CN110376172A - 一种l-苯丙氨酸的识别方法 - Google Patents
一种l-苯丙氨酸的识别方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110376172A CN110376172A CN201910667609.7A CN201910667609A CN110376172A CN 110376172 A CN110376172 A CN 110376172A CN 201910667609 A CN201910667609 A CN 201910667609A CN 110376172 A CN110376172 A CN 110376172A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- phenylalanine
- probe
- fluorescence
- fibrauretine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 55
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 title claims description 107
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 title claims description 53
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 75
- FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N [4,6-bis(cyanoamino)-1,3,5-triazin-2-yl]cyanamide Chemical group N#CNC1=NC(NC#N)=NC(NC#N)=N1 FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 34
- ZDOBFUIMGBWEAB-XGFHMVPTSA-N cucurbit[7]uril Chemical compound N1([C@H]2[C@H]3N(C1=O)CN1[C@H]4[C@H]5N(C1=O)CN1[C@H]6[C@H]7N(C1=O)CN1[C@H]8[C@H]9N(C1=O)CN1[C@H]%10[C@H]%11N(C1=O)CN([C@@H]1N(C%12=O)CN%11C(=O)N%10CN9C(=O)N8CN7C(=O)N6CN5C(=O)N4CN3C(=O)N2C2)C3=O)CN4C(=O)N5[C@H]6[C@@H]4N2C(=O)N6CN%12[C@@H]1N3C5 ZDOBFUIMGBWEAB-XGFHMVPTSA-N 0.000 claims abstract description 32
- QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-[3-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC(N(CCCl)CCCl)=C1 QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 95
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 20
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 11
- 230000005284 excitation Effects 0.000 claims description 11
- 238000001506 fluorescence spectroscopy Methods 0.000 claims description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 8
- 241000219112 Cucumis Species 0.000 claims description 5
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 238000000103 photoluminescence spectrum Methods 0.000 claims description 5
- 238000010791 quenching Methods 0.000 claims description 5
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N monobenzene Natural products C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 12
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 8
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 6
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N Phenylpropyl alcohol Natural products CCC(O)C1=CC=CC=C1 DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000005311 nuclear magnetism Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 2
