CN110591947A - 一株异养氨氧化菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

一株异养氨氧化菌及其应用,涉及环境污染物生物处理技术领域。来源于南美白对虾养殖海水,经人工富集培养、分离纯化得到,为革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA‑ZP17‑13。通过对革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA‑ZP17‑13基因组的测序,发现含有氨氮加氧酶基因。一株异养氨氧化菌的生物学特性为接触酶和氧化酶阳性,专性需氧,菌体形态呈杆状,菌落乳白色不透明,边缘规则,表面凸起,无晕环,直径1~2mm。可在含盐污水去除氨氮处理中的应用。

Description

一株异养氨氧化菌及其应用
技术领域
本发明涉及环境污染物生物处理技术领域,尤其是涉及一株异养氨氧化菌及其应用。
背景技术
上世纪90年代以来,我国近海的水产养殖业发展迅速,集约化高密度的养殖模式虽然带来了较高的养殖产出,却给养殖水体带来了大量的残留饲料和排泄物,导致水体的富营养化,甚至引起近海水华(Algal Blooms)的爆发,对近海水域的生态平衡造成了严重的破坏。
含氮化合物是生物代谢过程中必不可少的物质,在生命周期中起着极其重要的作用[1]。然而有些含氮化合物并不受欢迎,例如,氨氮。氨氮不仅能够引起水质问题,而且还具有刺鼻的气味[2]。因此,如何经济高效的去除养殖水体中的氨氮是养殖业安全的重要保障。生物脱氮是含氮污水处理的重要环节,是目前最经济、有效的脱氮方法。
异养硝化作用和异养硝化微生物其实早在1886年、1894年和1908年就有报道,但由于遭到Winogradsky(维诺格拉德斯基)的强烈批判和否定,在此后的很多年几乎没有研究报道[3]。Quastel和Scholefield等人以丙酮酸肟为底物进行试验,获得了能产亚硝酸盐的菌株[4-5],此后,研究者们猜想,可能存在有异养微生物可以氧化氨氮,即异养硝化作用。1983年Robertson首次从污水中分离纯化出异养硝化菌Thiosphaera pantotropha,并证实异养硝化菌在硝化作用过程中起着重要作用[6]。后来,Killham等人在研究土壤中硝化反应过程时发现异养菌也能起到硝化作用。后来将能够完成硝化作用的异养型微生物被命名成异养硝化菌[7]。异养硝化菌广泛存在于不同的环境中[8-12],主要存在于火山口、高山、河流、土壤、湿地和沼泽等[13-17]。目前,关于异养硝化方面的研究报道呈递增趋势。并有研究报道,一些硝化菌还同时兼具反硝化的功能。有些异养硝化菌可以在有氧存在的条件下,氧化氨氮或有机态氮,形成亚硝酸盐氮或硝酸盐氮[17]。由于异养硝化菌可利用底物十分宽泛,因而认为异养硝化反应硝化底物进行的更加彻底。目前,已报道的异养硝化菌有细菌、真菌、放线菌,其中细菌有报道的有Achromobacter、Alcaligenes、Acinetobacter、Bacillus、Pseudomonas、Rhodococcus等属,并多用于污水处理研究。
参考文献:
1.Kuypers MM,Marchant HK,Kartal B.The microbial nitrogen-cyclingnetwork.Nat Rev Microbiol 2018;16:263-276.
2.He T,Xie D,Li Z et al.Ammonium stimulates nitrate reduction duringsimultaneous nitrification and denitrification process by Arthrobacterarilaitensis Y-10.Bioresource Techn2017;239:66-73.
3.C.H.维诺德格拉德斯基著,阎逊初.土壤微生物学问题和方法:科学出版社;1962.72p.
4.Scholefield PG.Influence of organic Nitrogen Compounds onNitrifications in Soil.Nature1949;164:1068-1072.
