CN110684370A - 一类基于香豆素骨架的近红外荧光染料及其合成方法 - Google Patents
一类基于香豆素骨架的近红外荧光染料及其合成方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110684370A CN110684370A CN201811567875.4A CN201811567875A CN110684370A CN 110684370 A CN110684370 A CN 110684370A CN 201811567875 A CN201811567875 A CN 201811567875A CN 110684370 A CN110684370 A CN 110684370A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fluorescent dye
- formula
- coumarin
- compound
- alkyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B57/00—Other synthetic dyes of known constitution
- C09B57/02—Coumarine dyes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
- C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
- C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
- C09K2211/1029—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
- C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
- C09K2211/1088—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing oxygen as the only heteroatom
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明公开了一类基于香豆素结构的近红外荧光染料及其合成方法,该荧光染料的结构通式为式中R代表C1烷基、X‑代表PF6 ‑,或者R代表C2~C12烷基中任意一种,X‑代表Br‑。本发明将4‑(二乙氨基)香豆素通过Vilsmeier‑Haack反应合成4‑(二乙氨基)香豆素醛,再依次与氰基吡啶、不同碳链长度的卤代烷烃反应即得到系列荧光染料。本发明荧光染料通过对铵盐侧链的调控可以特异性的标记活细胞中的亚细胞器,而且R代表C3烷基的荧光染料可实现标记过程的快速染色以及免洗;荧光染料的最大发射波长处于红色发光区域,可显著消除细胞成像中自荧光现象的干扰;此外R代表C9、C12烷基的荧光染料具有产生单线态氧的性质,在细胞及细菌的光动力治疗中有一定的应用潜能。
Description
技术领域
本发明属于生物医学用荧光染料技术领域,具体涉及一类具有近红外发光性质,以及该荧光染料的制备方法。
背景技术
细胞质膜是活细胞与其环境之间的二维边界。与细胞质膜相关的生命活动包括动态膜重塑、信号转导和营养转运,这些都是细胞生物学家的研究热点。为了研究这些细胞进程,开发亚细胞荧光成像探针是非常重要的,它可以识别细胞质膜并记录动态变化。到目前为止,只有少量的商业荧光染料可用来跟踪细胞膜,如DiO3和DiI。然而目前大多数商业荧光染料发射波长处于可见光区域,会产生背景荧光,导致低信噪比(S/N)。而红色发光的荧光染料不但可以克服这一缺点,而且还可避免激光光源对细胞组织的损伤。因此,设计合成一种具有红色发光性质的荧光染料至关重要。
线粒体是细胞的“能量工厂”,它利用氧气进行氧化磷酸化产生三磷酸腺苷(ATP),为细胞及生命体提供能量。同时,伴随着呼吸链中电子的泄漏,多种活性氧物种(ROS)在线粒体内快速产生。线粒体ROS在维持氧化还原平衡、参与调控细胞的增殖、分化、凋亡等行为方面发挥重要作用。当ROS水平超过机体抗氧化防御能力时,会导致疾病的发生。因此,发展准确检测线粒体ROS的方法,对深入探究ROS的细胞功能调控及相关疾病的发生发展意义重大。由于ROS存在浓度低、寿命短、反应活性高等特点,对其进行精准检测是化学、生物学及医学领域的一大挑战。荧光成像技术具有时空分辨率高、生物相容性好、灵敏度高等显著优势,成为实时检测细胞及活体内ROS的有力工具。
发明内容
本发明的目的是提供一类基于香豆素骨架的近红外荧光染料,以及该荧光染料的制备方法。
针对上述目的,本发明所采用的荧光染料的结构通式如下所示:
式中R代表C1烷基、X-代表PF6 -,或者R代表C2~C12烷基中任意一种,X-代表Br-。
上述基于香豆素骨架的近红外荧光染料的制备方法如下:
