CN110418631A

CN110418631A - 化妆品组合物及方法

Info

Publication number: CN110418631A
Application number: CN201880018623.8A
Authority: CN
Inventors: 爱德华·查德威克; 吉赛·卡拉哈斯蒂
Original assignee: Mary Kay Co Ltd
Current assignee: Mary Kay Co Ltd; Kay Mary Inc
Priority date: 2017-03-17
Filing date: 2018-03-16
Publication date: 2019-11-05
Also published as: US20200246251A1; WO2018170355A1; US10660847B2; US10881604B2; US20210186856A1; US20180263894A1

Abstract

本发明一般涉及用于处理皮肤的用途和组合物，以减少皱纹的出现、使皮肤保湿、增亮肌肤、减少炎症、增加皮肤紧致度和/或增加皮肤弹性的成分的组合。该组合物包括鳄梨油、油橄榄果油和刺阿干树仁油的组合。

Description

化妆品组合物及方法

发明背景

A.技术领域

本发明一般涉及可应用于化妆品组合物的组合物，用于清洁、调理、和/或保护皮肤、和/或改善皮肤状况和/或视觉外观。在某些方面，组合物可包含例如减少皱纹的出现、促进保湿、增亮肌肤、减少炎症、增加皮肤紧致度、和/或增加皮肤弹性的成分的组合。这些成分的组合可以包括在广泛的产品制剂中(例如，面膜、精华、霜剂、清洁剂、爽肤水、凝胶、乳液、凝胶乳液、凝胶精华等)。

B.相关技术描述

衰老、长期暴露于不利的环境因素、营养失调、疲劳等会以被认为是视觉上不期望的方式改变皮肤的视觉外观、物理性能或生理功能。最显著和最明显的变化包括细纹和皱纹的发展、弹性的丧失、下垂的增加、紧致度的丧失、颜色均匀度或色调的损失、粗糙的表面纹理和斑驳的色素沉着。随着皮肤老化或经受长期环境损害而发生的不太明显但可测量的变化包括细胞和组织活力的普遍降低、细胞复制率的降低、皮肤血流量减少、水分含量降低、结构和功能的累积误差、常见生化途径的正常调节的改变、以及皮肤重塑和自我修复能力的降低。皮肤的外观和功能的许多变化由皮肤的外表皮层的改变导致，而其他的变化由下面真皮的改变导致。

保持皮肤水分有助于克服皮肤的一些不必要的变化。然而，保持皮肤的水分可能是困难的。暴露于化学品、溶剂、洗涤剂、化妆品、纺织品或干燥环境是皮肤可能失去水分的许多方式中的一些。

保湿剂是专门设计用于使皮肤的外层(表皮)更柔软、更柔韧的化学剂的复杂混合物。一些保湿剂通过减少蒸发来增加皮肤的水合(水分含量)。天然存在的皮肤脂质和甾醇、以及人造油或天然油、湿润剂、润肤剂、润滑剂等可以是商业皮肤保湿剂组合物的一部分。它们通常作为化妆品和治疗用途的商业产品提供，但也可以在家中使用常见的药物成分制成。然而，保湿剂并非完美。与保湿剂相关的一些问题包括令人不快的触觉性质(例如，厚重感、油腻感或黏稠感)、不稳定性、皮肤刺激性或保湿能力不足。

先前用已知的皮肤活性成分改善皮肤视觉外观的尝试已经显示出具有各种缺点，例如皮肤刺激性、恢复时间延长或所承诺的皮肤益处的低效递送。目前的产品可能无法解决这些缺点。

发明内容

发明人已经确定了与当前化妆品相关的问题的解决方案。该解决方案在于包含鳄梨(Persea gratissima)油、油橄榄(Olea europaea)果油、刺阿干树(Argania spinosa)仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠、和/或牛油果树脂(Butyrospermum parkii)和任选地扫帚叶澳洲茶(Leptospermum scoparium，麦卢卡蜂蜜)的成分的组合。该组合可用于制备减少皱纹出现的局部皮肤用组合物。在一些情况下，这些成分的组合为皮肤提供水分。在一些情况下，这些成分的组合防止皮肤变黑、淡化黑斑、减少黑色素沉着、减少炎症、增加皮肤中的胶原蛋白产生以增加皮肤紧致度和弹性、增加皮肤中的弹性蛋白产生以恢复皮肤形状、和/或增加层黏连蛋白和纤连蛋白的产生以促进表皮细胞与真皮-表皮连接区(DEJ)的细胞黏附。发明人还确定了与当前化妆品相关的问题的解决方案，该解决方案在于包含鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花(Limnanthes alba，绣线菊)籽油、杂交向日葵油、深海两节荠(Crambe abyssinica)籽油和任选地胡萝卜(Daucus carota sativa)根提取物的成分的组合。在一些情况下，这些成分的组合为皮肤提供水分。在一些情况下，这些成分的组合减少皱纹的出现。在一些情况下，这些成分的组合增加皮肤中胶原蛋白的产生。在一些情况下，这些成分的组合增加皮肤中弹性蛋白的产生。在一些情况下，这些成分的组合增加皮肤中层黏连蛋白的产生。在一些情况下，这些成分的组合增加皮肤中纤连蛋白的产生。在一些情况下，这些成分的组合抑制B16黑素生成。在一些情况下，这些成分的组合抑制酪氨酸酶表达。在一些情况下，这些成分的组合抑制TNF-α表达。

在一些方面，公开了一种局部用组合物。在一些方面，局部用组合物包含鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠和牛油果树脂中的任何一种、任何组合或全部。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠、和/或牛油果树脂以减少皱纹的出现，和任选地扫帚叶澳洲茶。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠、和/或牛油果树脂以滋润皮肤和/或减少皱纹的出现。在一些情况下，这些成分的组合增加皮肤中胶原蛋白、弹性蛋白、纤连蛋白和/或层黏连蛋白的产生。在一些情况下，这些成分的组合抑制B16黑素生成和/或酪氨酸酶表达。

组合物中成分的量可以变化(例如，量可以为低达0.000001重量％至高达98重量％或是其中的任何范围)。在一些方面，局部用组合物包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至5重量％的霍霍巴酯类、0.001重量％至1重量％的腺苷、0.001重量％至1重量％的透明质酸钠、和/或0.01重量％至5重量％的牛油果树脂。

在一些情况下，局部用组合物包含水。在一些情况下，组合物包含50重量％至75重量％的水。在一些情况下，局部用组合物包含碳酸二辛酯；甘油；环戊硅氧烷；氢化聚异丁烯；花生醇；丙烯酰基二甲基牛磺酸铵/VP共聚物；和丁二醇。在一些情况下，局部用组合物包含5重量％至20重量％的碳酸二辛酯；1重量％至10重量％的甘油；0.1重量％至5重量％的环戊硅氧烷；0.1重量％至5重量％的氢化聚异丁烯；0.01重量％至3重量％的花生醇；0.01重量％至3重量％的丙烯酰基二甲基牛磺酸铵/VP共聚物；和0.01重量％至3重量％的丁二醇。在一些情况下，局部用组合物是乳液、精华、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华。在一些情况下，局部用组合物是水包油型乳液或油包水型乳液。

在一些方面，局部用组合物包含鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和任选地胡萝卜根提取物中的任何一种、任何组合或全部。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和/或胡萝卜根提取物以滋润皮肤。在一些情况下，这些成分的组合减少皱纹的出现、防止皮肤变黑、淡化黑斑、减少黑色素沉着、减少炎症、增加皮肤紧致度和弹性、增加皮肤中的弹性蛋白产生以恢复皮肤形状、和/或促进表皮细胞与DEJ的细胞黏附。在一些情况下，这些成分的组合增加皮肤中胶原蛋白、弹性蛋白、纤连蛋白和/或层黏连蛋白的产生。在一些情况下，这些成分的组合抑制B16黑素生成和/或TNF-α表达。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和/或胡萝卜根提取物以减少皱纹的出现。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和/或胡萝卜根提取物以增加皮肤中胶原蛋白、弹性蛋白、层黏连蛋白和/或纤连蛋白的产生。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和/或胡萝卜根提取物以减少皮肤炎症。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和/或胡萝卜根提取物。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和/或胡萝卜根提取物以防止皮肤变黑和/或淡化皮肤上的黑斑。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的胡萝卜根提取物以增加皮肤中的胶原蛋白产生和/或抑制B16黑素生成和/或TNF-α表达。在一些情况下，局部用组合物包含有效量的刺阿干树仁油，以增加皮肤中的胶原蛋白产生，使皮肤紧致和有弹性和/或增加皮肤中弹性蛋白的产生，以在拉伸后恢复皮肤形状和/或增加皮肤中的层黏连蛋白和/或纤连蛋白产生，以促进表皮细胞与DEJ的细胞黏附。

组合物中成分的量可以变化(例如，量可以为低达0.000001重量％至高达98重量％或是其中的任何范围)。在一些方面，局部用组合物包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至10重量％的白池花籽油、0.1重量％至5重量％的杂交向日葵油、0.01重量％至5重量％的深海两节荠籽油、和/或0.01重量％至5重量％的胡萝卜根提取物。

在一些情况下，局部用组合物包含水。在一些情况下，组合物包含1重量％至20重量％的水。在一些情况下，组合物包含少于10重量％的水。在一些情况下，组合物基本上是无水的。在一些情况下，水以偶然的数量存在。在一些情况下，局部用组合物包含矿物油。在一些情况下，组合物包含20重量％至45重量％的矿物油。在一些情况下，矿物油是轻质矿物油。在一些情况下，组合物包含20重量％至45重量％的轻质矿物油。在一些情况下，组合物包含PEG-20甘油三异硬脂酸酯。在一些情况下，组合物包含5重量％至30重量％的PEG-20甘油三异硬脂酸酯。在一些情况下，组合物包含PEG-9异硬脂酸酯。在一些情况下，组合物包含1重量％至15重量％的PEG-9异硬脂酸酯。在一些情况下，组合物包含丁二醇、异壬酸异壬酯、乙基己酸鲸蜡硬脂醇酯和聚乙烯。在一些情况下，组合物包含5重量％至20重量％的丁二醇、1重量％至10重量％的异壬酸异壬酯、0.1重量％至10重量％的乙基己酸鲸蜡硬脂醇酯和0.1重量％至10重量％的聚乙烯。

本文公开的局部用组合物还可以包含一种或多于一种本文所述的成分。例如，组合物可包含选自一种或多于一种调理剂、保湿剂、pH调节剂、结构剂、无机盐和防腐剂的一种或多于一种附加成分。在一些情况下，局部用组合物还包含水。在一些情况下，本文公开的局部用组合物可以不包含一种或多于一种本文所述的成分。例如，组合物可以不包含选自一种或多于一种调理剂、保湿剂、pH调节剂、结构剂、无机盐和防腐剂的一种或多于一种附加成分。在一些情况下，组合物可以不包含鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠、牛油果树脂、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油、胡萝卜根提取物和/或扫帚叶澳洲茶中的一种或多于一种。在一些情况下，局部用组合物不包含水。在一些情况下，本文的局部用组合物可以是无水的或基本上无水的。

还公开了本文公开的组合物的使用方法。在一些方面，公开了一种改善皮肤状况或外观的方法，其包括将本文公开的任何一种组合物施用于需要其的皮肤。在一个方面，将本文公开的任何一种组合物施用于皮肤，并将组合物留在皮肤上，或者在一段时间后从皮肤上除去。

在另一方面，本文公开的组合物用于处理和/或减少皱纹的出现。在另一方面，本文公开的组合物用于通过将本文公开的任何一种组合物施用于皱纹来处理和/或减少皱纹的出现，其中皱纹被处理和/或皱纹的出现减少。在另一方面，所公开的组合物用于预防皱纹，其包括将本文公开的任何一种组合物施用于皮肤，其中皱纹被预防。

在另一方面，本文公开了一种增加皮肤胶原蛋白产生的方法。在另一方面，本文公开了一种滋润皮肤的方法。在另一方面，本文公开了一种减少皱纹出现的方法。在另一方面，本文公开了一种防止皮肤变黑和淡化黑斑的方法。在另一方面，本文公开了一种减少黑色素沉着的方法。在另一方面，本文公开了一种减少炎症的方法。在另一方面，本文公开了一种增加皮肤中胶原蛋白产生以增加皮肤紧致度和弹性的方法。在另一方面，本文公开了一种增加皮肤中弹性蛋白产生以恢复皮肤形状的方法。在另一方面，本文公开了一种增加层黏连蛋白和/或纤连蛋白产生以促进表皮细胞与DEJ的细胞黏附的方法。在一些方面，该方法包括将本文所述的任何一种局部用组合物施用于皮肤。在一些方面，该方法包括将组合物施用于皱纹。