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DWNBOPVKNPVNQG-LURJTMIESA-N (2s)-4-hydroxy-2-(propylamino)butanoic acid Chemical compound CCCN[C@H](C(O)=O)CCO DWNBOPVKNPVNQG-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- VAJVDSVGBWFCLW-UHFFFAOYSA-N 3-Phenyl-1-propanol Chemical compound OCCCC1=CC=CC=C1 VAJVDSVGBWFCLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YCBWLMWEQURJHX-UHFFFAOYSA-N 4-(trifluoromethyl)cyclohexan-1-amine Chemical compound NC1CCC(C(F)(F)F)CC1 YCBWLMWEQURJHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 Iron ion Chemical class 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102000008109 Mixed Function Oxygenases Human genes 0.000 description 1
- 108010074633 Mixed Function Oxygenases Proteins 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000023852 carbohydrate metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005789 organism growth Effects 0.000 description 1
- 230000008212 organismal development Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D455/00—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine
- C07D455/03—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine containing quinolizine ring systems directly condensed with at least one six-membered carbocyclic ring, e.g. protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
- C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N21/33—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using ultraviolet light
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6402—Atomic fluorescence; Laser induced fluorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
- C09K2211/1007—Non-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
- C09K2211/1011—Condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
- C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
- C09K2211/1029—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
- G01N2021/6432—Quenching
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
本发明公开了一种L‑苯丙氨酸的识别方法，是以荧光探针作为识别试剂进行识别；所述荧光探针是由七元瓜环或八元瓜环与黄藤素制备而成。本发明的方法具有识别方法简单，识别成本低，选择单一性强的特点。
Description
技术领域
本发明涉及一种L-苯丙氨酸的识别方法，特别是一种L-苯丙氨酸的荧光探针识别方法。
背景技术
氨基酸在生物体成长发育过程中发挥着极其重要的其作用：1.是人体组织的构成部分；2.构成人体内的各种物质；3.供给热量；4.免疫调节；5.作为体内重要的载体,起者运输的作用；6.氧化功能。氨基酸是蛋白质的基本组成物质,摄入氨基酸是人体获得氮源的唯一方式,人体吸收氨基酸后一部分被直接用来合成蛋白质，一部分被氧化分解,其中含氮部分用来合成其他必须氨基酸，一部分作为能量被分解掉,以尿素的形式排出体外。
L-苯丙氨酸（英文名：L-Phenylalanine）是必需氨基酸之一。在体内大部分经苯丙氨酸羟化酶催化作用氧化成酪氨酸，并与酪氨酸一起合成重要的神经递质和激素，参与机体糖代谢和脂肪代谢。
传统的L-苯丙氨酸的检测识别方法是气相色谱-质谱法，其方法复杂，且设备昂贵，识别成本高。而荧光探针由于具有识别方法简单，识别成本低等优点，在检测识别领域越来越受人们的欢迎。