1、将三氯氧磷与N,N-二甲基甲酰胺按摩尔比为1:1.1~1.3室温反应后,加入式I所示的4-(二乙氨基)香豆素的N,N-二甲基甲酰胺溶液,在50~70℃下反应20~24小时,分离纯化产物,得到式II化合物。
2、以乙醇为溶剂,将式II化合物、4-乙腈吡啶盐酸盐、三乙胺在40~50℃下反应10~12小时,分离纯化产物,得到式III化合物。
3、以N,N-二甲酰亚胺为溶剂,将式III化合物、碘甲烷在70~90℃下反应8~10小时,分离纯化产物,将其溶于乙腈中,加入六氟磷酸钾,在室温下反应10~12小时,反应完成后过滤,得到R为C1烷基、X-为PF6 -的荧光染料;
或者以N,N-二甲酰亚胺为溶剂,将式III化合物、卤代烷烃在70~90℃下反应8~10小时,分离纯化产物,得到R为C2~C12烷基中任意一种、X-为Br-的荧光染料;其中所述的卤代烷烃为C2~C12的溴代烷烃中任意一种。
上述步骤1中,优选所述式I化合物与三氯氧磷的摩尔比为1:8~9。
上述步骤2中,优选所述式II化合物、4-乙腈吡啶盐酸盐、三乙胺的摩尔比为1:2~3:3~5。
上述步骤3中,优选所述式III化合物与碘甲烷、六氟磷酸钾的摩尔比为1:8.5~12:8.5~12,所述式III化合物与卤代烷烃的摩尔比为1:8.5~12。
本发明的有益效果如下:
1、本发明利用香豆素简单骨架,首先以N,N-二乙基作为供电基团,以氰基吡啶作为吸电基团,形成分子内推拉电子效应的体系,再通过不同烷基侧链修饰得到目标化合物。这些化合物均具有红光发射性质,在荧光成像过程中可显著避免自荧光的干扰,同时通过侧链调节,可对不同的亚细胞结构进行定位标记。
2、本发明荧光染料的结构式中R代表C9和C12烷基时具有产生单线态氧特性,可有效产生单线态氧,从而应用于光动力治疗。利用这种特性,还可进行抑菌杀菌实验。
附图说明
图1是实施例1~5制备的荧光染料在二甲基亚砜中的紫外吸收光谱图。
图2是实施例1~5制备的荧光染料在二甲基亚砜中的荧光光谱图。
图3是实施例1制备的荧光染料的细胞成像图。
图4是实施例2制备的荧光染料的细胞成像图。
图5是实施例3制备的荧光染料的细胞成像图。
图6是实施例4制备的荧光染料的细胞成像图。
图7是实施例5制备的荧光染料的细胞成像图。
图8是实施例2制备的荧光染料的细胞免洗成像图。
图9是实施例2制备的荧光染料标记细胞膜随时间的细胞成像图。
图10是实施例1制备的荧光染料在去离子水中白光照射过程中的紫外可见吸收光谱图。
图11是实施例2制备的荧光染料在去离子水中白光照射过程中的紫外可见吸收光谱图。
图12是实施例3制备的荧光染料在去离子水中白光照射过程中的紫外可见吸收光谱图。
图13是实施例4制备的荧光染料在去离子水中白光照射过程中的紫外可见吸收光谱图。
图14是实施例5制备的荧光染料在去离子水中白光照射过程中的紫外可见吸收光谱图。
图15是实施例1~5制备的荧光染料和无荧光染料存在时在去离子水中白光照射过程中的378nm处吸收的相对强度图。
图16是实施例5制备的荧光染料在白光照射下对大肠杆菌的杀菌效果图。
图17是实施例5制备的荧光染料在白光照射下对金黄葡萄杆菌的杀菌效果图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明,但本发明的保护范围不仅限于这些实施例。
实施例1
1、将1.2mL(15.6mmol)N,N-二甲基甲酰胺加入1.23mL(13.25mmol)三氯氧磷中,室温搅拌30min后加入5mL含339mg(1.56mmol)式I-1所示的4-(二乙氨基)香豆素的N,N-二甲基甲酰胺溶液,在60℃下搅拌反应24小时,反应完后将反应液倒入冰水中,用乙酸乙酯和饱和食盐水萃取反应液,合并有机相,干法柱层析(以石油醚与乙酸乙酯体积比为30:1的混合液为洗脱剂),得到式II化合物。
2、将98mg(0.4mmol)式II化合物、155mg(1mmol)4-乙腈吡啶盐酸盐溶于2mL乙醇中,加入221μL(1.6mmol)三乙胺,在40℃下搅拌反应12小时,过滤得到式III化合物。
3、将104mg(0.3mmol)式III化合物溶于3mL N,N-二甲基甲酰胺中,加入186μL(3mmol)碘甲烷,80℃搅拌反应12小时,反应完后用二氯甲烷和饱和食盐水萃取反应液,合并有机相,旋干后,溶于2mL乙腈中,加入552mg(3mmol)六氟磷酸钾,置换反应完成后旋干,干法柱层析(以二氯甲烷与甲醇体积比为40:1的混合液为洗脱剂),得到式IV-1所示的荧光染料,其产率为65%。
所得产物的结构表征数据为:1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.92(d,J=6.2Hz,2H),8.84(s,1H),8.39(s,1H),8.31(d,J=6.1Hz,2H),7.66(d,J=9.0Hz,1H),6.88(d,J=8.6Hz,1H),6.69(s,1H),4.30(s,3H),3.56(d,J=6.8Hz,4H),1.17(t,J=6.7Hz,6H).
