CN110235662A - 一种桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法。本发明首先提供了桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在防治粉虱类害虫、制备粉虱类害虫防治药物和防治由粉虱类害虫引起的病害方面的应用。基于所述应用，本发明提供了一种桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法，喷洒爪哇虫草孢子悬浮液，同时释放桨角蚜小蜂，对烟粉虱进行防治。该方法简单、易于操作和推广，在粉虱类害虫的防治中，可减少化学农药的使用量甚至避免化学农药的使用，降低作物、蔬菜或花卉的受害率，保护生物多样性和天敌资源，提高生防微生物的传播效率，为粉虱类害虫的综合防治技术体系开辟重要途径。
Description
技术领域
本发明属于生物防治技术领域，更具体地，涉及一种桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法。
背景技术
粉虱类害虫是一类农业生产中经常遇到的害虫，其中，烟粉虱是该类害虫中非常有特点的代表物种。烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)属半翅目(Hemiptera)粉虱科(Aleyrodidae)，是一类高度杂食性昆虫，最早于1889年由Gennadius在希腊的烟草上发现。烟粉虱是多个隐种的复合体，在我国境内已先后报道了包括13个本地种和2个全球入侵种在内的15个烟粉虱隐种。烟粉虱作为重要经济害虫，是热带、亚热带保护地及大田作物的主要害虫之一，入侵后极易暴发成灾，且难以阻断其扩张趋势，受到全世界学者的高度关注。
烟粉虱的危害方式主要有三种，一是烟粉虱取食植物汁液：烟粉虱成虫、若虫均刺吸植物韧皮部汁液，导致植物衰弱；同时，分泌大量蜜露，污染植物器官和产品，诱发煤污病的发生，使植物减弱；二是传播病毒：烟粉虱是许多病毒病的重要传播媒介，由双生病毒引起的番茄黄化曲叶病是一种毁灭性病害；三是引起植物生理异常：烟粉虱若虫取食后可导致多种植物生理异常。我国常见的粉虱类害虫有：烟粉虱MED隐种、烟粉虱MEAM1隐种、温室白粉虱和黑刺粉虱。温室白粉虱主要危害温室蔬菜和观赏植物，由于人民生活水平逐步提高，以及种植结构的调整，温室蔬菜栽培面积逐年增加，温室生态环境稳定，有利于温室白粉虱的增殖，因此，许多地区温室白粉虱发生日趋严重，已成为温室蔬菜和花卉生产的重要害虫。烟粉虱MED隐种(B型烟粉虱)，又称银叶粉虱，对生产的威胁最大，传毒能力最强，一旦带毒则终生带毒，是导致番茄黄化曲叶病毒病流行传播的主要原因，且对常用农药抗药性强。2003年首次发现烟粉虱MEAM1隐种(Q型烟粉虱)入侵我国，Q型烟粉虱在一些国家和地区的危害逐渐加重，在随后的十年内Q型烟粉虱逐渐取代B型烟粉風成为主要危害种群，并呈进一步传播蔓延趋势，造成更严重的损失。黑刺粉虱是粉虱类害虫中发生普遍、危害严重的一种粉虱，以若虫群集叶背，吮吸汁液，被害叶形成黄斑，并能分泌蜜露诱发煤烟病，严重影响树势生长。
粉虱类害虫寄主范围广泛、危害方式多样、繁殖力强、世代重叠、种群增长迅速，发生范围广大，除危害经济作物外，还危害观赏植物及杂草。当前农业生产上采用农业防治、物理防治、化学防治和生物防治等方法对烟粉虱进行控制，其中，化学防治在烟粉虱的综合治理中扮演着重要角色，特别是新烟碱类杀虫剂噻虫嗪广泛用于防治烟粉風，但是田间烟粉虱已经产生了噻虫嗪抗性。目前，国内外对烟粉虱的治理主要依赖于化学防治，由于烟粉虱的取食和产卵都是在番茄叶片的背面，药剂不易达到靶标害虫，而大量化学杀虫剂的使用导致烟粉虱抗药性问题日益突出，因此，在生产上烟粉虱的防治工作不仅费时费力，而且成效不大，给蔬菜生产造成很大的经济损失。
目前，烟粉虱已对包括有机磷、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯、新烟碱类、昆虫生长调节剂等在内的多种杀虫剂产生不同程度的抗性，随着新型杀虫剂的应用，对随后应用的新型I杀虫剂也相继产生了不同程度的抗性，是世界范围内面临的重要问题。另外，农药多数有剧毒已被国家禁用，而且长期、大量使用化学农药导致了天敌昆虫大量死亡、生物多样性丧失、产生不同程度的抗药性、生态环境受到污染等一系列问题，农药残留超标的问题也时有发生。面对这样的被动局面，虫害防控的非化学手段研究与应用已是急迫问题。
生物防治因其绿色、环保、持效等优点，成为害虫最有效和最具应用前景的防治手段。生物防治是利用有益生物及其产物控制有害生物种群的防治技术，主要是通过利用生物之间相互依存、相互制约的食物链，使生物间的动态平衡向有利于农业生产方向倾斜。因此，寻求有效的生物防治产品及应用技术是今后害虫可持续控制的主要研究方向之一。如生防菌和生防天敌的筛选，对烟粉虱的防控具有重要的意义，目前，已知的烟粉虱生防菌如爪哇虫草(Cordyceps javanica)、玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)、蜡蚧轮枝菌(Verticillium lecanii)、粉虱坐壳孢(Aschersonia aleyrodis)等，生防天敌如寄生性天敌丽蚜小蜂(Encarsia formosa Gahan)、海氏桨角蚜小蜂(Eretmocerus hayati)、蒙氏桨角蚜小蜂(Eretmocerus mundus)、浅黄恩蚜小蜂(Encarsia sophia)，捕食性天敌小黑瓢虫(Delphastus cataliane)、刀角瓢虫(Serangium parcesetosum)、草蛉(Chrysoperlarufilabris)及盲蝽(Macrolophus caliginosus)等。然而这些生防菌和生防天敌的防效仍然存在不少问题，有待更好的改善，如存在的防控因素单一、受环境因素影响较大、防治效果不稳定、环境安全性及生物多样性等问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有粉虱类害虫防治方法的缺陷和不足，提供一种利用桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治粉虱类害虫的方法，桨角蚜小蜂为爪哇虫草的自然寄生性天敌，爪哇虫草为一种昆虫病原真菌，桨角蚜小蜂协同爪哇虫草显著提高了粉虱类害虫的防治效果。
本发明的第一个目的是提供桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在防治粉虱类害虫方面的应用。
本发明的第二个目的是提供桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在制备粉虱类害虫防治药物方面的应用。
本发明的第三个目的是提供桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在防治由粉虱类害虫引起的病害方面的应用。
本发明的第四个目的是提供一种桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法。
本发明的第五个目的是提供上述方法在防治烟粉虱方面的应用。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
本发明首次将桨角蚜小蜂与爪哇虫草联合对粉虱类害虫进行防治，在控制粉虱类害虫虫口的过程中，桨角蚜小蜂在粉虱种群中携带并传播爪哇虫草；该方法显著提高了对粉虱类害虫的防治效果，开拓了自然天敌与生防微生物在防治害虫领域联合应用的新手段，为粉虱类害虫的综合防治技术体系开辟了重要途径。
因此，以下应用均应在本发明的保护范围之内；
本发明提供了桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在防治粉虱类害虫方面的应用。
本发明还提供了桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在制备粉虱类害虫防治药物方面的应用。
本发明还提供了桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在防治由粉虱类害虫引起的病害方面的应用。
优选地，所述粉虱类害虫为烟粉虱或白粉虱。
更优选地，所述粉虱类害虫为烟粉虱。
优选地，所述由粉虱类害虫引起的病害是指由粉虱类害虫作为传播媒介所引起的病害。
更优选地，由粉虱类害虫作为传播媒介所引起的病害为双生病毒病。
更进一步优选地，所述双生病毒病为番茄黄化曲叶病、棉花曲叶病或木薯花叶病毒病中的任意一种或几种。
优选地，所述爪哇虫草为爪哇虫草(Cordyceps javanica)GZQ-1菌株，于2018年8月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，菌株保藏编号：GDMCC No：60437。
本发明还提供了一种桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法，喷洒爪哇虫草孢子悬浮液，同时释放桨角蚜小蜂，对烟粉虱进行防治。
优选地，所述爪哇虫草孢子悬浮液的浓度为103～1010孢子/mL。
更优选地，所述爪哇虫草孢子悬浮液的浓度为103～108孢子/mL。
更进一步优选地，所述爪哇虫草孢子悬浮液的浓度为108孢子/mL。
优选地，所述爪哇虫草孢子悬浮液的制备方法为：将爪哇虫草GZQ-1菌株斜面菌种取出活化，接种到萨氏培养基上，于恒温培养箱中培养14d，然后刮下培养基表面分生孢子，用含0.1％的吐温80无菌水过滤、收集分生孢子，配制成爪哇虫草孢子悬浮液。
优选地，所述桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法为：喷洒爪哇虫草孢子悬浮液至植物叶片上，直至有液滴滴下为止，自然晾干后，再释放桨角蚜小蜂。
优选地，所述桨角蚜小蜂的释放量为3只桨角蚜小蜂蛹/株棉花。
另外，上述方法在防治烟粉虱方面的应用，也应在本发明的保护范围之内。
优选地，上述方法用于作物、蔬菜或花卉种植过程中的烟粉虱的防治。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明首次研究发现将桨角蚜小蜂和爪哇虫草联合对粉虱类害虫进行防治可实现显著的协同增效作用，首次研究发现爪哇虫草对桨角蚜小蜂的蛹是无害的(1级，IOBC)，对成虫有轻微的危害(2级，IOBC)；并在粉虱类害虫高发季节进行田间粉虱类害虫的防治时，首次证实了爪哇虫草和桨角蚜小蜂联合使用的防治效果显著高于桨角蚜小蜂、爪哇虫草分别单独使用的防治效果，可高效、显著地提高烟粉虱的防治效果，对环境安全，且不会破坏生物多样性。
本发明提供的防治粉虱类害虫的方法简单、易于操作和推广，在粉虱类害虫的防治中，可减少化学农药的使用量甚至避免化学农药的使用，降低作物、蔬菜或花卉的受害率，保护生物多样性和天敌资源，提高生防微生物的传播效率，开拓自然天敌与生防微生物在防治害虫领域联合应用的新手段，进一步推动昆虫病原真菌与害虫天敌的协同作用，为粉虱类害虫的综合防治技术体系开辟重要途径。
附图说明
图1是爪哇虫草对桨角蚜小蜂卵和成蜂的致病力结果图。
图2是在非选择性实验中，爪哇虫草GZQ-1菌株对桨角蚜小蜂寄生潜能的影响结果；其中，a图为爪哇虫草对桨角蚜小蜂寄生率的影响结果；b图为爪哇虫草对桨角蚜小蜂羽化率的影响结果；c图为爪哇虫草对桨角蚜小蜂发育历期的影响结果；d图为爪哇虫草对桨角蚜小蜂寿命的影响结果；*和**代表在0.05和0.01水平上有显著性差异(配对t检验)。
