CN110184200B - 一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于微生物领域，提供了一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基及制备方法，以土豆浸提液80%，葡萄糖1%~2%、蛋白胨0.1%~0.2%、琼脂0.1%~0.2%，马尾松针粉末0.02%~0.05%，磷酸二氢钾0.15%~0.25%、硫酸镁0.1%~0.2%、碳酸钙0.1%~0.18%、维生B10.0005%‑0.0015%，余量为水，各组分质量分数之和为100%，灭菌后制成发酵培养基。采用本培养基培养的绣球菌菌丝体，较之传统的的固体培养，菌丝生长速度快；较之普通的液体培养，菌丝生物量提高了47.5％，菌丝生长速度和生物量的提高，极大缩短了食用菌母种的制备周期。

Description

一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基及制备方法
技术领域
本发明涉及微生物领域，具体涉及一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基及制备方法。
背景技术
绣球菌(Sparassis crispa),又名绣球蕈、绣球菇,隶属于担子菌亚门、异隔担子菌纲、非褶菌目、绣球菌科、绣球菌属,因其形似巨大绣球而得名。绣球菌作为一种珍稀的食药两用菌，野生资源稀少，虽已实现人工栽培，但因其菌丝生长速度慢、生物量低，导致绣球菌母种的制备耗时周期长。如何促进菌丝生长，提高生物量，成为制约绣球菌工业化发展的关键问题。本发明提供了一种适用于绣球菌快速生长的发酵培养基，采用本培养基培养的绣球菌，较之传统的的固体培养，菌丝生长速度快；较之普通的液体培养，菌丝生物量提高了47.5％，菌丝生长速度和生物量的提高，极大缩短了母种的制备周期。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生长速度快、生物量高的绣球菌菌丝体发酵培养基及制备方法。
为解决上述问题，本发明采用如下技术方案：
一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基的制备方法，该方法包括培养基制备、灭菌、接种、培养。
其中，所述培养基配方如下：土豆浸提液80%，葡萄糖1%~2% 、蛋白胨0.1%~0.2%、琼脂0.1%~0.2%，马尾松针粉末0.02%-0.05%，磷酸二氢钾0.15%~0.25%、硫酸镁0.1%~0.2%、碳酸钙0.1%~0.18%、维生素B1 0.0005%-0.0015%，余量为水，各组分质量之和为100%，pH自然。
其具体实施步骤如下：
（1）按比例称取土豆、葡萄糖、蛋白胨、琼脂、马尾松针粉末、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1。将土豆削皮、切块后取200g，1000mL沸水浸提30分钟后六层纱布过滤得到土豆浸提液，土豆浸提液就加入琼脂，待琼脂充分溶解后依次加入马尾松针粉末、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1、葡萄糖，定容至1000ml。
（2）灭菌：将制备好的发酵培养基分装至锥形瓶，于高压灭菌锅中121℃灭菌30min，取出备用。
（3）接种：采用绣球菌固体菌种进行接种，将经过活化的绣球菌菌种打孔后于超净工作台中接入灭菌后的发酵培养基中，接种量为3-5块菌饼直径为0.9cm绣球菌菌丝块接入100mL发酵培养基中。
（4）培养：将接种后的发酵培养基于25℃摇床中发酵培养18天，摇床转速为160rpm/min。
本发明的优点：
本方法操作简单、成本低，较之传统的的固体培养，菌丝生长速度快；较之普通的液体培养，菌丝生物量提高了47.5％，菌丝生长速度和生物量的提高，极大缩短了食用菌母种的制备周期。
附图说明
图1 实施例1培养基培养获得的绣球菌菌丝体干重。
具体实施方式
实施例1
所述培养基配方如下：土豆浸提液80%，葡萄糖1%、蛋白胨0.2%、琼脂0.2%，马尾松针粉末0.03%，磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.1%、碳酸钙0.15%、维生素B1 0.001%，余量为水，各组分质量之和为100%，pH自然。
其具体实施步骤如下：
（1）培养基制备：按比例称取土豆、葡萄糖、蛋白胨、琼脂、马尾松针粉末、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1。将土豆削皮、切块后取200g，在1000mL沸水浸提30分钟后六层纱布过滤得到土豆浸提液，先加入称好的琼脂，待琼脂充分溶解后依次加入马尾松针粉末、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1、葡萄糖，定容至1000ml。
（2）灭菌：将制备好的发酵培养基分装至锥形瓶，于高压灭菌锅中121℃灭菌30min，取出备用。
（3）接种：采用绣球菌固体菌种进行接种，将经过活化的绣球菌菌种打孔后于超净工作台中接入灭菌后的发酵培养基中，接种量为4块菌饼直径为0.9cm绣球菌菌丝块接入100mL发酵培养基中。
（4）培养：将接种后的发酵培养基于25℃摇床中发酵培养18天，摇床转速为160rpm/min。
实施例2
所述培养基配方如下：土豆浸提液80%，葡萄糖2% 、蛋白胨0.1%、琼脂0.1%马尾松针粉末0.02%，磷酸二氢钾0.25%、硫酸镁0.1%、碳酸钙0.18%、维生素B10.0015%，余量为水，各组分质量之和为100%，pH自然。
其具体实施步骤如下：
（1）培养基制备：按比例称取土豆、葡萄糖、蛋白胨、琼脂、马尾松针粉末、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1。将土豆削皮、切块后取200g，1000mL沸水浸提30分钟后六层纱布过滤得到土豆浸提液，先加入称好的琼脂，待琼脂充分溶解后依次加入马尾松针粉末、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1、葡萄糖，定容至1000ml。
（2）灭菌：将制备好的发酵培养基分装至锥形瓶，于高压灭菌锅中121℃灭菌30min，取出备用。
（3）接种：采用绣球菌固体菌种进行接种，将经过活化的绣球菌菌种打孔后于超净工作台中接入灭菌后的发酵培养基中，接种量为3块菌饼直径为0.9cm绣球菌菌丝块接入100mL发酵培养基中。
（4）培养：将接种后的发酵培养基于25℃摇床中发酵培养18天，摇床转速为160rpm/min。
实施例3
所述培养基配方如下：土豆浸提液80%，葡萄糖2% 、蛋白胨0.2%、琼脂0.15%，马尾松针粉末0.05%，磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.1%、碳酸钙0.1%、维生素B1 0.0005%，余量为水，各组分质量之和为100%，pH自然。
其具体实施步骤如下：
（1）培养基制备：按比例称取土豆、葡萄糖、蛋白胨、琼脂、马尾松针粉末、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1。将土豆削皮、切块后取200g，1000mL沸水浸提30分钟后六层纱布过滤得到土豆浸提液，先加入称好的琼脂，待琼脂充分溶解后依次加入马尾松针粉末、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1、葡萄糖，定容至1000ml。
（2）灭菌：将制备好的发酵培养基分装至锥形瓶，于高压灭菌锅中121℃灭菌30min，取出备用。
（3）接种：采用绣球菌固体菌种进行接种，将经过活化的绣球菌菌种打孔后于超净工作台中接入灭菌后的发酵培养基中，接种量为5块菌饼直径为0.9cm绣球菌菌丝块接入100mL发酵培养基中。
（4）培养：将接种后的发酵培养基于25℃摇床中发酵培养18天，摇床转速为160rpm/min。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (2)