实施例2
本实施例的步骤1、步骤2与实施例1相同。本实施例的步骤3中,将104mg(0.3mmol)式III化合物溶于4mL N,N-二甲基甲酰胺中,加入272μL(3mmol)溴丙烷,80℃搅拌反应12小时,反应完后用二氯甲烷和饱和食盐水萃取反应液,合并有机相,旋干后干法柱层析(以二氯甲烷与甲醇体积比为40:1的混合液为洗脱剂),得到式IV-2所示的荧光染料,其产率为75%。
实施例3
本实施例中,用等摩尔量的溴己烷替换实施例2中的溴丙烷,其他步骤与实施例2相同,得到式IV-3所示的荧光染料,其产率为78%。
所得产物的结构表征数据为:1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.02(d,J=6.9Hz,2H),8.83(s,1H),8.37(d,J=16.6Hz,1H),8.31(d,J=6.9Hz,2H),7.66(d,J=9.1Hz,1H),6.88(dd,J=9.1,2.2Hz,1H),6.68(d,J=2.0Hz,1H),4.55(t,J=7.4Hz,2H),3.55(q,J=6.9Hz,4H),1.89(d,J=2.5Hz,2H),1.28(s,5H),1.16(t,J=7.0Hz,5H),0.85(t,J=6.6Hz,3H).
实施例4
本实施例中,用等摩尔量的溴壬烷替换实施例2中的溴丙烷,其他步骤与实施例2相同,得到式IV-4所示的荧光染料,其产率为70%。
所得产物的结构表征数据为:1H NMR(600MHz,CDCl3)δ9.26(d,J=6.6Hz,2H),8.99(s,1H),8.44(s,1H),8.13(d,J=6.6Hz,2H),7.48(d,J=9.1Hz,1H),6.72-6.69(m,1H),6.50(d,J=1.9Hz,1H),4.94(s,2H),3.53(q,J=7.1Hz,4H),2.05(s,2H),1.40(s,2H),1.35(s,2H),1.30(t,J=7.2Hz,6H),1.25(s,8H),0.87(t,J=7.0Hz,3H).
实施例5
本实施例中,用等摩尔量的溴十二烷替换实施例2中的溴丙烷,其他步骤与实施例2相同,得到式IV-5所示的荧光染料,其产率为68%。
所得产物的结构表征数据为:1H NMR(600MHz,CDCl3)δ9.25(d,J=6.6Hz,9H),9.00(s,4H),8.44(s,4H),8.12(d,J=6.5Hz,9H),7.48(d,J=9.1Hz,5H),6.70(d,J=9.2Hz,5H),6.50(d,J=2.2Hz,5H),4.94(t,J=7.2Hz,11H),3.54(q,J=7.2Hz,19H),2.04(d,J=7.5Hz,10H),1.40(s,12H),1.34(s,12H),1.30(t,J=7.1Hz,32H),1.24(s,68H),0.87(t,J=7.0Hz,16H).
