CN110721289A - 仁术健胃颗粒的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明改进仁术健胃颗粒的制备方法，在原有工艺基础上，更改白术、薏苡仁、莪术的提取工艺：将原工艺中水蒸气蒸馏法提取莪术挥发油、水饱和溶液法包合莪术挥发油、白术和薏苡仁以超细粉的方式直接入药分别改进为：采用CO2超临界萃取白术和莪术挥发油，研磨法对白术、莪术挥发油包合，薏苡仁与黄芪、白花蛇舌草、半边莲一并乙醇回流提取。本发明制备方法包括：(一)预处理、(二)提取、(三)浓缩、(四)萃取物包合、(五)制粒、(六)整粒、(七)包装。基于新工艺制备得到的仁术健胃颗粒治疗慢性萎缩性胃炎及胃癌前病变效果显著优于原工艺效果。

Description

仁术健胃颗粒的制备方法
技术领域
本发明属于中药制药领域，具体涉及一种仁术健胃颗粒剂的制备工艺。仁术健胃颗粒是一种能够治疗慢性萎缩性胃炎及胃癌前病变的产品。
背景技术
胃部病变的进程是从常胃黏膜—慢性胃炎—萎缩性胃炎—肠上皮化生—不典型增生—胃癌的演变。其中慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis，CAG)是消化系统的常见病，具有发病率高、病程较长、病情复杂等特征，在胃黏膜癌前病变中占有重要地位。胃癌前期病变的本虚在于脾胃气虚，从治病求本的原则出发，当补益脾胃之气，而脾贵在运而不在补，益气应以健运脾胃为先，脾胃运化常，气血才能生化无穷，脾健则气旺，这是仁术健胃颗粒的组方依据，其以“益气活血”的治法治则，治疗“气虚血瘀”CAG临床效果良好。
仁术健胃颗粒主要用于治疗慢性萎缩性胃炎及胃癌前期病变，经我公司多年研发，该产品及其制备方法已获专利授权(CN02138103.8)。研究表明，仁术健胃颗粒有较好的抗氧化、清除自由基、抗细胞过度增殖、抑杀HP、诱导促进细胞的分化成熟等作用，是逆转胃粘膜癌前病变的有效方药。
但是原工艺中，莪术采用水蒸气蒸馏法提取莪术挥发油。水蒸气蒸馏法是将水蒸气通入不溶或难溶于水但有一定挥发性的有机物质中，使该有机物质在低于100℃的温度下，随着水蒸气一起蒸馏出来。此方法具有设备简单、操作安全、不污染环境、成本低、避免了提取过程中有机溶剂残留对油质造成影响等特点，能够有效提取中药挥发油，但存在原料易受热易焦化，或使成分发生变化，所得挥发油的芳香气味也可能变味，降低挥发油的价值等局限性。
另一方面，由于挥发油具有易挥发、水溶性差和对胃肠道黏膜的刺激特性，为了降低其挥发性、增大水溶性、提高稳定性，多将其制备成β-CD包合物。β-环糊精(β-Cyclodextrin，β-CD)是一种无臭无毒的白色结晶粉末，是由7个葡萄糖分子组成的一种特殊“内疏水，外亲水”的中空圆筒立体环状结构。这种结构非常稳定，不易受酶、pH、热等外在条件的影响，可与多种无机、有机分子结合成主客体包络物。目前广泛应用于药学领域，尤其是在中药制剂中的应用。在原工艺中，采用环糊精包合莪术挥发油，提高了挥发性莪术油的利用率和稳定性，但采用的水饱和溶液法虽然方便简捷，包合率较高，是实验室常用的包合物制备方法，工业化生产的产能会受到限制。
再者，在原工艺中，白术、薏苡仁以超细粉形式与其他清膏、包合物等直接混合制粒，虽然一方面使药物细胞破壁，提高中药药效，可以节约原药材，同时保持中药的全成分入药，利于保留生物活性成分，但是药材超细化后，比表面积增加，稳定性稍差，制剂成型存在一定困难。
本发明中采用的超临界流体萃取技术是20世纪70时年代用于提取和分离的一种技术。超临界提取的影响因素有SFE的流体比、CO2流量、压力时间、温度、粉碎粉粒度等。压力是SFE中最重要的参数。一定温度下，随着压力的增大，流体密度显著增加，溶质的溶解度增大，萃取效率提高。但过高的压力使生产成本明显提高，其萃取率增加有限。在SFE过程中，温度增加，加强了其扩散能力，使得被萃取物在超临界CO2中溶解度增加。有利于萃取。但随着温度的增加，杂质的溶解度也增加，使精制过程复杂化，从而降低产品的收率。同时温度增加，CO2流体的密度降低，使得对溶质的溶解力下降，降低产品收率。萃取时间增加，有利于超临界流体与溶质中有效成分的溶解平衡，增加萃取的时间就增加萃取得率。由于萃取一定时间后，随着溶质中有效成分的减少，再增加萃取时间，萃取得率增加缓慢，能耗增加。而且有些无效成分也更多地被萃取出来，直接影响产品的质量。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明改进仁术健胃颗粒的制备方法，在原有发明基础上，更改白术、薏苡仁、莪术的提取工艺：将原发明中水蒸气蒸馏法提取莪术挥发油、水饱和溶液法包合莪术挥发油、白术和薏苡仁以超细粉的方式直接入药分别改进为：采用CO2超临界萃取白术和莪术挥发油，研磨法对白术、莪术挥发油包合，薏苡仁与黄芪、白花蛇舌草、半边莲一并乙醇回流提取。提供一种治疗慢性萎缩性胃炎及胃癌前病变效果显著优于原工艺效果的仁术健胃颗粒的制备方法。
本发明具体技术方案如下：
本发明的第一个目的是提供一种仁术健胃颗粒的制备方法，从中药黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草中提取有效成分配制而成，其配制重量份数为：黄芪10-30份、白术5-20份、薏苡仁5-20份、黄芩5-20份、仙鹤草5-20份、莪术5-20份、半边莲5-20份、白花蛇舌草5-20份，所述黄芪用量大于莪术用量，所述制备方法包括以下步骤：
(一)预处理：按重量份数配比称取黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草；所述白花蛇舌草、半边莲、仙鹤草洗净切成1-2cm长的段；黄芪、黄芩、白术切片炒制；莪术切薄片；
(二)提取：
乙醇提取：黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁置于多功能提取罐中，加入药材(即黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁)总重量6-12倍量的60-85％乙醇，回流提取1-3次，每次1-3小时，合并各次提取液，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15的清膏I，备用；保留乙醇提取的药渣I备用；
超临界萃取：白术、莪术混合，粉碎成20～60目的颗粒，装入超临界萃取釜中，采用CO2超临界萃取，萃取温度为40～60℃，萃取压力15～35MPa，萃取时间1～3h，萃取物备用；保留CO2超临界萃取的药渣II备用；
水提：取CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材置于多功能提取罐中，加入药渣和药材(即CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材)总重量6-12倍量的水，煎煮1-3次，每次1-3小时，合并各次水提液，静置，滤过，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.10～1.15的清膏II，备用；
(三)浓缩：将步骤(二)所得清膏I、清膏II合并，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.30～1.35的清膏III，备用；
(四)萃取物包合：按萃取物与β-环糊精重量比为1：6～10的比例，取步骤(二)得到的萃取物与β-环糊精；所述β-环糊精中加水研匀，制成β-环糊精水溶液倒入胶体磨中，所述加水量为β-环糊精重量的2～4倍；所述步骤(二)得到的萃取物用乙醇溶解，制成萃取物乙醇溶液，缓慢连续滴加至胶体磨中，所述乙醇用量为萃取物的10～30wt％；采用研磨法进行包合，包合时间为30～90min，倾出，冷藏静置24小时，滤过，于40℃真空干燥，即得萃取物包合物；
(五)制粒：将清膏III、萃取物β-环糊精包合物及适量糊精、甜味剂混合，喷雾制粒，干燥，制成颗粒；
(六)整粒：将干燥的颗粒过10目及50目筛；
(七)包装：将所得颗粒分装成袋即得。
进一步的，步骤(二)所述的超临界萃取中，白术、莪术粉碎成40目颗粒，萃取温度为40℃，CO2流体压力35MPa，萃取时间2h。
进一步的，步骤(四)中所述萃取物与β-环糊精重量比为1：8，加水量为β-环糊精重量的4倍，乙醇用量为萃取物的30wt％，所述乙醇为95％乙醇，包合时间为60min。
进一步的，步骤(五)中所述干燥温度≤60℃。
进一步的，步骤(七)中所述包装为复合膜包装。
本发明的第二个目的是提供基于前述制备方法制备得到的仁术健胃颗粒。
本发明技术方案所实现的有益效果为：
1、本发明改进莪术、白术的提取工艺，将原发明中水蒸气蒸馏法提取莪术挥发油、白术以超细粉的方式直接入药改进为：采用CO2超临界萃取白术和莪术挥发油，有效避免原工艺水提挥发油易受热易焦化的问题，提取到的挥发油成分、芳香气味稳定，挥发油得率显著提高；同时有效避免原工艺药材超细化后，比表面积增加，稳定性稍差、制剂成型存在一定困难等局限性。
2、本发明中采用的超临界流体萃取技术是20世纪70时年代用于提取和分离的一种技术。超临界流体(Supercritical Fluid,SCF)是指处于临界温度(Tc)和临界压力(Pc)以上的流体，兼有气、液两者的特点：其一，密度接近于液体，具有类似液体的高密度；其二，粘度和扩散系数接近于气体，具有类似气体的低黏度。因此扩散系数是普通液体的100倍。CO2极性小，适于提取分子量小、亲脂性的萃取物、内酯、环氧化合物等物质。此外CO2性质稳定，无毒、不易燃易爆、廉价及较低的临界压力(7.37MPa)和较低的临界温度(31.05℃)，应用广泛。但不同的萃取工艺得到的有效成分不同，对于不同药材和不同类型的有效成分，超临界萃取工艺的单一因素变化也都会使萃取率、萃取到的有效成分产生较大的波动。本发明根据仁术健胃颗粒的配伍和药效设计CO2超临界萃取工艺，高效萃取莪术和白术挥发油，尤其是提高了吉马酮和白术内酯的得率，显著提高仁术健胃颗粒的产品质量和治疗效果。
3、本发明采用超临界流体萃取技术萃取莪术与白术中挥发油后使用β-环糊精进行包合，制成一种中药组合物，而目前针对莪术与白术组合物及其制备工艺研究较少。
4、本发明中采用超临界萃取技术得到白术和莪术挥发油后再采用胶磨法进行β-环糊精包合，掩盖不良气味，并提高其利用率和稳定性；
5、超临界萃取所得药渣再进行水提，使得药材有效成分提取更加充分。
6、胶体磨研磨法包合挥发油具有包合温度低、时间短、包合率高、产量高、适合工业化生产等优点。
7、本法明将原工艺中薏苡仁以超细粉的方式直接入药改进为醇提，能够有效提取薏苡仁油、三萜类化合物、甘油三油酸酯(C57H104O6)等有效成分，其中甘油三油酸酯的含量提高了20％，显著提高仁术健胃颗粒的产品质量和治疗效果。与方中黄芪、半边莲、白花蛇舌草等同时醇提，减少工时、降低能耗，降低浸膏量，减少辅料用量。
8、仁术健胃颗粒为纯中药制剂，主要用于治疗慢性萎缩性胃炎及胃癌前病变，促使慢性萎缩性胃炎并伴有胃粘膜肠上皮化生和异型增生等胃病好转，抑制胃癌细胞的增殖，促进癌细胞的凋亡，具有益气活血和清热解毒效果好等优点。本发明根据仁术健胃颗粒的配伍和药效，整体优化仁术健胃颗粒制备工艺，合理提高有效成分，对优化制备工艺的到的仁术健胃颗粒进行药效学实验，实验结果表明：新工艺生产的仁术健胃颗粒治疗慢性萎缩性胃炎及胃癌前病变效果显著优于原工艺治疗效果。
附图说明
图1为本发明仁术健胃颗粒制备方法流程图。
具体实施方式
实施例1CO2超临界萃取工艺的确定
本发明采用正交试验法对萃取条件进行筛选，选用综合评分为指标筛选最佳工艺，对其进行考察和研究。
本发明以粒度、压力、温度、萃取时间为因素进行正交试验，选用正交表L9(34)设计正交试验，对超临界萃取萃取莪术、白术组合物的工艺进行优化，以萃取物得率(％)、吉马酮含量(％)、白术内酯含量(％)为评价指标，以得到最优的萃取条件。试验安排及结果见表1-2。
表1 CO2超临界萃取因素水平表
Figure BDA0001929318510000051
表2 CO2超临界萃取L9(34)正交表
Figure BDA0001929318510000052
Figure BDA0001929318510000061
试验表明，本发明莪术、白术组合物最佳组合的萃取条件为A2B3C1D2，即将白术、莪术粉碎成40目颗粒，萃取温度为40℃，萃取压力35MPa，萃取时间2h。最佳方案中萃取物得率4.237％、吉马酮含量0.676％、白术内酯含量0.1055％。
实施例2萃取物包合工艺的确定
本发明采用正交试验法对包合条件进行筛选，选用综合评分为指标筛选最佳工艺，对其进行考察和研究。
本发明以β-环糊精：萃取物的重量比、研磨时间、加水倍量、乙醇用量为因素进行正交试验，选用正交表L9(34)设计正交试验，对萃取物包合工艺进行优化，以包合物得率(％)、油利用率(％)为评价指标，以得到最优的萃取条件。试验安排及结果见表3-4。
表3萃取物包合因素水平表
表4萃取物包合L9(34)正交表
Figure BDA0001929318510000063
试验表明，本发明的莪术挥发油、白术挥发油包合物的最佳制备条件为：A2B2C3D1，萃取物与β-环糊精重量比为1：8，加水量为β-环糊精重量的4倍，乙醇用量为萃取物的30wt％，研磨时间为60min。
本实施中的胶体磨乳化研磨法制备莪术挥发油、白术挥发油包合物，按《中华人民共和国药典》2015版一部附录XD挥发油测定法检测，最佳方案中挥发油油利用率为96.29％，包合率为97.54％。并且经薄层色谱检验，证明莪术和白术萃取物经包合后主成分基本不变，经氧化、光照、热稳定性等影响因素考察，包合物性质稳定，经工艺重现性验证，重现性良好。实施例3薏苡仁采用醇提工艺的确定
1、本发明中，薏苡仁的提取方式变更为：以醇提药材总重量6-12倍量的60-85％乙醇提取1-3次(每次1-3h)；醇提得到的含有薏苡仁的药渣用水提步骤中药渣和药材总重量6-12倍量的水煎煮1-3次(每次1-3h)，合并提取液，浓缩，得到清膏(密度为1.10-1.15(60℃))。
2、采用高效液相色谱法分别测定上述所得清膏以及薏苡仁超细粉中薏苡仁的有效成分(甘油三油酸酯)的含量。
(1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-二氯甲烷(65：35)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按甘油三油酸酯峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备取甘油三油酸酯对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.14mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备分别取薏苡仁超细粉约0.6g，上述清膏适量(约1.7g，清膏得率约36％，等同于0.6g超细粉)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相50ml，称定重量，浸泡2小时，超声处理(功率300W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。
供试品按干燥品计算，含甘油三油酸酯(C57H104O6)，不得少于0.5％。
3、实验结果
薏苡仁超细粉中甘油三油酸酯的含量为0.937％；上述清膏中甘油三油酸酯的含量为0.902％。结果表明，经醇提、水提后得到的甘油三油酸酯的已提取充分，有效成分提取非常完全，此外，相对于薏苡仁以超细粉入药的方式，本发明中薏苡仁提取充分，浸膏粉体积小，能减少辅料用量，并且利于制剂成型，进而减少成品的服用量。
实施例4仁术健胃颗粒的制备
1、处方(以下实施例中每份按10g计算。)
Figure BDA0001929318510000071
Figure BDA0001929318510000081
2、制备方法
(一)预处理：按重量份数配比称取黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草；所述白花蛇舌草、半边莲、仙鹤草洗净切成1-2cm长的段；黄芪、黄芩、白术切片炒制；莪术切薄片；
(二)提取：
乙醇提取：黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁置于多功能提取罐中，加入药材(即黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁)总重量8倍量80％乙醇，回流提取2次，每次2小时，提取液合并，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15的清膏I，备用；保留乙醇提取的药渣I备用；
超临界萃取：白术、莪术混合，粉碎成40目的颗粒，装入超临界萃取釜中，CO2超临界萃取，萃取温度为40℃，萃取压力35MPa，萃取时间2h，萃取物备用；保留CO2超临界萃取的药渣II备用；
水提：取CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材置于多功能提取罐中，加入药渣和药材(即CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材)总重量10倍量水，煎煮2次，每次2小时，合并2次水提液，静置，滤过，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.10～1.15的清膏II，备用；
(三)浓缩：将步骤(二)所得清膏I、清膏II合并，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.30～1.35的清膏III，备用；
(四)萃取物包合：按萃取物与β-环糊精重量比为1：8的比例，取步骤(二)得到的萃取物与β-环糊精；所述β-环糊精中加水研匀，制成β-环糊精水溶液倒入胶体磨中，所述加水量为β-环糊精重量的4倍；所述步骤(二)得到的萃取物用95％乙醇溶解，制成萃取物乙醇溶液，缓慢连续滴加至胶体磨中，所述95％乙醇用量为萃取物的30wt％；采用研磨法进行包合，包合时间为60min，倾出，冷藏静置24小时，滤过，于40℃真空干燥，即得萃取物包合物；
(五)制粒：将清膏III、萃取物β-环糊精包合物及适量糊精、甜味剂混合，喷雾制粒，不高于60℃温度干燥，制成颗粒；
(六)整粒：将干燥的颗粒过10目及50目筛；
(七)包装：将所得颗粒复合膜包装，即得。
实施例5仁术健胃颗粒的制备
1、处方(以下实施例中每份按10g计算。)
Figure BDA0001929318510000091
2、制备方法
(一)预处理：按重量份数配比称取黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草；所述白花蛇舌草、半边莲、仙鹤草洗净切成1-2cm长的段；黄芪、黄芩、白术切片炒制；莪术切薄片；
(二)提取：
乙醇提取：黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁置于多功能提取罐中，加入药材(即黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁)总重量6倍量85％乙醇，回流提取3次，每次1小时，提取液合并，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15的清膏I，备用；保留乙醇提取的药渣I备用；
超临界萃取：白术、莪术混合，粉碎成20目的颗粒，装入超临界萃取釜中，CO2超临界萃取，萃取温度为60℃，萃取压力15MPa，萃取时间3h，萃取物备用；保留CO2超临界萃取的药渣II备用；
水提：取CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材置于多功能提取罐中，加入药渣和药材(即CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材)总重量6倍量水，煎煮1次，每次3小时，合并水提液，静置，滤过，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.10～1.15的清膏II，备用；
(三)浓缩：将步骤(二)所得清膏I、清膏II合并，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.30～1.35的清膏III，备用；
(四)萃取物包合：按萃取物与β-环糊精重量比为1：6的比例，取步骤(二)得到的萃取物与β-环糊精；所述β-环糊精中加水研匀，制成β-环糊精水溶液倒入胶体磨中，所述加水量为β-环糊精重量的2倍；所述步骤(二)得到的萃取物用95％乙醇溶解，制成萃取物乙醇溶液，缓慢连续滴加至胶体磨中，所述95％乙醇用量为萃取物的10wt％；采用研磨法进行包合，包合时间为90min，倾出，冷藏静置24小时，滤过，于40℃真空干燥，即得萃取物包合物；
(五)制粒：将清膏III、萃取物β-环糊精包合物及适量糊精、甜味剂混合，喷雾制粒，不高于60℃温度干燥，制成颗粒；
(六)整粒：将干燥的颗粒过10目及50目筛；
(七)包装：将所得颗粒复合膜包装，即得。
实施例6仁术健胃颗粒的制备
1、处方(以下实施例中每份按10g计算。)
Figure BDA0001929318510000101
2、制备方法
(一)预处理：按重量份数配比称取黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草；所述白花蛇舌草、半边莲、仙鹤草洗净切成1-2cm长的段；黄芪、黄芩、白术切片炒制；莪术切薄片；
(二)提取：
乙醇提取：黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁置于多功能提取罐中，加入药材(即黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁)总重量12倍量60％乙醇，回流提取1次，每次3小时，提取液合并，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15的清膏I，备用；保留乙醇提取的药渣I备用；
超临界萃取：白术、莪术混合，粉碎成60目的颗粒，装入超临界萃取釜中，CO2超临界萃取，萃取温度为50℃，萃取压力25MPa，萃取时间1h，萃取物备用；保留CO2超临界萃取的药渣II备用；
水提：取CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材置于多功能提取罐中，加入药渣和药材(即CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材)总重量12倍量水，煎煮3次，每次1小时，合并3次水提液，静置，滤过，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.10～1.15的清膏II，备用；
(三)浓缩：将步骤(二)所得清膏I、清膏II合并，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.30～1.35的清膏III，备用；
(四)萃取物包合：按萃取物与β-环糊精重量比为1：10的比例，取步骤(二)得到的萃取物与β-环糊精；所述β-环糊精中加水研匀，制成β-环糊精水溶液倒入胶体磨中，所述加水量为β-环糊精重量的3倍；所述步骤(二)得到的萃取物用95％乙醇溶解，制成萃取物乙醇溶液，缓慢连续滴加至胶体磨中，所述95％乙醇用量为萃取物的20wt％；采用研磨法进行包合，包合时间为30min，倾出，冷藏静置24小时，滤过，于40℃真空干燥，即得萃取物包合物；
(五)制粒：将清膏III、萃取物β-环糊精包合物及适量糊精、甜味剂混合，喷雾制粒，不高于60℃温度干燥，制成颗粒；
(六)整粒：将干燥的颗粒过10目及50目筛；
(七)包装：将所得颗粒复合膜包装，即得。
实施例7动物实验
本实施例通过多因素法建立慢性萎缩性胃炎(CAG)脾气虚证大鼠模型，随机分组(正常组、模型组、原工艺组、现工艺组)。其中N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)是一种较为常见的致突变剂，使DNA链上已有的碱基发生烷化，从而产生突变，发挥其致癌作用。MNNG的诱变能力很强，产生的突变体常常含有多位点突变，并可发生在整个细胞周期，因而容易获得诱变，引起肿瘤发生。同时MNNG诱发癌的组织学特性与人的胃癌相似，且更易渗透胃幽门部和胃底黏膜。化学致癌剂MNNG作为工具药主要是模拟人不当摄入酸盐在胃内转化为亚酸胺等致癌物质，从而导致慢性萎缩性胃炎及胃癌癌前病变。
胃部病变的进程是从常胃黏膜—慢性胃炎—萎缩性胃炎—肠上皮化生—不典型增生—胃癌的演变。酒精可刺激胃酸分泌和直接刺激胃黏膜，引起胃黏膜炎性反应，胃黏膜细胞剥脱，并抑制胃黏膜的生长使其失去常的抵抗力，破坏胃點膜的保护作用，加快MNNG的作用。
实验组分别给予原工艺与现工艺(实施例1)生产的仁术健胃颗粒进行治疗，探索胃粘膜破坏因子和保护因子的改变与CAG脾气虚证的联系及考察工艺变更前后，仁术健胃颗粒的功效的变化。
比较变更前后仁术健胃颗粒的抗化学致癌作用——仁术健胃颗粒对N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍诱发大鼠胃腺癌的影响
1、实验目的
通过观察大鼠胃粘膜破坏因子如内皮素(ET)，一氧化氮合酶(NOS)，胃动素(MTL)的变化，胃粘膜保护因子如胃泌素(GAS)，生长抑素(SS),分泌型免疫球蛋白(SIgA)的变化，探讨仁术健胃颗粒对如上因子的影响，得到仁术健胃颗粒对MNNG诱发大鼠胃腺癌的治疗效果，比较现工艺制备的仁术健胃颗粒的功效是否强于原工艺制备的仁术健胃颗粒的功效。
2、实验内容
(1)实验用药
MNNG：东京仁成工业株式会社制造，批号：GNGMH；
生大黄饮片：安徽省金芙蓉中药饮片有限公司；
生厚朴饮片：安徽省金芙蓉中药饮片有限公司；
生枳实饮片：安徽省金芙蓉中药饮片有限公司；
仁术健颗粒(原工艺)：南京中山制药有限公司；
仁术健颗粒(新工艺)：南京中山制药有限公司，(以实施例1方法制备)；
ET和NOS试剂盒：南京建成生物工程研究所；
胃动素放免试剂盒：北京华英生物科技有限公司；
生长抑素试剂盒：北京华英生物科技有限公司；
SIgA试剂盒：南京建成生物工程研究所；
(2)实验动物
健康SD大鼠：由扬州大学动物中心提供，合格证号：SCXK(苏)201716661。
(3)实验饲料
全价营养颗粒饲料：由江苏省协同医药生物技术有限公司提供，批号20170809。
(4)实验条件
室温25±2℃，湿度50～60％，光照适度，通风良好。
(5)药物配制
MNNG的配制：
即用即配，整个配制过程注意避光操作。
精密称取0.15gMNNG，溶于1000ml蒸馏水中超声15分钟，制成150ug/ml的MNNG溶液装入饮水瓶中，让大鼠自由饮用。
配制170ug/ml的MNNG溶液，用于1ml/100g灌胃。
破气苦降法：
破气苦降煎剂由生大黄：生厚朴：生枳实以1:1:1的比例，煎煮并浓缩为每毫升含1g药量。药物先用温水浸润小时，先将厚朴和枳实煎煮，沸腾后计时30分钟，然后加入大黄继续煎煮，沸腾后计时20分钟，倒出水煎液后，加入水进行第二次煎煮，合并两次煎液，80℃下浓缩过滤，4℃冷藏备用。
仁术健胃颗粒(原工艺)的配制：
仁术健胃颗粒临床用量是每天1g/kg(用药量/体重)实验用量为临床用量的12倍，即12g/kg，1ml/100g灌胃。
仁术健胃颗粒(新工艺)的配制：
配制方法同上。
(6)实验方法
①慢性萎缩性胃炎(CAG)脾气虚证大鼠模型的建立
CAG脾气虚证模型组每天给予150ug/ml的MNNG溶液自由饮用，每周两次按照1ml/100g灌胃给予40％的酒精，每天以170ug/ml的MNNG溶液1ml/100g灌胃攻击，连续十周；第五周开始结合饥饱失常(逢单禁食、逢双饱食)，每天一次破气泻下煎剂2ml/100g灌胃，使用大鼠疲劳仪每天进行30分钟的疲劳运动复制脾气虚证，连续五周。
每天观察大鼠的表现，出现精神委靡、嗜卧、拱背、蜷缩扎堆、眼眯、被毛憔悴、耳尾色白、毛无光泽、抓取时挣扎无力、软便或溏便、泄泻、食欲减退、体肌瘦削等则表示脾气虚证模型建立成功。正常组，同等条件下以生理盐水灌胃。
②分组给药
第六周时，将CAG脾气虚证模型大鼠随机分为A、B、C、D组，用于实验：
A组：正常组，等量生理盐水(NS)，灌胃(ig)；
B组：CAG脾气虚证模型组，等量生理盐水(NS)，灌胃(ig)；
C组：仁术健胃颗粒(原工艺)组，12g/kg，ig；
D组：仁术健胃颗粒(新工艺)组，12g/kg，ig。
每组给予相应的药物连续治疗五周。第十周实验末将大鼠麻醉后，腹主动脉取血，离心取血清，-20℃冷冻保存，待测。
③ET的检测方法
按照内皮素检测试剂盒要求：应用双抗体夹心法测定标本中大鼠内皮素1(ET-1)水平。按加样，温育，洗涤，加酶，显色，终止，测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行，计算。颜色的深浅和样品中的内皮素1(ET-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中大鼠内皮素1(ET-1)浓度。
④免疫诱导型NOS的检测方法
按照一氧化氮合酶检测试剂盒要求：采用双抗体一步夹心法海联免疫吸附试验(ELISA)。颜色的深浅和样品中的大鼠一氧化氮合成酶(NOS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
⑤MTL的检测方法
按照胃动素放免试剂盒要求：采用平衡加样法，将待测样品100ul与抗体100ul充分混匀，4℃放置24h后，加入125I-MTL100ul，摇匀，4℃放置24h后，加入分离剂500ul，混匀室温放置20min，3500r/min，去上清液，测定沉淀cpm数，以N/T、B/T计算NSB、SO结合百分率，以B/SO计算标准及待测样品结合百分率，半数坐标纸上绘制标准曲线，查出样品值。
⑥GAS的检测方法
采用放免法测定组织中胃泌素(Gastrin)含量，按照试剂盒测定要求，将EDTA100ul，样品100ul，125I-GAS100ul按顺序加入摇匀后，4℃放置24h后，加入分离剂500ul，4℃放置15分钟后3500r/min，15分钟，离心去上清液，测定沉淀cpm数，以N/T、B/T计算NSB、SO结合百分率，以B/BO计算标准及待测样品结合百分率，半数坐标纸上绘制标准曲线，查出样品值。
⑦SS的检测方法
生长抑素(SS)为脑肠肽，具有广泛生理作用，采用放免法测定其含量。采用双管重复法测定，将样本提取液200ul，缓冲液100ul，抗体100ul按照顺序加入充分混匀，4℃放置24h后，加入125I-SS100ul，摇匀后温育48h，计入分离机600ul，室温放置15min，3500r/min，4℃-10℃离心，弃上清液，测定沉淀cpm数，以N/T、B/T计算NSB、SO结合百分率，以B/BO计算标准及待测样品结合百分率，半数坐标纸上绘制标准曲线，查出样品值。
⑧SIgA的检测方法
SIgA试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验(ELISA)，按照说明书要求进行检测操作。先将SIgA和生物素标记的抗体同时温存，洗涤后，加入亲和素标记物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B和酶结合物同时作用。产生颜色，颜色的深浅和样品中的SIgA浓度呈比例关系。
3、实验结果
(1)表5-7显示：CAG脾气虚证大鼠模型ET、NOS和MTL水平比正常组高，存在显著差异(p＜0.05)。仁术健胃颗粒(原工艺)组与新工艺组的ET、NOS和MTL水平均低于模型组；而现工艺组ET、NOS和MTL水平低于原工艺组。CAG脾气虚模型组ET、NOS和MTL水平都较高，提示多因素造模法会提高胃粘膜破坏因子水平，进一步的破坏胃部组织，使组织发生炎症，溃疡和粘膜萎缩。使用仁术健胃颗粒进行治疗干预后，各组(原工艺组和新工艺组)ET、NOS和MTL水平都明显下降，其水平接近正常大鼠水平。实验表明，仁术健胃颗粒的治疗，可以降低CAG脾气虚证模型异常降低的胃粘膜损伤因子ET、NOS和MTL水平，使其接近或恢复正常水平，起到保护胃组织的作用；且新工艺组治疗效果优于原工艺组。
(2)表8-10显示：CAG脾气虚证大鼠模型GAS、SS和SIgA水平比正常组低，存在显著差异(p＜0.05)。仁术健胃颗粒(原工艺)组与现工艺组的GAS、SS和SIgA水平均高于模型组；而仁术健胃颗粒(新工艺)组GAS、SS和SIgA水平高于原工艺组。实验表明，仁术健胃颗粒的治疗，可以提高CAG脾气虚证模型异常降低的胃粘膜保护因子GAS、SS、SIgA水平，使其接近或恢复正常水平，起到保护和修复病变胃部组织，防止病情恶化的作用；且新工艺组治疗效果优于原工艺组。
表5.仁术健胃颗粒对CAG脾气虚证大鼠血清ET的变化(n＝8,
Figure BDA0001929318510000151
)
Figure BDA0001929318510000152
(△p＜0.05与正常组比较；*P＜0.05与模型组比较。)
表6.仁术健胃颗粒对CAG脾气虚证大鼠血清NOS的变化(n＝8,
Figure BDA0001929318510000153
)
Figure BDA0001929318510000154
(△p＜0.05与正常组比较；*P＜0.05与模型组比较。)
表7.仁术健胃颗粒对CAG脾气虚证大鼠MTL的变化(n＝8,
Figure BDA0001929318510000155
)
Figure BDA0001929318510000156
(△p＜0.05与正常组比较；*P＜0.05与模型组比较。)
表8.仁术健胃颗粒对CAG脾气虚证大鼠GAS的变化(n＝5,
Figure BDA0001929318510000161
)
Figure BDA0001929318510000162
(△p＜0.01与正常组比较；*P＜0.05与模型组比较。)
表9.仁术健胃颗粒对CAG脾气虚证大鼠SS的变化(n＝5,
Figure BDA0001929318510000163
)
(△p＜0.05与正常组比较；*P＜0.05与模型组比较。)
表10.仁术健胃颗粒对CAG脾气虚证大鼠SIgA的变化(n＝8,)
Figure BDA0001929318510000166
(△p＜0.01与正常组比较；*P＜0.05与模型组比较。)
因此，改良仁术健胃颗粒与原工艺均可以调节CAG脾气虚证模型异常变化的胃粘膜破坏因子ET、NOS、MTL和粘膜护因子GAS、SS、SIgA接近或恢复到正常水平，起到治疗和预防的作用，但改良后仁术健胃颗粒治疗慢性萎缩性胃炎及胃癌前病变的作用效果显著优于原工艺的效果，说明本发明中工艺变更使得药材中有效成分提取更加完全、药效更优。

Claims (6)

1.一种仁术健胃颗粒的制备方法，从中药黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草中提取有效成分配制而成，其配制重量份数为：黄芪10-30份、白术5-20份、薏苡仁5-20份、黄芩5-20份、仙鹤草5-20份、莪术5-20份、半边莲5-20份、白花蛇舌草5-20份，所述黄芪用量大于莪术用量，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(一)预处理：按重量份数配比称取黄芪、白术、薏苡仁、黄芩、仙鹤草、莪术、半边莲、白花蛇舌草；所述白花蛇舌草、半边莲、仙鹤草洗净切成1-2cm长的段；黄芪、黄芩、白术切片炒制；莪术切薄片；
(二)提取：
乙醇提取：黄芪、白花蛇舌草、半边莲、薏苡仁置于多功能提取罐中，加入药材总重量6-12倍量的60-85％乙醇，回流提取1-3次，每次1-3小时，提取液合并，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15的清膏I，备用；保留乙醇提取的药渣I备用；
超临界萃取：白术、莪术混合，粉碎成20～60目的颗粒，装入超临界萃取釜中，采用CO2超临界萃取，萃取温度为40～60℃，萃取压力15～35MPa，萃取时间1～3h，萃取物备用；保留CO2超临界萃取的药渣II备用；
水提：取CO2超临界萃取的药渣II、乙醇提取的药渣I与黄芩、仙鹤草二味药材置于多功能提取罐中，加入药渣和药材总重量6-12倍量的水，煎煮1-3次，每次1-3小时，合并水提液，静置，滤过，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.10～1.15的清膏II，备用；
(三)浓缩：将步骤(二)所得清膏I、清膏II合并，减压浓缩至相对密度为60℃条件下1.30～1.35的清膏III，备用；
(四)萃取物包合：按萃取物与β-环糊精重量比为1：6～10的比例，取步骤(二)得到的萃取物与β-环糊精；所述β-环糊精中加水研匀，制成β-环糊精水溶液倒入胶体磨中，所述加水量为β-环糊精重量的2～4倍；所述步骤(二)得到的萃取物用乙醇溶解，制成萃取物乙醇溶液，缓慢连续滴加至胶体磨中，所述乙醇用量为萃取物的10～30wt％；采用研磨法进行包合，包合时间为30～90min，倾出，冷藏静置24小时，滤过，于40℃真空干燥，即得萃取物包合物；
(五)制粒：将清膏III、萃取物β-环糊精包合物及适量糊精、甜味剂混合，喷雾制粒，干燥，制成颗粒；
(六)整粒：将干燥的颗粒过10目及50目筛；
(七)包装：将所得颗粒分装成袋即得。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(二)所述的超临界萃取中，白术、莪术粉碎成40目颗粒，萃取温度为40℃，CO2流体压力35MPa，萃取时间2h。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(四)中所述萃取物与β-环糊精重量比为1：8，加水量为β-环糊精重量的4倍，乙醇用量为萃取物的30wt％，所述乙醇为95％乙醇，包合时间为60min。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(五)中所述干燥温度≤60℃。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(七)中所述包装为复合膜包装。
6.基于权利要求1至5任一项所述的制备方法制备得到的仁术健胃颗粒。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111693641A (zh) * 2020-07-20 2020-09-22 江苏弘典中药产业研究院有限公司 一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法
CN111948330A (zh) * 2020-07-03 2020-11-17 江苏弘典中药产业研究院有限公司 仁术健胃颗粒指纹图谱的检测方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1410099A (zh) * 2002-08-13 2003-04-16 南京中山制药厂 仁术健胃颗粒剂及其制备方法
CN1586604A (zh) * 2004-07-30 2005-03-02 张正生 一种莪术注射制剂及其制备方法
CN101062157A (zh) * 2007-05-29 2007-10-31 南京中山制药有限公司 枳术颗粒的制备工艺
CN101204411A (zh) * 2007-12-18 2008-06-25 深圳海王药业有限公司 白术挥发油包合物及其制备方法
CN102552806A (zh) * 2012-01-10 2012-07-11 山东中医药大学附属医院 一种消脂通脉颗粒及其制作方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1410099A (zh) * 2002-08-13 2003-04-16 南京中山制药厂 仁术健胃颗粒剂及其制备方法
CN1586604A (zh) * 2004-07-30 2005-03-02 张正生 一种莪术注射制剂及其制备方法
CN101062157A (zh) * 2007-05-29 2007-10-31 南京中山制药有限公司 枳术颗粒的制备工艺
CN101204411A (zh) * 2007-12-18 2008-06-25 深圳海王药业有限公司 白术挥发油包合物及其制备方法
CN102552806A (zh) * 2012-01-10 2012-07-11 山东中医药大学附属医院 一种消脂通脉颗粒及其制作方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
吴桐，等: "莪术、白术挥发油提取及包合工艺考察", 《中医药导报》 *
田应彪，等: "两种方法制备莪术油β-环糊精包合物工艺比较", 《医药导报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111948330A (zh) * 2020-07-03 2020-11-17 江苏弘典中药产业研究院有限公司 仁术健胃颗粒指纹图谱的检测方法
CN111948330B (zh) * 2020-07-03 2022-06-17 江苏弘典中药产业研究院有限公司 仁术健胃颗粒指纹图谱的检测方法
CN111693641A (zh) * 2020-07-20 2020-09-22 江苏弘典中药产业研究院有限公司 一种仁术健胃颗粒的薄层鉴别的方法

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