CN110693026A - 一种用于改善记忆力的水果成分组合物及其应用 - Google Patents
一种用于改善记忆力的水果成分组合物及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种用于改善记忆力的水果成分组合物，所述组合物包括甘草苷、枸杞多糖和任选的橄榄苦苷，其中，所述枸杞多糖如下提取：依次进行有机溶剂回流脱脂、复合酶水溶液提取以及微滤膜过滤。在本发明中，所述组合物还包括柚皮苷和芒果苷。本发明所述组合物的成分均为水果组分，性能温和，同时，各组分之间具有协同增效的作用可以用于改善记忆力。
Description
技术领域
本发明属于组合物领域，尤其涉及用于改善记忆力的组合物，特别地，涉及改善记忆力的水果成分组合物及其应用。
背景技术
目前，不仅老人需要改善记忆力，年轻人由于工作和学习的压力较大，同样需要进行记忆力改善。市场上可以改善记忆力的产品琳琅满目，但是大多都是保健品，并普遍存在改善记忆力效果不佳的问题。
当然，也有涉及改善记忆力的药物，其效果虽然比保健品好，但是，部分人服用后会出现不良反应，而且，是药三分毒，长期服用肯定会对身体造成一定程度的损伤。
因此，现有涉及改善记忆力的产品，要么改善效果不佳，要么成分不够温和。
发明内容
为了克服上述问题，本发明人进行了锐意研究，以温和的水果成分为原料，并对多种成分进行有效配伍，得到一种可以有效改善记忆力的水果成分组合物，所述组合物成分温和，同时，改善记忆力成分优异，从而完成本发明。
本发明一方面在于提供一种用于改善记忆力的水果成分组合物，具体体现在以下几个方面：
(1)一种用于改善记忆力的水果成分组合物，其中，所述组合物包括甘草苷、枸杞多糖和任选的橄榄苦苷。
(2)根据上述(1)所述的组合物，其中，组合物中各组分的重量配比如下：
甘草苷5～15份；
枸杞多糖2～15份；
橄榄苦苷0～10份。
(3)根据上述(1)或(2)所述的组合物，其中，组合物中各组分的重量配比如下：
甘草苷6～12份；
枸杞多糖6～12份；
橄榄苦苷2～5份。
(4)根据上述(1)至(3)之一所述的组合物，其中，所述枸杞多糖的提取如下进行：
步骤1、对枸杞依次进行干燥、粉碎和过筛处理，得到枸杞粉；
步骤2、将步骤1得到的枸杞粉于有机溶剂中进行回流脱脂处理，然后过滤、烘干得到粗产物；
步骤3、将粗产物于复合酶水溶液中进行提取，提取结束后抽滤、静置，取上层清液；
步骤4、对步骤3得到的上层清液进行浓缩，然后于有机溶剂中沉淀，过滤，得到所述枸杞多糖。
(5)根据上述(1)至(4)之一所述的组合物，其中，所述组合物还包括芒果苷。
(6)根据上述(1)至5之一所述的组合物，其中，所述芒果苷的用量为5～15份。
(7)根据上述(1)至(6)之一所述的组合物，其中，所述组合物还包括柚皮苷。
(8)根据上述(1)至(7)之一所述的组合物，其中，所述柚皮苷的用量为5～20份。
本发明另一方面提供了上述(1)至(8)之一所述组合物用于制备改善记忆力的药物的用途。
附图说明
图1示出水迷宫实验中正常组、模型组、实施例1以及对比例2～8给药组的小鼠逃避潜伏时间柱形图；
图2示出水迷宫实验中正常组、模型组、实施例1以及对比例2～8给药组的小鼠平均游泳速度柱形图；
图3示出Y迷宫实验中正常组、模型组以及实施例1给药组的小鼠Y迷宫正确率的柱形图。
具体实施方式
下面通过实施例和实验例对本发明进一步详细说明。通过这些说明，本发明的特点和优点将变得更为清楚明确。
本发明提供了一种用于改善记忆力的水果成分组合物，所述组合物包括甘草苷、枸杞多糖和任选的橄榄苦苷。
