CN110231419A - 一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其应用 - Google Patents

一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110231419A
CN110231419A CN201910533645.4A CN201910533645A CN110231419A CN 110231419 A CN110231419 A CN 110231419A CN 201910533645 A CN201910533645 A CN 201910533645A CN 110231419 A CN110231419 A CN 110231419A
Authority
CN
China
Prior art keywords
pesticide
reference substance
solution
sample
screening
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910533645.4A
Other languages
English (en)
Inventor
谭鹏
文永盛
王立山
许莉
肖春霞
廉向金
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chengdu food and medicine inspection research institute
Original Assignee
Chengdu food and medicine inspection research institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chengdu food and medicine inspection research institute filed Critical Chengdu food and medicine inspection research institute
Priority to CN201910533645.4A priority Critical patent/CN110231419A/zh
Publication of CN110231419A publication Critical patent/CN110231419A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G01N30/7233—Mass spectrometers interfaced to liquid or supercritical fluid chromatograph
    • G01N30/724—Nebulising, aerosol formation or ionisation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/86—Signal analysis
    • G01N30/8665—Signal analysis for calibrating the measuring apparatus
    • G01N30/8668—Signal analysis for calibrating the measuring apparatus using retention times
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/86—Signal analysis
    • G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Library & Information Science (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明提供了一种筛查中药产品中农药残留的方法，它是采用气相色谱串联三重四极杆质谱法筛查，根据筛查到的农药，再进行定量检测。本发明基于保留指数开发的方法更加适合于中药产品中农药残留测定，更能快速、方便、低检测成本的检测中药产品中的农药残留量，符合中药质量安全控制的发展方向。

Description

一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其 应用
技术领域
本发明具体涉及一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其应用。
背景技术
中药农药残留严重影响了中药的质量安全和国际声誉，逐渐受到民众和监管部门的重视。与欧盟、韩国、日本等国家相比，我国在中药农残限量研究方面存在一定的差距，主要体现在现有分析方法比较落后，研究药材品种少、限量标准少、允许残留限量高。随着人们对高品质绿色中药产品的需求增多，对中药产品的质量安全的关注增多，监管部门对中药产品农药残留的检测频率和检测种类也将明显增多，当务之急是建立一些具有快速、简便、高通量和低检测成本等特点的农药残留测定方法，让监管部门和检测机构在中药农药残留测定的工作实践中拥有更多的技术保障。常见的农药根据化学结构主要分为有机氯类、有机磷类、拟除虫菊酯类和氨基甲酸酯类等。目前单一的气相色谱法用于中药材多农药残留测定存在一定的缺陷：目标农药和干扰峰之间的色谱分离度较差，检测灵敏度低，无法准确定性，容易产生假阳性结果等，因此已经不能够满足现代对中药材多农药残留快速、准确和高通量检测的要求。
目前中药材/中药制剂农药残留快速、准确、高通量和低成本检测仍然面临着两大困难：提取与测定。由于中药材/中药制剂中的农药残留大多数属于痕量或微量级别，而中药材/中药制剂本身基质的复杂性，导致农药的提取、净化、测定都非常棘手。(1)提取难。目前中药材农药残留测定供试品溶液前处理过程比较繁琐，费时费力，有机溶剂消耗多。(2)筛查难。如何快速筛查出样品中残留的农药种类，即如何快速定性非常困难。通常的做法是先配制一系列农药混合对照品溶液和样品溶液，进样分析，根据农药对照品溶液的保留时间来确定样品中的农药种类。此外还需要配制农药单独对照品溶液，一一进样分析得到保留时间，以此获知样品中存在的农药种类。这种方法需要消耗大量农药对照品，导致检测成本昂贵。同时这种方法需要对单个对照品溶液一一进样分析得到每个农药的保留时间，需要消耗大量的分析时间，显然不能够满足现代多农药残留分析快速、高通量的需求。(3)定性难。如何在中药复杂基质中快速准确定位待测目标农药比较困难。中药的成分往往比较复杂，供试品溶液虽然经过净化，但中药中的化学成分仍然对目标农药有比较严重的干扰。尤其是在分离度不好的情况下气相色谱法往往很难准确定性，这就是采用单一气相色谱法测定农药容易产生假阳性结果的原因，即使是质谱检测系统也存在难以定性的情况。特别是某些拟除虫菊酯类农药往往存在多个同分异构体，比例氟氯氢菊酯，有4个同分异构体，却很难获得相应的对照品，导致在中药复杂基质中很难准确定性。(4)方法的重现难。由于色谱柱的改变(包括柱长度变化、柱降解)、检测仪器改变，导致在不同的检测实验室中由不同的检测人员检测时难以得到相同(或相近)的保留时间。(5)检测成本高。欧美国家和港澳台地区等对中药产品显著增加了农药测定的种类，甚至达上百种，而农药的对照品往往比较昂贵，甚至需要从国外进口，导致检测成本普遍比较昂贵。实际上，目前大多数中药材面临着药材本身的价值远低于该药材进行多农药残留的检测费用的窘境。
当前中药材农药残留分析正朝着快速、方便、准确、高通量和低检测成本的方向发展，当务之急是建立具备相应特点的分析方法。
