CN110218683B - 用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法 - Google Patents

用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110218683B
CN110218683B CN201910570919.7A CN201910570919A CN110218683B CN 110218683 B CN110218683 B CN 110218683B CN 201910570919 A CN201910570919 A CN 201910570919A CN 110218683 B CN110218683 B CN 110218683B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bacillus
soil
microbial
mojavensis
sand
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910570919.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110218683A (zh
Inventor
赵丽娜
刘玉冰
王增如
黄文广
张宇
王蕾
罗晓玲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Grassland Workstation of Ningxia Hui Autonomous Region (Grassland Supervision Center of Ningxia Hui Autonomous Region)
Northwest Institute of Eco Environment and Resources of CAS
Original Assignee
Grassland Workstation Of Ningxia Hui Autonomous Region (grassland Supervision Center Of Ningxia Hui Autonomous Region)
Northwest Institute of Eco Environment and Resources of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Grassland Workstation Of Ningxia Hui Autonomous Region (grassland Supervision Center Of Ningxia Hui Autonomous Region), Northwest Institute of Eco Environment and Resources of CAS filed Critical Grassland Workstation Of Ningxia Hui Autonomous Region (grassland Supervision Center Of Ningxia Hui Autonomous Region)
Priority to CN201910570919.7A priority Critical patent/CN110218683B/zh
Publication of CN110218683A publication Critical patent/CN110218683A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110218683B publication Critical patent/CN110218683B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K17/00—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials
    • C09K17/14—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials containing organic compounds only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K17/00—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials
    • C09K17/14—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials containing organic compounds only
    • C09K17/18—Prepolymers; Macromolecular compounds
    • C09K17/32—Prepolymers; Macromolecular compounds of natural origin, e.g. cellulosic materials
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2105/00—Erosion prevention

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法，涉及微生物技术领域。该用于沙区土壤改良的微生物组合物含有枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌。该微生物组合物施用于沙区，不仅能够良好的使沙粒团聚并保持相对稳定的状态，同时还可以有效的改善土壤理化特性，可广泛应用于沙区土壤恢复，有利于实现沙区的可持续性发展。

Description

用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体而言，涉及一种用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法。
背景技术
如何提升土壤肥力是当前人类与土壤改良斗争的重要技术难题之一。与土壤施肥、种植苗木和物理重构技术相比，微生物土壤改良法作为一种新型土壤改良技术，具有污染性小、价格低廉、耗时短暂、适应性强、工程量小等优点，被国际上公认为是未来从根本上修复土壤生态系统最有发展潜力的一种措施。然而，目前关于微生物改良沙区土壤的研发仍处于探索阶段，已有的相关技术研发针对添加肥料来刺激微生物生长代谢，初步证实了微生物土壤改良技术在改善土壤理化特性等方面的积极意义。
目前，芽孢杆菌属细菌联合培养在沙区土壤改良中的应用还未有报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于沙区土壤改良的微生物组合物。该微生物组合物能够良好的使沙粒团聚并保持相对稳定，可有效的改善土壤理化特性。
本发明的另一目的在于提供一种用于沙区土壤改良的微生物制剂。该微生物制能够良好的使沙粒团聚并保持相对稳定，可有效的改善土壤理化特性。
本发明的另一目的在于提供一种沙区土壤改良的方法。采用该方法能够使沙粒团聚并保持相对稳定，可有效的改善土壤理化特性。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明提供了一种用于沙区土壤改良的微生物组合物，其含有：枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌。
优选地，枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌之间的活菌数比例为1：(0.5-0.6)：(0.7-0.8)；
优选地，枯草芽孢杆菌的活菌数为109-1010CFU，莫海威芽孢杆菌的活菌数为109-1010CFU，解淀粉芽孢杆菌的活菌数为109-1010CFU；
优选地，枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌之间的用量比为2-4:4-6:4-6，优选为3:5:5。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCCNO.17601。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述枯草芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQID NO.1所示。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述莫海威芽孢杆菌的保藏编号为CGMCCNO.17602。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述莫海威芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO.2所示。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为CGMCCNO.17604。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述解淀粉芽孢杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO.3所示。
上述枯草芽孢杆菌CGMCC NO.17601、莫海威芽孢杆菌CGMCC NO.17602、解淀粉芽孢杆菌CGMCC NO.17604已于2019年4月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
上述枯草芽孢杆菌CGMCC NO.17601已于2019年4月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，分类学命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，保藏编号为：CGMCCNO.17601。
上述莫海威芽孢杆菌CGMCC NO.17602已于2019年4月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，分类学命名为莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)，保藏编号为：CGMCC NO.17602。
上述解淀粉芽孢杆菌CGMCC NO.17604已于2019年4月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，分类学命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，保藏编号为：CGMCC NO.17604。
第二方面，本发明提供了一种用于沙区土壤改良的微生物制剂，其含有上述的微生物组合物或通过对上述的微生物组合物进行发酵培养所得到的发酵产物。
第三方面，本发明提供了一种沙区土壤改良的方法，其包括：
将上述的微生物组合物进行发酵培养；
将发酵培养得到的发酵产物喷洒至沙区表面。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，按每平方米喷洒1×108-1×1010CFU的量喷洒上述微生物制剂。
第四方面，本发明提供了上述微生物制剂的制备方法，该微生物制剂是通过对上述的微生物组合物进行发酵培养所得到的发酵产物，所述微生物制剂的制备方法包括：将枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌共同接种于培养基进行发酵培养。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述培养基含有：酵母粉、葡萄糖以及MgSO4，pH 8.2-8.5；
优选的，所述培养基含有：18-22g/L酵母粉、28-32g/L葡萄糖、8-12g/L MgSO4。
进一步地，在本发明的一些实施方案中，培养的条件如下：在28-32℃，200-300rpm的条件下培养16-20h。
本发明具有以下有益效果：
本发明提供的微生物组合物，其含有枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，这三种菌联合发挥作用，能够产生多种水解酶类、发挥固氮作用和产生大量的胞外多糖，将该微生物组合物施用于沙区，不仅能够良好的使沙粒团聚并保持相对稳定的状态，同时还可以有效的改善土壤理化特性，可广泛应用于沙区土壤恢复，有利于实现沙区的可持续性发展。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明实施例中菌株(B3/B5)在培养基上的水解图；其中：a为B5菌株和联合培养菌株在淀粉酶选择性平板上的水解圈；b为B5菌株和联合培养菌株在蛋白酶选择性平板上的水解圈；c为B3和联合培养菌株在纤维素酶选择性平板上的水解圈。
图2为B8菌株在无氮培养基上的菌落形态图。
图3为本发明实施例中不同菌株(B3/B5/B8)及其联合培养时的胞外多糖产量结果。
图4为不同菌株(B3/B5/B8)在LB固体培养基上的菌落形态图，图中：a为枯草芽孢杆菌B3菌株；b为莫海威芽孢杆菌B5菌株；c为解淀粉芽孢杆菌B8菌株。
图5为本发明实施例中使用不同菌株(B3/B5/B8)的16S rDNA序列所作的系统发育树结果；其中，a为枯草芽孢杆菌B3菌株，b为莫海威芽孢杆菌B5菌株，c为解淀粉芽孢杆菌B8菌株。
图6为本发明实施例中菌株联合(B3、B5和B8)施用到沙区对沙粒聚集的效果图，图中，a代表施加联合培养菌株发酵液半年后沙区表面效果图；b代表施加联合培养菌株发酵液半年后形成的结皮图片。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
芽孢杆菌属细菌的分离筛选及鉴定
(1)样品采集：
2018年6月29日采集腾格里沙漠沙坡头人工固沙植被区的生物土壤结皮。
(2)培养基：
a)LB培养基：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L，蒸馏水1000mL，pH7.0-7.2(固体培养基时加入2％的琼脂粉)。
b)淀粉酶选择性培养基：淀粉2g/L，牛肉膏5g/L，葡萄糖5g/L，胰蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L，琼脂粉20g/L，蒸馏水1000mL，pH 7.0-7.2。
c)蛋白酶选择性培养基：酪蛋白5g/L，葡萄糖10g/L，酵母粉10g/L，磷酸氢二钾1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，硫酸镁0.1g/L，琼脂粉20g/L，蒸馏水1000mL，pH 7.0-7.2。
d)纤维素酶选择性培养基：羧甲基纤维素钠20g/L，葡萄糖5g/L，胰蛋白胨2.5g/L，磷酸氢二钠2.5g/L，磷酸二氢钠1.5g/L，琼脂粉20g/L，蒸馏水1000mL，pH 7.0-7.2。
(3)菌种初筛：
准确称取1g生物土壤结皮样品添加到9mL无菌生理盐水中，涡旋仪充分混匀；80℃水浴10min除去非芽孢细菌体；按照1％的接种量接种于LB培养基中，30℃培养48h后于LB固体平板上进行稀释涂布；挑取不同形态的菌落进行划线纯化，编号保存。
(4)菌种复筛：
a)将上述纯化菌株接种到LB培养基中，30℃摇床培养48h；
b)使用牛津杯法分别在淀粉酶选择性培养基、蛋白酶选择性培养基及纤维素酶选择性培养基上测量纯化菌株的淀粉酶、蛋白酶及纤维素酶活性，结果显示：B5菌株的淀粉酶活性和蛋白酶活性最高，B3菌株的纤维素酶活性最高(参见附图1)。
c)选择无氮培养基评估菌株固氮能力，仅B8菌株具有固氮能力(参见附图2)。
d)取3mL发酵液加入到离心管中，10000rpm，4℃离心20min收集上清液；将2mL的上清液中添加6mL 95％的冰乙醇，剧烈震摇至絮状沉淀后放置于4℃冰箱中过夜；10000rpm，4℃离心5min收集沉淀，将沉淀使用75％的乙醇洗涤三次；室温下晾干，加入2mL无菌水制成粗多糖溶液；通过苯酚-硫酸法对以上粗多糖溶液进行测量，三株菌的胞外多糖产量均较高，其中，B3发酵产生的胞外多糖为4.41±1.63g/L，B5发酵产生的胞外多糖为5.80±1.33g/L，B8发酵产生的胞外多糖为6.13±0.23g/L(参见附图3)。
e)选择B3、B5和B8菌株进行芽孢杆菌属细菌的联合培养。三菌(B3、B5和B8菌株)联合发酵的发酵液中的淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的降解能力均有所增加，且三菌(B3、B5和B8菌株)联合发酵产生的胞外多糖(16.48±1.14g/L)也显著的高于单株发酵菌株的胞外多糖产量。
(5)菌种鉴定：
a)形态观察：
使用接种环挑取上述菌体制作涂片，并进行革兰氏染色和芽孢染色，观察其为革兰氏阳性的芽孢杆菌；其在LB固体培养基上生长24h的形态具体参见附图4。其中B3菌株菌落较大，淡黄色或褐色，表面典型的粗糙不规则，有很多隆起和皱褶；B5菌株菌落为乳白色或淡黄色，表面呈圆形或粗糙不规则，有隆起和皱褶；B8菌株菌落呈乳白色，圆形，边缘有细齿，中间隆起，表面光滑。
b)分子生物学鉴定：
使用索莱宝细菌DNA提取试剂盒对上述菌株(B3、B5和B8菌株)的DNA进行提取，使用通用引物27F(5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’)和1492R(5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’)扩增16S rDNA基因片段并测序，B3菌株的16S rDNA的序列如SEQ ID No.1所示；B5菌株的16SrDNA的序列如SEQ ID No.2所示；B8菌株的16S rDNA的序列如SEQ ID No.3所示。将测得基因序列提交到NCBI数据库进行比对(参见附图5)，发现与B3亲缘关系最近的是枯草芽孢杆菌Z36(MG470688.1)；与B5亲缘关系最近的是莫海威芽孢杆菌261AG9(KF811046.1)；与B8亲缘关系最近的是解淀粉芽孢杆菌265XY3(KF954553.1)，同源性均未达到100％，说明上述3种菌株具有独立的分类学地位。
因此，本发明所提供的芽孢杆菌属B3、B5和B8菌株分别属于枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，均是新发现的菌株，上述三种菌株于2019年4月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；其中，枯草芽孢杆菌B3菌株的保藏编号为CGMCC NO.17601；莫海威芽孢杆菌B5菌株的保藏编号为CGMCC NO.17602；解淀粉芽孢杆菌B8菌株的保藏编号为CGMCC NO.17604。
实施例2：
芽孢杆菌属细菌联合培养的多糖产生能力测定
a)将上述芽孢杆菌属菌株B3、B5和B8菌株分别接种到LB培养基中，30℃摇床(230rpm)培养12h，备用。
b)联合培养：将上述种子液按照枯草芽孢杆菌B3 3％、莫海威芽孢杆菌B5 5％和解淀粉芽孢杆菌B8 5％转接到联合培养基(含工业酵母粉2％，工业葡萄糖3％，MgSO4 1％，pH 8.2-8.5)中，在30℃，230rpm的条件下培养18h作为发酵液，备用；
菌株B3单独培养：将上述菌株B3的种子液按照13％的接种量转接到上述联合培养基中，在30℃，230rpm的条件下培养18h作为发酵液，备用；
菌株B5单独培养：将上述菌株B5的种子液按照13％的接种量转接到联合培养基中，在30℃，230rpm的条件下培养18h作为发酵液，备用；
菌株B8单独培养：将上述菌株B8的种子液按照13％的接种量转接到联合培养基中，在30℃，230rpm的条件下培养18h作为发酵液，备用。
c)分别取3mL发酵液加入到离心管中，10000rpm，4℃离心20min收集上清液；将2mL的上清液中添加6mL 95％的冰乙醇，剧烈震摇至絮状沉淀后放置于4℃冰箱中过夜；10000rpm，4℃离心5min收集沉淀，将沉淀使用75％的乙醇洗涤三次；室温下晾干，加入2mL无菌水制成粗多糖溶液。
d)通过苯酚-硫酸法对以上粗多糖溶液进行测量，结果如图3所示，B3发酵产生的胞外多糖为4.41±1.63g/L，B5发酵产生的胞外多糖为5.80±1.33g/L，B8发酵产生的胞外多糖为6.13±0.23g/L，三菌(B3、B5和B8菌株)联合发酵产生的胞外多糖为16.48±1.14g/L。三株菌单独培养时的胞外多糖产量均较高，联合培养条件下能显著性的提高其胞外多糖产量。
本发明所提供的芽孢杆菌属细菌(B3、B5和B8菌株)联合培养时能够产生大量的胞外多糖，能够高效的使沙粒团聚并保持相对稳定的状态。因此，上述三种菌株的组合物可广泛应用于沙区土壤改良前的进行沙区表面固定的这一必要步骤。
实施例3：
芽孢杆菌属细菌联合培养的土壤改良
a)将上述芽孢杆菌属菌株(B3、B5和B8菌株)分别接种到LB培养基中，30℃摇床(230rpm)培养12h作为种子液。
b)将上述种子液按照枯草芽孢杆菌B3 3％、莫海威芽孢杆菌B55％和解淀粉芽孢杆菌B8 5％转接到联合培养基(工业酵母粉2％，工业葡萄糖3％，MgSO4 1％，pH 8.2-8.5)中，在30℃，230rpm的条件下培养18h作为发酵液，备用。
c)通过稀释涂布法测得有效活菌数分别为枯草芽孢杆菌B3 2.16×109CFU/mL、莫海威芽孢杆菌B5 1.19×109CFU/mL和解淀粉芽孢杆菌B8 1.61×109CFU/mL。将其发酵液的总有效活菌数稀释至1.0×106CFU/mL，按1.0×109CFU/m2的量均匀喷洒到沙区表面。
d)结果如图6所示，可以看出，在半年后沙区表面能够形成7cm厚左右的沙粒聚集体(图6-b)。由此说明，本发明提供的枯草芽孢杆菌B3、莫海威芽孢杆菌B5和解淀粉芽孢杆菌B8联合，可以用于沙区土壤改良，起到良好的防沙固沙效果。
同时土壤肥力(容重、有机碳、全氮、机械组成等)指标明显改善。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所、宁夏回族自治区草原工作站（宁夏回族自治区草原监理中心）
<120> 用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法
<160> 3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1452
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
accgatggcg gcagctataa tgcaagtcga gcggacagat gggagcttgc tccctgatgt 60
tagcggcgga cgggtgagta acacgtgggt aacctgcctg taagactggg ataactccgg 120
gaaaccgggg ctaataccgg atgcttgttt gaaccgcatg gttcaaacat aaaaggtggc 180
ttcggctacc acttacagat ggacccgcgg cgcattagct agttggtgag gtaacggctc 240
accaaggcaa cgatgcgtag ccgacctgag agggtgatcg gccacactgg gactgagaca 300
cggcccagac tcctacggga ggcagcagta gggaatcttc cgcaatggac gaaagtctga 360
cggagcaacg ccgcgtgagt gatgaaggtt ttcggatcgt aaagctctgt tgttagggaa 420
gaacaagtac cgttcgaata gggcggtacc ttgacggtac ctaaccagaa agccacggct 480
aactacgtgc cagcagccgc ggtaatacgt aggtggcaag cgttgtccgg aattattggg 540
cgtaaagggc tcgcaggcgg ttccttaagt ctgatgtgaa agcccccggc tcaaccgggg 600
agggtcattg gaaactgggg aacttgagtg cagaagagga gagtggaatt ccacgtgtag 660
cggtgaaatg cgtagagatg tggaggaaca ccagtggcga aggcgactct ctggtctgta 720
actgacgctg aggagcgaaa gcgtggggag cgaacaggat tagataccct ggtagtccac 780
gccgtaaacg atgagtgcta agtgttaggg ggtttccgcc ccttagtgct gcagctaacg 840
cattaagcac tccgcctggg gagtacggtc gcaagactga aactcaaagg aattgacggg 900
ggcccgcaca agcggtggag catgtggttt aattcgaagc aacgcgaaga accttaccag 960
gtcttgacat cctctgacaa tcctagagat aggacgtccc cttcgggggc agagtgacag 1020
gtggtgcatg gttgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc 1080
gcaacccttg atcttagttg ccagcattca gttgggcact ctaaggtgac tgccggtgac 1140
aaaccggagg aaggtgggga tgacgtcaaa tcatcatgcc ccttatgacc tgggctacac 1200
acgtgctaca atggacagaa caaagggcag cgaaaccgcg aggttaagcc aatcccacaa 1260
atctgttctc agttcggatc gcagtctgca actcgactgc gtgaagctgg aatcgctagt 1320
aatcgcggat cagcatgccg cggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca ccgcccgtca 1380
caccacgaga gtttgtaaca cccgaagtcg gtgaggtaac ctttatggag ccagccgccg 1440
aagtgacaga tt 1452
<210> 2
<211> 1453
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
gaaagtggcg gcagctaata atgcaagtcg agcggacaga tgggagcttg ctccctgatg 60
ttagcggcgg acgggtgagt aacacgtggg taacctgcct gtaagactgg gataactccg 120
ggaaaccggg gctaataccg gatgcttgtt tgaaccgcat ggttcaaaca taaaaggtgg 180
cttcggctac cacttacaga tggacccgcg gcgcattagc tagttggtga ggtaacggct 240
caccaaggca acgatgcgta gccgacctga gagggtgatc ggccacactg ggactgagac 300
acggcccaga ctcctacggg aggcagcagt agggaatctt ccgcaatgga cgaaagtctg 360
acggagcaac gccgcgtgag tgatgaaggt tttcggatcg taaagctctg ttgttaggga 420
agaacaagta ccgttcgaat agggcggtac cttgacggta cctaaccaga aagccacggc 480
taactacgtg ccagcagccg cggtaatacg taggtggcaa gcgttgtccg gaattattgg 540
gcgtaaaggg ctcgcaggcg gttccttaag tctgatgtga aagcccccgg ctcaaccggg 600
gagggtcatt ggaaactggg gaacttgagt gcagaagagg agagtggaat tccacgtgta 660
gcggtgaaat gcgtagagat gtggaggaac accagtggcg aaggcgactc tctggtctgt 720
aactgacgct gaggagcgaa agcgtgggga gcgaacagga ttagataccc tggtagtcca 780
cgccgtaaac gatgagtgct aagtgttagg gggtttccgc cccttagtgc tgcagctaac 840
gcattaagca ctccgcctgg ggagtacggt cgcaagactg aaactcaaag gaattgacgg 900
gggcccgcac aagcggtgga gcatgtggtt taattcgaag caacgcgaag aaccttacca 960
ggtcttgaca tcctctgaca atcctagaga taggacgtcc ccttcggggg cagagtgaca 1020
ggtggtgcat ggttgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag 1080
cgcaaccctt gatcttagtt gccagcattc agttgggcac tctaaggtga ctgccggtga 1140
caaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa atcatcatgc cccttatgac ctgggctaca 1200
cacgtgctac aatggacaga acaaagggca gcaaaaccgc gaggttaagc caatcccaca 1260
aatctgttct cagttcggat cgcagtctgc aactcgactg cgtgaagctg gaatcgctag 1320
taatcgcgga tcagcatgcc gcggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc 1380
acaccacgag agtttgtaac acccgaagtc ggtgaggtaa cctttatgga gccagccgcc 1440
gaagtgaccg atg 1453
<210> 3
<211> 1452
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
gcaattgcgg cagctaatac atgcaagtcg agcggacaga tgggagcttg ctccctgatg 60
ttagcggcgg acgggtgagt aacacgtggg taacctgcct gtaagactgg gataactccg 120
ggaaaccggg gctaataccg gatggttgtt tgaaccgcat ggttcaaaca taaaaggtgg 180
cttcggctac cacttacaga tggacccgcg gcgcattagc tagttggtga ggtaatggct 240
caccaaggca acgatgcgta gccgacctga gagggtgatc ggccacactg ggactgagac 300
acggcccaga ctcctacggg aggcagcagt agggaatctt ccgcaatgga cgaaagtctg 360
acggagcaac gccgcgtgag tgatgaaggt tttcggatcg taaagctctg ttgttaggga 420
agaacaagtg ccgttcgaat agggcggcac cttgacggta cctaaccaga aagccacggc 480
taactacgtg ccagcagccg cggtaatacg taggtggcaa gcgttgtccg gaattattgg 540
gcgtaaaggg ctcgcaggcg gtttcttaag tctgatgtga aagcccccgg ctcaaccggg 600
gagggtcatt ggaaactggg gaacttgagt gcagaagagg agagtggaat tccacgtgta 660
gcggtgaaat gcgtagagat gtggaggaac accagtggcg aaggcgactc tctggtctgt 720
aactgacgct gaggagcgaa agcgtgggga gcgaacagga ttagataccc tggtagtcca 780
cgccgtaaac gatgagtgct aagtgttagg gggtttccgc cccttagtgc tgcagctaac 840
gcattaagca ctccgcctgg ggagtacggt cgcaagactg aaactcaaag gaattgacgg 900
gggcccgcac aagcggtgga gcatgtggtt taattcgaag caacgcgaag aaccttacca 960
ggtcttgaca tcctctgaca atcctagaga taggacgtcc ccttcggggg cagagtgaca 1020
ggtggtgcat ggttgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag 1080
cgcaaccctt gatcttagtt gccagcattc agttgggcac tctaaggtga ctgccggtga 1140
caaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa atcatcatgc cccttatgac ctgggctaca 1200
cacgtgctac aatggacaga acaaagggca gcgaaaccgc gaggttaagc caatcccaca 1260
aatctgttct cagttcggat cgcagtctgc aactcgactg cgtgaagctg gaatcgctag 1320
taatcgcgga tcagcatgcc gcggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc 1380
acaccacgag agtttgtaac acccgaagtc ggtgaggtaa cctttaggag ccagccgccg 1440
aagtgacaga tt 1452

Claims (6)

1.一种沙区土壤改良的方法，其特征在于，其包括：
将微生物组合物进行发酵培养；
将发酵培养得到的发酵产物喷洒至沙区表面；
所述微生物组合物由如下菌组成：枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌；
所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC NO.17601，所述莫海威芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC NO.17602，所述解淀粉芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC NO.17604。
2.根据权利要求1所述的沙区土壤改良的方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌之间的活菌数比例为1：(0.5-0.6)：(0.7-0.8)。
3.根据权利要求2所述的沙区土壤改良的方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌的活菌数为109-1010CFU，莫海威芽孢杆菌的活菌数为109-1010CFU，解淀粉芽孢杆菌的活菌数为109-1010CFU。
4.根据权利要求3所述的沙区土壤改良的方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌之间的用量比为2-4:4-6:4-6。
5.根据权利要求1-4任一项所述的沙区土壤改良的方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌、莫海威芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌之间的用量比为3:5:5。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，按每平方米喷洒1×108-1×1010CFU的量喷洒发酵产物。
CN201910570919.7A 2019-06-27 2019-06-27 用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法 Active CN110218683B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910570919.7A CN110218683B (zh) 2019-06-27 2019-06-27 用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910570919.7A CN110218683B (zh) 2019-06-27 2019-06-27 用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110218683A CN110218683A (zh) 2019-09-10
CN110218683B true CN110218683B (zh) 2020-06-26

Family

ID=67815286

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910570919.7A Active CN110218683B (zh) 2019-06-27 2019-06-27 用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110218683B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114717006A (zh) * 2022-03-11 2022-07-08 四川爱隆植物营养科技有限公司 一种微生物松土剂

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103626531A (zh) * 2013-11-20 2014-03-12 宁夏天地经纬电力设备工程有限公司 一种复合肥及其制备方法
CN103740607A (zh) * 2013-11-28 2014-04-23 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种摩加夫芽胞杆菌及微生物菌剂和它们的应用
CN108130094A (zh) * 2017-12-27 2018-06-08 厦门金裕安贸易有限公司 一种沙质土壤改良剂及其应用
WO2018122649A1 (es) * 2016-12-26 2018-07-05 Universidad Nacional De Colombia Proceso para obtener un extracto biocida
CN109337826A (zh) * 2018-11-22 2019-02-15 武汉大学 一种真菌及真菌-蓝藻复合地衣结皮的快速培育方法
CN109517749A (zh) * 2017-09-19 2019-03-26 上海中海龙高新技术研究院 一种土壤改良菌剂及应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103626531A (zh) * 2013-11-20 2014-03-12 宁夏天地经纬电力设备工程有限公司 一种复合肥及其制备方法
CN103740607A (zh) * 2013-11-28 2014-04-23 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 一种摩加夫芽胞杆菌及微生物菌剂和它们的应用
WO2018122649A1 (es) * 2016-12-26 2018-07-05 Universidad Nacional De Colombia Proceso para obtener un extracto biocida
CN109517749A (zh) * 2017-09-19 2019-03-26 上海中海龙高新技术研究院 一种土壤改良菌剂及应用
CN108130094A (zh) * 2017-12-27 2018-06-08 厦门金裕安贸易有限公司 一种沙质土壤改良剂及其应用
CN109337826A (zh) * 2018-11-22 2019-02-15 武汉大学 一种真菌及真菌-蓝藻复合地衣结皮的快速培育方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
产胞外多糖菌株的筛选及其对土壤团聚体的影响;张文平等;《江西农业大学学报》;20171231;第39卷(第4期);772-779 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN110218683A (zh) 2019-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112458012B (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌微生物菌剂及其应用
CN109679858B (zh) 一株解磷耐盐的荧光假单胞菌菌株及其培养方法与应用
CN111826310B (zh) 一种含有嗜麦芽寡养单胞菌的菌酶混合制剂及其应用
CN107384840B (zh) 一株抗旱促生复合菌剂及其应用
CN109182178B (zh) 一株具有铬耐受和Cr(VI)去除能力的菌株及其在原位修复中轻度铬污染土壤中的应用
WO2017133331A1 (zh) 一株铜绿假单胞菌及其在生产蛋白酶中的应用
CN113106044A (zh) 一种链霉菌改造菌及其在降解羽毛中的应用
CN110218683B (zh) 用于沙区土壤改良的微生物组合物、微生物制剂以及方法
CN111100813A (zh) 一株缓解植物盐害的耐盐促生细菌jp-jh及其应用
CN110295131B (zh) 一株高效降解聚对苯二甲酸/己二酸丁二酯的寡养单胞菌及其应用
CN104560815B (zh) 一种具有降解偶氮化合物活性的地衣芽孢杆菌及其应用
CN108977385B (zh) 一株产几丁质酶的米修链霉菌及其应用
CN114921375B (zh) 一株高产纤维素酶的芽孢杆菌及其应用
CN110257295B (zh) 特基拉芽孢杆菌及其在荒漠化防治中的应用和方法
CN110408567B (zh) 一株耐盐碱甲基营养型芽孢杆菌及其活菌制剂与应用
CN113564086A (zh) 具有溶磷功能并促进园林植物生长的根瘤菌及其应用
CN112662580A (zh) 一种嗜氧类芽孢杆菌及其应用
CN112430559B (zh) 一种伊朗纤维素单胞菌及其应用
CN114958657B (zh) Chitinophaga eiseniae降解羽毛粉产生生物表面活性剂的应用
CN114657097B (zh) 一株高效拮抗青枯病菌的贝莱斯芽孢杆菌lgt-1及其应用
CN114717153B (zh) 嗜温鞘氨醇杆菌在降解羽毛粉产生生物表面活性剂的应用
CN114644993B (zh) 高耐盐的盐单胞菌及其促进盐碱地植物生长的微生物原位生态修复方法
CN114045241B (zh) 一株枯草芽孢杆菌HKS018及其在生产β-甘露聚糖酶中的应用
CN112195121B (zh) 一种耐高温微小杆菌及其应用
CN114437998B (zh) 促进水稻生长和提高幼苗耐寒能力的砖红色微杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20200601

Address after: 730000 No.318, Donggang West Road, Chengguan District, Lanzhou City, Gansu Province

Applicant after: NORTHWEST INSTITUTE OF ECO-ENVIRONMENT AND RESOURCES, CAS

Applicant after: Grassland Workstation of Ningxia Hui Autonomous Region (Grassland Supervision Center of Ningxia Hui Autonomous Region)

Address before: Chengguan District of Gansu city of Lanzhou province Donggang West Road 730000 No. 260

Applicant before: Institute of environment and Engineering in cold and dry areas, Chinese Academy of Sciences

Applicant before: Grassland Workstation of Ningxia Hui Autonomous Region (Grassland Supervision Center of Ningxia Hui Autonomous Region)

TA01 Transfer of patent application right
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant