CN110330541A - 一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法 - Google Patents
一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种对5′‑鸟嘌呤核苷酸和5′‑胞嘧啶核苷酸的分离方法，涉及超高交联吸附树脂对5′‑鸟嘌呤核苷酸和5′‑胞嘧啶核苷酸的分离技术领域，为解决目前CMP和GMP的分离均采用离子交换法，存在酸碱消耗量大、分离所得产品需要脱盐处理的问题。首先通过不同溶液pH条件下CMP和GMP在超高交联吸附树脂上的吸附平衡实验，选取2.0作为后续固定床分离的上样pH，pH2.0的盐酸作为CMP的洗脱剂，去离子水作为GMP的洗脱剂。然后将CMP和GMP的混合液通入到超高交联吸附树脂固定床中进行吸附，固定床高径比为10:1～25:1，上样量为1mg/g树脂～20mg/g树脂。进而进行CMP和GMP的洗脱，洗脱流速为0.5BV/h～3BV/h，在固定床出口处分别收集CMP和GMP。
Description
技术领域
本发明涉及超高交联吸附树脂对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸分离技术领域，具体为一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法。
背景技术
5′-核糖核苷酸(包括5′-腺嘌呤核苷酸(AMP)、5′-鸟嘌呤核苷酸(GMP)、5′-胞嘧啶核苷酸(CMP)和5′-尿嘧啶核苷酸(UMP)四种)可以用作增鲜剂、奶粉添加剂、医药中间体和植物生长调节剂等，已经被广泛地应用于食品、医药和农业等领域。目前工业上常用的5′-核糖核苷酸制备方法是RNA酶解法。RNA酶解所获得的四种5′-核糖核苷酸的混合物较多采用强酸性阳离子交换树脂进行分离，该过程中UMP和AMP可以较好地分离，但是CMP和GMP分离难度大，较难实现一步完全分离，导致分离过程上样量小、分离效率低。1993年福州大学谢宪章等人首先用732型强酸性阳离子交换树脂从四种5′-核糖核苷酸中分离出了AMP和UMP，然后用717型强碱性阴离子交换树脂分离了GMP和CMP，GMP的洗脱要采用3％氯化钠水溶液作为洗脱剂，而且阴离子交换树脂要采用大量强酸和强碱进行再生(谢宪章，林志强，杨培钦.酵母RNA酶解液中核苷酸分离技术研究.氨基酸杂质.1993)。2007年，河北科技大学杨翠竹等人采用一根732型阳离子交换树脂柱分离了四种5′-核糖核苷酸，但是未能实现GMP和CMP的分离，然后采用一种阴离子交换树脂对GMP和CMP进行了分离(杨翠竹.5′-核苷酸制备工艺的优化.石家庄：河北科技大学.2007)。2018年，南通秋之友生物科技有限公司邱蔚然等人采用阴离子交换树脂分离了通过一种阳离子交换树脂后的CMP和GMP的混合物，虽然所得产品的浓度较高，但是要采用氯化钠浓度梯度洗脱的方式，所得产品中含盐量较高，后续要进行脱盐处理，而且也要消耗大量强酸和强碱对阴离子交换树脂进行再生(中国专利公开号：CN 108752405 A)。
综上所述，目前CMP和GMP的分离均采用离子交换法，存在酸碱消耗量大、分离所得产品需要脱盐处理的问题；因此，不满足现有的需求，对此我们提出了一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法。
本发明内容
本发明的目的在于提供一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，以解决上述背景技术中提出的目前CMP和GMP的分离均采用离子交换法，存在酸碱消耗量大、分离所得产品需要脱盐处理的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，包括以下步骤：
步骤1：在不同溶液pH条件下进行CMP和GMP在超高交联吸附树脂上的吸附平衡实验；
步骤2：选取2.0作为后续固定床分离的上样pH，pH2.0的盐酸作为CMP的洗脱剂，去离子水作为GMP的洗脱剂；
步骤3：将CMP和GMP的混合液通入到超高交联吸附树脂固定床中进行吸附，固定床高径比为10:1～25:1，上样量为1mg/g树脂～20mg/g树脂；
步骤4：进行CMP和GMP的洗脱。
优选的，所述步骤1中CMP和GMP浓度检测的步骤具体为：
步骤1-1：配制好的缓冲液以及去离子水用孔径0.22μm的水系微孔滤膜过滤，甲醇用孔径0.45μm的尼龙微孔滤膜过滤，过滤后进行超声处理30min。打开高效液相色谱仪，采用100％的甲醇，以1ml/min的流速冲洗色谱柱20min；待泵压力稳定后，换成甲醇3％，去离子水97％，总流速为1ml/min，冲洗色谱柱20min，压力稳定后，再换成去离子水100％，总流速为1ml/min，冲洗色谱柱20min，压力稳定后，再换成流动相C100％进行色谱柱平衡，同时打开可变波长检测器，开始采集基线，待基线趋于水平线时，平衡结束；
步骤1-2：按照检测条件编写分析程序以及进样序列，将预处理后的标准品以及样品按照进样序列放置在自动进样器的相应位置上，开始进样并收集图谱信息，根据峰面积计算样品的浓度。
优选的，所述步骤2中固定床分离过程中pH的选择具体步骤为：
采用静态吸附平衡实验法分别研究溶液pH对CMP和GMP在弱极性超高交联吸附树脂上的吸附量的影响，初步选出后续固定床分离过程中的上样pH和洗脱剂。
优选的，所述步骤3中CMP和GMP混合溶液的获得方法具体为：
步骤3-1：采用核酸酶P1对酵母RNA溶液进行水解，获得四种5′-核糖核苷酸的混合物；
步骤3-2：将RNA酶解液通入到一种弱极性超高交联吸附树脂固定床中进行色素脱除；
步骤3-3：将脱色后的酶解液采用一种强酸性阳离子交换树脂进行分离，收集其中的CMP和GMP混合组分，即为本发明中所用的CMP和GMP混合溶液。
优选的，所述步骤4中进行CMP和GMP的洗脱具体步骤为：
首先用pH为2的盐酸作为洗脱剂进行洗脱，待CMP接近完全流出时，换成去离子水进行洗脱。洗脱流速为0.5～3BV/h，柱温控制为25℃。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本发明通过将弱极性超高交联吸附树脂应用于CMP和GMP的分离，对CMP和GMP的分离效果好，不需要采用盐对CMP和GMP进行洗脱，也不需要大量的强酸和强碱对树脂进行再生，可大大降低酸碱的消耗量，同时可以提高上一步四种5′-核糖核苷酸分离过程的上样量，提高分离效率。
2、本发明中所使用的弱极性超高交联吸附树脂不仅可以用于5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离过程，还可以应用于其他带有疏水基团的小分子两性化合物如氨基酸、对氨基酸苯甲酸等的分离。
附图说明
图1为本发明的溶液pH对CMP和GMP在树脂XDA-1上的吸附率的影响图；
图2为本发明的CMP和GMP的固定床分离过程洗脱曲线图；
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
请参阅图1，本发明提供的一种实施例：一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，包括以下实施例：
实施例1：溶液pH对CMP和GMP在超高交联吸附树脂XDA-1上的吸附平衡行为研究；
(1)CMP的吸附平衡行为：
配制浓度为2g/L的CMP溶液500ml，作为原液，分别取原液25ml放于100ml三角瓶中，调节至不同的pH，然后加入2g树脂，在25℃摇床中150rpm条件下震荡4h以上以达到吸附平衡，测定吸附平衡后溶液pH，并取样用水稀释一定倍数测定CMP的浓度，采用公式计算不同溶液pH条件下的CMP的吸附量，公式中qe为平衡吸附量(mg/g)，c0和ce分别为溶液中CMP的初始和吸附平衡浓度(g/L)，V为溶液体积(ml)，m为树脂的质量(g)，采用公式计算不同pH条件下CMP的吸附率，公式中f为吸附率；
(2)GMP的吸附平衡行为：
配制浓度为2g/L的GMP溶液500ml，作为原液,分别取25ml放于100ml三角瓶中，调节至不同溶液pH，然后均加入2g树脂，采用上述步骤测定不同溶液pH条件下GMP在树脂XDA-1上的吸附量和吸附率；不同溶液pH条件下CMP和GMP在树脂XDA-1上的吸附率如图1所示，根据CMP和GMP吸附率的差异，选取pH2.0作为后续固定床的上样pH，选取pH2.0的盐酸为CMP的洗脱剂，去离子水作为GMP的洗脱剂。
实施例2：CMP和GMP的固定床分离过程。
(1)混合溶液的获得
将酵母RNA粉末配制成pH为5.5、质量分数为6％的RNA溶液，加入核酸酶P1溶液，在70℃条件下水解3h 50min，4000rpm离心10min，并抽滤获得四种5′-核糖核苷酸的混合物，然后将该混合物通入到超高交联吸附树脂XDA-200固定床中进行脱色，处理量为11BV。将脱色后的酶解液通入到732型强酸性阳离子交换树脂固定床中进行四种5′-核糖核苷酸的分离，上样量为0.06mg5′-核糖核苷酸/g树脂，采用去离子水进行洗脱，收集其中CMP和GMP的混合液，用盐酸将溶液pH调节至2.0，作为上柱分离的原料液备用。
(2)装柱
将预处理好的吸附树脂XDA-1采用湿法装柱法装入到层析柱中，树脂装填量为14.5g，层析柱内径为1cm，高径比为21，柱温控制为25℃。
(3)层析柱的平衡
将pH为2的盐酸溶液从层析柱上端通入到层析柱中，冲洗层析柱，在柱出口处用pH计测定流出液pH，直到pH接近2，平衡结束。
(4)上样和洗脱
将树脂上端的液体流出至接近树脂面，然后将CMP和GMP混合溶液沿层析柱壁缓慢加入到层析柱中，上样量为1.1mg/g树脂。然后开泵将树脂上液面下降至接近树脂面，再沿壁缓慢加入pH为2的盐酸溶液至液面高度为1.5cm左右，然后开始用pH为2的盐酸溶液进行洗脱，流速为1BV/h，并在层析柱出口处每隔10min收集一个样品。用高效液相色谱仪分析样品浓度。待CMP接近洗脱完全时，换用去离子水进行GMP的洗脱。
实施例3：CMP和GMP的固定床分离过程。
(1)混合溶液的获得
将酵母RNA粉末配制成pH为5.5、质量分数为6％的RNA溶液，加入核酸酶P1溶液，在70℃条件下水解3h 50min，4000rpm离心10min，并抽滤获得四种5′-核糖核苷酸的混合物，然后将该混合物通入到超高交联吸附树脂XDA-200固定床中进行脱色，处理量为11BV。将脱色后的酶解液通入到732型强酸性阳离子交换树脂固定床中进行四种5′-核糖核苷酸的分离，上样量为0.06mg5′-核糖核苷酸/g树脂，采用去离子水进行洗脱，收集其中CMP和GMP的混合液，用盐酸将溶液pH调节至2.0，作为上柱分离的原料液备用。
(2)装柱
将预处理好的吸附树脂XDA-1采用湿法装柱法装入到层析柱中，树脂装填量为14.5g，层析柱内径为1cm，高径比为21，柱温控制为25℃。
(3)层析柱的平衡
将pH为2的盐酸从层析柱上端通入到层析柱中，冲洗层析柱，在柱出口处用pH计测定流出液pH，直到pH接近2，平衡结束。
(4)上样和洗脱
将树脂上端的液体流出至接近树脂面，然后将CMP和GMP混合溶液沿层析柱壁缓慢加入到层析柱中，上样量为2mg/g树脂。然后开泵将树脂上液面下降至接近树脂面，再沿壁缓慢加入pH为2的盐酸溶液至液面高度为1.5cm左右，然后开始用pH为2的盐酸溶液进行洗脱，流速为1BV/h，并在层析柱出口处每隔10min收集一个样品。用高效液相色谱仪分析样品浓度。待CMP接近洗脱完全时，换用去离子水进行GMP的洗脱。CMP和GMP的洗脱曲线如图2所示。CMP和GMP产品的纯度均高于98％，收率均高于95％。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
Claims (5)
1.一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1：在不同溶液pH条件下进行CMP和GMP在超高交联吸附树脂上的吸附平衡实验；
步骤2：选取2.0作为后续固定床分离的上样pH，pH2.0的盐酸作为CMP的洗脱剂，去离子水作为GMP的洗脱剂；
步骤3：将CMP和GMP的混合液通入到超高交联吸附树脂固定床中进行吸附，固定床高径比为10:1～25:1，上样量为1mg/g树脂～20mg/g树脂；
步骤4：进行CMP和GMP的洗脱。
2.根据权利要求1所述的一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，其特征在于：所述步骤1中CMP和GMP浓度检测的步骤具体为：
步骤1-1：配制好的缓冲液以及去离子水用孔径0.22μm的水系微孔滤膜过滤，甲醇用孔径0.45μm的尼龙微孔滤膜过滤，过滤后进行超声处理30min，打开高效液相色谱仪，采用100％的甲醇，以1ml/min的流速冲洗色谱柱20min；待泵压力稳定后，换成甲醇3％，去离子水97％，总流速为1ml/min，冲洗色谱柱20min，压力稳定后，再换成去离子水100％，总流速为1ml/min，冲洗色谱柱20min，压力稳定后，再换成流动相C100％进行色谱柱平衡，同时打开可变波长检测器，开始采集基线，待基线趋于水平线时，平衡结束；
步骤1-2：按照检测条件编写分析程序以及进样序列，将预处理后的标准品以及样品按照进样序列放置在自动进样器的相应位置上，开始进样并收集图谱信息，根据峰面积计算样品的浓度。
3.根据权利要求1所述的一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，其特征在于：所述步骤2中固定床分离过程中pH的选择具体步骤为，采用静态吸附平衡实验法分别研究溶液pH对CMP和GMP在弱极性超高交联吸附树脂上的吸附量的影响，初步选出后续固定床分离过程中的上样pH和洗脱剂。
4.根据权利要求1所述的一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，其特征在于：所述步骤3中CMP和GMP混合溶液的获得方法具体为：
步骤3-1：采用核酸酶P1对酵母RNA溶液进行水解，获得四种5′-核糖核苷酸的混合物；
步骤3-2：将RNA酶解液通入到一种弱极性超高交联吸附树脂固定床中进行色素脱除；
步骤3-3：将脱色后的酶解液采用一种强酸性阳离子交换树脂进行分离，收集其中的CMP和GMP混合组分，即为本发明中所用的CMP和GMP混合溶液。
5.根据权利要求1所述的一种对5′-鸟嘌呤核苷酸和5′-胞嘧啶核苷酸的分离方法，其特征在于：所述步骤4中进行CMP和GMP的洗脱具体步骤为，首先用pH为2的盐酸作为洗脱剂进行洗脱，待CMP接近完全流出时，换成去离子水进行洗脱。洗脱流速为0.5～3BV/h，柱温控制为25℃。
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Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103254333A (zh) * | 2013-05-21 | 2013-08-21 | 南京工业大学 | 超高交联树脂sx-01及其应用 |
| CN103304490A (zh) * | 2013-06-18 | 2013-09-18 | 聊城大学 | 一种从瓜蒌皮中分离纯化5种嘌呤及嘧啶碱基的方法 |
| CN103331035A (zh) * | 2013-06-28 | 2013-10-02 | 南京工业大学 | 一种对核苷酸酶解液进行脱色的方法 |
| WO2015143638A1 (zh) * | 2014-03-26 | 2015-10-01 | 南京工业大学 | 核苷酸的生产工艺 |
-
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103254333A (zh) * | 2013-05-21 | 2013-08-21 | 南京工业大学 | 超高交联树脂sx-01及其应用 |
| CN103304490A (zh) * | 2013-06-18 | 2013-09-18 | 聊城大学 | 一种从瓜蒌皮中分离纯化5种嘌呤及嘧啶碱基的方法 |
| CN103331035A (zh) * | 2013-06-28 | 2013-10-02 | 南京工业大学 | 一种对核苷酸酶解液进行脱色的方法 |
| WO2015143638A1 (zh) * | 2014-03-26 | 2015-10-01 | 南京工业大学 | 核苷酸的生产工艺 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| JIAO PF ET AL: "Combined ion exchange and adsorption", 《JOURNAL OF CHEMICAL TECHNOLOGY AND BIOTECHNOLOGY》 * |
| 周文晓 等: "核酸水解液中4种单核苷酸分离的研究", 《中国酿造》 * |
| 王传喜 等: "链霉菌FIM-080014产生的核苷类代谢产物研究", 《天然产物研究与开发》 * |
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