保留指数定义：是气相色谱分析领域中国际公认的一种很重要的定性参数。保留指数的基本原理是将正构烷烃的保留指数定为它的碳数的100倍。待测物质的保留指数是与待测物质具有相同调整保留值的假想的正构烷烃的碳数的100倍。通常以色谱图上位于待测物质两侧的相邻正构烷烃的保留值为基准，用对数内插法求得。虽然化合物的保留时间因单个色谱系统而异(例如，色谱柱长度，膜厚度，直径，载气速度和压力)，但衍生得到的保留指数完全独立于这些参数。目前保留指数尚未应用于中药中农药残留检测。
发明内容
为解决上述问题，本发明建立了一种快速筛查中药产品中农药残留的方法，它是采用气相色谱串联三重四极杆质谱法筛查，具体包括如下操作步骤：
1)对照品溶液的制备：取C9～C33正构烷烃混合对照品，加正己烷溶解，即得；
2)供试品溶液的制备：取待测样品，粉碎过筛，加冰醋酸浸润，再加乙腈，振荡5-10min，冰浴30-60min，再加入无水硫酸镁与无水乙酸钠，摇散，振荡5-10min，离心，取上清液，加入无水硫酸镁，N-丙基乙二胺，十八烷基硅烷键合硅胶，石墨化炭黑，混匀，振荡5-10min，离心，再取上清液浓缩至0.05-0.2mL，加正己烷定容至1.0mL，混匀，过滤即得；
3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：毛细管柱；进样口温度为250℃，进样压力为250KPa；载气控制方式为恒线速度模式；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；
质谱条件：离子源为电子轰击源；质谱监测模式为多反应监测；
4)根据C9～C33色谱峰保留时间和Smart Database-Pesticides database农药数据库，用GC/MS系统计算农药的预测保留时间，再根据农药预测保留时间和质荷比(m/z)与供试品色谱图中色谱峰比对，筛查待测样品中农药的种类。
进一步地，步骤1)所述对照品溶液中每1L含C9～C33正构烷烃混合对照品50mg。
进一步地，步骤2)所述待测样品为中药原药材、中药饮片和/或含有中药饮片的复方制剂；所述冰醋酸为1％冰醋酸溶液。
进一步地，步骤2)所述待测样品、冰醋酸、乙腈、无水硫酸镁、无水乙酸钠的质量体积比为：3g：15ml：15ml：6g：1.5g；所述上清液与无水硫酸镁，N-丙基乙二胺，十八烷基硅烷键合硅胶，石墨化炭黑的质量体积比为9mL：1199.8mg：400.1mg：400.1mg：45.0mg。
进一步地，步骤2)所述浸润后放置50min；所述振荡频率800次/min，时间5min；所述冰浴30min；所述离心转速8500转/min，时间5min。
进一步地，步骤2)所述取上清液浓缩是取4ml上清液于氮吹仪上30℃水浴浓缩至0.1mL。
进一步地，步骤3)所述色谱条件中毛细管柱为SHIMADZU SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱，规格30m×0.25mm，0.25μm；进样量为1.0μL，不分流进样；载气为高纯氦；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；柱平衡时间为2分钟。
进一步地，步骤3)所述质谱条件中离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；溶剂延迟时间为6分钟。
本发明还提供了一种前述方法筛查到的农药的含量测定方法，它包括如下步骤：
a、对照品溶液的制备：取前述方法筛查到的农药的对照品，混合，加正己烷溶解，即得；
b、内标溶液的制备：取氘代倍硫磷对照品，加正己烷溶解，既得；
c、基质混合对照品溶液的制备：取经前述方法筛查得到的不含农药的待测样品，按步骤2)所述方法处理至浓缩，再加入步骤a对照品溶液，用正己烷定容至1mL，混匀，过滤，取续滤液，即得；其中在加乙腈时，再加入步骤b内标溶液；
d、供试品溶液的制备：取经前述方法筛查得到的含农药的待测样品，按照步骤2)所述方法制备；其中在加乙腈时，再加入步骤b内标溶液；
e、分别吸取系列浓度的基质混合对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，按照步骤3)所述色谱条件和质谱条件检测，根据混合对照品色谱图绘制标准曲线，用同位素内标法计算筛查到的含有农药的待测样品中农药的含量。
进一步地，步骤a所述对照品溶液中混合农药对照品浓度分别为100μg/mL和1000μg/mL。
进一步地，步骤b所述内标溶液每1ml含氘代倍硫磷5μg。
进一步地，步骤c所述待测样品与100μg/mL对照品溶液的质量体积比分别为3g:50μL和3g:10μL；所述待测样品与1000μg/mL对照品溶液的质量体积比分别为3g:50μL、3g:100μL、3g:200μL和3g:400μL。
进一步地，步骤c和d所述内标溶液与乙腈的体积比为100μL：15ml。
本发明中采用保留指数原理来预先筛查样品中存在的农药种类：首先，准确吸取浓度为50mg/L的正构烷烃C9～C33混合对照溶液1.0μL，注入GC/MS系统按上述色谱质谱条件进行分析，并确认正构烷烃C9～C33各色谱峰位置正确，然后结合Smart Database-Pesticides database农药数据库，GC/MS系统自动计算出目标农药的预测保留时间。然后，准确吸取供试品溶液1.0μL进样分析，根据预测保留时间和质荷比(m/z)筛查样品中存在何种农药。
本发明中根据待测农药的保留指数得到预测保留时间，进而预先筛查出样品中存在的农药，最后制备相应的基质匹配农药对照品溶液，采用同位素内标法计算待测农药的含量。
与现有技术相比，本发明基于保留指数开发的方法更加适合于中药产品中农药残留测定，更能快速、方便、低检测成本的检测中药产品中的农药残留量，符合中药质量安全控制的发展方向。具体地，与现有的中药农药残留检测方法相比，本申请的发明方法用于检测中药产品中农药残留具有如下优点：
1、在农药分析的刚开始不必需要大量农药对照品就能帮助分析人员快速筛查出样品中含有的农药种类，然后再对筛查出来的农药进行靶向定量分析。这无疑为分析人员大大减轻了实验强度，提高了分析效率，极大降低了分析成本。
2、在质谱图中有严重干扰时帮助分析人员准确识别目标农药。样品进样分析后，需要在质谱图中对待测目标农药的色谱峰进行确认，如果目标农药和干扰峰的保留时间非常接近，分析人员可以参考目标农药的预测保留时间来帮助识别它，特别是在遇到某些拟除虫菊酯类农药具有多个异构体化合物时有重要参考价值。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图简述
图1显示利用保留指数对目标农药辅助定性示意图
图2显示利用保留指数对不同仪器设备上目标农药预测保留时间的示意图
图3显示典型的正构烷烃C9～C33正构烷烃混合标准品溶液总离子流图
图4显示典型的八角茴香供试品溶液TIC图
图5显示典型的西洋参对照品溶液(A)和供试品溶液(B)TIC图
图6显示典型的西洋参供试品中被检测到的农药的质量色谱图
具体实施方式
实施例1快速筛查八角茴香中农药种类
1)对照品溶液的制备：精密量取C9～C33正构烷烃混合标准品0.5mL,用正己烷稀释成浓度为50mg/L的溶液，即得；
2)供试品溶液的制备：粉碎八角茴香药材(过三号筛)，取3g，准确称定，置50mLQuEChERS Extract tubes中，加入1％冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置50分钟，精密加入乙腈15mL涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，置于冰浴中冷却30分钟，加入盐包1[含无水硫酸镁6.0g与无水乙酸钠1.5g的混合粉末]，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，离心(8500转/min)5分钟，取上清液9mL，置SPE PSAPacking净化管，加入盐包2[含无水硫酸镁1199.8mg，N-丙基乙二胺(PSA)400.1mg，十八烷基硅烷键合硅胶400.1mg，石墨化炭黑45.0mg]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟使净化完全，离心(8500转/min)5分钟，精密吸取上清液4mL，置氮吹仪上于30℃水浴浓缩至0.1mL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得；
3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：
以SHIMADZU SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm)为色谱柱；进样口温度为250℃，进样量为1.0μL，不分流进样，高压进样压力为250KPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒线速度模式；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；柱平衡时间为2分钟；
质谱条件：离子源为电子轰击源(EI)，离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；质谱监测模式为多反应监测，溶剂延迟时间为6分钟；
4)根据对照品色谱图中正构烷烃C9～C33色谱峰保留时间，结合Smart Database-Pesticides database农药数据库，用GC/MS系统自动计算出农药的预测保留时间，再将农药的预测保留时间和质荷比(m/z)与供试品色谱图中色谱峰比对，筛查样品中存在的农药种类。
实施例2检测八角茴香中农药含量
1)对照品溶液的制备：精密量取C9～C33正构烷烃混合标准品0.5mL,用正己烷稀释成浓度为50mg/L的溶液，即得；
2)内标溶液的制备：精密量取内标氘代倍硫磷对照品，加正己烷制成每1mL含5μg的溶液，即得；
3)供试品溶液的制备：粉碎八角茴香药材(过三号筛)，取3g，准确称定，置50mLQuEChERS Extract tubes中，加入1％冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置50分钟，精密加入乙腈15mL与内标溶液l00μL涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，置于冰浴中冷却30分钟，加入盐包1[含无水硫酸镁6.0g与无水乙酸钠1.5g的混合粉末]，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，离心(8500转/min)5分钟，取上清液9mL，置SPE PSA Packing净化管，加入盐包2[含无水硫酸镁1199.8mg，N-丙基乙二胺(PSA)400.1mg，十八烷基硅烷键合硅胶400.1mg，石墨化炭黑45.0mg]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟使净化完全，离心(8500转/min)5分钟，精密吸取上清液4mL，置氮吹仪上于30℃水浴浓缩至0.1mL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得；
4)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：
以SHIMADZU SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm)为色谱柱；进样口温度为250℃，进样量为1.0μL，不分流进样，高压进样压力为250KPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒线速度模式；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；柱平衡时间为2分钟；
质谱条件：离子源为电子轰击源(EI)，离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；质谱监测模式为多反应监测，溶剂延迟时间为6分钟；
5)根据对照品色谱图中正构烷烃C9～C33色谱峰保留时间，结合Smart Database-Pesticides database农药数据库，用GC/MS系统自动计算出农药的预测保留时间，再将农药的预测保留时间和质荷比(m/z)与供试品色谱图中色谱峰比对，筛查八角茴香中存在的农药种类；
6)农药混合对照品溶液的制备
精密量取筛查到的农药的混合对照品，用正己烷分别制成每1L含农药对照品100μg和1000μg的两种溶液，即得；
7)、基质混合对照品溶液的制备
取经筛查得到的不含农药的八角茴香共6份，按照步骤3)供试品溶液的制备方法处理至“置氮吹仪上于30℃，分别加入混合对照品溶液(100μg/L)50μL、100μL，混合对照品溶液(1000μg/L)50μL、100μL、200μL、400μL，加正己烷定容至1mL，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过(0.22μm)，取续滤液，即得系列基质混合对照品溶液；
8)吸取基质混合对照品溶液注入色谱仪，按照步骤4)色谱条件和质谱条件检测，绘制浓度-离子丰度标准曲线，用同位素内标法计算筛查到的含有农药的八角茴香中各农药的含量。
实施例3快速筛查西洋参饮片中农药种类
1)对照品溶液的制备：精密量取C9～C33正构烷烃混合标准品0.5mL,用正己烷稀释成浓度为50mg/L的溶液，即得；
2)供试品溶液的制备：粉碎西洋参饮片药材(过三号筛)，取3g，准确称定，置50mLQuEChERS Extract tubes中，加入1％冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置50分钟，精密加入乙腈15mL涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，置于冰浴中冷却30分钟，加入盐包1[含无水硫酸镁6.0g与无水乙酸钠1.5g的混合粉末]，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，离心(8500转/min)5分钟，取上清液9mL，置SPE PSAPacking净化管，加入盐包2[含无水硫酸镁1199.8mg，N-丙基乙二胺(PSA)400.1mg，十八烷基硅烷键合硅胶400.1mg，石墨化炭黑45.0mg]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟使净化完全，离心(8500转/min)5分钟，精密吸取上清液4mL，置氮吹仪上于30℃水浴浓缩至约0.1mL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得；
3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：
以SHIMADZU SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm)为色谱柱；进样口温度为250℃，进样量为1.0μL，不分流进样，高压进样压力为250KPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒线速度模式；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；柱平衡时间为2分钟；
质谱条件：离子源为电子轰击源(EI)，离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；质谱监测模式为多反应监测，溶剂延迟时间为6分钟；
4)根据对照品色谱图中正构烷烃C9～C33色谱峰保留时间，结合Smart Database-Pesticides database农药数据库，用GC/MS系统自动计算出农药的预测保留时间，再将农药的预测保留时间和质荷比(m/z)与供试品色谱图中色谱峰比对，筛查样品中存在的农药种类。
实施例4检测西洋参饮片中农药含量
1)对照品溶液的制备：精密量取C9～C33正构烷烃混合标准品0.5mL,用正己烷稀释成浓度为50mg/L的溶液，即得；
2)内标溶液的制备：精密量取内标氘代倍硫磷对照品，加正己烷制成每1mL含5μg的溶液，即得；
3)供试品溶液的制备：粉碎西洋参饮片药材(过三号筛)，取3g，准确称定，置50mLQuEChERS Extract tubes中，加入1％冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置50分钟，精密加入乙腈15mL与内标溶液l00μL涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，置于冰浴中冷却30分钟，加入盐包1[含无水硫酸镁6.0g与无水乙酸钠1.5g的混合粉末]，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，离心(8500转/min)5分钟，取上清液9mL，置SPE PSA Packing净化管，加入盐包2[含无水硫酸镁1199.8mg，N-丙基乙二胺(PSA)400.1mg，十八烷基硅烷键合硅胶400.1mg，石墨化炭黑45.0mg]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟使净化完全，离心(8500转/min)5分钟，精密吸取上清液4mL，置氮吹仪上于30℃水浴浓缩至0.1mL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得；
4)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：
以SHIMADZU SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm)为色谱柱；进样口温度为250℃，进样量为1.0μL，不分流进样，高压进样压力为250KPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒线速度模式；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；柱平衡时间为2分钟；
质谱条件：离子源为电子轰击源(EI)，离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；质谱监测模式为多反应监测，溶剂延迟时间为6分钟；
5)根据对照品色谱图中正构烷烃C9～C33色谱峰保留时间，结合Smart Database-Pesticides database农药数据库，用GC/MS系统自动计算出农药的预测保留时间，再将农药的预测保留时间和质荷比(m/z)与供试品色谱图中色谱峰比对，筛查西洋参饮片中存在的农药种类；
6)农药混合对照品溶液的制备
精密量取筛查到的农药的混合对照品，用正己烷分别制成每1L含农药对照品100μg和1000μg的两种溶液，即得；
7)、基质混合对照品溶液的制备
取经筛查得到的不含农药的西洋参共6份，按照步骤3)供试品溶液的制备方法处理至“置氮吹仪上于30℃，分别加入混合对照品溶液(100μg/L)50μL、100μL，混合对照品溶液(1000μg/L)50μL、100μL、200μL、400μL，加正己烷定容至1mL，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过(0.22μm)，取续滤液，即得系列基质混合对照品溶液；
8)吸取基质混合对照品溶液注入色谱仪，按照步骤4)色谱条件和质谱条件检测，绘制浓度-离子丰度标准曲线，用同位素内标法计算筛查到的含有农药的西洋参饮片中各农药的含量。
以下通过实验例的方式说明本发明的有益效果：
实验例1本发明的方法建立
a.色谱条件
以SHIMADZU SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm)为色谱柱；进样口温度为250℃，进样量为1.0μL，不分流进样，高压进样压力为250KPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒线速度模式；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；柱平衡时间为2分钟。
b.质谱条件
离子源为电子轰击源(EI)，离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；质谱监测模式为多反应监测，溶剂延迟时间为6分钟。
c.农药混合对照品溶液的制备
精密量取上述各农药对照品贮备液适量，用正己烷分别制成每1L含100μg和1000μg的两种溶液，即得。
d.内标溶液的制备
使用氘代倍硫磷作为农药残留测定的内标物质。精密量取内标氘代倍硫磷贮备溶液适量，加正己烷制成每1mL含5μg的溶液，即得。
e.基质混合对照品溶液的制备
取空白基质样品3g，共6份，同供试品溶液的制备方法处理至“置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.1mL”，分别加入混合对照品溶液(100μg/L)50μL、100μL，混合对照品溶液(1000μg/L)50μL、100μL、200μL、400μL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过(0.22μm)，取续滤液，即得系列基质混合对照品溶液。
f.正构烷烃混合对照品溶液的制备
精密量取C9～C33正构烷烃混合标准品储备液(1000mg/L)0.5mL,用正己烷稀释成浓度为50mg/L的溶液，即得。
g.供试品溶液的制备
粉碎药材(过三号筛)，取约3g，准确称定，置50mL QuEChERS Extract tubes中，加入1％冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置50分钟，精密加入乙腈15mL与内标溶液l00μL涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，置于冰浴中冷却30分钟，加入盐包1[含无水硫酸镁6.0g与无水乙酸钠1.5g的混合粉末]，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，离心(8500转/min)5分钟，取上清液9mL，置SPE PSA Packing净化管，加入盐包2[含无水硫酸镁1199.8mg，N-丙基乙二胺(PSA)400.1mg，十八烷基硅烷键合硅胶400.1mg，石墨化炭黑45.0mg]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟使净化完全，离心(8500转/min)5分钟，精密吸取上清液4mL，置氮吹仪上于30℃水浴浓缩至约0.1mL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。
h.快速、高通量筛查样品中的农药