在具体的方面，本发明的组合物配制为局部皮肤用组合物。组合物可以具有用于化合物和提取物的皮肤病学可接受的载体或载剂。组合物还可以包含保湿剂或湿润剂、表面活性剂、含硅酮的化合物、UV剂、油和/或本说明书所确定的其他成分或本领域中已知的成分。该组合物可以是面膜、洗剂、霜剂、凝胶、精华、乳液(例如，水包油、油包水、水包硅酮、硅酮包水、水包油包水、油包水包油、硅酮包水包油等)、溶液(如水溶液或水醇溶液)、无水基底(如口红或粉末)、软膏剂、乳剂、糊状物、气溶胶、固体形式、眼部啫喱、凝胶精华、凝胶乳液等。该组合物可以配制成用于局部皮肤施用，在使用期间每天施用至少1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次或多于7次。在本发明的其他方面中，该组合物可以是储存稳定或颜色稳定的，或是两者兼具。还期望可以选择组合物的黏度以达到期望的结果，例如根据期望的组合物类型，该组合物的黏度可以为1cps至远超过1百万cps，或者是其中可得到的任意范围或整数(例如，在25℃下在Brookfield黏度计上用TC转子以2.5rpm测量的2cps、3cps、4cps、5cps、6cps、7cps、8cps、9cps、10cps、20cps、30cps、40cps、50cps、60cps、70cps、80cps、90cps、100cps、200cps、300cps、400cps、500cps、600cps、700cps、800cps、900cps、1000cps、2000cps、3000cps、4000cps、5000cps、6000cps、7000cps、8000cps、9000cps、10000cps、20000cps、30000cps、40000cps、50000cps、60000cps、70000cps、80000cps、90000cps、100000cps、200000cps、300000cps、400000cps、500000cps、600000cps、700000cps、800000cps、900000cps、1000000cps、2000000cps、3000000cps、4000000cps、5000000cps、10000000cps等)。

在非限制性方面，该组合物可以具有约6至约9的pH。在其他方面，pH可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14。组合物可以包含甘油三酯。非限制性实例包括短链、中链和长链甘油三酯。在某些方面，甘油三酯是中链甘油三酯(例如辛酸癸酸甘油三酯)。组合物还可以包含防腐剂。防腐剂的非限制性实例包括苯甲酸钠、碘代丙炔基丁基氨基甲酸酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、或对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯的混合物。在一些实施方案中，组合物不含对羟基苯甲酸酯类。

本发明的组合物可以具有吸收UVA和UVB的性质。该组合物可以具有2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60或大于60、或其中可以得到的任何整数的防晒指数(SPF)。该组合物可以是防晒露、防晒喷雾或防晒霜。

本发明的组合物还可以包含以下附加成分中的任何一种、任意组合或全部：水、螯合剂、保湿剂、防腐剂、增稠剂、含硅酮的化合物、精油、结构化剂、维生素、药物成分或抗氧化剂，或这些成分的任意组合或这些成分的混合物。在某些方面，该组合物可以包含在之前句子中确定的这些附加成分中的至少二种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或全部。这些附加成分的非限制性实例在本说明书全文确定，并通过引用并入本部分。这些成分的量以组合物的重量或体积计可以为0.0001％至99.9％，或者是在如本说明书其他部分中所公开的范围之间的任意整数或范围，其通过引用并入本段。

还预期了包含本发明的组合物的试剂盒。在某些实施方案中，该组合物包含在容器中。该容器可以是瓶子、分配器或包装。该容器可以分配预定量的组合物。在某些方面，该组合物以喷雾、薄雾、团块或液体形式分配。该容器可以在其表面上包含标记。该标记可以是词语、缩写、图片或符号。

还预期了本说明书通篇所公开的组合物可以被用作免洗型或洗去型组合物。举例来说，免洗型组合物可以是被局部地施用至皮肤并在皮肤上保留一段时间(例如，至少5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟、20分钟或30分钟，或至少1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、13小时、14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时或24小时、或整夜或整个白天)的组合物。或者，洗去型组合物可以是旨在施用至皮肤，然后在一段时间如小于5分钟、4分钟、3分钟、2分钟或1分钟内(例如用水)从皮肤除去或洗去的产品。洗去型组合物的实例可以是皮肤清洁剂、洗发水、护发素或肥皂。免洗型组合物的实例可以是皮肤保湿剂、防晒剂、面膜、晚霜或日霜。

预期对于本发明的任意方法或组合物，可以实施本说明书中所讨论的任意实施方案，反之亦然。此外，本发明的组合物可以用于实现本发明的方法。

在一个实施方案中，本发明的组合物可以是可药用的或可化妆用的、或可以具有舒适的触觉性质。“可药用的”、“可化妆用的”和/或“舒适的触觉性质”描述具有令皮肤感觉舒适的特定触觉性质的组合物(例如，不是太水或太油的组合物、具有丝滑质地的组合物、非黏性或黏性的组合物等)。可药用的或可化妆用的还可以涉及组合物的乳脂状或润滑性能，或组合物的水分保留性能。

还预期了一种包含本发明的组合物的产品。在非限制性方面，该产品可以是化妆品。该化妆品可以是本说明书其他部分所述的那些，或是本领域技术人员已知的那些。产品的非限制性实例包括保湿剂、霜剂、洗剂、皮肤柔软剂、凝胶、沐浴露、粉底、晚霜、口红、清洁剂、洁肤膏、爽肤水、防晒霜、面膜、抗老化产品、除臭剂、止汗剂、香水、古龙水等。

还公开了本发明的以下实施方案1至实施方案30。实施方案1是一种处理皮肤以减少皱纹出现、促进保湿、增亮肌肤、减少炎症、增加皮肤紧致度和/或增加皮肤弹性的方法，该方法包括向皮肤局部施用有效量的包含鳄梨油、油橄榄果油和刺阿干树仁油的局部用组合物，其中该组合物滋润皮肤、减少皱纹的出现、减少黑色素分泌、抑制TNF-α分泌、增加胶原蛋白的产生、增加弹性蛋白的产生、增加层黏连蛋白和/或增加纤连蛋白。实施方案2是实施方案1的方法，其中局部用组合物还包含有效量的霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠和牛油果树脂。实施方案3是实施方案2的方法，其中局部用组合物包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至5重量％的霍霍巴酯类、0.001重量％至1重量％的腺苷、0.001重量％至1重量％的透明质酸钠、和/或0.01重量％至5重量％的牛油果树脂。实施方案4是实施方案1至3中任一项的方法，其中局部用组合物还包含水。实施方案5是实施方案4的方法，其中局部用组合物包含50重量％至75重量％的水。实施方案6是实施方案1的方法，其中局部用组合物还包含有效量的白池花籽油、杂交向日葵油和深海两节荠籽油。实施方案7是实施方案6的方法，其中局部用组合物包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至10重量％的白池花籽油、0.1重量％至5重量％的杂交向日葵油和0.01重量％至5重量％的深海两节荠籽油。实施方案8是实施方案6至7中任一项的方法，其中局部用组合物还包含有效量的胡萝卜根提取物以增加皮肤中胶原蛋白的产生、减少皮肤炎症和/或增亮肌肤。实施方案9是实施方案8的方法，其中局部用组合物包含0.01重量％至5重量％的胡萝卜根提取物。实施方案10是实施方案6至9中任一项的方法，其中局部用组合物还包含轻质矿物油。实施方案11是实施方案10的方法，其中局部用组合物包含20重量％至45重量％的轻质矿物油。实施方案12是实施方案1至11中任一项的方法，其中局部用组合物是乳液、精华、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华。实施方案13是实施方案1至12中任一项的方法，其中局部用组合物是水包油型乳液或油包水型乳液。实施方案14是实施方案1至13中任一项的方法，其中有效量的局部用组合物减少皱纹的出现、促进保湿、增亮肌肤、减少炎症、增加皮肤紧致度和增加皮肤弹性。实施方案15是一种包含鳄梨油、油橄榄果油和刺阿干树仁油的局部用组合物，以减少皮肤上皱纹的出现、滋润皮肤、减少炎症、增加皮肤紧致度、增加弹性和/或增亮肌肤。实施方案16是实施方案15的局部用组合物，其还包含霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠和牛油果树脂。实施方案17是实施方案16的局部用组合物，其中局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠、和/或牛油果树脂以减少皮肤上皱纹的出现和滋润皮肤。实施方案18是实施方案15至17中任一项的局部用组合物，其包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至5重量％的霍霍巴酯类、0.001重量％至1重量％的腺苷、0.001重量％至1重量％的透明质酸钠、和/或0.01重量％至5重量％的牛油果树脂。实施方案19是实施方案15至18中任一项的局部用组合物，其还包含水。实施方案20是实施方案19的局部用组合物，其包含50重量％至75重量％的水。实施方案21是实施方案15的局部用组合物，其还包含白池花籽油、杂交向日葵油和深海两节荠籽油。实施方案22是实施方案21的局部用组合物，其中局部用组合物包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和/或胡萝卜根提取物以滋润皮肤和/或减少皮肤上皱纹的出现。实施方案23是实施方案21至22中任一项的局部用组合物，其中局部用组合物包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至10重量％的白池花籽油、0.1重量％至5重量％的杂交向日葵油和0.01重量％至5重量％的深海两节荠籽油。实施方案24是实施方案21至23中任一项的局部用组合物，其还包含胡萝卜根提取物。实施方案25是实施方案24的局部用组合物，其中局部用组合物包含有效量的胡萝卜根提取物以增加皮肤中胶原蛋白的产生、减少皮肤炎症和/或增亮肌肤。实施方案26是实施方案24或25的局部用组合物，其包含0.01重量％至5重量％的胡萝卜根提取物。实施方案27是实施方案21至26中任一项的局部用组合物，其还包含轻质矿物油。实施方案28是实施方案27的局部用组合物，其包含20重量％至45重量％的轻质矿物油。实施方案29是实施方案15至28中任一项的局部用组合物，其中局部用组合物是乳液、精华、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华。实施方案30是实施方案15至29中任一项的局部用组合物，其中局部用组合物是水包油型乳液或油包水型乳液。

“局部施用”是指施用或涂敷组合物到嘴唇或角质组织的表面上。“局部皮肤用组合物”包括适合在皮肤和/或角质组织上局部施用的组合物。这些组合物一般为皮肤病学上可接受的，这是因为当施用到皮肤和/或角质组织时，它们不具有异常毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应等。本发明的局部皮肤护理组合物可以具有选定的黏度，以避免施用到皮肤和/或角质组织后明显的滴落或淤积。

“角质组织”包括被配置哺乳动物最外保护层的含有角质的层，并且包括但不限于嘴唇、皮肤、毛发和指甲。

术语“约”或“大约”定义为本领域普通技术人员所理解的接近于。在一个非限制性实施方案中，该术语定义为在10％以内，优选5％以内，更优选1％以内，最优选0.5％以内。

术语“基本上”指在10％以内、5％以内、1％以内或0.5％以内。

术语“抑制”或“减少”包括实现期望结果的任何可测量的减少或完全的抑制。术语“促进”或“增加”包括蛋白质或分子(例如，基质蛋白质例如纤连蛋白、层黏连蛋白、胶原蛋白或弹性蛋白，或分子例如透明质酸)的任何可测量的增加或产生，以实现所需的效果。

在说明书和/或权利要求中使用的术语“有效”意味着足以实现期望的、预期的或所需的结果。

当在权利要求和/或说明书中与术语“包含”、“包括”、“具有”或“含有”一起使用时，要素前不使用数量词可以表示“一个”，但是其也符合“一个或更多个”、“至少一个”和“一个或多于一个”的意思。

如本说明书和权利要求中所使用的，词语“包含”、“具有”、“包括”或“含有”是包括性的或开放式的，并且不排除附加的、未列举的要素或方法步骤。

使用的组合物和方法可以“包含”本说明书通篇所公开的任意成分或步骤，“基本由”或“由”本说明书通篇所公开的任意成分或步骤“组成”。关于短语“基本上由……组成”，本发明组合物和方法的基本和新颖的性质是减少皱纹的出现、增加皮肤中胶原蛋白的产生、滋润皮肤、防止皮肤变黑、淡化皮肤黑斑、减少黑色素沉着、减少炎症、增加皮肤紧致度和弹性、帮助保持皮肤形状、和/或促进表皮细胞与DEJ的细胞黏附的能力。

短语“和/或”表示和或者或。为了说明，A、B和/或C包括：单独的A，单独的B，单独的C，A和B的组合，A和C的组合，B和C的组合，或A、B和C的组合。换句话说，“和/或”作为包容性的或。

本发明的其他目的、特征和优点通过下面的详细描述会变得明显。然而，应理解详细的描述和实施例在表明本发明的具体实施方案时仅以举例说明的方式给出。另外，期望通过该详细描述，本发明的精神和范围内的变化和修改对于本领域技术人员会变得明显。

具体实施方式

如上所述，本发明的几个独特方面是在局部用化妆品组合物中组合鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠、和/或牛油果树脂和任选地扫帚叶澳洲茶。这样可以减少皱纹的出现、促进保湿、防止皮肤变黑、帮助淡化黑斑、减少黑色素沉着、增加皮肤中的胶原蛋白产生以增加皮肤紧致度和弹性、增加皮肤中的弹性蛋白产生以恢复皮肤形状、和/或增加层黏连蛋白和纤连蛋白的产生以促进表皮细胞与DEJ的细胞黏附。此外，本发明的几个独特方面是在局部化妆品组合物中组合鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和任选地胡萝卜根提取物。这样可以减少皱纹的出现、促进保湿、防止皮肤变黑、帮助淡化黑斑、减少炎症、增加皮肤中的胶原蛋白产生以增加皮肤紧致度和弹性、增加皮肤中的弹性蛋白产生以恢复皮肤形状、和/或增加层黏连蛋白和纤连蛋白的产生以促进表皮细胞与DEJ的细胞黏附。

以下子部分更详细地描述了本发明的非限制性方面。

设计本发明的特定组合物以用作局部用组合物。该组合物依赖于鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠和/或牛油果树脂中的任何一种、任何组合或全部的独特组合，或鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和任选地胡萝卜根提取物中的任何一种、任何组合或全部的独特组合。实施例1、表1和表2提供了这些组合物的非限制性实例。