1. 一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基，其特征在于：所述培养基含有以下原料：土豆浸提液80%，葡萄糖1%、蛋白胨0.2%、琼脂0.2%，马尾松针粉末0.03%，磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.1%、碳酸钙0.15%、维生素B1 0.001%，余量为水，各组分质量之和为100%，pH自然。
2.如权利要求1所述的一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基的制备方法，其特征在于，其具体步骤如下：
（1）培养基制备：按比例称取土豆、葡萄糖、蛋白胨、琼脂、马尾松针粉末、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1，将土豆削皮、切块200g，1000mL沸水浸提30分钟后六层纱布过滤得到土豆浸提液，在土豆浸提液中加入琼脂，待琼脂充分溶解后依次加入马尾松针粉末、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、碳酸钙、维生素B1，葡萄糖最后加入；
（2）灭菌：将制备好的发酵培养基分装至锥形瓶，每瓶100mL于高压灭菌锅中121℃灭菌30min，取出备用；
（3）接种：采用绣球菌固体菌种进行接种，将经过活化的绣球菌菌种打孔后于超净工作台中接入灭菌后的发酵培养基中，将3-5块直径为0.9cm绣球菌菌丝块接入100mL发酵培养基中；
（4）培养：将接种后的发酵培养基于25℃摇床中发酵培养18天，摇床转速为160rpm/min。
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