现目前有八元瓜环与黄藤素制备的荧光探针（专利号：CN201811586962.4），是用于检测识别饮用水中的铁离子，专利（专利号：CN201811222729.8）公开了一种荧光探针，是用八元瓜环和吖啶盐酸盐制备而成，可以识别L-苯丙氨酸，但是，其同时还能识别L-精氨酸、L-组氨酸和L-赖氨酸等，专一性不高。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种L-苯丙氨酸的识别方法。本发明的方法具有识别方法简单，识别成本低，选择单一性强的特点。
本发明的技术方案：一种L-苯丙氨酸的识别方法，是以荧光探针作为识别试剂进行识别；所述荧光探针是由七元瓜环或八元瓜环与黄藤素制备而成。
前述的L-苯丙氨酸的识别方法，所述识别的具体方法是，将所述荧光探针用中性水稀释成探针标准溶液，向标准溶液中滴加待测水溶液，静置后以固定激发波长342nm进行荧光光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化，并通过荧光光谱强度的变化值ΔF判断待测液中是否含有L-苯丙氨酸，从而实现对L-苯丙氨酸的识别。
前述的L-苯丙氨酸的识别方法，所述探针标准溶液的浓度为2.0×10-5 mol/L。
前述的L-苯丙氨酸的识别方法，所述静置的时间为5-15s。
前述的L-苯丙氨酸的识别方法，所述静置的时间为10s。
前述的L-苯丙氨酸的识别方法，所述荧光探针是由七元瓜环与黄藤素制成时，荧光光谱强度的变化值ΔF对应493nm下的荧光强度变化，且当识别到L-苯丙氨酸时，493nm下的荧光强度猝灭；所述荧光探针是由八元瓜环与黄藤素制成时，荧光光谱强度的变化值ΔF对应541.94nm下的荧光强度变化，且当识别到L-苯丙氨酸时，541.94nm下的荧光强度增强。
前述的L-苯丙氨酸的识别方法，所述荧光探针的制备方法如下：
1）取七元瓜环或八元瓜环溶于水，得溶液A；
2）取黄藤素溶于水，得溶液B；
3）将溶液A与溶液B混合，在常温下反应即可。
前述的L-苯丙氨酸的识别方法，所述七元瓜环或八元瓜环与黄藤素的摩尔比为1：0.5-2。
本发明的有益效果
本发明通过利用荧光探针对L-苯丙氨酸进行检测，检测时只需要将待测液滴加至探针溶液中，然后进行荧光激发，观察其荧光强度变化即可，识别方法简单。同时，相对于传统的检测过程和所需的设备，本发明的检测过程和设备更加简单，成本更低。此外，本发明的方法在检测氨基酸时，只对L-苯丙氨酸具有响应，其他的氨基酸的荧光强度值几乎没有变化，可见，本发明的荧光探针在检测氨基酸时具有选择单一性强的优点。
实验例1：探究七元瓜环与黄藤素所形成探针的合适摩尔比
为了探究七元瓜环与黄藤素所形成探针的合适摩尔比，采用紫外吸收光法谱和荧光光谱法对主客体之间的相互作用进行了考察。
摩尔比法测定各体系之间的紫外吸收光谱和荧光谱和荧光光谱数据，具体方法为：将黄藤素和七元瓜环分别配制成1.0mmol/L和0.1mmol/L的水溶液备用，固定客体浓度为0.02mmol/L，改变七元瓜环的浓度，配置N七元瓜环/N黄藤素为0、0.1、0.2、0.3、0.5、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5的水溶液，在室温下测定溶液的紫外-可见吸收光谱；固定客体浓度为0.02mmol/L，改变七元瓜环的浓度，配置N七元瓜环/N黄藤素为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5的水溶液，在激发波长为342nm，激发狭缝为5nm，发射狭缝为5nm，电压为570V的条件下测定溶液的荧光发射光谱。随后采用等摩尔连续变化法(JOB法)测定体系之间的紫外吸收光谱，固定主客体的总浓度为4.0mmol/L不变，通过不断改变主客体之间的物质的量之比，配制出一系列不同摩尔比N七元瓜环/(N七元瓜环+N黄藤素)=0.1、0.2…0.8、0.9的待测溶液，并按此方法，测定紫外吸收光谱。
实验例2：定量分析
向浓度为2.0×10-5mol/L的七元瓜环与黄藤素制得的荧光探针标准溶液中加入不同体积分数的含有L-苯丙氨酸的溶液进行检测，检测结果如图2所示，可以看出，加入不同体积分数后标准溶液中L-苯丙氨酸的浓度也不相同，不同浓度的L-苯丙氨酸可使荧光探针溶液发生不同程度的荧光猝灭，而L-苯丙氨酸响应的线性范围为（2.0-60.0）×10-6mol/L，检出限为6.3899×10-6 mol/L（如图3）。
实验例3：探究八元瓜环与黄藤素所形成探针的合适摩尔比
为了探究八元瓜环与黄藤素所形成探针的合适摩尔比，采用紫外吸收光法谱和荧光光谱法对主客体之间的相互作用进行了考察。
摩尔比法测定各体系之间的紫外吸收光谱和荧光谱和荧光光谱数据，具体方法为：将黄藤素和八元瓜环分别配制成1.0mmol/L和0.1mmol/L的水溶液备用，固定客体浓度为0.02mmol/L，改变八元瓜环的浓度，配置N八元瓜环/N黄藤素为0、0.1、0.2、0.3、0.5、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5的水溶液，在室温下测定溶液的紫外-可见吸收光谱；固定客体浓度为0.02mmol/L，改变八元瓜环的浓度，配置N八元瓜环/N黄藤素为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5的水溶液，在激发波长为342nm，激发狭缝为5nm，发射狭缝为5nm，电压为600V的条件下测定溶液的荧光发射光谱。随后采用等摩尔连续变化法(JOB法)测定体系之间的紫外吸收光谱，固定主客体的总浓度为4.0mmol/L不变，通过不断改变主客体之间的物质的量之比，配制出一系列不同摩尔比N八元瓜环/(N八元瓜环+N黄藤素)=0.1、0.2…0.8、0.9的待测溶液，并按此方法，测定紫外吸收光谱。
实验例4：定量分析
向浓度为2.0×10-5mol/L的八元瓜环和黄藤素制得的荧光探针标准溶液中加入不同体积分数的含有L-苯丙氨酸的溶液进行检测，检测结果如图7所示，可以看出，加入不同体积分数后标准溶液中L-苯丙氨酸的浓度也不相同，不同浓度的L-苯丙氨酸可使荧光探针溶液发生不同程度的荧光增敏，而L-苯丙氨酸响应的线性范围为（2.0-60.0）×10-6mol/L，检出限为2.33×10-6mol/L（如图8）。
附图说明
图1为七元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液加入含有不同L型氨基酸的溶液时的荧光光谱曲线；
图2为七元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液加入含有不同浓度L-苯丙氨酸的溶液时的荧光光谱曲线；
图3为七元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液加入含有不同浓度L-苯丙氨酸的溶液时的检出限模拟图；
图4为七元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液加入不同浓度的含有L-苯丙氨酸的溶液时的核磁滴定图；其中，（A）黄藤素；(B) 黄藤素:七元瓜环=1：1；(C) 黄藤素:七元瓜环:L-苯丙氨酸=1：1：7.25；(D)L-苯丙氨酸；
图5为七元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液中加入含有不同L型氨基酸的溶液时，365nm下七元瓜环与黄藤素体系探针与常见的20种人体必需氨基酸相互作用的荧光光谱图；
图6为八元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液加入含有不同L型氨基酸的溶液时的荧光光谱曲线；
图7为八元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液加入含有不同浓度L-苯丙氨酸的溶液时的荧光光谱曲线；
图8为八元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液加入含有不同浓度L-苯丙氨酸的溶液时的检出限模拟图；
图9为探针标准溶液加入不同浓度含有L-Phe的溶液时的核磁滴定图；其中，（A）黄藤素；(B)黄藤素:八元瓜环=1：1；(C)黄藤素:八元瓜环:L-苯丙氨酸=1：1：6.35；(D)L-苯丙氨酸；
图10为八元瓜环与黄藤素制成的探针标准溶液加入含有不同L型氨基酸的溶液时，365nm下八元瓜环与黄藤素体系探针与常见的20种人体必需氨基酸相互作用的荧光光谱图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。
本发明的实施例
实施例1：一种L-苯丙氨酸的识别方法，步骤如下：
1）制备标准探针溶液：取七元瓜环溶于水，得溶液A；取黄藤素溶于水，得溶液B；将溶液A与溶液B混合，控制七元瓜环与黄藤素的摩尔比为1：1，在常温下反应，得探针溶液，其中探针的分子式为C42H42N28O14@ C21H22NO4，其探针模式图如附图3所示，将探针溶液加中性水稀释至浓度为2.0×10-5 mol/L，得标准探针溶液；
2）L-苯丙氨酸识别：将待测溶液滴加至标准探针溶液中，静置10s，然后以固定激发波长342nm进行荧光光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化，当493nm下的荧光强度猝灭时，则说明待测溶液中含有L-苯丙氨酸，否则不含。
实施例2：一种L-苯丙氨酸的识别方法，步骤如下：
1）制备标准探针溶液：取七元瓜环溶于水，得溶液A；取黄藤素溶于水，得溶液B；将溶液A与溶液B混合，控制七元瓜环与黄藤素的摩尔比为1：0.5，在常温下反应，得探针溶液，将探针溶液加中性水稀释至浓度为2.0×10-5 mol/L，得标准探针溶液；
2）L-苯丙氨酸识别：将待测溶液滴加至标准探针溶液中，静置5s，然后以固定激发波长342nm进行荧光光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化，当493nm下的荧光强度猝灭时，则说明待测溶液中含有L-苯丙氨酸，否则不含。
实施例3：一种L-苯丙氨酸的识别方法，步骤如下：
1）制备标准探针溶液：取七元瓜环溶于水，得溶液A；取黄藤素溶于水，得溶液B；将溶液A与溶液B混合，控制七元瓜环与黄藤素的摩尔比为1： 2，在常温下反应，得探针溶液，将探针溶液加中性水稀释至浓度为2.0×10-5 mol/L，得标准探针溶液；
2）L-苯丙氨酸识别：将待测溶液滴加至标准探针溶液中，静置15s，然后以固定激发波长342nm进行荧光光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化，当493nm下的荧光强度猝灭时，则说明待测溶液中含有L-苯丙氨酸，否则不含。
实施例4：一种L-苯丙氨酸的识别方法，步骤如下：
1）制备标准探针溶液：取八元瓜环溶于水，得溶液A；取黄藤素溶于水，得溶液B；将溶液A与溶液B混合，控制八元瓜环与黄藤素的摩尔比为1：1，在常温下反应，得探针溶液，其中探针的分子式为C48H48N32O16@ C21H22NO4，其探针模式图如附图7所示，将探针溶液加中性水稀释至浓度为2.0×10-5 mol/L，得标准探针溶液；
2）L-苯丙氨酸识别：将待测溶液滴加至标准探针溶液中，静置10s，然后以固定激发波长342nm进行荧光光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化，当541.94nm下的荧光强度增强时，则说明待测溶液中含有L-苯丙氨酸，否则不含。
实施例5：一种L-苯丙氨酸的识别方法，步骤如下：
1）制备标准探针溶液：取八元瓜环溶于水，得溶液A；取黄藤素溶于水，得溶液B；将溶液A与溶液B混合，控制八元瓜环与黄藤素的摩尔比为1：0.5，在常温下反应，得探针溶液，将探针溶液加中性水稀释至浓度为2.0×10-5 mol/L，得标准探针溶液；
2）L-苯丙氨酸识别：将待测溶液滴加至标准探针溶液中，静置5s，然后以固定激发波长342nm进行荧光光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化，当541.94nm下的荧光强度增强时，则说明待测溶液中含有L-苯丙氨酸，否则不含。
实施例6：一种L-苯丙氨酸的识别方法，步骤如下：
1）制备标准探针溶液：取八元瓜环溶于水，得溶液A；取黄藤素溶于水，得溶液B；将溶液A与溶液B混合，控制八元瓜环与黄藤素的摩尔比为1： 2，在常温下反应，得探针溶液，将探针溶液加中性水稀释至浓度为2.0×10-5 mol/L，得标准探针溶液；
2）L-苯丙氨酸识别：将待测溶液滴加至标准探针溶液中，静置15s，然后以固定激发波长342nm进行荧光光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化，当541.94nm下的荧光强度增强时，则说明待测溶液中含有L-苯丙氨酸，否则不含。
以上所述，仅为本发明创造较佳的具体实施方式，但本发明创造的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明创造揭露的技术范围内，根据本发明创造的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明创造的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种L-苯丙氨酸的识别方法，其特征在于：是以荧光探针作为识别试剂进行识别；所述荧光探针是由七元瓜环或八元瓜环与黄藤素制备而成。
2.根据权利要求1所述的L-苯丙氨酸的识别方法，其特征在于：所述识别的具体方法是，将所述荧光探针用中性水稀释成探针标准溶液，向标准溶液中滴加待测水溶液，静置后以固定激发波长342nm进行荧光光谱测定，并绘制激发出的该激光波长处的荧光强度的变化，并通过荧光光谱强度的变化值ΔF判断待测液中是否含有L-苯丙氨酸，从而实现对L-苯丙氨酸的识别。
3.根据权利要求2所述的L-苯丙氨酸的识别方法，其特征在于：所述探针标准溶液的浓度为2.0×10-5 mol/L。
4.根据权利要求2所述的L-苯丙氨酸的识别方法，其特征在于：所述静置的时间为5-15s。
5.根据权利要求4所述的L-苯丙氨酸的识别方法，其特征在于：所述静置的时间为10s。
6.根据权利要求2所述的L-苯丙氨酸的识别方法，其特征在于：所述荧光探针是由七元瓜环与黄藤素制成时，荧光光谱强度的变化值ΔF对应493nm下的荧光强度变化，且当识别到L-苯丙氨酸时，493nm下的荧光强度猝灭；所述荧光探针是由八元瓜环与黄藤素制成时，荧光光谱强度的变化值ΔF对应541.94nm下的荧光强度变化，且当识别到L-苯丙氨酸时，541.94nm下的荧光强度增强。
7.根据权利要求1所述的L-苯丙氨酸的识别方法，其特征在于：所述荧光探针的制备方法如下：
1）取七元瓜环或八元瓜环溶于水，得溶液A；
2）取黄藤素溶于水，得溶液B；
3）将溶液A与溶液B混合，在常温下反应即可。
8.根据权利要求7所述的L-苯丙氨酸的识别方法，其特征在于：所述七元瓜环或八元瓜环与黄藤素的摩尔比为1：0.5-2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910667609.7A CN110376172B (zh) | 2019-07-23 | 2019-07-23 | 一种l-苯丙氨酸的识别方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910667609.7A CN110376172B (zh) | 2019-07-23 | 2019-07-23 | 一种l-苯丙氨酸的识别方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110376172A true CN110376172A (zh) | 2019-10-25 |
| CN110376172B CN110376172B (zh) | 2022-05-17 |
Family
ID=68255199
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910667609.7A Active CN110376172B (zh) | 2019-07-23 | 2019-07-23 | 一种l-苯丙氨酸的识别方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110376172B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113929690A (zh) * | 2021-11-16 | 2022-01-14 | 贵州大学 | 一种瓜环基有机荧光材料及其制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109507164A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-03-22 | 贵州大学 | 一种饮用水中铁离子的检测方法 |
| CN109652062A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-04-19 | 贵州大学 | 一种新型荧光探针t及其制备和应用 |
-
2019
- 2019-07-23 CN CN201910667609.7A patent/CN110376172B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109507164A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-03-22 | 贵州大学 | 一种饮用水中铁离子的检测方法 |
| CN109652062A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-04-19 | 贵州大学 | 一种新型荧光探针t及其制备和应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| CHANG FENG LI: "Determination of L-phenylalanine by cucurbit[7]uril sensitized fluorescence quenching method", 《CHINESE CHEMICAL LETTERS》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113929690A (zh) * | 2021-11-16 | 2022-01-14 | 贵州大学 | 一种瓜环基有机荧光材料及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110376172B (zh) | 2022-05-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109232589A (zh) | 一种荧光探针及其制备和应用 | |
| Yan et al. | An effective real-time colorimeteric sensor for sensitive and selective detection of cysteine under physiological conditions | |
| Zhu et al. | A colorimetric and fluorescence lighting-up probe for the determination of biogenic primary diamine during the spoilage of fish | |
| CN105928914A (zh) | 硫化氢检测传感器及其制备方法、硫化氢的定量检测方法和细胞内硫化氢的定性检测方法 | |
| CN107502339B (zh) | 一种识别尼罗替尼的比率荧光探针及其制备和识别方法 | |
| CN106370638A (zh) | 用于Hg2+检测的比色、荧光双信号生物传感器及检测方法 | |
| CN110117295A (zh) | 一种检测汞离子的荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN106905958A (zh) | 一种基于反式七元瓜环的荧光探针、制备方法及应用 | |
| Gao et al. | Rapid and accurate detection of phosphate in complex biological fluids based on highly improved antenna sensitization of lanthanide luminescence | |
| CN110376172A (zh) | 一种l-苯丙氨酸的识别方法 | |
| CN110412000B (zh) | 基于十元瓜环检测l-色氨酸的荧光探针及其检测方法 | |
| Xu et al. | A novel ratiometric fluorescent probe with high selectivity for lysosomal nitric oxide imaging | |
| Feng et al. | Selective detection of ozone in inflamed mice using a novel activatable chemiluminescent probe | |
| CN105985291B (zh) | 一种快速高选择性分析氟离子的比色荧光探针 | |
| Zhang et al. | In situ generated chromophore as the indicator for background-free sensing strategy of hydrazine with high sensitivity with in vitro and in vivo applications | |
| CN110411999B (zh) | 基于八元瓜环检测l-苯丙氨酸的荧光探针及其检测方法 | |
| CN110669503A (zh) | 一种一氧化碳近红外荧光探针的制备和应用 | |
| CN110527506A (zh) | 一种用于检测苯丙氨酸的高选择性荧光探针及其应用 | |
| CN113416540B (zh) | 一种应用于检测药物性耳聋试剂的碳点及其制备方法 | |
| Zhang et al. | “One stone, two birds”: a mitochondria-targeted fluorescent probe for the detection of viscosity and HSO 3− in living cells | |
| CN108383820A (zh) | 一种杯[4]硫脲香豆素化学传感器及其制备方法和应用 | |
| CN111635388B (zh) | 基于芘和香豆素衍生物的亚硫酸氢根荧光探针、制备方法及应用 | |
| CN116217589A (zh) | 用于制备肿瘤早期诊断的ONOO-和/或Na2S2荧光探针试剂的应用 | |
| CN112557355B (zh) | 一种稀土荧光探针检测生物体液中铋离子的方法 | |
| CN110596056A (zh) | 基于七元瓜环检测l-苯丙氨酸的荧光探针及其检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |