CN110280777B - 一种多肽序列合成荧光金纳米簇的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种多肽序列合成荧光金纳米簇的方法，涉及金纳米簇合成技术领域，其包括以下步骤：S1、金纳米簇制备：将20mM浓度的HAuCl4的水溶液8μL加入到浓度为1.06mM的CMMMMM多肽的188μL的溶液中，剧烈震荡，然后在30s内加入浓度为0.5M的NaOH的溶液4μL。该合成荧光金纳米簇的新型有效的多肽序列的方法，合成了荧光稳定且量子产率较高的金纳米簇，与传统CYYYYY序列合成金纳米簇相比，在连续紫外光照射60分钟后，基于CMMMMM序列合成的金纳米簇的荧光仍能保持在初始强度的90%以上，解决了传统多肽CYYYYY序列合成的金纳米簇易光漂白以及荧光不稳定且量产率低的问题。
Description
技术领域
本发明涉及金纳米簇合成技术领域，具体为一种多肽序列合成荧光金纳米簇的方法。
背景技术
超小型和生物相容性金纳米团簇被认为是生物传感和生物成像等光学和生物应用最有前景的候选材料之一。近年来，研究人员利用DNA、树枝状分子、蛋白质和多肽等多种分子多为模板设计并合成了生物相容性较好的金纳米簇。其中，多肽具有独特的序列特异性自组装特性和三维结构，被认为是合成金纳米簇的有效生物模板。
目前，基于C和Y的多肽序列是最常用的多肽用于合成金纳米簇，其中半胱氨酸（C）作为固定端，酪氨酸（Y）作为还原端。但是，在实际应用中仍然存在一些不能忽视的缺点，如光漂白和相对较低的量子产率。因此，设计更有效的多肽序列用来合成荧光稳定和较高量子产率的金纳米簇仍然具有重要意义。
发明内容
（一）解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种多肽序列合成荧光金纳米簇的方法，解决了传统多肽CYYYYY序列合成的金纳米簇易光漂白以及荧光不稳定且量产率低的问题。
（二）技术方案
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种多肽序列合成荧光金纳米簇的方法，包括以下步骤：
S1、金纳米簇制备：将20mM浓度的HAuCl4的水溶液8μL加入到浓度为1.06mM 的CMMMMM多肽的188μL的溶液中，剧烈震荡，然后在30s内加入浓度为0.5M 的NaOH的溶液4μL，将上述混合溶液放置在黑暗恒温箱中37℃孵育12h，即得到荧光稳定的金纳米簇。
S2、以不同还原端的氨基酸序列为模板合成的金纳米簇的荧光对比，得出，以CMMMMM序列为模板合成的金纳米簇荧光强度最强。
S3、紫外光照射对比，连续紫外光照射60分钟后，基于CMMMMM序列合成的金纳米簇的荧光仍能保持在初始强度的90%以上，而基于CYYYYY序列合成的金纳米簇的荧光不足初始强度的30%。
所述CYYYYY为半胱氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸，所述CMMMMM为半胱氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸。
（三）有益效果
本发明提供了一种多肽序列合成荧光金纳米簇的方法，与现有技术相比，本发明的有益效果是：该合成荧光金纳米簇的新型有效的多肽序列的方法，合成了荧光稳定且量子产率较高的金纳米簇，与传统CYYYYY序列合成金纳米簇相比，在连续紫外光照射60分钟后，基于CMMMMM序列合成的金纳米簇的荧光仍能保持在初始强度的90%以上，解决了传统多肽CYYYYY序列合成的金纳米簇易光漂白以及荧光不稳定且量产率低的问题，本专利所使用的方法相对传统方法有着明显的优势。
附图说明
图1为本发明中以不同还原端的氨基酸序列为模板合成的金纳米簇的荧光对比图；
图2为本发明中CMMMMM序列和传统CYYYYY序列合成的金纳米簇在紫外灯下连续照射的荧光对比图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
如图1-2所示，本发明提供一种技术方案：一种多肽序列合成荧光金纳米簇的方法，包括以下步骤：
S1、金纳米簇制备：将20mM浓度的HAuCl4的水溶液8μL加入到浓度为1.06mM 的CMMMMM多肽的188μL的溶液中，剧烈震荡，然后在30s内加入浓度为0.5M 的NaOH的溶液4μL，将上述混合溶液放置在黑暗恒温箱中37℃孵育12h，即得到荧光稳定的金纳米簇。
S2、以不同还原端的氨基酸序列为模板合成的金纳米簇的荧光对比，得出，以CMMMMM序列为模板合成的金纳米簇荧光强度最强，可见图1，其中图中最上方的线条为以CMMMMM序列为模板合成，其中Intensity的含义为光强度，Wavelength的含义为波长，其中1-17内字母为氨基酸的单字母缩写组合。
S3、紫外光照射对比，连续紫外光照射60分钟后，基于CMMMMM序列合成的金纳米簇的荧光仍能保持在初始强度的90%以上，而基于CYYYYY序列合成的金纳米簇的荧光不足初始强度的30%，可见图2，图中上方曲线为CMMMMM相关曲线，其中，Normalized emission为散发强度， CYYYYY为半胱氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸，CMMMMM为半胱氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (1)
1.一种多肽序列合成荧光金纳米簇的方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、金纳米簇制备：将20mM浓度的HAuCl4的水溶液8μL加入到浓度为1.06mM 的CMMMMM多肽的188μL的溶液中，剧烈震荡，然后在30s内加入浓度为0.5M 的NaOH的溶液4μL，将上述混合溶液放置在黑暗恒温箱中37℃孵育12h，即得到荧光稳定的金纳米簇；
S2、以不同还原端的氨基酸序列为模板合成的金纳米簇的荧光对比，得出，以CMMMMM序列为模板合成的金纳米簇荧光强度最强；
S3、紫外光照射对比，连续紫外光照射60分钟后，基于CMMMMM序列合成的金纳米簇的荧光仍能保持在初始强度的90%以上，而基于CYYYYY序列合成的金纳米簇的荧光不足初始强度的30%；
所述CYYYYY为半胱氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸-酪氨酸，所述CMMMMM为半胱氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸-甲硫氨酸。
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| 荧光金纳米簇的合成及其传感成像应用最新进展;徐升豪 等;《青岛科技大学学报》;20150831;第36卷(第4期);第355-361页 * |
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