CN110564666A - 一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法 - Google Patents

一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110564666A
CN110564666A CN201910890657.2A CN201910890657A CN110564666A CN 110564666 A CN110564666 A CN 110564666A CN 201910890657 A CN201910890657 A CN 201910890657A CN 110564666 A CN110564666 A CN 110564666A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fusarium
keratitis
experimental
tree
shrew
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910890657.2A
Other languages
English (en)
Inventor
李妍
胡竹林
孔蕾
刘海
戴敏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201910890657.2A priority Critical patent/CN110564666A/zh
Publication of CN110564666A publication Critical patent/CN110564666A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N3/00—Spore forming or isolating processes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/37—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from fungi

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，包括如下步骤：镰刀菌培养、镰刀菌孢子制备、实验分组及镰刀菌型角膜炎造模、镰刀菌型角膜炎模型的培养分析及镰刀菌型角膜炎的观察。本发明采用树鼩的眼作为实验眼，并进行镰刀菌型角膜炎模型的构建以及分析观察，进而使得通过本发明能够实现对镰刀菌型角膜炎模型的构建以及及时有效的观察分析，即使得本发明有利于进行推广应用。

Description

一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法
技术领域
本发明涉及镰刀菌型角膜炎技术领域，尤其涉及一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法。
背景技术
镰刀菌型角膜炎是由于真菌感染导致的，镰刀菌型角膜炎主要表现为匐行性角膜溃疡，溃疡面比较粗糙，高起于角膜表面。早期溃疡为浅在性，表层有点状结节样浸润，呈灰白色或乳白色混浊；形状不规则，表面粗糙不平，有干性感，与健康角膜界限清楚。
针对镰刀菌型角膜炎的产生及并发后的具体现象，需要通过构建镰刀菌型角膜炎模型，并对构建的镰刀菌型角膜炎模型进行进一步的观察分析，传统镰刀菌型角膜炎模型的构建过程较为复杂，且针对构建的镰刀菌型角膜炎模型不能够实现及时的分析观察。为此，我们提出了一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，包括以下步骤：
S1、镰刀菌培养：
对接种环采用酒精灯加热灭菌，待接种环冷却后，使用接种环刮取适量的镰刀菌菌种，并接种到沙保氏葡萄糖琼脂培养基中，将接种后的培养基置于26℃普通培养箱中培养7d-14d；
S2、镰刀菌孢子制备：
S2.1、对接种环采用酒精灯加热灭菌，待接种环冷却后，使用接种环刮取步骤S1中培养基内培养后的所有菌丝至装有5ml生理盐水的离心管内；
S2.2、使用移液器吸取生理盐水5mL反复冲洗步骤S1中培养基内培养后的菌丝表面，即获得真菌混悬液，将真菌混悬液收集至步骤S2.1中的离心管内，即获得真菌混合液；
S2.3、取新的离心管一根，并在离心管的管口放入高压蒸汽灭菌的玻璃漏斗，漏斗内放置无菌脱脂纱布；
S2.4、将步骤S2.2中的真菌混合液倒入步骤S2.3中的漏斗内，在无菌脱脂纱布的过滤下进行过滤菌丝并获得孢子混悬液；
S2.5、将步骤S2.4获得的孢子混悬液放置在血细胞计数板上，并调整血细胞计数板上的孢子混悬液的孢子数量为1×109CFU·mL-1，进一步的将血细胞计数板放入-80℃冰箱备用；
S3、实验分组及镰刀菌型角膜炎造模：
S3.1实验分为实验组、空白对照组，其中选取20只树鼩作为实验组、选取10只树鼩作为空白对照组；
S3.2、造模前3天，在实验组及空白对照组的树鼩的实验眼结膜下注射5mg/ml的地塞米松针0.1ml；
S3.3、实验组镰刀菌型角膜炎造模：
①对树鼩使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射，在麻醉生效后，在生物安全柜内使用碘伏对实验眼进行3遍消毒；②进一步的铺一次性灭菌后洞巾，使用盐酸奥布卡因滴眼液通过洞巾的通孔滴在实验眼上，对实验眼进行麻醉；③使用聚维酮碘1ml冲洗实验眼的结膜囊；④使用4mm环钻在实验眼的角膜上做标记，使用70％乙醇棉球覆盖于标记处并持续40s；⑤使用胰岛素针头对④中处理后的角膜进行上皮刮除，进一步使用胰岛素针头在角膜的前弹力层表面上进行规则划痕；⑥使用微量移液器在划痕处滴注5ul的步骤S2所获得的孢子混悬液；⑦使用5-0丝线间断缝合实验眼的睑缘，缝合数为2针，即整个实验组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成。
S3.4、空白对照组镰刀菌型角膜炎造模：
①对树鼩使用0.3ml盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射，在麻醉生效后，在生物安全柜内使用碘伏对实验眼进行3遍消毒；②进一步的铺一次性灭菌后洞巾，使用盐酸奥布卡因滴眼液通过洞巾的通孔滴在实验眼上，对实验眼进行麻醉；③使用聚维酮碘1ml冲洗实验眼的结膜囊；④使用4mm环钻在实验眼的角膜上做标记，使用70％乙醇棉球覆盖于标记处并持续40s；⑤使用胰岛素针头对④中处理后的角膜进行上皮刮除，进一步使用胰岛素针头在角膜的前弹力层表面上进行规则划痕；⑥使用微量移液器在划痕处滴注5ul的步生理盐水；⑦使用5-0丝线间断缝合实验眼的睑缘，缝合数为2针，即整个空白对照组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成。
S4、镰刀菌型角膜炎模型的培养分析：
在实验组镰刀菌型树鼩角膜炎造模及空白对照组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成后的第7天，使用无菌圆刀片刮取角膜溃疡周边组织接种到沙保氏葡萄糖琼脂培养基中，置于26℃培养箱培养14天，观察是否有真菌生长，拍照记录菌落形态，当存在菌丝生长时，对菌丝涂片，并在1％亚甲基蓝染色的情况下，使用显微镜下观察菌丝及孢子形态。
S5、镰刀菌型角膜炎的观察：
S5.1：前段照相
实验组及空白对照组术后第1天、第3天、第7天时，使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射；麻醉生效后，使用图像采集系统上采集实验眼处的图片并保存，针对有角膜炎现象的图片，观察图片中真菌性角膜炎形态变化及溃疡浸润情况。
S5.2：活体共聚焦显微镜观察
实验组及空白对照组术后第1天、第3天、第7天时，使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射；麻醉生效后，使用活体共聚焦显微镜检查并采集实验眼处的图片，针对有角膜炎现象的图片，观察图片中菌丝生长情况以及角膜各层结构变化情况。
优选的，在步骤S2中，所使用的生理盐水的浓度均为0.9％。
优选的，步骤S2及步骤S1均在生物安全柜内进行完成。
优选的，步骤S2中，所使用的离心管的规格均为15ml离心管。
优选的，在步骤S2.3中，漏斗内放置的无菌脱脂纱布具体为8层。
优选的，在步骤S3中实验组、正常对照组及空白对照组中的树鼩所选取的实验眼均为右眼。
本发明提出的一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，有益效果在于：本方案在操作使用的过程中，采用树鼩的眼作为实验眼，并进行镰刀菌型角膜炎模型的构建以及分析观察，构建过程中的操作步骤简便、易施行，且在对构建后的镰刀菌型角膜炎模型进行观察分析的过程中，整个观察分析过程有序、易操作，且通过实验组、空白对照组的相对比，有利于对构建后的镰刀菌型角膜炎模型进行精准的观察分析，进而使得通过本发明能够实现对镰刀菌型角膜炎模型的构建以及及时有效的观察分析，即使得本发明有利于进行推广应用。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，包括以下步骤：
S1、镰刀菌培养：
对接种环采用酒精灯加热灭菌，待接种环冷却后，使用接种环刮取适量的镰刀菌菌种，并接种到沙保氏葡萄糖琼脂培养基中，将接种后的培养基置于26℃普通培养箱中培养7d-14d；
S2、镰刀菌孢子制备：
S2.1、对接种环采用酒精灯加热灭菌，待接种环冷却后，使用接种环刮取步骤S1中培养基内培养后的所有菌丝至装有5ml生理盐水的离心管内；
S2.2、使用移液器吸取生理盐水5mL反复冲洗步骤S1中培养基内培养后的菌丝表面，即获得真菌混悬液，将真菌混悬液收集至步骤S2.1中的离心管内，即获得真菌混合液；
S2.3、取新的离心管一根，并在离心管的管口放入高压蒸汽灭菌的玻璃漏斗，漏斗内放置无菌脱脂纱布；
S2.4、将步骤S2.2中的真菌混合液倒入步骤S2.3中的漏斗内，在无菌脱脂纱布的过滤下进行过滤菌丝并获得孢子混悬液；
S2.5、将步骤S2.4获得的孢子混悬液放置在血细胞计数板上，并调整血细胞计数板上的孢子混悬液的孢子数量为1×109CFU·mL-1，进一步的将血细胞计数板放入-80℃冰箱备用；
S3、实验分组及镰刀菌型角膜炎造模：
S3.1实验分为实验组、空白对照组，其中选取20只树鼩作为实验组、选取10只树鼩作为空白对照组；
S3.2、造模前3天，在实验组及空白对照组的树鼩的实验眼结膜下注射5mg/ml的地塞米松针0.1ml；
S3.3、实验组镰刀菌型角膜炎造模：
①对树鼩使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射，在麻醉生效后，在生物安全柜内使用碘伏对实验眼进行3遍消毒；②进一步的铺一次性灭菌后洞巾，使用盐酸奥布卡因滴眼液通过洞巾的通孔滴在实验眼上，对实验眼进行麻醉；③使用聚维酮碘1ml冲洗实验眼的结膜囊；④使用4mm环钻在实验眼的角膜上做标记，使用70％乙醇棉球覆盖于标记处并持续40s；⑤使用胰岛素针头对④中处理后的角膜进行上皮刮除，进一步使用胰岛素针头在角膜的前弹力层表面上进行规则划痕；⑥使用微量移液器在划痕处滴注5ul的步骤S2所获得的孢子混悬液；⑦使用5-0丝线间断缝合实验眼的睑缘，缝合数为2针，即整个实验组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成。
S3.4、空白对照组镰刀菌型角膜炎造模：
①对树鼩使用0.3ml盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射，在麻醉生效后，在生物安全柜内使用碘伏对实验眼进行3遍消毒；②进一步的铺一次性灭菌后洞巾，使用盐酸奥布卡因滴眼液通过洞巾的通孔滴在实验眼上，对实验眼进行麻醉；③使用聚维酮碘1ml冲洗实验眼的结膜囊；④使用4mm环钻在实验眼的角膜上做标记，使用70％乙醇棉球覆盖于标记处并持续40s；⑤使用胰岛素针头对④中处理后的角膜进行上皮刮除，进一步使用胰岛素针头在角膜的前弹力层表面上进行规则划痕；⑥使用微量移液器在划痕处滴注5ul的步生理盐水；⑦使用5-0丝线间断缝合实验眼的睑缘，缝合数为2针，即整个空白对照组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成。
S4、镰刀菌型角膜炎模型的培养分析：
在实验组镰刀菌型树鼩角膜炎造模及空白对照组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成后的第7天，使用无菌圆刀片刮取角膜溃疡周边组织接种到沙保氏葡萄糖琼脂培养基中，置于26℃培养箱培养14天，观察是否有真菌生长，拍照记录菌落形态，当存在菌丝生长时，对菌丝涂片，并在1％亚甲基蓝染色的情况下，使用显微镜下观察菌丝及孢子形态。
S5、镰刀菌型角膜炎的观察：
S5.1：前段照相
实验组及空白对照组术后第1天、第3天、第7天时，使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射；麻醉生效后，使用图像采集系统上采集实验眼处的图片并保存，针对有角膜炎现象的图片，观察图片中真菌性角膜炎形态变化及溃疡浸润情况。
S5.2：活体共聚焦显微镜观察
实验组及空白对照组术后第1天、第3天、第7天时，使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射；麻醉生效后，使用活体共聚焦显微镜检查并采集实验眼处的图片，针对有角膜炎现象的图片，观察图片中菌丝生长情况以及角膜各层结构变化情况。
在步骤S2中，所使用的生理盐水的浓度均为0.9％。
步骤S2及步骤S1均在生物安全柜内进行完成。
步骤S2中，所使用的离心管的规格均为15ml离心管。
在步骤S2.3中，漏斗内放置的无菌脱脂纱布具体为8层。
在步骤S3中实验组、正常对照组及空白对照组中的树鼩所选取的实验眼均为右眼。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、镰刀菌培养：
对接种环采用酒精灯加热灭菌，待接种环冷却后，使用接种环刮取适量的镰刀菌菌种，并接种到沙保氏葡萄糖琼脂培养基中，将接种后的培养基置于26℃普通培养箱中培养7d-14d；
S2、镰刀菌孢子制备：
S2.1、对接种环采用酒精灯加热灭菌，待接种环冷却后，使用接种环刮取步骤S1中培养基内培养后的所有菌丝至装有5ml生理盐水的离心管内；
S2.2、使用移液器吸取生理盐水5mL反复冲洗步骤S1中培养基内培养后的菌丝表面，即获得真菌混悬液，将真菌混悬液收集至步骤S2.1中的离心管内，即获得真菌混合液；
S2.3、取新的离心管一根，并在离心管的管口放入高压蒸汽灭菌的玻璃漏斗，漏斗内放置无菌脱脂纱布；
S2.4、将步骤S2.2中的真菌混合液倒入步骤S2.3中的漏斗内，在无菌脱脂纱布的过滤下进行过滤菌丝并获得孢子混悬液；
S2.5、将步骤S2.4获得的孢子混悬液放置在血细胞计数板上，并调整血细胞计数板上的孢子混悬液的孢子数量为1×109CFU·mL-1，进一步的将血细胞计数板放入-80℃冰箱备用；
S3、实验分组及镰刀菌型角膜炎造模：
S3.1实验分为实验组、空白对照组，其中选取20只树鼩作为实验组、选取10只树鼩作为空白对照组；
S3.2、造模前3天，在实验组及空白对照组的树鼩的实验眼结膜下注射5mg/ml的地塞米松针0.1ml；
S3.3、实验组镰刀菌型角膜炎造模：
①对树鼩使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射，在麻醉生效后，在生物安全柜内使用碘伏对实验眼进行3遍消毒；②进一步的铺一次性灭菌后洞巾，使用盐酸奥布卡因滴眼液通过洞巾的通孔滴在实验眼上，对实验眼进行麻醉；③使用聚维酮碘1ml冲洗实验眼的结膜囊；④使用4mm环钻在实验眼的角膜上做标记，使用70％乙醇棉球覆盖于标记处并持续40s；⑤使用胰岛素针头对④中处理后的角膜进行上皮刮除，进一步使用胰岛素针头在角膜的前弹力层表面上进行规则划痕；⑥使用微量移液器在划痕处滴注5ul的步骤S2所获得的孢子混悬液；⑦使用5-0丝线间断缝合实验眼的睑缘，缝合数为2针，即整个实验组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成。
S3.4、空白对照组镰刀菌型角膜炎造模：
①对树鼩使用0.3ml盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射，在麻醉生效后，在生物安全柜内使用碘伏对实验眼进行3遍消毒；②进一步的铺一次性灭菌后洞巾，使用盐酸奥布卡因滴眼液通过洞巾的通孔滴在实验眼上，对实验眼进行麻醉；③使用聚维酮碘1ml冲洗实验眼的结膜囊；④使用4mm环钻在实验眼的角膜上做标记，使用70％乙醇棉球覆盖于标记处并持续40s；⑤使用胰岛素针头对④中处理后的角膜进行上皮刮除，进一步使用胰岛素针头在角膜的前弹力层表面上进行规则划痕；⑥使用微量移液器在划痕处滴注5ul的步生理盐水；⑦使用5-0丝线间断缝合实验眼的睑缘，缝合数为2针，即整个空白对照组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成。
S4、镰刀菌型角膜炎模型的培养分析：
在实验组镰刀菌型树鼩角膜炎造模及空白对照组镰刀菌型树鼩角膜炎造模完成后的第7天，使用无菌圆刀片刮取角膜溃疡周边组织接种到沙保氏葡萄糖琼脂培养基中，置于26℃培养箱培养14天，观察是否有真菌生长，拍照记录菌落形态，当存在菌丝生长时，对菌丝涂片，并在1％亚甲基蓝染色的情况下，使用显微镜下观察菌丝及孢子形态。
S5、镰刀菌型角膜炎的观察：
S5.1：前段照相
实验组及空白对照组术后第1天、第3天、第7天时，使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射；麻醉生效后，使用图像采集系统上采集实验眼处的图片并保存，针对有角膜炎现象的图片，观察图片中真菌性角膜炎形态变化及溃疡浸润情况。
S5.2：活体共聚焦显微镜观察
实验组及空白对照组术后第1天、第3天、第7天时，使用盐酸氯胺酮进行肌肉麻醉注射；麻醉生效后，使用活体共聚焦显微镜检查并采集实验眼处的图片，针对有角膜炎现象的图片，观察图片中菌丝生长情况以及角膜各层结构变化情况。
2.根据权利要求1所述的一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，其特征在于，在步骤S2中，所使用的生理盐水的浓度均为0.9％。
3.根据权利要求1所述的一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，其特征在于，步骤S2及步骤S1均在生物安全柜内进行完成。
4.根据权利要求1所述的一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，其特征在于，步骤S2中，所使用的离心管的规格均为15ml离心管。
5.根据权利要求1所述的一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，其特征在于，在步骤S2.3中，漏斗内放置的无菌脱脂纱布具体为8层。
6.根据权利要求1所述的一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法，其特征在于，在步骤S3中实验组、正常对照组及空白对照组中的树鼩所选取的实验眼均为右眼。
CN201910890657.2A 2019-09-20 2019-09-20 一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法 Pending CN110564666A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910890657.2A CN110564666A (zh) 2019-09-20 2019-09-20 一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910890657.2A CN110564666A (zh) 2019-09-20 2019-09-20 一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110564666A true CN110564666A (zh) 2019-12-13

Family

ID=68781416

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910890657.2A Pending CN110564666A (zh) 2019-09-20 2019-09-20 一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110564666A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111134089A (zh) * 2020-02-20 2020-05-12 扬州大学 犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型的建立方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109330732A (zh) * 2018-11-09 2019-02-15 昆明医科大学第附属医院 一种小鼠单纯疱疹病毒性角膜炎模型的建立方法及应用
CN109820875A (zh) * 2018-12-13 2019-05-31 上海市第一人民医院 一种细菌性角膜炎动物模型及其构建方法和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109330732A (zh) * 2018-11-09 2019-02-15 昆明医科大学第附属医院 一种小鼠单纯疱疹病毒性角膜炎模型的建立方法及应用
CN109820875A (zh) * 2018-12-13 2019-05-31 上海市第一人民医院 一种细菌性角膜炎动物模型及其构建方法和应用

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111134089A (zh) * 2020-02-20 2020-05-12 扬州大学 犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型的建立方法
CN111134089B (zh) * 2020-02-20 2022-04-15 扬州大学 犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型的建立方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102294053B (zh) 去细胞异种角膜基质载体及其制备方法和应用
CN103937738B (zh) 促进角膜内皮细胞粘附的药剂
CN104855285B (zh) 一种多倍体金线莲有机培养一次性成苗诱导方法
CN108210520A (zh) 慢性青光眼动物模型建立方法及其应用
CN105695389A (zh) 一种快速获得三七圆斑病菌分生孢子的活体接种产孢方法
CN105838672B (zh) 用于眼部的干细胞诱导培养液、其制备方法及其应用
CN106244521A (zh) 一种人羊膜上皮细胞、分离培养方法及用途
CN110564666A (zh) 一种树鼩镰刀菌型角膜炎模型的构建及观察分析方法
CN105441391A (zh) 一种糖尿病并发抑郁症的细胞模型及建立方法和应用
CN104645416B (zh) 一种组织工程人角膜基质的体外构建方法
CN105875406B (zh) 一种梅片树愈伤组织的诱导与增殖方法
CN108865985A (zh) 一种干细胞源外泌体干预上皮-间质转化的方法
CN106282094B (zh) 人皮肤来源的前体细胞诱导分化为角膜内皮样细胞的方法
CN102433307B (zh) 一种来源于人肺腺癌的细胞株及其制备方法
CN1771796A (zh) 一种蚕豆离体培养方法
CN103409363B (zh) 感光前体细胞与视网膜组织体外共培养方法
CN107306796B (zh) 一种烟草玻璃化愈伤组织和不定芽去玻璃化的方法
RU2746647C1 (ru) Способ создания экспериментальной модели грибкового кератита у кроликов
CN1749393A (zh) 一种人角膜内皮细胞系的构建方法
CN107115299A (zh) 一种雷帕霉素纳米胶束滴眼液及其制备方法
CN106265744A (zh) 脐带间充质干细胞在制备治疗角膜损伤的干细胞制剂中的应用
RU2700403C1 (ru) Способ моделирования внутриглазного инфекционного процесса
CN102327650B (zh) 一种人工晶状体植入手术柔性水溶胶辅剂及其制备方法
CN102586188B (zh) 一种来源于人肺大细胞癌的细胞株及其制备方法
CN108450333A (zh) 一种卷丹百合愈伤组织的诱导方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20191213