图3是在选择性实验中，爪哇虫草GZQ-1菌株对桨角蚜小蜂寄生潜能的影响结果；其中，a图为爪哇虫草对桨角蚜小蜂寄生率的影响结果；b图为爪哇虫草对桨角蚜小蜂羽化率的影响结果；*和**代表在0.05和0.01水平上有显著性差异(配对t检验)。
图4是爪哇虫草GZQ-1菌株与桨角蚜小蜂联合防治烟粉虱的结果；其中，不同柱子上方相同字母相同，表示不同处理间差异不显著(P＞0.05Duncan检验)。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
以下实施例中的实验材料分别为：
供试菌株：爪哇虫草(Cordyceps javanica)GZQ-1菌株。
寄主植物：棉花(Gossypium hirsutum)，品种为鲁棉32号。
供试虫源：烟粉虱(Bemisia tabaci)，桨角蚜小蜂(Eretmocerus hayati)。
供试培养基：萨氏培养基(SDAY/4)。
实施例1爪哇虫草GZQ-1菌株对桨角蚜小蜂的致病力分析
1、爪哇虫草对桨角蚜小蜂蛹的致病力实验
(1)实验方法
选用生长状况一致的棉花苗，利用接虫盒，每个盒内接入烟粉虱成虫60对，24h后移走烟粉虱成虫。待烟粉虱发育到二龄时，接入桨角蚜小蜂，待桨角蚜小蜂发育到蛹期时用于实验。
采用浸泡法，将带有桨角蚜小蜂蛹的棉花叶片浸入爪哇虫草孢子悬浮液15s(1×103孢子/mL、1×104孢子/mL、1×105孢子/mL、1×106孢子/mL、1×107孢子/mL、1×108孢子/mL)，用1％的吐温-80作为对照。将棉花叶片放到有琼脂(10g.L-1)的培养皿里，用扎孔的保鲜膜封口，置于人工气候箱(温度26～27℃，湿度80～85％)培养，连续记录7天桨角蚜小蜂蛹的死亡率。
(2)实验结果
爪哇虫草对桨角蚜小蜂蛹的致病力结果如表1所示，可以看出，随着爪哇虫草孢子悬浮液浓度的升高，桨角蚜小蜂蛹的死亡率增加。使用爪哇虫草孢子悬浮液浓度为1×106孢子/mL、1×107孢子/mL时，对桨角蚜小蜂蛹的致病力差异未达到显著水平，其余爪哇虫草孢子悬浮液浓度之间均存在显著差异(P＜0.05)。总体来说，当爪哇虫草孢子悬浮液浓度最高(1×108孢子/mL)时，桨角蚜小蜂蛹的死亡率仅为28.00％，LC50＞1×108孢子/mL，因此，爪哇虫草对桨角蚜小蜂蛹的致病力很小。
表1爪哇虫草对桨角蚜小蜂蛹的致病力
| 浓度(孢子/mL) | 桨角蚜小蜂蛹的累计校正死亡率M±SE(％) |
| 1×10<sup>8</sup> | 28.00±1.00a |
| 1×10<sup>7</sup> | 18.33±0.67b |
| 1×10<sup>6</sup> | 18.00±0.58b |
| 1×10<sup>5</sup> | 14.33±0.88c |
| 1×10<sup>4</sup> | 8.67±0.66d |
| 1×10<sup>3</sup> | 2.00±0.58e |
注：表中数据表示平均值±标准误，同一列不同字母表示不同处理间差异显著(P＜0.05Duncan检验)。
2、爪哇虫草对桨角蚜小蜂成蜂的致病力实验
(1)实验方法
用干净的棉花叶片浸入爪哇虫草悬浮液15s(1×103孢子/mL、1×104孢子/mL、1×105孢子/mL、1×106孢子/mL、1×107孢子/mL、1×108孢子/mL)，自然风干菌液后，将棉花叶片放到有琼脂的培养皿里，接入刚羽化的桨角蚜小蜂30头，用1％的吐温-80作为对照。将棉花叶片放到有琼脂(10g.L-1)的培养皿里，用扎孔的保鲜膜封口，置于人工气候箱(温度26～27℃，湿度80～85％)培养，连续记录7天桨角蚜小蜂成蜂的死亡率。
(2)实验结果
爪哇虫草对桨角蚜小蜂成蜂的致病力结果如图1所示，可以看出，随着爪哇虫草孢子悬浮液浓度的升高，桨角蚜小蜂成蜂的死亡率增加，当爪哇虫草孢子悬浮液浓度低于1×104孢子/mL时，桨角蚜小蜂成蜂的死亡率低于10％；当爪哇虫草孢子悬浮液浓度为1×108孢子/mL时，桨角蚜小蜂成蜂的死亡率达到34％；LC50＞1×108孢子/mL。因此，爪哇虫草对桨角蚜小蜂成蜂的致病力很小。
通过以上爪哇虫草对桨角蚜小蜂的致病力分析，可以看出，随着爪哇虫草孢子悬浮液浓度增加，对桨角蚜小蜂的致病力增加。当爪哇虫草孢子悬浮液浓度低于1×108孢子/mL时，对桨角蚜小蜂蛹期和成蜂期的致病力分别为28％和34％，致病力：成蜂期＞蛹期，LC50＞1×108孢子/mL。因此，爪哇虫草对桨角蚜小蜂有一定的负面影响，但致病力很小。
实施例2爪哇虫草GZQ-1菌株对桨角蚜小蜂寄生潜能的影响
1、非选择性实验(单一龄期)
(1)实验方法
选用生长状况一致的棉花苗，套上接虫盒，每个盒内接入烟粉虱成虫40对，产卵24h后烟粉虱成虫移除。每个处理的烟粉虱待其发育到相应的龄期(1～4)用于实验。把爪哇虫草孢子悬浮液(1×108孢子/mL)均匀喷洒到带有各龄期若虫的叶片上，直至有液滴滴下为止，自然晾干后，选取直径更大的接虫盒夹住烟粉虱若虫，接入初羽化的桨角蚜小蜂，24h后移除寄生蜂。利用吐温-80作为对照实验，每个处理重复5次。观察、记录桨角蚜小蜂的寄生率、羽化率、发育历期及其羽化后代寿命。
(2)实验结果
在非选择性实验中，爪哇虫草对桨角蚜小蜂寄生率的影响结果如图2中的a图所示，可以看出，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂对烟粉虱若虫的寄生率降低。对烟粉虱二龄若虫、三龄若虫的寄生率与对照组相比，具有显著差异；而对烟粉虱四龄若虫的寄生率与对照组相比，差异未达到显著水平。因此，在单一龄期下，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂对烟粉虱各个龄期若虫的寄生率影响：二龄＞三龄＞一龄＞四龄。
爪哇虫草对桨角蚜小蜂羽化率的影响结果如图2中的b图所示，可以看出，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂寄生烟粉虱的羽化率降低。桨角蚜小蜂寄生烟粉虱一龄若虫、二龄若虫的羽化率与对照相比，差异显著，尤其是寄生烟粉虱一龄若虫的羽化率与对照相比，差异极显著；而桨角蚜小蜂寄生烟粉虱三龄若虫、四龄若虫的羽化率与对照相比，差异未达到显著水平。因此，在单一龄期下，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂对烟粉虱各个龄期若虫的羽化率影响：一龄＞二龄＞三龄＞四龄。
爪哇虫草对桨角蚜小蜂发育历期的影响结果如图2中的c图所示，可以看出，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂寄生烟粉虱的发育历期相对延长。桨角蚜小蜂寄生烟粉虱一龄若虫时，其发育历期为18.56天，对照组为18.40天；寄生烟粉虱二龄若虫时，其发育历期为10.91天，对照组是10.07天；寄生烟粉虱三龄若虫时，其发育历期为13.08天，对照组是11.93天；寄生烟粉虱四龄若虫时，其发育历期为15.22天，对照组是15.15天。桨角蚜小蜂寄生烟粉虱二龄若虫、三龄若虫的发育历期与对照相比，差异显著。因此，在单一龄期下，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂对烟粉虱各个龄期若虫的发育历期影响：二龄＞三龄＞一龄＞四龄。
爪哇虫草对桨角蚜小蜂寿命的影响结果如图2中的d图所示，可以看出，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂寄生烟粉虱的寿命相对延长。桨角蚜小蜂寄生烟粉虱二龄若虫、三龄若虫的寿命与对照相比，差异显著；而寄生烟粉虱四龄若虫的寿命与对照相比，差异未达到显著水平。因此，在单一龄期下，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂对烟粉虱各个龄期若虫的寿命影响：二龄＞三龄＞四龄＞一龄。
2、选择性实验(多龄期)
(1)实验方法
挑选长势良好的棉花苗，每株选取两个大小一致的两个叶片，每片叶子用接虫盒接入40对烟粉虱成虫，24h后吸走烟粉虱成虫。以后每隔两天接入一次烟粉虱成虫，最终保证叶片上有不同龄期的粉虱若虫用于实验。其余操作同上述非选择性实验(单一龄期)的操作。观察、记录桨角蚜小蜂的寄生率、羽化率。
(2)实验结果
在选择性实验中，爪哇虫草对桨角蚜小蜂寄生率的影响结果如图3中的a图所示，可以看出，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂对烟粉虱若虫的寄生率降低。对烟粉虱二龄若虫的寄生率与对照相比，差异极显著；对烟粉虱一龄若虫、三龄若虫的寄生率与对照组相比，差异显著；而对烟粉虱四龄若虫的寄生率与对照相比，差异未达到显著水平。因此，在多龄期选择下，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂对烟粉虱各个龄期若虫的寄生率影响：二龄＞三龄＞四龄＞一龄。
爪哇虫草对桨角蚜小蜂羽化率的影响结果如图3中的b图所示，可以看出，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂寄生烟粉虱的羽化率降低。对烟粉虱一龄若虫、二龄若虫的羽化率与对照相比，差异极显著；而对烟粉虱三龄若虫、四龄若虫的羽化率与对照相比，差异未达到显著水平。因此，在多龄期选择下，经过爪哇虫草孢子悬浮液处理后，桨角蚜小蜂对烟粉虱各个龄期若虫的羽化率影响：一龄＞二龄＞三龄＞四龄。
实施例3爪哇虫草GZQ-1菌株与桨角蚜小蜂联合防治烟粉虱
1、实验方法
(1)供试烟粉虱种群的饲养：选取长势一致的健康棉花苗，利用微型接虫盒接入烟粉虱成虫，产卵24h后，将烟粉虱成虫移除，把接有烟粉虱的棉花苗放到养虫笼中，温度26±1℃，湿度60～80％进行饲养，定期施肥浇水；
(2)供试桨角蚜小蜂种群的饲养：选取带有烟粉虱2～3龄若虫的棉花苗植株，利用小型指形管吸取桨角蚜小蜂，并且通过微型接虫盒接24h后移走，繁殖3～5代后用于实验；
(3)供试爪哇虫草菌株的培养：实验时把爪哇虫草菌株转接到新的PDA培养基上进行活化，在霉菌培养箱中培养两周，得到培养过后产孢量大的爪哇虫草菌株；
(4)爪哇虫草孢子悬浮液的配制：将步骤(3)得到的菌株刮取到放有1％吐温-80的烧杯里，经磁力搅拌器搅拌，待完全打散均匀后，用四层滤纸过滤，然后利用血球计数板在40倍物镜下计数，配制1×108孢子/mL浓度的孢子悬浮液，所有接菌工作均在超菌工作台上完成；
(5)田间实验：选取长势良好且生长状况一致的棉花苗，利用接虫盒接入60对烟粉虱成虫，待烟粉虱发育到二龄若虫用于田间实验，田间实验于2017年10月在华南农业大学生物防治教育部工程研究中心网室内进行。
采用罩笼实验，分别进行以下四种处理方式：a组：1％吐温-80处理(对照组)；b组：仅使用桨角蚜小蜂处理；c组：仅使用爪哇虫草处理；d组：爪哇虫草和桨角蚜小蜂联合使用处理；每个处理重复4次，随机安排四个处理。
上述田间实验的具体实验操作如下：
a组：选取带有烟粉虱若虫的棉花苗，作为对照组；把1％吐温-80均匀喷施到棉花叶片上，直至有液滴滴下为止，自然晾干后放入养虫笼内进行培养；
b组：选取带有烟粉虱若虫的棉花苗，接入桨角蚜小蜂24h后移除；继续将棉花植株放回养虫笼培养；
c组：选取带有烟粉虱若虫的棉花苗，把爪哇虫草孢子悬浮液(1×108孢子/mL)均匀喷洒到叶片上，直至有液滴滴下为止，自然晾干后放入养虫笼内继续培养；
d组：选取带有烟粉虱若虫的棉花苗，把爪哇虫草孢子悬浮液(1×108孢子/mL)均匀喷洒到叶片上，直至有液滴滴下为止，自然晾干后接入桨角蚜小蜂，产卵24h后移除，继续将棉花植株放回养虫笼培养。
每个养虫笼内放入四盆棉花苗，培养四笼，放入温湿度计，记录温度、湿度情况。随后每隔两天进行一次调查，调查时，每次从笼内不同位置上随机挑选8片面积相似的棉花叶片，带回实验室记录烟粉虱的数量。连续调查两周，并记录实验结果。
2、实验结果
爪哇虫草GZQ-1菌株与桨角蚜小蜂联合防治烟粉虱的结果如图4所示，可以看出，与a组(对照组)相比，b组(仅使用桨角蚜小蜂处理)、c组(仅使用爪哇虫草处理)和d组(爪哇虫草和桨角蚜小蜂联合使用处理)均对烟粉虱有致死作用，且随着时间延长，烟粉虱的死亡率逐渐增大。具体地，第7天时的死亡率分别达到51.5％、49.0％、53.75％；继续进行观察统计，第14天时，d组烟粉虱的死亡率高达91.2％，而b组、c组的死亡率分别为54％、55.33％，d组比b组、c组烟粉虱的死亡率分别显著地提高了37.2％和35.87％。
可以看出，d组与b组、c组相比，烟粉虱的死亡率具有显著差异，产生了明显的协同增效作用，d组即爪哇虫草和桨角蚜小蜂联合使用防治烟粉虱，可显著提高烟粉虱的死亡率，显著增大烟粉虱的防治效果。
以上结果说明：爪哇虫草和桨角蚜小蜂联合使用，可在短时间内达到对烟粉虱显著的防治效果，其效果显著高于桨角蚜小蜂、爪哇虫草分别单独使用的防治效果。因此，爪哇虫草和桨角蚜小蜂联合使用，可高效、显著地提高烟粉虱的防治效果，防治效果稳定，对环境安全，且不会破坏生物多样性。
以上具体实施方式为便于理解本发明而说明的较佳实施例，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (10)
1.桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在防治粉虱类害虫方面的应用。
2.桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在制备粉虱类害虫防治药物方面的应用。
3.桨角蚜小蜂协同爪哇虫草在防治由粉虱类害虫引起的病害方面的应用。
4.根据权利要求1～3任一所述的应用，其特征在在于，所述粉虱类害虫为烟粉虱或白粉虱。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在在于，所述由粉虱类害虫引起的病害包括由粉虱类害虫作为传播媒介所引起的病害。
6.根据权利要求1～3任一所述的应用，其特征在于，所述爪哇虫草为爪哇虫草(Cordyceps javanica)GZQ-1菌株，于2018年8月20日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，菌株保藏编号：GDMCC No：60437。
7.一种桨角蚜小蜂协同爪哇虫草防治烟粉虱的方法，其特征在于，喷洒爪哇虫草孢子悬浮液，同时释放桨角蚜小蜂，对烟粉虱进行防治。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述爪哇虫草孢子悬浮液的浓度为103～1010孢子/mL。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，喷洒爪哇虫草孢子悬浮液至植物叶片上，直至有液滴滴下为止，自然晾干后，再释放桨角蚜小蜂。
10.权利要求7～9任一所述方法在防治烟粉虱方面的应用。
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| PB01 | Publication | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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