CN110251665A - 枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用，所述枯草杆菌纤溶酶由枯草杆菌Bacillus subtilis QK02菌种发酵制得，该菌种己保存于国家典型培养物保藏中心，菌种编号为CCTCCNO：M203078；本发明的枯草杆菌纤溶酶可单独用药溶解已有血栓，并且预防血栓复发。

Description

枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用

技术领域

本发明涉及深静脉血栓治疗领域。更具体地说，本发明涉及一种枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物方面的应用。

背景技术

血栓栓塞性疾病越来越成为全球的重大健康问题，成为导致全球人口死亡原因的第一位，其包括静脉血栓和动脉血栓栓塞性疾病。动脉血栓性疾病包括冠状动脉综合征和脑卒中等；静脉血栓栓塞性疾病主要包括深静脉血栓栓塞症和肺血栓栓塞症，深静脉血栓栓塞症中发生于下肢的占到90％以上，因此深静脉血栓栓塞症一般也指下肢深静脉血栓栓塞症；深静脉血栓(DVT)是血液在深静脉内不正常凝结引起的静脉回流障碍性疾病，常发生于下肢，是继脑卒中和冠心病之后的第三大血栓性疾病。引起深静脉血栓的主要原因是静脉壁损伤、血流缓慢和血液高凝状态。并且DVT患者血栓容易脱落引起非常严重的肺栓塞(PE)。危险因素包括原发性因素和继发性因素。传统DVT的治疗方法主要有以下几种：

1、抗凝治疗

抗凝是DVT的基本治疗，也是标准治疗，可抑制血栓蔓延、降低PE的发生率和死亡率。但是，单纯抗凝治疗并不能有效消除血栓、降低PTS发生率。抗凝药物有普通肝素、低分子肝素、维生素K拮抗剂和新型口服抗凝剂。

(1)肝素：肝素分为普通肝素和低分子肝素，主要通过抑制凝血酶的作用阻碍血栓的再生。普通肝素一般为静脉持续给药，剂量个体差异较大，使用时必须监测凝血功能，可引起血小板减少症(HIT)。HIT诊断一旦成立，应立即停用。低分子肝素一般为皮下注射用药，HIT发生率低于普通肝素，肾功能不全者慎用。而肝素作为肠外给药一般应用在急性DVT的急性期阶段(一般为7天内)。

(2)华法林：是一种维生素K拮抗剂，是长期抗凝的主要口服药物，效果评估需要监测凝血功能的国际标准化值(INR)。主要问题是治疗剂量范围窄，个体差异大，药效易受到多种食物和药物影响。

(3)利伐沙班：是一种新型的口服抗凝药物，ⅡXα因子抑制剂。利伐沙班作为进口药物，已经被我国药监局批准用于DVT的预防和治疗。研究证明利伐沙班单药治疗与低分子肝素和华法林合用标准治疗的疗效相当。轻度的肾功能不全的患者液可以正常使用。主要问题是价格昂贵。

(4)阿加曲班：Ⅱα因子抑制剂，静脉用药，分子量小，能进入血栓内部，对凝血酶的抑制能力强于肝素，主要应用于急性期治疗。

2、溶栓治疗

溶栓疗法分为系统性溶栓和导管接触性溶栓(CDT)，系统性溶栓是经过外周静脉全身应用溶栓药。CDT是将导管置于静脉血管内，溶栓药物直接作用于血栓，较系统性溶栓可显著提高溶栓效率治疗时间短，并发症少，为临床首选的溶栓疗法。临床上应用最广的DVT溶栓药物为尿激酶，但是溶栓剂量至今无统一标准，常见的不良反应为出血。其次重组链激酶和阿替普酶也可应用于DVT的溶栓治疗。重组链激酶的溶栓效果较好，但过敏反应多，出血发生率高。阿替普酶溶栓效果较好，出血发生率低，但是价格昂贵。

溶栓疗法主要适应症为急性近端DVT(髂、股、腘静脉)，一般为14天以内，且出血风险较小。预期寿命大于1年，全身情况较好的患者。溶栓疗法的禁忌症很多，包括溶栓药物过敏、近期活动性出血、近期手术、近期严重外伤、严重高血压、严重肝肾功能不全、细菌性内膜炎、脑卒中病史、动脉瘤患者、主动脉夹层患者、动静脉畸形患者等，年龄大于75岁的患和妊娠者慎用。

