CN110368482A - 一种组合物及其在制备防治心血管疾病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种组合物及其在制备抗心血管疾病中的应用。所述组合物包括鲟鱼蛋白肽、纳豆粉、茯苓多糖、以及归经包括脾经的中药提取物;其中所述鲟鱼蛋白肽与所述纳豆粉的质量比例在1~1.5:1之间,所述鲟鱼蛋白肽与所述茯苓多糖的质量比例在1.8~2.2:1之间;所述归经包括脾经的中药提取物与茯苓多糖的质量比例在1.5~2.5:1之间;所述组合物中含有5000~10000IU/g纳豆激酶。本发明提供的组合物(商品名“鲟纳茯精华片”)具有明显的降低血脂和溶解血栓的作用,采用食品或已确认的药食同源药品,能满足食品的安全性要求,适合长期使用,能应用于制备以预防为主、防治结合的心血管疾病防治药物。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域,更具体地,涉及一种组合物及其在制备抗心血管疾病中的应用。
背景技术
心脑血管疾病是心脏血管和脑血管疾病的统称,主要指由于高脂血症、血液黏稠、动脉粥样硬化、高血压等所导致的心脏、大脑及全身组织发生的缺血性或出血性疾病。心脑血管疾病是一种严重威胁人类,特别是50岁以上中老年人健康的常见病,具有高患病率、高致残率和高死亡率的特点,即使应用目前最先进、完善的治疗手段,仍可有50%以上的脑血管意外幸存者生活不能完全自理,全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人,居各种死因首位。
防治心血管疾病的药物以化学药物为主,长期服用多存在肝肾毒性,导致脂质代谢紊乱,甚至凝血功能障碍。因此适合长期服用,以预防为主、防治结合的心血管疾病防治药物,有着广阔的市场前景。
发明内容
针对现有技术的以上缺陷或改进需求,本发明提供了一种组合物及其在制备防治心血管疾病药物中的应用,其目的在于,通过将药食同源的鲟鱼蛋白肽、纳豆粉、茯苓多糖、以及归经包括脾经的中药提取物进行复配,获得有效的降低血脂和溶解血栓的效果,能用于心血管疾病的防止药物的制备,由此解决现有技术亟待开发适合长期服用,以预防为主、防治结合的心血管疾病的防治药物的技术问题。
为实现上述目的,按照本发明的一个方面,提供了一种组合物,包括鲟鱼蛋白肽、纳豆粉、茯苓多糖、以及归经包括脾经的中药提取物;其中所述鲟鱼蛋白肽与所述纳豆粉的质量比例在1~1.5:1之间,所述鲟鱼蛋白肽与所述茯苓多糖的质量比例在1.8~2.2:1之间;所述归经包括脾经的中药提取物与茯苓多糖的质量比例在1.5~2.5:1之间;所述组合物中含有5000~10000IU/g纳豆激酶。
优选地,所述组合物,其所述鲟鱼蛋白肽含有1.2~1.5mg/g的金属硫蛋白肽。
优选地,所述组合物,其所述鲟鱼蛋白肽按照如下方法制备:
1)将鲟鱼洗净、切成块状,然后绞碎,加入其重量1-3倍的水,升温至90℃以上保持10-20min,然后在2-2.5MPa的压力下进行汽爆处理3-5min;
2)步骤1)得到的物料冷却至60℃以下,加入盐酸溶液调pH至1.5-5,再加入鲟鱼质量0.2~0.3%的胃蛋白酶原进行酶解反应2至5小时;
3)步骤2)得到的物料加入碱溶液调节pH至7.5至8,再加入鲟鱼质量0.1~0.2%的胰蛋白酶进行酶解反应1至3小时;
3)步骤2)得到的物料升温至90℃以上保持10-20min,再冷却至65℃以下,进行脱色、脱盐、除菌过滤、滤液浓缩,最后经消毒干燥后即可得到蛋白肽粉体;
