CN110755637B - 谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒及其构建 - Google Patents

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Abstract

本发明属于药物制剂新辅料和新剂型领域，涉及谷胱甘肽抑制剂‑光敏剂共组装纳米粒的构建。其中，谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为：5:1～1:5，并通过如下方法制备：将一定量的谷胱甘肽抑制剂与光敏剂或谷胱甘肽抑制剂、光敏剂与PEG的混合物溶解到适量的有机溶剂中，在搅拌条件下，将该溶液缓慢滴加到去离子水中，自发形成均匀的纳米粒。该纳米药物传递系统中，纳米粒子粒径小而均一，有利于纳米粒通过渗透与滞留增强(EPR)效应富集于肿瘤部位；具有超高的载药量，有利于减小辅料相关的不良反应和毒性，氯吡格雷作为一种新型的谷胱甘肽抑制剂能够增强ROS水平，与光敏剂产生协同的抗肿瘤效果。

Description

谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒及其构建
技术领域
本发明属于药物制剂新辅料和新剂型领域，涉及谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒的构建，具体涉及一种氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的构建及其在药物递送系统中的应用。
背景技术
癌症已经成为严重威胁人类生命健康的疾病，据世界卫生组织(WHO)统计，全球每年有超过800万人死于癌症。近年来，光动力学治疗已经广泛应于癌症的治疗，其机制是光敏剂吸收一定波长的光能而跃迁至激发态，处于激发态的光敏剂在回落到基态时，与周围的各种分子发生反应，将能量传递到周围的O2分子产生细胞毒性的活性氧(radicaloxygen species,ROS)诱导肿瘤细胞坏死和凋亡，达到局部治疗肿瘤的目的。与传统的化疗、放疗、手术等治疗方法相比，光动力学疗法能特异性地杀伤肿瘤细胞，具有系统毒性小，非侵入性，毒副作用少等优点。然而，肿瘤部位高表达的谷胱甘肽会消耗光敏剂所产生的活性氧，这很大程度上限制了光动力学的临床应用。因此，谷胱甘肽抑制剂与光敏剂联合使用能降低肿瘤细胞内的谷胱甘肽水平从而提高ROS水平，增强光动学的治疗效果，实现高效协同的抗肿瘤作用。
随着纳米药物的快速发展，许多载体材料可实现光敏剂的包载和递送，但是应用载体对药物进行包载存在载药量低、稳定性差、光敏剂等物质易在载体中形成结晶、泄漏和辅料相关的毒副作用等问题。因此，亟需构建更高效的新型药物递送系统用于光敏剂的递送。在共组装纳米粒中，不需加入载体材料，药物分子之间可以通过非共价作用形成组装的纳米体系。谷胱甘肽抑制剂和光敏剂自身作为纳米结构的主体具有较高的载药量。且共组装纳米粒易于进行表面修饰，有效的靶向肿瘤部位，且能够通过渗透与滞留增强(EPR)效应在肿瘤组织蓄积；且制备工艺简单，易放大，具有很好的临床转化应用前景。
发明内容
针对现有技术的上述缺陷，本发明拟设计并构建谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒。氯吡格雷是临床上常用的抗血栓药，受其作用机制的启发，我们发现氯吡格雷在细胞色素P450(CYP2C19)作用下产生的活性代谢产物能与谷胱甘肽结合，且能够降低细胞内谷胱甘肽含量，因此氯吡格雷可作为一种新型的谷胱甘肽抑制剂。因此，本发明构建了谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒，具体构建了氯比格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒，通过非共价结合的方式实现氯吡格雷与光敏剂焦脱镁叶绿素a高效共载和共同递送。本发明中的共组装纳米递药系统能通过谷胱甘肽抑制剂联合光动力治疗，发挥高效的协同抗肿瘤作用。共组装纳米递药系统无需使用纳米载体，避免了与辅料有关的毒性问题，且具有较高的载药量。本发明将为谷胱甘肽抑制剂联合光动力治疗提供一种新型、安全、有效的药物传递策略。
本发明通过以下技术方案实现上述目的：
本发明所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒，是抗谷胱甘肽抑制剂和光敏剂通过π-π堆积、疏水作用等非共价作用力形成的共载纳米粒。
所述的谷胱甘肽抑制剂为抗血栓药物氯吡格雷；光敏剂为卟啉类光敏剂，选自二氢卟吩e6、叶绿素衍生物或血卟啉单甲醚。
其中，谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为：5:1～1:5，优选为2:1的摩尔比。谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为5:1～1:5时，均可以形成共组装纳米粒，其粒径小于300nm。而在2:1-1:5范围内，其粒径小于150nm，且粒径分布更均匀。
本发明所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒通过如下方法制备：
将一定量的谷胱甘肽抑制剂与光敏剂或谷胱甘肽抑制剂、光敏剂与PEG的混合物溶解到适量的有机溶剂中，在搅拌条件下，将该溶液缓慢滴加到去离子水中，自发形成均匀的纳米粒。
所述的有机溶剂为乙醇、甲醇、四氢呋喃或任意两种的组合溶剂；
进一步地，本发明优选的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒为氯吡格雷- 焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒，所述的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒可以为氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒或PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒。
所述的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒，是氯吡格雷与焦脱镁叶绿素a通过π-π堆积、疏水作用等非共价作用力形成的纳米组装体。
其中，氯吡格雷与焦脱镁叶绿素a的摩尔比为：5:1～1:5。
所述的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的制备方法如下：
(1)氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的制备方法：将一定量的氯吡格雷与焦脱镁叶绿素a溶解到适量有机溶剂乙醇、甲醇、四氢呋喃或者以上两种的混合溶剂中，优选溶剂为甲醇和四氢呋喃混合溶剂(甲醇与四氢呋喃的比例为 80:20～50:50)，其中氯吡格雷浓度范围为2mg/mL～4mg/mL，焦脱镁叶绿素a 浓度范围为2mg/mL～4mg/mL，在搅拌下，将该溶液缓缓滴加到去离子水中，自发形成均匀的纳米粒。
(2)PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的制备方法：将一定量的氯吡格雷、焦脱镁叶绿素a与PEG修饰剂溶解到适量的甲醇和四氢呋喃混合溶剂(甲醇与四氢呋喃的比例为80:20～50:50)中(氯吡格雷浓度范围为2 mg/mL～4mg/mL，焦脱镁叶绿素a浓度范围为2mg/mL～4mg/mL)在搅拌下，将该混合溶液缓慢滴加到去离子水中，自发形成均匀的纳米粒。其中，焦脱镁叶绿素a与PEG修饰剂的比例为90:10～80:20，优选比例为90:10；上述的PEG修饰剂为DSPE-PEG、TPGS、PLGA-PEG和PE-PEG等，优选的PEG修饰剂为 DSPE-PEG。所述PEG的分子量为1000、2000和5000，优选的PEG分子量为 2000。
本发明的氯吡格雷与焦脱镁叶绿素a首次被发现可以共同自组装形成均匀的纳米体系。该纳米药物传递系统的优势在于：(1)采用一步纳米沉淀的方法，制备工艺简单，易于放大生产；(2)纳米粒子粒径小而均一(～140nm)，有利于纳米粒通过渗透与滞留增强(EPR)效应富集于肿瘤部位；(3)更易于表面修饰，可通过PEG修饰以延长纳米粒在血液中的循环时间；(4)超高的载药量，有利于减小辅料相关的不良反应和毒性。(5)氯吡格雷作为一种新型的谷胱甘肽抑制剂能够增强ROS水平，与光敏剂产生协同的抗肿瘤效果。
附图说明
图1为本发明实施例2的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的粒径分布图。
图2为本发明实施例2的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的透射电子显微镜图。
图3为本发明实施例3的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的FBS中的粒径-时间图。
图4为本发明实施例4的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的紫外吸收光谱图。
图5为本发明实施例5的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的体外释放实验图。
