CN110484605A - 一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用 - Google Patents

一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110484605A
CN110484605A CN201910898709.0A CN201910898709A CN110484605A CN 110484605 A CN110484605 A CN 110484605A CN 201910898709 A CN201910898709 A CN 201910898709A CN 110484605 A CN110484605 A CN 110484605A
Authority
CN
China
Prior art keywords
microrna
gene
bound fraction
living cells
detection
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910898709.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110484605B (zh
Inventor
周琳
陈鸣
唱凯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
First Affiliated Hospital of PLA Military Medical University
Original Assignee
First Affiliated Hospital of PLA Military Medical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by First Affiliated Hospital of PLA Military Medical University filed Critical First Affiliated Hospital of PLA Military Medical University
Priority to CN201910898709.0A priority Critical patent/CN110484605B/zh
Publication of CN110484605A publication Critical patent/CN110484605A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110484605B publication Critical patent/CN110484605B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6841—In situ hybridisation

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供了一种活细胞原位检测microRNA‑34的基因，涉及基因工程技术领域。本发明所述基因基于DNA立体镊子结构快速原位检测microRNA，能够实现在活细胞内的迅速检测，避免了microRNA提取，逆转录以及PCR等一系列的操作。同时针对microRNA针对疾病诊断特异性较差的现状，原位检测能够很好的实现对microRNA表达异常的细胞的检测，从而明确发生疾病的细胞及组织来源，能够极大地增强microRNA检测的临床意义。在本发明实施例中，对梯度稀释待测microRNA‑34进行检测，检测限达到1.499nm，灵敏度高；同时相较于其他序列相似的microRNA，表现出高度特异性。

Description

一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和 应用
技术领域
本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用。
背景技术
MicroRNA作为一类内源性、非编码的RNA分子，其在生命活动的许多过程中起着重要的调节作用，尤其是与包括癌症在内的众多疾病的发生、发展密切相关。MicroRNA异常表达与肿瘤等疾病的密切关系促使其可以作为诊断和预测癌症的生物标志物。然而，由于microRNA本身含量低、易于降解、尺寸小、序列相似以及在肿瘤中广泛的异常表达等特点，使其难以通过简单方法直接检测，因而急需发展高灵敏度、高特异性的原位检测方法。目前常用的microRNA检测方法包括northernblot，实时定量PCR以及原位杂交等，然而这几种方法对microRNA检测过程中均无法兼顾高灵敏度、高特异性及原位检测这三个重要因素，并且其操作过程繁琐，条件要求苛刻，需要有经验的人员进行操作，从而限制了其应用范围。然而，在临床及科研中，单一的microRNA不能发挥诊断作用的重要原因之一就是不能判定其细胞来源，而实时的高灵敏的microRNA原位检测将可以弥补这一缺陷。因此，实现microRNA在活细胞内的原位检测将是推动其在临床领域应用的一大机遇。
近几年来，对microRNA和mRNA的胞内检测逐渐开始崭露头角。前期有研究利用上转发光金纳米粒子修饰的DNA四面体结构实现了对活细胞内的microRNA的定量检测，或是利用石墨烯结合DNA荧光探针实现了对活细胞内microRNA的原位检测。然而，目前核酸分子的胞内检测大多还需辅以各种纳米材料作为载体实现，其细胞毒性，体内代谢效率等问题难以避免。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用，利用生物相容性极高的DNA纳米结构进行胞内检测，有效减少对细胞本身活性的影响，能够实现在活细胞内的迅速检测，避免了microRNA提取，逆转录以及PCR等一系列的操作，能够简单有效的快速实现对microRNA的检测。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种活细胞原位检测microRNA-34的基因，所述基因由P1、P2、P3、P4、P5和P6组装成立体镊子结构，所述立体镊子结构包括5条边和4个面；所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述P4的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述P5的核苷酸序列如SEQID NO.5所示，所述P6的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
在所述立体镊子结构中，所述P1和P2的结合部分形成固定边1；P1和P3的结合部分连接P1和P5的结合部分形成边2；P2和P3的结合部分连接P2和P5的结合部分形成边3；P2和P4的结合部分连接P2和P6的结合部分形成边4；P1和P4的结合部分连接P1和P6的结合部分形成边5；所述固定边1、边2和边5形成面1，所述固定边1、边3和边4形成面2，所述面1和面2以所述固定边1为轴开合；在所述边2和边3上包括microRNA的结合部。
优选的，在所述立体镊子结构中，还包括荧光基团和荧光淬灭基团。
优选的，在所述P5和P6的一端分别包含有荧光基团和荧光淬灭基团。
本发明还提供了所述基因的制备方法，包括以下步骤：将P1、P2、P3、P4、P5和P6等体积混合后，于95℃下变性5min，降温后得所述基因。
优选的，所述P1、P2、P3、P4、P5和P6的浓度均为10μM。
本发明还提供了一种活细胞原位检测microRNA-34的试剂盒，包括所述基因或利用所述制备方法制备得到的基因。
本发明还提供了所述试剂盒在活细胞原位检测microRNA-34中的应用。
优选的，在活细胞原位检测时，将所述基因与待测RNA样本于37℃共孵育1h，当荧光被淬灭时，待测RNA样本中不包含有microRNA-34；当表现出荧光时，待测RNA样本中包含有microRNA-34。
本发明提供了一种活细胞原位检测microRNA-34的基因，基于DNA立体镊子结构快速原位检测microRNA，能够实现在活细胞内的迅速检测，避免了microRNA提取，逆转录以及PCR等一系列的操作，能够简单有效的快速实现对microRNA的检测。同时针对microRNA针对疾病诊断特异性较差的现状，原位检测能够很好的实现对microRNA表达异常的细胞的检测，从而明确发生疾病的细胞及组织来源，能够极大地增强microRNA检测的临床意义。在本发明实施例中，对梯度稀释待测microRNA-34进行检测，检测限达到1.499nm，灵敏度高；同时相较于其他序列相似的microRNA，表现出高度特异性。
附图说明
图1为本发明所述基因的立体镊子结构图；
图2为P1和P2所形成的立体DNA镊子的基本形状；
图3为P3、P4、P5和P6与P1和P2的结合关系；
图4为所述基因与microRNA-34结合后的结构图；
图5为不同浓度下的microRNA-34与所述结构的基因结合后的波长图；
图6为荧光强度与microRNA-34浓度的线性分析图；
图7为不同种类的microRNA与所述结构的基因结合后的波长分析图。
具体实施方式
本发明提供了一种活细胞原位检测microRNA-34的基因，所述基因由P1、P2、P3、P4、P5和P6组装成立体镊子结构，所述立体镊子结构包括5条边和4个面；所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述P4的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述P5的核苷酸序列如SEQID NO.5所示，所述P6的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
在所述立体镊子结构中，所述P1和P2的结合部分形成固定边1；P1和P3的结合部分连接P1和P5的结合部分形成边2；P2和P3的结合部分连接P2和P5的结合部分形成边3；P2和P4的结合部分连接P2和P6的结合部分形成边4；P1和P4的结合部分连接P1和P6的结合部分形成边5；所述固定边1、边2和边5形成面1，所述固定边1、边3和边4形成面2，所述面1和面2以所述固定边1为轴开合；在所述边2和边3上包括microRNA的结合部。
在本发明中，所述立体镊子结构中的结合部分是基于碱基互补配对原则结合起来的。本发明所述基因结构如图1所示，P1和P2部分结合构成了立体DNA镊子的基本形状(图2)，P3和P4分别与P1和P2结合，稳定立体镊子的结构，P5和P6分别与P1和P2部分结合(图3)，P5和P6遗留的部分设计为miRNA-34的互补序列，作为microRNA结合的位点，由于DNA单链是柔性结构，故无法保持四面体的结构，而导致该条棱连接的两个面闭合，形成类似闭合的“扇贝”的结构。而当待测microRNA-34(UGGCAGUGUCUUAGCUGGUUGU)存在时，可以与所述microRNA的结合部的单链杂交形成刚性的双链，重新支撑起四面体结构，打开“扇贝”(图4)。
在本发明的所述立体镊子结构中，优选还包括荧光基团和荧光淬灭基团，在所述P5和P6的一端分别都包含有所述荧光基团和荧光淬灭基团。当所述三维DNA镊子为开的状态时，荧光亮；当所述三维DNA镊子为闭合的状态时，荧光暗，因此可通过荧光的亮暗，判断三维DNA镊子的开合状态，从而判断是否与microRNA杂交。
本发明还提供了所述基因的制备方法，包括以下步骤：将P1、P2、P3、P4、P5和P6等体积混合后，于95℃下变性5min，降温后得所述基因。
在本发明中所述P1、P2、P3、P4、P5和P6的浓度优选的均为10μM。本发明对发生所述变性的仪器并没有特殊限定，优选PCR仪。本发明所述降温优选为自然降温至室温(18～25℃)。
本发明还提供了一种活细胞原位检测microRNA-34的试剂盒，包括所述基因或利用所述制备方法制备得到的基因。
本发明还提供了所述试剂盒在活细胞原位检测microRNA-34中的应用。
本发明所述活细胞原位检测优选为非诊断目的。本发明在进行所述活细胞原位检测时，优选将所述基因与待测RNA样本37℃共孵育1h，当不存在microRNA-34时，荧光基团与猝灭基团之间距离较近，荧光被淬灭，当存在microRNA-34时，通过miRNA与P5或P6的结合，荧光基团和淬灭基团之间的距离增大，荧光得以释放出来。因此一条microRNA可以对应一个荧光基团，以此可以根据荧光的强度定量microRNA的数量。
下面结合实施例对本发明提供的活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
将立体DNA镊的组装链分别以10μM的浓度等比例混合后95℃变性5min，然后缓慢降温至室温形成三维DNA镊结构。立体DNA镊组装链序列见表1。
表1立体DNA镊的组装链序列
对上述得到的三维DNA镊结构进行灵敏度和特异性检测：
1、分别将microRNA-34梯度稀释为1000nM，500nM，200nM，100nM，50nM，40nM，30nM，20nM，10nM，1nM，直至荧光强度变化与空白对照组无显著性差异时为止，然后分别将稀释后的microRNA-34与上述三维DNA镊结构在37℃下共孵育1h后在荧光显微镜下观察结果。结果如图5所示，确定其检测下限为1.499nM。
对荧光强度与microRNA-34浓度进行线性分析，结果如表2和图6所示：Y＝1.041X+202(Y为荧光强度，X为浓度nM)。
表2不同浓度下的荧光强度
2、选取与待测microRNA-34序列类似的microRNA(如microRNA-21，microRNA-27)作为阴性对照，与上述三维DNA镊结构在37℃下共孵育1h后在荧光显微镜下观察结果，验证该立体镊子检测microRNA的特异性，结果如图7所示。
本发明提供了一种活细胞原位检测microRNA-34的基因，能够实现在活细胞内的迅速检测microRNA-34，特异性好，灵敏度高。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
<120> 一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用
<160> 6
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 88
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
cgcgcacctg agagtccttc taatagggtt tcctggtcaa gcggtgaact agaatgccct 60
ttgggctgtt ccgggtgtgg ctcgtccg 88
<210> 2
<211> 89
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
ggccgaggac tcctgtcctg gtcaagcggt ttggcgaact ggtcctgcgt ctacttaccg 60
tttccgacga gccacacccg gaacagccc 89
<210> 3
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
tctcaggtgc gcgtttcggt aagtagacg 29
<210> 4
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
aggagtcctc ggcctttggg cattctagtt 30
<210> 5
<211> 48
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
ccctattaga aggacaacca gctaagacac tgccaggacc agttcgcc 48
<210> 6
<211> 48
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
ccgcttgacc aggacaacca gctaagacac tgccaccgct tgaccagg 48

