CN110559399B - 一种芦笋根皂甙的高效提取方法 - Google Patents

一种芦笋根皂甙的高效提取方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于天然药物提取技术领域，具体涉及一种芦笋根皂甙的高效提取方法。该方法是通过以下步骤实现的：（1）芦笋根预处理（2）一次匀浆；（3）复合酶解；（4）二次匀浆；（5）浓缩干燥；（6）浸提；（7）醇沉。本发明能够提高芦笋根的利用价值，实现资源再利用；本发明提取的芦笋根皂甙，提取率高，同时制备的皂甙稳定性好，纯度高。

Description

一种芦笋根皂甙的高效提取方法
技术领域
本发明属于天然药物提取技术领域，具体涉及一种芦笋根皂甙的高效提取方法。
背景技术
芦笋富含氨基酸、维生素、矿物质、膳食纤维，营养价值丰富，味道鲜美，软嫩可口，是世界十大名菜之一，在国际市场上享有“蔬菜之王”的美称，目前国内外已有多种采用芦笋为主要原料的抗癌药，保健品。嫩茎是芦笋作为蔬菜的主要可食部分，但同时产生的芦笋根的食品价值没有得到有效开发，被当成垃圾任意丢弃。芦笋根系发达，在土壤中横向伸展可达3m左右，纵深2m左右，大部分根分布在30cm以内的耕作层里。芦笋根占据整棵芦笋的四分之一，我国每年可产生大约几十万吨的芦笋根，数量非常庞大。由于芦笋根含水量较高容易腐烂，大多挖出后晒干当柴火烧，耗费大量的人力物力。芦笋根除了蛋白、矿物质含量丰富外，还含有大量活性成分，其中皂苷是其主要的活性成分，其水解产物为菝葜皂苷元，具有抗糖尿病、抗氧化、抗癌、抗炎等多种功效。
从天然产物中分离出的具有生物活性的皂甙在保健品和医药领域引起了广泛的关注。皂甙提取中，大多为有机溶剂提取，但是该方法溶剂用量大，而吸附层析法对于设备要求高，成本高。因此，亟待研发一种高效的芦笋根中皂甙的提取方法。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种芦笋根皂甙的高效提取方法。
本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：
本发明提供了一种芦笋根皂甙的高效提取方法，包括以下步骤：
（1）预处理：挑选直径在在1cm以上的芦笋根，经干式除杂机除去沙土和杂质，随后被送至滚筒式清洗机中用水清洗干净；
（2）一次匀浆：将清洗好的芦笋根切成2-3cm的小段，加入5-6倍体积的萃取液进行匀浆，得一次匀浆液；
所述萃取液是由棕榈酸异丙酯、甘油及水组成；
（3）复合酶解：将一次匀浆液在40℃下加入占匀浆液0.1%-0.2%复合酶，酶解20-30min后，灭酶，得酶解液；
（4）二次匀浆：将酶解液加入1-2倍体积的冰水，进行二次匀浆；
（5）浓缩干燥：将匀浆液用无纺布过滤除渣，取上清液，离心，取上清液，在50℃条件下减压浓缩至浸膏状；
（6）浸提：将浸膏状的浓缩液加入5-6倍95%冰乙醇，以1000-1200pm条件下搅拌3-5min，然后投入碳酸钙包，升温至70-75℃、提取30-40min，提取3-5次；
（7）醇沉：合并上清液，在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，加2-3倍体积以1000-1200pm条件下3-5min均匀分散,用1-2倍体积水饱和正丁醇萃取4-6次,合并正丁醇部分,再用1-2倍体积正丁醇饱和水洗涤4-6次,在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，真空冷冻干燥至水分含量4%左右,即得芦笋总皂甙。
进一步的，所述一次匀浆为在2000-2500rpm条件下，匀浆8-10min。
进一步的，所述萃取液是由棕榈酸异丙酯、甘油及水按照体积比1：1：20组成。
进一步的，所述复合酶是由纤维素酶、半纤维素酶、阿魏酸酯酶及果胶酶按照质量比2：1：1组成。
进一步的，所述二次匀浆为在2000-2500rpm条件下，匀浆8-10min。
进一步的，所述离心为在3000-5000rpm条件下，离心10-15min。
进一步的，所述碳酸钙包为每1L浓缩液中加入碳酸钙包为10g。
上述碳酸钙包的内容物为碳酸钙10份及0.1份二氧化硅。
本发明的有益效果为：
（1）本发明能够提高芦笋根的利用价值，实现资源再利用；
（2）本发明提取的芦笋根皂甙，提取率高，同时制备的皂甙稳定性好，纯度高。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步的解释和说明。
实施例1
一种芦笋根皂甙的高效提取方法，步骤如下：
（1）预处理：挑选直径在在1cm以上的芦笋根，经干式除杂机除去沙土和杂质，随后被送至滚筒式清洗机中用水清洗干净；
（2）一次匀浆：将清洗好的芦笋根切成2-3cm的小段，加入5倍体积的萃取液，在2000-2500rpm条件下，匀浆10min，得一次匀浆液；
所述萃取液是由棕榈酸异丙酯、甘油及水按照体积比1：1：20组成；
（3）复合酶解：将一次匀浆液在40℃下加入占匀浆液0.2%复合酶，酶解30min后，灭酶，得酶解液；
所述复合酶是由纤维素酶、半纤维素酶、阿魏酸酯酶及果胶酶按照质量比2：1：1：1组成；
（4）二次匀浆：将酶解液加入2倍体积的冰水，在2500rpm条件下，匀浆8min，进行二次匀浆；
（5）浓缩干燥：将匀浆液用无纺布过滤除渣，取上清液，离心，取上清液，在50℃条件下减压浓缩至浸膏状；
（6）浸提：将浸膏状的浓缩液加入5倍95%冰乙醇，以1000-1200pm条件下搅拌3-5min，然后投入碳酸钙包，升温至70-75℃、提取30min，提取5次；
所述碳酸钙包为每1L浓缩液中加入碳酸钙包为10g；所述碳酸钙包的内容物为碳酸钙10份及0.1份二氧化硅；
（7）醇沉：合并上清液，在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，加2-3倍体积以1000-1200pm条件下5min均匀分散,用2倍体积水饱和正丁醇萃取6次,合并正丁醇部分,再用2倍体积正丁醇饱和水洗涤6次,在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，真空冷冻干燥至水分含量4%左右,即得芦笋根总皂甙。
实施例2
一种芦笋根皂甙的高效提取方法，步骤如下：
（1）预处理：挑选直径在在1cm以上的芦笋根，经干式除杂机除去沙土和杂质，随后被送至滚筒式清洗机中用水清洗干净；
（2）一次匀浆：将清洗好的芦笋根切成2-3cm的小段，加入6倍体积的萃取液，在2000-2500rpm条件下，匀浆8min，得一次匀浆液；
所述萃取液是由棕榈酸异丙酯、甘油及水按照体积比1：1：20组成；
（3）复合酶解：将一次匀浆液在40℃下加入占匀浆液0.1%复合酶，酶解20min后，灭酶，得酶解液；
所述复合酶是由纤维素酶、半纤维素酶、阿魏酸酯酶及果胶酶按照质量比2：1：1：1组成；
（4）二次匀浆：将酶解液加入1-2倍体积的冰水，在2000-2500rpm条件下，匀浆8-10min，进行二次匀浆；
（5）浓缩干燥：将匀浆液用无纺布过滤除渣，取上清液，离心，取上清液，在50℃条件下减压浓缩至浸膏状；
（6）浸提：将浸膏状的浓缩液加入6倍95%冰乙醇，以1000-1200pm条件下搅拌3-5min，然后投入碳酸钙包，升温至70-75℃、提取40min，提取5次；
所述碳酸钙包为每1L浓缩液中加入碳酸钙包为10g；所述碳酸钙包的内容物为碳酸钙10份及0.1份二氧化硅；
（7）醇沉：合并上清液，在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，加3倍体积以1000-1200pm条件下3-5min均匀分散,用1倍体积水饱和正丁醇萃取6次,合并正丁醇部分,再用2倍体积正丁醇饱和水洗涤6次,在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，真空冷冻干燥至水分含量4%左右,即得芦笋根总皂甙。
对比例1
一种芦笋根皂甙的高效提取方法，步骤如下：
（1）预处理：挑选直径在在1cm以上的芦笋根，经干式除杂机除去沙土和杂质，随后被送至滚筒式清洗机中用水清洗干净；
（2）一次匀浆：将清洗好的芦笋根切成2-3cm的小段，加入5倍体积的冰水，在2000-2500rpm条件下，匀浆10min，得一次匀浆液；
（3）复合酶解：将一次匀浆液在40℃下加入占匀浆液0.1%复合酶（同实施例1），酶解30min后，灭酶，得酶解液；
（4）二次匀浆：将酶解液加入2倍体积的冰水，在2500rpm条件下，匀浆8min，进行二次匀浆；
（5）浓缩干燥：将匀浆液用无纺布过滤除渣，取上清液，离心，取上清液，在50℃条件下减压浓缩至浸膏状；
（6）浸提：将浸膏状的浓缩液加入5倍95%冰乙醇，以1000-1200pm条件下搅拌3-5min，然后投入碳酸钙包（同实施例1），升温至70-75℃、提取30min，提取5次；
（7）醇沉：合并上清液，在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，加2-3倍体积以1000-1200pm条件下5min均匀分散,用2倍体积水饱和正丁醇萃取6次,合并正丁醇部分,再用2倍体积正丁醇饱和水洗涤6次,在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，真空冷冻干燥至水分含量4%左右,即得芦笋总皂甙。
对比例2
一种芦笋根皂甙的高效提取方法，步骤如下：
（1）预处理：挑选直径在在1cm以上的芦笋根，经干式除杂机除去沙土和杂质，随后被送至滚筒式清洗机中用水清洗干净；
（2）一次匀浆：将清洗好的芦笋根切成2-3cm的小段，加入5倍体积的萃取液，在2000-2500rpm条件下，匀浆10min，得一次匀浆液；
所述萃取液是由棕榈酸异丙酯、甘油及水按照体积比1：1：20组成；
（3）复合酶解：将一次匀浆液在40℃下加入占匀浆液0.2%复合酶，酶解30min后，灭酶，得酶解液；
所述复合酶是由纤维素酶、半纤维素酶及果胶酶按照质量比2：1：1：1组成；
（4）二次匀浆：将酶解液加入2倍体积的冰水，在2500rpm条件下，匀浆8min，进行二次匀浆；
（5）浓缩干燥：将匀浆液用无纺布过滤除渣，取上清液，离心，取上清液，在50℃条件下减压浓缩至浸膏状；
（6）浸提：将浸膏状的浓缩液加入5倍95%冰乙醇，以1000-1200pm条件下搅拌3-5min，然后投入碳酸钙包（同实施例1），升温至70-75℃、提取30min，提取5次；
（7）醇沉：合并上清液，在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，加2-3倍体积以1000-1200pm条件下5min均匀分散,用2倍体积水饱和正丁醇萃取6次,合并正丁醇部分,再用2倍体积正丁醇饱和水洗涤6次,在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，真空冷冻干燥至水分含量4%左右,即得芦笋根总皂甙。
对比例3
一种芦笋根皂甙的高效提取方法，步骤如下：
（1）预处理：挑选直径在在1cm以上的芦笋根，经干式除杂机除去沙土和杂质，随后被送至滚筒式清洗机中用水清洗干净；
（2）一次匀浆：将清洗好的芦笋根切成2-3cm的小段，加入5倍体积的萃取液，在2000-2500rpm条件下，匀浆10min，得一次匀浆液；
所述萃取液是由棕榈酸异丙酯、甘油及水按照体积比1：1：20组成；
（3）复合酶解：将一次匀浆液在40℃下加入占匀浆液0.2%复合酶，酶解30min后，灭酶，得酶解液；
所述复合酶是由纤维素酶、半纤维素酶、阿魏酸酯酶及果胶酶按照质量比2：1：1：1组成；
（4）二次匀浆：将酶解液加入2倍体积的冰水，在2500rpm条件下，匀浆8min，进行二次匀浆；
（5）浓缩干燥：将匀浆液用无纺布过滤除渣，取上清液，离心，取上清液，在50℃条件下减压浓缩至浸膏状；
（6）浸提：将浸膏状的浓缩液加入5倍95%冰乙醇，以1000-1200pm条件下搅拌3-5min，升温至70-75℃、提取30min，提取5次；
（7）醇沉：合并上清液，在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，加2-3倍体积以1000-1200pm条件下5min均匀分散,用2倍体积水饱和正丁醇萃取6次,合并正丁醇部分,再用2倍体积正丁醇饱和水洗涤6次,在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，真空冷冻干燥至水分含量4%左右,即得芦笋根总皂甙。
对比例4
一种芦笋根皂甙的高效提取方法，步骤如下：
（1）预处理：挑选直径在在1cm以上的芦笋根，经干式除杂机除去沙土和杂质，随后被送至滚筒式清洗机中用水清洗干净；
（2）一次匀浆：将清洗好的芦笋根切成2-3cm的小段，加入5倍体积的冰水，在2000-2500rpm条件下，匀浆10min，得一次匀浆液；
（3）复合酶解：将一次匀浆液在40℃下加入占匀浆液0.2%复合酶，酶解30min后，灭酶，得酶解液；
所述复合酶是由纤维素酶、半纤维素酶及果胶酶按照质量比2：1：1：1组成；
（4）二次匀浆：将酶解液加入2倍体积的冰水，在2500rpm条件下，匀浆8min，进行二次匀浆；
（5）浓缩干燥：将匀浆液用无纺布过滤除渣，取上清液，离心，取上清液，在50℃条件下减压浓缩至浸膏状；
（6）浸提：将浸膏状的浓缩液加入5倍95%冰乙醇，以1000-1200pm条件下搅拌3-5min，升温至70-75℃、提取30min，提取5次；
（7）醇沉：合并上清液，在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，加2-3倍体积以1000-1200pm条件下5min均匀分散,用2倍体积水饱和正丁醇萃取6次,合并正丁醇部分,再用2倍体积正丁醇饱和水洗涤6次,在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，真空冷冻干燥至水分含量4%左右,即得芦笋根总皂甙。
效果实施例
（一）将实施例1-2及对比例1-4提取的芦笋根皂甙，首先称取乙醇沉淀物得率，具体结果见表1。
表1
Figure DEST_PATH_IMAGE002
（二）将实施例及对比例提取的芦笋根皂甙进行吸光度值检测，芦笋根皂甙样品中加香茅草-高氯酸显色后在545nm波长处测其吸光度，吸光度为0.298（n=5），计算皂甙纯度，具体结果见表2。
表2
Figure DEST_PATH_IMAGE004

Claims (7)

1.一种芦笋根皂甙的高效提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）预处理：挑选直径在1cm以上的芦笋根，经干式除杂机除去沙土和杂质，随后被送至滚筒式清洗机中用水清洗干净；
（2）一次匀浆：将清洗好的芦笋根切成2-3cm的小段，加入5-6倍体积的萃取液进行匀浆，得一次匀浆液；
所述萃取液是由棕榈酸异丙酯、甘油及水组成；
（3）复合酶解：将一次匀浆液在40℃下加入占匀浆液0.1%-0.2%复合酶，酶解20-30min后，灭酶，得酶解液；
所述复合酶是由纤维素酶、半纤维素酶、阿魏酸酯酶及果胶酶按照质量比2：1：1：1组成；
（4）二次匀浆：将酶解液加入1-2倍体积的冰水，进行二次匀浆；
（5）浓缩干燥：将匀浆液用无纺布过滤除渣，取上清液，离心，取上清液，在50℃条件下减压浓缩至浸膏状；
（6）浸提：将浸膏状的浓缩液加入5-6倍95%冰乙醇，以1000-1200rpm条件下搅拌3-5min，然后投入碳酸钙包，升温至70-75℃、提取30-40min，提取3-5次；
（7）合并上清液，在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，加2-3倍体积以1000-1200rpm条件下3-5min均匀分散， 用1-2倍体积水饱和正丁醇萃取4-6次， 合并正丁醇部分， 再用1-2倍体积正丁醇饱和水洗涤4-6次， 在40-45℃条件下减压浓缩至浸膏，真空冷冻干燥至水分含量4% ， 即得芦笋总皂甙。
2.根据权利要求1所述的高效提取方法，其特征在于，所述一次匀浆为在2000-2500rpm条件下，匀浆8-10min。
3.根据权利要求1所述的高效提取方法，其特征在于，所述萃取液是由棕榈酸异丙酯、甘油及水按照体积比1：1：20组成。
4.根据权利要求1所述的高效提取方法，其特征在于，所述二次匀浆为在2000-2500rpm条件下，匀浆8-10min。
5.根据权利要求1所述的高效提取方法，其特征在于，所述离心为在3000-5000rpm条件下，离心10-15min。
6.根据权利要求1所述的高效提取方法，其特征在于，所述碳酸钙包为每1L浓缩液中加入碳酸钙包为10g。
7.根据权利要求6所述的高效提取方法，其特征在于，所述碳酸钙包的内容物为碳酸钙10份及0.1份二氧化硅。
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