CN110226633A - 一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料及其制备方法，其包括富硒牡蛎小分子蛋白肽40～80份、富硒熟小麦粉15～30份、魔芋粉3～10份、低聚果糖5～30份、植物蛋白2～25份、熟藜麦粉1～10份、脱脂奶粉15～30份等，所述固体饮料经含下述各项的混合物灭菌处理：1)DL‑苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐和枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐，2)邻羟基苯甲酸甲酯，3)至少一种酪丝缬肽‑二氢卟吩e6金属络合物酯。固体饮料营养成分搭配全面、均衡、合理，效果好、见效快，冲调即食，混合物中的各项具有协同增效作用，迅速抑制并灭除饮料中的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染。

Description

一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料及其制备方法
技术领域
本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料及其制备方法以及消毒方法。
背景技术
固体饮料是指以糖、乳和乳制品、蛋或蛋制品、果汁或食用植物提取物等为主要原料，添加适量的辅料或食品添加剂制成的每100克成品水分不高于5克的固体制品，呈粉末状、颗粒状或块状。固体饮料属于软饮料的一类，一直以来，固体饮料因具有便于携带、易于保存、体积小、便于运输、食用方便、品种多样等特点备受消费者的青睐。但现有技术中的固体饮料的品质参差不齐，口感较差，营养价值低。
然而由于在生产过程中多种营养素和各种可能的微生物的引入，即便是固体饮料依然存在容易地被微生物污染的可能，这最终导致产品腐败和无用。此外，饮料的微生物污染代表对于使用者的健康风险。通过使用化学防腐剂来阻止微生物在这些饮料中存活或生长。由于世界范围增加的商品流动，在饮料中细菌越来越值得注意，这些细菌是饮料制造商迄今未知的。特别地在乙酸菌的情况下，已经显示出防腐剂不是充分足够有效的并且因此以非常高的浓度使用以便阻止这些细菌能够增殖并且于是由此污染该饮料(Horsakova,I.等人，亚西亚菌属作为使经包装的非充气水果饮料腐败的细菌(Asaia sp.as a bacteriumdecaying the packaged still fruit beverages)，捷克，食品科学杂志(Journal ofFood Science)，27，第362～365页，2009年)。然而，高浓度的防腐剂的使用从经济观点来看是不令人希望的并且受到法律规定限制。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种高效杀灭饮料中各种乙酸菌的混合物及利用其进行的消毒方法，混合物中的各项具有协同增效作用，可用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌和/或用于饮料的后续保存，混合物中的各项联合应用时的协同指数SI<1，可高效发挥协同增效作用，迅速抑制并灭除饮料中的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染。
本发明的目的之二在于提供一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料及其制备方法，固体饮料营养成分搭配全面、均衡、合理，饱腹感好，效果好、见效快，冲调即食，利于人体吸收，有利于帮助人们进行塑身，所述固体饮料富含蛋白质，同时富含维生素类及硒，营养价值高，使用本发明所述混合物进行灭菌处理，可在不使用防腐剂的状况下延长饮料的保存期限，维持固体饮料冲调后的色泽、香气、滋味、营养成分等的高水平存在。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
[1]包含以下各项的具有协同增效作用的混合物：
1)DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐和枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐的混合物，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及
3)至少一种如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，
其中，式(1)中M选自选自正二价或正四价离子，例如可以是Mn2+、Fe2+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Zn2+、Hg2+、Ca2+、Mg2+、Sr2+、Ba2+、Pb2+、Sn2+、Pt2+、Rh2+、Ru2+、Pb4+、Ti4+、Sn4+；式(1)中M更优选地选自Ni2+、Zn2+、Pb2+、Ru2+；
所述混合物用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
所使用的DL-苹果酸的碱金属盐优选地选自DL-苹果酸锂、DL-苹果酸钠和DL-苹果酸钾的至少一种，更优选地是DL-苹果酸钾。
所使用的DL-苹果酸的碱土金属盐优选地选自DL-苹果酸铍、DL-苹果酸镁和DL-苹果酸钙的至少一种，更优选地是DL-苹果酸镁。
所使用的枸椽酸的碱金属盐优选地选自枸椽酸锂、枸椽酸钠和枸椽酸钾的至少一种，更优选地是枸椽酸钾。
所使用的枸椽酸的碱土金属盐优选地选自枸椽酸铍、枸椽酸镁和枸椽酸钙的至少一种，更优选地是枸椽酸镁。
所使用的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的制备方法，包括下述步骤：
1)避光及保护气体存在下，酪丝缬肽与二氢卟吩e6金属络合物发生酯化；
2)离心，上清液以去离子水透析，冷冻干燥；
3)干燥物用硅胶柱层析分离，以二氯甲烷-乙腈梯度洗脱液洗脱；
4)挥去二氯甲烷-乙腈后，以乙腈溶解，用C-18反相柱层析精制纯化，以乙腈-水梯度洗脱液洗脱；
5)所得纯化液浓缩至干，再将浓缩物干燥即得。
所使用的保护气体是氮气。
所使用的二氯甲烷-乙腈梯度洗脱液的体积比是1:0、50:1、10:1、1:1、1:10、1:50、1:0。
所使用的乙腈-水梯度洗脱液的体积比是1:0、50:1、10:1、1:1、1:10、1:50、1:0。
浓缩物干燥所使用的方法包括但不限于真空干燥至恒重或冷冻干燥至恒重。
本发明方法中以上述将酪丝缬肽与二氢卟吩e6金属络合物先行酯化，再行透析，再行硅胶柱层析分离、反相柱层析精制纯化，最后干燥的方法制备酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，制备过程易控，酪丝缬肽作为溶于水的极性端，使得酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯溶于水，解决了Ce6水溶性差的问题。终产物酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的得率与纯度均较高，可以极大地提高其与DL-苹果酸或枸椽酸和/或其盐以及与邻羟基苯甲酸甲酯协同高效控制乙酸菌的抑菌作用，可被应用于饮料如固体饮料等中的消毒处理。
[2]项[1]所述混合物的用途，其包括项[1]所述混合物用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌。
项[1]所述混合物的用途，还包括项[1]所述混合物用于饮料的后续保存。
本领域的技术人员已知，来自乙酸菌家族的细菌总体上是革兰氏阴性、需氧的杆菌，这些细菌的模式株是醋化醋杆菌并且新颖的细菌已经同时指派给主要在亚西亚菌属(Asaiasp)的组中的乙酸菌家族。对所述饮料灭菌和/或用于饮料的后续保存是指从所述饮料中去除乙酸菌，这些乙酸菌选自下组:亚细亚菌属(Asaias p.)、醋杆菌属(Acetobactersp.)、葡糖杆菌属(Gluconobacter sp.)、葡糖醋杆菌属(Gluconacetobacter sp.)、糖杆菌属(Saccharibacter sp.)、斯瓦米纳坦菌属(Swaminanthia sp.)、酸单胞菌属(Acidomonassp.)、柯扎克氏菌属(Kozakia sp.)、新亚细亚菌属(Neoasaia sp.)、颗粒杆菌属(Granulibacter sp.)、酸胞菌属(Acidocella sp.)、嗜酸杆菌属(Acidiphilium sp.)、玫瑰球菌属(Roseococcus sp.)、酸球形菌属(Acidosphaera sp.)、红球形菌属(Rhodopilasp.)。该混合物特别优选地对于亚西亚羊蹄甲菌(Asaia bogorensis)、亚西亚蜘蛛兰菌(Asaia lannaensis)、氧化葡糖杆菌和絮凝葡糖醋杆菌(Gluconacetobacterliquefaciens)有效。
总体上，基于待灭菌的饮料的量的25～5000ppm的量使用DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐，还能够以更小的或更大的量使用；基于待灭菌的饮料的量，使用DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐的量优选地在100～2000ppm之间，更优选地在500～1000ppm之间。
总体上，基于待灭菌的饮料的量的25～5000ppm的量使用枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐，还能够以更小的或更大的量使用；基于待灭菌的饮料的量，使用枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐的量优选地在100～2000ppm之间，更优选地在500～1000ppm之间。
总体上，基于待灭菌的饮料的量的25～100ppm的量使用邻羟基苯甲酸甲酯，当然还能够以更小的或更大的量使用；基于待灭菌的饮料的量，使用邻羟基苯甲酸甲酯的量优选地在25～75ppm之间，更优选地在50～75ppm之间。
总体上，基于待灭菌的饮料的量的10～500ppm的量使用如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，当然还能够以更小的或更大的量使用；基于待灭菌的饮料的量，使用如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的量优选在300～400ppm之间，更优选地在350～375ppm之间。
根据本发明，乙酸菌的污染应理解为是指对于本领域的技术人员而言从现有技术已知的检测方法引起饮料中乙酸菌的显著水平的检出。根据这些方法进行的细菌的检出在本发明的上下文中已经是一种污染且需清除。本发明方法项[1]中包含1)DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐或枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐，以及2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及3)至少一种如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯各项的具有协同增效作用的混合物可以发挥出用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌和/或用于饮料的后续保存的用途，上述1)、2)和3)中的各项联合应用时的协同指数SI<1，可高效发挥协同增效作用，迅速抑制并灭除饮料中的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染，抑制乙酸菌对饮料的酸化作用，并可在不使用防腐剂的状况下延长饮料的保存期限，维持饮料或固体饮料冲调后的色泽、香气、滋味、营养成分等的高水平存在。
由于根据本发明的目的还涉及将上述混合物掺入到待灭菌的饮料中，本发明同样涉及[3]一种用于已经被乙酸菌污染的饮料灭菌的方法，包括将如项[1]或[2]所述的混合物结合到所述饮料中。
该结合可以例如通过以任何顺序分开地加入所述混合物各项a)、b)和c)或者以总混合物形式加入上述混合物来进行。这种混合物可以通过另外的溶剂或者还通过其他添加剂(诸如乳化剂)或其他合适的食品添加剂来稀释。可以使用亲水的、有机的并且与水混溶的溶剂作为溶剂。优选地，不加入额外的溶剂。这些化合物优选地分别结合到所述饮料中。
根据本发明使用的混合物以一种协同的方式发挥抵抗乙酸菌的作用，本发明同样涉及[4]一种用于保存已灭菌饮料的方法，包括将如项[1]或[2]所述的混合物结合到所述饮料中。
依据本发明的目的还涉及将上述混合物掺入到待灭菌的饮料中，本发明还涉及[5]一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料，按照重量份计其包括下述重量份的各项：富硒牡蛎小分子蛋白肽40～80重量份、富硒熟小麦粉15～30重量份、螺旋藻粉0.1～3重量份、魔芋粉3～10重量份、低聚果糖5～30重量份、植物蛋白2～25重量份、熟藜麦粉1～10重量份、脱脂奶粉15～30重量份、复合矿物质0.1～5重量份、复合维生素0.1～5重量份，所述固体饮料经项[1]～[4]任一项所述的混合物灭菌处理。在本发明中，所述富硒牡蛎小分子蛋白肽可以迅速补充体内所需的营养物质，并且可以几乎不消耗体内能量达到所需营养部位，本发明对所述富硒牡蛎小分子蛋白肽的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可，也可由富硒牡蛎经过清理、粉碎、蒸煮、酶解、过滤、浓缩、干燥等工序制得。本发明的固体饮料以富硒牡蛎小分子蛋白肽和富硒熟小麦粉为主要原料，再配以螺旋藻粉、魔芋粉、低聚果糖、植物蛋白、熟藜麦粉、脱脂奶粉、复合矿物质和复合维生素等成分，使得本发明的固体饮料营养成分搭配全面、均衡、合理，饱腹感好，效果好、见效快，冲调即食，利于人体吸收，有利于帮助人们进行塑身，能够很好地满足人们对完美身材的要求，本发明所述固体饮料富含蛋白质，同时富含维生素类及硒，营养价值高。
作为本发明优选的实施方式，所述复合维生素优选为维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、维生素E、泛酸和维生素C中的任意两种以上的混合。本发明对所述维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、维生素E、泛酸和维生素C的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。
作为本发明优选的实施方式，所述复合矿物质优选为葡萄糖酸锌、葡萄糖酸亚铁、乳酸钙、碳酸钙、EDTA铁钠、氧化镁和磷酸氢钙中的任意两种以上的混合。本发明对所述葡萄糖酸锌、葡萄糖酸亚铁、乳酸钙、碳酸钙、EDTA铁钠、氧化镁和磷酸氢钙的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。
依据本发明的目的，本发明还涉及[6]:如项[5]所述富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料的制备方法，其包括：
1)将项[5]中的各项粉碎至可通过不低于180目筛后按照配方量混合，溶于蒸馏水；
2)步骤1)溶液中掺入项[1]～[4]任一项所述的混合物，混匀后静置1～48h，干燥至恒重并粉碎至固体饮料所需粒径即得。
本发明固体饮料的制备方法物料处理简单，不会造成营养成分的损失，同时将多种有效成分保留下来，既提高了原料的利用率，降低了生产成本，同时使有效成分被充分吸收；掺入项[1]～[4]任一项所述的混合物进行灭菌处理，可以迅速杀灭饮料中存留的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染，抑制乙酸菌对饮料的酸化作用，并可在不使用防腐剂的状况下延长饮料的保存期限，维持固体饮料冲调后的色泽、香气、滋味、营养成分等的高水平存在。
本发明的有益效果为：
1)本发明的固体饮料营养成分搭配全面、均衡、合理，饱腹感好，效果好、见效快，冲调即食，利于人体吸收，有利于帮助人们进行塑身，能够很好地满足人们对完美身材的要求，本发明所述固体饮料富含蛋白质，同时富含维生素类及硒，营养价值高；
2)使用本发明所述混合物进行灭菌处理，可以迅速杀灭饮料中存留的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染，抑制乙酸菌对饮料的酸化作用，并可在不使用防腐剂的状况下延长饮料的保存期限，维持固体饮料冲调后的色泽、香气、滋味、营养成分等的高水平存在；
3)本发明中包含1)DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐或枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐，以及2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及3)至少一种如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯各项的具有协同增效作用的混合物可以发挥出用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌和/或用于饮料的后续保存的用途，上述1)、2)和3)中的各项联合应用时的协同指数SI<1，可高效发挥协同增效作用，迅速抑制并灭除饮料中的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染；
4)本发明方法中以将酪丝缬肽与二氢卟吩e6金属络合物先行酯化，再行透析，再行硅胶柱层析分离、反相柱层析精制纯化，最后干燥的方法制备酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，制备过程易控，酪丝缬肽作为溶于水的极性端，使得酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯溶于水，解决了Ce6水溶性差的问题；
5)制备酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯时的终产物得率与纯度均较高，可以极大地提高其与DL-苹果酸或枸椽酸和/或其盐以及与邻羟基苯甲酸甲酯协同高效控制乙酸菌的抑菌作用，可被应用于饮料如固体饮料等中的消毒处理。