3、血栓清除术

经皮机械性血栓清除术(PMT)，主要是采用旋转涡轮和流体动力学的原理打碎或抽吸血栓，从而达到快速清除或减少血栓负荷。临床证明，与CTD联合使用能较少溶栓药剂量，缩短住院时间。但是PMT应用于急性期的中央型DVT(14天内)。

综上，DVT标准治疗为抗凝治疗，而肝素和阿加曲班作为肠胃外用药一般应用于急性DVT(14天内)的起始治疗，需要联合肠内抗凝药使用。DVT的亚急性期(15-30天)和长期(大于1月)治疗仍以口服抗凝药为主。溶栓疗法和PMT主要应用于急性中央型DVT的治疗为抗凝治的辅助治疗，且存在过多禁忌症。而DVT即使经过正规的治疗，还是一种多发，高复发率、高风险的血栓性疾病，其发病后的预防和治疗仍是一个漫长过程。因此，临床缺乏一种毒副作用低、可以口服使用的溶栓药物。

发明内容

为了实现以上目的，本发明公开了枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用。

更优的，所述的枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用，所述枯草杆菌纤溶酶由枯草杆菌Bacillus subtilis QK02菌种发酵制得，该菌种己保存于国家典型培养物保藏中心，菌种编号为CCTCCNO：M203078。

更优的，所述的枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用，所述枯草杆菌纤溶酶可与医药学上可接受的辅料配合制成液体药剂、胶囊剂或者片剂。

本发明至少包括以下有益效果：本发明的枯草杆菌纤溶酶可单独用药溶解已有血栓，并且预防血栓复发；亦可与抗凝药物联合用药，抗凝药物主要起到血栓的进一步发展，而口服溶栓药可溶解已有血栓，起到协同治疗的效果，可预期显著提升DVT的治疗效果、降低并发症和复发率。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明

图1为实施例4中给药14天后大鼠下腔静脉血栓药效组织切片图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

实施例1

一、枯草杆菌纤溶酶来源

表1枯草杆菌纤溶酶信息

二、实施情况

表2试验所用动物信息

种属品系：	新西兰兔；
		等级：	普通级；
数量和性别：	共12，雌雄各半；
		给药开始时体重：	2.0～2.5kg；
供应单位：	武汉市万千佳兴生物科技有限公司；
		动物生产许可证：	SCXK(鄂)20160011；
动物质量合格证号：	NO.4201000004051；
		接收日期：	2019.2.28

新西兰兔饲养于清洁级动物房，饲养环境为温度22～26℃，相对湿度50％～60％，人工光照明暗各12h。

2、动物分组

模型组：3只，生理盐水，每日2次，每次2mL/kg；

低剂量试验组：3只，用生理盐水配制浓度2500IU的枯草杆纤溶酶药液，灌胃，每日2次，每次2mL/kg；

中剂量试验组：3只，用生理盐水配制浓度5000IU的枯草杆纤溶酶药液，灌胃，每日2次，每次2mL/kg；

高剂量试验组：3只，用生理盐水配制浓度10000IU的枯草杆纤溶酶药液，灌胃，每日2次，每次2mL/kg；

3、试验方法

3.1建模

实验兔耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠，注射剂量0.5-1.2mL/kg，仰卧位固定于兔板上，使其后肢伸展位，对兔腹股及大腿内侧剃毛，消毒等术前准备。沿右(或左)下肢近端沿股静脉的走向，做长约4cm的斜形皮肤切口，分离皮下及肌肉组织，可见股动脉、股静脉及股神经相伴行。小心分离股静脉，避免撕裂管壁。游离股静脉约2cm，血管夹夹闭近心端，以无齿镊钳夹远端血管壁10次，在血管夹远心端约1cm处用1ml注射器平行向心插入股静脉，注入0.1ml凝血酶(终浓度250U/ml)，迅速退出针头，按压针孔处数分钟。血管夹保留1h，期间不定时向组织滴加生理盐水以保持湿润。1h后缓慢取出血管夹，分层缝合肌肉与皮肤。

每天2次，共给药7天，2mL/kg；早09:30～10:30；晚05:30～6:30。

试验期间所有动物每天进行临床观察。笼旁观察非给药日：上午进行1次观察。给药日：每次给药后1h内观察1次。

在给药7天后解剖，取结注入凝血酶段的股静脉进行HE染色；

4、临床检验

4.1组织病理学

给药期结束D8。动物解剖前隔夜禁食，不超过20h，不限饮水。耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠，注射剂量0.5-1.2mL/kg，动物麻醉后耳缘静脉采血，取注入凝血酶段的股静脉约1.5cm，进行HE染色；

