CN110622720B - 一种烟草赤星病菌的接种方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种烟草赤星病菌接种方法，特别涉及生物化学领域。包括以下步骤：S1：获取供试菌株；S2：将所述供试菌株在培养基上用预设温度培养至预设时间得到分生孢子培养皿；S3：将所述分生孢子培养皿放置在4℃的环境中保存；S4：获取上年的赤星病菌病残株或烟叶并粉碎得到病株粉末；S5：所述分生孢子培养皿包括分生孢子和分生培养基，混合所述分生孢子、所述分生培养基和所述病株粉末得到接种孢子；S6：获取待接种植株，当所述待接种植株的下部叶开始成熟时，将所述接种孢子撒在所述待接种植株的中下部成熟叶片上。本方案解决了如何降低赤星病菌接种难度的技术问题，适用于赤星病菌接种。

Description

一种烟草赤星病菌的接种方法
技术领域
本发明涉及生物化学领域，特别涉及一种烟草赤星病菌接种方法。
背景技术
烟草赤星病菌是由链格孢菌引起的一种叶部真菌病害，为了防治烟草赤星病菌，需要进行人工接种。为了解决这一问题，现有技术在病圃田参加鉴定品种的四周保护行种植抗病品种净叶黄，待下部叶开始成熟时，将在培养基上分离培养好的赤星病菌病原菌制成1％的葡萄糖孢子悬浮液(孢子浓度为104～106个/mL)，喷雾接种于各供试品种的中下部成熟叶片，延期采收或不采收脚叶。于每次采收前一天进行病情调查，共调查3次。以感病品种G140、抗病品种净叶黄为对照。
其中烟草赤星病菌分生孢子悬浮液制备过程为将供试菌株在PDA平板上25℃培养7d，待充分产孢后，加1％无菌葡萄糖溶液10mL浸泡15min，用无菌棉签洗下孢子和菌丝体，经4层无菌纱布过滤，除去菌丝体，再用1％无菌葡萄糖溶液配成孢子悬浮液(浓度为1.0×105个mL－1)。
但是使用上述方案对烟草进行赤星病菌接种的难度大，且不利于大面积接种。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是如何降低赤星病菌接种难度。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种烟草赤星病菌接种方法，包括以下步骤：
S1：获取供试菌株；
S2：将所述供试菌株在培养基上用预设温度培养至预设时间得到分生孢子培养皿；
S3：将所述分生孢子培养皿放置在4℃的环境中保存；
S4：获取上年的赤星病菌病残株或烟叶并粉碎得到病株粉末；
S5：所述分生孢子培养皿包括分生孢子和分生培养基，混合所述分生孢子、所述分生培养基和所述病株粉末得到接种孢子；
S6：获取待接种植株，当所述待接种植株的下部叶开始成熟时，将所述接种孢子撒在所述待接种植株的中下部成熟叶片上。
本发明的有益效果是：本方案通过将接种孢子洒落在待接种植株的中下部成熟叶片上，相比喷雾接种发病效果更好，同时也方便操作，相比喷雾接种省工一半以上，利于大面积接种，从而解决了赤星病菌接种难度高的技术问题。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
进一步，步骤S2中，所述预设温度为25℃。
采用上述进一步方案的有益效果是，此温度利于供试菌株产孢。
进一步，步骤S2中，所述预设时间为7天。
采用上述进一步方案的有益效果是，7天后供试菌株在培养基上充分产孢。
进一步，步骤S2中，所述分生孢子培养皿的直径为90mm；步骤S5中，所述病株粉末为250gd。
进一步，步骤S2中，所述培养基为PDA平板。
本发明附加的方面的优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明实践了解到。
附图说明
图1为本发明烟草赤星病菌接种方法的实施例的方法流程图。
具体实施方式
以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例基本如附图1所示：
本实施例中烟草赤星病菌接种方法，包括以下步骤：
S1：获取供试菌株；
S2：将供试菌株在培养基上用预设温度培养至预设时间得到分生孢子培养皿；
S3：将分生孢子培养皿放置在4℃的环境中保存；
S4：获取上年的赤星病菌病残株或烟叶并粉碎得到病株粉末；
S5：分生孢子培养皿包括分生孢子和分生培养基，混合分生孢子、分生培养基和病株粉末得到接种孢子；
S6：获取待接种植株，当待接种植株的下部叶开始成熟时，将接种孢子撒在待接种植株的中下部成熟叶片上。
本发明的有益效果是：本方案通过将接种孢子洒落在待接种植株的中下部成熟叶片上，相比喷雾接种发病效果更好，同时也方便操作，相比喷雾接种省工一半以上，利于大面积接种，从而解决了赤星病菌接种难度高的技术问题。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
可选的，在一些其它实施例中，步骤S2中，预设温度为25℃。
此温度利于供试菌株产孢。
可选的，在一些其它实施例中，步骤S2中，预设时间为7天。
7天后供试菌株在培养基上充分产孢。
可选的，在一些其它实施例中，步骤S2中，分生孢子培养皿的直径为90mm；步骤S5中，病株粉末为250gd。
可选的，在一些其它实施例中，步骤S2中，培养基为PDA平板。
需要说明的是，上述各实施例是与上述各方法实施例对应的产品实施例，对于本实施例中各结构装置及可选实施方式的说明可以参考上述各方法实施例中的对应说明，在此不再赘述。
读者应理解，在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
所属领域的技术人员可以清楚地了解到，为了描述的方便和简洁，上述描述的装置和单元的具体工作过程，可以参考前述方法实施例中的对应过程，在此不再赘述。
以上，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到各种等效的修改或替换，这些修改或替换都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以权利要求的保护范围为准。

Claims (5)

1.一种烟草赤星病菌接种方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：获取供试菌株；
S2：将所述供试菌株在培养基上用预设温度培养至预设时间得到分生孢子培养皿；
S3：将所述分生孢子培养皿放置在4℃的环境中保存；
S4：获取上年的赤星病菌病残株或烟叶并粉碎得到病株粉末；
S5：所述分生孢子培养皿包括分生孢子和分生培养基，混合所述分生孢子、所述分生培养基和所述病株粉末得到接种孢子；
S6：获取待接种植株，当所述待接种植株的下部叶开始成熟时，将所述接种孢子撒在所述待接种植株的中下部成熟叶片上。
2.根据权利要求1所述的烟草赤星病菌接种方法，其特征在于：步骤S2中，所述预设温度为25℃。
3.根据权利要求1所述的烟草赤星病菌接种方法，其特征在于：步骤S2中，所述预设时间为7天。
4.根据权利要求1所述的烟草赤星病菌接种方法，其特征在于：步骤S2中，所述分生孢子培养皿的直径为90mm。
5.根据权利要求1所述的烟草赤星病菌接种方法，其特征在于：步骤S2中，所述培养基为PDA平板。
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