5.Quastel PJH,F.RS,Scholefield,Amp DPG,Stevenson DJW.Oxidation ofpyruvic oxime by soil organisms.Nature 1950;166:940-942.
6.Berks BC,Richardson DJ,Robinson C et al.Purification andcharacterization of the periplasmic nitrate reductase from Thiosphaerapantotropha.Eur J Biochem 1994;220:117-124.
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12.Robertson LA,Kuenen JG,Kleijntjens R.Aerobic denitrification andheterotrophic nitrification by Thiosphaera pantotropha.Antonie vanLeeuwenhoek 1985;51:445-445.
13.Pedersen H,Dunkin KA,Firestone MK.The relative importance ofautotrophic and heterotrophic nitrification in a conifer forest soil asmeasured by 15N tracer and pool dilution techniques.Biogeochemistry 1999;44:135-150.
14.Papen H,Berg RV.A Most Probable Number method(MPN)for theestimation of cell numbers of heterotrophic nitrifying bacteria in soil.Plantand Soil 1998;199:123-130.
15.张光亚,陈美慈,韩如旸等.一株异养硝化细菌的分离及系统发育分析.微生物学报2003;43:156-161.
16.Fisher T,Fisher E,Appleman MD.Nitrite production by heterotrophicbacteria.J Gen Appl Microbio 1956;14:238-247.
17.White JP,Johnson GT.Aflatoxin Production Correlated withNitrification in Aspergillus flavus Group Species.Mycologia 1982;74:718-723.
发明内容
本发明的第一目的是提供一株异养氨氧化菌。
本发明的第二目的是提供一株异养氨氧化菌在含盐污水去除氨氮处理中的应用。
所述一株异养氨氧化菌来源于南美白对虾养殖海水,经人工富集培养、分离纯化得到;所述一株异养氨氧化菌为革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13,已于2019年03月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,邮编:100101,保藏中心登记入册编号:CGMCC No.17273。所述革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonasvenusta的菌株MA-ZP17-13 16S rDNA基因序列的GenBank注册号为MK371741,通过对革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13基因组的测序,发现含有氨氮加氧酶(amo)基因。所述一株异养氨氧化菌的生物学特性为接触酶和氧化酶阳性,专性需氧,菌体形态呈杆状,菌落乳白色不透明,边缘规则,表面凸起,无晕环,直径1~2mm。
所述革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13 16SrDNA基因序列为:
TTTAAACTGAAGAGTTTGATCATGGCTCAGATTGAACGCTGGCGGCAGGCCTAACACATGCAAGTCGAGCGGTAACAGGGGTAGCTTGCTACCCGCTGACGAGCGGCGGACGGGTGAGTAATGCATAGGAATCTGCCCGATAGTGGGGGATAACCTGGGGAAACCCAGGCTAATACCGCATACGTCCTACGGGAGAAAGGGGGCTCCGGCTCCCGCTATTGGATGAGCCTATGTCGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCAAGGCGACGATCCGTAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACATCGGGACTGAGACACGGCCCGAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGCCCTCGGGTTGTAAAGCACTTTCAGCGAGGAAGAACGCCTAGTGGTTAATACCCATTAGGAAAGACATCACTCGCAGAAGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCGCGTAGGTGGCTTGATAAGCCGGTTGTGAAAGCCCCGGGCTCAACCTGGGAACGGCATCCGGAACTGTCAAGCTAGAGTGCAGGAGAGGAAGGTAGAATTCCCGGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATCGGGAGGAATACCAGTGGCGAAGGCGGCCTTCTGGACTGACACTGACACTGAGGTGCGAAAGCGTGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCGACCAGCCGTTGGGTGCCTAGCGCACTTTGTGGCGAAGTTAACGCGATAAGTCGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTACTCTTGACATCCTGCGAACTTGTGAGAGATCACTTGGTGCCTTCGGGAACGCAGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTCCCGTAACGAGCGCAACCCTTGTCCTTATTTGCCAGCGCGTAATGGCGGGAACTCTAAGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGAGTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGCCGGTACAAAGGGTTGCGAGCTCGCGAGAGTCAGCTAATCCCGAAAAGCCGGTCTCAGTCCGGATCGGAGTCTGCAACTCGACTCCGTGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGTGAATCAGAATGTCACGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGACTGCACCAGAAGTGGTTAGCTTAACCTTCGGGAAAGCGATCACCACGGTGTGGTTCATGACTGGGGTGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTAGGGGAACCTGCGGCTGGATCACCTCCTTAAA
所述氨氮加氧酶(amo)基因序列如下:
GTGAAGGGCATCCGTGTCAGCGCAGAAAGTGCAAAGGGACTTGTAACATCGCTTACCGTAGGCGCCGTGGGCGGCATCGTTTTTCATCTCACCGGTTTACCGCTAGCCTGGATGCTAGGCCCGCTGATTGCCAACCTGCTGGTATCGGCAAAAGGAATTAGCGTTGGCGTACCGGAGCCGCTACGCAACGTATTTTTAGCGCTCATGGGGTTGGTGCTGGGCAGCCAAGTAACGCCGCAGCTTGCCCATCGTGTGCTGGACTGGCCAATCTCGGCGGCACTCTTGCTGGCCGGTGTTGCGGCATCCACCGCGGTTGCCGCGGCGTGGTATCGTCGCTGTGGCTTCGACCCGGTCAGTGCTTGGTTTGGTGCATCGCCAGGGGCCATGACGGCAATGATTATGCTTGGCGATCAATGTGGCGGCGACCCGCAACGCATCGCCATTGCCCAGTCACTACGTATTATTCTCGTTATCCTGTTTCTGCCTCCCCTGTTTTGGGCATTTGAAGGCGGTGCAGGTGACATTGGGCCAGCCCAAGCTACCCTTGAGCACGGCTGGATGCTGCTCACTATTCCTTTCTTATTACCGGTGGGCCGGTGGCTGCGCATTCCAAGTTCGGCGTTACTTGCGCCGCTTATTATGGCGGCCTTGCTCTCTGGGTTTGGGCTGGCCAGCCTTACCTTGCCTAGTTGGGGAATGAACCTCATGTTATGGGTGTTGGGTAGCGCGATTGGCTCGCGTTTTCAAGGCATGACACGGCGCCTGCTCGGGCGTTATTTATGGCAGTCGGGGGTGGCGACGCTGCTGGCACTGGTGGTGTTAGCACTATTTGCTGAACTGATCCATCAGCTGTTGGGCGTGCGCCGTGACGTAGCCCTATTAGCGCTGGCTCCCGGTGGCATCGGTGAAATGGCTATTCTTGCTGTTGCGCTGAATATCGATCCCGTGTTTGTAGCATTTCACCACTTACTGCGTATGGTCACACTGATGATCGTGGCTCCTTTTTGGGCTCGTTGGCTATTGCGTCGCCACTCTTCTTAA
所述一株异养氨氧化菌的最适生长条件为:pH=7.0~8.0,温度28~37℃。
所述一株异养氨氧化菌在含盐污水去除氨氮处理中的应用,所述含盐污水可为含氨氮污染物的高盐污水。