5、试验结果

5.1临床观察

试验期间各组动物未见濒死或死亡。临床观察结果显示，各剂量组与模型组动物均未见明显异常。

5.2血管HE

灌胃7天后，血管HE染色结果显示：

模型组血管的整个管腔内充满血栓，血管内膜增厚，栓塞由大量的炎性细胞、交联的纤维蛋白以及少量红细胞构成；

低剂量组的血管内膜增厚，血管的管腔内血栓部分溶解炎，性细胞减少，血管周围形成狭窄的通道，与模型组相比有少许改善；

中剂量组血管内血栓再通，血栓溶解明显，周围新生的内皮细胞长入，血管内膜明显增厚，与模型组相比有显著改善；

高剂量组血管壁结构完整，血管内皮细胞未破坏，血管再通，腔内仅见小团未溶解的血栓，与模型组相比有极显著改善。

实施例2

表3试验所用动物

种属品系：	昆明小鼠；
		等级：	SPF级；
数量和性别：	共32只，雌雄各半；
		给药开始时体重：	20±2g；
供应单位：	华中科技大学实验动物中心
		动物生产许可证：	SCXK(鄂)2016-0009
动物质量合格证号：	NO.42009800002608
		签发单位：	华中科技大学实验动物中心
接收日期：	2017.11.10

小鼠灭菌饲料；鼠来宝(武汉)生物科技有限公司；保存在低温、干燥和卫生环境；使用笼盖上的食槽饲喂，持续供给，自由采食；自由饮水，温度20～25℃；其中，由市自来水厂提供的生活饮用水经本公司反渗透(RO)系统处理后提供给动物饮用；饮水瓶不间断供水，自由摄取；

2、动物分组

阴性对照组：8只，生理盐水，每日2次，每次2mL/kg；

低剂量试验组：8只，用生理盐水配制浓度80IU/ml的枯草杆纤溶酶药液，灌胃；

中剂量试验组：8只，用生理盐水配制浓度160IU/ml的枯草杆纤溶酶药液，灌胃；

高剂量试验组：8只，用生理盐水配制浓度320IU/ml的枯草杆纤溶酶药液，灌胃；

3、试验方法

3.1建模

正式试验前小鼠饥饿处理8小时；

试验期间，所有小鼠每次均灌胃0.5ml，每天灌胃2次，连续灌胃3天，测量每组小鼠全尾长后腹腔注射50mg/kg的角叉菜胶，再连续灌胃3天后测量每组小鼠的血栓尾长度，停止灌胃1天后测量小鼠剩余尾长和断尾情况和死亡情况；

4、数据处理和统计分析

采用SPSS 19.0和Excel 2010对小鼠尾部血栓长度数据进行录入和统计分析。用Levene’s检验方法进行方差齐性检验，如果方差齐(p>0.01)，可直接引用方差分析的结果判断总体差异是否有统计学显著意义，如果方差不齐(p≤0.01)，根据Welch检验结果判断总体差异是否有统计学显著意义。P<0.05表示差异有统计学显著意义。对试验过程中濒死或死亡动物采集的数据，仅列表不纳入统计。

5、临床检验

5.1临床观察

试验期间，对照组死亡一只，剩7只小鼠；

停止灌胃1天后，对照组死亡一只，剩6只小鼠；

而3个试验组均未发生小鼠死亡；

5.2尾部血栓长度和剩余尾长

尾部血栓长度：对照组平均尾部血栓长度2.74cm，低、中、高三个剂量组平均尾部血栓长度分别为1.81cm、0.69cm、0.60cm，与对照比分别减少了33.9％(p<0.05)、74.8％(p<0.01)、78.1％(p<0.01)；

剩余尾长及剩余尾长相对比值：对照组平均剩余尾长6.23cm，低、中、高三个剂量组平均剩余尾长分别为7.58cm、7.65cm、7.83cm，与对照比分别增加了21.7％(p<0.05)、22.8％(p<0.05)、25.7％(p<0.01)；

剩余尾长相对比值：对照组剩余尾长相对比值为73.2％，低、中、高三个剂量组平均剩余尾长分别为90.1％、96.2％、93.7％，与对照比分别增加了16.9％、23％、20.5％；

断尾和死亡率：对照组断尾率为100％，低剂量组断尾率为75％、中剂量组断尾率为50％，高剂量组断尾率为0；

表4各组小鼠剩全尾长、剩余尾长及尾部血栓长度情况

注：与模型对照组比较*p＜0.05,**p＜0.01

表5各组小鼠剩余尾长相对比值及断尾率情况

6、试验结果

枯草杆菌纤溶酶是由枯草芽孢杆菌表达分泌的一类丝氨酸蛋白酶，对纤维蛋白具有特异性的高效降解功效，且基本来源于食品(例如豆豉、纳豆等)，具有可靠地安全性。

尾部血栓长度结果显示，对照组平均尾部血栓长度2.74cm，低、中、高三个剂量组平均尾部血栓长度分别为1.81cm、0.69cm、0.60cm，与对照比分别减少了33.9％(p<0.05)、74.8％(p<0.01)、78.1％(p<0.01)。剩余尾长结果显示，对照组平均剩余尾长6.23cm，低、中、高三个剂量组平均剩余尾长分别为7.58cm、7.65cm、7.83cm，与对照比分别增加了21.7％(p<0.05)、22.8％(p<0.05)、25.7％(p<0.01)。剩余尾长相对比值结果显示，对照组剩余尾长相对比值为73.2％，低、中、高三个剂量组平均剩余尾长分别为90.1％、96.2％、93.7％，与对照比分别增加了16.9％、23％、20.5％。说明枯草杆菌纤溶酶低剂量组(2000IU/kg)就能够降低小鼠尾部血栓，增加小鼠的剩余尾长，并存在剂量相关性。

断尾和死亡率结果显示，对照组断尾率为100％，低剂量组断尾率为75％、中剂量组断尾率为50％，高剂量组断尾率为0；仅对照组小鼠发生了死亡(25％)，低、中、高三个剂量组均未发生死亡。说明枯草杆菌纤溶酶能够有效的降低小鼠尾部血栓的断尾率和死亡率。在本试验条件下，小鼠经口灌胃枯草杆菌纤溶酶(2000、4000和8000IU/kg)，有效溶栓剂量为2000IU/kg，且随着剂量的增加溶栓效果更好，显著了减少小鼠尾部血栓长度，降低小鼠产生尾部血栓后断尾的发生率。

实施例3

表6试验所用动物信息

种属品系：	SD大鼠；
		等级：	SPF级；
数量和性别：	共60，雄性；
		给药开始时体重：	雄200～220g；
供应单位：	湖南斯莱克景达实验动物有限公司；
		动物生产许可证：	SCXK(湘)2016002；
动物质量合格证号：	NO.43004700055311；
		动物实验单位：	武汉赛维尔生物科技有限公司；
接收日期：	2019.1.8

所有动物接受4天的检疫与适应性饲养，期间每天1次对动物进行一般观察；

SD大鼠饲养于本公司SPF级动物房，动物使用许可证号：SYXK(鄂)2018-0101。昼夜明暗交替时间：12h/12h，最小换气次数：≥15次/h，温度：20.4～24.0℃，最大日温差：<4℃，相对湿度37.1～60.5％。

其中，由市自来水厂提供的生活饮用水经本公司反渗透(RO)系统处理后提供给动物饮用；饮水瓶不间断供水，自由摄取；

2、动物分组

模型组：10只，生理盐水，每日2次，每次10mL/kg；

假手术组：10只，生理盐水，每日2次，每次10mL/kg；

低剂量试验组：10只，用生理盐水配制浓度4000IU的枯草杆纤溶酶药液，灌胃，每日2次，早09:30～10:30；晚05:30～6:30，每次10mL/kg；

中剂量试验组：10只，用生理盐水配制浓度8000IU的枯草杆纤溶酶药液，灌胃，每日2次，早09:30～10:30；晚05:30～6:30，每次10mL/kg；

高剂量试验组：10只，用生理盐水配制浓度16000IU的枯草杆纤溶酶药液，灌胃，每日2次，早09:30～10:30；晚05:30～6:3，0每次10mL/kg；

3、试验方法

3.1血栓造模实验方案

术前12h禁食，腹腔注射麻醉10％水合氯醛350mg/kg，麻醉成功后仰卧位四肢伸展固定手术台上。经大鼠腹部正中切口进腹，切开皮肤长约5cm切口，逐层分离腹壁肌肉、腹膜。入腔后将肠管迁移向术野左侧(用0.9％氯化钠溶液浸湿纱布覆盖肠管)，充分暴露下腔静脉。在左肾静脉下方2mm处的下腔静脉结扎点，用5-0缝线结扎左肾静脉下方下腔静脉各属支。另取1根4-0缝线与下腔静脉主干并排，5-0缝线方节打结后，谨慎抽出4-0缝线。在结扎下方用显微血管夹阻断下腔静脉。放置1h后，拍照去除显微血管夹。2.0mL生理盐水注入腹腔中，逐层关腹，皮肤下撒少许青霉素粉末。