首先，准确吸取浓度为50mg/L的正构烷烃C9～C33混合对照溶液1.0μL，注入GC/MS系统按上述色谱质谱条件进行分析，并确认正构烷烃C9～C33各色谱峰位置正确，GC/MS系统自动计算出目标农药的预测保留时间。然后，准确吸取供试品溶液1.0μL进样分析，根据预测保留时间和质荷比(m/z)筛查样品中存在何种农药。图1显示利用保留指数对目标农药辅助定性示意图；图2显示利用保留指数对不同仪器设备上目标农药预测保留时间的示意图。
i.定量检测被筛查到的农药
根据预先筛查得到的农药，制备相应的基质匹配农药对照品溶液。精密吸取系列基质混合对照品溶液各1.0μL注入GC/MS系统按上述色谱质谱条件进行分析，制备标准曲线；最后分别吸取供试品溶液1.0μL，进样测定，用同位素内标法计算待测农药的含量。
实验例2本发明的方法学验证
按照2015版《中国药典》附录“中药质量标准分析方法验证指导原则”要求对本发明进行方法学验证，确保本发明方法所测得的数据真实可靠。
2.1专属性考察(取样空白试验)
为考察提取溶剂和提取材料对供试品是否存在干扰，按照供试品溶液的制备方法，制备缺少待测药材的阴性供试品溶液，注入气质仪测定。结果显示目标农药在阴性供试品溶液中均未检测出，表明提取溶剂和提取材料对实验结果无干扰。
2.2精密度考察
取同一份基质混合对照品溶液(浓度为100μg/L)，连续进样6次，每次1.0μL，记录目标农药的色谱峰面积。结果显示测定的农药的色谱峰面积的RSD位于0.73％～1.65％之间，表明仪器的精密度良好。
2.3检测限和定量限考察
检测下限和定量下限用来评估方法的灵敏性，实验中采用信噪比法。用上述已知低浓度(浓度为5μg/L)的基质混合对照品溶液所测得信号进行计算，以信噪比为3:1时相应的浓度为检测下限，以信噪比为10:1时相应的浓度为定量下限，采用峰对峰模式计算。表1是对八角茴香农药成分检测限和定量限的考察，结果显示，本方法针对目标农药的检测具有较高的检测灵敏度。
表1 12种拟除虫菊酯类农药检测参数优化结果
2.4线性关系考察
将上述所得系列基质混合对照品溶液，分别进样1.0μL测定，记录各待测物质的色谱峰面积。以峰面积比为纵坐标(Y)，进样浓度比为横坐标(X)，绘制标准曲线。结果显示测定的目标农药在进样浓度范围内的线性关系良好。
2.5稳定性考察
取同一供试品溶液，分别于制备后0、2、4、8、24、48h内进样测定，记录12个目标农药的色谱峰面积，计算RSD。结果显示，测定的待测目标农药在48小时内色谱峰面积的RSD均小于3.0％，表明在48小时内供试品溶液的稳定性良好(需要保持每个进样瓶盖的密封性)。
2.6准确性考察(加样回收试验)
取同一批次样品粉末约1.500g(过三号筛)，共12份(编号1～12)，准确称定，置50mL QuEChERS Extract tubes中，编号1～6分别加入混合对照品溶液(100μg/L)100μL，作为浓度水平1；编号7～12分别加入混合对照品溶液(1000μg/L)100μL，作为浓度水平2；然后同“供试品溶液的制备方法”制备供试品溶液，进样测定各目标农药的色谱峰面积，计算含量和回收率。结果显示目标农药的回收率在80.23％～94.73％之间，表明方法的准确性在可接受的范围内。
通过以上方法学考察，可以看出本发明所述方法具有较好的准确性，可以真实的反映样品中的含量，方法可靠。
实验例3检测八角茴香中12种拟除虫菊酯类农药残留的含量
供试品：八角茴香药材；
对照品：C9～C33正构烷烃混标标准品(1000mg/L,批号：110219-06-1ML)购买于美国o2si smart solutions公司；12种菊酯类农药混合对照品(100μg/mL,批号：06031629)购买于德国Neochema GmbH；氘代倍硫磷对照品(Fenthion D6,100μg/mL,批号：96566AC)购买于德国Dr.Ehrenstorfer GmbH；
仪器：GCMS-TQ8050三重四极杆气质联用仪，日本岛津公司，配备AOC-20i自动进样器；TGL-16冷冻高速离心机，四川蜀科公司；XS–205电子天平，AL–204电子天平，瑞士Mettler Toledo公司；1.0～10μL、10～100μL移液枪，德国Eppendorf公司；超声仪，南京新辰生物科技有限公司；Milli-Q超纯水制备系统，美国Millipore公司。
a.色谱条件
以SHIMADZU SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm)为色谱柱；进样口温度为250℃，进样量为1.0μL，不分流进样，高压进样压力为250KPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒线速度模式；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；柱平衡时间为2分钟。
b.质谱条件
离子源为电子轰击源(EI)，离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；质谱监测模式为多反应监测，溶剂延迟时间为6分钟。
c.农药混合对照品溶液的制备
精密量取12种菊酯类农药混合对照品，用正己烷分别制成每1L含每种农药化合物100μg和1000μg的两种溶液，即得。
d.内标溶液的制备
使用氘代倍硫磷作为菊酯类农残测定的内标物质。精密量取内标氘代倍硫磷对照品适量，加正己烷制成每1mL含5μg的溶液，即得。
e.基质混合对照品溶液的制备
取空白基质样品3g(空白基质样品是指通过本发明筛查到的不含农药的八角茴香)，共6份，同供试品溶液的制备方法处理至“置氮吹仪上于30℃水浴浓缩至约0.1mL”，分别加入混合对照品溶液(100μg/L)50μL、100μL，混合对照品溶液(1000μg/L)50μL、100μL、200μL、400μL，加正己烷定容至1mL，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过(0.22μm)，取续滤液，即得系列基质混合对照品溶液。
f.正构烷烃混合对照品溶液的制备
精密量取C9～C33正构烷烃混合标准品(1000mg/L)0.5mL,用正己烷稀释成浓度为50mg/L的溶液，即得。
g.供试品溶液的制备
粉碎八角茴香药材(过三号筛)，取约3g，准确称定，置50mL QuEChERS Extracttubes中，加入1％冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置50分钟，精密加入乙腈15mL与内标溶液l00μL涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，置于冰浴中冷却30分钟，加入盐包1[含无水硫酸镁6.0g与无水乙酸钠1.5g的混合粉末]，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，离心(8500转/min)5分钟，取上清液9mL，置SPE PSAPacking净化管，加入盐包2[含无水硫酸镁1199.8mg，N-丙基乙二胺(PSA)400.1mg，十八烷基硅烷键合硅胶400.1mg，石墨化炭黑45.0mg]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟使净化完全，离心(8500转/min)5分钟，精密吸取上清液4mL，置氮吹仪上于30℃水浴浓缩至约0.1mL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。
h.快速、高通量筛查农药
首先，准确吸取浓度为50mg/L的正构烷烃C9～C33混合对照溶液1.0μL，注入GC/MS系统按上述色谱质谱条件进行分析，并确认正构烷烃C9～C33各色谱峰位置正确，然后结合Smart Database-Pesticides database农药数据库，GC/MS系统自动计算出12个目标农药的预测保留时间。然后，准确吸取供试品溶液1.0μL进样分析，根据预测保留时间和质荷比(m/z)筛查样品中存在何种农药。