本文公开的一些组合物可以施用于皮肤，并留在皮肤上一段时间(例如至少1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5分钟、10分钟、20分钟、30分钟或60分钟或多于60分钟)。在这之后，如果需要的话，组合物可以从皮肤上洗去或从皮肤上剥离。本文公开的一些组合物可以施用于皮肤并立即从皮肤上冲洗掉。本文公开的一些组合物可以施用于皮肤并至少部分地被皮肤吸收。

在以下部分中描述本发明的这些和其他非限制性方面。

A.活性成分

本发明的前提是一种或多于一种活性成分(鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠和/或牛油果树脂的组合，或鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和任选地胡萝卜根提取物和/或扫帚叶澳洲茶)的组合的确定可用于减少皱纹的出现、促进保湿、防止皮肤变黑、淡化黑斑、减少黑色素沉着、减少炎症、增加皮肤中的胶原蛋白产生以增加皮肤紧致度和弹性、增加皮肤中的弹性蛋白产生以恢复皮肤形状、和/或增加层黏连蛋白和纤连蛋白的产生以促进表皮细胞与DEJ的细胞黏附。

这种成分的组合可用于不同的产品，以处理各种皮肤状况。作为非限制性实例，成分的组合可以配制成面膜、乳液(例如水包油型乳液、油包水型乳液)、凝胶、精华、凝胶乳液、凝胶精华、洗剂或身体霜。

鳄梨油是来自鳄梨植物的油，鳄梨也称为油梨。在一些情况下，鳄梨油是可商购获得的。在一些情况下，鳄梨油可由Arista提供。

油橄榄果油是来自油橄榄树的果实的油，油橄榄树也称为橄榄树。在一些情况下，油橄榄果油是可商购获得的。在一些情况下，油橄榄果油可由Lipo Chemicals提供。

刺阿干树仁油来源于摩洛哥南部原产的摩洛哥坚果树的果核，具有抗衰老作用，滋养干燥的皮肤。在一些情况下，刺阿干树仁油是可商购获得的。在一些情况下，刺阿干树仁油可由Sophim以商品名Seppic提供。在一些情况下，刺阿干树仁油可由BASF以商品名Lipofructyl Argan LS 9779提供。

霍霍巴酯类是由霍霍巴油的酯化而制成的酯。在一些情况下，霍霍巴酯类是可商购获得的。

腺苷是嘌呤核苷，其包含与核糖分子部分连接的腺嘌呤分子。腺苷深入渗透到皮肤，有助于防止皱纹和减少UVB阳光伤害。在一些情况下，腺苷是可商购获得的。

透明质酸钠是透明质酸的钠盐，透明质酸是一种天然存在于包括结缔组织在内的各种组织中的化合物。在一些情况下，透明质酸钠是可商购获得的。

牛油果树脂是从非洲牛油树的种子中提取的略带黄色或象牙色的天然脂肪。它可以用作保湿剂和药膏。在一些情况下，牛油果树脂是可商购获得的。在一些情况下，牛油果树脂可由HallStar Company以商品名Shea Butter-Ultra Refined提供。

白池花籽油是来自白池花的种子的油，白池花也称为绣线菊或白色绣线菊。白池花是一种原产于加利福尼亚州和俄勒冈州的开花植物。在一些情况下，白池花籽油是可商购获得的。在一些情况下，白池花籽油可由Fanning Corp提供。

杂交向日葵油是来自杂交向日葵的油，杂交向日葵也称为向日葵。在一些情况下，杂交向日葵油是可商购获得的。在一些情况下，杂交向日葵油可由美国的Floratech提供。

深海两节荠籽油是来自深海两节荠的种子的油，深海两节荠是一种原产于地中海地区的开花植物。在一些情况下，深海两节荠籽油是可商购获得的。在一些情况下，深海两节荠籽油可由Desert Whale Jojoba Company/Vantage Specialty Chemicals提供。

胡萝卜根提取物是胡萝卜的根提取物，胡萝卜是一种驯化的根茎类蔬菜，也称为甘荀。在一些情况下，胡萝卜根提取物是可商购获得的。在一些情况下，胡萝卜根提取物可由Southern Cross提供。在一些情况下，胡萝卜根提取物可由Abacross提供。在一些情况下，胡萝卜根提取物是甘油提取物。

扫帚叶澳洲茶是由麦卢卡或扫帚叶澳洲茶树生产的。在一些情况下，扫帚叶澳洲茶是可商购获得的。在一些情况下，扫帚叶澳洲茶可由Abacross提供。

本文中所述的提取物可以是通过本领域中已知的提取方法及其组合制备的提取物。提取方法的非限制性实例包括使用液-液提取、固相提取、水溶液提取、乙酸乙酯提取、醇提取、丙酮提取、油提取、超临界二氧化碳提取、加热提取、压力提取、压降提取、超声提取等。提取物可以是液体、固体、干燥液体、重悬固体等。

B.成分的量

预期本发明的组合物可以包含任意量的本说明书所讨论成分。该组合物还可包含任意数量在本说明书全文中所描述的附加成分(例如，颜料或附加的化妆品或药物成分)的组合。在该组合物中任意成分的浓度可以改变。例如，在非限制性实施方案中，该组合物在其最终形式下可以包含以下量的本说明书和权利要求通篇所提及的至少一种成分、主要由或由以下量的本说明书和权利要求通篇所提及的至少一种成分组成：例如至少约0.0001％、0.0002％、0.0003％、0.0004％、0.0005％、0.0006％、0.0007％、0.0008％、0.0009％、0.0010％、0.0011％、0.0012％、0.0013％、0.0014％、0.0015％、0.0016％、0.0017％、0.0018％、0.0019％、0.0020％、0.0021％、0.0022％、0.0023％、0.0024％、0.0025％、0.0026％、0.0027％、0.0028％、0.0029％、0.0030％、0.0031％、0.0032％、0.0033％、0.0034％、0.0035％、0.0036％、0.0037％、0.0038％、0.0039％、0.0040％、0.0041％、0.0042％、0.0043％、0.0044％、0.0045％、0.0046％、0.0047％、0.0048％、0.0049％、0.0050％、0.0051％、0.0052％、0.0053％、0.0054％、0.0055％、0.0056％、0.0057％、0.0058％、0.0059％、0.0060％、0.0061％、0.0062％、0.0063％、0.0064％、0.0065％、0.0066％、0.0067％、0.0068％、0.0069％、0.0070％、0.0071％、0.0072％、0.0073％、0.0074％、0.0075％、0.0076％、0.0077％、0.0078％、0.0079％、0.0080％、0.0081％、0.0082％、0.0083％、0.0084％、0.0085％、0.0086％、0.0087％、0.0088％、0.0089％、0.0090％、0.0091％、0.0092％、0.0093％、0.0094％、0.0095％、0.0096％、0.0097％、0.0098％、0.0099％、0.0100％、0.0200％、0.0250％、0.0275％、0.0300％、0.0325％、0.0350％、0.0375％、0.0400％、0.0425％、0.0450％、0.0475％、0.0500％、0.0525％、0.0550％、0.0575％、0.0600％、0.0625％、0.0650％、0.0675％、0.0700％、0.0725％、0.0750％、0.0775％、0.0800％、0.0825％、0.0850％、0.0875％、0.0900％、0.0925％、0.0950％、0.0975％、0.1000％、0.1250％、0.1500％、0.1750％、0.2000％、0.2250％、0.2500％、0.2750％、0.3000％、0.3250％、0.3500％、0.3750％、0.4000％、0.4250％、0.4500％、0.4750％、0.5000％、0.5250％、0.0550％、0.5750％、0.6000％、0.6250％、0.6500％、0.6750％、0.7000％、0.7250％、0.7500％、0.7750％、0.8000％、0.8250％、0.8500％、0.8750％、0.9000％、0.9250％、0.9500％、0.9750％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％、6.0％、6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％、6.6％、6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8.0％、8.1％、8.2％、8.3％、8.4％、8.5％、8.6％、8.7％、8.8％、8.9％、9.0％、9.1％、9.2％、9.3％、9.4％、9.5％、9.6％、9.7％、9.8％、9.9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％或其中可得到的任何范围。在非限制性方面，该百分比可以按整个组合物的重量或体积进行计算。本领域普通技术人员会理解，给定组合物中的浓度可以根据成分的添加、替换和/或减少而改变。

C.载体

本发明的组合物可以包含所有类型的载体和载剂，或可以包含在所有类型的载体和载剂中。载体或载剂可以是药学上或皮肤病学上可接受的载体或载剂。载体或载剂的非限制性实例包括水、甘油、醇、油、含硅的化合物、硅酮化合物和蜡。变体和其他合适的载体对于本领域技术人员是明显的，并且适用于本发明。在某些方面，化合物、成分和试剂的浓度和组合以这样的方式进行挑选，以使得组合物是化学相容的并且不形成从最终产品中沉淀出来的络合物。

D.结构

本发明的组合物可以被构造或配制成各种不同的形式。非限制性实例包括乳液(例如，油包水、水包油包水、水包油、水包硅酮、硅酮包水、油包水包油、硅酮包水包油的乳液)、霜剂、洗剂、溶液(水溶液或者水-醇溶液)、无水基底(例如口红和粉末)、凝胶、面膜、撕除式面膜和软膏剂。变体和其他结构对于本领域技术人员是明显的，并且适用于本发明。

E.附加成分

除了发明人所公开成分的组合之外，组合物还可以包含附加成分，例如化妆品成分和药物活性成分。这些附加成分的非限制性实例在以下子部分中进行描述。

1.化妆品成分

CTFA国际化妆品成分词典和手册(2004和2008)描述了多种可以在本发明的情况下使用的非限制性化妆品成分。这些成分种类的实例包括：芳香剂(人造的和天然的；例如葡糖酸、苯氧乙醇和三乙醇胺)、染料和着色成分(例如蓝色1号、蓝色1号色淀、红色40号、二氧化钛、D&C蓝色4号、D&C绿色5号、D&C橙色4号、D&C红色17号、D&C红色33号、D&C紫色2号、D&C黄色10号和D&C黄色11号)、芳香剂/香味剂(甜叶菊(Stevia rebaudiana)提取物和薄荷醇)、吸附剂、润滑剂、溶剂、保湿剂(包括例如润肤剂、湿润剂、成膜剂、闭塞剂和影响皮肤天然保湿机制的试剂)、拒水剂、UV吸收剂(物理和化学吸收剂，例如对氨基苯甲酸(“PABA”)和相应的PABA衍生物、二氧化钛、氧化锌等)、精油、维生素(例如维生素A、B、C、D、E和K)、微量金属(例如锌、钙和硒)、抗刺激物(例如类固醇和非固醇类抗炎药)、植物提取物(例如芦荟、柑橘、黄瓜提取物、银杏、人参和迷迭香)、抗菌剂、抗氧化剂(例如BHT和生育酚)、螯合剂(例如EDTA二钠和EDTA四钠)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)、pH调节剂(例如氢氧化钠和柠檬酸)、吸收剂(例如淀粉辛烯琥珀酸铝、高岭土、玉米淀粉、燕麦淀粉、环糊精、滑石和沸石)、皮肤漂白和光亮剂(例如氢醌和烟酰胺乳酸盐/酯)、湿润剂(例如山梨醇、脲、甲基葡糖醇聚醚-20、异构糖和甘露醇)、去角质剂、防水剂(例如氢氧化镁/铝硬脂酸盐)、皮肤调节剂(例如芦荟提取物、尿囊素、没药醇、神经酰胺、聚二甲基硅氧烷、透明质酸、生物糖胶-1、乙基己基甘油、戊二醇、氢化聚癸烯、油酸辛基十二醇酯和甘草酸二钾)。在以下子部分中提供这些成分中的一些的非限制性实例。

a.UV吸收剂和/或反射剂

可以与本发明的组合物组合使用的UV吸收剂和/或反射剂包括化学和物理防晒物质。可以使用的化学防晒物质的非限制性实例包括对氨基苯甲酸(PABA)、PABA酯(PABA甘油酯、PABA戊基二甲酯和PABA辛基二甲酯)、PABA丁酯、PABA乙酯、PABA乙基二羟基丙酯、二苯甲酮类(氧苯酮、磺异苯酮、二苯甲酮和二苯甲酮-1至二苯甲酮-12)、肉桂酸盐/酯(甲氧基肉桂酸辛酯(奥西诺酯)、对甲氧基肉桂酸异戊酯、辛基甲氧基肉桂酸酯、西诺沙酯、二异丙基肉桂酸甲酯、甲氧基肉桂酸DEA盐、二异丙基肉桂酸乙酯、甘油辛酸酯二甲氧基肉桂酸酯和甲氧基肉桂酸乙酯)、肉桂酸酯、水杨酸酯(均甲基水杨酸酯、水杨酸苄酯、水杨酸乙二醇酯、水杨酸异丙基苄醇酯等)、邻氨基苯甲酸盐/酯、尿刊酸乙酯、胡莫柳酯、水杨酸辛酯、二苯甲酰基甲烷衍生物(例如阿伏苯宗)、奥克立林、辛基三嗪酮、棓酰棓酸三油酸酯、氨基苯甲酸甘油酯、2-羟基-1,4-萘醌和二羟基丙酮、乙基己基三嗪酮、二辛基丁酰胺基三嗪酮、苯亚甲基丙二酸酯聚硅氧烷、对苯二亚甲基二莰酮磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠、二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸己酯、双二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸酯、双苯并唑基苯基乙基己基亚氨基三嗪、甲酚曲唑三硅氧烷、亚甲基双苯并三唑基四甲基丁基苯酚和双乙基己基氧苯酚甲氧苯基三嗪、4-甲基苯亚甲基莰酮和4-甲氧基肉桂酸异戊酯。物理防晒物质的非限制性实例包括高岭土、滑石、凡士林和金属氧化物(例如二氧化钛和氧化锌)。

b.保湿剂

可以与本发明的组合物一起使用的保湿剂的非限制性实例包括氨基酸、硫酸软骨素、双甘油、赤藓糖醇、果糖、葡萄糖、甘油、甘油聚合物、乙二醇、1,2,6-己三醇、蜂蜜、透明质酸、氢化蜂蜜、氢化淀粉水解物、肌醇、乳糖醇、麦芽糖醇、麦芽糖、甘露醇、天然保湿因子、PEG-15丁二醇、聚甘油山梨醇、吡咯烷酮羧酸的盐、PCA钾、丙二醇、异构寡糖、葡糖醛酸钠、PCA钠、山梨醇、蔗糖、海藻糖、脲和木糖醇。

其他实例包括乙酰化羊毛脂、乙酰化羊毛脂醇、苏氨酸、赖氨酸、丙氨酸、藻类提取物、库拉索芦荟(Aloe barbadensis)、库拉索芦荟提取物、库拉索芦荟凝胶、药蜀葵(Altheaofficinalis)提取物、杏(Prunus armeniaca)仁油、精氨酸、精氨酸天冬氨酸盐/酯、山金车(Arnica montana)提取物、天冬氨酸、鳄梨(Persea gratissima)油、屏障鞘脂、丁醇、蜂蜡、山萮醇、β-谷甾醇、垂枝桦(Betula alba)树皮提取物、琉璃苣(Borago officinalis)提取物、假叶树(Ruscus aculeatus)提取物、丁二醇、金盏花(Calendula officinalis)提取物、金盏花油、小烛树(Euphorbia cerifera)蜡、菜籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、豆蔻(Elettariacardamomum)油、巴西棕榈树(Copernicia erifera)蜡、胡萝卜(Daucus carota sativa)油、蓖麻(Ricinus communis)油、神经酰胺、地蜡、鲸蜡硬脂醇聚醚-5、鲸蜡硬脂醇聚醚-12、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯、十六醇聚醚-20、十六醇聚醚-24、鲸蜡醇乙酸酯、鲸蜡醇辛酸酯、鲸蜡醇棕榈酸酯、白花春黄菊(Anthemis nobilis)油、胆固醇、胆固醇酯、胆甾醇羟基硬脂酸酯、柠檬酸、欧丹参(Salvia sclarea)油、可可(Theobroma cacao)脂、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、椰子(Cocos nucifera)油、胶原蛋白、胶原蛋白氨基酸、玉米(Zea mays)油、脂肪酸、癸基油酸酯、聚二甲基硅氧烷共聚醇、聚二甲基硅氧烷醇、己二酸二辛酯、琥珀酸二辛酯、二聚季戊四醇六辛酸酯/六癸酸酯、DNA、赤藓糖醇、乙氧基二乙二醇、亚油酸乙酯、蓝桉(Eucalyptus globulus)油、月见草(Oenothera biennis)油、脂肪酸、斑点老鹳草(Geranium maculatum)油、葡萄糖胺、葡糖谷氨酸酯、谷氨酸、甘油聚醚-26、甘油、丙三醇、甘油二硬脂酸酯、甘油羟基硬脂酸酯、月桂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、肉豆蔻酸甘油酯、油酸甘油酯、甘油硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯SE、甘氨酸、乙二醇硬酯酸酯、乙二醇硬酯酸酯SE、葡糖氨基葡聚糖、棕榈酰葡萄(Vitis vinifera)籽油、美洲榛(Corylus americana)坚果油、欧洲榛(corylus avellana)坚果油、己二醇、透明质酸、红花(Carthamustinctorius)油、氢化蓖麻油、氢化椰油酸甘油酯、氢化椰子油、氢化羊毛脂、氢化卵磷脂、氢化棕榈油甘油酯、氢化棕榈仁油、氢化大豆油、氢化牛脂酸甘油酯、氢化植物油、水解胶原蛋白、水解弹性蛋白、水解葡糖氨基葡聚糖、水解角蛋白、水解大豆蛋白、羟基化羊毛脂、脯氨酸、羟基脯氨酸、异鲸蜡醇硬脂酸酯、异鲸蜡醇硬脂酰基硬脂酸酯、油酸异癸酯、异硬脂酸异丙酯、羊毛脂酸异丙酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、异硬脂酰胺DEA、异硬脂酸、异硬脂醇乳酸酯、异硬脂醇新戊酸酯、素方花(Jasminum officinale)油、霍霍巴(Buxus chinensis)油、巨藻、石栗(Aleurites moluccana)坚果油、乳酰胺MEA、羊毛脂醇聚醚-16、羊毛脂醇聚醚-10乙酸酯、羊毛脂、羊毛脂酸、羊毛脂醇、羊毛脂油、羊毛脂蜡、薰衣草(Lavandula angustifolia)油、卵磷脂、香橼(Citrus medica limonum)油、亚油酸、亚麻酸、澳洲坚果(Macadamia ternifolia)油、麦芽糖醇、母菊(Chamomilla recutita)油、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基硅烷醇PCA、矿物油、貂油、被孢霉油、肉豆蔻醇乳酸酯、肉豆蔻醇肉豆蔻酸酯、肉豆蔻醇丙酸酯、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯、辛基月桂醇、辛基月桂醇肉豆蔻酸酯、辛基月桂醇硬脂酰基硬脂酸酯、羟基硬脂酸辛酯、棕榈酸辛酯、水杨酸辛酯、硬脂酸辛酯、油酸、水解油橄榄(Olea europaea)油、甜橙(Citrus aurantium dulcis)油、油棕(Elaeis guineensis)油、棕榈酸、泛硫乙胺、泛醇、泛醇基乙基醚、石蜡、PCA、桃(Prunuspersica)仁油、花生(Arachis hypogaea)油、PEG-8C12-18酯、PEG-15椰油烷基胺、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-60甘油异硬脂酸酯、PEG-5甘油硬脂酸酯、PEG-30甘油硬脂酸酯、PEG-7氢化蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、PEG40失水山梨醇全油酸酯、PEG-5大豆甾醇、PEG-10大豆甾醇、PEG-2硬脂酸酯、PEG-8硬脂酸酯、PEG-20硬脂酸酯、PEG-32硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯、PEG-50硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-150硬脂酸酯、十五内酯、薄荷(Mentha piperita)油、凡士林、磷脂、浮游生物提取物、多氨基糖缩合物、聚甘油-3二异硬脂酸酯、聚季铵盐24、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯85、肉豆蔻酸钾、棕榈酸钾、丙二醇、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇月桂酸酯、丙二醇硬脂酸酯、丙二醇硬脂酸酯SE、PVP、吡哆醇二棕榈酸酯、视黄醇、视黄醇棕榈酸酯、水解稻(Oryza sativa)糠油、RNA、迷迭香(Rosmarinus officinalis)油、玫瑰油、红花(Carthamus tinctorius)油、药鼠尾草(Salvia officinalis)油、檀香(Santalum album)油、丝氨酸、血清蛋白、芝麻(Sesamum indicum)油、牛油果树(Butyrospermum parkii)脂、蚕丝粉、软骨素硫酸钠、透明质酸钠、乳酸钠、棕榈酸钠、PCA钠、聚谷氨酸钠、可溶胶原、失水山梨醇月桂酸酯、失水山梨醇油酸酯、失水山梨醇棕榈酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、失水山梨醇硬脂酸酯、山梨醇、野大豆(Glycine soja)油、鞘脂、角鲨烷、角鲨烯、硬脂酰胺MEA-硬脂酸酯、硬脂酸、硬脂氧基聚二甲基硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷、硬脂醇、硬脂醇甘草亭酸酯、硬脂醇庚酸酯、硬脂醇硬脂酸酯、向日葵(Helianthus annuus)籽油、甜扁桃(Prunus amygdalus dulcis)油、合成蜂蜡、生育酚、乙酸生育酚酯、生育酚亚油酸酯、三山嵛精、十三烷醇新戊酸酯、十三烷醇硬脂酸酯、三乙醇胺、三硬脂酸精、脲、植物油、水、蜡、小麦(Triticum vulgare)胚芽油和依兰(Cananga odorata)油。

c.抗氧化剂

可以与本发明的组合物一起使用的抗氧化剂的非限制性实例包括乙酰半胱氨酸、抗坏血酸多肽、抗坏血酸二棕榈酸酯、抗坏血酸甲基硅烷醇果胶酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸硬脂酸酯、BHA、BHT、叔丁基氢醌、半胱氨酸、半胱氨酸HCl、二戊基氢醌、二叔丁基氢醌、二鲸蜡醇硫代二丙酸酯、二油基生育酚甲基硅烷醇、抗坏血酸硫酸酯二钠、二硬脂醇硫代二丙酸酯、双十三烷醇硫代二丙酸酯、没食子酸月桂酯、异抗坏血酸、抗坏血酸酯、阿魏酸乙酯、阿魏酸、没食子酸酯、氢醌、巯基乙酸异辛酯、曲酸、抗坏血酸镁、抗坏血酸磷酸酯镁、甲基硅烷醇抗坏血酸酯、天然植物抗氧化剂例如绿茶或葡萄籽提取物、去甲二氢愈创木酸、没食子酸辛酯、苯巯基乙酸、磷酸抗坏血酸酯生育酚酯钾、亚硫酸钾、没食子酸丙酯、醌、迷迭香酸、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、异抗坏血酸钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、超氧化物歧化酶、巯基乙酸钠、山梨醇缩糠醛、硫二甘醇、亚硫基二乙酰胺、硫二乙酸、巯基乙酸、硫代乳酸、硫代水杨酸、生育酚聚醚-5、生育酚聚醚-10、生育酚聚醚-12、生育酚聚醚-18、生育酚聚醚-50、生育酚、托可索伦、生育酚乙酸酯、生育酚亚油酸酯、生育酚烟酸酯、生育酚琥珀酸酯和三(壬基苯基)亚磷酸酯。

d.结构化剂

在其他非限制性方面，本发明的组合物可以包含结构化剂。在特定的方面，结构化剂帮助向组合物提供流变学特征以有助于组合物的稳定性。在其他方面，结构化剂还可以起乳化剂或表面活性剂的作用。结构化剂的非限制性实例包括硬脂酸、棕榈酸、硬脂醇、鲸蜡醇、山嵛醇、硬脂酸、棕榈酸、具有平均约1个至约21个亚乙基氧单元的硬脂醇的聚乙二醇醚、具有平均约1个至约5个亚乙基氧单元的鲸蜡醇的聚乙二醇醚及其混合物。

e.乳化剂

在本发明的某些方面，组合物不包含乳化剂。然而，在其他方面，组合物可以包含一种或多于一种乳化剂。乳化剂可以降低相间的表面张力并改善乳液的剂型和稳定性。乳化剂可以是非离子的、阳离子的、阴离子的和两性离子的乳化剂(参见McCutcheon(1986)；美国专利5011681号；4421769号；3755560号)。非限制性实例包括甘油酯、丙二醇酯、聚乙二醇的脂肪酸酯、聚丙二醇的脂肪酸酯、山梨醇的酯、失水山梨醇酐的酯、羧酸共聚物、葡萄糖的酯和醚、乙氧基化的酯、乙氧基化的醇、磷酸烷基酯、聚氧乙烯脂肪醚磷酸酯、脂肪酸酰胺、酰基乳酸酯、脂肪酸盐、TEA硬脂酸酯、DEA油醇聚醚-3磷酸酯、聚乙二醇20失水山梨醇单月桂酸酯(聚山梨醇酯20)、聚乙二醇5大豆甾醇、硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-20、硬脂醇聚醚-21、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、C12-13链烷醇聚醚-3、PPG-2甲基葡萄糖醚二硬脂酸酯、PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20、双-PEG/PPG-20/20二甲硅酮、鲸蜡醇聚醚-10、聚山梨醇酯80、鲸蜡醇磷酸酯、鲸蜡醇磷酸酯钾、二乙醇胺鲸蜡醇磷酸酯、聚山梨醇酯60、甘油硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、花生醇、花生醇葡糖苷、羟丙基环糊精及其混合物。

f.含硅酮的化合物

在非限制性方面，含硅酮的化合物包括分子主链由交替的硅和氧原子与连接在硅原子上的侧基组成的聚合产物家族中的任何成员。通过改变-Si-O-链的长度、侧基和交联，硅酮可以合成为各种各样的材料。它们的稠度可以从液体到凝胶到固体改变。

可以在本发明的情况下使用的含硅酮的化合物包括在本说明书中所描述的或本领域普通技术人员已知的那些。非限制性实例包括硅油(例如挥发性和非挥发性油)、凝胶和固体。在特定的方面，含硅酮的化合物包括硅油，例如聚有机硅氧烷。聚有机硅氧烷的非限制性实例包括聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、环己硅氧烷、聚硅酮-11、苯基聚三甲基硅氧烷、三甲基甲硅烷基氨端聚二甲基硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷或它们与其他有机硅氧烷材料以任何给定比例的混合物，以根据预期的应用(举例来说，施用至特定区域例如皮肤、毛发或眼睛)达到期望的稠度和应用特征。“挥发性硅油”包括具有低气化热的硅油，即通常低于约50卡每克的硅油。挥发性硅油的非限制性实例包括：环聚二甲基硅氧烷，例如道康宁344流体、道康宁345流体、道康宁244流体和道康宁245流体、挥发硅7207(康涅狄格州，丹伯里，联合碳化物公司)；低黏度聚二甲基硅氧烷，即黏度为约50cst或低于50cst的聚二甲基硅氧烷(举例来说，聚二甲基硅氧烷，例如道康宁200-0.5cst流体)。道康宁流体可以从密歇根州米德兰的道康宁公司获得。在CTFA化妆品成分词典的第三版中(通过引用并入)，环聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷分别被描述为环二甲基聚硅氧烷化合物和用三甲基硅氧基单元封端的完全甲基化的线性硅氧烷聚合物的混合物。可以在本发明的情况下使用的其他非限制性的挥发性硅油包括从纽约州沃特福德的通用电气公司硅酮产品部(General Electric Co.,Silicone Products Div.)和密歇根州艾德里安的斯塔夫化学公司的SWS硅酮产品部(SWS Silicones Div.of Stauffer Chemical Co.)获得的那些。

g.去角质剂

去角质剂包含去除皮肤外表面上的死皮肤细胞的成分。这些试剂可以通过机械的、化学的和或其他的方式起作用。机械去角质剂的非限制性实例包括磨砂剂例如浮石、二氧化硅、织物、纸、壳、珠、固体晶体、固体聚合物等。化学去角质剂的非限制性实例包括酸和酶去角质剂。可以用作去角质剂的酸包括但不限于乙醇酸、乳酸、柠檬酸、α羟基酸、β羟基酸等。还预期本领域技术人员熟知的其他去角质剂在本发明的上下文中是有用的。

h.精油

精油包括来自药草、花朵、树木和其他植物的油。这类油一般以植物细胞间微小的液滴存在，并可以用本领域技术人员已知的若干方法进行提取(例如，蒸气蒸馏、吸香法(即使用脂肪提取)、浸渍、溶剂提取或机械压榨)。当这些类型的油暴露于空气时，它们趋于挥发(即挥发性油)。因此，虽然许多精油是无色的，但是它们随着时间氧化并且颜色变得更深。精油不溶于水，但溶于醇、醚、固定油(植物的)和其他有机溶剂。在精油中发现的一般物理特征包括从约160℃到240℃变化的沸点和从约0.759到约1.096的密度。

精油一般通过油被发现的来源植物命名。例如，玫瑰油或薄荷油分别来自玫瑰或薄荷植物。可以在本发明的情况下使用的精油的非限制性实例包括芝麻油、澳洲坚果油、茶树油、月见草油、西班牙鼠尾草油、西班牙迷迭香油、芫荽油、百里香油、众香果油、玫瑰油、茴油、凤仙花油、香柠檬油、玫瑰木油、香柏油、甘菊油、鼠尾草油、香紫苏油、丁香油、柏木油、桉油、小茴香油、海茴香油、乳香油、香叶油、姜油、葡萄柚油、茉莉油、杜松子油、薰衣草油、柠檬油、柠檬草油、梨莓油、橘子油、甘牛至油、没药油、橙花油、橙油、绿叶油、胡椒油、黑胡椒油、橙叶油、松油、奥图玫瑰油、迷迭香油、檀香油、绿薄荷油、甘松油、香根草油、冬青油、或依兰依兰精油。还预期本领域技术人员已知的其他精油在本发明的情况下是有用的。

i.增稠剂

包括增稠剂或凝胶剂在内的增稠剂，包括可以增加组合物黏度的物质。增稠剂包括可以增加组合物黏度而基本上不改变组合物内活性成分功效的那些。增稠剂还可以增加本发明的组合物的稳定性。在本发明的一些方面，增稠剂包括氢化聚异丁烯、三羟硬脂精、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物或它们的混合物。

可以在本发明的情况下使用的另外的增稠剂的非限制性实例包括羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖和胶。羧酸聚合物的实例包括含有一种或多于一种衍生自丙烯酸的单体的交联化合物、经取代的丙烯酸和这些丙烯酸和经取代的丙烯酸的盐和酯，其中所述交联剂含有两个或多于两个碳-碳双键，并衍生自多元醇(参见美国专利5087445号；4509949号；2798053号；CTFA International Cosmetic IngredientDictionary，第四版，1991，第12和80页)。可商购获得的羧酸聚合物的实例包括卡波姆，其为丙烯酸与蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交联的均聚物(例如，来自B.F.Goodrich的CARBOPOL^TM 900系列)。

交联的聚丙烯酸酯聚合物的非限制性实例包括阳离子型和非离子型聚合物。在美国专利第5100660号；第4849484号；第4835206号；第4628078号；第4599379号中描述了实例。

聚丙烯酰胺聚合物(包括非离子的聚丙烯酰胺聚合物，其包括经取代的带支链的或不支链的聚合物)的非限制性实例包括聚丙烯酰胺、异构烷烃和月桂醇聚醚-7、丙烯酰胺与被丙烯酸和经取代的丙烯酸取代的丙烯酰胺的多嵌段共聚物。

多糖的非限制性实例包括纤维素、羧甲基羟乙基纤维素、乙酸丙酸羧酸纤维素、羟乙基纤维素、羟乙基乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、微晶纤维素、纤维素硫酸钠及其混合物。其他实例为烷基取代的纤维素，其中纤维素聚合物的羟基被羟烷基化(优选羟乙基化或羟丙基化)以形成羟烷基化的纤维素，其然后用C10至C30直链或带支链烷基基团通过醚键进行进一步改性。一般这些聚合物为C10至C30直链或带支链醇与羟烷基纤维素的醚。其他有用的多糖包括硬葡聚糖类，其包括每三个单元具有(1-6)连接的葡萄糖的直链的(1-3)连接的葡萄糖单元。

本发明可以使用的胶的非限制性实例包括阿拉伯树胶、琼脂、藻胶、藻酸、藻酸铵、支化淀粉、藻酸钙、角叉菜胶钙、肉毒碱、角叉菜胶、糊精、明胶、结冷胶、瓜尔豆胶、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、锂蒙脱石、透明质酸、水合二氧化硅、羟丙基壳聚糖、羟丙基瓜尔胶、卡拉亚胶、海带、槐豆胶、纳豆胶、藻酸钾、角叉菜胶钾、藻酸丙二醇酯、菌核胶、羧甲基葡聚糖钠、角叉菜胶钠、黄蓍胶、黄原胶及其混合物。

j.防腐剂

可以在本发明的情况下使用的防腐剂的非限制性实例包括季铵盐防腐剂例如聚季铵盐-1和苄烷铵卤化物(例如苯扎氯铵(“BAC”)和苯扎溴铵)、对羟基苯甲酸酯(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)、苯氧基乙醇、苄醇、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫汞撒或其组合。

2.药物成分

还预期药物活性成分对本发明的组合物是有用的。药物活性成分的非限制性实例包括抗粉刺剂、用于处理酒渣鼻的试剂、止痛剂、麻醉剂、肛门直肠的、抗组胺药、包括非甾族消炎药在内的消炎剂、抗生素、抗菌剂、抗病毒素、抗微生物剂、抗癌活性物、抗疥螨剂、灭虱剂、抗肿瘤药、防汗药、止痒剂、抗牛皮癣药、抗脂溢剂、生物活性蛋白质和多肽、烧伤处理剂、烧灼剂、脱色剂、脱毛剂、尿布疹处理剂、酶、毛发生长刺激剂、包括DFMO及其盐和类似物在内的毛发生长抑制剂、止血剂、角质层分离剂、口疮处理剂、唇疱疹处理剂、牙科或牙周处理剂、光敏感活性物、皮肤保护剂/屏障剂、包括激素和皮质激素的类固醇、晒伤处理剂、遮光剂、经皮活性物、鼻活性物、阴道活性物、疣处理剂、创伤处理剂、创伤愈合剂等。

F.试剂盒

还预期试剂盒用于本发明的特定方面。例如，本发明的组合物可以包括在试剂盒内。试剂盒可以包括容器。容器可以包括瓶子、金属管、层压管、塑料管、分配器、高压容器、屏障容器、包装、分室、口红容器、压缩容器、能够保存化妆品组合物的化妆品盘或其他类型的容器例如注塑或吹塑成型的塑料容器，在其中保存分散体或组合物或期望的瓶子、分配器或包装。试剂盒和/或容器可在其表面包含标记。举例来说，标记可以是词语、短语、缩写、图片或符号。

所述容器可以分配预定量的组合物。在其他实施方案中，可以挤压容器(例如金属、层压或塑料管)以分配期望量的组合物。组合物可以分配为喷雾、气溶胶、液体、流体或半固体。容器可以具有喷雾、抽吸或挤压机构。试剂盒还可以包含用于使用试剂盒组分以及使用任何包括于容器内的组合物的说明书。说明书可以包括如何施用、使用和保存组合物的解释。

实施例

包括以下实施例以说明本发明的优选实施方案。本领域技术人员应理解以下实施例中所公开的技术代表发明人发现的在本发明的实践中发挥良好作用的技术，因此能够认为构成用于它的实践的优选实施方式。然而，根据本公开，本领域技术人员应理解，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，在所公开的具体实施方案中可以做许多改变，并仍获得相同或相似的结果。

根据本公开，本文中所公开和要求保护的所有组合物和方法可以在没有过度的实验的情况下制成和实现。尽管本发明的组合物和方法已经按照优选的实施方案进行了描述，但是对于本领域技术人员明显的是，可以对所述组合物和方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序中实施变化，而不脱离本发明的概念、精神和范围。更具体地，明显地，化学和生理两方面都相关的特定试剂可以替代本文所描述的试剂，同时会实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在如由所附权利要求限定的本发明的精神、范围和概念内。

实施例1

将具有本文公开的成分的制剂制备成局部皮肤用组合物。在某些例子中，局部皮肤用组合物可以制备成乳液、精华、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华。表1中的制剂是作为水包油乳液霜剂制备的局部皮肤用组合物的实例。表2中的制剂是作为油包水乳液清洁剂制备的局部皮肤用组合物的实例。

表1^

^制剂可以通过在70℃至75℃加热下在烧杯中混合所述成分直至均匀来制备。然后可以将所述制剂冷却到标准室温(20℃至25℃)。此外，如果需要，可以添加额外的组分，例如以改变为皮肤提供益处的组合物或组分的流变性质。

*例如，可以添加赋形剂以改变组合物的流变性质。或者，可以改变水的量，只要组合物中水的量为至少40重量％，优选为50重量％至75重量％。

表2^

*例如，可以添加赋形剂以改变组合物的流变性质。或者，可以改变水的量，只要组合物中水的量低于至少40重量％，优选为0.01重量％至20重量％。

实施例2

(体外活性)

已经确定包含鳄梨油、油橄榄果油、刺阿干树仁油、白池花籽油、杂交向日葵油、深海两节荠籽油和/或胡萝卜根提取物的组合物可以增加胶原蛋白的产生以有助于改善皮肤紧致度和弹性、减少TNF-根的表达以减少炎症、抑制B16黑色素以防止皮肤变黑和淡化黑斑、抑制酪氨酸酶、增加弹性蛋白的产生、增加纤连蛋白的产生和/或增加层黏连蛋白的产生。定量结果的总结见表3，用于确定成分性质的方法在下面提供。

表3

胶原蛋白刺激测定：胶原蛋白是对皮肤结构关键的一种细胞外基质蛋白。增加的胶原蛋白合成帮助改善皮肤紧致度和弹性。该生物测定可以用来检测本说明书中所公开活性成分的胡萝卜根提取物对人类表皮成纤维细胞产生前胶原肽(胶原蛋白的前体)的影响。该测定的终点是反映前胶原肽的存在和细胞活力的分光光度测量。该测定通过采用定量的夹心酶联免疫分析技术，因此对前胶原肽特异的单克隆抗体预先涂覆在微孔板上。将标准品和样品移液到孔中，存在的任何前胶原肽都被固定的抗体结合。洗掉所有未结合的物质后，添加对前胶原肽特异的酶联多克隆抗体到孔中。冲洗以去除所有未结合的抗体-酶试剂之后，添加底物溶液到孔中，颜色显现与最初步骤中结合的原胶原肽的量成比例。可以停止显色，并使用酶标仪测量450nm处的颜色强度。

为了产生样品和对照，将半汇合的正常人成体表皮成纤维细胞(CascadeBiologics)在含有10％胎牛血清(Mediatech)的标准DMEM生长培养基中于37℃、10％CO₂下培养。可以用每种测试成分和对照处理细胞3天。孵育后，收集细胞培养基，并使用来自Takara(#MK101)的夹心酶联免疫吸附分析(ELISA)定量前胶原肽分泌的量，如上所述。

结果表明胡萝卜根提取物使胶原蛋白的产生增加了22.3％至65％。此外，结果表明刺阿干树仁油可使胶原蛋白的产生增加28％。

B16色素沉着测定：黑素生成是黑素细胞产生黑色素的过程，黑色素是一种天然产生的给予皮肤、毛发和眼睛颜色的色素。抑制黑素生成有益于预防皮肤变黑和减轻与老化有关的黑斑。该生物测定采用B16-F1黑素细胞(ATCC)，一种永生化的小鼠黑色素瘤细胞系，来分析化合物对黑素生成的效果。该测定的终点是黑色素产生和细胞活性的分光光度测量。可以在37℃、10％的CO₂下利用10％的胎牛血清(Mediatech)在标准DMEM生长培养基中培养B16-F1黑素细胞，然后用本说明书中所公开活性成分、成分的组合或具有所述组合的组合物中的任一种处理。孵育之后，通过在405nm处的吸收测量黑色素分泌，并对细胞活性进行定量。具体地，结果表明胡萝卜根提取物抑制B16黑素生成表达27％。另外，结果表明扫帚叶澳洲茶抑制B16黑素生成表达31％。