其平均分子量在250Da以下。
优选地,所述组合物,其所述纳豆粉其发酵制备过程使用菌种BacillussubtilisQK02,由中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCCNO:M203078。
优选地,所述组合物,其所述纳豆粉为采用枯草杆菌对黑豆进行发酵的制得的纳豆粉末。
优选地,所述组合物,其所述归经包括脾经的中药提取物为火麻仁提取物、以及郁李仁提取物的一种或两种的组合,优选所述归经包括脾经的中药提取物为火麻仁提取物和郁李仁提取物按照质量比例1:0.8~1.2的组合。
优选地,所述组合物,其所述茯苓多糖为取代度在0.69至0.73的羧甲基茯苓多糖。
按照本发明的另一个方面,提供了所述的组合物的应用,其应用于防治心血管疾病药物的制备。
优选地,所述组合物应用,其应用于溶血栓药物的制备。
优选地,所述组合物应用,其应用于降脂药物的制备。
总体而言,通过本发明所构思的以上技术方案与现有技术相比,能够取得下列有益效果:
实验证实,本发明提供的组合物有效复配了鲟鱼蛋白肽、纳豆粉、茯苓多糖、以及归经包括脾经的中药提取物,相对于鲟鱼蛋白肽、纳豆粉单独使用和联合使用,具有更佳明显的降低血脂和溶解血栓的作用。同时,由于本发明提供的组合物皆采用食品或已确认的药食同源药品,能满足食品的安全性要求,适合长期使用,能应用于制备以预防为主、防治结合的心血管疾病防治药物。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。此外,下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
本发明提供的组合物,包括鲟鱼蛋白肽、纳豆粉、茯苓多糖、以及归经包括脾经的中药提取物;其中所述鲟鱼蛋白肽与所述纳豆粉的质量比例在1~1.5:1之间,所述鲟鱼蛋白肽与所述茯苓多糖的质量比例在1.8~2.2:1之间;所述归经包括脾经的中药提取物与茯苓多糖的质量比例在1.5~2.5:1之间;所述组合物中含有5000~10000IU/g纳豆激酶。
所述鲟鱼蛋白肽含有1.2~1.5mg/g的金属硫蛋白肽;所述鲟鱼蛋白肽按照如下方法制备:
1)将鲟鱼洗净、切成块状,然后绞碎,加入其重量1-3倍的水,升温至90℃以上保持10-20min,然后在2-2.5MPa的压力下进行汽爆处理3-5min;
2)步骤1)得到的物料冷却至60℃以下,加入盐酸溶液调pH至1.5-5,再加入鲟鱼质量0.2~0.3%的胃蛋白酶原进行酶解反应2至5小时;
3)步骤2)得到的物料加入碱溶液调节pH至7.5至8,再加入鲟鱼质量0.1~0.2%的胰蛋白酶进行酶解反应1至3小时;
4)步骤3)得到的物料升温至90℃以上保持10-20min,再冷却至65℃以下,进行脱色、脱盐、除菌过滤、滤液浓缩,最后经消毒干燥后即可得到蛋白肽粉体。
平均分子量在250Da以下。
所述纳豆粉为使用菌种Bacillus subtilis QK02枯草杆菌对黑豆进行发酵的制得的纳豆粉末,菌种Bacillus subtilis QK02由中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC NO:M203078,所述纳豆粉按照如下方法制备:
(1)Bacillus subtilis QK02种子液的培养:
种子液是由斜面菌株经摇瓶培养制备。培养条件为:以LB培养基为种子培养基,pH为7.2,三角瓶装液量为25mL/250mL,培养温度37℃,摇床转速为180r/min,培养周期为16h。
(2)原料预处理:
取籽粒饱满的黑豆进行除杂清洗后,每10kg加入30L营养液浸泡16h;将浸泡过的黑豆沥干液体后放入蒸煮设备中于0.1MPa、121℃蒸煮40min;所述营养液成分为:乳糖10g/L、胰蛋白胨20g/L、Na2HPO4·12H2O 5g/L、NaH2PO4·2H2O 1g/L、MgSO4·7H2O 0.5g/L、以及CaCl2 0.2g/L,调节pH7.2。
(3)固体发酵:
将蒸煮后的黑豆原料自然冷却至50℃后于无菌条件下按黑豆重量的10%接种Bacillus subtilis QK02种子液,然后于发酵设备中进行发酵,优选控制物料厚度为3cm,温度为37℃,湿度为75%,发酵时间为24h。
(4)冷冻干燥:
将固体发酵后的物料置于-80℃超低温冰箱中冻结,然后放入预冷的真空冷冻干燥机中,于真空度为10Pa,冷阱温度-50℃条件下干燥24h,粉碎得到纳豆粉。
所述茯苓多糖优选为取代度在0.69至0.73的羧甲基茯苓多糖,按照如下方法制备:
第一步:将干燥过的茯苓菌核进行粉碎过80或100目筛,得到粒度均匀的茯苓粉;
第二步:将第一步获得的茯苓粉以60Co-γ为辐照源,对其进行辐照,辐照剂量为9kGy~27kGy;
第三步:以辐照后的茯苓粉作为羧甲基化反应底物,加入乙醇溶液进行溶胀;所述乙醇溶液浓度为85%,溶胀料液比为酒精溶液与茯苓粉的料液比在5~7∶1之间。
第四步:溶胀后加入氢氧化钠进行碱化反应,反应结束后,冷却;碱化反应中所述的氢氧化钠加入的量为茯苓粉质量的0.3~0.4倍;加入氢氧化钠之后进行搅拌,碱化反应0.5~1h,反应温度为40~60℃;反应结束后,应进行冷却,冷却至温度10~30℃;
第五步:加入氯乙酸和过量的氢氧化钠与茯苓全粉进行羧甲基化反应,得到所述取代度在0.69至0.73的羧甲基茯苓多糖。具体地,羧甲基化反应中所述氯乙酸的加入量为茯苓粉质量的0.8~1.2倍,使茯苓粉和氯乙酸在过量的氢氧化钠下进行醚化反应3~4h,反应温度为50~70℃,反应完毕后,用冰乙酸调至pH至5.0~6.0,用体积分数80~90%的乙醇洗涤3~5次,除去多余氯离子,并洗至白色或淡黄色,在50℃温度条件下干燥。
所述归经包括脾经的中药提取物为火麻仁提取物、以及郁李仁提取物的一种或两种的组合,优选所述归经包括脾经的中药提取物为火麻仁提取物和郁李仁提取物按照质量比例1:0.8~1.2的组合。
所述火麻仁提取物为桑科植物大麻Cannabis sativa L.的干燥成熟种子的黄棕色粉末状提取物。
本发明提供的组合物中中华鲟鱼全鱼鱼粉能降低血液中低密脂蛋白含量,而纳豆粉中富含纳豆激酶,被证实具有溶解纤维蛋白、双向调节收缩压和舒张压的作用,理论上二者的组合物联合用药对于大部分心血管疾病的病理原因能起到抑制作用,包括动脉粥样硬化、血栓、调节血脂,因此有望开发为防止心血管疾病的药物。然而纳豆激酶在pH值较低的胃环境中迅速失活,而中华鲟全鱼鱼粉不经胃肠道消化则难以吸收,二者的组合难以起到联合用药的效果。如果将其分别独立给药,则由于消化吸收的不确定性,难以本发明提供的固定比例吸收,无法起到确切的联合用药的作用。
本发明中将中华鲟鱼全鱼粉水解与纳豆粉制成肠溶片,并证实其对于血液粘稠度、低密脂蛋白含量的调节效果明显优于二者单一使用。辅以茯苓多糖双向调节免疫反应,中华鲟鱼全鱼粉水解与纳豆粉效果发挥,同样需要采用溶解度好,亲水性强,容易直接由肠道吸收的羧甲基茯苓多糖。同时化用中医引药归经的原理,配合脾经药引进一步提高对于血液的药效。归经包括脾经的中药提取物,亦从多种归经包括脾经的中药提取物中,选择直接由肠道吸收率较高的火麻仁提取物和郁李仁提取物。
另一方面本发明提供的组合物,有效成分皆为药食同源的成分:中华鲟为大型经济鱼类,肉和卵都可食用,脂肪蛋白含量均高,鳔和脊索可制胶,鱼鳍和鱼唇也多胶质;纳豆由黄豆通过纳豆菌(枯草杆菌)发酵制成豆制品,具有黏性,气味较臭,味道微甜,不仅保有黄豆的营养价值、富含维生素K2、提高蛋白质的消化吸收率,长期以来被作为健康食品;羧甲基茯苓溶解度好,亲水性强具有良好的肠道吸收率,且被证明属于安全无毒级别,可用于食品,火麻仁提取物、以及郁李仁提取物皆为卫生部公布的既是药品又是食品(药食同源)目录中的有效成分,本发明提供的组合物在安全性方面,完全满足食品的安全性要求。以本发明提供的组合物为基础开发的食品“鲟纳茯精华片”可作为食品长期服用。
实验证实,本发明提供的组合物(商品名“鲟纳茯精华片(嫦娥II号)”)对于降低血液黏度效果明显,成分安全适合长期使用,因此能用于防治心血管疾病药物的制备,尤其是应用于溶血栓药物的制备,一方面对已经形成的血栓具备溶解作用,同时降低血栓形成风险;同时其具有明显降低血脂的作用,能用于降血脂药物的制备。
以下为实施例:
实施例中鲟鱼蛋白肽按照如下方法制备:
1)将鲟鱼洗净、切成块状,然后绞碎,加入其重量1-3倍的水,升温至90℃以上保持20min,然后在2.5MPa的压力下进行汽爆处理3min;
2)步骤1)得到的物料冷却至60℃以下,加入盐酸溶液调pH至1.5-5,再加入鲟鱼质量0.3%的胃蛋白酶原进行酶解反应5小时;
3)步骤2)得到的物料加入碱溶液调节pH至7.5至8,再加入鲟鱼质量0.1%的胰蛋白酶进行酶解反应2小时;
4)步骤3)得到的物料升温至90℃以上保持20min,再冷却至65℃以下,进行脱色、脱盐、除菌过滤、滤液浓缩,最后经消毒干燥后即可得到蛋白肽粉体。脱色剂采用活性炭和硅藻土按质量比2:1混合得到,脱色剂的加入量为鲟鱼质量的0.2-0.3%,脱色时间为30min,温度控制在60-70℃;采用枯草芽孢杆菌发酵进行脱腥处理;采用反渗透脱盐处理,所述反渗透脱盐处理参数:压力1MP,温度25℃,脱盐率70%,醋酸纤维素膜;再采用微滤膜进行除菌过滤;采用纳滤膜对滤液浓缩,最后经瞬时高温消毒和真空冷冻干燥后即可得到蛋白肽粉体。
所述鲟鱼蛋白肽,含有1.5mg/g的金属硫蛋白肽;委托北京中科光析化工技术研究所(食品实验室)进行多肽含量及分子量分布检测结果显示平均分子量为243。
实施例中纳豆粉按照如下方法制备:
(1)Bacillus subtilis QK02种子液的培养:
种子液是由斜面菌株经摇瓶培养制备。培养条件为:以LB培养基为种子培养基,pH为7.2,三角瓶装液量为25mL/250mL,培养温度37℃,摇床转速为180r/min,培养周期为16h。
(2)原料预处理:
取籽粒饱满的黑豆进行除杂清洗后,每10kg加入30L营养液浸泡16h;将浸泡过的黑豆沥干液体后放入蒸煮设备中于0.1MPa、121℃蒸煮40min;所述营养液成分为:乳糖10g/L、胰蛋白胨20g/L、Na2HPO4·12H2O 5g/L、NaH2PO4·2H2O 1g/L、MgSO4·7H2O 0.5g/L、以及CaCl2 0.2g/L,调节pH7.2。
(3)固体发酵:
将蒸煮后的黑豆原料自然冷却至50℃后于无菌条件下按黑豆重量的10%接种Bacillus subtilis QK02种子液,然后于发酵设备中进行发酵,优选控制物料厚度为3cm,温度为37℃,湿度为75%,发酵时间为24h。
(4)冷冻干燥:
将固体发酵后的物料置于-80℃超低温冰箱中冻结,然后放入预冷的真空冷冻干燥机中,于真空度为10Pa,冷阱温度-50℃条件下干燥24h,粉碎得到纳豆粉。
实施例中茯苓多糖照如下方法制备:
取1kg过100目筛的茯苓粉,以60Co-γ为辐照源辐照24h,加入5.0L85%乙醇在室温下搅拌溶胀30min,再加入0.3~0.5kg的氢氧化钠(用少量乙醇溶解)在50℃下搅拌碱化0.5~1.0h。碱化后,冷却反应体系至30℃以下,然后再加入0.3~0.5kg氢氧化钠(用少量乙醇溶解)和0.8~1.0kg氯乙酸,在50~70℃温度条件下醚化3.0h。反应完毕后,用体积分数80%的乙醇洗涤4次,除去多余氯离子。在40~50℃下干燥7~10h,过40目筛,得到羧甲基茯苓多糖粉。
羧甲基取代度测定:
D·S按照灰碱法测定,测定方法如下:将已充分干燥后的改性产品连同瓷埚锅放进高温炉,700±25℃灼烧30min,冷却后先用少量水润湿含有焦粒的灰白粉末,然后洗移至烧杯中(总量不超150mL),加入甲基红指示剂3滴,用0.05mol/L H2SO4滴到显红色后,再从滴定管放入10mL,记下H2SO4总用量a,将溶液放在电炉上加热,使之轻轻沸腾10min,不必冷却,即用0.1mol/L的NaOH溶液滴定至变黄色为止,记下其用量b。计算公式:
取代度(D·S)=0.162B/(l-0.08B)
B=(a*Nl-b*N2)/W
a一硫酸标准溶液用量(mL)
b一氢氧化钠标准溶液用量(mL)
Nl一硫酸标准溶液当量浓度(0.05mol/L)
N2一氢氧化钠标准溶液当量浓度(0.l mol/L)
W一样品重量(g)
本发明制备的CMP的取代度(D·S)=0.6902
实施例中火麻仁提取物可以通过市售购买获得,也可以采用本领域熟知的提取方法提取获得,所述的提取方法例如是浸泡提取、加热提取、回流提取、超声提取、逆流提取、超临界萃取中的一种或两种以上的组合。
实施例中郁李仁提取物可以通过市售购买获得,也可以采用本领域熟知的提取方法提取获得,所述的提取方法例如是浸泡提取、加热提取、回流提取、超声提取、逆流提取、超临界萃取中的一种或两种以上的组合。
实施例提供的组合物成分配比如下表:
实施例6
取实施例1至5、实施例制备的鲟鱼蛋白肽、纳豆粉、以及相应实施例比例的蛋白肽、纳豆粉的混合物分别装入专用肠溶小胶囊,胶囊载药0.1g,获得试验制剂;对照组小胶囊罐装0.1g麦芽糊精。
取120只wistar大鼠,随机分成12组,每组10只;每日给药2次,每次1颗小胶囊,连续7日。给药后第8天,将大鼠以3.5%水合氯醛进行腹腔麻醉(1ml/100g),手术分离双侧颈总动脉。在双侧颈总动脉下各垫一条1.2cm×3.0cm的塑料薄片,用浸渍有50μl FeCl3溶液(10%,w/w)的滤纸条(1.0cm×1.5cm)覆盖双侧颈总动脉。20min后取下滤纸条,剪下变色区域并用生理盐水洗净,滤纸吸干水分后测量其长度,并用分析天平精密称重。
单位长度血栓的重量记为相对栓重(mg/cm),并以下述公式计算抗栓率(%)。
抗栓率%=(W对照-W给药)/W对照×100%
其中,W对照为对照组平均相对栓重;W给药为给药组平均相对栓重。