本发明采用了上述技术方案提供范文，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。
附图说明
图1为本发明的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯结构式示意图；
图2为本发明的经过本发明的混合物灭菌后的固体饮料中的乙酸菌的相对残留量示意图。
具体实施方式
除非另有定义，本文所使用的技术和科学术语，具有本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本发明使用本文中所描述的方法和材料；但本领域中已知的其他合适的方法和材料也可以被使用。本文中所描述的材料、方法和实例仅是说明性的，并不是用来作为限制。所有出版物、专利申请案、专利案、临时申请案、数据库条目及本文中提及的其它参考文献等，其整体被并入本文中作为参考。若有冲突，以本说明书包括定义为准。
由下面的详述、附图及权利要求，本发明的其它特征和优点将变得很明显。
对于语词“例如”(“for example”)和“如”(“such as”)及其语法等同物，短语“而不限于”(“and without limitation”)应被理解为遵循一般用法，除非另有明确说明。如本文所用，语词“约”(“about”)是指考虑到由于实验误差的变化。除非另有明确说明，本文所述的所有测量，无论是否有明确地使用，都要被理解为被语词“约”一词所修正。如本文所用，单数形式“一”，“一个”，和“该”(“a，”“an，”and“the”)都包括复数用法，除非上下文另有明确规定。
实施例1：
本实施例提供一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料，按照重量份计其包括下述重量份的各项：富硒牡蛎小分子蛋白肽50重量份、富硒熟小麦粉16重量份、螺旋藻粉0.5重量份、魔芋粉4重量份、低聚果糖5重量份、植物蛋白4重量份、熟藜麦粉2重量份、脱脂奶粉18重量份、复合矿物质0.5重量份、复合维生素0.5重量份，所述固体饮料经下述混合物灭菌处理。在本发明中，所述富硒牡蛎小分子蛋白肽可以迅速补充体内所需的营养物质，并且可以几乎不消耗体内能量达到所需营养部位，本发明对所述富硒牡蛎小分子蛋白肽的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可，也可由富硒牡蛎经过清理、粉碎、蒸煮、酶解、过滤、浓缩、干燥等工序制得。本发明的固体饮料以富硒牡蛎小分子蛋白肽和富硒熟小麦粉为主要原料，再配以螺旋藻粉、魔芋粉、低聚果糖、植物蛋白、熟藜麦粉、脱脂奶粉、复合矿物质和复合维生素等成分，使得本发明的固体饮料营养成分搭配全面、均衡、合理，饱腹感好，效果好、见效快，冲调即食，利于人体吸收，有利于帮助人们进行塑身，能够很好地满足人们对完美身材的要求，本发明所述固体饮料富含蛋白质，同时富含维生素类及硒，营养价值高。
所述复合维生素为均等含量的维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素E和维生素C的混合。所述复合维生素采用本领域常规市售产品。
所述复合矿物质为均等含量的葡萄糖酸锌、葡萄糖酸亚铁、乳酸钙、碳酸钙、EDTA铁钠、氧化镁和磷酸氢钙的混合。所述复合矿物质采用本领域常规市售产品即可。
上述富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料的制备方法包括：
1)将各项粉碎至可通过180目筛后按照配方量混合，溶于10倍蒸馏水；
2)步骤1)溶液中掺入下述混合物，混匀后静置12h，干燥至恒重并粉碎至固体饮料所需粒径即得。
本发明固体饮料的制备方法物料处理简单，不会造成营养成分的损失，同时将多种有效成分保留下来，既提高了原料的利用率，降低了生产成本，同时使有效成分被充分吸收；掺入下述混合物进行灭菌处理，可以迅速杀灭饮料中存留的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染，抑制乙酸菌对饮料的酸化作用，并可在不使用防腐剂的状况下延长饮料的保存期限，维持固体饮料冲调后的色泽、香气、滋味、营养成分等的高水平存在。
上述混合物为包含以下各项的具有协同增效作用的混合物：
1)DL-苹果酸碱金属盐和枸椽酸碱土金属盐，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及
3)如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，
其中，式(1)中M是Zn2+。
其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
所使用的DL-苹果酸碱金属盐是DL-苹果酸锂。
所使用的枸椽酸碱土金属盐是枸椽酸镁。
所述富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料的制备方法中，下述各项掺入饮料中的量是：
1)DL-苹果酸碱金属盐600ppm和枸椽酸碱土金属盐600ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯60ppm，以及
3)如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯350ppm。
所使用的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的制备方法，包括下述步骤：
1)避光及氮气存在下，酪丝缬肽与二氢卟吩e6金属络合物发生酯化；
2)离心，上清液以去离子水透析，冷冻干燥；
3)干燥物用硅胶柱层析分离，以二氯甲烷-乙腈梯度洗脱液洗脱；
4)挥去二氯甲烷-乙腈后，以乙腈溶解，用C-18反相柱层析精制纯化，以乙腈-水梯度洗脱液洗脱；
5)所得纯化液浓缩至干，再将浓缩物干燥即得。
所使用的二氯甲烷-乙腈梯度洗脱液的体积比是1:0、50:1、10:1、1:1、1:10、1:50、1:0。
所使用的乙腈-水梯度洗脱液的体积比是1:0、50:1、10:1、1:1、1:10、1:50、1:0。
浓缩物干燥所使用的方法是冷冻干燥至恒重。
本发明方法中以上述将酪丝缬肽与二氢卟吩e6金属络合物先行酯化，再行透析，再行硅胶柱层析分离、反相柱层析精制纯化，最后干燥的方法制备酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，制备过程易控，酪丝缬肽作为溶于水的极性端，使得酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯溶于水，解决了Ce6水溶性差的问题。终产物酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的得率与纯度均较高，可以极大地提高其与DL-苹果酸或枸椽酸和/或其盐以及与邻羟基苯甲酸甲酯协同高效控制乙酸菌的抑菌作用，可被应用于饮料如固体饮料等中的消毒处理。
实施例2：
本实施例提供下述各项：
项[1]：包含以下各项的具有协同增效作用的混合物：
1)DL-苹果酸钾、DL-苹果酸镁和枸椽酸钾，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及
3)如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，
其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
所使用的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的制备方法包括下述步骤：
1)避光及氮气存在下，酪丝缬肽与二氢卟吩e6金属络合物发生酯化；
2)离心，上清液以去离子水透析，冷冻干燥；
3)干燥物用硅胶柱层析分离，以二氯甲烷-乙腈梯度洗脱液洗脱；
4)挥去二氯甲烷-乙腈后，以乙腈溶解，用C-18反相柱层析精制纯化，以乙腈-水梯度洗脱液洗脱；
5)所得纯化液浓缩至干，再将浓缩物干燥即得。
所使用的二氯甲烷-乙腈梯度洗脱液的体积比是1:0、50:1、10:1、1:1、1:10、1:50、1:0。
所使用的乙腈-水梯度洗脱液的体积比是1:0、50:1、10:1、1:1、1:10、1:50、1:0。
浓缩物干燥所使用的方法是真空干燥至恒重。
本发明方法中以上述将酪丝缬肽与二氢卟吩e6金属络合物先行酯化，再行透析，再行硅胶柱层析分离、反相柱层析精制纯化，最后干燥的方法制备酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，制备过程易控，酪丝缬肽作为溶于水的极性端，使得酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯溶于水，解决了Ce6水溶性差的问题。终产物酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的得率与纯度均较高，可以极大地提高其与DL-苹果酸或枸椽酸和/或其盐以及与邻羟基苯甲酸甲酯协同高效控制乙酸菌的抑菌作用，可被应用于饮料如固体饮料等中的消毒处理。
项[2]：项[1]所述混合物的用途，其包括项[1]所述混合物用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌。
项[1]所述混合物的用途，还包括项[1]所述混合物用于饮料的后续保存。
总体上，基于待灭菌的饮料的量，所述DL-苹果酸钾的掺入量是300ppm、DL-苹果酸镁的掺入量是300ppm、枸椽酸钾的掺入量是300ppm、邻羟基苯甲酸甲酯的掺入量是70ppm、如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的掺入量是375ppm。
根据本发明，乙酸菌的污染应理解为是指对于本领域的技术人员而言从现有技术已知的检测方法引起饮料中乙酸菌的显著水平的检出。根据这些方法进行的细菌的检出在本发明的上下文中已经是一种污染且需清除。本发明方法项[1]中包含1)DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐或枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐，以及2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及3)至少一种如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯各项的具有协同增效作用的混合物可以发挥出用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌和/或用于饮料的后续保存的用途，上述1)、2)和3)中的各项联合应用时的协同指数SI<1，可高效发挥协同增效作用，迅速抑制并灭除饮料中的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染，抑制乙酸菌对饮料的酸化作用，并可在不使用防腐剂的状况下延长饮料的保存期限，维持饮料或固体饮料冲调后的色泽、香气、滋味、营养成分等的高水平存在。
项[3]：由于根据本发明的目的还涉及将上述混合物掺入到待灭菌的饮料中，本发明同样涉及一种用于已经被乙酸菌污染的饮料灭菌的方法，包括将如项[1]或[2]所述的混合物结合到所述饮料中。
该结合可以例如通过以任何顺序分开地加入所述混合物各项a)、b)和c)或者以总混合物形式加入上述混合物来进行。这种混合物可以通过另外的溶剂或者还通过其他添加剂(诸如乳化剂)或其他合适的食品添加剂来稀释。可以使用亲水的、有机的并且与水混溶的溶剂作为溶剂。优选地，不加入额外的溶剂。这些化合物优选地分别结合到所述饮料中。
项[4]：根据本发明使用的混合物以一种协同的方式发挥抵抗乙酸菌的作用，本发明同样涉及一种用于保存已灭菌饮料的方法，包括将如项[1]或[2]所述的混合物结合到所述饮料中。
项[5]：依据本发明的目的本发明还涉及一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料，按照重量份计其包括下述重量份的各项：富硒牡蛎小分子蛋白肽75重量份、富硒熟小麦粉25重量份、螺旋藻粉2重量份、魔芋粉8重量份、低聚果糖20重量份、植物蛋白10重量份、熟藜麦粉8重量份、脱脂奶粉20重量份、复合矿物质2重量份、复合维生素2重量份，所述固体饮料经项[1]～[4]任一项所述的混合物灭菌处理。在本发明中，所述富硒牡蛎小分子蛋白肽可以迅速补充体内所需的营养物质，并且可以几乎不消耗体内能量达到所需营养部位，本发明对所述富硒牡蛎小分子蛋白肽的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可，也可由富硒牡蛎经过清理、粉碎、蒸煮、酶解、过滤、浓缩、干燥等工序制得。本发明的固体饮料以富硒牡蛎小分子蛋白肽和富硒熟小麦粉为主要原料，再配以螺旋藻粉、魔芋粉、低聚果糖、植物蛋白、熟藜麦粉、脱脂奶粉、复合矿物质和复合维生素等成分，使得本发明的固体饮料营养成分搭配全面、均衡、合理，饱腹感好，效果好、见效快，冲调即食，利于人体吸收，有利于帮助人们进行塑身，能够很好地满足人们对完美身材的要求，本发明所述固体饮料富含蛋白质，同时富含维生素类及硒，营养价值高。
所述复合维生素是均等含量的维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、维生素E、泛酸和维生素C的混合。本发明对所述维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酸、维生素E、泛酸和维生素C的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。
作为本发明优选的实施方式，所述复合矿物质是均等含量的葡萄糖酸锌、葡萄糖酸亚铁、乳酸钙、碳酸钙、EDTA铁钠、氧化镁和磷酸氢钙的混合。本发明对所述葡萄糖酸锌、葡萄糖酸亚铁、乳酸钙、碳酸钙、EDTA铁钠、氧化镁和磷酸氢钙的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。
项[6]：依据本发明的目的，本发明还涉及项[5]所述富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料的制备方法，其包括：
1)将项[5]中的各项粉碎至可通过200目筛后按照配方量混合，溶于蒸馏水；
2)步骤1)溶液中掺入项[1]～[4]任一项所述的混合物，混匀后静置24h，干燥至恒重并粉碎至固体饮料所需粒径即得。
本发明固体饮料的制备方法物料处理简单，不会造成营养成分的损失，同时将多种有效成分保留下来，既提高了原料的利用率，降低了生产成本，同时使有效成分被充分吸收；掺入项[1]～[4]任一项所述的混合物进行灭菌处理，可以迅速杀灭饮料中存留的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染，抑制乙酸菌对饮料的酸化作用，并可在不使用防腐剂的状况下延长饮料的保存期限，维持固体饮料冲调后的色泽、香气、滋味、营养成分等的高水平存在。
实施例3：
实施例3与实施例2基本相同，不同之处在于实施例3中，所述具有协同增效作用的混合物如下：
1)DL-苹果酸钠300ppm和枸椽酸锂300ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯70ppm，以及
3)如式(1)所示且M是Ca2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯375ppm，其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
实施例4：
实施例4与实施例2基本相同，不同之处在于实施例4中，所述具有协同增效作用的混合物如下：
1)DL-苹果酸铍300ppm和枸椽酸300ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯70ppm，以及
3)如式(1)所示且M是Ni2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯375ppm，其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
实施例5：
实施例5与实施例2基本相同，不同之处在于实施例5中，所述具有协同增效作用的混合物如下：
1)DL-苹果酸钠150ppm、DL-苹果酸钾150ppm和枸椽酸镁300ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯70ppm，以及
3)如式(1)所示且M是Ba2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯375ppm，其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
实施例6：
实施例6与实施例2基本相同，不同之处在于实施例6中，所述具有协同增效作用的混合物如下：
1)DL-苹果酸300ppm和枸椽酸镁300ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯70ppm，以及
3)如式(1)所示且M是Cu2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯375ppm，其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
实施例7：
实施例7与实施例2基本相同，不同之处在于实施例7中，所述具有协同增效作用的混合物如下：
1)DL-苹果酸镁300ppm和枸椽酸铍300ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯70ppm，以及
3)如式(1)所示且M是Fe2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯375ppm，其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
实施例8：
实施例8与实施例2基本相同，不同之处在于实施例8中，所述具有协同增效作用的混合物如下：
1)DL-苹果酸钾150ppm、DL-苹果酸钙150ppm和枸椽酸钙300ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯70ppm，以及
3)如式(1)所示且M是Ba2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯375ppm，其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
实施例9：
实施例9与实施例2基本相同，不同之处在于实施例9中，所述具有协同增效作用的混合物如下：
1)DL-苹果酸300ppm、枸椽酸锂150ppm和枸椽酸铍150ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯70ppm，以及
3)如式(1)所示且M是Ni2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯375ppm，其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
实施例10：
实施例10与实施例2基本相同，不同之处在于实施例10中，所述具有协同增效作用的混合物如下：
1)DL-苹果酸镁300ppm、枸椽酸100ppm和枸椽酸镁200ppm，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯70ppm，以及
3)如式(1)所示且M是Rh2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯375ppm，其用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
对比实施例V11：
对比实施例V11与实施例2基本相同，不同之处在于在对比实施例V11中，所述具有协同增效作用的混合物中仅包含邻羟基苯甲酸甲酯，以及如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，且掺入量与实施例2相同。
对比实施例V12：
对比实施例V12与实施例2基本相同，不同之处在于在对比实施例V12中，所述具有协同增效作用的混合物仅包含DL-苹果酸钾、DL-苹果酸镁和枸椽酸钾，以及如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，且掺入量与实施例2相同。
对比实施例V13：
对比实施例V13与实施例2基本相同，不同之处在于在对比实施例V13中，所述具有协同增效作用的混合物仅包含DL-苹果酸钾、DL-苹果酸镁和枸椽酸钾，以及邻羟基苯甲酸甲酯，且掺入量与实施例2相同。
对比实施例V14：
对比实施例V14与实施例2基本相同，不同之处在于在对比实施例V14中，所述具有协同增效作用的混合物仅仅包含DL-苹果酸钾、DL-苹果酸镁和枸椽酸钾，且掺入量与实施例2相同。
对比实施例V15：
对比实施例V15与实施例2基本相同，不同之处在于在对比实施例V15中，所述具有协同增效作用的混合物仅仅包含邻羟基苯甲酸甲酯，且掺入量与实施例2相同。
对比实施例V16：
对比实施例V16与实施例2基本相同，不同之处在于在对比实施例V16中，所述具有协同增效作用的混合物仅仅包含如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，且掺入量与实施例2相同。
测试例1：
分别取优选实施例1、2制备得到的富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料进行感官评价，感官评价人员共20名，根据感官评价标准进行评分，去除最大值和最小值后对其余评分综合取平均值，分别对实施例1、2制备得到的富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料进行感官评定，具体评定标准如表1所示，具体评价结果如表2所示。
表1固体饮料感官评价标准
表2固体饮料感官评价得分
由表2可以看出，本发明的优选实施例1和2中制备得到的富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料在四种感官评价得分均高于9分，说明其在固形物色泽、冲调后色泽、香气与滋味均处于优良状态，本发明的固体饮料营养成分搭配全面、均衡、合理，饱腹感好，效果好、见效快，冲调即食，利于人体吸收。
测试例2：
分别取优选实施例1、2制备得到的富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料进行全营养营养成分检测，结果如表3所示。
表3富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料中营养成分表
由表3可知，本发明的富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料营养成分搭配全面、均衡、合理，富含蛋白质，同时富含维生素类及硒，营养价值高。
测试例3：
分别取优选实施例2-10以及对比实施例V11-V16中制备得到的富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料进行乙酸菌含量检测，得出各实施例灭菌后的乙酸菌含量相对于灭菌前(相对值设为1)的残留量，其统计结果如图1所示。由图1可以看出，本发明的含有1)DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐和枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐的混合物，以及2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及3)至少一种如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的所述混合物进行灭菌处理，可以迅速杀灭饮料中存留的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染，抑制乙酸菌对饮料的酸化作用，并可在不使用防腐剂的状况下延长饮料的保存期限，维持固体饮料冲调后的色泽、香气、滋味、营养成分等。
测试例4：
使固体饮料特被定量的微生物混合物污染并且研究防腐剂混合物与这些单独物质相比的效力。细菌的混合物由絮凝葡糖醋杆菌、氧化葡糖杆菌和液化葡糖醋杆菌组成。一周之后，研究该饮料的一部分的微生物的存在，测试结果如表4所示。
单独测试：V14(DL-苹果酸钾、DL-苹果酸镁和枸椽酸钾)；V15(邻羟基苯甲酸甲酯)；V16(如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯)；
混合测试1：V11(邻羟基苯甲酸甲酯&如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯)；V12(DL-苹果酸钾、DL-苹果酸镁和枸椽酸钾&如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯)；V13(DL-苹果酸钾、DL-苹果酸镁和枸椽酸钾&邻羟基苯甲酸甲酯)；
混合测试2：实施例2(DL-苹果酸钾、DL-苹果酸镁和枸椽酸钾&邻羟基苯甲酸甲酯&如式(1)所示且M是Ru2+的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯)；
试验细菌：从饮料灌装线分离的各种乙酸菌的混合物；
底物：本发明所述富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料；
接种细菌/mL的底物：在该混合物中200cfu/mL。
使用库尔等人(应用微生物学(Applied Microbiology)9，第538至541页，1961年)所述的方法来确定协同作用。应用以下关系：
Qa＝物质A的浓度，它是MIC，
Qb＝物质B的浓度，它是MIC，
Qc＝物质C的浓度，它是MIC，
QA＝在A/B/C的浓度中物质A的浓度，在这个浓度下微生物生长受到抑制，
QB＝在A/B/C的浓度中物质B的浓度，在这个浓度下微生物生长受到抑制，
QC＝在A/B/C的浓度中物质C的浓度，在这个浓度下微生物生长受到抑制，协同指数SI＝QA/Qa+QB/Qb+QC/Qc，
SI＝1意味着相加作用，
SI>1意味着拮抗作用，
SI<1意味着协同作用。
表4协同测试统计
由表4可以看出，本发明中包含1)DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐或枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐，以及2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及3)至少一种如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的各项具有协同增效作用，上述1)、2)和3)中的各项联合应用时的协同指数SI<1，高效发挥协同增效作用，可以发挥出用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌和/或用于饮料的后续保存的用途，迅速抑制并灭除饮料中的各种乙酸菌，消除乙酸菌污染。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (10)

1.包含以下各项的具有协同增效作用的混合物：
1)DL-苹果酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐和枸椽酸和/或其碱金属盐和/或其碱土金属盐的混合物，以及
2)邻羟基苯甲酸甲酯，以及
3)至少一种如式(1)所示的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯，
其中，式(1)中M选自正二价或正四价离子；
所述混合物用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌、优选地用于其后续保存。
2.根据权利要求1所述的混合物，其特征在于：
所使用的DL-苹果酸的碱金属盐选自DL-苹果酸锂、DL-苹果酸钠和DL-苹果酸钾的至少一种；
所使用的DL-苹果酸的碱土金属盐选自DL-苹果酸铍、DL-苹果酸镁和DL-苹果酸钙的至少一种；
所使用的枸椽酸的碱金属盐选自枸椽酸锂、枸椽酸钠和枸椽酸钾的至少一种；
所使用的枸椽酸的碱土金属盐选自枸椽酸铍、枸椽酸镁和枸椽酸钙的至少一种。
3.根据权利要求1所述的混合物，其特征在于：所述式(1)中M选自Mn2+、Fe2+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Zn2+、Hg2+、Ca2+、Mg2+、Sr2+、Ba2+、Pb2+、Sn2+、Pt2+、Rh2+、Ru2+、Pb4+、Ti4+、Sn4+。
4.根据权利要求1～3任一项所述的混合物，其特征在于：所使用的酪丝缬肽-二氢卟吩e6金属络合物酯的制备方法，包括下述步骤：
1)避光及保护气体存在下，酪丝缬肽与二氢卟吩e6金属络合物发生酯化；
2)离心，上清液以去离子水透析，冷冻干燥；
3)干燥物用硅胶柱层析分离，以二氯甲烷-乙腈梯度洗脱液洗脱；
4)挥去二氯甲烷-乙腈后，以乙腈溶解，用C-18反相柱层析精制纯化，以乙腈-水梯度洗脱液洗脱；
5)所得纯化液浓缩至干，再将浓缩物干燥即得。
5.权利要求1～4任一项所述混合物的用途，其特征在于包括权利要求1～4任一项所述混合物用于已经被乙酸菌污染的饮料的灭菌。
6.权利要求1～4任一项所述混合物的用途，其特征在于包括权利要求1～4任一项所述混合物用于用于饮料的后续保存。
7.一种用于已经被乙酸菌污染的饮料灭菌的方法，其特征在于包括将权利要求1～4任一项所述混合物结合到所述饮料中。
8.一种用于保存已灭菌饮料的方法，其特征在于包括将权利要求1～4任一项所述混合物结合到所述饮料中。
9.一种富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料，其特征在于按照重量份计其包括下述重量份的各项：
富硒牡蛎小分子蛋白肽40～80重量份、
富硒熟小麦粉15～30重量份、
螺旋藻粉0.1～3重量份、
魔芋粉3～10重量份、
低聚果糖5～30重量份、
植物蛋白2～25重量份、
熟藜麦粉1～10重量份、
脱脂奶粉15～30重量份、
复合矿物质0.1～5重量份、
复合维生素0.1～5重量份，
所述固体饮料经权利要求1～4任一项所述混合物灭菌处理。
10.权利要求9所述富硒牡蛎小分子蛋白肽固体饮料的制备方法，其包括：
1)将权利要求9中的各项粉碎至可通过不低于180目筛后按照配方量混合，溶于蒸馏水；
2)步骤1)溶液中掺入权利要求1～4任一项所述混合物，混匀后静置1～48h，干燥至恒重并粉碎至固体饮料所需粒径即得。
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