CN110530856A - 一种食品中蛋白质含量的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于食品检测技术领域，具体涉及一种食品中蛋白质含量的检测方法。本申请的食品中蛋白质含量的检测方法，通过测试未处理样品中的氮含量和添加沉淀剂A和沉淀剂B后样品中的氮含量，从而获得样品中的蛋白质含量，与现有技术相比，该蛋白质含量检测方法先通过添加沉淀剂A和沉淀剂B使得样品中的蛋白质沉淀，从而获得非蛋白的氮含量，改进了测试流程，使得测得的蛋白质含量准确度更高，可以更加真实的反应食品中蛋白质的含量，且该测试流程操作简单，便于实验人员操作。

Description

一种食品中蛋白质含量的检测方法
技术领域
本发明属于食品检测技术领域，具体涉及一种食品中蛋白质含量的检测方法。
背景技术
食品/农产品欺诈是当今全球社会共同面对和关注的问题。欧盟委员会健康和消费者政策代表John Dalli认为：食品欺诈属于“一种巨大的潜在经济利益所驱使的重要问题”。食品欺诈是一种欺骗消费者的行为，主要通过将劣质食品以次充好在市场上流通的形式，或在加工食品中以劣质原辅料代替价格高昂材料、张贴虚假标签的形式进行。
在过去的数十年间，食品/农产品欺诈的主要形式之一是“用较便宜的替代品完全或部分替代有价值的成分”。以生鲜乳收购环节为例，最初不法商贩通过在生鲜乳中加入水来提高收益。在收购方通过检测蛋白质等营养物质含量的方式来判断掺水情况后，不法商贩人工添加各种物质来影响检测结果。在针对掺假物质的检测方法研制成功之后，不法商贩又会升级掺假手段。仅在过去的十余年期间，乳蛋白质的掺假物就已经历了尿素、三聚氰胺、皮革水解物、大豆分离蛋白等物质。
除了乳与乳制品外，肉与肉制品、丝绸、毛纺织品、皮革制品、以阿胶为代表的药品均遇到过掺假现象。掺假现象不但打击了正规合法企业，产生“劣币驱逐良币”的现象，而且损坏了“中国制造”的品牌形象，降低了中国商品在国际市场的价格。
出现上述情况的主要原因是“掺假检测”。即现在的检测技术通常是在催化加热条件下分解食品中的蛋白质，使其产生氨，氨与硫酸结合生成硫酸铵。再通过碱化蒸馏使氨游离，并用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量计算氮含量，再乘以换算系数，即为蛋白质的含量。这种处理方式使得样品中蛋白质的含量偏高，因样品中含非蛋白氮如有机氮氨基酸、无机氮铵盐等。
发明内容
为了解决上述现有检测技术检测蛋白质含量不准确等问题，本发明提供一种食品中蛋白质含量的检测方法。
为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种食品中蛋白质含量的检测方法，
S1：称取两份等量的样品M和N；
S2：将样品M置于于烧杯中加入蒸馏水并搅拌，接着往烧杯中加入沉淀剂A和沉淀剂B进行混合，将混合后溶液转移至离心管离心分离30-50min；
S3：将步骤1中的样品N和步骤2中离心管内的上清液分别置于消解管中，并加入硫酸铜、硫酸钾及浓硫酸；
S4：将步骤S3中的消解管放置于消解炉中加热至消解管内液体呈溶液呈澄清蓝绿色，冷却后加入水，获得备用溶液M1和溶液N1；
S5：往接收瓶中加入硼酸溶液和混合指示剂，并使冷凝管的下端插入接收瓶的液面下；
S6：将含有溶液M1的消解管安装在定氮仪上，并往消解管内加入碱性溶液至消解管呈棕褐色或红褐色不褪去；开启蒸馏功能通入蒸汽，收集蒸馏液，收集完成后用少量水冲洗冷凝管下端，取下接收瓶；
S7：用标准酸性溶液滴定接收瓶中溶液至灰色或蓝紫色，并根据消耗的酸的体积计算样品M中的氮含量X1；
S8：将含有溶液N1的消解管按步骤S5-S7进行操作，获得样品N中的氮含量X2；
S9：根据获得的样品M中的氮含量X1和样品N中的氮含量X2计算样品中蛋白质的含量。
进一步的，步骤S3还包括取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸于消解管内，并按步骤S4-S7进行操作，计算试剂中的氮含量X0。
进一步的，样品中蛋白质的含量等于样品N中的氮含量X2减去样品M中的氮含量X1和试剂中的氮含量X0。
进一步的，步骤S2中沉淀剂A包括铁氰化钾、铁氰化钠中的一种或多种。
进一步的，沉淀剂A与样品的质量百分比为4.5-6.5:0.2-2.0。
进一步的，沉淀剂B包括乙酸锌，所述乙酸锌与样品的质量百分比为4.5-6.5:0.2-2.0。
进一步的，步骤S4消解管放置于消解炉中的加热步骤包括：将消解管放置于消解炉中升温至180-220℃，并恒温反应1-3小时；接着继续升温至380-420℃，恒温反应至溶液呈澄清蓝绿色，溶液呈澄清蓝绿色后继续加热0.3-1.0h。
进一步的，步骤S5中硼酸溶液的浓度为2％。
进一步的，步骤S6中碱性溶液包括氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、醋酸钠溶液、醋酸钾溶液中的一种或多种。
进一步的，标准酸性溶液包括0.05N硫酸溶液或0.05N盐酸溶液。
本发明提供一种食品中蛋白质含量的检测方法，通过测试未处理样品中的氮含量和添加沉淀剂A和沉淀剂B后样品中的氮含量，从而获得样品中的蛋白质含量，与现有技术相比，该蛋白质含量检测方法先通过添加沉淀剂A和沉淀剂B使得样品中的蛋白质沉淀，从而获得非蛋白的氮含量，改进了测试流程，使得测得的蛋白质含量准确度更高，可以更加真实的反应食品中蛋白质的含量，且该测试流程操作简单，便于实验人员操作。
附图说明
图1为食品中蛋白质含量的检测方法的流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。
实施例一
如图1所示，蛋白质含量的检测方法，本实施例的食品以蛋糕为例进行测试，其方法如下：
S1：称取两份等量的样品M和N；
即称取两份0.5g的同种蛋糕M和N；
S2：将样品M置于于烧杯中加入蒸馏水并搅拌，接着往烧杯中加入沉淀剂A和沉淀剂B进行混合，将混合后溶液转移至离心管离心分离30-50min；
即将蛋糕M置于100mL的烧杯中，并加入20mL三级水，充分搅拌均匀；接着往烧杯中加入4.5g蛋白质沉淀剂A铁氰化钾，混合后再加5.0g蛋白质沉淀剂B乙酸锌，再转移至50mL的离心管内，补充水至50mL的刻度线，在5000r/min的离心机上离心30min；
S3：将步骤1中的样品N和步骤2中离心管内的上清液分别置于消解管中，并加入硫酸铜、硫酸钾及浓硫酸；
即取步骤2中的离心后离心管上清液10mL于消解管中，取步骤S1中的蛋糕N于另一消解管内，接着往两支消解管内加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20mL浓硫酸；同时取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸于另一支消解管内做试剂空白试验；
S4：将步骤S3中的消解管放置于消解炉中加热至消解管内液体呈溶液呈澄清蓝绿色，冷却后加入水，获得备用溶液M1和溶液N1；
即摇匀三支消解管后于瓶口放一漏斗，并同时将消解管放置于消解炉中升温至200℃，并恒温反应2小时；接着继续升温至400℃，恒温反应至溶液呈澄清蓝绿色，溶液呈澄清蓝绿色后继续加热0.5h；
该步骤发生硝化反应的方程式为：
有机物+H2SO4→(NH4)2SO4+CO2↑+SO2↑+SO3↑
加热完成后，取下消解管放冷，小心加入20mL水，获得备用溶液M1、溶液N1、空白试剂溶液；
S5：往接收瓶中加入硼酸溶液和混合指示剂，并使冷凝管的下端插入接收瓶的液面下；
即往接收瓶中加入10mL2％硼酸溶液及混合指示剂1滴，并使冷凝管的下端插入接收瓶的液面下；
S6：将含有溶液M1的消解管安装在定氮仪上，并往消解管内加入碱性溶液至消解管呈棕褐色或红褐色不褪去；开启蒸馏功能通入蒸汽，收集蒸馏液，收集完成后用少量水冲洗冷凝管下端，取下接收瓶；
本步骤中的碱性溶液包括氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、醋酸钠溶液、醋酸钾溶液等，本实施例以40％的氢氧化钠为例进行实验；
开启蒸馏功能通入蒸汽，收集蒸馏液至150mL，收集完成后用少量水冲洗冷凝管下端，取下接收瓶；
该步骤蒸馏反应的方程式为：
(NH4)2SO4+2NaOH→2NH3+2H2O+Na2SO4；
2NH3+4H3BO3→(NH4)2B4O7+5H2O；
S7：用标准酸性溶液滴定接收瓶中溶液至灰色或蓝紫色，并根据消耗的酸的体积计算样品M中的氮含量X1；
即以0.05N的硫酸标准溶液滴定至接收瓶溶液呈现灰色或蓝紫色，并以此作为滴定终点，根据消耗的硫酸的体积计算100g样品M中的氮含量X1为0.22g；
该步骤中滴定反应的方程式为：
(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O→(NH4)2SO4+4H3BO3
S8：将含有溶液N1的消解管按步骤S5-S7进行操作，获得样品N中的氮含量X2；
即将含有溶液N1的消解管按步骤S5-S7进行操作，获得100g样品N中的氮含量X2为7.56g；
S9：根据获得的样品M中的氮含量X1和样品N中的氮含量X2计算样品中蛋白质的含量；
即将含有空白试剂溶液的消解管按步骤S5-S7进行操作，获得空白试剂中的氮含量X0为0g；
根据获得的100g样品M中的氮含量0.22g和100g样品N中的氮含量7.56g，计算100g样品中蛋白质的含量为7.34g。
通过增加测试步骤，改进测试流程，使得蛋糕中的蛋白质含量更加准确，可以更加真实的反应蛋糕中蛋白质的含量。
实施例二
重复实施例一同样蛋糕的实验步骤，经过蛋白质沉淀剂A和蛋白质沉淀剂B沉淀后，100g样品M中的氮含量X1为0.21g；
根据实施例一中测试出的100g样品N中的氮含量7.56g，计算本实施例100g样品中蛋白质的含量为7.35g。
实施例三
本实施例与实施例一的区别在于：采用不同的蛋糕进行测试；
取三份0.5g蛋糕A、B、C，其中蛋糕B和C加入蛋白质沉淀剂A和蛋白质沉淀剂B沉淀后，使得蛋糕B和C的蛋白质沉淀，从而测试蛋糕B和C中的非蛋白质的氮含量；
本实施例按实施例一中的步骤进行测试，从而获得的100g样品A中的氮含量5.73g、100g样品B中的氮含量0.02g、100g样品C中的氮含量0.04g，因此，100g样品B中蛋白质的含量为5.71g；100g样品C中蛋白质的含量为5.69g。
本发明通过增加测试步骤，改进测试流程，使得蛋糕中的蛋白质含量更加准确，并且可以更加真实的反应蛋糕中蛋白质的含量。
上述仅为本发明的优选具体实施方式，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。

Claims (10)

1.一种食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：
S1：称取两份等量的样品M和N；
S2：将样品M置于于烧杯中加入蒸馏水并搅拌，接着往烧杯中加入沉淀剂A和沉淀剂B进行混合，将混合后溶液转移至离心管离心分离30-50min；
S3：将步骤1中的样品N和步骤2中离心管内的上清液分别置于消解管中，并加入硫酸铜、硫酸钾及浓硫酸；
S4：将步骤S3中的消解管放置于消解炉中加热至消解管内液体呈溶液呈澄清蓝绿色，冷却后加入水，获得备用溶液M1和溶液N1；
S5：往接收瓶中加入硼酸溶液和混合指示剂，并使冷凝管的下端插入接收瓶的液面下；
S6：将含有溶液M1的消解管安装在定氮仪上，并往消解管内加入碱性溶液至消解管呈棕褐色或红褐色不褪去；开启蒸馏功能通入蒸汽，收集蒸馏液，收集完成后用少量水冲洗冷凝管下端，取下接收瓶；
S7：用标准酸性溶液滴定接收瓶中溶液至灰色或蓝紫色，并根据消耗的酸的体积计算样品M中的氮含量X1；
S8：将含有溶液N1的消解管按步骤S5-S7进行操作，获得样品N中的氮含量X2；
S9：根据获得的样品M中的氮含量X1和样品N中的氮含量X2计算样品中蛋白质的含量。
2.根据权利要求1所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述步骤S3还包括取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸于消解管内，并按步骤S4-S7进行操作，计算试剂中的氮含量X0。
3.根据权利要求2所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述样品中蛋白质的含量等于样品N中的氮含量X2减去样品M中的氮含量X1和试剂中的氮含量X0。
4.根据权利要求1所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述步骤S2中沉淀剂A包括铁氰化钾、铁氰化钠中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述沉淀剂A与样品的质量百分比为4.5-6.5:0.2-2.0。
6.根据权利要求1所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述沉淀剂B包括乙酸锌，所述乙酸锌与样品的质量百分比为4.5-6.5:0.2-2.0。
7.根据权利要求1所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述步骤S4消解管放置于消解炉中的加热步骤包括：将消解管放置于消解炉中升温至180-220℃，并恒温反应1-3小时；接着继续升温至380-420℃，恒温反应至溶液呈澄清蓝绿色，溶液呈澄清蓝绿色后继续加热0.3-1.0h。
8.根据权利要求1所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述步骤S5中硼酸溶液的浓度为2％。
9.根据权利要求1所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述步骤S6中碱性溶液包括氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、醋酸钠溶液、醋酸钾溶液中的一种或多种。
10.根据权利要求1所述的食品中蛋白质含量的检测方法，其特征在于：所述标准酸性溶液包括0.05N硫酸溶液或0.05N盐酸溶液。
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