CN110771889A - 一种提高免疫力的活性组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提高免疫力的活性组合物及其制备方法与应用。属于保健食品技术领域。包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖5‑15份、B‑胡萝卜素5‑15份、超氧化物歧化酶5‑10份、鲨鱼软骨粉10‑15份、金针菇菌丝体总多糖10‑20份、蚕蛹提取物5‑15份和甜味剂4‑8份,并公开了制备工艺。本发明制备工艺简单,原料易得,通过对组分的不断优化,制备的活性组合物具有良好的体外抑制癌细胞扩增效果,可提高免疫力并具有协同增效的作用。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品技术领域,更具体的说是涉及一种提高免疫力的活性组合物及其制备方法与应用。
背景技术
目前,随着生活压力的增加,癌症发明率日益增多,长期消耗性疾病造成的免疫力下降严重威胁着患者的生命,根据相关报道,很多癌症患者并非死于癌症本身,而是死于癌症引发的并发症,提高免疫力可以显著增加患者的生存周期并改善其生活质量。
具有提高免疫活性的食品众多,例如螺旋藻,在全世界范围内已被广泛用作保健品,并同时被美国和欧洲航天局推荐为长期执行太空任务人员的主要食品之一。螺旋藻被发现具有多种药理作用。如降血脂、抗氧化、抗感染、抗癌变、抗辐射、抗衰老、增强机体免疫力等。
但是,由于癌症患者生理状态相对较差,很难同时服用不同种类的保健食品,而单一组分保健品效果较低。
因此,提供一种提高免疫力的活性组合物及其制备方法,工艺简单,组分之间具有协同增效作用,是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此,本发明提供了一种提高免疫力的活性组合物及其制备方法与应用。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种提高免疫力的活性组合物,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖5-15份、B-胡萝卜素5-15份、超氧化物歧化酶5-10份、鲨鱼软骨粉10-15份、金针菇菌丝体总多糖10-20份、蚕蛹提取物5-15份和甜味剂4-8份。
优选的:包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖8-12份、B-胡萝卜素8-12份、超氧化物歧化酶6-9份、鲨鱼软骨粉12-14份、金针菇菌丝体总多糖12-18份、蚕蛹提取物5-7份和甜味剂5-7份。
优选的:包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖10份、B-胡萝卜素10份、超氧化物歧化酶9份、鲨鱼软骨粉13份、金针菇菌丝体总多糖15份、蚕蛹提取物10份和甜味剂6份。
进一步的:一种上述组合物的制备方法,包括下列步骤:
(1)将螺旋藻多糖、B-胡萝卜素、超氧化物歧化酶、鲨鱼软骨粉、金针菇菌丝体总多糖、蚕蛹提取物、甜味剂混合即得;
(2)将所述混合物制备为口服液/粉剂/胶囊。
进一步的:一种活性组合物或制备方法在保健品中的应用。
经由上述的技术方案可知,与现有技术相比,本发明公开提供了一种提高免疫力的活性组合物及其制备方法与应用,取得的技术效果为制备工艺简单,原料易得,通过对组分的不断优化,制备的活性组合物具有良好的抑癌效果,并可提高免疫力并具有协同增效的作用,既可以延长患者的生存周期,同时也可以改善其生理指标。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明实施例公开了一种提高免疫力的活性组合物及其制备方法与应用未说明的单一组分均为市售渠道采购,例如,超氧化物歧化酶采购自西安大丰收生物科技有限公司;蚕蛹提取物(蛋白粉)采购自西安冠茂生物科技有限公司;螺旋藻多糖采购自赣州华汉生物科技有限公司;鲨鱼软骨粉采购自河北鸿韬生物工程有限公司等,对其来源不做限定,在此不再一一赘述。
未说明的方法为实验室常规技术方法,如NK细胞活性检测方法、金针菇菌丝体总多糖的提取方法,其中,以金针菇菌丝体总多糖的提取方法为例,可采用下述工艺或其他总多糖提取工艺。
(1)试管菌种购自北钠生物公司BNCC336077。
(2)经常规斜面菌种的培养、一级摇瓶菌种培养方法、二级摇瓶菌种培养制得,培养基为常规基础培养基(马铃薯200~250g MgSO45g 白糖20g 维生素B1(B2)100μM KH2PO42.5g 水1000ml 琼脂20g)工艺参数:在0.15Mpa下培养基灭菌15分钟,冷却后案接种量10%接种,温度25℃,罐压为0.025MPa,通气量为1:0.5V/V/min。发酵时间50小时。
(3)金针菇菌丝体总多糖的提取:取金针菇菌丝体500g,加入5倍量水煎煮2小时2次,滤过,合并滤液,放冷静置过夜,倾出上清夜,浓缩至1000ml,加乙醇至含醇量75%,静置12-24小时,过滤,滤渣加水1000ml溶解,加乙醇至含醇量75%,静置12-24小时,滤过,滤渣减压干燥,即得金针菇菌丝体粗多糖。
(4)将粗多糖溶于1000ml水,加入氯仿200ml、正丁醇30ml,置分液漏斗中剧烈振荡15min,静置舍弃下层蛋白。反复操作至上层茚三酮反应阴性。除蛋白后在多糖溶液中加入适量树脂除色素,过滤,滤液中加乙醇至含醇量75%,静置12-24小时,滤过,滤渣减压干燥,即得金针菇菌丝体总多糖。
实施例1
一种提高免疫力的活性组合物,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖5g、B-胡萝卜素5g、超氧化物歧化酶5g、鲨鱼软骨粉10g、金针菇菌丝体总多糖10g、蚕蛹提取物5g和甜味剂(环己基氨基磺酸钠)4g。
制备方法包括下列步骤:
(1)将螺旋藻多糖、B-胡萝卜素、超氧化物歧化酶、鲨鱼软骨粉、金针菇菌丝体总多糖、蚕蛹提取物、环己基氨基磺酸钠混合即得。
(2)将所述混合物按料液比1∶3加入葡萄糖溶液摇匀得口服液。
实施例2
一种提高免疫力的活性组合物,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖15g、B-胡萝卜素15g、超氧化物歧化酶10g、鲨鱼软骨粉15g、金针菇菌丝体总多糖20g、蚕蛹提取物15g和环己基氨基磺酸钠8g。
制备方法同实施例1。
实施例3
一种提高免疫力的活性组合物,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖8g、B-胡萝卜素8g、超氧化物歧化酶6g、鲨鱼软骨粉12g、金针菇菌丝体总多糖12g、蚕蛹提取物5g和甜味剂(柠檬酸钠)5g。
制备方法同实施例1
实施例4
一种提高免疫力的活性组合物,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖12g、B-胡萝卜素12g、超氧化物歧化酶9g、鲨鱼软骨粉14g、金针菇菌丝体总多糖18g、蚕蛹提取物7g和柠檬酸钠7g。
制备方法同实施例1。
实施例5
一种提高免疫力的活性组合物,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖10g、B-胡萝卜素10g、超氧化物歧化酶9g、鲨鱼软骨粉13g、金针菇菌丝体总多糖15g、蚕蛹提取物10g和柠檬酸钠6g。
制备方法同实施例1。
体外抑癌效果实验
以犬乳腺肿瘤细胞株,CMT-1作为试验对象。将CMT-1细胞以每孔3,000-4,000颗细胞的密度接种于96孔平底细胞培养盘中,并以含有5-10%胎牛血清与1%抗菌抗霉液的DMEM细胞培养液培养,于38℃、5%CO2培养箱中培养16小时,将原有的细胞培养液换成含有0.5%胎牛血清与1%抗菌抗霉液的DMEM细胞培养液(2ml/孔),分别加入由实施例1-5制备的口服液。并于培养的第三天,将一半的原有培养液换成含有活性组合物的新培养液,并继续置于培养箱中培养。
以WST1试剂(罗氏)检测第一、三及六天细胞存活率,方法为加入细胞培养液十分之一体积量的WST1试剂后,于培养箱中静置4小时,再以酵素免疫分析读测仪(ELISAreader)读取波长450nm的吸光值(OD450),以未加入细胞的空白培养基及WST1试剂混合液作为空白对照组,以未加活性组合物处理的细胞作为负对照组,每组三重复,并以下列公式计算对肿瘤细胞存活率的影响:细胞存活率(%)=[(试验组细胞OD450-空白对照组OD450)/(负对照组细胞OD450-空白对照组OD450)]×100%。
结果表明实施例1-5制备的活性组合物皆会抑制犬乳腺肿瘤细胞株CMT-1细胞的生长,其中,实施例5的抑制效果最好,而且处理时间越久抑制效果也越好。具体见表1:
表1
时间 | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 实施例5 |
1d | 100% | 100% | 100% | 100% | 100% |
3d | 71% | 68% | 63% | 62% | 55% |
5d | 53% | 47% | 51% | 43% | 37% |
对比试验1
与实施例5的区别在于不含有螺旋藻多糖。
对比实验2
与实施例5的区别在于不含有鲨鱼软骨粉。
对比实验3
与实施例5的区别在于不含有金针菇菌丝体总多糖。
对比实验4
与实施例5的区别在于不含有超氧化物歧化酶。
对比实验5
与实施例5的区别在于不含有蚕蛹活性肽。
对比实验6
与实施例5的区别在于成分仅有螺旋藻1种。
对比实验7
与实施例5的区别在于成分仅有鲨鱼软骨粉1种。
实验方法同上。
体外抑癌效果数据见下表2:
表2
结果表明,组分删减后,体外抑癌效果相对下降,单一组分抑癌效果较差。
患者使用效果实验
某医院,选取肺癌III期患者,筛选基本病况(生理生化指标、B超肿瘤大小、患者配合度与精神状态)和用药接近的10名志愿者(停止服用除必须药物外的其他保健食品)免费赠送实施例5制备的免疫活性组合物,与不服用活性组合物的同期病况接近的患者做对照。
经30d连续服用后,患者B超结果显示,服用活性组合物的患者,肿瘤发展不同程度抑制,此外,经测定,服用活性组合物的患者NK细胞活性相对提高15-27%。持续服用3-6个月,随访观察,并发症及感染相对降低20-35%。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述,每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处,各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。
对所公开的实施例的上述说明,使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
Claims (5)
1.一种提高免疫力的活性组合物,其特征在于,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖5-15份、B-胡萝卜素5-15份、超氧化物歧化酶5-10份、鲨鱼软骨粉10-15份、金针菇菌丝体总多糖10-20份、蚕蛹提取物5-15份和甜味剂4-8份。
2.根据权利要求1所述的一种提高免疫力的活性组合物,其特征在于,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖8-12份、B-胡萝卜素8-12份、超氧化物歧化酶6-9份、鲨鱼软骨粉12-14份、金针菇菌丝体总多糖12-18份、蚕蛹提取物5-7份和甜味剂5-7份。
3.根据权利要求2所述的一种提高免疫力的活性组合物,其特征在于,包括以下重量份的原料:螺旋藻多糖10份、B-胡萝卜素10份、超氧化物歧化酶9份、鲨鱼软骨粉13份、金针菇菌丝体总多糖15份、蚕蛹提取物10份和甜味剂6份。
4.一种如权利要求1-3任一所述的组合物的制备方法,其特征在于,包括下列步骤:
(1)将螺旋藻多糖、B-胡萝卜素、超氧化物歧化酶、鲨鱼软骨粉、金针菇菌丝体总多糖、蚕蛹提取物、甜味剂混合即得;
(2)将所述混合物制备为口服液/粉剂/胶囊。
5.一种如权利要求1-3任一所述的活性组合物或权利要求4所述制备方法在制备保健品中的应用。
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