i.定量分析被筛查到的农药
根据预先筛查得到的农药，制备空白基质匹配农药对照品溶液。精密吸取系列基质混合对照品溶液各1.0μL注入GC/MS系统按上述色谱质谱条件进行分析，制备标准曲线；最后分别吸取供试品溶液1.0μL，进样测定，用同位素内标法计算待测农药的含量。
本实验中12个目标农药在12分钟左右开始出峰(七氟菊酯)，在23分钟左右完成测定(溴氰菊酯)，因此只需要C9～C33的保留时间来完成对目标农药的预测。结果显示，目标农药(包括同分异构体)的预测保留时间和实测保留时间非常接近，时间差均小于0.02min。因此，在系统无法自动定性定量或者自动识别错误的的情况下，可以参考该农药的预测保留时间来帮助定性。以氯氰菊酯-3为例，若想要对供试品中的氯氰菊酯-3准确定性，但是氯氰菊酯-2、氯氰菊酯-3、氯氰菊酯-4都位于图谱正中间，三者的保留时间分别为20.668、20.726、20.765min,相差0.058min、0.0039min，系统无法自动准确识别氯氰菊酯-3，在没有氯氰菊酯-3单体对照品的情况下，可参考氯氰菊酯4个同分异构体的预测保留时间，可以辅助定性氯氰菊酯-3，具体见图4，以此原理可辅助定性其他难以定性的目标农药。图3显示典型的正构烷烃C9～C33正构烷烃混合标准品溶液总离子流图，图4显示典型的八角茴香供试品溶液TIC图，表2显示12种目标农药保留时间和实际测得保留时间结果，表3显示20批次八角茴香中12个菊酯类农药残留测定结果。
测定结果显示，20个批次样品中有2个批次检测到了微量的氯氰菊酯，1个批次检测到了微量的氯菊酯。在样品产地采集过程中，发现八角茴香树与农作物土壤相距不远，因此微量的拟除虫聚酯残留可能是由于农作物生长期间喷洒农药残留于土壤中的转移。结合八角茴香的临床用量(3～6g)，表明3个批次样品中拟除虫菊酯类的残留量处于比较安全的范围内。
表2 12种目标农药保留时间和实际测得保留时间结果
*1，2，3，4代表该农药存在4个同分异构体
表3 20批次八角茴香中12种拟除虫菊酯类农药残留测定结果(μg/kg)
注：1.ND*---代表未检出2.其余农药由于未检测，未在表格中列出
实验例4检测西洋参饮片中130种有机氯和有机磷等农药残留的含量
供试品：西洋参饮片
对照品：C9～C33正构烷烃混合标准品(1000mg/L,批号：110219-06-1ML)购买于美国o2si smart solutions公司；130种有机氯和有机磷类农药对照品混合对照品(50μg/mL)购买于北京曼哈格生物科技有限公司；氘代倍硫磷对照品(Fenthion D6,100μg/mL,批号：96566AC)购买于德国Dr.Ehrenstorfer GmbH；
仪器：GCMS-TQ8050三重四极杆气质联用仪，日本岛津公司，配备AOC-20i自动进样器；TGL-16冷冻高速离心机，四川蜀科公司；XS–205电子天平，AL–204电子天平，瑞士Mettler Toledo公司；1.0～10μL、10～100μL移液枪，德国Eppendorf公司；超声仪，40KHz，南京新辰生物科技有限公司；Milli-Q超纯水制备系统，美国Millipore公司。
a.色谱条件
以SHIMADZU SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm)为色谱柱；进样口温度为250℃，进样量为1.0μL，不分流进样，高压进样压力为250KPa；载气为高纯氦气，载气控制方式为恒线速度模式；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；柱平衡时间为2分钟。
b.质谱条件
离子源为电子轰击源(EI)，离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；质谱监测模式为多反应监测，溶剂延迟时间为6分钟。
c.农药混合对照品溶液的制备
精密量取130种有机氯和有机磷类农药对照品混合对照品适量，用正己烷分别制成每1L含100μg和1000μg的两种溶液，即得。
d.内标溶液的制备
使用氘代倍硫磷作为内标物质。精密量取内标氘代倍硫磷对照品适量，加正己烷制成每l mL含5μg的溶液，即得。
e.基质混合对照品溶液的制备
取空白基质样品3g(空白基质样品是指通过本发明筛查到的不含农药的西洋参饮片)，共6份，同供试品溶液的制备方法处理至“置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.1mL”，分别加入混合对照品溶液(100μg/L)50μL、100μL，混合对照品溶液(1000μg/L)50μL、100μL、200μL、400μL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用微孔滤膜滤过(0.22μm)，取续滤液，即得系列基质混合对照品溶液。
f.正构烷烃混合对照品溶液的制备
精密量取C9～C33正构烷烃混合标准品(1000mg/L)0.5mL,用正己烷稀释成浓度为50mg/L的溶液，即得。
g.供试品溶液的制备
粉碎西洋参饮片(过三号筛)，取约3g，准确称定，置50mL QuEChERS Extracttubes中，加入1％冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置50分钟，精密加入乙腈15mL与内标溶液l00μL涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，置于冰浴中冷却30分钟，加入盐包1[含无水硫酸镁6.0g与无水乙酸钠1.5g的混合粉末]，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟，离心(8500转/min)5分钟，取上清液9mL，置SPE PSAPacking净化管，加入盐包2[含无水硫酸镁1199.8mg，N-丙基乙二胺(PSA)400.1mg，十八烷基硅烷键合硅胶400.1mg，石墨化炭黑45.0mg]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈振荡(800次/min)5分钟使净化完全，离心(8500转/min)5分钟，精密吸取上清液4mL，置氮吹仪上于30℃水浴浓缩至约0.1mL，加正己烷定容至l mL，涡旋混匀，用0.22μm微孔滤膜滤过，即得。
h.快速、高通量筛查农药
首先，准确吸取浓度为50mg/L的正构烷烃C9～C33混合对照溶液1.0μL，注入GC/MS系统按上述色谱质谱条件进行分析，并确认正构烷烃C9～C33各色谱峰位置正确，GC/MS系统自动计算出目标农药的预测保留时间。然后，准确吸取供试品溶液1.0μL进样分析，根据预测保留时间和质荷比(m/z)筛查样品中存在何种农药。
i.定量分析被筛查到的农药
根据预先筛查得到的农药，制备空白基质匹配农药对照品溶液。精密吸取系列基质混合对照品溶液各1.0μL注入GC/MS系统按上述色谱质谱条件分析，制备标准曲线；最后分别吸取供试品溶液1.0μL进样测定，用同位素内标法计算待测农药的含量。
表4显示130种农药的预测保留时间和实际测得保留时间结果，表5显示20批次西洋参中农药残留测定结果，图5显示典型的西洋参对照品溶液(A)和供试品溶液(B)TIC图，图6显示典型的西洋参供试品中被检测到的农药的质量色谱图。测定结果显示，从检出农药种类来看，西洋参中主要检测到了有机氯类农药，共计检出8种有机氯农药。从检出率来看，共有20个批次西洋参药材检测到了有机氯类农残，检出率为100％；共有16个批次检测到了毒死蜱，检出率为80％；共有18个批次检测到了腐霉利，检出率为90％。从检出量来看，有机氯类农药超标现象比较普遍和严重。有机氯类农药以五氯硝基苯为例，其残留量范围为39.70～1397.46μg/kg，毒死蜱的残留量范围为14.68～627.21μg/kg，腐霉利的残留量为26.71～294.75μg/kg。可见腐霉利在西洋参防止烂根中的应用比较普遍，在西洋参中的残留也比较普遍，并且残留量范围也较大。因此有必要加强对西洋参药材中腐霉利、毒死蜱残留量的监控。本次实验中全部样品都检测到了有机氯类农残，并且残留量范围也较大，因此极有必要加强对西洋参药材中有机氯类农残残留量监控，以保障西洋参药材的临床使用安全性。
表4 130种农药的预测保留时间和实际测得保留时间结果
表5 20批次西洋参中农药残留测定结果(μg/kg)
注：1.ND*---代表未检出2.其余农药由于未检测，未在表格中列出
综上，本发明方法不必需要大量农药对照品就能帮助分析人员快速筛查出样品中含有的农药种类，然后再对筛查出来的农药进行靶向定量分析，大大减轻了实验强度，提高了分析效率，极大降低了分析成本。在质谱图中有严重干扰时能帮助分析人员准确识别目标农药。本发明方法快速、方便、低检测成本的检测中药产品中的农药残留量，符合中药质量安全控制的发展方向。

Claims (13)

1.一种快速筛查中药产品中农药残留的方法，其特征在于：它是采用气相色谱串联三重四极杆质谱法筛查，具体包括如下操作步骤：
1)对照品溶液的制备：取C9～C33正构烷烃混合对照品，加正己烷溶解，即得；
2)供试品溶液的制备：取待测样品，粉碎过筛，加冰醋酸浸润，再加乙腈，振荡5-10min，冰浴30-60min，再加入无水硫酸镁与无水乙酸钠，摇散，振荡5-10min，离心，取上清液，加入无水硫酸镁，N-丙基乙二胺，十八烷基硅烷键合硅胶，石墨化炭黑，混匀，振荡5-10min，离心，再取上清液浓缩至0.05-0.2mL，加正己烷定容至1.0mL，混匀，过滤即得；
3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：毛细管柱；进样口温度为250℃，进样压力为250KPa；载气控制方式为恒线速度模式；程序升温：初始温度为50℃，保持1分钟，先以每分钟25℃升温至125℃，再以每分钟10℃升温至300℃，保持15分钟；
质谱条件：离子源为电子轰击源；质谱监测模式为多反应监测；
4)根据C9～C33色谱峰保留时间和Smart Database-Pesticides database农药数据库，用GC/MS系统计算农药的预测保留时间，再根据农药预测保留时间和质荷比(m/z)与供试品色谱图中色谱峰比对，筛查待测样品中农药的种类。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤1)所述对照品溶液中每1L含C9～C33正构烷烃混合对照品50mg。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤2)所述待测样品为中药原药材、中药饮片和/或含有中药饮片的复方制剂；所述冰醋酸为1％冰醋酸溶液。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤2)所述待测样品、冰醋酸、乙腈、无水硫酸镁、无水乙酸钠的质量体积比为3g：15ml：15ml：6g：1.5g；所述上清液与无水硫酸镁，N-丙基乙二胺，十八烷基硅烷键合硅胶，石墨化炭黑的质量体积比为9mL：1199.8mg：400.1mg：400.1mg：45.0mg。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤2)所述浸润后放置50min；所述振荡频率800次/min，时间5min；所述冰浴30min；所述离心转速8500转/min，时间5min。
6.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤2)所述取上清液浓缩是取4ml上清液于氮吹仪上30℃水浴浓缩至0.1mL。
7.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤3)所述色谱条件中毛细管柱为SHIMADZUSH-Rxi-5Sil MS毛细管柱，规格30m×0.25mm，0.25μm；进样量为1.0μL，不分流进样；载气为高纯氦；色谱柱流量为1.69mL/min，线速度为47.2cm/sec，吹扫流量为5mL/min；柱平衡时间为2分钟。
8.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤3)所述质谱条件中离子化能量70eV，离子源温度为230℃，质谱传输接口温度为250℃，碰撞气为氩气；溶剂延迟时间为6分钟。
9.一种按照权利要求1-8所述方法筛查到的农药的含量测定方法，其特征在于，它包括如下步骤：
a、对照品溶液的制备：取权利要求1-8所述方法筛查到的农药的对照品，混合，加正己烷溶解，即得；
b、内标溶液的制备：取氘代倍硫磷对照品，加正己烷溶解，既得；
c、基质混合对照品溶液的制备：取经权利要求1-8所述方法筛查得到的不含农药的待测样品，按步骤2)所述方法处理至浓缩，再加入步骤a对照品溶液，用正己烷定容至1mL，混匀，过滤，取续滤液，即得；其中在加乙腈时，再加入步骤b内标溶液；
d、供试品溶液的制备：取经权利要求1-8所述方法筛查得到的含农药的待测样品，按照步骤2)所述方法制备；其中在加乙腈时，再加入步骤b内标溶液；
e、分别吸取系列浓度的基质混合对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，按照步骤3)所述色谱条件和质谱条件检测，根据混合对照品色谱图绘制标准曲线，用同位素内标法计算筛查到的含有农药的待测样品中农药的含量。
10.根据权利要求9所述方法，其特征在于：步骤a所述对照品溶液中混合农药对照品浓度分别为100μg/mL和1000μg/mL。
11.根据权利要求9所述方法，其特征在于：步骤b所述内标溶液每1ml含氘代倍硫磷5μg。
12.根据权利要求9所述方法，其特征在于：步骤c所述待测样品与100μg/mL对照品溶液的质量体积比分别为3g:50μL和3g:10μL；所述待测样品与1000μg/mL对照品溶液的质量体积比分别为3g:50μL、3g:100μL、3g:200μL和3g:400μL。
13.根据权利要求9所述方法，其特征在于：步骤c和d所述内标溶液与乙腈的体积比为100μL：15ml。
CN201910533645.4A 2019-06-19 2019-06-19 一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其应用 Pending CN110231419A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910533645.4A CN110231419A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910533645.4A CN110231419A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110231419A true CN110231419A (zh) 2019-09-13

Family

ID=67856849

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910533645.4A Pending CN110231419A (zh) 2019-06-19 2019-06-19 一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110231419A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110850014A (zh) * 2019-10-29 2020-02-28 夏永刚 一种部分甲基化阿尔迪醇乙酸酯保留指数数据库及其构建方法和应用
CN112229929A (zh) * 2020-10-10 2021-01-15 贵阳海关综合技术中心(贵州国际旅行卫生保健中心、贵阳海关口岸门诊部) 一种在线gpc-gc-ms/ms非靶向快速筛查茶叶中农药残留的方法
CN117434186A (zh) * 2023-12-22 2024-01-23 中国市政工程华北设计研究总院有限公司 一种携污雨水复杂臭味气体组成的同步识别与量化方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108387655A (zh) * 2018-02-11 2018-08-10 四川省食品药品检验检测院 一种用于检测麦冬中农药残留量的方法
CN109557197A (zh) * 2017-04-17 2019-04-02 中国检验检疫科学研究院 基于GC-Q-Orbitrap的食用农产品中农药化合物电子身份数据库及检测方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109557197A (zh) * 2017-04-17 2019-04-02 中国检验检疫科学研究院 基于GC-Q-Orbitrap的食用农产品中农药化合物电子身份数据库及检测方法
CN108387655A (zh) * 2018-02-11 2018-08-10 四川省食品药品检验检测院 一种用于检测麦冬中农药残留量的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
李灵娥 等: "20种农药的标准Kováts指数及其在程序升温下的活数据库定性", 《分析化学》 *
楼正云 等: "第四讲：茶叶中农药残留的气相(质)色谱测定方法(续)", 《中国茶叶》 *
田丽 等: "在线凝胶色谱净化结合三重四极杆气质联用仪在非目标物农药残留筛查中的应用", 《环境化学》 *
谭鹏 等: "基于QuEChERS-GC-QQQ-MS/MS法同时测定知母中58种农药残留", 《中草药》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110850014A (zh) * 2019-10-29 2020-02-28 夏永刚 一种部分甲基化阿尔迪醇乙酸酯保留指数数据库及其构建方法和应用
CN112229929A (zh) * 2020-10-10 2021-01-15 贵阳海关综合技术中心(贵州国际旅行卫生保健中心、贵阳海关口岸门诊部) 一种在线gpc-gc-ms/ms非靶向快速筛查茶叶中农药残留的方法
CN117434186A (zh) * 2023-12-22 2024-01-23 中国市政工程华北设计研究总院有限公司 一种携污雨水复杂臭味气体组成的同步识别与量化方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Bolanos et al. Application of hollow fibre liquid phase microextraction for the multiresidue determination of pesticides in alcoholic beverages by ultra-high pressure liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry
CN110231419A (zh) 一种基于保留指数的中药产品中农药残留的检测方法及其应用
Shen et al. Rapid control of Chinese star anise fruits and teas for neurotoxic anisatin by direct analysis in real time high resolution mass spectrometry
CN108760909A (zh) 一种食用农产品农药残留非靶标、多指标、快速侦测的电子化方法
JP2021512292A (ja) 残留農薬のｍｒｍ遷移を検出するように構成される、トリプル四重極型質量分析計
CN103913528B (zh) 一种茶鲜叶中拟除虫菊酯类农药的定量检测方法
CN106324123B (zh) 烟草及烟草制品中农药残留量的测定方法
WO2018163086A1 (en) Polar pesticide determination using chromatography
CN103926348B (zh) 同时测定茶鲜叶中有机磷类及拟除虫菊酯类农药残留量的分析方法
CN101963602B (zh) 检测尿中安眠镇静药物及其代谢物的柱切换lc-ms/ms分析方法
CN106353418B (zh) 一种用气相色谱-三重四级杆二级质谱同时测定茶青中28种农药残留的方法
Van de Riet et al. Determination of malachite green and leucomalachite green in a variety of aquacultured products by liquid chromatography with tandem mass spectrometry detection
Fan et al. Screening of multi-mycotoxins in fruits by ultra-performance liquid chromatography coupled to ion mobility quadrupole time-of-flight mass spectrometry
CN107941980A (zh) 水产品中利福平残留的超高效液相色谱串联质谱快速测定方法
CN108387655A (zh) 一种用于检测麦冬中农药残留量的方法
CN112229929A (zh) 一种在线gpc-gc-ms/ms非靶向快速筛查茶叶中农药残留的方法
CN103869025A (zh) 一种检测茶鲜叶中农药残留的前处理方法
CN105486796A (zh) 一种瓜果类水果中544种农药残留lc-q-tof/ms侦测技术
Xu et al. Dissipation behavior, residue transfer, and safety evaluation of chlorantraniliprole and indoxacarb during tea growing and brewing by ultrahigh-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry
CN106053634A (zh) 一种熟肉制品中n‑二甲基亚硝胺检测方法
Du et al. Determination of 43 pesticide residues in intact grape berries (Vitis vinifera L.) by using an ultrasound-assisted acetonitrile extraction method followed by LC–MS/MS
CN106918655A (zh) 一种远志uplc测定方法
CN107561194A (zh) 一种果蔬多农药残留快速检测方法
CN105467056A (zh) 一种茄果类蔬菜中708种农药残留gc-q-tof/ms侦测技术
CN106290686B (zh) Hplc-ms-ms测定王老吉凉茶成分含量的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190913

RJ01 Rejection of invention patent application after publication