按上式计算抗栓率,并对结果进行统计学分析,结果见表1;
表1给药组抗栓率结果
结果显示:实施例1至5的组合物能辅助纳豆激酶发挥溶血栓效果,与纳豆粉高剂量添加的效果的溶血栓效果相当,实施例5的组合物溶血栓效果甚至超过纯纳豆粉,然而在没有添加茯苓多糖、火麻仁提取物、以及郁李仁提取物时,仅使用鲟鱼蛋白肽和纳豆粉的组合其溶血栓效果低于纳豆粉。
实施例7对大鼠体内动脉血栓形成的影响实验
取wistar大鼠120只,体重在180~220g,雌雄各半,将其随机分为12组,每组10只,雌雄各5只;每日给药2次,每次1颗小胶囊,连续7日。末次给药后30分钟,将大鼠用20%乌拉但麻醉,剥离大鼠颈总动脉,在远心端进行动脉插管用四道生理记录仪加测血压,在近心端用45%的FeCL3溶液浸泡的0.5cm宽的滤纸条包裹动脉,记录从包裹到血压降为0时的时间为动脉血栓形成时间,记录数据,各组进行组间t检验统计分析。结果见表2。
表2给药组对大鼠内动脉血栓形成的影响
组别 | 动脉血栓形成时间(min) |
对照组 | 10.55±1.54 |
实施例1 | 16.34±2.03 |
实施例2 | 15.55±3.42 |
实施例3 | 17.55±1.68 |
实施例4 | 17.30±1.33 |
实施例5 | 18.55±1.32 |
鲟鱼蛋白肽:纳豆粉=1:1(实施例1、4) | 14.32±1.87 |
鲟鱼蛋白肽:纳豆粉=1.2:1(实施例2) | 14.80±1.22 |
鲟鱼蛋白肽:纳豆粉=1.5:1(实施例3) | 14.87±1.77 |
鲟鱼蛋白肽:纳豆粉=1.4:1(实施例5) | 14.94±1.68 |
鲟鱼蛋白肽 | 16.55±1.48 |
纳豆粉 | 15.04±1.69 |
实验组中均表现出明显的延长血栓形成的时间,鲟鱼蛋白肽的效果优于纳豆粉单独使用,鲟鱼蛋白肽和纳豆粉的组合使用相对于单独使用均略次于单独使用,采用羧甲基茯苓多糖和火麻仁提取物、郁李仁提取物复配后,延长血栓形成时间的效果的饿到了显著提升。
实施例7
取实施例1至5、实施例制备的鲟鱼蛋白肽、纳豆粉、以及相应实施例比例的蛋白肽、纳豆粉的混合物分别装入专用肠溶小胶囊,胶囊载药0.1g,获得试验制剂;对照组小胶囊罐装0.1g麦芽糊精;阳性对照组小胶囊装入含有2.5mg阿托伐他汀钙的麦芽糊精。
取wistar大鼠140只,体重在180~220g,雌雄各半,适应性喂养1周后将其随机分为14组,每组10只,雌雄各5只;取1组喂以标准饲料,作为正常对照组;其他组喂以高脂饲料(2%胆固醇,0.5%胆酸钠,3%猪油,0.2%丙基硫氧嘧啶,94.3%基础粉末饲料)。
喂养两周后,正常对照组不施加干预因素,其他13组,每日给药2次,每次1颗小胶囊,连续7日。最后一次给药前天禁食,末次给药后30分钟,收集血液,离心去血清,测量血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,如表3。
表3给药组对大鼠血脂的影响
与单独使用阿伐他汀钙相比,本发明提供的组合物均有相当的降低TC、TG的效果,对于LDL-C的降低效果优于阳性对照组。联合使用鲟鱼蛋白肽或纳豆粉亦有明显的降血脂效果,单独使用时,效果减弱。
实施例8
按照质量份数,将实施例5中的组合物100份与0.5麦芽糊精、0.5份木糖醇、0.3份硬脂酸镁压制成片,每片0.5g,包裹肠溶包衣,制得商品名为“鲟纳茯精华片”的保健食品。肠溶包衣材料:苯二甲酸醋酸纤维素8.0g,聚对苯二甲酸乙二醇酯2.4ml,乙酸乙酯33.0ml和乙酸异丙酯33.6ml,在氮气保护下至少用1层。
人群实验:
采用“鲟纳茯精华片”,一日2次,每次2片,两周为一疗程。选择高血脂并发动脉粥样硬化的病患150例,2个疗程后显效136例,有效12例,无效2例。显效率为90.6%,有效率为98.7%,无效率1.3%。
本领域的技术人员容易理解,以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种组合物,其特征在于,包括鲟鱼蛋白肽、纳豆粉、茯苓多糖、以及归经包括脾经的中药提取物;其中所述鲟鱼蛋白肽与所述纳豆粉的质量比例在1~1.5:1之间,所述鲟鱼蛋白肽与所述茯苓多糖的质量比例在1.8~2.2:1之间;所述归经包括脾经的中药提取物与茯苓多糖的质量比例在1.5~2.5:1之间;所述组合物中含有5000~10000IU/g纳豆激酶。
2.如权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述鲟鱼蛋白肽含有1.2~1.5mg/g的金属硫蛋白肽。
3.如权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述鲟鱼蛋白肽按照如下方法制备:
1)将鲟鱼洗净、切成块状,然后绞碎,加入其重量1-3倍的水,升温至90℃以上保持10-20min,然后在2-2.5MPa的压力下进行汽爆处理3-5min;
2)步骤1)得到的物料冷却至60℃以下,加入盐酸溶液调pH至1.5-5,再加入鲟鱼质量0.2~0.3%的胃蛋白酶原进行酶解反应2至5小时;
3)步骤2)得到的物料加入碱溶液调节pH至7.5至8,再加入鲟鱼质量0.1~0.2%的胰蛋白酶进行酶解反应1至3小时;
3)步骤2)得到的物料升温至90℃以上保持10-20min,再冷却至65℃以下,进行脱色、脱盐、除菌过滤、滤液浓缩,最后经消毒干燥后即可得到蛋白肽粉体;
其平均分子量在250Da以下。
4.如权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述纳豆粉其发酵制备过程使用菌种Bacillus subtilis QK02,由中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC NO:M203078。
5.如权利要求4所述的组合物,其特征在于,所述纳豆粉为采用枯草杆菌对黑豆进行发酵的制得的纳豆粉末。
6.如权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述归经包括脾经的中药提取物为火麻仁提取物、以及郁李仁提取物的一种或两种的组合,优选所述归经包括脾经的中药提取物为火麻仁提取物和郁李仁提取物按照质量比例1:0.8~1.2的组合。
7.如权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述茯苓多糖为取代度在0.69至0.73的羧甲基茯苓多糖。
8.如权利要求1至7任意一项所述的组合物的应用,其特征在于,应用于防治心血管疾病药物的制备。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,应用于溶血栓药物的制备。
10.如权利要求8所述的应用,其特征在于,应用于降脂药物的制备。
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