所述一株异养氨氧化细菌可在水体生物处理和修复中的应用,一株异养氨氧化菌在异养条件下可以进行氨氧化作用,在10℃下培养3天,氨氮的去除率可以达到88.8%。通过对该菌进行基因组完成图测序,发现该菌含有氨氮加氧酶(amo)基因。该菌可在低温(10℃)好氧异养条件下高效去除氨氮,可应用于含盐废水及养殖污水的生物强化处理与修复,应用前景良好。
附图说明
图1为菌株MA-ZP17-13在异养硝化培养基中氨氮去除情况图。
图2为菌株MA-ZP17-13的系统进化树图。
图3为菌株MA-ZP17-13的异养硝化速率测定图。
具体实施方式:
以下实施例将结合附图对本发明作进一步的说明。
所述一株异养氨氧化菌来源于南美白对虾养殖海水,经人工富集培养、分离纯化得到;所述一株异养氨氧化菌为革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13,已于2019年03月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,邮编:100101,保藏中心登记入册编号:CGMCC No.17273。所述革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonasvenusta的菌株MA-ZP17-13 16S rDNA基因序列的GenBank注册号为MK371741,通过对革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13基因组的测序,发现含有氨氮加氧酶(amo)基因。所述一株异养氨氧化菌的生物学特性为接触酶和氧化酶阳性,专性需氧,菌体形态呈杆状,菌落乳白色不透明,边缘规则,表面凸起,无晕环,直径1~2mm。
所述革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13 16SrDNA基因序列为:
TTTAAACTGAAGAGTTTGATCATGGCTCAGATTGAACGCTGGCGGCAGGCCTAACACATGCAAGTCGAGCGGTAACAGGGGTAGCTTGCTACCCGCTGACGAGCGGCGGACGGGTGAGTAATGCATAGGAATCTGCCCGATAGTGGGGGATAACCTGGGGAAACCCAGGCTAATACCGCATACGTCCTACGGGAGAAAGGGGGCTCCGGCTCCCGCTATTGGATGAGCCTATGTCGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCAAGGCGACGATCCGTAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACATCGGGACTGAGACACGGCCCGAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGCCCTCGGGTTGTAAAGCACTTTCAGCGAGGAAGAACGCCTAGTGGTTAATACCCATTAGGAAAGACATCACTCGCAGAAGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCGCGTAGGTGGCTTGATAAGCCGGTTGTGAAAGCCCCGGGCTCAACCTGGGAACGGCATCCGGAACTGTCAAGCTAGAGTGCAGGAGAGGAAGGTAGAATTCCCGGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATCGGGAGGAATACCAGTGGCGAAGGCGGCCTTCTGGACTGACACTGACACTGAGGTGCGAAAGCGTGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCGACCAGCCGTTGGGTGCCTAGCGCACTTTGTGGCGAAGTTAACGCGATAAGTCGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTACTCTTGACATCCTGCGAACTTGTGAGAGATCACTTGGTGCCTTCGGGAACGCAGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTCCCGTAACGAGCGCAACCCTTGTCCTTATTTGCCAGCGCGTAATGGCGGGAACTCTAAGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGAGTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGCCGGTACAAAGGGTTGCGAGCTCGCGAGAGTCAGCTAATCCCGAAAAGCCGGTCTCAGTCCGGATCGGAGTCTGCAACTCGACTCCGTGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGTGAATCAGAATGTCACGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGACTGCACCAGAAGTGGTTAGCTTAACCTTCGGGAAAGCGATCACCACGGTGTGGTTCATGACTGGGGTGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTAGGGGAACCTGCGGCTGGATCACCTCCTTAAA
所述氨氮加氧酶(amo)基因序列如下:
GTGAAGGGCATCCGTGTCAGCGCAGAAAGTGCAAAGGGACTTGTAACATCGCTTACCGTAGGCGCCGTGGGCGGCATCGTTTTTCATCTCACCGGTTTACCGCTAGCCTGGATGCTAGGCCCGCTGATTGCCAACCTGCTGGTATCGGCAAAAGGAATTAGCGTTGGCGTACCGGAGCCGCTACGCAACGTATTTTTAGCGCTCATGGGGTTGGTGCTGGGCAGCCAAGTAACGCCGCAGCTTGCCCATCGTGTGCTGGACTGGCCAATCTCGGCGGCACTCTTGCTGGCCGGTGTTGCGGCATCCACCGCGGTTGCCGCGGCGTGGTATCGTCGCTGTGGCTTCGACCCGGTCAGTGCTTGGTTTGGTGCATCGCCAGGGGCCATGACGGCAATGATTATGCTTGGCGATCAATGTGGCGGCGACCCGCAACGCATCGCCATTGCCCAGTCACTACGTATTATTCTCGTTATCCTGTTTCTGCCTCCCCTGTTTTGGGCATTTGAAGGCGGTGCAGGTGACATTGGGCCAGCCCAAGCTACCCTTGAGCACGGCTGGATGCTGCTCACTATTCCTTTCTTATTACCGGTGGGCCGGTGGCTGCGCATTCCAAGTTCGGCGTTACTTGCGCCGCTTATTATGGCGGCCTTGCTCTCTGGGTTTGGGCTGGCCAGCCTTACCTTGCCTAGTTGGGGAATGAACCTCATGTTATGGGTGTTGGGTAGCGCGATTGGCTCGCGTTTTCAAGGCATGACACGGCGCCTGCTCGGGCGTTATTTATGGCAGTCGGGGGTGGCGACGCTGCTGGCACTGGTGGTGTTAGCACTATTTGCTGAACTGATCCATCAGCTGTTGGGCGTGCGCCGTGACGTAGCCCTATTAGCGCTGGCTCCCGGTGGCATCGGTGAAATGGCTATTCTTGCTGTTGCGCTGAATATCGATCCCGTGTTTGTAGCATTTCACCACTTACTGCGTATGGTCACACTGATGATCGTGGCTCCTTTTTGGGCTCGTTGGCTATTGCGTCGCCACTCTTCTTAA
所述一株异养氨氧化菌的最适生长条件为:pH=7.0~8.0,温度28~37℃。
所述一株异养氨氧化菌在含盐污水去除氨氮处理中的应用,所述含盐污水为含氨氮污染物的高盐污水。
以下给出具体实施例。
实施例1:Halomonas venusta MA-ZP17-13的分离与鉴定
从福建省漳州市漳浦县一个南美白对虾养殖池采集海水样品,取2mL采集的海水样品,转接到灭菌LB(蛋白胨5g/L,酵母膏5g/L,氯化钠(NaCl)10g/L,pH值7.4~8.2)富集培养液的锥形瓶中富集培养,1周为一个周期,每个周期结束后取适量培养液离心,弃上清液,收集沉淀,获得菌体,然后在无菌条件下用生理盐水洗涤菌体3次,以2%的接种量转接入新鲜的灭菌的异养硝化培养基继续培养,反复循环,进行驯化。取富集培养基2mL转接到灭菌的选择培养基中(氯化铵(NH4Cl)0.382g/L,乙酸钠(CH3CH2ONa)3.417g/L,硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.05g/L,磷酸氢二钾(K2HPO4)0.2g/L,氯化钠(NaCl)30g/L,硫酸锰(MnSO4)0.01g/L,硫酸亚铁(FeSO4)0.01g/L,pH值7.4~8.2,121℃高压蒸汽灭菌20min)。10℃、140r/min的摇床上振荡培养2d,培养2d后,转接到新的选择培养基中,反复转接3次。每次转接前都进行氨氮含量的测定。
取1mL富集后培养基,梯度稀释后,涂布于固体选择培养基中,得到多株纯菌,纯菌接种至液体培养基中验证其异养硝化能力,最后得到一株低温异养氨氧化菌MA-ZP17-13,该菌经16S rDNA基因序列鉴定为美丽盐单胞菌(Halomonas venusta);选取其中相似序列,用MEGA5.0计算出序列的系统进化距离,构建系统进化树。系统进化树显示,与其相似度最高的菌株为Halomonas venusta DSM4743T(AJ306894)菌株,相似度为99.93%(见图1)。结合菌株的16S rDNA序列的测定结果,将其归属于美丽盐单胞菌(Halomonas venusta)。
实施例2:Halomonas venusta MA-ZP17-13氨氮去除和异养氨氧化的性能
将Halomonas venusta MA-ZP17-13接种至以氯化铵(NH4Cl)为唯一氮源的异养硝化培养基中,通入氧气,以保证可以进行好氧呼吸,同时注入乙炔气体,抑制反硝化作用的进行。在140r/min、10℃摇床中培养,间隔取样并检测氨氮、硝酸根和亚硝酸根浓度变化。由图2可以看出Halomonas venusta MA-ZP17-13培养3天后的氨氮去除率可以达到88.8%。由图3可以看出Halomonas venusta MA-ZP17-13培养3天异养硝化速率为0.0166mg/L-1.h。
序列表
<110> 自然资源部第三海洋研究所
<120> 一株异养氨氧化菌及其应用
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<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1540
<212> DNA
<213> 美丽盐单胞菌(Halomonas venusta)
<400> 1
tttaaactga agagtttgat catggctcag attgaacgct ggcggcaggc ctaacacatg 60
caagtcgagc ggtaacaggg gtagcttgct acccgctgac gagcggcgga cgggtgagta 120
atgcatagga atctgcccga tagtggggga taacctgggg aaacccaggc taataccgca 180
tacgtcctac gggagaaagg gggctccggc tcccgctatt ggatgagcct atgtcggatt 240
agctagttgg tgaggtaaag gctcaccaag gcgacgatcc gtagctggtc tgagaggatg 300
atcagccaca tcgggactga gacacggccc gaactcctac gggaggcagc agtggggaat 360
attggacaat gggcgaaagc ctgatccagc catgccgcgt gtgtgaagaa ggccctcggg 420
ttgtaaagca ctttcagcga ggaagaacgc ctagtggtta atacccatta ggaaagacat 480
cactcgcaga agaagcaccg gctaactccg tgccagcagc cgcggtaata cggagggtgc 540
aagcgttaat cggaattact gggcgtaaag cgcgcgtagg tggcttgata agccggttgt 600
gaaagccccg ggctcaacct gggaacggca tccggaactg tcaagctaga gtgcaggaga 660
ggaaggtaga attcccggtg tagcggtgaa atgcgtagag atcgggagga ataccagtgg 720
cgaaggcggc cttctggact gacactgaca ctgaggtgcg aaagcgtggg tagcaaacag 780
gattagatac cctggtagtc cacgccgtaa acgatgtcga ccagccgttg ggtgcctagc 840
gcactttgtg gcgaagttaa cgcgataagt cgaccgcctg gggagtacgg ccgcaaggtt 900
aaaactcaaa tgaattgacg ggggcccgca caagcggtgg agcatgtggt ttaattcgat 960
gcaacgcgaa gaaccttacc tactcttgac atcctgcgaa cttgtgagag atcacttggt 1020
gccttcggga acgcagagac aggtgctgca tggctgtcgt cagctcgtgt tgtgaaatgt 1080
tgggttaagt cccgtaacga gcgcaaccct tgtccttatt tgccagcgcg taatggcggg 1140
aactctaagg agactgccgg tgacaaaccg gaggaaggtg gggacgacgt caagtcatca 1200
tggcccttac gagtagggct acacacgtgc tacaatggcc ggtacaaagg gttgcgagct 1260
cgcgagagtc agctaatccc gaaaagccgg tctcagtccg gatcggagtc tgcaactcga 1320
ctccgtgaag tcggaatcgc tagtaatcgt gaatcagaat gtcacggtga atacgttccc 1380
gggccttgta cacaccgccc gtcacaccat gggagtggac tgcaccagaa gtggttagct 1440
taaccttcgg gaaagcgatc accacggtgt ggttcatgac tggggtgaag tcgtaacaag 1500
gtagccgtag gggaacctgc ggctggatca cctccttaaa 1540
<210> 2
<211> 1041
<212> DNA
<213> 美丽盐单胞菌(Halomonas venusta)
<400> 2
gtgaagggca tccgtgtcag cgcagaaagt gcaaagggac ttgtaacatc gcttaccgta 60
ggcgccgtgg gcggcatcgt ttttcatctc accggtttac cgctagcctg gatgctaggc 120
ccgctgattg ccaacctgct ggtatcggca aaaggaatta gcgttggcgt accggagccg 180
ctacgcaacg tatttttagc gctcatgggg ttggtgctgg gcagccaagt aacgccgcag 240
cttgcccatc gtgtgctgga ctggccaatc tcggcggcac tcttgctggc cggtgttgcg 300
gcatccaccg cggttgccgc ggcgtggtat cgtcgctgtg gcttcgaccc ggtcagtgct 360
tggtttggtg catcgccagg ggccatgacg gcaatgatta tgcttggcga tcaatgtggc 420
ggcgacccgc aacgcatcgc cattgcccag tcactacgta ttattctcgt tatcctgttt 480
ctgcctcccc tgttttgggc atttgaaggc ggtgcaggtg acattgggcc agcccaagct 540
acccttgagc acggctggat gctgctcact attcctttct tattaccggt gggccggtgg 600
ctgcgcattc caagttcggc gttacttgcg ccgcttatta tggcggcctt gctctctggg 660
tttgggctgg ccagccttac cttgcctagt tggggaatga acctcatgtt atgggtgttg 720
ggtagcgcga ttggctcgcg ttttcaaggc atgacacggc gcctgctcgg gcgttattta 780
tggcagtcgg gggtggcgac gctgctggca ctggtggtgt tagcactatt tgctgaactg 840
atccatcagc tgttgggcgt gcgccgtgac gtagccctat tagcgctggc tcccggtggc 900
atcggtgaaa tggctattct tgctgttgcg ctgaatatcg atcccgtgtt tgtagcattt 960
caccacttac tgcgtatggt cacactgatg atcgtggctc ctttttgggc tcgttggcta 1020
ttgcgtcgcc actcttctta a 1041

Claims (8)

1.一株异养氨氧化菌,其特征在于来源于南美白对虾养殖海水,经人工富集培养、分离纯化得到;所述一株异养氨氧化菌为革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13,已于2019年03月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏中心登记入册编号:CGMCC No.17273。
2.如权利要求1所述一株异养氨氧化菌,其特征在于所述革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13 16S rDNA基因序列的GenBank注册号为MK371741,通过对革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13基因组的测序,发现含有氨氮加氧酶amo基因。
3.如权利要求1所述一株异养氨氧化菌,其特征在于其为接触酶和氧化酶阳性,专性需氧,菌体形态呈杆状,菌落乳白色不透明,边缘规则,表面凸起,无晕环,直径1~2mm。
4.如权利要求2所述一株异养氨氧化菌,其特征在于所述革兰氏染色阴性的美丽盐单胞菌Halomonas venusta的菌株MA-ZP17-13 16S rDNA基因序列为:
TTTAAACTGAAGAGTTTGATCATGGCTCAGATTGAACGCTGGCGGCAGGCCTAACACATGCAAGTCGAGCGGTAACAGGGGTAGCTTGCTACCCGCTGACGAGCGGCGGACGGGTGAGTAATGCATAGGAATCTGCCCGATAGTGGGGGATAACCTGGGGAAACCCAGGCTAATACCGCATACGTCCTACGGGAGAAAGGGGGCTCCGGCTCCCGCTATTGGATGAGCCTATGTCGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCAAGGCGACGATCCGTAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACATCGGGACTGAGACACGGCCCGAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGCCCTCGGGTTGTAAAGCACTTTCAGCGAGGAAGAACGCCTAGTGGTTAATACCCATTAGGAAAGACATCACTCGCAGAAGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCGCGTAGGTGGCTTGATAAGCCGGTTGTGAAAGCCCCGGGCTCAACCTGGGAACGGCATCCGGAACTGTCAAGCTAGAGTGCAGGAGAGGAAGGTAGAATTCCCGGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATCGGGAGGAATACCAGTGGCGAAGGCGGCCTTCTGGACTGACACTGACACTGAGGTGCGAAAGCGTGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCGACCAGCCGTTGGGTGCCTAGCGCACTTTGTGGCGAAGTTAACGCGATAAGTCGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTACTCTTGACATCCTGCGAACTTGTGAGAGATCACTTGGTGCCTTCGGGAACGCAGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTCCCGTAACGAGCGCAACCCTTGTCCTTATTTGCCAGCGCGTAATGGCGGGAACTCTAAGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGAGTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGCCGGTACAAAGGGTTGCGAGCTCGCGAGAGTCAGCTAATCCCGAAAAGCCGGTCTCAGTCCGGATCGGAGTCTGCAACTCGACTCCGTGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGTGAATCAGAATGTCACGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGACTGCACCAGAAGTGGTTAGCTTAACCTTCGGGAAAGCGATCACCACGGTGTGGTTCATGACTGGGGTGAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTAGGGGAACCTGCGGCTGGATCACCTCCTTAAA。
5.如权利要求2所述一株异养氨氧化菌,其特征在于所述氨氮加氧酶amo基因序列如下:
GTGAAGGGCATCCGTGTCAGCGCAGAAAGTGCAAAGGGACTTGTAACATCGCTTACCGTAGGCGCCGTGGGCGGCATCGTTTTTCATCTCACCGGTTTACCGCTAGCCTGGATGCTAGGCCCGCTGATTGCCAACCTGCTGGTATCGGCAAAAGGAATTAGCGTTGGCGTACCGGAGCCGCTACGCAACGTATTTTTAGCGCTCATGGGGTTGGTGCTGGGCAGCCAAGTAACGCCGCAGCTTGCCCATCGTGTGCTGGACTGGCCAATCTCGGCGGCACTCTTGCTGGCCGGTGTTGCGGCATCCACCGCGGTTGCCGCGGCGTGGTATCGTCGCTGTGGCTTCGACCCGGTCAGTGCTTGGTTTGGTGCATCGCCAGGGGCCATGACGGCAATGATTATGCTTGGCGATCAATGTGGCGGCGACCCGCAACGCATCGCCATTGCCCAGTCACTACGTATTATTCTCGTTATCCTGTTTCTGCCTCCCCTGTTTTGGGCATTTGAAGGCGGTGCAGGTGACATTGGGCCAGCCCAAGCTACCCTTGAGCACGGCTGGATGCTGCTCACTATTCCTTTCTTATTACCGGTGGGCCGGTGGCTGCGCATTCCAAGTTCGGCGTTACTTGCGCCGCTTATTATGGCGGCCTTGCTCTCTGGGTTTGGGCTGGCCAGCCTTACCTTGCCTAGTTGGGGAATGAACCTCATGTTATGGGTGTTGGGTAGCGCGATTGGCTCGCGTTTTCAAGGCATGACACGGCGCCTGCTCGGGCGTTATTTATGGCAGTCGGGGGTGGCGACGCTGCTGGCACTGGTGGTGTTAGCACTATTTGCTGAACTGATCCATCAGCTGTTGGGCGTGCGCCGTGACGTAGCCCTATTAGCGCTGGCTCCCGGTGGCATCGGTGAAATGGCTATTCTTGCTGTTGCGCTGAATATCGATCCCGTGTTTGTAGCATTTCACCACTTACTGCGTATGGTCACACTGATGATCGTGGCTCCTTTTTGGGCTCGTTGGCTATTGCGTCGCCACTCTTCTTAA(1041bp)。
6.如权利要求1所述一株异养氨氧化菌,其特征在于其最适生长条件为:pH=7~8,温度28~37℃。
7.如权利要求1所述一株异养氨氧化菌在含盐污水去除氨氮处理中的应用。
8.如权利要求7所述应用,其特征在于所述含盐污水为含氨氮污染物的高盐污水。
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