3.2假手术组方案

假手术组的10只大鼠仅做开腹，游离左肾静脉血栓与下腔静脉汇合处及下方1.0cm长下腔静脉段即关腹，其余同动物模型组。

试验期间所有动物每天进行临床观察。笼旁观察非给药日：上午进行1次观察。给药日：每次给药后1h内观察1次。

所有解剖动物：给药期结束(D8)和(D15)时进行解剖(每组动物，均随机分为2小组，其中一个小组给药7天，即进行解剖，另外一个小组给药14天，即进行解剖)；麻醉后心脏采血；血液和尿液标本在采集后放入样品运输箱，2h内送临检部门检测。

4、临床检验

4.1组织病理学

给药期结束D8和D15。动物解剖前隔夜禁食，不超过20h，不限饮水。采用腹腔注射10％水合氯醛麻醉，注射剂量为350mg/kg，动物麻醉后腹心脏采血，然后剖开腹腔采集结扎线下方的下腔静脉1.5cm。然后进行HE染色。

5、试验结果

5.1临床观察

试验期间，各组动物未见濒死或死亡。临床观察结果显示，各剂量组与模型组动物均未见明显异常。

5.2血管HE

血管HE染色结果显示，灌胃14天后，

假手术组血管各层结构清晰，腔内干净，未见明显异常；

模型组血管主体基本坏死钙化(黑色箭头)，坏死灶周围伴有一些少量的炎性细胞以及新生血管(红色箭头)，周围形成再通血管，下方形成的的狭窄血管内还可见脱落的栓塞(黄色箭头)；

低剂量组血管外周基本坏死钙化，官腔内部炎性细胞减少，周围形成狭窄的再通血管(红色箭头)，与模型组相比有少许改善；

中剂量组血管内血栓再通，血栓部分溶解出现裂缝，周围新生的内皮细胞长入并被覆于裂隙表面形成新的血管，相互吻合沟通(黑色箭头)，主血管壁局部可见坏死断裂(红色箭头)，与模型组相比有极显著改善；

高剂量组血管壁结构完整，各层结构清晰，腔内仅见小团溶解的血栓(黑色箭头)，主要由红细胞，纤维蛋白以及少量的白细胞组织，与模型组相比有极显著改善。高剂量组血管壁结构完整，血管内皮细胞未破坏，血管再通，腔内仅见小团未溶解的血栓，与模型组相比有极显著改善。

5.3血栓重量

灌胃7天后，假手术组无血栓积累；模型组血栓平均重量为106.74mg，低、中、高三个剂量组血栓平均重量分别为89.29mg、53.64mg、42.27mg，与模型组相比分别减少了16.3％(p<0.05)、49.7％(p<0.01)和60.4％(p<0.01)，且存在剂量相关性。

灌胃14天后，假手术组无血栓积累；模型组血栓平均重量为77.05mg，低、中、高三个剂量组血栓平均重量分别为55.79mg、45.85mg、36.89mg，与模型组相比分别减少了27.5％(p<0.01)、40.5％(p<0.01)和52.1％(p<0.01)，且存在剂量相关性。

表6枯草杆菌纤溶酶口服给药7天组、14天组SD大鼠下腔静脉血栓重量

注：与模型对照组比较*p≤0.05,**p≤0.01

血栓重量结果显示，灌胃7天后，假手术组无血栓积累；模型组血栓平均重量为106.74mg，低、中、高三个剂量组血栓平均重量分别为89.29mg、53.64mg、42.27mg，与模型组相比分别减少了16.3％(p<0.05)、49.7％(p<0.01)和60.4％(p<0.01)，且存在剂量相关性。灌胃14天后，假手术组无血栓积累；模型组血栓平均重量为77.05mg，低、中、高三个剂量组血栓平均重量分别为55.79mg、45.85mg、36.89mg，与模型组相比分别减少了27.5％(p<0.01)、40.5％(p<0.01)和52.1％(p<0.01)，且存在剂量相关性。说明枯草杆菌纤溶酶能够显著降低大鼠下腔静脉血栓，并且随着剂量的增加，血栓重量减少越明显。

5.4 FDP、FIB数据分析

纤维蛋白原降解产物(FDP)检测结果：灌胃14天后，假手术组FDP含量平均值为70.07ng/mL；模型组FDP含量平均值为118.57ng/mL，低、中、高三个剂量组FDP含量平均值分别为85.55ng/mL、72.19ng/mL、154.60ng/mL；与模型组相比，低、中两个剂量FDP含量分别降低了25.3％(p<0.05)、39.1％(p<0.01)，高剂量组FDP增加了30.4％(p<0.01)。

纤维蛋白原(FIB)检测结果：灌胃14天后，假手术组FIB含量平均值为2.07g/L，模型组FIB含量平均值为2.60g/L，低、中、高三个剂量组FIB含量平均值分别为2.44g/L、2.22g/L、2.32g/L；与模型组相比，中剂量组FIB含量下降了14.6％(p<0.01)，低、高两个剂量组FIB含量均有所下降，但差异不显著。

表7枯草杆菌纤溶酶对FDP、FIB的影响

注：与模型对照组比较*p≤0.05，**p≤0.01

FDP检测结果显示，灌胃14天后，假手术组FDP含量平均值为70.07ng/mL；模型组FDP含量平均值为118.57ng/mL，低、中、高三个剂量组FDP含量平均值分别为85.55ng/mL、72.19ng/mL、154.60ng/mL；与模型组相比，低、中两个剂量FDP含量分别降低了25.3％(p<0.05)、39.1％(p<0.01)，高剂量组FDP增加了30.4％(p<0.01)。

FIB检测结果显示，灌胃14天后，假手术组FIB含量平均值为2.07g/L，模型组FIB含量平均值为2.60g/L，低、中、高三个剂量组FIB含量平均值分别为2.44g/L、2.22g/L、2.32g/L；与模型组相比，中剂量组FIB含量下降了14.6％(p<0.01)，低、高两个剂量组FIB含量均有所下降，但差异不显著。

图1为大鼠下腔静脉血栓药效组织切片图，由图1可知，假手术组血管各层结构清晰，腔内干净，未见明显异常；模型组血管主体基本坏死钙化，坏死灶周围伴有一些少量的炎性细胞以及新生血管，周围形成再通血管，下方形成的的狭窄血管内还可见脱落的栓塞；低剂量组(4000IU/kg)血管外周基本坏死钙化，官腔内部炎性细胞减少，周围形成狭窄的再通血管，与模型组相比有少许改善；中剂量组(8000IU/kg)血管内血栓再通，血栓部分溶解出现裂缝，周围新生的内皮细胞长入并被覆于裂隙表面形成新的血管，相互吻合沟通，主血管壁局部可见坏死断裂，与模型组相比有极显著改善；高剂量组(16000IU/kg)血管壁结构完整，各层结构清晰，腔内仅见小团溶解的血栓，主要由红细胞，纤维蛋白以及少量的白细胞组织，与模型组相比有极显著改善。

总之，纤溶酶QK由枯草芽孢杆菌表达分泌的一类丝氨酸蛋白酶，是一种单链多肽酶。能高效降解交联的纤维蛋白。与纳豆激酶类似，除了能够直接降解血栓，还可以少量激活体内的t-PA和尿激酶原，进一步激活纤溶酶，增强溶栓效果。与传统的溶栓药物相比，具有更好的溶栓效果，且安全性高，毒副作用少。

因此，纤溶酶QK是一种极具开发的溶栓药物，从而填补市场上口服溶栓药的空缺。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。

Claims (3)

1.枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用。

2.如权利要求1所述的枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用，其特征在于，所述枯草杆菌纤溶酶由枯草杆菌Bacillus subtilis QK02菌种发酵制得，该菌种己保存于国家典型培养物保藏中心，菌种编号为CCTCCNO：M203078。

3.如权利要求1所述的枯草杆菌纤溶酶在治疗深静脉血栓药物中的应用，其特征在于，所述枯草杆菌纤溶酶可与医药学上可接受的辅料配合制成液体药剂、胶囊剂或者片剂。