弹性蛋白刺激测定：弹性蛋白是一种结缔组织蛋白，其帮助皮肤在拉伸或收缩后恢复形状。弹性蛋白也是一种重要的负载蛋白，用于需要储存机械能的地方。通过在赖氨酰氧化酶催化的反应中连接许多可溶性原弹性蛋白分子来制备弹性蛋白。通过使用针对弹性蛋白的免疫荧光抗体对培养的人成纤维细胞进行染色，监测在培养的人成纤维细胞中的弹性蛋白分泌和弹性蛋白纤维。具体地，结果表明刺阿干树仁油使弹性蛋白产量增加129％。

层黏连蛋白和纤连蛋白刺激测定：层黏连蛋白和纤连蛋白是真皮-表皮连接区(DEJ)(也被称为基膜)中主要的蛋白质。DEJ位于真皮和表皮联结之间，形成叫做网脊的指状突出。表皮细胞从真皮的血管中接收它们的养分。网脊增大暴露于这些血管和所需养分的表皮的表面积。DEJ提供两种组织区室的黏连，并控制皮肤的结构完整性。层黏连蛋白和纤连蛋白是位于DEJ中的两种结构糖蛋白。考虑到将细胞保持在一起的胶，真皮成纤维细胞分泌层黏连蛋白和纤连蛋白以帮助促进表皮细胞到DEJ的细胞内和细胞间黏连。可以通过在培养的人成纤维细胞的细胞上清液中定量层黏连蛋白和纤连蛋白来监测层黏连蛋白和纤连蛋白分泌，该培养的人成纤维细胞用培养基处理3天，其中培养基具有或不具有测试成分。孵育后，可以使用酶联免疫吸附测定(ELISA)中针对每种蛋白质的免疫荧光抗体测量层黏连蛋白和纤连蛋白含量。通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑(MTS)的生物转化测定，对细胞代谢活性进行标准化测量。具体地，结果表明刺阿干树仁油使纤连蛋白产生增加22％，层黏连蛋白产生增加135％。

肿瘤坏死因子-瘤坏死因子加果表测定：TNF超家族的原型配体，TNF-原，是一种在炎症中起主要作用的多效细胞因子。其表达的增加与促炎活性上调有关。该生物测定可以用来分析本说明书中所公开活性成分、成分的组合或具有所述组合的组合物中的任一种对人类表皮角化细胞产生TNF-在的影响。该测定的终点可能是反映TNF-该的存在和细胞活性的分光光度测量。该测定采用定量的夹心酶联免疫分析技术，由此已经将对TNF-细特异的单克隆抗体预先涂覆在微孔板上。可以将标准品和样品移液到孔中，以使得所有存在的TNF-克由固定化的抗体结合。洗掉所有未结合的物质后，可以将对TNF-的特异的酶联多克隆抗体添加到孔。冲洗以去除所有未结合的抗体-酶反应物之后，可以将底物溶液添加到孔，显色与最初步骤中结合的TNF-之的量成比例，使用酶标仪在450nm处检测。可以停止显色，并测量颜色的强度。可以将在37℃下5％的CO₂中在EPILIFE止标准生长培养基(CascadeBiologics)中培养的半汇合的正常人类成熟角质细胞(Cascade Biologics)用佛波醇-12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA，10ng/ml，Sigma Chemical，#P1585-1MG)和本说明书中所公开的活性成分、成分的组合或具有所述组合的组合物的任一种处理6小时。PMA已经显示导致TNF-导分泌明显的增加，所述TNF-的分泌在处理6小时后达到峰值。培育之后，可以收集细胞培养基，并使用来自R&D Systems(#DTA00C)的夹心酶联免疫吸附分析(ELISA)对TNF-S分泌的量进行定量。具体地，结果表明胡萝卜根提取物抑制TNF-，表达78％。

蘑菇酪氨酸酶活性测定：在哺乳动物细胞中，酪氨酸酶在来自酪氨酸(和来自多巴色素聚合)的黑色素多步生物合成中催化两个步骤。酪氨酸酶位于黑素细胞中，并产生给予皮肤、毛发和眼睛颜色的黑色素(芳香醌化合物)。可以在本说明书所公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或具有所述组合的组合物存在下或不存在下将纯化的蘑菇络氨酸酶(Sigma)与其底物L-Dopa(Fisher)培养。可以通过在490nm处的比色板读数来评估色素形成。蘑菇络氨酸酶活性的抑制百分比可以通过与未处理的对照相比较来计算，以确定测试成分或其组合抑制纯化酶的活性的能力。测试提取物的抑制与曲酸(Sigma)的抑制进行比较。具体地，结果表明扫帚叶澳洲茶抑制TNF-行表达55％。

实施例3

(其他测定)

可以用于确定在本说明书全文和权利要求书中所公开的成分、或任意成分的组合或包含所述成分的组合的组合物的任一种的功效测定，可以通过本领域普通技术人员已知的方法进行确定。以下是可以在本发明的情况下使用的非限制性测定。应认识到，可以使用其他测试过程，包括例如客观的和主观的过程。

抗氧化(AO)测定：体外生物测定测量本说明中所公开的成分、成分的组合或具有所述组合的组合物中的任一种的总抗氧化能力。所述分析依赖样品中抗氧化剂的能力抑制(2,2'-联氮-双-[3-乙基苯并噻唑啉磺酸盐])被正铁肌红蛋白氧化成活生物体的抗氧化系统包含酶，例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶；大分子，例如白蛋白、血浆铜蓝蛋白和铁蛋白；和大量的小分子，包括抗坏血酸、α活生育酚、β育胡萝卜素、还原型谷胱甘肽、尿酸和胆红素。内源的源自食物的抗氧化剂的总数表示细胞外液的总抗氧化能力。所有不同抗氧化剂的协作提供比单独的任何单个化合物更强的对抗反应性氧或氮自由基侵袭的保护。因此，总的抗氧化能力与测量单独组分获得的相比可以给出更相关的生物信息，因为它考虑了血浆和体液中存在的所有抗氧化剂的累积效应。样品中抗氧化剂预防ABTS氧化的能力与一种水溶性生育酚类似物Trolox进行比较，并以Trolox的摩尔当量进行定量。可以使用来自Cayman Chemical(密歇根州安阿伯，USA)的抗氧化能力试剂盒#709001作为测量本说明中所公开的成分、成分的组合或具有所述组合的组合物中的任一种的总抗氧化能力的体外生物测定。方案可以根据制造商的建议进行。

ORAC测定：本说明书公开的活性成分、活性成分的组合或含有所述组合的组合物的任一种的氧自由基吸附(或吸收)能力(ORAC)也可以通过测量这些成分或组合物的抗氧化活性测试。抗氧化活性表明能够还原氧化试剂(氧化剂)。该测定定量了抑制氧化剂，例如已知导致损害细胞(例如皮肤细胞)的氧自由基的作用的程度及所用时间。本说明书公开的活性成分、成分的组合或含有所述组合的组合物的任一种的ORAC值可以通过本领域普通技术人员已知的方法进行确定(参见U.S.公开第2004/0109905号和第2005/0163880号；和可商购获得的试剂盒如Zen-Bio ORAC抗氧化分析试剂盒(#AOX-2))。Zen-Bio ORAC抗氧化分析试剂盒测量了由于通过AAPH(2,2'-偶氮二-2-甲基丙基脒二盐酸盐)分解而形成过氧自由所引起的基随时间的荧光素荧光的损失。一种水溶性维生素E类似物Trolox用作以剂量依赖的方式抑制荧光素衰减的阳性对照。

基质金属蛋白酶3和9酶活性(MMP3；MMP9)测定：体外的基质金属蛋白酶(MMP)抑制测定。MMP是胞外蛋白酶，其凭借它们宽的底物特异性在许多正常的和疾病状态起作用。MMP3底物包括胶原蛋白、纤连蛋白和层黏连蛋白；而MMP9底物包括胶原蛋白VII、纤连蛋白和层黏连蛋白。使用来自BioMol International的用于MMP3(AK-400)和MMP-9(AK-410)的比色药物发现试剂盒，该测定设计用于测量MMP的蛋白酶活性，使用含硫多肽作为显色底物(Ac-PLG-[2-巯基-4-甲基-戊酰基]-LG-OC2H5)5,6。MMP裂解位点的肽键由含硫多肽中的硫酯键替代。该键被MMP水解产生巯基，其与DTNB[5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)，埃尔曼(Ellman’s)试剂]反应生成2-硝基-5-硫代苯甲酸，可以通过其在412nm处的吸光度进行检测(在pH 6.0和高于7时，ε＝13600M^-1cm^-1)。可以测定本说明书中公开的活性成分、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物。

基质金属蛋白酶1(MMP1)酶活性测定：体外的基质金属蛋白酶(MMP)抑制测定。MMP是胞外蛋白酶，其凭借它们宽的底物特异性在许多正常的和疾病状态起作用。MMP1底物包括胶原蛋白IV。分子探针Enz/Chek白明胶酶/胶原酶分析试剂盒(#E12055)利用荧光明胶底物来检测MMP1蛋白酶活性。在溶蛋白性裂解后，显示亮绿色荧光，并可以使用荧光酶标仪来观测亮绿色荧光以测量酶活性。

来自Invitrogen的Enz/Chek明胶酶/胶原酶分析试剂盒(#E12055)被设计为体外测定以测量MMP1酶活性。可以测定本说明书中公开的活性成分、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物。该测定依赖于纯化的MMP1酶降解荧光明胶底物的能力。底物被MMP1特异地裂解后，则显示亮绿色荧光，并可以使用荧光酶标仪观测亮绿色荧光。在纯化的酶和底物存在或不存的条件下培养测试材料以确定其蛋白酶抑制能力。

环氧合酶(COX)测定：体外环氧合酶-1和环氧合酶-2(COX-1、COX-2)抑制测定。COX是一种表现出环氧合酶和过氧化物酶两种活性的双功能酶。环氧合酶活性将花生四烯酸转化为过氧化氢内过氧化物(前列腺素G2；PGG2)，过氧化物酶部分将内过氧化物(前列腺素H2；PGH2)还原为相应的醇，前列腺素、血栓素和环前列腺素的前体。该COX抑制剂筛选测定测量环氧合酶的过氧化物酶部分。过氧化物酶活性通过监测氧化的N,N,N',N'-四甲基-对苯二胺(TMPD)的出现比色地进行分析。该抑制剂筛选测定包括COX-1和COX-2酶两者，以筛选同工酶特异性抑制剂。可以使用比色COX(绵羊)抑制剂筛选分析(#760111，CaymanChemical)来分析本说明书中所公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合、或具有所述组合的组合物对纯化的环氧合酶(COX-1或COX-2)的影响。根据制造商的用法说明，纯化的酶、血红素和试验提取物可以在分析缓冲液中混合，并在室温下摇动培育15分钟。培育之后，可以加入花生四烯酸和比色底物开始反应。颜色变化可以通过在590nm的比色板读数进行评估。COX-1或COX-2活性的抑制百分比可以通过与未处理的对照比较进行计算，以确定试验提取物抑制纯化酶的活性的能力。

脂肪氧合酶(LO)测定：体外的脂肪氧合酶(LO)抑制分析。LO是非血红素的含铁的加双氧酶，其催化分子氧加成到脂肪酸。亚油酸盐/酯和花生四烯酸盐/酯是植物中和动物中LO的主要底物。然后，花生四烯酸可以转化为羟基二十烷三烯(HETE)酸衍生物，其随后转化为有效的炎症介质白三烯。该测定通过测量利用花生四烯酸培养的脂肪氧合酶(5-LO、12-LO或15-LO)产生的氢过氧化物提供一种精确的和方便的用于筛选脂肪氧合酶抑制剂的方法。可以使用比色LO抑制剂筛选试剂盒(#760700，Cayman Chemical)来确定本说明书中所公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合、或具有所述组合的组合物抑制酶活性的能力。可以将纯化的15-脂肪氧合酶和测试成分在分析缓冲液中混合，并在室温下摇动培育10分钟。培育之后，可以加入花生四烯酸开始反应，混合物可以在室温下再培育10分钟。可以加入比色底物终止催化，颜色变化可以通过在490nm测定的荧光板进行评估。可以与未处理的对照相比较来评估脂肪氧合酶活性的抑制百分比，以确定本说明书中所公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合、或具有所述组合的组合物抑制纯化酶的活性的能力。

弹性蛋白酶测定：可以使用Molecular Probes(美国俄勒冈州，尤金)的弹性蛋白酶分析(试剂盒#E-12056)作为用于测量本说明书中所公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或具有所述组合的组合物的弹性蛋白酶活性抑制的体外酶抑制测定。EnzChek试剂盒含有可溶的牛颈韧带弹性蛋白，其可以用染料标记以使共轭荧光能够被淬灭。非荧光的底物可以被弹性蛋白酶或其他蛋白酶消化以产生高荧光的片段。产生的荧光增强可以用荧光微孔板测定仪进行监测。来自弹性蛋白底物的消化产物在约505nm处具有最大吸收，在约515nm处具有最大荧光发射。当使用EnzChek弹性蛋白酶分析试剂盒以筛选弹性蛋白酶抑制剂时，可以将肽、N-甲氧基琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Val-氯甲基酮用作选择性的、共同的弹性蛋白酶抑制剂。

油控制测定：用于测量皮脂腺中皮脂分泌的减少和/或皮脂腺中皮脂产生的减少的测定可以通过使用本领域普通技术人员已知的标准技术进行测定。在一个例子中，可以使用前额。可以将本说明书中所公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或具有所述组合的组合物每天一次或两次地施用到前额的一部分持续一段固定的日子(例如1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天或多于14天)，而前额的其他部分不用所述组合物处理。在一段固定的日子期满后，皮脂分泌可以通过将细吸墨纸施用到经处理的和未经处理的前额皮肤上进行测定。这是通过首先用湿的和干的布从经处理的和未经处理的区域去除所有皮脂实现的。然后将吸墨纸施用到经处理的和未经处理的前额区域，可以绕着前额放置橡皮筋以轻轻地将吸墨纸压到皮肤上。2小时后，可以移去吸墨纸，使其干燥，然后进行透照。越深的吸墨纸对应于越多的皮脂分泌(或较浅的吸墨纸对应于减少的皮脂分泌)。

红斑测定：测量皮肤发红减少的测定可以使用Minolta Chromometer进行评估。可以通过在对象前臂施用0.2％的十二烷基硫酸钠溶液来引发皮肤红斑。该区域用封闭的贴片保护24小时。24小时后，除去贴片，可以使用Minolta Chroma Meter的a*值对刺激引发的发红进行评估。a*值测量皮肤色调在红色区域的变化。读数后立即用本说明书公开的活性成分、任一种活性成分的组合或含有所述组合的组合物处理该区域。可以定期进行重复测量以确定制剂减少发红和刺激的能力。

皮肤水分/水合测定：皮肤水分/水合的益处可以通过利用以Nova Dermal PhaseMeter进行的阻抗测量进行测量。阻抗计测量皮肤水分含量的变化。皮肤外层具有不同的电性质。当皮肤干燥时，其导电很差。当其变得含水更多时，产生增加的导电性。因此，皮肤阻抗(与导电性有关)的变化可以用于评价皮肤水合的变化。在每个测试日可以根据仪器说明对装置进行校准。还可以对温度和相对湿度进行标记。对对象可以进行如下评估：测量前其可以在具有确定湿度(例如30％至50％)和温度(例如68℃至72℃)的室内进行平衡。在脸的每一侧进行三个独立的阻抗测定，并对其进行记录和平均。阻抗计可以使用T5设定，其对施用到脸上每五秒的阻抗值进行平均。变化可以以统计方差和显著性进行报道。根据该方法可以测定本说明书中公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物。

皮肤清透度和雀斑与老年斑减少的测定：皮肤清透度和雀斑与老年斑减少使用Minolta Chromometer进行评价。皮肤色调的变化可以使用Minolta Chroma Meter的a*值进行评估以确定由产品处理引起刺激的可能性。a*值测量皮肤色调在红色区域的变化。这用于确定本说明书中公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物是否诱导刺激。测量可以在脸的每一侧进行并进行平均，作为左边脸和右边脸的值。皮肤清透度也可以使用Minolta Meter进行测量。测量是Minolta Meter的a*值、b值、和L值的组合，并与皮肤的亮度有关，而且非常好地对应皮肤的光滑度和水合作用。皮肤读数如上进行。在一个非限制性方面，皮肤清透度可以描述为L/C，其中C是色度并定义为(a²+b²)^1/2。

皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和皮肤色调测定：皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和皮肤颜色可以用临床评分技术进行评估。例如，皮肤干燥的临床评分可以通过五点标准Kligman量表进行确定：(0)皮肤是柔软和湿润的；(1)皮肤呈现正常而没有可见的干燥；(2)皮肤感觉轻微干燥而没有可见的剥落；(3)皮肤感觉干燥、坚韧并且具有一些鳞屑的发白的外观；以及(4)皮肤感觉非常干燥、粗糙并且具有有鳞屑的发白的外观。评估可以由两个临床医师独立进行并进行平均。

皮肤色调临床评分测定：皮肤色调的临床评分可以通过十点模拟数值量表实施：(10)平滑的均匀的皮肤、粉红棕色的颜色。手持放大镜检查时没有暗的、发红的或有鳞的斑块。皮肤的微观纹理摸上去非常均匀；(7)不用放大镜观察到均匀的皮肤色调。没有鳞状区域，但是有由于色素淀积或红斑引起的疹斑。没有直径大于1cm的疹斑；(4)轻易地注意到皮肤色素异常和不均匀的纹理。少量鳞片。一些区域摸上去皮肤粗糙；以及(1)不均匀的皮肤着色和纹理。多个区域具有鳞片和色素异常，色素减退型的、发红的或黑色的斑点。直径超过1cm的大面积不均匀着色。评估由两个临床医师独立进行并进行平均。

皮肤光滑度的临床评分测定：皮肤光滑度的临床评分可以通过十点模拟数值量表进行分析：(10)光滑的，皮肤是湿润的和闪光的，手指划过表面时没有阻力；(7)一定程度光滑的，微小的阻力；(4)粗糙的、可见地改变，摩擦时有摩擦力；以及(1)粗糙的、片状的、不均匀的表面。评估由两个临床医师独立进行并进行平均。

用Packman等人(1978)公开的方法进行的皮肤光滑度和皱纹减少的测定：皮肤光滑度和皱纹的减少也可以通过使用Packman等人(1978)公开的方法进行可视化评估。例如，每一名对象就诊时，对每一名对象的表面面纹(SFL)的深度、浅度和总数量都可以进行认真的评分和记录。通过将数量因子乘以深度/宽度/长度因子得到数字的分数。获得眼睛区域和嘴巴区域(左侧和右侧)的分数并将其加在一起作为总的皱纹分数。

用Hargens Ballistometer进行的皮肤紧致度测定：皮肤紧致度可以用HargensBallistometer，一种通过在皮肤上落下一个小物体并记录前两个反弹峰来评估皮肤弹性和紧致度的装置，来进行测量。使用的ballistometry是具有相对钝的探头(4平方毫米的接触面积)的小的轻量探测器。探测器轻轻地穿透进入皮肤，并产生依赖于皮肤外层性质的测量，所述皮肤外层包括角质层和外表皮以及部分真皮层。

用Gas Bearing Electrodynamometer进行的皮肤柔软度/柔韧性测定：皮肤柔软度/柔韧性可以使用Gas Bearing Electrodynamometer，一种测量皮肤压力/张力性质的仪器，来进行评估。皮肤的黏弹性与皮肤保湿有关。可以通过用双面胶将探测器附着在皮肤表面来实现对脸颊区域指定位点的测量。可以将大约3.5gm的力平行施加于皮肤表面，精确地测量皮肤的位移。然后可以计算皮肤的柔韧性，并表达为DSR(动态弹簧刚度，以gm/mm计)。

用复制品进行的细纹和皱纹的显现测定：皮肤上的细纹和皱纹的显现可以使用复制品进行评估，所述复制品是皮肤表面的印模。可以使用如硅橡胶的材料。复制品可以通过图像分析进行分析。可以通过利用硅复制品形成对象的脸并用计算机图像分析系统分析复制品图像来客观地定量细纹和皱纹可见性的变化。复制品可以从眼睛区域和颈部区域获得，并用数码相机以低照明入射角进行拍摄。数字图像可以用图像处理程序进行分析并确定复制品被皱纹和细纹覆盖的区域。

用表面光度仪/记录针的方法进行的皮肤表面轮廓测定：皮肤表面轮廓可以通过使用表面光度仪/记录针的方法进行测量。这包括闪光或拖动记录针穿过复制品表面。记录针的垂直位移通过距离传感器可以录入计算机，在扫描复制品的一定距离后，皮肤轮廓的分析可以以二维曲面产生。该扫描可以沿着固定的轴重复任意次数以产生模拟的皮肤3-D图像。使用记录针技术可以获得十个随机的复制品截面，并组合产生平均值。目标值包括Ra，其为通过相对于平局轮廓高度计算的轮廓高度积分得到的所有粗糙度(高度)值的算术平均数。Rt，其为最高峰和最低谷之间的最大垂直距离，以及Rz，其为平均峰振幅减去平均峰高度。以用mm为单位标定的值给出值。设备应在每次使用前通过扫描具有已知值的金属标准物进行标准化。Ra值可以通过下式计算：Ra＝标准化粗糙度；lm＝横向(扫描)长度；以及y＝轮廓位置相对于平均轮廓高度的绝对值(x-轴)。

MELANODERM^TM测定：在其他非限制性方面，可通过使用皮肤模拟例如MELANODERMTM来评价本说明书中所公开的每种活性成分活性成分的每一种、任一种成分的组合或具有该组合的组合物的功效。黑素细胞，皮肤类似物中细胞的一种，当暴露于黑色素的前体L-二羟苯基丙氨酸(L-DOPA)时阳性着色。皮肤类似物，MELANODERMTM可以如下处理：利用各种包含说明说公开的每种活性成分、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物的基质或将基质单独作为对照。或者，可以将未处理的皮肤类似物样品用作对照。

丝聚合蛋白的产生：可以测量由于本说明书中公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物引起的角质细胞中丝聚合蛋白的产生的变化。丝聚合蛋白是皮肤中天然保湿因子(NMF)的前体。NMF增加会增加皮肤的水分含量。可以使用分析角质形成细胞裂解物中的丝聚合蛋白浓度的生物测定来确定经处理和未经处理的角质形成细胞中的丝聚合蛋白产生。可用于量化丝聚合蛋白生成的生物测定的非限制性实施例是SIMON^TM蛋白质印迹方案。对于每个样品，正常人表皮角质形成细胞(NHEK)在具有来自Life Technologies(M-EP-500-CA)的钙的EPI-200-Mattek EPILIFE-生长培养基中生长。在处理之前，将NHEK在37℃、5％CO₂下于生长培养基中过夜孵育。然后将NHEK在含有1％试验化合物/提取物或不含化合物/提取物(阴性对照)的生长培养基中孵育24小时至36小时。然后可以洗涤、收集NHEK并将其储存在冰或冷水中，直到使用裂解缓冲液和超声处理在冰上裂解。可以确定样品的蛋白质浓度并用于标准化样品。裂解物可以储存在-80℃直至用于定量测定。

SIMON冲蛋白质印迹生物测定分析采用定量蛋白质印迹免疫测定技术，其中使用丝聚合蛋白特异性抗体以定量检测测试样品中的丝聚合蛋白。裂解细胞样品并标准化蛋白质浓度。然后可以上样标准化的样品和分子量标准品，并使用毛细血管电泳在变性的蛋白质分离凝胶上运行。固定化凝胶中的蛋白质并使用对丝聚合蛋白具有特异性的一抗进行免疫探针标记。然后可以用结合一抗的酶联检测抗体对固定的蛋白质进行免疫探针标记。然后可以将化学发光底物溶液加入到固定的蛋白质中，以允许化学发光的显影与固定化中结合的丝聚合蛋白的量成比例。在特定时间停止化学发光显影，并且可以测量化学发光信号的强度并与阳性和阴性对照进行比较。

闭合蛋白的产生：可以测量由于本说明书中公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物引起的角质细胞中闭合蛋白的产生的变化。闭合蛋白是一种对紧密连接的形成和皮肤的水分屏障功能至关重要的蛋白质。可以通过使用分析角质形成细胞细胞裂解物中的闭合蛋白浓度的生物测定来确定在经处理和未经处理的角质形成细胞中如何产生闭合蛋白的非限制性实施例。可以使用SIMON理蛋白质印迹方案进行生物测定。对于样品，来自Life Technologies(C-005-5C)的成人人表皮角质形成细胞(HEKa)可在37℃和5％CO₂下于EPILIFE质生长培养基中生长24小时，其中含有来自Life Technologies的钙(M-EP-500)-CA)补充Life Technologies的角质形成细胞生长补充剂(HKGS)(S-101-5)。然后将HEKa在生长培养基中与测试化合物/提取物孵育，无化合物/提取物的情况作为阴性对照，或用1mM CaCl2孵育24小时至48小时。然后洗涤、收集HEKa并将其储存在冰或冷水中直至使用裂解缓冲液和超声处理在冰上裂解。可以确定样品的蛋白质浓度并用于标准化样品。将裂解物储存在-80℃直至用于生物测定。

SIMON^TM蛋白质印迹生物测定分析采用定量蛋白质印迹免疫测定技术，其中使用对闭合蛋白具有特异性的抗体以定量检测测试样品中的闭合蛋白。裂解细胞样品并标准化蛋白质浓度。然后上样标准化的样品和分子量标准品，并使用毛细血管电泳在变性的蛋白质分离凝胶上运行。然后固定化凝胶中的蛋白质并使用对闭合蛋白具有特异性的一抗进行免疫探针标记。用结合一抗的酶联检测抗体对固定的蛋白质进行免疫探针标记。然后将化学发光底物溶液加入到固定的蛋白质中，使得化学发光的显影与固定化中结合的闭合蛋白的量成比例。可以在特定时间停止化学发光显影，并且可以测量化学发光信号的强度并与阳性和阴性对照进行比较。

角质形成细胞单层通透性：可以测量由本说明书中公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物引起的角质细胞单层的渗透性的变化。角质形成细胞单层渗透性是皮肤屏障完整性的量度。作为非限制性实施例，可以使用Millipore的体外血管渗透性测定法(ECM642)测定经处理和未经处理的角质形成细胞中的角质形成细胞单层渗透性。该测定分析内皮细胞的吸附、转运和渗透性。简而言之，来自LifeTechnologies(C-005-5C)的成人人表皮角质形成细胞可以接种到收集孔内的多孔胶原包被的膜上。然后将角质形成细胞在37℃和5％CO₂下于EPILIFE质生长培养基中培养24小时，其中来自Life Technologies(M-EP-500-CA)的钙补充有来自Life Technologies的角质形成细胞生长补充剂(HKGS)(S-101-5)。该孵育时间允许细胞形成单层并堵塞膜孔。然后用新鲜培养基替换培养基(测试样品)或无(未经处理对照)测试化合物/提取物，并将角质形成细胞在37℃和5％CO₂下再培养48小时。为了测定用/不用测试化合物/提取物孵育后的角质形成细胞单层的渗透性，用含有高分子量异硫氰酸荧光素(FITC)-葡聚糖的新鲜培养基替换培养基，并将角质形成细胞在37℃、5％CO₂下孵育4小时。在4小时孵育期间，FITC可以以与单层渗透性成比例的速率通过角质形成细胞单层和多孔膜而进入收集孔。孵育4小时后，可以确定收集孔中的细胞活力和FITC的含量。对于FITC含量，收集收集孔中的培养基，当在520nm激发时，在480nm(Em)下测定培养基的荧光。渗透率百分比和以及与未经处理的对照相比的百分比变化可通过以下等式确定：渗透率百分比＝((测试样品的平均Ex/Em)/未经处理的对照的平均Ex/Em)照的平均；百分比变化＝测试样品的渗透率百分比-未经处理对照的渗透率百分比。

透明质酸的产生：可以测量由于本说明书中公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物引起的人真皮成纤维细胞中透明质酸的产生的变化。HA是参与稳定基质结构的多糖，并且涉及向组织和细胞提供膨压。作为一个非限制性实施例，可以使用来自R&D系统(DY3614)的透明质酸DuoSet ELISA试剂盒测定经处理和未经处理的成人真皮成纤维细胞(HDFa)细胞中的HA产生。在该测定中，为了产生样品，处理前，在37℃和10％CO₂下于饥饿培养基(在含有0.15％胎牛血清和1％青霉素链霉素溶液的杜皮克氏改良爱哥尔氏培养基中)中孵育72小时来自Cascade Biologics(C-13-5C)的半汇合HDFa细胞。然后将细胞与新鲜饥饿培养基一起与测试化合物、阳性对照(来自Sigma-Aldrich的佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(P1585)和来自Sigma-Aldrich的血小板衍生生长因子(P3201))或不含添加剂一起孵育24小时。然后收集培养基并在-80℃冷冻直至用于ELISA测定。

简而言之，ELISA测定采用定量夹心酶联免疫分析技术，由此可以将对HA具有特异性的捕获抗体预先包被在微孔板上。将来自经处理和未经处理细胞的标准品和培养基移液到微孔板孔中，使得存在的任何HA能够与固定化抗体结合。冲走所有未结合的物质后，添加对HA具有特异性的酶联检测抗体到孔中。在洗涤除去任何未结合的抗体-酶试剂后，将底物溶液加入孔中以允许与初始步骤中结合的HA量成比例的显色。在特定时间停止显色，并且可以使用酶标仪测量450nm处的颜色强度。

透明质酸酶活性的抑制：可以测量由于本说明书中公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物引起的透明质酸酶活性的变化。透明质酸酶是一种降解HA的酶。HA是参与稳定基质结构的多糖，并且涉及向组织和细胞提供膨压。作为一个非限制性实施例，可以使用从Sigma-Aldrich方案#EC 3.2.1.35改良的体外方案确定透明质酸酶活性。简而言之，将来自Sigma-Aldrich的1-S型透明质酸酶(H3506)加入到含有测试化合物或对照的微孔板反应孔中。单宁酸可用作阳性对照抑制剂，不能向对照酶中加入测试化合物，具有测试化合物或阳性对照但不含透明质酸酶的孔可用作背景阴性对照。将孔在37℃下孵育10分钟，然后加入底物(HA)。加入底物并在37℃下孵育45分钟已进行反应。然后将每种反应溶液的一部分转移到pH 3.75的乙酸钠和乙酸溶液中并轻轻混合，以停止该部分反应(停止孔)。在将一部分反应溶液加入到停止孔中之后，停止孔和反应孔都应含有相同体积的溶液。将反应孔和停止孔在室温下孵育10分钟。然后测量反应孔和停止孔在600nm处的吸光度。可以使用以下公式计算抑制：抑制剂(或对照)活性＝(在600nm处的抑制剂停止孔吸光度-在600nm处的抑制剂反应孔吸光度)；初始活性＝600nm处的对照酶吸光度；抑制百分比＝[(初始活性/抑制剂活性)制剂活性吸光度；抑。

过氧化物酶体增殖物激活的受体γ氧化物酶体增殖物活性：可以测量由于本说明书中公开的活性成分的每一种、任一种成分的组合或含有所述组合的组合物引起的PPAR-于的活性的变化。PPAR-化是一种对皮脂产生至关重要的受体。作为一个非限制性实施例，可以使用分析测试化合物或组合物抑制配体结合的能力的生物测定来确定PPAR-脂的活性。简而言之，可以将可从Life Technologies(PV4894)获得的荧光小分子pan-PPAR配体FLUORMONETM Pan-PPAR Green用于确定测试化合物或组合物是否能够抑制配体与PPAR-试的结合。样品孔包括PPAR-品和荧光配体，以及：测试化合物或组合物(测试)；参考抑制剂罗格列酮(阳性对照)；或无测试化合物(阴性对照)。将孔孵育一段时间以使配体有机会结合PPAR-一。然后可以测量每个样品孔的荧光偏振并与阴性对照孔比较以确定测试化合物或组合物的抑制百分比。

细胞因子阵列：将人类表皮胶质细胞培养至70％至80％汇合度。平板中的培养基被吸出，并添加0.025％胰蛋白酶/EDTA。当细胞变圆时，轻拍培养皿以释放细胞。包含胰蛋白酶/EDTA的细胞被从培养皿移出，并被平衡。将细胞以180被从离心5分钟以形成细胞沉淀。吸出上清液。得到的团块在EPILIFE^TM培养基(Cascade Biologics)中重悬。在大约10％至20％汇合度时将细胞接种至6孔板。当细胞变成约80％汇合度后，吸去培养基，添加1.0mlEPILIFE^TM以及佛波醇13-肉豆蔻酸12-乙酸酯(酸酯酸醇l E一种已知的炎症诱导剂)和测试组合物稀释液至两个重复的孔(即1.0％(100至两的100％储备液)和0.1％(100至的100％储备液)测试组合物被稀释到终体积1ml的EPILIFE^TM生长培养基中)。培养基被轻柔地涡旋以保证充分的混合。另外，添加1.0ml EPILIFE^TM至含有或不含有另外的PMA的对照孔。配制后，平板然后在37孔。配℃和5.0。配制后，平板₂下孵育大约5小时。孵育5小时后，将所有培养基收集在锥形管中，并在-70℃下冷冻。

为了分析，将16格的杂交盒附接至16格的FAST载玻片，该FAST载玻片一式三份排列着16种抗细胞因子抗体加实验对照(Whatman BioSciences)，并且将载玻片放置到FAST框中(每个框4个载玻片)用于处理。在室温下用70ml S&S蛋白分析封闭缓冲液(WhatmanSchleicher and Scheull)将阵列封闭15分钟。去除封闭缓冲液并添加70ml每种上清样品至每个阵列。将阵列在室温下伴随轻柔的搅动孵育3小时。用TBS-T洗涤阵列3次。用70ml抗体混合物处理阵列，所述抗体混合物包含一种对应于每个阵列的捕获抗体的生物素化的抗体。将阵列在室温下伴随轻柔的搅动孵育1小时。用TBS-T洗涤阵列3次。用70ml溶液在室温下伴随轻柔的搅动孵育阵列1小时，所述溶液包含链霉亲和素-Cy5缀合物。用TBS-T洗涤阵列3次，快速在去离子水中冲洗，并干燥。

载玻片可以在Perkin-Elmer ScanArray 4000激光共聚焦成像系统中成像。可以保存阵列图像，并用Imaging Research Array Vision软件分析。简言之，通过减去背景信号来确定点强度。来自每个样品条件的点重复值可以被平均，然后与适合的对照比较。

内皮管形成：内皮管形成涉及血管生成和微血管毛细血管形成。毛细血管形成和血管生成可能导致皮肤发红和红斑痤疮。在存在或不存在测试提取物和化合物的情况下，可以使用在细胞培养系统中具有预先形成的原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的毛细血管小管破裂测定来确定内皮细胞形成管的能力。

简而言之，在细胞外基质上体外培养HUVEC，该细胞外基质刺激内皮细胞的附着和管状形态发生以形成毛细血管样腔结构。这些体外形成的毛细血管在许多方面与人血管毛细血管相似。毛细血管试验基于该现象并用于评估潜在的脉管系统靶向剂。

HUVEC培养物在5％CO₂、37℃的细胞培养箱中生长。HUVEC的完全生长培养基是补充有2％胎牛血清(FBS)、12BS)培养牛脑提取物、1脑提取物、氢化可的松和1化可的松和养基是补充有形态发庆大霉素-两性霉素)的内皮细胞基础培养基(EBM)。可将第3代和第8代之间的HUVEC培养物用于所有测定实验。

用荧光剂钙黄绿素AM预先标记HUVEC，并使用其完全生长培养基将其接种于细胞外基质涂覆的96孔培养板中。在形态发生过程约4小时后，应形成内皮毛细血管。然后，将50μl体积的设计剂量的测试剂施加到所形成的毛细血管小管培养物中作为处理条件。可以在测试剂载体中添加未经处理对照。可以包括一种浓度的FDA批准的抗血管生成药物索坦(Sutent)作为试验性能对照。处理约六小时后，可以在定量分析处理条件下通过显微镜检查每个孔中的内皮小管形态、成像、和毛细血管破坏活性。每个测试条件可以在重复孔中进行，包括对照。

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根据本公开，本文中所公开和要求保护的所有组合物和/或方法可以不需要不合适的实验即制成和实现。尽管本发明的组合物和方法已经按照优选的实施方案进行了描述，但是对于本领域技术人员明显的是，可以对所述组合物和/或方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序中实施变化，而不脱离本发明的概念、精神和范围。更具体地，明显地，化学和生理两方面都相关的特定试剂可以替代本文所描述的试剂，同时会实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在如由所附权利要求限定的本发明的精神、范围和概念内。

参考文献

以下参考文献在一定程度上提供示例性程序或对本文所陈述细节的其他补充细节，它们通过引用明确地并入本文。

化妆品成分词典，第三版，CTFA，1982。

国际化妆品成分词典，第四版，CTFA，1991。

国际化妆品成分词典和指南，第十版，CTFA，2004。

国际化妆品成分词典和指南，第十二版，CTFA，2008。

Claims

1.一种处理皮肤以减少皱纹出现、增加保湿、增亮肌肤、减少炎症、增加皮肤弹性和/或增加皮肤紧致度的方法，所述方法包括向皮肤局部施用有效量的包含鳄梨油、油橄榄果油和刺阿干树仁油的局部用组合物，其中所述局部用组合物减少黑色素分泌、抑制TNF-α分泌、增加胶原蛋白的产生、增加弹性蛋白的产生、增加层黏连蛋白的产生和/或增加纤连蛋白的产生。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述局部用组合物还包含有效量的霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠和牛油果树脂。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述局部用组合物包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至5重量％的霍霍巴酯类、0.001重量％至1重量％的腺苷、0.001重量％至1重量％的透明质酸钠和/或0.01重量％至5重量％的牛油果树脂。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述局部用组合物还包含有效量的白池花籽油、杂交向日葵油和深海两节荠籽油。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述局部用组合物包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至10重量％的白池花籽油、0.1重量％至5重量％的杂交向日葵油和0.01重量％至5重量％的深海两节荠籽油。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述局部用组合物还包含有效量的胡萝卜根提取物以增加皮肤中胶原蛋白的产生、减少皮肤炎症、防止皮肤变黑和/或淡化皮肤黑斑。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述局部用组合物包含0.01重量％至5重量％的胡萝卜根提取物。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述局部用组合物还包含20重量％至45重量％的轻质矿物油。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述局部用组合物是乳液、精华、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华。

10.一种局部用组合物，其包含有效量的鳄梨油、油橄榄果油和刺阿干树仁油，以减少皮肤上皱纹的出现、滋润皮肤、减少炎症、增加皮肤紧致度、增加弹性和/或增亮肌肤。

11.根据权利要求10所述的局部用组合物，其中所述局部用组合物包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油和0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油。

12.根据权利要求10所述的局部用组合物，其还包含霍霍巴酯类、腺苷、透明质酸钠和牛油果树脂。

13.根据权利要求12所述的局部用组合物，其包含0.1重量％至5重量％的霍霍巴酯类、0.001重量％至1重量％的腺苷、0.001重量％至1重量％的透明质酸钠和/或0.01重量％至5重量％的牛油果树脂。

14.根据权利要求10所述的局部用组合物，其还包含50重量％至75重量％的水。

15.根据权利要求10所述的局部用组合物，其还包含白池花籽油、杂交向日葵油和深海两节荠籽油。

16.根据权利要求15所述的局部用组合物，其包含0.1重量％至5重量％的鳄梨油、0.1重量％至5重量％的油橄榄果油、0.1重量％至5重量％的刺阿干树仁油、0.1重量％至10重量％的白池花籽油、0.1重量％至5重量％的杂交向日葵油和0.01重量％至5重量％的深海两节荠籽油。

17.根据权利要求10所述的局部用组合物，其中所述局部用组合物还包含有效量的胡萝卜根提取物以增加皮肤中胶原蛋白的产生、减少皮肤炎症和/或增亮肌肤。

18.根据权利要求17所述的局部用组合物，其包含0.01重量％至5重量％的胡萝卜根提取物。

19.根据权利要求10所述的局部用组合物，其还包含20重量％至45重量％的轻质矿物油。

20.根据权利要求10所述的局部用组合物，其中所述局部用组合物是乳液、精华、凝胶、凝胶乳液或凝胶精华。