Claims (8)

1.一种活细胞原位检测microRNA-34的基因，其特征在于，所述基因由P1、P2、P3、P4、P5和P6组装成立体镊子结构，所述立体镊子结构包括5条边和4个面；所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述P3的核苷酸序列如SEQID NO.3所示，所述P4的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述P5的核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示，所述P6的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
在所述立体镊子结构中，所述P1和P2的结合部分形成固定边1；P1和P3的结合部分连接P1和P5的结合部分形成边2；P2和P3的结合部分连接P2和P5的结合部分形成边3；P2和P4的结合部分连接P2和P6的结合部分形成边4；P1和P4的结合部分连接P1和P6的结合部分形成边5；所述固定边1、边2和边5形成面1，所述固定边1、边3和边4形成面2，所述面1和面2以所述固定边1为轴开合；在所述边2和边3上包括microRNA的结合部。
2.根据权利要求1所述基因，其特征在于，在所述立体镊子结构中，还包括荧光基团和荧光淬灭基团。
3.根据权利要求2所述基因，其特征在于，在所述P5和P6的一端分别包含有所述荧光基团和荧光淬灭基团。
4.权利要求1～3任一项所述基因的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将P1、P2、P3、P4、P5和P6等体积混合后，于95℃下变性5min，降温后得所述基因。
5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，所述P1、P2、P3、P4、P5和P6的浓度均为10μM。
6.一种活细胞原位检测microRNA-34的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～3任一项所述基因或利用权利要求4或5所述制备方法制备得到的基因。
7.权利要求6所述试剂盒在活细胞原位检测microRNA-34中的应用。
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，在活细胞原位检测时，将所述基因与待测RNA样本于37℃共孵育1h，当荧光被淬灭时，待测RNA样本中不包含有microRNA-34；当表现出荧光时，待测RNA样本中包含有microRNA-34。
CN201910898709.0A 2019-09-23 2019-09-23 一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用 Expired - Fee Related CN110484605B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910898709.0A CN110484605B (zh) 2019-09-23 2019-09-23 一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910898709.0A CN110484605B (zh) 2019-09-23 2019-09-23 一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110484605A true CN110484605A (zh) 2019-11-22
CN110484605B CN110484605B (zh) 2020-07-28