其中：甘草苷存在于豆科植物甘草的根中，是一种黄酮类化合物；所述枸杞多糖是由多个单糖或衍生物聚合而成的大分子活性物质，是枸杞生物学作用的主要有效成分之一，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6种单糖组成，对机体具有非特异性免疫调解功能；而橄榄苦苷具有抗氧化和广谱抗菌等作用。发明人发现，采用甘草苷、枸杞多糖和任选的橄榄苦苷作为组合物时，可以有效改善记忆。
在本发明中，所述橄榄苦苷为任选添加，其中，在组合物中加入橄榄苦苷可以在一定程度上提高组合物改善记忆力的效果。但是，在本发明中，并不以橄榄苦苷为主要成分，添加少量即可。
根据本发明一种优选的实施方式，组合物中各组分的重量配比如下：
甘草苷 5～15份；
枸杞多糖 2～15份；
橄榄苦苷 0～10份。
在进一步优选的实施方式中，组合物中各组分的重量配比如下：
甘草苷 6～12份，例如8份；
枸杞多糖 6～12份，例如8～9份；
橄榄苦苷 2～5份，例如4份。
在最优选的是实施方式中，组合物中各组分的重量配比如下：
甘草苷 8份；
枸杞多糖 8.3份；
橄榄苦苷 4份。
其中，发明人经过大量实验发现，只有在甘草苷、枸杞多糖和橄榄苦苷采用特定配比的情况下，得到的组合物改善记忆效果最好。
具体地，枸杞多糖含量太高(20～40份)时，会降低组合物改善记忆的效果。说明，在本发明中，各组分之间并不是简单的叠加，而是具有交互作用，彼此之间协同增效。
根据本发明一种优选的实施方式，在所述组合物中，甘草苷与枸杞多糖的用量比为(0.3～3.75):1。
在进一步优选的实施方式中，在所述组合物中，甘草苷与枸杞多糖的用量比为(0.4～2):1。
在更进一步优选的实施方式中，在所述组合物中，甘草苷与枸杞多糖的用量比为(0.8～1):1。
根据本发明一种优选的实施方式，所述枸杞多糖的提取如下进行：
步骤1、对枸杞依次进行干燥、粉碎和过筛处理，得到枸杞粉；
步骤2、将步骤1得到的枸杞粉于有机溶剂中进行回流脱脂处理，然后过滤、烘干得到粗产物；
步骤3、将粗产物于复合酶水溶液中进行提取，提取结束后抽滤、静置，取上层清液；
步骤4、对步骤3得到的上层清液进行浓缩，然后于有机溶剂中沉淀，过滤，得到所述枸杞多糖。
在进一步优选的实施方式中，在步骤4的过滤后还进行如下处理：
将过滤后得到的沉淀物加入水中，然后通过微滤膜(优选孔径小于0.2μm)进行过滤，得到枸杞多糖水溶液，进行浓缩，得到所述枸杞多糖。
其中，发明人发现，经过微滤膜过滤后得到的枸杞多糖在用于组合物后，组合物提高记忆力的效果更优异。
根据本发明一种优选的实施方式，在步骤2中，所述有机溶剂选自氯仿、石油醚、甲醇和正丁醇中的一种或几种。
在进一步优选的实施方式中，在步骤2中，所述有机溶剂为氯仿和甲醇的混合溶剂。
在更进一步优选的实施方式中，氯仿于甲醇的用量比为(1～2.5):1，优选为(1.5～2):1，例如2:1。
其中，发明人发现，当采用氯仿和甲醇特定比例时，得到的枸杞多糖用于组合物时，组合物提高记忆的效果最好。
根据本发明一种优选的实施方式，在步骤3中，所述复合酶包括纤维素酶、淀粉酶和果胶酶。
在进一步优选的实施方式中，在所述复合酶中，纤维素酶、淀粉酶和果胶酶的用量比为(4～6):(1～3):(2～4)，例如5:2:3。
在更进一步优选的实施方式中，以步骤1中枸杞100％计，所述复合酶的用量为4～7％，优选为4～6％。
根据本发明一种优选的实施方式，所述组合物还包括芒果苷。
其中，芒果苷又称莞知母宁，是知母根茎中抗病毒的活性成分。
在进一步优选的实施方式中，在组合物中，所述芒果苷的用量为5～15份。
在更进一步优选的实施方式中，在组合物中，所述芒果苷的用量为8～12份。
其中，发明人发现，并不是所有原料的用量越多越好，用量过多反而会影响效果。具体地，芒果苷的用量不能太高，当高于15份时(尤其当高于30份时)，组合物改善记忆的效果反而会降低(参见实施例1和对比例1)。
根据本发明一种优选的实施方式，所述组合物还包括柚皮苷。
其中，柚皮苷来源于芸香科植物中的二氢黄铜类化合物，为白色至浅黄色结晶性粉末，其具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、改善微循环和营养供给。
在进一步优选的实施方式中，在组合物中，所述柚皮苷的用量为5～20份。
在更进一步优选的实施方式中，在组合物中，所述柚皮苷的用量为8～15份。
其中，发明人经过实验发现，柚皮苷的用量不能太高，当柚皮苷用量太高，超过20份时，组合物改善记忆的效果会降低(参见实施例1和对比例2)。
按照一般思维，如果组合物中的每个单一组分均具有改善记忆的效果，那么当组分用量越多时，组合物改善记忆的效果越好。但是，实际并非如此，发明人经过大量实验实现，所述组合物中各组分之间存在最佳用量比，而并不是单组分用量越多越好。这是因为所述组合物中各组分之间并不是简单的加和关系，而是具有交互作用、存在协同增效的效果。
根据本发明一种优选的实施方式，在所述组合物中，芒果苷与柚皮苷的用量比为(0.25～5):1。
在进一步优选的实施方式中，在所述组合物中，芒果苷与柚皮苷的用量比为(0.5～1.5):1，例如1:1。
在本发明最优选的实施方式中，组合物中各组分的重量配比如下：
本发明另一方面提供了本发明第一方面所述组合物用于制备改善记忆力的药物的用途。
本发明所具有的有益效果包括：
(1)本发明所述组合物的成分均为水果组分，性能温和；
(2)本发明所述组合物中各组分之间具有协同增效的作用；
(3)本发明所述组合物可以用于改善记忆力，并且，改善效果优异。
实施例
以下通过具体实施例进一步描述本发明。不过这些实施例仅仅是范例性的，并不对本发明的保护范围构成任何限制。
在实施例中：D-半乳糖购自上海璞帝生物科技有限公司(批号：BY08031)，甘草苷购自上海润朗生物科技有限公司(批号：MUST-18032801)，柚皮苷购自上海润朗生物科技有限公司(批号：MUST-18040122)，芒果苷购自上海润朗生物科技有限公司(批号：D1819120)，橄榄苦苷购自上海润朗生物科技有限公司(批号：610B022)。
实施例1’枸杞多糖的提取
称取10g干燥的枸杞，粉碎过80目筛，得枸杞粉；
量取60mL氯仿和20mL甲醇，混合后将枸杞粉置于其中，于65℃进行回流脱脂1h，然后过滤、烘干，得粗产物；
称取0.05g复合酶(纤维素酶：淀粉酶：果胶酶＝5:2:3)，按重量比1:10加入蒸馏水，50℃活化20min，然后将粗产物加入其中，调pH至5.8，于旋转蒸发器中浸提后升温至95℃灭酶25min，然后冷却、抽滤、静置，取上层清液；
对清液进行浓缩处理，然后于乙醇中沉淀；
取沉淀物再次用蒸馏水溶解，过孔径为0.15μm的分离膜进行分离，得多糖水溶液，浓缩即得枸杞多糖。
实施例1
称取10mg柚皮苷、8mg甘草苷、8.3mg枸杞多糖(采用实施例1’的产物)、10mg芒果苷和4mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
实施例2
称取8mg柚皮苷、12mg甘草苷、6mg枸杞多糖(采用实施例1’的产物)、12mg芒果苷和3mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
实施例3
称取15mg柚皮苷、6mg甘草苷、12mg枸杞多糖(采用实施例1’的产物)、8mg芒果苷和5mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
实施例4
称取5mg柚皮苷、15mg甘草苷、4mg枸杞多糖(采用实施例1’的产物)、15mg芒果苷和8mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
实施例5
称取20mg柚皮苷、5mg甘草苷、15mg枸杞多糖(采用实施例1’的产物)、5mg芒果苷和2mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例
对比例1
重复实施例1的过程，区别在于：芒果苷为40mg。
对比例2
重复实施例1的过程，区别在于：柚皮苷为40mg。
对比例3
称取40mg柚皮苷、2mg甘草苷、33.4mg枸杞多糖、40mg芒果苷和4mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例4
重复对比例3的过程，区别在于：甘草苷的用量为8mg。
对比例5
称取10mg柚皮苷、2mg甘草苷、8.3mg枸杞多糖、40mg芒果苷和4mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例6
重复实施例5的过程，区别在于：(1)采用33.4mg枸杞多糖；(2)采用10mg芒果苷。
对比例7
称取40mg柚皮苷、2mg甘草苷、33.4mg枸杞多糖、10mg芒果苷和4mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例8
称取40mg柚皮苷、8mg甘草苷、33.4mg枸杞多糖、40mg芒果苷和1mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例9
重复实施例1的过程，区别在于，将组合物中的五种组分全部替换为等重量的柚皮苷，即为40.3mg的柚皮苷。
对比例10
重复实施例1的过程，区别在于，将组合物中的五种组分全部替换为等重量的甘草苷，即为40.3mg的甘草苷。
对比例11
重复实施例1的过程，区别在于，将组合物中的五种组分全部替换为等重量的芒果苷，即为40.3mg的芒果苷。
对比例12
重复实施例1的过程，区别在于，将组合物中的五种组分全部替换为等重量的枸杞多糖，即为40.3mg的枸杞多糖。
对比例13
重复实施例1的过程，区别在于，不添加柚皮苷，并将柚皮苷的重量平均到其它组分，使其它组分用量比不变、且总组合物重量不变，具体地：
称取10.64mg甘草苷、11.04mg枸杞多糖、13.3mg芒果苷和5.32mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例14
重复实施例1的过程，区别在于，不添加芒果苷，并将芒果苷的重量平均到其它组分，使其它组分用量比不变、且总组合物重量不变，具体地：
称取13.3mg柚皮苷、10.64mg甘草苷、11.04mg枸杞多糖和5.32mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例15
重复实施例1的过程，区别在于，不添加甘草苷，并将甘草苷的重量平均到其它组分，使其它组分用量比不变、且总组合物重量不变，具体地：
称取12.48mg柚皮苷、10.35mg枸杞多糖、12.48mg芒果苷和5mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例16
重复实施例1的过程，区别在于，不添加枸杞多糖，并将枸杞多糖的重量平均到其它组分，使其它组分用量比不变、且总组合物重量不变，具体地：
称取12.59mg柚皮苷、10.075mg甘草苷、12.59mg芒果苷和5.0375mg橄榄苦苷，混合均匀，得到组合物。
对比例17枸杞多糖的提取
称取10g干燥的枸杞，粉碎过80目筛，得枸杞粉，于500mL热水中提取2h；
过滤后加入100mL氯仿和20mL正丁醇，剧烈镇摇15min，3000rpm离心25min，取上清液；
将上清液浓缩至50mL，搅拌下加入3倍体积的95％乙醇中，室温静置1h，3000rpm离心10min，固形物多次进行95％乙醇洗涤以及离心处理，最后真空干燥得枸杞多糖。
对比例18
重复实施例1的过程，区别在于：采用对比例17制备的枸杞多糖替换实施例1’的枸杞多糖。
实验例1小鼠记忆能力检测
将实施例1～5以及对比例1～16的组合物分别进行如下处理：
将组合物放入EP管内，然后向EP管内加50mL生理盐水，混匀，再向EP管内加1mL吐温80，得到组合物水溶液。
取90只ICR雄性小鼠(来自温州医科大学实验动物中心)，平均体重18-20g，在该实验例中，照料和使用老鼠程序是与温州医科大学附属第一医院道德伦理委员会主张的一致。
将小鼠分为正常组(5只)，模型组(5只)，给药组(80只)，其中，对模型组和给药组的每只小鼠通过颈部皮下注射D-半乳糖(500mg·kg-1溶于生理盐水中)0.2mL，每日一次，共8周致小鼠脑老化，建立脑老化模型，正常组的每只小鼠皮下注射同等剂量生理盐水。
对于给药组的小鼠，在造模后连续给药1mL(即1mL组合物水溶液，具体地，每五只小鼠给一种药)30d，每天灌胃1次，每次0.2mL(正常组、模型组灌胃等容积生理盐水)。给药结束后对三组小鼠均进行学习能力检测，进行记忆能力检测。
Morris水迷宫(温州医科大学药学院脑研究所提供)。
正式Morris水迷宫试验前，小鼠每天训练1次，连续训练4天。训练及正式试验期间，迷宫外参照物保持不变。训练时将小鼠面向池壁放入水中，训练其找到平台。训练时间60s，60s内未找到平台者，将其引至平台，使之站立台上15s，产生记忆。第5天正式试验，自动录像记录系统记录大鼠找到平台的时间(游泳持续时间)、游泳路径长度，同时确定搜索策略。
其中：
(1)采用实施例1以及对比例1～8得到的组合物给药的检测结果如表1和图1～2所示。
表1：
从表1和图1～2的数据直接观看，可以发现：
(1.1)正常小鼠(正常组)较D半乳糖诱导脑老化小鼠(模型组)在水迷宫实验中逃避潜伏期时间结果相比，逃避潜伏期时间明显低于D半乳糖诱导脑老化小鼠；治疗组小鼠(给药组)的逃避潜伏期时间结果都比D半乳糖诱导脑老化小鼠逃避潜伏期时间短，说明组合物中5种组分的联合使用能够有效改善D半乳糖诱导的小鼠脑老化情况，达到改善记忆力的目的；
尤其是采用实施例1的组合物进行治疗时，逃避潜伏期时间最短，远低于模型组，而几乎接近于正常组。
(1.2)正常小鼠较D半乳糖诱导脑老化小鼠在水迷宫实验中平均游泳速度结果相比，平均游泳速度明显快于D半乳糖诱导脑老化小鼠，治疗组小鼠(给药组)的平均游泳速度结果都比D半乳糖诱导脑老化小鼠平均游泳速度快，从这一方面也说明5种药物的联合使用在一定程度上能够改善D半乳糖诱导的小鼠脑老化情况；
尤其是当采用实施例1的组合物进行治疗时，游泳速度最快，远高于模型组，甚至稍高于正常组。
(1.3)具体分析实施例1与对比例1，其中，两者区别在于对比例1采用了高剂量的芒果柑，但是，无论是时间还是速度，对比例1的效果均远不如实施例1，说明对比例1中加了高剂量的芒果柑不但没有提高改善记忆的效果，反而使效果降低，说明，本发明所述组合物各组分间存在交互作用、彼此之间协同增效，而不是单一的加和作用。
(1.4)具体分析实施例1与对比例2，其中，两者区别在于对比例2采用了高剂量的柚皮柑，两者的速度效果相差不大，但是，对比例2的时间远高于实施例1，说明对比例2中加了高剂量的柚皮柑不但没有提高改善记忆的效果，反而使效果降低，也说明，本发明所述组合物各组分间是协同增效。
(1.5)具体分析对比例3与对比例4，其中，两者区别在于对比例3采用了高剂量的甘草苷，发现，对比例3的时间低于对比例4、速度高于对比例4，说明，甘草苷用量太低会影响组合物改善记忆的效果。
(2)采用实施例1～5、对比例9～16以及对比例18得到的组合物给药的检测结果如表2。
表2：
(2.1)比较实施例1～5以及对比例9～12，发现，采用实施例给药的效果明显优于对比例9～12，说明采用同等量的单组份进行给药，其改善记忆的效果远低于本发明所述组合物改善记忆的效果，再一次说明，本发明所述组合物中各组分并不是单一的加和关系，而是协同增效。
(2.2)比较实施例1～5以及对比例13～16，发现，采用实施例给药的效果明显优于对比例13～16，说明，本发明所述组合物中各组分都是至关重要的，所述组合物之所以具有优异的改善记忆力的效果，原因在于多个组分之间的相互作用。
(2.3)比较实施例1与对比例18发现，采用现有技术公开的枸杞多糖提取方法得到的枸杞多糖(对比例17)在应用组合物(对比例18)时，组合物提高记忆的效果要低于实施例1，说明采用本发明所述方法提取得到的枸杞多糖在应用于所述组合物时，提高记忆的性能更优异。
Y迷宫正确率实验结果(温州医科大学提供药学院脑研究所提供)。
采用Y迷宫进行自发选择性行为学实验，用以判断小鼠学习记忆能力。小鼠被置于一个臂端面朝中心，允许每只小鼠自由探索8min。每次进入臂内的标准为：小鼠身体100％进入臂内记为一次进入。一次成功的探索定义为：在一系列探索中，动物依次进入3个不同的臂内(如：3—1—2，2—3—1，1—3—2)。正确率(％)＝正确选择次数/(总穿臂次数-2)×100％。结果如图3所示。
由图3的数据直接观看可以发现：
(1)正常小鼠(正常组)较D半乳糖诱导脑老化小鼠(模型组)在Y迷宫实验中正确率结果相比，正交率明显高于D半乳糖诱导脑老化小鼠(P<0.05)；
(2)治疗组小鼠(给药组实施例1)的正交率结果比D半乳糖诱导脑老化小鼠正交率高(P<0.05)，接近正常组。
以上结合优选实施方式和范例性实例对本发明进行了详细说明。不过需要声明的是，这些具体实施方式仅是对本发明的阐述性解释，并不对本发明的保护范围构成任何限制。在不超出本发明精神和保护范围的情况下，可以对本发明技术内容及其实施方式进行各种改进、等价替换或修饰，这些均落入本发明的保护范围内。本发明的保护范围以所附权利要求为准。
Claims (9)
1.一种用于改善记忆力的水果成分组合物，其特征在于，所述组合物包括甘草苷、枸杞多糖和任选的橄榄苦苷。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，组合物中各组分的重量配比如下：
甘草苷 5～15份；
枸杞多糖 2～15份；
橄榄苦苷 0～10份。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，组合物中各组分的重量配比如下：
甘草苷 6～12份；
枸杞多糖 6～12份；
橄榄苦苷 2～5份。
4.根据权利要求1至3之一所述的组合物，其特征在于，所述枸杞多糖通过包括以下步骤的方法提取：
步骤1、对枸杞依次进行干燥、粉碎和过筛处理，得到枸杞粉；
步骤2、将步骤1得到的枸杞粉于有机溶剂中进行回流脱脂处理，然后过滤、烘干得到粗产物；
步骤3、将粗产物于复合酶水溶液中进行提取，提取结束后抽滤、静置，取上层清液；
步骤4、对步骤3得到的上层清液进行浓缩，然后于有机溶剂中沉淀，过滤，得到所述枸杞多糖。
5.根据权利要求1至4之一所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括芒果苷。
6.根据权利要求1至5之一所述的组合物，其特征在于，所述芒果苷的用量为5～15份。
7.根据权利要求1至6之一所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括柚皮苷。
8.根据权利要求1至7之一所述的组合物，其特征在于，所述柚皮苷的用量为5～20份。
9.根据权利要求1至8之一所述组合物用于制备改善记忆力的药物的用途。
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