发明人对实施例1~5制备的荧光染料进行了性能测试,具体测试如下:
1、光物理性质测定
以二甲基亚砜为溶剂,将荧光染料配制成浓度为2×10-5mol/L的荧光染料溶液,采用普析紫外可见分光光度计、日立F-7000荧光分光光度计测试所得溶液的紫外吸收光谱和荧光发射光谱,结果见图1~2。由图可见,本发明实施例1~5得到的荧光染料的最大发射波长均处于660nm左右,均具有近红外发射性质。
2、细胞成像实验
(1)共染
使用HeLa细胞进行测试,用胰酶消化对数期生长的HeLa细胞,经5分钟离心之后,移除上层清液,加入新鲜的DMEM不完全高糖培养液1.0mL,制成单细胞悬浮液,并计数以1×104个细胞/mL DMEM不完全高糖培养液2.0mL接种于35mm培养皿上,培养48小时,并在一定时间段观察细胞形态。待细胞可用于细胞成像时,用PBS缓冲溶液洗去漂浮的细胞,并分别加入配制好的10μmol/L DiO的DMEM溶液(实施例4~5加入配制好的500nmol/mL的Mito-tracker Green的DMEM溶液),在37℃的细胞培养箱中孵化培养10分钟,然后小心移走培养液,加入配制好的10mmol/L实施例1~5制备的荧光染料的DMEM溶液,在37℃细胞培养箱中孵化培养10分钟。待样品培养之后,小心移走培养液,并用PBS溶液洗一次,并加不含酚红的DMEM溶液,在奥林巴斯荧光共聚焦显微镜下进行细胞成像。结果见图3~7,图中A为商业染料DiO/Mito-tracker Green对细胞的荧光成像图,B为本发明荧光染料的细胞荧光成像图,D为细胞明场成像,C为图像A、图像B重合后的叠加图。
由图3~7中叠加的图片可以清楚的看出,实施例1、2制备的荧光染料与商业细胞膜染料的重合度很高,说明实施例1、2制备的荧光染料对细胞膜具有特异性标记功能,实施例4、5制备的荧光染料与商业线粒体染料的重合度很高,而实施例3制备的荧光染料则不具备特异性标记的性质。
(2)免洗
使用Hela细胞进行测试,用胰酶消化对数期生长的Hella细胞,经5分钟离心之后,移除上层清液,加入新鲜的DMEM不完全高糖培养液1.0mL,制成单细胞悬浮液,并计数以1×104个细胞/mL DMEM不完全高糖培养液2.0mL接种于35mm培养皿上,培养48小时,并在一定时间段观察细胞形态。待细胞可用于细胞成像时,用PBS缓冲溶液洗去漂浮的细胞,并分别加入配制好的10μmol/L实施例2制备的荧光染料不含酚红的DMEM溶液,在37℃的细胞培养箱中孵化培养10分钟,不需要洗直接在奥林巴斯荧光共聚焦显微镜下进行细胞成像。成像结果见图8。由图可见,实施例2制备的荧光染料在不经洗涤的过程进行成像后,并无背景干扰,仍可很好地对细胞膜进行染色。
(3)快速染色
使用Hela细胞进行测试,用胰酶消化对数期生长的Hella细胞,经5分钟离心之后,移除上层清液,加入新鲜的DMEM不完全高糖培养液1.0mL,制成单细胞悬浮液,并计数以1×104个细胞/mL DMEM不完全高糖培养液2.0mL接种于35mm培养皿上,培养48小时,并在一定时间段观察细胞形态。待细胞可用于细胞成像时,用PBS缓冲溶液洗去漂浮的细胞,并分别加入配制好的10μmol/L实施例2制备的荧光材料的不含酚红的DMEM溶液,在奥林巴斯荧光共聚焦显微镜下随时间在原位进行细胞成像。成像结果见图9。由图可见,加入实施例2制备的荧光材料后,在10秒时即可很好的对细胞膜进行荧光成像。
3、单线态氧产生性能测试
取15μL 2×10-5mol/L荧光染料的二甲基亚砜溶液、15μL 2×10-2mol/L 9,10-蒽基-双(亚甲基)二丙二酸(ABDA)的二甲基亚砜溶液加入2970μL去离子水中,在光照0min、1min、5min、10min、20min时进行紫外吸收光谱扫描。空白组取15μL二甲基亚砜溶液、15μL 2×10-2mol/L ABDA的二甲基亚砜溶液加入2970μL去离子水中,在光照0min、1min、5min、10min、20min时进行紫外吸收光谱扫描。结果见图10~15。由图可见,本发明实施例4和5制备的荧光染料与空白组对比,在光照一定时间时ABDA在378nm处的紫外吸收峰明显降低,说明实施例4和5制备的荧光染料在光照条件下均可产生单线态氧,从而使得ABDA的紫外吸收峰降低。
4、抑菌杀菌性能测试
将实施例5的荧光染料溶于二甲基亚砜中,配制成1×10-2mol/L的荧光染料溶液。
空白组:取1μL二甲基亚砜溶液于1mL含1×104个细菌的大肠杆菌或金黄葡萄球菌的0.9%NaCl水溶液中,震荡摇匀后孵化30分钟,无白光照射。
空白光照组:取1μL二甲基亚砜溶液于1mL含1×104个细菌的大肠杆菌或金黄葡萄球菌的0.9%NaCl水溶液中,震荡摇匀后孵化30分钟,25mW/cm2白光照射30分钟。
实验组:取1μL荧光染料溶液于1mL含1×104个细菌的大肠杆菌或金黄葡萄球菌的0.9%NaCl水溶液中,震荡摇匀后孵化30分钟,无白光照射。
光照实验组:取1μL荧光染料溶液于1mL含1×104个细菌的大肠杆菌或金黄葡萄球菌的0.9%NaCl水溶液中,震荡摇匀后孵化30分钟,25mW/cm2白光照射30分钟。
随后从四组细菌溶液中各取50μL分别加入2mL固体培养基上,用涂布器均匀涂抹。将培养皿放置于37℃恒温培养箱中,14小时后取出培养皿,结果见图16~17。图16是该荧光染料对大肠杆菌的杀菌效果图,图17是该荧光染料对金黄葡萄球菌的杀菌效果图,其中A~D图分别为空白组、空白光照组、实验组、光照组对应的实验结果。由图可见,无论是大肠杆菌还是金黄葡萄球菌,经实施例5荧光染料孵育且光照后,培养皿中均无菌落产生;经实施例5荧光染料孵育而无光照,培养皿中仍存在大量菌落;而无实施例5荧光染料孵育无论是光照或是不光照,培养皿中仍存在过量的菌落。由此说明实施例5的荧光染料可作为很好的光敏材料在光照条件下应用于杀菌抑菌方面。
Claims (6)
2.一种权利要求1所述的荧光染料的制备方法,其特征在于:
(1)将三氯氧磷与N,N-二甲基甲酰胺按摩尔比为1:1.1~1.3室温反应后,加入式I所示的4-(二乙氨基)香豆素的N,N-二甲基甲酰胺溶液,在50~70℃下反应20~24小时,分离纯化产物,得到式II化合物;
(2)以乙醇为溶剂,将式II化合物、4-乙腈吡啶盐酸盐、三乙胺在40~50℃下反应10~12小时,分离纯化产物,得到式III化合物;
(3)以N,N-二甲酰亚胺为溶剂,将式III化合物、碘甲烷在70~90℃下反应8~10小时,分离纯化产物,将其溶于乙腈中,加入六氟磷酸钾,在室温下反应10~12小时,反应完成后过滤,得到R为C1烷基、X-为PF6 -的荧光染料;
或者以N,N-二甲酰亚胺为溶剂,将式III化合物、卤代烷烃在70~90℃下反应8~10小时,分离纯化产物,得到R为C2~C12烷基中任意一种、X-为Br-的荧光染料;其中所述的卤代烷烃为C2~C12的溴代烷烃中任意一种。
3.根据权利要求2所述的荧光染料的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述式I化合物与三氯氧磷的摩尔比为1:8~9。
4.根据权利要求2所述的荧光染料的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述式II化合物、4-乙腈吡啶盐酸盐、三乙胺的摩尔比为1:2~3:3~5。
5.根据权利要求2所述的荧光染料的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述式III化合物与碘甲烷、六氟磷酸钾的摩尔比为1:8.5~12:8.5~12。
6.根据权利要求2所述的荧光染料的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述式III化合物与卤代烷烃的摩尔比为1:8.5~12。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201811567875.4A CN110684370A (zh) | 2018-12-21 | 2018-12-21 | 一类基于香豆素骨架的近红外荧光染料及其合成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201811567875.4A CN110684370A (zh) | 2018-12-21 | 2018-12-21 | 一类基于香豆素骨架的近红外荧光染料及其合成方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN110684370A true CN110684370A (zh) | 2020-01-14 |
Family
ID=69107161
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201811567875.4A Pending CN110684370A (zh) | 2018-12-21 | 2018-12-21 | 一类基于香豆素骨架的近红外荧光染料及其合成方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN110684370A (zh) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111217798A (zh) * | 2020-02-24 | 2020-06-02 | 山西大学 | 一种香豆素-喹啉衍生物及其合成方法与应用 |
CN111560026A (zh) * | 2020-05-11 | 2020-08-21 | 苏州大学 | 高光学稳定性细胞膜荧光标记物及其制备方法与应用 |
CN112079822A (zh) * | 2020-09-22 | 2020-12-15 | 山西大学 | 香豆素-氰基吡啶衍生物在比率检测二氧化硫中的应用 |
CN112079858A (zh) * | 2020-09-24 | 2020-12-15 | 山西大学 | 一种香豆素衍生物Th-HM1及其合成方法和应用 |
CN113501816A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-10-15 | 深圳市罗湖区人民医院 | 一种活性光敏剂及其制备方法和应用 |
-
2018
- 2018-12-21 CN CN201811567875.4A patent/CN110684370A/zh active Pending
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111217798A (zh) * | 2020-02-24 | 2020-06-02 | 山西大学 | 一种香豆素-喹啉衍生物及其合成方法与应用 |
CN111560026A (zh) * | 2020-05-11 | 2020-08-21 | 苏州大学 | 高光学稳定性细胞膜荧光标记物及其制备方法与应用 |
CN111560026B (zh) * | 2020-05-11 | 2021-08-27 | 苏州大学 | 高光学稳定性细胞膜荧光标记物及其制备方法与应用 |
CN112079822A (zh) * | 2020-09-22 | 2020-12-15 | 山西大学 | 香豆素-氰基吡啶衍生物在比率检测二氧化硫中的应用 |
CN112079858A (zh) * | 2020-09-24 | 2020-12-15 | 山西大学 | 一种香豆素衍生物Th-HM1及其合成方法和应用 |
CN112079858B (zh) * | 2020-09-24 | 2021-09-28 | 山西大学 | 一种香豆素衍生物Th-HM1及其合成方法和应用 |
CN113501816A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-10-15 | 深圳市罗湖区人民医院 | 一种活性光敏剂及其制备方法和应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN110684370A (zh) | 一类基于香豆素骨架的近红外荧光染料及其合成方法 | |
Chang et al. | Bright fluorescent chemosensor platforms for imaging endogenous pools of neuronal zinc | |
Hu et al. | Multicolor monitoring of cellular organelles by single wavelength excitation to visualize the mitophagy process | |
Zhang et al. | A ratiometric lysosomal pH probe based on the coumarin–rhodamine FRET system | |
Dmitriev et al. | Optical probes and techniques for O 2 measurement in live cells and tissue | |
CN111263751A (zh) | 具有聚集诱导发光特性的水溶性化合物 | |
US10351707B2 (en) | Water-soluble iron ion fluorescent probe and preparation method thereof | |
CN107098923A (zh) | 一类红光与近红外发射溶酶体靶向荧光染料及其制备方法与用途 | |
Zhu et al. | Effect of substituents on Stokes shift of BODIPY and its application in designing bioimaging probes | |
CN105238093B (zh) | 一类两亲性吲哚方酸菁染料及其长效标记溶酶体的应用 | |
KR20120085100A (ko) | 이광자 형광 프로브를 이용한 미토콘드리아 내 아연 활성의 영상화 방법 및 이의 제조방법 | |
Song et al. | A turn-on fluorescent probe for Au 3+ based on rodamine derivative and its bioimaging application | |
Chisholm et al. | Photoactivated cell-killing involving a low molecular weight, donor–acceptor diphenylacetylene | |
Xu et al. | A fast-responsive two-photon fluorescent turn-on probe for nitroreductase and its bioimaging application in living tissues | |
Sun et al. | Near-infrared dual-functional AIEgens for lipid droplets imaging in multispecies and photodynamic therapy | |
Cong et al. | Ratiometric fluorescence detection of hydroxyl radical using cyanine-based binary nanoGUMBOS | |
CN112500386A (zh) | 基于吡啰红肟的近红外HClO荧光探针、制备及其应用 | |
Wang et al. | Design, synthesis, cell imaging, kinetics and thermodynamics of reaction-based turn-on fluorescent probes for the detection of biothiols | |
ES2718835T3 (es) | Colorantes fluorescentes en el infrarrojo cercano (NIR) | |
KR101584606B1 (ko) | 이광자 형광 프로브, 이의 제조방법 및 이를 이용한 pH 이미지화 방법 | |
Xiang et al. | The study of a curcumin-resembling molecular probe for the pH-responsive fluorometric assay and application in cell imaging | |
CN106634964B (zh) | 噁嗪类化合物在制备近红外荧光探针中的应用 | |
Wu et al. | Synthesis and properties of water-soluble 1, 9-dialkyl-substituted BF 2 azadipyrromethene fluorophores | |
Liu et al. | Fluorogenic probes for mitochondria and lysosomes via intramolecular photoclick reaction | |
CN115650897B (zh) | 一种同时检测Cys和线粒体粘度的荧光探针及其制备方法和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200114 |