CN108853369A - 天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法及应用,按重量组份计,水凝胶贴剂包括:甘油15‑45份、NP‑700 2‑6份、甘羟铝0.2‑0.6份、蒸馏水13.6‑40.7份、酒石酸0.1‑0.3份、氮酮1.5‑4.5份、丙二醇1.5‑4.5份、SDS 0.25‑0.75份、及PAMs 15.85‑47.55份。本发明的水凝胶贴剂具有较好的成型性、粘弹性、透气性、与皮肤剥离性好,对于皮肤烫伤具有较好治疗效果的同时,能防止皮肤溃烂,对创伤伤口具有良好的抗菌、消炎功效,对创面具有较好的修复作用,减缓疤痕残留问题,水凝胶贴剂的制备方法经过一次保温交联而得,操作方便,利于规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及制剂技术领域。更具体地说,本发明涉及天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法及应用。
背景技术
烫伤是由无火焰的高温液体(废水、热油、钢水)、高温固体(燃烧的金属等)或高温蒸汽所致的组织损伤,其包括高温烫伤和低温烫伤,烫伤的程度一般分为一度伤、二度伤、以及三度伤。其中,一度伤的烫伤只损伤皮肤表层,局部轻度红肿、无水泡、疼痛明显,对于其处理多采用冷水浸泡后可自行恢复;三度伤的烫伤是皮下、脂肪、肌肉、骨骼都有损伤,并呈灰或红褐色,对于其处理应立即用纱布包住创面及时送医处理;;二度伤的烫伤是真皮烫伤,局部红肿疼痛,有大小不等的水疱。目前传统临床上对于二度伤的处理有许多成熟的方法,例如,涂抹烧伤烫伤膏后包扎。但由于传统烫伤膏成型性、粘弹性问题,使用后其会残留在皮肤表面而不易清除,在清除过程中对原本脆弱的皮肤表面造成二次创伤;其次,膏体在制备过程中,根据实际需求,一般由亲水性高分子材料、保湿剂、交联剂、交联调节剂、促透剂、防腐剂、增稠剂等组份构成,通常还会加入防腐剂、抗氧剂、乳化剂等等,组分较多,过多组份的添加反而会引起伤口的炎症反应,并不利于伤口愈合;最后,存在创面愈合周期长,疤痕残留的问题。为此,制备一种具有较好成型性、粘弹性、透气性、同时对皮肤的粘附性良好,且与皮肤剥离性好的水凝胶基质是目前急需解决的问题。
用于治疗烫伤的膏体或者贴剂,除却用于制备成型的辅料基质外,还包括起药效作用的药物。天然植物抗菌液((Natural plant antimicrobial solution,PAMs)作为来源于天然植物药的外用搽剂,具有无耐受,无成瘾且少不良反应等众多优势,其对于皮肤炎症和再生修复的作用效果最具代表性,其作用机制与NF-κB信号通路以及IL-6、IL-8等细胞炎症因子的抑制密切相关。但是由于常规消毒抗菌剂酒精含量大(约50%),对于破损皮肤表面(例如烫伤)具有较大的刺激性,存在药物在创面的作用时间短、药效发挥不充分的问题。红花,有活血化瘀,散湿去肿,有助于治跌打损伤、疮疡肿痛疗效的功效;芸香草为乔木科香茅属植物,主要用于支气管炎、风湿性关节炎、肠炎等,具有消炎止痛的功效;紫草具有凉血、活血、清热、解毒的功效;刺天茄为茄科植物刺茄子的果实,具有消炎解毒、镇静止痛的功效。为此,提供制备一种对于皮肤烫伤具有较好治疗效果的同时,对创面具有较好的修复作用,减缓疤痕残留问题的水凝胶贴剂是是一种有效的解决办法。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,其水凝胶贴剂具有较好的成型性、粘弹性、透气性、同时对皮肤的粘附性良好,且与皮肤剥离性好,对于皮肤烫伤具有较好治疗效果的同时,能防止皮肤溃烂,对创伤伤口具有良好的抗菌、消炎功效,对创面具有较好的修复作用,减缓疤痕残留问题,水凝胶贴剂的制备方法,经过一次性保温交联而得,操作方便,利于规模化生产。
本发明还有一个目的是提供一种天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂在制备治疗烫伤的药物中的应用。
本发明还有一个目的是提供一种天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂在制备皮肤溃烂、抗菌消炎药物中的应用。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,按重量组份计,水凝胶贴剂包括:甘油15-45份、NP-700 2-6份、甘羟铝0.2-0.6份、蒸馏水13.6-40.7份、酒石酸0.1-0.3份、氮酮1.5-4.5份、丙二醇1.5-4.5份、SDS 0.25-0.75份、及PAMs 15.85-47.55份,制备方法包括以下步骤:
S1、将NP-700、甘羟铝在搅拌条件下分散于甘油中形成A相;
S2、将酒石酸、PAMs、氮酮、丙二醇、SDS在搅拌条件下分散于水中形成B相;
S3、然后将B相加入A相,搅拌均匀后,置于保温箱中,调节温度为45-55℃,保温18-30h后,取出室温静置1-3d,即得水凝胶贴剂。
优选的是,所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,PAMs包括质量体积比为20-40g:10-20g:20-30g:20-40g:1L的红花、芸香草、紫草、刺天茄、及乙醇。
优选的是,所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,按重量组份计,水凝胶贴剂包括:甘油30份、NP-700 4份、甘羟铝0.4份、蒸馏水31.7份、酒石酸0.2份、氮酮3份、丙二醇3份、SDS 0.5份、及PAMs 31.7份。
优选的是,所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,PAMs的制备方法具体为:
a1、将红花、芸香草、紫草、及刺天茄分别粉碎成粉,并混合均匀,得原料粉,加入乙醇没过原料粉,常温浸提2h,过滤得第一滤液和原料渣,向原料渣中再次加入乙醇至过原料渣,常温浸提3h后过滤得第二滤液和滤渣,合并第一滤液和第二滤液,得总滤液;
a2、在步骤a1的滤渣中加入乙醇没过滤渣,密封室温发酵5-9d,过滤得第一发酵液和发酵渣,向发酵渣中加入乙醇至没过发酵渣,密封室温发酵4-6d,过滤得第二发酵液,合并第一发酵液和第二发酵液,得总发酵液;
a3、将总滤液和总发酵液合并后,加入剩余乙醇,混合均匀后灭菌,即可。
优选的是,所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,PAMs还包括以下原料:预处理珍珠粉、及薄荷叶,预处理珍珠粉、及薄荷叶与乙醇的质量体积比为4-6g:6-8g:1L;
其中,预处理珍珠粉的制备方法具体为将珍珠粉置于炭化炉中,控制炭化炉内起始温度为150℃,以每小时升温30-40℃的速度升温至炭化炉内温度为200-250℃,继续反应3-5h,炭化炉内温度以每小时50-60℃的速度降至室温,即可;
薄荷叶用水蒸汽蒸馏法获得薄荷精油,向薄荷精油中加入预处理珍珠粉,静置2-3h,得精油料;
步骤a1中红花粉碎后,得红花粉,在与芸香草、紫草、及刺天茄粉碎后的粉末混合之前,将红花粉浸入柠檬水中,置于70℃的水浴环境中,浸提1h,过滤得红花水溶液和第一滤渣,将红花渣浸入40%的甲醇溶液中,置于50℃的水浴环境中,浸提2h,过滤得红花醇溶液和红花渣,将红花渣与芸香草、紫草、及刺天茄粉碎后的粉末混合均匀,得原料粉,将红花水溶液和红花醇溶液混合减压浓缩得浓缩液,向浓缩液中加入精油,静置1-1.5h,得浓缩料,其中,柠檬水由质量比为50:2的蒸馏水、柠檬酸混合组成,红花粉和柠檬水的质量体积比为1:10,红花粉和40%的甲醇的质量体积比为1:10;
步骤a3中将总滤液和总发酵液合并后,依次加入剩余乙醇、浓缩料,混合均匀后灭菌,即可
一种天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂在制备治疗烫伤的药物中的应用。
一种天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂在制备皮肤溃烂、抗菌消炎药物中的应用。
本发明至少包括以下有益效果:
第一、本发明所述的水凝胶基质与水溶性和脂溶性的药物均具有很好的相容性,且各组分之间有合理的配比,使制备的水凝胶贴剂具有良好的成型性,不会出现“冷流”现象且具有较优的粘弹性,同时,透气性、对皮肤粘附性良好,优于传统贴剂,既能紧贴伤口创面,从而使药物和皮肤接触良好,保证药物的有效传递,利于皮肤对于药物的吸收,且与皮肤剥离性好,可以反复揭贴和贴敷、不污染衣物、无残留等优点,避免药品在皮肤表面的残留造成的换药时对皮肤表面造成二次伤害的问题,其中,水凝胶基质为水凝胶贴剂中除却PAMs的其余原料制备组成;
第二、药物分子均匀分散或溶解在凝胶体系中,会与溶剂或高分子化合物产生一定的相互作用,从而达到缓释、控释的目的,相比于传统的多组分水凝胶基质(均是由亲水性高分子材料、保湿剂、交联剂、交联调节剂、促透剂、防腐剂、增稠剂等组成),本申请的水凝胶基质中没有添加任何填充剂、增稠剂、或者交联调节剂,制备基质的化学组分较少,避免传统基质由于多组分易引起伤口的炎症反应的问题;
第三、水凝胶贴剂相对于原有的PAMs,乙醇含量急剧降低,水凝胶基质有效避免了PAMs由于乙醇含量大(约50%)造成的对烫伤皮肤具有较大的刺激性的问题,且水凝胶基质载药量大,PAMs用量可以达到58.9%,特别适合中药多组分、大剂量的用药特点,且一次用药的持续时间长,避免频繁更换贴剂,且水凝胶基质由水溶性高分子材料组成,易使皮肤角质层软化,进一步促进皮肤对于药物的透皮吸收,增大用药效果;
第四、构建烫伤模型检测表示,对大鼠皮肤烫伤具有较好治疗效果的同时,能防止皮肤溃烂,对创伤伤口具有良好的抗菌、消炎功效,对创面具有较好的修复作用,减缓疤痕残留问题,且对大鼠的体重和脏器指数统计显示水凝胶贴剂无毒副作用;
第五、水凝胶贴剂在非密封条件下,室温放置21天,发现水凝胶贴剂的线性粘弹区(LVR)范围基本没有变化,虽然凝胶液体化性质增强,但固体化性质依然占主导(Tanδ=G”/G’),凝胶的交联程度没有很大改变,进一步说明凝胶贴剂的稳定性好;
第六、水凝胶贴剂经过一次保温交联而得,操作方便,利于规模化生产。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明的其中一种技术方案所述不同实验条件下水凝胶贴剂振荡压力与复合模量G*的关系图;
图2为本发明的其中一种技术方案所述不同实验条件下水凝胶贴剂扫描频率与储能模量G’的关系图;
图3为本发明的其中一种技术方案所述不同实验条件下水凝胶贴剂扫描频率与耗能模量G”的关系图;
图4为本发明的其中一种技术方案所述不同实验条件下水凝胶贴剂扫描频率与相位角正切值Tanδ的关系图;
图5为本发明的其中一种技术方案所述不同实验条件下水凝胶贴剂扫描频率与复合模量G*的关系图;
图6为本发明的其中一种技术方案所述不同时间下水凝胶贴剂振荡压力与复合模量G*的关系图;
图7为本发明的其中一种技术方案所述不同时间水凝胶贴剂扫描频率与储能模量G’的关系图;
图8为本发明的其中一种技术方案所述不同时间水凝胶贴剂扫描频率与耗能模量G”的关系图;
图9为本发明的其中一种技术方案所述不同时间水凝胶贴剂扫描频率与相位角正切值Tanδ的关系图;
图10为本发明的其中一种技术方案所述不同时间水凝胶贴剂扫描频率与复合模量G*的关系图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
<实施例1>
水凝胶贴剂包括以下重量份的原料:甘油15份、NP-700 2份、甘羟铝0.2份、蒸馏水13.6份、酒石酸0.1份、氮酮1.5份、丙二醇1.5份、SDS 0.25份、及PAMs 15.85份;
水凝胶贴剂的制备方法,包括以下步骤:
S1、将NP-700、甘羟铝在搅拌条件下分散于甘油中形成A相;
S2、将酒石酸、PAMs、氮酮、丙二醇、SDS在搅拌条件下分散于水中形成B相;
S3、然后将B相加入A相,搅拌均匀后,置于保温箱中,调节温度为45℃,保温30h后,取出室温静置1d,即得水凝胶贴剂;
其中,PAMs包括质量体积比为20g:10g:20g:20g:1L的红花、芸香草、紫草、刺天茄、及乙醇;
PAMs的制备方法具体为:
a1、将红花、芸香草、紫草、及刺天茄分别粉碎成粉,并混合均匀,得原料粉,加入乙醇没过原料粉,常温浸提2h,过滤得第一滤液和原料渣,向原料渣中再次加入乙醇至过原料渣,常温浸提3h后过滤得第二滤液和滤渣,合并第一滤液和第二滤液,得总滤液;
a2、在步骤a1的滤渣中加入乙醇没过滤渣,密封室温发酵5d,过滤得第一发酵液和发酵渣,向发酵渣加入乙醇至没过发酵渣,密封室温发酵6d,过滤得第二发酵液,合并第一发酵液和第二发酵液,得总发酵液;
a3、将总滤液和总发酵液合并后,加入剩余乙醇,混合均匀后灭菌,即可。
<实施例2>
水凝胶贴剂包括以下重量份的原料:甘油30份、NP-700 4份、甘羟铝0.4份、蒸馏水27.2份、酒石酸0.2份、氮酮3份、丙二醇3份、SDS 0.5份、及PAMs 31.7份;
水凝胶贴剂的制备方法,包括以下步骤:
S1、将NP-700、甘羟铝在搅拌条件下分散于甘油中形成A相;
S2、将酒石酸、PAMs、氮酮、丙二醇、SDS在搅拌条件下分散于水中形成B相;
S3、然后将B相加入A相,搅拌均匀后,置于保温箱中,调节温度为50℃,保温24h后,取出室温静置2d,即得水凝胶贴剂;
其中,PAMs包括质量体积比为30g:15g:25g:30g:1L的红花、芸香草、紫草、刺天茄、及乙醇;
PAMs的制备方法具体为:
a1、将红花、芸香草、紫草、及刺天茄分别粉碎成粉,并混合均匀,得原料粉,加入乙醇没过原料粉,常温浸提2h,过滤得第一滤液和原料渣,向原料渣中再次加入乙醇至过原料渣,常温浸提3h后过滤得第二滤液和滤渣,合并第一滤液和第二滤液,得总滤液;
a2、在步骤a1的滤渣中加入乙醇没过滤渣,密封室温发酵7d,过滤得第一发酵液和发酵渣,向发酵渣加入乙醇至没过发酵渣,密封室温发酵5d,过滤得第二发酵液,合并第一发酵液和第二发酵液,得总发酵液;
a3、将总滤液和总发酵液合并后,加入剩余乙醇,混合均匀后灭菌,即可。
<实施例3>
水凝胶贴剂包括以下重量份的原料:甘油45份、NP-700 6份、甘羟铝0.6份、蒸馏水40.7份、酒石酸0.3份、氮酮4.5份、丙二醇4.5份、SDS 0.75份、及PAMs 47.55份;
水凝胶贴剂的制备方法,包括以下步骤:
S1、将NP-700、甘羟铝在搅拌条件下分散于甘油中形成A相;
S2、将酒石酸、PAMs、氮酮、丙二醇、SDS在搅拌条件下分散于水中形成B相;
S3、然后将B相加入A相,搅拌均匀后,置于保温箱中,调节温度为55℃,保温18h后,取出室温静置3d,即得水凝胶贴剂;
其中,PAMs包括质量体积比为40g:20g:30g:40g:1L的红花、芸香草、紫草、刺天茄、及乙醇;
PAMs的制备方法具体为:
a1、将红花、芸香草、紫草、及刺天茄分别粉碎成粉,并混合均匀,得原料粉,加入乙醇没过原料粉,常温浸提2h,过滤得第一滤液和原料渣,向原料渣中再次加入乙醇至过原料渣,常温浸提3h后过滤得第二滤液和滤渣,合并第一滤液和第二滤液,得总滤液;
a2、在步骤a1的滤渣中加入乙醇没过滤渣,密封室温发酵9d,过滤得第一发酵液和发酵渣,向发酵渣加入乙醇至没过发酵渣,密封室温发酵4d,过滤得第二发酵液,合并第一发酵液和第二发酵液,得总发酵液;
a3、将总滤液和总发酵液合并后,加入剩余乙醇,混合均匀后灭菌,即可。
<实施例4>
水凝胶贴剂包括以下重量份的原料:甘油30份、NP-700 4份、甘羟铝0.4份、蒸馏水27.2份、酒石酸0.2份、氮酮3份、丙二醇3份、SDS 0.5份、及PAMs 31.7份;
水凝胶贴剂的制备方法,包括以下步骤:
S1、将NP-700、甘羟铝在搅拌条件下分散于甘油中形成A相;
S2、将酒石酸、PAMs、氮酮、丙二醇、SDS在搅拌条件下分散于水中形成B相;
S3、然后将B相加入A相,搅拌均匀后,置于保温箱中,调节温度为50℃,保温24h后,取出室温静置2d,即得水凝胶贴剂;
其中,PAMs包括质量体积比为30g:15g:25g:30g:5g:7g:1L的红花、芸香草、紫草、刺天茄、预处理珍珠粉、薄荷叶、及乙醇;
预处理珍珠粉的制备方法具体为将珍珠粉置于炭化炉中,控制炭化炉内起始温度为150℃,以每小时升温30-40℃范围内的速度升温至炭化炉内温度为250℃,继续反应3h,炭化炉内温度以每小时50-60℃范围内的速度降至室温,即可;
薄荷叶用水蒸汽蒸馏法获得薄荷精油,向薄荷精油中加入预处理珍珠粉,静置3h,得精油料;
PAMs的制备方法具体为:
a1、红花粉碎后,得红花粉,在与芸香草、紫草、及刺天茄粉碎后的粉末混合之前,将红花粉浸入柠檬水中,置于70℃的水浴环境中,浸提1h,过滤得红花水溶液和第一滤渣,将红花渣浸入40%的甲醇溶液中,置于50℃的水浴环境中,浸提2h,过滤得红花醇溶液和红花渣,将红花渣与芸香草、紫草、及刺天茄粉碎后的粉末混合均匀,得原料粉,加入乙醇没过原料粉,室温浸提2h,过滤得第一滤液和原料渣,向原料渣中再次加入乙醇没过原料渣,室温浸提3h后过滤得第二滤液和滤渣,合并第一滤液和第二滤液,得总滤液,将红花水溶液和红花醇溶液混合减压浓缩得浓缩液,向浓缩液中加入精油,静置1.5h,得浓缩料,其中,柠檬水由质量比为50:2的蒸馏水、柠檬酸混合组成,红花粉和柠檬水的质量体积比为1:10,红花粉和40%的甲醇的质量体积比为1:10;
a2、在步骤a1的滤渣中加入乙醇没过滤渣,密封室温发酵7d,过滤得第一发酵液和发酵渣,向发酵渣加入乙醇至没过发酵渣,密封室温发酵5d,过滤得第二发酵液,合并第一发酵液和第二发酵液,得总发酵液;
a3、将总滤液和总发酵液合并后,依次加入剩余乙醇、浓缩料,混合均匀后灭菌,即可。
<对比例1>
水凝胶贴剂的制备方法中步骤S1和S2桶实施例2,其中,不同的是,S3、然后将B相加入A相,搅拌均匀后,置于保温箱中,调节温度为50℃,保温6h后,取出室温静置3d,即得水凝胶贴剂。
<对比例2>
水凝胶贴剂的制备方法中步骤S1和S2桶实施例2,其中,不同的是,S3、然后将B相加入A相,搅拌均匀后,置于保温箱中,调节温度为25℃,保温24h后,取出室温静置3d,即得水凝胶贴剂。
<对比例3>
国药准字为Z20000004的美宝湿润烧伤膏,简称美宝。
<对比例4>
PAMs,其制备方法同实施例2中的PAMs的制备方法相同。
<对比例5>
75%乙醇。
<检测实验>
1、表观发现实施例1-4、及对比例1-2的水凝胶贴剂均可成型,且实施例1-4得水凝胶贴剂的成型效果明显优于对比例1-2。
2、流变学性能的检测:
采用高级旋转流变仪,在室温下对实施例2、及对比例1-2的水凝胶贴剂进行流变学性能的检测,其中,采用的平板夹具直径为20mm,间距设定1000μm,在流变仪动态振荡模式下进行实验,将剪切应力设在0-500Pa,频率设为1Hz,检测实施例2、及对比例1-2的水凝胶贴剂样品的线性粘弹区(LVR:施加应力能产生成比例应变),具体如图1所示,可知实施例2的LVR为1-500Pa,对比例1的LVR为1-188Pa,对比例2的LVR为1-144Pa,即实施例2样品的线性粘弹区范围是最大的,说明它在应力范围下体系结构最不容易被破坏,断裂,也更稳定。
在线性粘弹区(LVR)区域内,选取σ=50Pa的固定剪切应力,频率范围设在0.016-16Hz,进行扫描,测定实施例2及对比例1-2的水凝胶贴剂的流变学参数G*(复合模量)、G’(储能模量)、G”(耗能模量)及Tanδ(相位角正切值),其中,由图2、图3可以看出,对于实施例2及对比例1-2的水凝胶贴剂样品而言,随着频率的升高,凝胶的储能模量和耗能模量都是上升的,且实施例2>对比例1>对比例2,即实施例2的样品拥有更大的内聚力和皮肤粘附性;由图4可知,在0.016-11Hz频率范围内相位角对比例2>对比例1>实施例2,11-16Hz内对比例2>实施例2>对比例1,即对比例2的粘性特性占比最大,凝胶液体化性质最突出,在常规使用频率范围(0.016-11Hz)内,实施例2的弹性特性占比最大,凝胶固体化性质最突出;由图5可知,在整个选取的频率范围内,复合模量测试,实施例2>对比例1>对比例2,即实施例2的样品交联程度最大。
结论:综合线性粘弹区(LVR)、G*(复合模量)、G’(储能模量)、G”(耗能模量)及Tanδ(相位角正切值)可知,实施例2制得的水凝胶样品在内聚力、皮肤粘附性、弹性特性等方面均具有较优的性能。
3、水凝胶贴剂稳定性检测
将实施例1-3制备的水凝胶贴剂室温放置21天,分别检测其第1天和第21天的线性粘弹区(LVR),发现实施例1-3制备的水凝胶贴剂在第21天时的线性粘弹区(LVR)相对于其第1天检测的线性粘弹区(LVR)范围基本没有变化,即承受压力范围的能力没有改变,放置21天后,虽然凝胶液体化性质增强,但固体化性质依然占主导(Tanδ=G”/G’),且放置21天后,凝胶的交联程度没有很大改变,尤其当频率增大时,它们之间的复合模量差距减小,16Hz时,交联程度一样,说明水凝胶贴剂的稳定性良好,其中轻微的变化主要由于室温放置时没有密封,吸收了空气中的水分,但是这也反而进一步说明本发明的水凝胶贴剂为保持自身湿润性和弹性,具有一定的吸水能力,但是,吸水能力较小,其并不影响凝胶本身的特性,其中,实施例2样品第1天和第21天不同时间下水凝胶贴剂振荡压力与复合模量G*的关系如图6所示;实施例2样品第1天和第21天不同时间水凝胶贴剂扫描频率与储能模量G’的关系如图7所示;实施例2样品第1天和第21天不同时间水凝胶贴剂扫描频率与耗能模量G”的关系如图8所示;实施例2样品第1天和第21天不同时间水凝胶贴剂扫描频率与相位角正切值的关系如图9所示;实施例2样品第1天和第21天不同时间水凝胶贴剂扫描频率与复合模量G*关系的关系如图10所示。
4、构建烫伤模型:
将27只Wistar大鼠(260-280g)饲养1周后,称体重,腹腔注射7%水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉,用带有刻度的两端无堵头离心管注入沸水,持续接触大鼠背部脱毛的皮肤20s,烫伤面积为5.72cm2,每只大鼠后背处烫一个伤口。将大鼠按表1进行分组,分别用实施例2、实施例4、对比例3-5制得的样品,对对应的大鼠伤口进行给药处理,每日一次,给药16次后,停止给药;其中,实施例2、实施例4、及对比例3中的样品每次给药帖剂的重量为2.27g,敷16h(两次给药间隔8h),每次滴加PAMs量等同实施例2中对应贴剂含有的PAMs量,对比例575%乙醇每次滴加量等同PAMs的量,空白组不做任何处理。且对空白组(K)大鼠皮肤病理观察可知,烫伤模型的表皮缺失、毛囊及皮脂腺全部未见,大片皮下组织溶解、脱落,即该烫伤模型属于深Ⅱ度烫伤;
表1大鼠烫伤模型分组
表观给药后伤口愈合情况:
给药3次后(Day4),对比观察发现美宝组和PAMs组的伤口颜色加深,出血点面积扩大,颜色呈黄棕色;
给药7次后(Day8),美宝组创面稍变硬,出血点面积扩大,颜色加深,水凝胶贴剂1组局部结痂,颜色加深,水凝胶贴剂2组局部结痂且结痂趋势和范围优于水凝胶贴剂1组,PAMs组伤口边缘有结痂趋势,而75%乙醇组除了伤口稍变硬,其他无明显变化,水凝胶贴剂1组结痂时间明显早于美宝组、PAMs组、及模型对照组;
给药12次后(Day13),美宝组痂体边缘翘起,水凝胶贴剂1组局部痂体脱落,水凝胶贴剂2组局部痂体脱落且脱落趋势和范围优于水凝胶贴剂1组,PAMs组和75%乙醇组伤口没有明显变化,即水凝胶贴剂1组痂体脱落时间明显早于美宝组、PAMs组、及模型对照组;
给药15次后(Day16),美宝组痂体、及PAMs组痂体大部分脱落,水凝胶贴剂2组、及水凝胶贴剂1组痂体脱落基本完成,水凝胶贴剂2组及水凝胶贴剂1组对应伤口面积明显缩小,颜色变浅,75%乙醇组痂体边缘翘起。
5、大鼠表皮生长因子(EGF)含量检测
中药抗烧、烫伤的作用机制与促进组织生长因子分泌及释放、减轻炎症反应、调控胶原的合成及代谢、促进上皮细胞增殖、清除氧自由基等有关。创面愈合是个非常复杂的生物过程,涉及局部炎症反应、细胞增殖、结缔组织形成及伤口收缩与改建等,表皮细胞生长因子(EGF)在此过程中发挥着极其重要的作用,通过与其表面受体结合,促进表皮细胞分裂增殖,促进成纤维细胞增殖并合成胶原纤维。在创面修复前期,促进生长因子的生成或表达,发挥促进创面愈合作用,在创面修复中后期,重组人表皮生长因子(rh EGF)使EGF受体表达下降,抑制细胞活力,减轻局部组织过度增生,减少瘢痕形成。
根据KYM大鼠EGF酶联免疫检测试剂盒说明书按要求检测大鼠血清中表皮生长因子(EGF)含量,具体为:
步骤一、第7次给药后,分别取烫伤模型表1美宝组(M)、PAMs组(P)、水凝胶贴剂1组(N1)、及75%乙醇组(J)大鼠3只,用10%水合氯醛麻醉后,动脉取血(此方法取血量大且血清纯度高),取血完毕后,将血液样本室温放置30min左右,然后立即以6000r/min离心15min,取上清液为血清,用封口膜封口,4℃暂时存放用以血清中表皮生长因子(EGF)检测;
步骤二、第16次给药后,分别取烫伤模型表1美宝组(M)、水凝胶贴剂1组(N1)、PAMs组(P)75%乙醇组(J)、及空白组(K)大鼠3只,同样按照步骤一中对每组大鼠的处理方式进行处理,获得血清,保存。
其中,如果当日无法进行酶联免疫检测,则将血清置于-80℃冷冻保存,所有的实验被重复三次或三次以上,多重比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验,p<0.05,p<0.01分别代表有显著和极显著差异。
表2给药7次后(Day8)各组EGF含量
组别 | EGF(pg/ml) | EGF(pg/ml) | EGF(pg/ml) |
美宝组(M) | 40.27629 | 39.91023 | 36.45671 |
PAMs组(P) | 38.13837 | 35.413 | 36.67453 |
水凝胶贴剂1组(N1) | 46.0112 | 42.7636 | 46.76717 |
75%乙醇组(J) | 38.37237 | 41.07728 | 37.89841 |
表3给药7次后(Day8)各组EGF含量测试结果的显著性差异
表4给药16次后(Day17)各组EGF含量
组别 | EGF(pg/ml) | EGF(pg/ml) | EGF(pg/ml) |
美宝组(M) | 38.26767 | 34.94467 | 31.78219 |
水凝胶贴剂1组(N1) | 39.31495 | 39.9713 | 37.87452 |
PAMs组(P) | 34.06658 | 33.86526 | 33.62324 |
75%乙醇组(J) | 29.54254 | 30.67304 | 33.33496 |
空白组(K) | 43.26432 | 43.11283 | 42.33218 |
表5给药16次后(Day17)各组EGF含量测试结果的显著性差异
由表2-5可知,第7次给药后,水凝胶贴剂1组(N1)血清中EGF高于其他组,且有极显著性差异;第16次给药后水凝胶贴剂1组(N1)血清中EGF较第7次给药后EGF下调,给药16次后水凝胶贴剂1组(N1)与其他各组比较组比较均有明显差异(P<0.01);综合病理切片可以得出载药凝胶对创面愈合有一定的促进作用,即血清中EGF在创面修复前期,EGF高于其他组,且有显著性差异,促进生长因子的生成或表达,发挥促进创面愈合作用,在创面修复中、后期EGF减少,减轻局部组织过度增生,减少瘢痕形成。
6、大鼠的体重和脏器指数统计
脏器指数是反映药物对脏器影响,尤其是毒性的重要指标,脏器指数下降表示脏器萎缩、退行性变化等。肝脏是动物机体重要的代谢器官,若肝脏重量降低,将直接影响动物代谢能力,脾脏是动物体内主要的免疫器官,在机体的免疫过程中发挥重要作用,若脾脏重量降低可使动物免疫功能下降。
测定:给药16次后的进行大鼠表皮生长因子(EGF)含量检测的大鼠动脉取血后,将其脱臼致死,取下大鼠胸腺和脾脏,清理后称重,按如下公式计算脏器指数:脏器指数=脏器质量(mg)/大鼠体重(g),所有的实验被重复三次或三次以上,数据表示用表示,经SPSS统计分析,p<0.05,p<0.01分别代表有显著和极显著差异。
表6给药16次后大鼠的脏器指数统计
表7给药16次后大鼠的脏器指数统计
根据表6-7记载可知,水凝胶贴剂1组、PAMs组、与完全空白组间脏器指数值都没有显著性的差异,水凝胶贴剂1组、PAMs组用于治疗烫伤过程中毒副作用较小,对肝脾基本没有损伤。
通过以上实验方法制备的PAMs水凝胶贴剂具有良好粘弹性和成型性。实验证明此PAMs水凝胶贴剂对皮肤烫伤具有较好治疗效果的同时,也能防止皮肤溃烂,对创伤伤口具有良好的抗菌、消炎功效,对创面具有较好的修复作用,减缓疤痕残留问题,并且毒副作用较小。
需要说明的是:上述文件中常温即为室温;
PAMs制备过程中所用乙醇为无水乙醇。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。
Claims (7)
1.天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,其特征在于,按重量组份计,水凝胶贴剂包括:甘油15-45份、NP-700 2-6份、甘羟铝0.2-0.6份、蒸馏水13.6-40.7份、酒石酸0.1-0.3份、氮酮1.5-4.5份、丙二醇1.5-4.5份、SDS 0.25-0.75份、及PAMs 15.85-47.55份,制备方法包括以下步骤:
S1、将NP-700、甘羟铝在搅拌条件下分散于甘油中形成A相;
S2、将酒石酸、PAMs、氮酮、丙二醇、SDS在搅拌条件下分散于水中形成B相;
S3、然后将B相加入A相,搅拌均匀后,置于保温箱中,调节温度为45-55℃,保温18-30h后,取出室温静置1-3d,即得水凝胶贴剂。
2.如权利要求1所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,其特征在于,PAMs包括质量体积比为20-40g:10-20g:20-30g:20-40g:1L的红花、芸香草、紫草、刺天茄、及乙醇。
3.如权利要求2所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,其特征在于,按重量组份计,水凝胶贴剂包括:甘油30份、NP-700 4份、甘羟铝0.4份、蒸馏水31.7份、酒石酸0.2份、氮酮3份、丙二醇3份、SDS 0.5份、及PAMs 31.7份。
4.如权利要求2所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,其特征在于,PAMs的制备方法具体为:
a1、将红花、芸香草、紫草、及刺天茄分别粉碎成粉,并混合均匀,得原料粉,加入乙醇没过原料粉,常温浸提2h,过滤得第一滤液和原料渣,向原料渣中再次加入乙醇至过原料渣,常温浸提3h后过滤得第二滤液和滤渣,合并第一滤液和第二滤液,得总滤液;
a2、在步骤a1的滤渣中加入乙醇没过滤渣,密封室温发酵5-9d,过滤得第一发酵液和发酵渣,向发酵渣中加入乙醇至没过发酵渣,密封室温发酵4-6d,过滤得第二发酵液,合并第一发酵液和第二发酵液,得总发酵液;
a3、将总滤液和总发酵液合并后,加入剩余乙醇,混合均匀后灭菌,即可。
5.如权利要求1所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的制备方法,其特征在于,PAMs还包括以下原料:预处理珍珠粉、及薄荷叶,预处理珍珠粉、及薄荷叶与乙醇的质量体积比为4-6g:6-8g:1L;
其中,预处理珍珠粉的制备方法具体为将珍珠粉置于炭化炉中,控制炭化炉内起始温度为150℃,以每小时升温30-40℃的速度升温至炭化炉内温度为200-250℃,继续反应3-5h,炭化炉内温度以每小时50-60℃的速度降至室温,即可;
薄荷叶用水蒸汽蒸馏法获得薄荷精油,向薄荷精油中加入预处理珍珠粉,静置2-3h,得精油料;
步骤a1中红花粉碎后,得红花粉,在与芸香草、紫草、及刺天茄粉碎后的粉末混合之前,将红花粉浸入柠檬水中,置于70℃的水浴环境中,浸提1h,过滤得红花水溶液和第一滤渣,将红花渣浸入40%的甲醇溶液中,置于50℃的水浴环境中,浸提2h,过滤得红花醇溶液和红花渣,将红花渣与芸香草、紫草、及刺天茄粉碎后的粉末混合均匀,得原料粉,将红花水溶液和红花醇溶液混合减压浓缩得浓缩液,向浓缩液中加入精油,静置1-1.5h,得浓缩料,其中,柠檬水由质量比为50:2的蒸馏水、柠檬酸混合组成,红花粉和柠檬水的质量体积比为1:10,红花粉和40%的甲醇的质量体积比为1:10;
步骤a3中将总滤液和总发酵液合并后,依次加入剩余乙醇、浓缩料,混合均匀后灭菌,即可。
6.如权利要求1-5任一项所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的应用,其用途在于,所述水凝胶贴剂在制备治疗烫伤的药物中的应用。
7.如权利要求1-5任一项所述的天然植物抗菌液PAMs水凝胶贴剂的应用,其用途在于,所述水凝胶贴剂在制备皮肤溃烂、抗菌消炎药物中的应用。
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