Family

ID=68559211

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910898709.0A Expired - Fee Related CN110484605B (zh) 2019-09-23 2019-09-23 一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110484605B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114875034A (zh) * 2022-05-09 2022-08-09 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 一种同时检测赭曲霉毒素a和玉米赤霉烯酮的三维dna纳米镊子及其制备方法和应用

Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101341259A (zh) * 2005-08-01 2009-01-07 俄亥俄州立大学研究基金会 用于乳腺癌的诊断、预后和治疗的基于MicroRNA的方法和组合物
CN102443643A (zh) * 2011-12-20 2012-05-09 苏州福英基因科技有限公司 各种癌症病理演变前期microrna-34水平原位杂交检测试剂盒及检测方法和应用
CN102899418A (zh) * 2012-11-09 2013-01-30 中国科学院上海应用物理研究所 一种基于DNA三维纳米结构探针的电化学miRNA检测方法
CN103698375A (zh) * 2013-12-27 2014-04-02 上海市计量测试技术研究院 一种检测miRNA的方法
CN104342155A (zh) * 2014-10-13 2015-02-11 江南大学 一种同时具有荧光及磁性和手性信号的金字塔组装结构的制备方法
CN104964960A (zh) * 2015-06-08 2015-10-07 江南大学 一种基于四面体嵌银结构的超灵敏检测血管内皮生长因子的方法
CN106498047A (zh) * 2016-10-21 2017-03-15 江南大学 基于金‑上转换纳米粒子四面体的双信号原位检测胞内microRNA的方法
WO2017046181A1 (en) * 2015-09-14 2017-03-23 Genfit Methods for diagnosing and evaluating non-alcoholic steatohepatitis
CN107727705A (zh) * 2017-09-28 2018-02-23 东南大学 一种酶反应检测纳米孔电学传感器
CN108018354A (zh) * 2017-12-19 2018-05-11 贵州医科大学 MicroRNA-34在抑制前列腺癌转移治疗中的新用途
CN109706226A (zh) * 2019-03-11 2019-05-03 中国科学院化学研究所 一种基于不对称PCR和LAMP循环扩增反应进行miRNA快速检测的方法

Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101341259A (zh) * 2005-08-01 2009-01-07 俄亥俄州立大学研究基金会 用于乳腺癌的诊断、预后和治疗的基于MicroRNA的方法和组合物
CN102443643A (zh) * 2011-12-20 2012-05-09 苏州福英基因科技有限公司 各种癌症病理演变前期microrna-34水平原位杂交检测试剂盒及检测方法和应用
CN102899418A (zh) * 2012-11-09 2013-01-30 中国科学院上海应用物理研究所 一种基于DNA三维纳米结构探针的电化学miRNA检测方法
CN103698375A (zh) * 2013-12-27 2014-04-02 上海市计量测试技术研究院 一种检测miRNA的方法
CN104342155B (zh) * 2014-10-13 2016-02-10 江南大学 一种同时具有荧光及磁性和手性信号的金字塔组装结构的制备方法
CN104342155A (zh) * 2014-10-13 2015-02-11 江南大学 一种同时具有荧光及磁性和手性信号的金字塔组装结构的制备方法
CN104964960A (zh) * 2015-06-08 2015-10-07 江南大学 一种基于四面体嵌银结构的超灵敏检测血管内皮生长因子的方法
WO2017046181A1 (en) * 2015-09-14 2017-03-23 Genfit Methods for diagnosing and evaluating non-alcoholic steatohepatitis
CN108138232A (zh) * 2015-09-14 2018-06-08 基恩菲特公司 用于诊断和评估非酒精性脂肪性肝炎的方法
CN106498047A (zh) * 2016-10-21 2017-03-15 江南大学 基于金‑上转换纳米粒子四面体的双信号原位检测胞内microRNA的方法
WO2018072745A1 (zh) * 2016-10-21 2018-04-26 江南大学 基于金-上转换纳米粒子四面体的双信号原位检测胞内microRNA的方法
CN107727705A (zh) * 2017-09-28 2018-02-23 东南大学 一种酶反应检测纳米孔电学传感器
CN108018354A (zh) * 2017-12-19 2018-05-11 贵州医科大学 MicroRNA-34在抑制前列腺癌转移治疗中的新用途
CN109706226A (zh) * 2019-03-11 2019-05-03 中国科学院化学研究所 一种基于不对称PCR和LAMP循环扩增反应进行miRNA快速检测的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WENTING YANG等: "Programmed Dual-Functional DNA Tweezer for Simultaneous and Recognizable Fluorescence Detection of microRNA and Protein", 《ANAL. CHEM.》 *
XUE GONG等: "RNA-regulated molecular tweezers for sensitive fluorescent detection of microRNA from cancer cells", 《BIOSENSORS ANDBIOELECTRONICS》 *
余元勋主编: "《中国分子胃癌学》", 30 April 2016, 安徽科学技术出版社 *
赵志敏等: "microRNA_34基因甲基化与肿瘤关系研究进展", 《农垦医学》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114875034A (zh) * 2022-05-09 2022-08-09 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 一种同时检测赭曲霉毒素a和玉米赤霉烯酮的三维dna纳米镊子及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN110484605B (zh) 2020-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2021129581A (ja) 核酸の検知
KR102026096B1 (ko) 핵산 검출용 형광핵산나노구조체-그래핀 바이오센서
Tao et al. Double-loop hairpin probe and doxorubicin-loaded gold nanoparticles for the ultrasensitive electrochemical sensing of microRNA
KR101496671B1 (ko) 핵산 검출용 조성물 및 이를 이용한 핵산 검출 방법
CN103451182B (zh) 裂开型核酸适配体探针及其在肿瘤细胞检测、捕获与释放中的应用方法
JP7438553B2 (ja) 分子内動力学的プローブ
Gao et al. In situ detection of plasma exosomal microRNA for lung cancer diagnosis using duplex-specific nuclease and MoS 2 nanosheets
Meng et al. FRET investigation toward DNA tetrahedron-based ratiometric analysis of intracellular telomerase activity
Li et al. Single-molecule fluorescence resonance energy transfer and its biomedical applications
CN108430336A (zh) 循环细胞、蛋白质和核酸的体内收集和局部定量以及特征分析
Zhang et al. A dual “turn-on” biosensor based on AIE effect and FRET for in situ detection of miR-125b biomarker in early Alzheimer's disease
Jarrett et al. Assessment of mitochondrial damage in retinal cells and tissues using quantitative polymerase chain reaction for mitochondrial DNA damage and extracellular flux assay for mitochondrial respiration activity
Li et al. Polymerase chain reaction-based ultrasensitive detection of HBV DNA via G-quadruplex selective iridium (III) complex luminescent probe
Shandilya et al. Gold based nano-photonic approach for point-of-care detection of circulating long non-coding RNAs
Mohajeri et al. An update on advances in new developing DNA conjugation diagnostics and ultra-resolution imaging technologies: possible applications in medical and biotechnological utilities
CN102321759B (zh) 一种检测s1核酸酶及其抑制剂的荧光方法
CN110484605A (zh) 一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用
Ilbeigi et al. Photo-genosensor for Trichomonas vaginalis based on gold nanoparticles-genomic DNA
Grohmann et al. Making connections—strategies for single molecule fluorescence biophysics
Zhang et al. Controllable Assembly of a Quantum Dot-Based Aptasensor Guided by CRISPR/Cas12a for Direct Measurement of Circulating Tumor Cells in Human Blood
Liu et al. Using time-shared scanning optical tweezers assisted two-photon fluorescence imaging to establish a versatile CRISPR/Cas12a-mediated biosensor
Raab et al. Transport and detection of unlabeled nucleotide targets by microtubules functionalized with molecular beacons
CN112501257A (zh) 一种基于核酸自组装无酶催化的circRNA活细胞内成像的可视化传感器
Jiang et al. Tetrahedral DNA Nanoconjugates for Simultaneous Measurement of Telomerase Activity and miRNA
Lan et al. A photoluminescent biosensor based on long-range self-assembled DNA cascades and upconversion nanoparticles for the detection of breast cancer-associated circulating microRNA in serum samples

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20200728

Termination date: 20210923

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee