CN110470748A - 一种高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法 - Google Patents
一种高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110470748A CN110470748A CN201810446597.0A CN201810446597A CN110470748A CN 110470748 A CN110470748 A CN 110470748A CN 201810446597 A CN201810446597 A CN 201810446597A CN 110470748 A CN110470748 A CN 110470748A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- impurity
- phosphate buffer
- method described
- mobile phase
- moxifloxacin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
本发明属于分析化学领域，具体涉及盐酸莫西沙星有关物质的检测方法，选用苯基键合硅胶为填料的色谱柱，以缓冲液与有机相的混合溶剂梯度洗脱作为流动相进行检测。本发明通过对色谱柱、洗脱梯度及柱温等技术的改进，实现了在同一个色谱柱条件下，对盐酸莫西沙星16种杂质的有效分离。本发明稳定性好，具有良好的专属性，灵敏度高，分离度高。
Description
技术领域
本发明属于分析化学领域，具体涉及盐酸莫西沙星有关物质的检测方法。
背景技术
盐酸莫西沙星(Moxifloxacin hydrochloride)，化学名为：1-环丙基-6-氟-7-((4aS,7aS)-1H-
[3,4-b]六氢吡啶并二氢吡咯-6(2H))-8-甲氧基-4-氧-1,4-二氢喹啉-3-羧酸盐酸盐，结构式如下：
盐酸莫西沙星是德国拜耳医药公司研制的超广谱喹诺酮类抗生素，于1999年9月首次在德国上市，同年12月获FDA批准在美国上市。盐酸莫西沙星是一种具有广谱抗菌活性和杀菌作用很强的8-甲氧基氟喹诺酮类抗菌药，对革兰阳性菌，革兰阴性菌，厌氧菌，抗酸菌和非典型微生物如支原体，衣原体和军团菌等均有抗菌活性。
有关物质是指在原料药生产中带入的起始物料、试剂、中间体、副产物和异构体等物质，也可能是制剂在生产、储藏和运输过程中产生的降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。为保证药物的安全有效性，需要对药物中的有关物质进行研究、检测和监控。
发明专利CN201710154924.0使用液相色谱法检测盐酸莫西沙星注射液中有关物质时，仅能检测出5种杂质，目前还未发现能够检测盐酸莫西沙星16种有关物质的方法。
本发明通过色谱柱、优选洗脱梯度及优选柱温等技术的优选改进，达到了对盐酸莫西沙星16种有关物质的分离检测，同时也更能满足药品注册要求。本发明稳定性好，具有良好的专属性，灵敏度高，分离度高。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种采用高效液相色谱法检测盐酸莫西沙星16种有关物质的方法。本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中选用苯基键合硅胶为填料的色谱柱，柱温设置为37℃±1℃；流动相A为磷酸盐缓冲液-甲醇，体积比为80:20，流动相B为磷酸盐缓冲液-甲醇，体积比为20:80，采用梯度洗脱；磷酸盐缓冲溶液含有四丁基硫酸氢铵、磷酸二氢钾和磷酸，所述的梯度洗脱为：
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中磷酸盐缓冲液含有四丁基硫酸氢铵0.5g/L、磷酸二氢钾1.0g/L和磷酸2ml/L。
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中流动相的流速为0.7～0.9ml/min，检测波长为293nm或282nm。
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述的样品溶液采用如下方法配制：取磷酸二氢钾1.0g，四丁基硫酸氢铵0.5g，无水亚硫酸钠0.05g，加水适量使溶解，加磷酸2ml，用水稀释至1000ml即得稀释剂；取盐酸莫西沙星或含莫西沙星的制剂适量，用稀释剂配制成每1ml中含莫西沙星0.48mg的样品溶液。
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述样品溶液的进样体积为20μl。
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述柱温设置为37℃。
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述的色谱柱采用Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm。
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述的流动相的流速为0.8ml/min。
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中所述的磷酸盐缓冲液pH值为2.0～3.2，优选地，pH值为3.0。
本发明公开的高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其中有关物质的结构如下表：
杂质M：
制备工艺：以杂质SM2-F和莫西沙星中间体M-1作起始物料，乙腈作溶剂，三乙胺作碱，室温过夜反应后用浓盐酸调至pH＝1～2得到杂质M。
杂质N：
制备工艺：以杂质SM2-D和莫西沙星中间体M-1作起始物料，乙腈作溶剂，三乙胺作碱，室温过夜反应后用浓盐酸调至pH＝1～2，得到杂质N。
有益效果：
1、本发明提供的盐酸莫西沙星有关物质的检测方法，采用37℃柱温，明显低于现有技术的柱温，更有利于色谱柱的耐用性，且通过色谱柱、优选洗脱梯度及优选柱温等技术的优选改进，实现了在同一个色谱柱条件下，对盐酸莫西沙星16种有关物质的有效分离检测，简化了分析方法。
2、本发明提供的盐酸莫西沙星有关物质的检测方法，梯度洗脱时间短：容易实现大批量样品的检测，提高分析效率，节省流动相中有机溶剂的用量，降低了检测成本，减少了环境污染。
3、采用本发明提供的检测方法，分离杂质的数量远超于现有技术，更利于控制药品质量，提高用药安全。
附图说明：
附图1：实施例1中HPLC检测图谱；
附图2：实施例2中HPLC检测图谱；
附图3：实施例3中HPLC检测图谱；
附图4：对比例1中HPLC检测图谱；
附图5：对比例2中HPLC检测图谱；
附图6：对比例3中在梯度程序①下的HPLC检测图谱；
附图7：对比例3中在梯度程序②下的HPLC检测图谱；
附图8：对比例4中在梯度程序②下柱温在40℃下的HPLC检测图谱；
附图9：对比例4中在梯度程序②下柱温在35℃下的HPLC检测图谱；
附图10：对比例5中在35℃柱温下的HPLC检测图谱；
附图11：对比例5中在40℃柱温下的HPLC检测图谱；
附图12：对比例6中采用色谱柱1下的HPLC检测图谱；
附图13：对比例6中采用色谱柱2下的HPLC检测图谱；
附图14：对比例6中采用色谱柱3下的HPLC检测图谱；
附图15：对比例7中的HPLC检测图谱；
具体实施方式：
实施例1
高效液相色谱条件：
苯基键合硅胶为填充剂，Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；柱温：37℃；检测波长：293nm；进样量：20μl；
梯度洗脱程序如下：
溶液配制：
稀释剂：称无水亚硫酸钠50mg、四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml，加水溶解并稀释至1000ml；
杂质定位溶液：取杂质A、B、C、E适量，加稀释剂溶解并制成每1ml各约含0.1mg的溶液；取杂质D、F、G、H、I、J、K、M、N、O、SM1、脱羧杂质适量，用甲醇溶解，加稀释剂定容制成每1ml各约含0.1mg的溶液，即得各杂质的定位溶液。
系统适用性溶液：取样品3ml，置10ml量瓶中，分别加各杂质定位溶液各0.1ml，用稀释剂稀释至刻度(每1ml中含莫西沙星0.48mg)。
取系统适用性溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图如附图1所示。从附图1可以看出，在该色谱条件下，莫西沙星和16个杂质相互之间的分离度均大于1.8，能实现有效分离。各成分具体的保留时间及分离度见表2。
经稳定性试验考察，16个杂质中有9个杂质收入质量标准，分别为杂质A/B/C/D/E/F/I/G/脱羧杂质。因此，我们对这9个杂质进行准确度验证。
莫西沙星对照品贮备液：精密称取盐酸莫西沙星对照品适量，精密称定，加稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含莫西沙星0.1mg的溶液，混匀；精密量取1ml，置10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度。
杂质对照品原液：分别取杂质A、B、C、E适量，精密称定，加稀释剂溶解后，用稀释剂定量稀释制成每1ml中约含各杂质0.1mg的溶液，混匀；分别取杂质D、F、G、I、脱羧杂质适量，精密称定，加甲醇溶解后，用稀释剂定量稀释制成每1ml中约含各杂质0.1mg的溶液，混匀，即得各杂质对照品贮备液；精密量取各杂质对照品贮备液2ml，置20ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度。
混合对照品溶液：精密量取莫西沙星对照品贮备液、杂质对照品原液各1ml，置同一20ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度。
准确度-50％限度水平：取样品6ml，置20ml量瓶中，加杂质对照品原液0.5ml，用稀释剂稀释至刻度(每1ml中含莫西沙星0.48mg，含杂质A、B、C、D、E、F、G、I、脱羧杂质各约0.25μg)。
准确度-100％限度水平：取样品3ml，置10ml量瓶中，加杂质对照品原液0.5ml，用稀释剂稀释至刻度(每1ml中含莫西沙星0.48mg，含杂质A、B、C、D、E、F、G、I、脱羧杂质各约0.5μg)。
样品溶液：取样品3ml，置10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度(每1ml中含莫西沙星0.48mg)。采用外标法计算各杂质的回收率。结果见表1。
表1准确度试验结果
表2实施例1高效液相色谱分析的保留时间及分离度
实施例2
高效液相色谱条件：
色谱柱：苯基键合硅胶为填充剂，Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm；
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至2.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；柱温：37℃；检测波长：293nm；进样量：20μl；
梯度洗脱程序如下：
溶液配制同实施例1；
取系统适用性溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图如附图2所示。从附图2可以看出，调整流动相pH＝2.0时，各成分之间基本能达到有效分离，且方法学验证均满足要求。各成分具体的保留时间及分离度见表3。
表3实施例2高效液相色谱分析的保留时间及分离度
实施例3
高效液相色谱条件：
色谱柱：苯基键合硅胶为填充剂，Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm；
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；柱温：37℃；检测波长：282nm；进样量：20μl；
梯度洗脱程序如下：
溶液配制同实施例1；
取系统适用性溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图如附图3所示。从附图3可以看出，在检测波长为282nm条件下，各成分之间的分离度均大于1.7，能够实现有效分离，且方法学验证均满足要求。各成分具体的保留时间及分离度见表4。
表4实施例3高效液相色谱分析的保留时间及分离度
对比例1
高效液相色谱条件：
苯基键合硅胶为填充剂，Kromasil Eternity-5-PhenylHexyl，4.6mm×250mm，5μm；
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；柱温：45℃；检测波长：293nm；进样量：20μl；
梯度洗脱程序：
溶液配制：稀释剂、杂质定位溶液、系统适用性溶液的配制均同实施例1。
取系统适用性溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图如附图4所示。从附图4可以看出，在该色谱条件下，各成分之间的分离度均大于1.5，具体保留时间及分离度见表6。
表6对比例1高效液相色谱分析的保留时间及分离度
为验证该色谱条件的可行性，进一步对收入质量标准的主要杂质进行准确度验证，采用外标法计算各杂质的回收率。准确度验证实验中的各溶液配制同实施例1，准确度实验数据结果见表5。
通过准确度验证试验结果可知，该色谱条件下杂质A与莫西沙星分离度虽大于1.5(准确度-100％限度水平，R＝1.79)，但通过放大色谱图观察发现：杂质A出峰位置仍有主峰洗脱，干扰杂质A积分结果(基线积分偏高，谷底积分偏低)，导致杂质A积分误差大，回收率不满足要求。
表5准确度预试验结果
对比例2
高效液相色谱条件：
苯基键合硅胶为填充剂，Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；柱温：45℃；检测波长：293nm；进样量：20μl；
梯度洗脱程序：
各溶液的配制均同实施例1。
取系统适用性溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图如附图5所示。从附图5可以看出，在该色谱条件下，各成分之间的分离度均大于2.4，能够实现有效分离，具体保留时间及分离度见表8。
表8对比例2高效液相色谱分析的保留时间及分离度
为验证该色谱条件的可行性，进一步对收入质量标准的9个杂质进行准确度验证，采用外标法计算各杂质的回收率。准确度验证实验中的各溶液配制同实施例1，准确度实验数据结果见表7。
通过准确度验证试验结果可知，更换小粒径的短色谱柱后，杂质A与莫西沙星峰间分离度提高(准确度-100％限度水平，R＝2.41)，杂质A在限度(0.1％)浓度50％、100％的回收率基本满足要求(>85％)，但杂质F与莫西沙星峰间分离度降低(准确度-100％限度水平，分离度由4.71→2.79)，其在限度(0.1％)浓度50％的回收率降低(<85％)，回收率不满足要求。
表7更换色谱柱准确度预试验结果
对比例3
高效液相色谱条件：
苯基键合硅胶为填充剂，Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；柱温：45℃；检测波长：293nm；进样量：20μl；
梯度程序改变为梯度程序①：
各溶液配制同实施例1；
考察主成分及各杂质的色谱行为，结果表明：杂质O(单杂定位RT：22.382min)与杂质C(单杂定位RT：22.349min)保留时间基本一致，杂质G(单杂定位RT：39.725min)与SM1(单杂定位RT：39.378min)保留时间基本一致，仍未分离，方法需继续优化。色谱图见图6，具体的保留时间及分离度见表9。
表9对比例3在梯度程序①下的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
进一步调整梯度程序②：
试验结果表明，改变梯度程序后，各杂质分离无明显改善，杂质O与杂质C、杂质G与杂质SM1仍未分离，方法需继续优化。色谱图见图7，具体的保留时间及分离度见表10。
表10对比例3在梯度程序②下的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
对比例4
高效液相色谱条件：
苯基键合硅胶为填充剂，Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；检测波长：293nm；进样量：20μl；
溶液配制同实施例1，
梯度程序②：
调整柱温：35℃、40℃，
试验结果：柱温为40℃时，杂质C、O有分开趋势，杂质G与SM1保留时间仍重合，色谱图见图8，具体的保留时间及分离度见表11。柱温为35℃时，杂质C、O，杂质G与SM1能有效分离，但杂质N、H保留时间重合，色谱图见图9，具体的保留时间及分离度见表12。说明柱温筛选必要性，方法需继续优化。
表11对比例4在梯度程序②下，柱温为40℃时的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
表12对比例4在梯度程序②下，柱温为35℃时的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
对比例5
高效液相色谱条件：
苯基键合硅胶为填充剂，Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；检测波长：293nm；进样量：20μl；
溶液配制同实施例1，
柱温耐用性(35℃、37℃、40℃)与调整杂质N、H洗脱段有机相比例，梯度程序如下：
取系统适用性溶液进样分析，结果见表13。结果表明，柱温为35℃时，杂质P、F分离度<1.5，色谱图见图10，具体的保留时间及分离度见表14；柱温为40℃时，杂质C、O分离度较差(<1.0)，色谱图见图11，具体的保留时间及分离度见表15。
综合考虑，拟定柱温为37℃。色谱图见图1，具体的保留时间及分离度见表2。
表13柱温筛选各杂质分离度试验结果
表14对比例5柱温为35℃时的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
表15对比例5柱温为40℃时的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
对比例6
高效液相色谱条件：
色谱柱：考察不同色谱柱下的杂质分离行为；
色谱柱1：Waters XBridge Phenyl 4.6mm×150mm，3.5μm；
色谱柱2：GL Sciences Inertsil PH-3 4.0mm×250mm，5μm；
色谱柱3：Kromasil Eternity-5-PhenylHexyl 4.6mm×250mm，5μm；
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；柱温：37℃；检测波长：293nm；进样量：20μl；
系统适用性溶液：称取盐酸莫西沙星约25mg，置25ml量瓶中，加各杂质贮备液(脱羧杂质、F、A、B、O、C、J、D、E、I、N、H、SM1、G、K、M)适量，用稀释剂稀释至刻度(每1ml中含莫西沙星1mg，含各杂质约1μg)。
其他溶液配制同实施例1；
梯度程序如下：
取系统适用性溶液进样分析，结果表明，采用不同色谱柱(色谱柱1～3)，各杂质均不能全部达到有效分离。
采用色谱柱1的色谱图见图12，具体的保留时间及分离度见表16；
采用色谱柱2的色谱图见图13，具体的保留时间及分离度见表17；
采用色谱柱3的色谱图见图14，具体的保留时间及分离度见表18；
表16对比例6采用色谱柱1的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
表17对比例6采用色谱柱2的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
表18对比例6采用色谱柱3的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
对比例7
高效液相色谱条件：
色谱柱：苯基键合硅胶为填充剂，Agilent Poroshell 120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm；
磷酸盐缓冲液：分别取四丁基硫酸氢铵0.5g、磷酸二氢钾1.0g和磷酸2ml至烧杯中，加水1000ml使溶解，用三乙胺调节pH值至3.0，抽滤，即得；
流动相A：磷酸盐缓冲液-甲醇(80:20)；
流动相B：磷酸盐缓冲液-甲醇(20:80)；
流速：0.8ml/min；柱温：37℃；检测波长：293nm；进样量：20μl；
溶液配制同实施例1，
梯度程序③：
取系统适用性溶液进样分析，结果表明，梯度程序③条件下，各杂质均不能全部达到有效分离，色谱图见图15，具体的保留时间及分离度见表19。
表19对比例7采用梯度程序③的高效液相色谱分析的保留时间及分离度
Claims (9)
1.一种高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法，其特征在于：选用苯基键合硅胶为填料的色谱柱，柱温设置为37℃±1℃；流动相A为磷酸盐缓冲液-甲醇，体积比为80:20，流动相B为磷酸盐缓冲液-甲醇，体积比为20:80，采用梯度洗脱；磷酸盐缓冲溶液含有四丁基硫酸氢铵、磷酸二氢钾和磷酸，所述的梯度洗脱为：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液含有四丁基硫酸氢铵0.5g/L、磷酸二氢钾1.0g/L和磷酸2ml/L。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：设定流动相的流速为0.7～0.9ml/min，检测波长为293nm或282nm。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：采用如下方法配制样品溶液：取磷酸二氢钾1.0g，四丁基硫酸氢铵0.5g，无水亚硫酸钠0.05g，加水适量使溶解，加磷酸2ml，用水稀释至1000ml即得稀释剂；取盐酸莫西沙星或含莫西沙星的制剂适量，用稀释剂配制成每1ml中含莫西沙星0.48mg的样品溶液。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：样品溶液的进样体积为20μl。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：设置柱温为37℃。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的色谱柱采用Agilent Poroshell120 Phenyl Hexyl，4.6mm×100mm，2.7μm。
8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的磷酸盐缓冲液pH值为2.0～3.2，优选地，pH值为3.0。
9.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述流动相的流速为0.8ml/min。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810446597.0A CN110470748A (zh) | 2018-05-11 | 2018-05-11 | 一种高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810446597.0A CN110470748A (zh) | 2018-05-11 | 2018-05-11 | 一种高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110470748A true CN110470748A (zh) | 2019-11-19 |
Family
ID=68504304
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810446597.0A Pending CN110470748A (zh) | 2018-05-11 | 2018-05-11 | 一种高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110470748A (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110988167A (zh) * | 2019-12-06 | 2020-04-10 | 珠海润都制药股份有限公司 | 一种加替环合酯中基因毒杂质的检测方法 |
| CN112986470A (zh) * | 2019-12-13 | 2021-06-18 | 武汉九州钰民医药科技有限公司 | 盐酸环丙沙星原料或片剂中有关物质的分析检测方法 |
| CN113533569A (zh) * | 2021-07-15 | 2021-10-22 | 山东诺明康药物研究院有限公司 | 一种检测抗菌滴眼液中有关物质的方法 |
| CN113588837A (zh) * | 2021-08-10 | 2021-11-02 | 山东鲁抗医药股份有限公司 | 一种盐酸莫西沙星有关物质的检测方法 |
| CN113820409A (zh) * | 2021-09-01 | 2021-12-21 | 河北国龙制药有限公司 | 一种莫西沙星母核中有关物质的检测方法 |
| CN114113353A (zh) * | 2020-08-31 | 2022-03-01 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | 分离检测加替羧酸乙酯和/或相关杂质的方法 |
| CN114113355A (zh) * | 2020-08-31 | 2022-03-01 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | Hplc法分离检测加替羧酸乙酯和/或相关杂质的方法 |
| CN118067873A (zh) * | 2024-02-22 | 2024-05-24 | 华夏生生药业(北京)有限公司 | 一种盐酸莫西沙星氯化钠注射液中杂质的检测方法 |
-
2018
- 2018-05-11 CN CN201810446597.0A patent/CN110470748A/zh active Pending
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110988167A (zh) * | 2019-12-06 | 2020-04-10 | 珠海润都制药股份有限公司 | 一种加替环合酯中基因毒杂质的检测方法 |
| CN112986470A (zh) * | 2019-12-13 | 2021-06-18 | 武汉九州钰民医药科技有限公司 | 盐酸环丙沙星原料或片剂中有关物质的分析检测方法 |
| CN114113353A (zh) * | 2020-08-31 | 2022-03-01 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | 分离检测加替羧酸乙酯和/或相关杂质的方法 |
| CN114113355A (zh) * | 2020-08-31 | 2022-03-01 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | Hplc法分离检测加替羧酸乙酯和/或相关杂质的方法 |
| CN114113353B (zh) * | 2020-08-31 | 2023-05-02 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | 分离检测加替羧酸乙酯和/或相关杂质的方法 |
| CN114113355B (zh) * | 2020-08-31 | 2023-05-30 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | Hplc法分离检测加替羧酸乙酯和/或相关杂质的方法 |
| CN113533569A (zh) * | 2021-07-15 | 2021-10-22 | 山东诺明康药物研究院有限公司 | 一种检测抗菌滴眼液中有关物质的方法 |
| CN113588837A (zh) * | 2021-08-10 | 2021-11-02 | 山东鲁抗医药股份有限公司 | 一种盐酸莫西沙星有关物质的检测方法 |
| CN113588837B (zh) * | 2021-08-10 | 2023-03-10 | 山东鲁抗医药股份有限公司 | 一种盐酸莫西沙星有关物质的检测方法 |
| CN113820409A (zh) * | 2021-09-01 | 2021-12-21 | 河北国龙制药有限公司 | 一种莫西沙星母核中有关物质的检测方法 |
| CN113820409B (zh) * | 2021-09-01 | 2022-10-21 | 河北国龙制药有限公司 | 一种莫西沙星母核中有关物质的检测方法 |
| CN118067873A (zh) * | 2024-02-22 | 2024-05-24 | 华夏生生药业(北京)有限公司 | 一种盐酸莫西沙星氯化钠注射液中杂质的检测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110470748A (zh) | 一种高效液相色谱检测盐酸莫西沙星有关物质的方法 | |
| CN100371709C (zh) | 一种用液相色谱法分离测定匹伐他汀及其光学异构体的方法 | |
| CN109870528A (zh) | 一种高效液相色谱法测定阿奇霉素胶囊有关物质的方法 | |
| CN108982695A (zh) | 衍生化hplc法测定药物或其中间体中叠氮化合物的方法 | |
| CN109374784A (zh) | 一种用hplc分离测定达格列净原料药有关物质的方法 | |
| CN103076421B (zh) | 瑞巴派特有关物质检查的分析方法 | |
| CN101929985A (zh) | 一种用高效液相色谱法测定阿托伐他汀钙有关物质的方法 | |
| CN109307716B (zh) | 一种依匹哌唑有关物质的检测方法 | |
| CN112798719A (zh) | 一种枸橼酸西地那非中有关物质n-甲基哌嗪的检测方法 | |
| CN110954629A (zh) | 一种呋塞米中糠胺含量测定的控制方法 | |
| CN104764840B (zh) | 盐酸帕洛诺司琼及杂质的分离与检测方法 | |
| CN114324703B (zh) | 一种同时检测多种氨基酸的方法 | |
| CN110118836A (zh) | 高效液相色谱法测定利伐沙班中遗传毒性杂质的方法 | |
| CN107132297B (zh) | 一种普拉康唑光学异构体的分析检测方法 | |
| CN109856303A (zh) | 泮托拉唑钠中基因毒性杂质的高灵敏度分析方法 | |
| CN101929988A (zh) | 一种用高效液相色谱法测定非布索坦有关物质的方法 | |
| CN111007184A (zh) | 一种4-甲基哌嗪-1-甲酰氯盐酸盐含量的检测方法 | |
| CN107976489B (zh) | 一种测定普瑞巴林中残留吡啶的方法 | |
| Chi et al. | Enantiomeric resolution, stereochemical assignment and toxicity evaluation of TPA enantiomers | |
| CN111257491A (zh) | 一种检测甲磺酸乐伐替尼中环丙胺的hplc方法 | |
| CN108107138A (zh) | Hplc-cad测定葡萄糖氯化钠注射液中葡萄糖的方法 | |
| CN108061765A (zh) | Hplc法分离测定盐酸厄洛替尼中间体m1及其相关杂质的方法 | |
| CN102565203B (zh) | 一种用液相色谱法分离测定溴甲纳曲酮及其杂质的方法 | |
| CN100516868C (zh) | 3,5-取代噁唑烷酮类化合物的含量检测方法 | |
| CN117929563A (zh) | 1-苄基-3-哌啶醇中杂质和残留溶剂的分离测定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |