CN110487732A - 栗蘑中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及农药残留快速检测方法,具体是一种栗蘑中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测方法。按蔬菜农药残留检测抽样规范NY/T762‑2004进行栗蘑抽样,按胆碱酯酶抑制率法进行检测;样品处理与分析包括:鲜栗蘑按每株不同部位选取点位剪取样本,栗蘑干于不同株剪取样本,分别浸泡于磷酸盐缓冲溶液离心管中,静止15min;在样品中按检出限的浓度添加阳性标准物质;按照GB/T5009.199.2003标准,栗蘑检测样本抑制率低于50%的正常值范围之内,且低于阳性对照检出范围的平均值,判定为阴性,反之判定为阳性。本发明能够确保栗蘑生产质量安全,有利于加快栗蘑在市场的流通。
Description
技术领域
本发明涉及农药残留快速检测方法,具体是一种栗蘑中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测方法。
背景技术
栗蘑(又名灰树花)是食、药兼用蕈菌,属担子菌亚门层菌纲目多孔菌科树花菌属。原限于野生,产量低;现经人工驯化后,产量大大提高。栗蘑含有丰富的氨基酸、蛋白质等多种微量元素。
栗蘑种植户一般是将鲜栗蘑人工撕成丝状,在天气晴好时期,自然晾干;在阴雨天,需要烘干设备烘干,保留物质水分11-13%。夏季栗蘑干极易吸湿回潮,保管不妥,易吸湿变黄,进而发霉虫蛀等,影响品质。因此,在栗蘑生产过程中,部分种植户喷洒敌百虫、低毒性辛硫磷、速灭杀丁等农药进行防治虫害,可能造成农药残留超标。为保证栗蘑质量安全、食用安全,需要对栗蘑农药残留进行快速筛查。
现有的农产品质量安全检测农药残留技术,主要是测得蔬菜总有机磷和氨基甲酸酯类农药,采用标准是GB/T5009.199.2003,标准说明对蘑菇有如下叙述:含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。并未给出蘑菇类检测的具体方法,而针对栗蘑的快速检测筛查目前尚无成熟技术。
发明内容
本发明要解决的技术问题是,依据蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测方法(GB/T5009.199.2003),针对栗蘑的特点,提供一种栗蘑中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测方法,保障栗蘑的质量安全。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是:
一种栗蘑中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测方法,按蔬菜农药残留检测抽样规范NY/T762-2004进行栗蘑抽样,按酶抑制率法进行检测;样品处理与分析按下述方法进行:
(1)鲜栗蘑按每株不同部位选取5个点位,剪成1cm的小块,混均,称取2g样本3份,浸泡于5毫升、PH8.0的磷酸盐缓冲溶液离心管中,静止15min;
(2)栗蘑干来自不同株混合,对每批次均匀分布5个点位,每个点位为一份样品,剪成0.5-1cm碎块,混均,称取0.4g样本3份,浸泡于10毫升、PH8.0的磷酸盐缓冲溶液离心管中,静止15min;
(3)在96孔酶标板上,第一列作为空白对照,第二列作为阳性对照,阳性对照控制在检出限的浓度;选择阴性栗蘑样品,在样品中按检出限的浓度添加阳性标准物质,再按试剂说明书及仪器使用方法操作;
(4)判定标准,按照GB/T5009.199.2003标准,栗蘑检测样本抑制率低于50%的正常值范围之内,且低于阳性对照检出范围的平均值,判定为阴性,反之判定为阳性;每一批做一次阳性对照。
采用上述技术方案的本发明,与现有技术相比,其效果是:
①减少了栗蘑农残检测中的假阳性率,测得大于等于阳性样本对照的抑制率阳性样本,用于气相上机定量检测,阳性率准确率在91.3%以上。
②对栗蘑的快速检测提供了方法、判定标准,减少了财力、人力、时间,加快了栗蘑在市场的流通。
③经晾晒或烘干试验验证:按干湿比例,平均9.53g左右的鲜栗蘑(不同时期的采摘水分含量不等)能够晾晒成1.0g干栗蘑,2g的鲜栗蘑变成干栗蘑为0.21g。所以通过试验选择干栗蘑试验条件为:样本量为0.4g干栗蘑加入10毫升缓冲溶液,浸泡15分钟进行测定,所得结果具有可对比性。
④为栗蘑生产与市场流通提供了更好、方便快捷服务。
⑤确保了栗蘑生产质量安全。
具体实施方式
以下结合实施例详述本发明,目的仅在于更好的理解本发明内容,所举之例并非限制本发明内容。
一种栗蘑中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测方法,按以下步骤进行:
(1)栗蘑的抽样按蔬菜农药残留检测抽样规范NY/T762-2004进行。
(2)检测方法:胆碱酯酶抑制率法(分光光度计法)。
(3).原理:在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酸胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
(4)仪器设备及试剂:农药残留速测仪,酶标板(或比色皿),有效期内农残试剂盒,37℃恒温箱,微量移液器,漏斗,百分之一电子天平。
(5)样品处理与分析:鲜栗蘑按每株不同部位选取5个点位,剪成1cm的小块,混均,称取2g样本3份,浸泡于5毫升,PH8.0的磷酸盐缓冲溶液离心管中,静止15min;栗蘑干是来自不同株混合,对每批次均匀分布5个点位,每个点位为一份样品,剪成0.5-1cm碎块,混均,称取0.4g样本3份,浸泡于10毫升,PH8.0的磷酸盐缓冲溶液离心管中,静止15min;在96孔酶标板上,第一列作为空白对照,在第二列作为阳性对照(阳性对照控制在检出限的浓度,如敌百虫0.2mg/kg),选择阴性栗蘑样品,在样品中按检出限的浓度添加阳性标准物质,再按试剂说明书及仪器使用方法操作;计算:目前速测仪可以直接测得3min前后数值,直接计算出结果,得出样本的抑制率。
(6)判定标准,按照标准GB/T5009.199.2003,栗蘑检测样本抑制率低于50%的正常值范围之内,且低于阳性对照检出范围的平均值,判定为阴性,反之判定为阳性。每一批做一次阳性对照。
下面是五批次栗蘑速测所得的酶抑制率平均数值,每一批次上机气相定量检测需要费用1000元/批次,速测160元/批次;气相定量24小时/批次,速测30min/批次,每批次节省检测费用84%,检测时间提高98%。
本次试验共试验样品685批次,其中筛查出疑似阳性样品46批次,对46批次疑似阳性样品通过气相色谱测定,其中假阳性为4批次,阳性准确率为91.3%。
其中部分试验数据如下:
表1 未做阳性对照数据结果
表2 做阳性对照数据结果
做栗蘑加标阳性对照筛除的假阳性的样本,经气相色谱确定为阴性,故做对照能够进行有效的排除假阳性,提高检测效率和准确性。
以上所述仅为本发明较佳可行的实施例而已,并非因此局限本发明的权利范围,凡运用本发明说明书内容所作的等效变,均包含于本发明的权利范围之内。
Claims (1)
1.一种栗蘑中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测方法,按蔬菜农药残留检测抽样规范NY/T762-2004进行栗蘑抽样,按酶抑制率法进行检测;其特征在于,样品处理与分析按下述方法进行:
(1)鲜栗蘑按每株不同部位选取5个点位,剪成1cm的小块,混均,称取2g样本3份,浸泡于5毫升、PH8.0的磷酸盐缓冲溶液离心管中,静止15min;
(2)栗蘑干来自不同株混合,对每批次均匀分布5个点位,每个点位为一份样品,剪成0.5-1cm碎块,混均,称取0.4g样本3份,浸泡于10毫升、PH8.0的磷酸盐缓冲溶液离心管中,静止15min;
(3)在96孔酶标板上,第一列作为空白对照,第二列作为阳性对照,阳性对照控制在检出限的浓度;选择阴性栗蘑样品,在样品中按检出限的浓度添加阳性标准物质,再按试剂说明书及仪器使用方法操作;
(4)判定标准,按照GB/T5009.199.2003标准,栗蘑检测样本抑制率低于50%的正常值范围之内,且低于阳性对照检出范围的平均值,判定为阴性,反之判定为阳性;每一批做一次阳性对照。
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