重楼提取物和美洲大蠊提取物的面霜,时间越长透皮吸收效果越好,累计透过量越高,说明滇重楼有效成分的加入,可以使滇重楼提取物和美洲大蠊提取物有效成分与基质在协同作用下透皮效果好。
表2面霜的透皮吸收(腺苷)
1h(%) | 2h(%) | 3h(%) | 4h(%) | 5h(%) | 6h(%) | |
对照1 | 0.5 | 0.43 | 0.47 | 0.52 | 0.58 | 0.67 |
对照2 | 3.19 | 7.42 | 12.65 | 21.38 | 31.47 | 40.6 |
实验组 | 10.5 | 20.75 | 32.58 | 40.45 | 51.8 | 65.82 |
表3面霜的透皮吸收(黄酮苷)
1h(%) | 2h(%) | 3h(%) | 4h(%) | 5h(%) | 6h(%) | |
对照1 | 0.45 | 0.89 | 1.07 | 1.59 | 1.84 | 1.99 |
对照2 | 0.85 | 0.89 | 1.77 | 1.59 | 1.74 | 1.28 |
实验组 | 8.53 | 15.75 | 18.65 | 25.32 | 32.23 | 40.87 |
3.2.3面霜的抗菌活性检测
通过牛津杯法检测含美洲大蠊成分糖尿病皮肤护理面霜的抗菌活性,所用牛津杯直径为10mm,因此如果抑菌圈直径小于11mm则视为无效。实验中所用对照为某市售品牌面霜。所得结果如下表4。
表4面霜的抑菌活性
实验结果提示,含美洲大蠊滇重楼提取物面霜对金黄色葡萄球菌、红色毛癣菌有显著抑制作用,抑制效果明显优于某市售面霜;对白癣菌及犬小孢子菌有一定的抑制效果。
实施例4体乳的制备以及对糖尿病患者皮肤护理功效测试
4.1体乳的制备方法
4.1.1体乳的制备1
(1)美洲大蠊提取物:0.5%,滇重楼提取物2%,鲸蜡硬脂基葡糖苷:1%,氢化椰油甘油脂类辛:2%,鲸蜡硬脂醇:1%;三庚精:2%,硬脂酸甘油酯:1%,可可仔酯:0.5%,精炼乳木果油:0.5%,EDTA-2Na:0.05%,维生素E:0.5%,苯氧乙醇:0.1%,羟苯甲酯:0.5%,1,3丁二醇:1%,辛基十二醇:0.1%,尿囊素:0.1%,去离子水补齐余量;上述各组分的总和为100%。按质量份数备料;
(2)将50%去离子水进行灭菌并在集热式恒温加热磁力搅拌器中加热至75-80℃;
(3)依次将鲸蜡硬脂基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、硬脂酸甘油酯、氢化椰油甘油脂类、三庚精、可可仔酯及精炼乳术果油加入油相锅中,开启搅拌和加热,使油相温度升至75-80℃;然后开启均质,将溶解完全的油相真空抽入搅拌器中参加乳化;
(4)均质完成后保温搅拌20min,称取1,3丁二醇、EDTA-2Na、苯氧乙醇、羟苯甲酯、辛基十二醇,溶解均匀后加入到乳化体系中搅拌均匀,乳化完成后开始降温;
(5)待温度降至45℃,将美洲大蠊提取物,滇重楼提取物,维生素E及尿囊素通过加料口加至乳化锅内;
(6)充分搅拌15~20min,停止搅拌,出料。
4.1.2体乳的制备2
与4.1.1不同之处在于:美洲大蠊提取物:4%,滇重楼提取物:0.5%,鲸蜡硬脂基葡糖苷:2%,氢化椰油甘油脂类辛:1%,鲸蜡硬脂醇:3%;三庚精:1%,硬脂酸甘油酯:1%,可可仔酯:1%,精炼乳木果油:0.1%,EDTA-2Na:0.05%,维生素E:1%,苯氧乙醇:0.6%,羟苯甲酯:1%,1,3丁二醇:3%,辛基十二醇:0.5%,尿囊素:0.5%,去离子水补齐余量;上述各组分的总和为100%。
4.2体乳对糖尿病患者皮肤护理功效测试
4.2.1体乳的透皮吸收试验
取220-250gSD大鼠,腹部皮肤用脱毛剂8%Na2S溶液脱毛,清水洗净皮肤表面,饲养24h后断颈处死,剪下腹部皮肤,剥离皮下脂肪及粘液组织,用蒸馏水反复洗净,再用生理盐水漂洗后,浸于生理盐水中,4℃冰箱中短期保存,备用。
体外透皮吸收试验测定:采用ZTY智能透皮试验仪,取制备好的鼠皮,剪成适当大小的3片(3.4cm2),分别置于透皮试验仪的3个供给池与接收池之间,角质层面向供给池,真皮层面向接收池,使皮肤结合紧密勿有气泡。取0.5g体乳与不同浓度的透皮促进剂混合均匀后,贴在鼠皮表皮,接受室内为15ml接收液(PEG400:95%甲醇:生理盐水=1:3:6)。开动恒温水浴循环(37±1)℃和磁力加热搅拌器(300r/min),开始计时,随时排除接收池中气泡,在设定时间点1h、2h、3h、4h、5h及6h分别从接收池取样1ml,并立即补充等体积接收液。取出样品用0.45μm微孔滤膜过滤后,HPLC测定浓度。体乳的透皮吸收实验选取腺苷和黄酮苷作为标准品,采用HPLC测定浓度检测,经质量换算后结果如表5和表6。对照组1是普通基质浮液组,对照组2是市面上含美洲大蠊提取物体乳,实验组是实施例中本发明所制备的体乳。体乳的透皮吸收实验选取腺苷和黄酮苷作为标准品,采用HPLC测定浓度检测,经质量换算后结果如表5和表6。
结果显示:含滇重楼提取物和美洲大蠊提取物的体乳透皮吸收率最高,含美洲大蠊提取物的体乳透皮吸收率次之;普通基质乳汁液透皮吸收率最低。可以看出本发明含滇重楼提取物和美洲大蠊提取物的体乳,时间越长透皮吸收效果越好,累计透过量越高,说明滇重楼有效成分的加入,可以使滇重楼提取物和美洲大蠊提取物有效成分与基质在协同作用下透皮效果好,吸收好。
表5体乳的透皮吸收(腺苷)
1h(%) | 2h(%) | 3h(%) | 4h(%) | 5h(%) | 6h(%) | |
对照1 | 0.45 | 0.53 | 0.56 | 0.63 | 0.62 | 0.75 |
对照2 | 2.33 | 4.45 | 8.57 | 15.42 | 22.57 | 34.68 |
实验组 | 5.56 | 8.76 | 16.64 | 30.64 | 44.84 | 70.2 |
表6体乳的透皮吸收(黄酮苷)
4.2.2体乳的抗菌活性检测
通过牛津杯法检测含美洲大蠊提取物体乳的抗菌活性,所用牛津杯直径为10mm,因此如果抑菌圈直径小于11mm则视为无效。实验中所用对照为某市售品牌体乳。所得结果如下表7。
实验结果提示,含美洲大蠊提取物的体乳对导致皮肤菌群紊乱的金黄色葡萄球菌、红色毛癣菌、白癣菌、犬小孢子菌均有一定抑制作用,抑制效果优于某市售体乳。
表7体乳的抑菌活性
实施例5精华液的制备以及对糖尿病患者皮肤护理功效测试
5.1精华液的制备方法
5.1.1精华液的制备1
(1)备料,按质量百分数:美洲大蠊提取物0.05%,滇重楼提取物3%,丁二醇60%,丙二醇2%,甘油15%,羟基乙酸0.15%,乙基己基甘油0.1%,PEG-60氢化蓖麻油0.15%,甘油辛酸酯0.05%,六脒二异氰酸酯0.1%,神经酰胺1%,余量为水。
(2)将去离子水进行灭菌并加热至80-90℃,称量配方中的丁二醇、丙二醇、甘油;(3)向被加热的去离子水中依次加入,均质3-5min至分散均匀,然后继续搅拌10-15min至所有成分充分溶解;
(4)称量配方中的其他组分;
(5)降温并维持温度45-50℃,然后分别加入剩余的组分,每加入一种组分市后需要搅拌3-5min,待其完全溶解之后再加入下一组分;所有组分溶解后就得到含美洲大蠊提取物精华液。
5.1.2精华液的制备2
与5.1.1不同之处在于:所用的原料质量百分数为:美洲大蠊提取物2%,滇重楼提取物:0.5%,丁二醇40%,丙二醇0.5%,甘油7.5%,羟基乙酸0.05%,乙基己基甘油0.05%,PEG-60氢化蓖麻油0.05%,甘油辛酸酯0.01%,六脒二异氰酸酯0.01%,神经酰胺0.1-1%,余量为水。
5.2精华液对糖尿病患者皮肤护理功效测试
5.2.1精华液的透皮吸收试验
取220-250gSD大鼠,腹部皮肤用脱毛剂8%Na2S溶液脱毛,清水洗净皮肤表面,饲养24h后断颈处死,剪下腹部皮肤,剥离皮下脂肪及粘液组织,用蒸馏水反复洗净,再用生理盐水漂洗后,浸于生理盐水中,4℃冰箱中短期保存,备用。
体外透皮吸收试验测定:采用ZTY智能透皮试验仪,取制备好的鼠皮,剪成适当大小的3片(3.4cm2),分别置于透皮试验仪的3个供给池与接收池之间,角质层面向供给池,真皮层面向接收池,使皮肤结合紧密勿有气泡。取0.5g精华液与不同浓度的透皮促进剂混合均匀后,贴在鼠皮表皮,接受室内为15ml接收液(PEG400:95%甲醇:生理盐水=1:3:6)。开动恒温水浴循环(37±1)℃和磁力加热搅拌器(300r/min),开始计时,随时排除接收池中气泡,在设定时间点1h、2h、3h、4h、5h及6h分别从接收池取样1ml,并立即补充等体积接收液。取出样品用0.45μm微孔滤膜过滤后,HPLC测定浓度。对照组1是普通基质面霜组,对照组2是市面上含美洲大蠊提取物精华液,实验组是实施例中本发明所制备的精华液。精华液的透皮吸收实验选取腺苷和黄酮苷作为标准品,采用HPLC测定浓度检测,经质量换算后结果如表8和表9。
结果显示:含滇重楼提取物和美洲大蠊提取物的精华液透皮吸收率最高,市售含美洲大蠊提取物的精华液透皮吸收率次之。可以看出本发明含滇重楼提取物和美洲大蠊提取物的精华液有较好的透皮吸收效果,且时间越长效果越好,累计透过量越高,说明滇重楼有效成分的加入,可以使滇重楼提取物和美洲大蠊提取物有效成分与基质在协同作用下透皮效果好,吸收好。
表8精华液的透皮吸收(腺苷)
表9精华液的透皮吸收(黄酮苷)
1h(%) | 2h(%) | 3h(%) | 4h(%) | 5h(%) | 6h(%) | |
对照1 | 0.47 | 0.75 | 0.88 | 1.37 | 1.74 | 1.99 |
对照2 | 0.78 | 1.45 | 2.68 | 3.32 | 3.24 | 3.18 |
实验组 | 6.48 | 8.36 | 24.54 | 48.83 | 56.87 | 65.55 |
4.精华液的疗效观察
(1)张某,男,58岁,12年糖尿病病史,空腹血糖控制在5.5-6.9mmol/L,餐后血糖控制在6.0-8.5mmol/L。近两年来出现面部脱屑、皮肤瘙痒,且出现皮肤色素凹陷性疤痕等症状;随后经人推荐开始使用本发明的产品,在清洁面部皮肤后使用精华液,每日3次。在使用两周后,脱屑症状明显减轻,皮肤瘙痒基本消失,创伤面色素凹陷性疤痕明显改善。
(2)刘某,女,72岁,21年糖尿病病史。多年来患者面部及全身皮肤瘙痒,并伴有皮肤干燥及苔癣样变。患者按照每日3次使用含美洲大蠊精华液,两周后瘙痒症状明显减轻,四周后脱屑症状基本消失,皮肤相较于之前,明显焕发光泽,创伤面色素凹陷性疤痕明显改善。
实施例6本发明的护肤霜对糖尿病皮肤修复的影响
C1的护肤霜的配方与制备方法同实施例3面霜的制备3.1.1,不同在于,没有添加任何提取物;
C2中只添加美洲大蠊提取物;
C3中添加美洲大蠊提取物和滇重楼提取物;
C4中仅添加滇重楼提取物;
将以上所制备C1-C4的护肤霜进行使用效果性能测试
糖尿病大鼠全层皮损创伤模型的建立
动物随机分为4组(n=10),每组15只体重180-200gSD大鼠,构建大鼠糖尿病模型。
使用1%的戊巴比妥钠溶液经腹腔注射实施麻醉,具体剂量为50mg/kg,约0.8ml,具体剂量根据动物体重变化。首先将麻醉好的动物用电推剪褪去背部毛发,暴露皮肤,用碘酒消毒后,用直径8mm的眼科环钻在背部开三个等大的圆形创面。创面深度直至暴露肌肉外的筋膜。术后SD大鼠参照完全驯化饲养条件,一笼一只,分开饲养。各组分别在每日早、晚两个时段涂抹C1~C4制备得到的护肤霜各一次,待连续使用2周后,采用打分的方法进行效果评价。满分为5分,4~5分表示改善效果极佳;3~4分表示改善效果良好;2~3分表示改善效果一般;2分以下表示未见明显改善效果或有瘢痕形成,最后各组取平均分,具体评分情况如下所示:
动物表皮愈合情况评分。
C1 1.7无刺激
C2 3.8无刺激
C3 4.5无刺激
C4 2.9无刺激
测试结果及图2可知:C1~C4组的护肤霜对动物表皮伤口愈合实验均具有较为优异的促伤口愈合效果,而且伤口恢复后创面平整度的情况来看,C3(即添加美洲大蠊提取物和滇重楼提取物)的面霜效果最佳,C2(仅添加美洲大蠊提取物)的面霜效果次之,较为平整,C4(仅添加滇重楼提取物)更次之,C1(基质)的面霜效果最差;从创面的色泽来看,C3(即添加美洲大蠊提取物和滇重楼提取物)的面霜效果最佳,最为接近肤色,C4(仅添加滇重楼提取物)次之,C2(仅添加美洲大蠊提取物)的面霜效果次之,C1(基质)的面霜效果最差,颜色为黑褐色。因此,添加美洲大蠊提取物和滇重楼提取物的C3面霜效果对糖尿病大鼠的皮肤损伤修复效果最佳。
实施例7美洲大蠊提取物加滇重楼提取物在皮肤创伤修复效果比较
为了确定美洲大蠊提取物在皮损修复过程中对表皮重建,肉芽组织增生,胶原沉积的影响,发明人选取体重180-200gSD大鼠构建大鼠糖尿病皮肤缺损模型。对照组采用仅含美洲大蠊提取物的面霜,实验组采用含有美洲大蠊+滇重楼提取物的面霜。造模方法同实施例6。选取术后第12天的SD大鼠,颈椎脱臼处死后,立即剪取创面及其周围5mm的皮肤,放于事先配置好的Bouin固定液中固定4小时,然后进行组织脱水,石蜡包埋,用石蜡切片机将包埋组织的石蜡块切成厚度3.5μm的组织薄片,贴附在正电荷防脱片后,进行Masson染色,观察新生组织的胶原沉积情况。Masson染色方法参照Masson染色试剂盒说明书。Weigert铁苏木素染色液染色5-10min,酸性乙醇分化5-15s,水洗,Masson蓝化液返蓝3-5min,水洗,丽春红品红染色液染色5-10min,在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液,用弱酸工作液洗1min,磷钼酸溶液洗1-2min,用配置好的弱酸工作液洗1-2min,乙醇脱水,二甲苯透明封片。
染色结果见图3。
从图3中可以明显地看出:实验大鼠处理12天后,实验组使用启美洲大蠊提取物滇重楼的面霜,创口新生上皮胶原纤维排列整齐(如图3(B));而对照组使用含美洲大蠊提取物的面霜,创口虽然也有新生的表皮,但其新生表皮的胶原纤维增生明显,排列紊乱(如图3(A)),重建程度远不及实验组。
比较肉芽组织:在术后12天,对照组肉芽组织中还具有较丰富的毛细血管,仍处于增生反应阶段(如图3(A)),肉芽组织厚度明显厚于实验组。这可以说明美洲大蠊提取物会使创口恢复产生疤痕的一个原因;而且说明实验组创口恢复肉芽组织成熟度明显优于对照组。
从Masson染色的结果看,相对于对照组,实验组并没有表现出过度的胶原纤维沉积(如图3(A)),相反,实验组胶原纤维排列较整齐,纤维较细(如图3(B))。而肉芽组织过度增生和胶原的过度沉积是导致肥厚性瘢痕产生的重要原因。通过对以上新生皮肤病理形态的观察,可以看出美洲大蠊加滇重楼提取物在加快创面愈合的同时,还能加快肉芽组织的成熟和产生更少的胶原纤维沉积,使创面愈合的又好又快又平整,减少了瘢痕的生成,对于糖尿病病人来说,能有效抑制色素性凹陷性疤痕的产生,大大提高了生存质量。
因此,本发明的具有促进皮肤伤口愈合作用的护肤霜成分均对使用效果产生了显著影响,C2单纯添加美洲大蠊提取物后期出现创面不平整现象,且皮肤修复后色泽暗沉,而C4仅添加滇重楼提取物创面凹陷,色泽较为接近肤色,C3中美洲大蠊提取物、滇重楼提取物配合使用,有效减少创面凸起现象,使创面愈合更为平整规则,色泽更为接近肤色,抑制瘢痕形成。这是因为滇重楼提取物有效成份的加入,使得美洲大蠊提取物以及基质的协同作用下,透皮吸收性更好,抑菌效果更强,皮肤修复效果更好,抵消了美洲大蠊单独使用或过量使用,引起的皮肤创面疤痕以及创面黑色素生成和沉积等副作用,具有良好的应用前景。
Claims (6)
1.美洲大蠊提取物和滇重楼提取物在制备合适于糖尿病病人皮肤的护肤品中的应用,其特征在于:所述的护肤品为面霜,其由以下质量百分比的原料制备而成:美洲大蠊提取物:0.5-4%,滇重楼提取物:0.5-3%,硬脂醇:3-5%,辛酸/癸酸甘油三酯:3-5%,鲸蜡硬脂醇:1-3%,角鲨烷:1-4%,甘油三酯:1-3%,聚二甲基硅氧烷:0.1-0.5%,乙二胺四乙酸二钠:0.05-0.1%,卡波姆:0.5-1%,透明质酸钠:0.05-2%,1,3-丙二醇:1-5%,甘油:2-4%,L-精氨酸:0.1-0.5%,尿囊素:0.1-0.3%,甘草酸二钾:0.1-0.2%,去离子水补齐余量;上述各组分的总和为100%。
2.美洲大蠊提取物和滇重楼提取物在制备合适于糖尿病病人皮肤的护肤品中的应用,其特征在于:所述的护肤品为精华液,其由以下质量百分比的原料制备而成:美洲大蠊提取物0.05-2%,滇重楼提取物:0.5-3%,丁二醇40-60%,丙二醇0.5-2%,甘油7.5-15%,羟基乙酸0.05-0.15%,乙基己基甘油0.05-0.1%,PEG-60氢化蓖麻油0.05-0.15%,甘油辛酸酯0.01-0.05%,六脒二异氰酸酯0.01-0.1%,神经酰胺0.1-1%,余量为水,上述各组分的总和为100%。
3.根据权利要求1或2任一权利要求所述的应用,其特征在于:所述的美洲大蠊提取物的提取方法如下:选择虫体饱满的美洲大蠊成虫,烘干机内60-80℃条件下烘干;8-10倍量95%乙醇作为溶剂浸泡2-8周;乙醇回流提取3次,每次提取时间1-4h,所剩浸膏加8-10倍体积量水溶液浸泡4-8h,然后提取2次,两次提取时间分别为1-4h,合并水提溶液,减压浓缩并干燥得水提物,即美洲大蠊提取物。
4.根据权利要求1-2中任一权利要求所述的应用,其特征在于:所述的滇重楼提取物的提取方法如下:将滇重楼根茎粗粉用95%的乙醇浸泡12-48h,经减压蒸馏,得到滇重楼醇提液和残渣,滇重楼醇提液经超声提取2-4h得到提取液,残渣中加入8倍体积量的浓度为75 %的乙醇进行超声波提取1-4h,合并提取液经减压浓缩成浸膏状,即得滇重楼提取物。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述的面霜制作方法如下:
(1)按照权利要求1所述的质量百分比准备原料:
(2)将透明质酸钠、1,3-丙二醇及甘油置于乳化锅内,开启搅拌,转速35~45 r/min,然后加入总组分50%的水至乳化锅内,将卡波姆在搅拌下缓慢撒入锅中,保持搅拌,直至溶胀均匀;
(3)开启真空泵,抽真空至真空度-0.08MPa;关闭真空泵,保持真空状态开启加热,使体系升温至75-80℃;
(4)将硬脂醇、辛酸/癸酸甘油三酯、鲸蜡硬脂醇、角鲨烷、甘油三酯、聚二甲基硅氧烷和乙二胺四乙酸二钠,依次加入油相锅中,开启搅拌和加热,使油相温度升至75-80℃;
(5)保持搅拌,转速30~40r/min,开启均质,均质转速1500r/min,将溶解完全的油相真空抽入搅拌锅中参加乳化,油相需缓慢而均匀的抽入,保持均质速率,每均质3~5min,间隔2~3min后再次均质,如此反复,均质3~5次,均质完成后保温搅拌20min,将L-精氨酸溶解均匀后加入到乳化体系中搅拌均匀,乳化完成后开始降温;
(6)待温度降至45℃,将美洲大蠊提取物,滇重楼提取物,尿囊素及甘草酸二钾,通过加料口加至乳化锅内,调节pH值至5-6;
(7)充分搅拌15~20min,停止搅拌,破真空,出料。
6.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述的精华液的制备方法如下:
(1)按权利要求2所述的质量百分比准备原料;
(2)将去离子水进行灭菌并加热至80-90℃;向加热的去离子水中依次加入,丁二醇、丙二醇、甘油;均质3-5min至分散均匀,然后继续搅拌10-15min至所有成分充分溶解;
(3)降温并维持温度45-50℃,然后分别加入剩余的组分,每加入一种组分后搅拌3-5min,待其完全溶解之后再加入下一组分;所有组分溶解后就得到含美洲大蠊提取物精华液。
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Also Published As
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