图6为本发明实施例6的4T1、RM-1、HepG2和L02细胞CYP2C19酶浓度和活性图。
图7为本发明实施例7的不同浓度氯吡格雷孵育后的4T1、RM-1、HepG2 和L02细胞中谷胱甘肽含量测定。
图8为本发明实施例7的氯吡格雷在4T1细胞中其活性代谢产物与谷胱甘肽结合产物的质谱图。
图9为本发明实施例8的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒体外细胞毒性图。
图10为本发明实施例8的氯吡格雷溶液体外细胞毒性图。
图11为本发明实施例9的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒体外产生活性氧的检测结果图。
图12为本发明实施例10的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的体内组织分布图。
图13为本发明实施例10的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的在体肿瘤体积变化图。
图14本发明实施例10的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的在体抗肿瘤实验中小鼠体重变化图。
具体实施方式
通过以下具体实例，对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但并不表示实施例对本发明的限制。
实施例1：非PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的制备
将一定量的氯吡格雷(CPG)和焦脱镁叶绿素a(PPa)溶解于混合溶剂(甲醇/ 四氢呋喃＝50/50，v/v)中，配制成2mg/mL的CPG储备液和2mg/mL的PPa储备液。
谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为5:1时，在搅拌速度900rpm条件下，将混合溶液(600μL CPG溶液和200μL PPa溶液)滴加到2mL去离子水中。在37℃的条件下旋转蒸发除去有机溶剂，得到共组装纳米粒。
谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为2:1，在搅拌速度900rpm条件下，将混合溶液(240μL CPG溶液和200μL PPa溶液)滴加到2mL去离子水中。37℃的条件下旋转蒸发除去有机溶剂，即得到共组装纳米粒。
谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为1:1时，在搅拌速度900rpm条件下，将混合溶液(120μL CPG溶液和200μL PPa溶液)滴加到2mL去离子水中。在 37℃的条件下旋转蒸发除去有机溶剂，即得到共组装纳米粒。
谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为1:2时，在搅拌速度900rpm条件下，将混合溶液(60μL MTX溶液和150μL PPa溶液)滴加到2mL去离子水中。在 37℃的条件下旋转蒸发除去有机溶剂，即得到共组装纳米粒。
谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为1:5时，在搅拌速度900rpm条件下，将混合溶液(24μL MTX溶液和200μL PPa溶液)滴加到2mL去离子水中。在 37℃的条件下旋转蒸发除去有机溶剂，得到共组装纳米粒。
接下来我们通过计算不同摩尔比例纳米粒在4T1细胞中的协同指数，研究了 5:1、2:1、1:1、1:2和1:5对4T1细胞的细胞毒性。其中，细胞氯吡格雷：焦脱镁叶绿酸a为5:1和2:1的纳米粒在4T1细胞中的联合指数分别为0.86和 0.57(联合指数＜1，协同作用；联合指数＞1，拮抗作用)，表明这两种比例的纳米粒具有很强的协同作用，因此，本发明优选氯吡格雷与焦脱镁叶绿酸a摩尔比为5:1-2:1。根据以上因素，选用摩尔比为2:1的纳米粒进行进一步的研究。
所有比例均形成纳米粒，其粒径、多分散指数以及协同指数(半抑制率)如表1。
表1谷胱甘肽抑制剂和光敏剂的处方优化
Figure BDA0002216499100000061
结果表明：谷胱甘肽抑制剂与光敏剂的摩尔比为：5:1～1:5，均可以形成共组装纳米粒，在5:1-2:1条件下不仅粒径小，粒径分布均匀且有很强的细胞毒协同作用。
实施例2：PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的制备。
将DSPE-PEG2K(10wt％)与CPG(2mg)溶解于1mL乙醇溶液中，PPa(2mg) 溶于1mL乙醇与四氢呋喃的混合溶液中(乙醇/四氢呋喃＝50/50，v/v)。当谷胱甘肽抑制剂和光敏剂的摩尔比为2:1时，在搅拌速度条件下(900rpm)，将按比例混合好的混合溶液缓慢滴加到到2mL去离子水中。在37℃的条件下旋转蒸发除去有机溶剂，即得到PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒(简称为CPG/PPa NPs)。且PPa的载药量为32.6％，实现光敏剂的高效载药。
使用动态光散射法测定PEG修饰的氯吡格雷与焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的粒径，粒径分布如图1。并使用透射电子显微镜观测实施例2中制备的PEG 修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a纳米粒的粒径和形态，如图2所示，透射电镜图表明共组装纳米粒为均一的球形，且粒径在140nm左右。
实施例3：PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的胶体稳定性
将实例2中制备的PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒在 37℃的条件下在含有10％FBS的pH 7.4的PBS中孵育12h，并且在预先设定的时间点(0，2，4，6，8，10，12h)利用动态光散射法测定其粒径变化。结果如图3所示，共组装纳米粒的粒径在12小时无明显变化，表明纳米粒具有良好的胶体稳定性。
实施例4：PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的紫外吸收光谱
CPG的DMSO溶液、PPa的DMSO溶液、实施例2中制备的PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒、0.2％SDS(w/v，十二烷基硫酸钠)溶液，与加入纳米粒的0.2％SDS溶液3mL，分别加到比色皿中，使用紫外分光光度计在250-800nm波长范围内分别扫描上述溶液的紫外吸收光谱。如图4所示，与 PPa溶液相比，纳米粒的吸收峰出现明显红移且峰变宽，并且在0.2％SDS介质中，纳米粒的吸收强度下降且峰左移变宽。说明π-π堆积和疏水作用共同驱动共组装纳米粒的形成。
实施例5：PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的体外释放实验使用透析法评价纳米粒的体外释放行为。将1mL实施例2制备的纳米粒密封于透析袋中，并浸入30mL释放介质(PBS pH6.5或7.4)中。由于光动力作用，焦脱镁叶绿酸a在光照条件下会被破坏。因此使用高效液相色谱法(HPLC) 在220nm的波长下测定氯吡格雷的累积释放量。如图5所示，PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒在pH 6.5的酸性介质中释放约30％，而在pH 7.4的条件下释放为20％，表明纳米粒具有明显的pH敏感释放特性。
实施例6：4T1、RM-1、HepG2和L02细胞中CYP2C19浓度和活性研究
受氯吡格雷代谢机制的启发，对鼠源乳腺癌细胞(4T1)、鼠源前列腺癌细胞 (RM-1)、人源肝癌细胞(HepG2)和人正常肝细胞(L02)中CYP2C19浓度和活性进行了研究。4T1、RM-1、HepG2和L02细胞以1×105细胞/孔的细胞密度分别接种到12孔板，孵育12h后使其贴壁。然后上述细胞用PBS洗三次，用500μL 胰酶消化，3000rpm离心5min，加入适量PBS吹散。然后用液氮反复冻融三次，用CYP2C19浓度和活性检测试剂盒测定上述4种细胞CYP2C19酶浓度和活性。如图6所示，4种细胞酶浓度和活性顺序依次为L02>HepG2>4T1>RM-1。
实施例7：不同浓度氯吡格雷孵育4T1、RM-1、HepG2和L02细胞后的谷胱甘肽含量研究
4T1、RM-1、HepG2和L02细胞以3×105细胞/孔的细胞密度分别接种到12 孔板，孵育12h后使其贴壁。然后用不同浓度的氯吡格雷孵育48h，未用氯吡格雷孵的细胞为对照。48h后，细胞用PBS洗三次，用500μL胰酶消化，3000rpm 离心5min，加入适量PBS吹散。然后用液氮反复冻融三次，谷胱甘肽含量测定试剂盒测定上述细胞的谷胱甘肽含量。如图7所示，氯吡格雷能明显降低4T1、 HepG2和L02细胞谷胱甘肽含量，但并没有明显降低RM-1细胞谷胱甘肽含量，这主要归因于RM-1细胞中CYP2C19酶含量和活性较其它三种细胞低。
为了进一步确定氯吡格雷活性代谢产物能与细胞内的谷胱甘肽结合，我们采用高分辨质谱研究了氯吡咯雷(2mg/mL)孵育4T1细胞后的分子量。质谱图结果如图8所示，氯吡格雷活性代谢产物与细胞内的谷胱甘肽形成结合物 (CPG-SS-GSH)的分子量为633.53568[M+H]+。因此质谱图可以证明 CPG-SS-GSH结合物的存在。
实施例8：PEG化的氯吡咯雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的细胞毒性实验
采用MTT法测定共组装纳米粒对4T1、RM-1、HepG2三种细胞的细胞毒性。将这上述肿瘤细胞以每孔2000个细胞的密度接种到96孔板中孵育12h后使其贴壁。带细胞贴壁后，加入系列浓度的PPa溶液、CPG/PPa溶液和纳米粒，继续孵育48h。孵育结束后，每孔加入20μLMTT(5mg/mL)，在37℃条件下孵育4h。弃去培养基，每孔加入150μL DMSO溶液，用酶标仪在波长为570nm处测定其吸光度。
采用MTT法测定共组装纳米粒对4T1、RM-1、HepG2三种细胞的光动力学细胞毒性。细胞孵育12h后，加入系列浓度的PPa溶液、CPG/PPa溶液和纳米粒，并在黑暗条件下孵育4h后，用激光(660nm，30mW/cm2，2min)照射整块96孔板。进一步将细胞孵育44小时。孵育结束后，每孔加入20μL MTT(5mg/mL)，在37℃条件下孵育4h。弃去培养基，每孔加入150μL DMSO溶液，用酶标仪在波长为 570nm处测定其吸光度。
采用MTT法测定不同浓度的CPG对4T1、RM-1、HepG2和L02细胞的细胞毒性。细胞孵育12h后，加入系列浓度的CPG溶液，孵育48h。孵育结束后，每孔加入20μL MTT(5mg/mL)，在37℃条件下孵育4h。弃去培养基，每孔加入150μL DMSO溶液，用酶标仪在波长为570nm处测定其吸光度。
如图9所示，在78.125-1250ng/mL的浓度范围内，PPa溶液、CPG/PPa溶液和纳米粒对三种细胞几乎没有毒性。但在激光(660nm，30mW/cm2，2min)照射下，PPa溶液、CPG/PPa溶液和纳米粒显示了很强的光动力学细胞毒性。且与 PPa溶液相比，CPG/PPa溶液和纳米粒显示了更强的细胞毒性。这表明CPG与 PPa具有良好的协同抗肿瘤效果。
如图10所示，CPG在781.25-12500ng/mL的浓度范围内对4T1、RM-1、HepG2 和L02细胞几乎没有细胞毒性。
实施例9：PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒在体外产生活性氧的检测
采用DCFH-DA为荧光探针，检测PPa溶液与纳米粒在4T1细胞中产生ROS的量。DCFH-DA本身不产生荧光信号，但与细胞内活性氧反应时能产生有荧光的 DCF。将4T1细胞以每孔1×104的密度接种在96孔板并孵育12h使其贴壁。贴壁后，用PPa溶液或纳米粒(200ng/mL)在37℃下培养4h。4h后将培养基弃掉，加入 DCFH-DA(10ug/mL)孵育30min，孵育结束后用激光(660nm，30mW/cm2)照射 10min，未被激光照射的作为对照。
如图11所示，在无激光照射下，PPa溶液和纳米粒组具有很弱的DCF的荧光信号。但是，在激光照射条件下，PPa溶液和纳米粒组具有很强的荧光信号，且纳米粒比PPa溶液的荧光强度更强。此结果表明经激光照射后，上述两种制剂都产生更多的ROS，且纳米粒比PPa溶液产生了更多的ROS，是由于纳米粒中的CPG 能够降低GSH水平从而提高ROS水平。
实施例10：PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的组织分布实验
用荧光成像系统评价纳米粒在4T1荷瘤小鼠的组织分布。将4T1细胞(5×106细胞)接种于雌性BABL/C小鼠的右侧。当肿瘤体积达到约400mm3时，静脉注射纳米粒和PPa溶液。在注射4h和12h后，处死小鼠，用无创体内成像系统分析心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏和肿瘤等主要器官荧光信号强度。
如图12所示，PPa溶液在肾脏中观察到较强的荧光信号，说明其给药后被迅速清除，而纳米粒在肝脏和肿瘤组织中观察到较强的荧光信号。且随时间的延长，纳米粒在肿瘤部位有明显的蓄积。表明纳米粒在血液中的循环时间长并且通过增强渗透滞留(EPR)效应有效的蓄积在肿瘤组织。
实施例11：PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒的体内抗肿瘤效果和安全性评价
建立4T1细胞荷瘤动物模型。将4T1细胞(100μL中含5×106个细胞)皮下接种至雌性BALB/c小鼠。当肿瘤体积长至约200mm3时，将荷瘤小鼠随机分为5组(每组5只)；生理盐水、CPG溶液、PP溶液(光照)、CPG/PPa溶液(光照)、纳米粒 (光照)组。每隔一天静脉给药，共给药4次(7.2mg/kg MTX和6mg/kg PPa)，根据组织分布结果，注射12h后激光组给以激光照射(660nm，200mW/cm2，5min) 每天测量小鼠肿瘤体积和体重。
如图13所示，生理盐水组肿瘤体积迅速增加，在第11天约为1000mm3。与生理盐水组相比，CPG溶液剂组几乎没有抑制肿瘤生长，PP溶液(光照)、CPG/PPa 溶液(光照)组具能够一定程度上抑制肿瘤增长。纳米粒组显示了最好的抗肿瘤效果，其主要原因是：(1)纳米粒在体内循环时间长，在EPR作用下有高的肿瘤蓄积。(2)在激光照射下CPG与PPa协同抗肿瘤。如图14所示，各组小鼠体重均没有明显变化，结果说明这些纳米粒起到抗肿瘤作用的同时，没有对机体造成显著的非特异性毒性，是安全有效的抗肿瘤药物递送系统。

Claims (12)

1.谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒，其特征在于，谷胱甘肽抑制剂与光敏剂通过非共价力作用共组装，谷胱甘肽抑制剂与光敏剂摩尔比为5:1~1:5，所述谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒为氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒。
2.如权利要求1所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒，其特征在于，谷胱甘肽抑制剂与光敏剂通过π-π堆积和疏水作用共组装。
3.如权利要求1或2所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒，其特征在于，谷胱甘肽抑制剂与光敏剂摩尔比为5:1~2:1。
4.如权利要求1所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒，其特征在于，所述氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒，包含非PEG化的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒或PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒。
5.如权利要求1所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒的制备方法，其特征在于，
将氯吡格雷与焦脱镁叶绿素a溶解到有机溶剂中，在搅拌条件下，将该溶液缓缓滴加到去离子水中，自发形成均匀的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒；
或将PEG修饰剂、氯吡格雷与焦脱镁叶绿素a溶解到有机溶剂中，在搅拌条件下，将该混合溶液缓慢滴加到去离子水中，自发形成均匀的PEG修饰的氯吡格雷-焦脱镁叶绿素a共组装纳米粒；
所述PEG修饰剂为DSPE-PEG、TPGS、PE-PEG、或PLGA-PEG。
6.如权利要求5所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙醇，甲醇或四氢呋喃中的一种或几种有机溶剂。
7.如权利要求5所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为甲醇和四氢呋喃混合溶剂，其中，甲醇与四氢呋喃的比例为80:20～50:50。
8.如权利要求5所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒制备方法，其特征在于，所述的纳米粒为非PEG化的共组装纳米粒和PEG修饰的共组装纳米粒；所述PEG修饰剂中，PEG的分子量为1000 -5000；焦脱镁叶绿素a与PEG修饰剂的比例为90:10～80:20。
9.如权利要求8所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒制备方法，其特征在于，PEG分子量为2000-5000。
10.权利要求1-4任何一项所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒在制备药物传递系统中的应用。
11.权利要求1-4任何一项所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒在制备抗肿瘤药物中的应用。
12.权利要求1-4任何一项所述的谷胱甘肽抑制剂-光敏剂共组装纳米粒在制备注射给药、口服给药或局部给药系统中的应用。
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