CN116240116A - 一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法 - Google Patents

一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116240116A
CN116240116A CN202310236878.4A CN202310236878A CN116240116A CN 116240116 A CN116240116 A CN 116240116A CN 202310236878 A CN202310236878 A CN 202310236878A CN 116240116 A CN116240116 A CN 116240116A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture medium
supplement
preparation
solution
vitamin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202310236878.4A
Other languages
English (en)
Inventor
李桂全
李香芬
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qinghai Jiushi Worm Grass Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Qinghai Jiushi Worm Grass Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qinghai Jiushi Worm Grass Biotechnology Co ltd filed Critical Qinghai Jiushi Worm Grass Biotechnology Co ltd
Priority to CN202310236878.4A priority Critical patent/CN116240116A/zh
Publication of CN116240116A publication Critical patent/CN116240116A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及培养基的制备方法技术领域，特别涉及一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括S1：制备基础培养基；S2：制备补充剂1和补充剂2；S3：制备混合培养基，即在基础培养基中加入补充剂2并灭菌处理，然后加入补充剂1，搅拌均用，得到混合培养基。本发明制备方法简单，制备得到的培养基可有效促进冬虫夏草菌种快速生长，为生产提供大量的发酵菌种。

Description

一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法
技术领域
本发明涉及培养基的制备方法技术领域，特别涉及一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法。
背景技术
冬虫夏草是鳞翅目蝙蝠蛾科蝠蛾属幼虫被子囊菌纲肉座菌目麦角菌科虫草属冬虫夏草（Ophiocordyceps sinensis）真菌寄生后形成的虫菌复合体。青藏高原因其独特的地理、气候生态环境，孕育了众多独特生物资源，其中冬虫夏草有“百药之王”的美誉，味甘性温、药性平和、温而不燥、补而不滞，被历代医家称为“治诸虚百损之上品”。是传统中医药理论中唯一能起到阴阳并补的中药。因其独特的药理药效，受到广大销售者的青睐，需求也日益剧增，但冬虫夏草产区产量相当有限，加之国家为了保护三江源生态环境，禁采禁挖相关政策的出台，冬虫夏草资源更加稀缺。为缓解市场的供需矛盾，亟待发展人工发酵冬虫夏草菌丝产品，这也是解决冬虫夏草资源紧缺的一种有效途径。
现有技术中，冬虫夏草菌种分离培养所用培养基都是普通培养基，很少添加维生素和微量元素，导致生长缓慢，在生产无法提供充足的发酵菌种，限制了规模化生产菌种需求量和生产规模。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，使分离的冬虫夏草菌种在该培养基中能快速生长，为生产提供大量的发酵菌种。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括以下步骤：
S1：制备基础培养基
该基础培养基包含以下组分：蛋白胨3-10g/L、酵母提取粉为5-20g/L、葡萄糖为5-20g/L、磷酸二氢钾 0.5 g/L、硫酸镁为0.5 g/L、琼脂20 g/L；按配方依次加入上述组分和蒸馏水，搅拌溶解制成溶液，121℃下灭菌30-35min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用；
S2：制备补充剂
补充剂1：包含以下组分，维生素B150-200g/L、维生素B1210-100g/L、维生素B910-100g/L，按配方加入上述组分和蒸馏水，充分搅拌溶解配制成溶液，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤上述溶液，将滤液密封保存备用；
补充剂2：包含以下组分，硫酸亚铁5-30g/L、硝酸钙50-200g/L、氯化钠50-150g/L，按配方加入上述组分和蒸馏水配制成溶液，保存备用；
S3：制备本发明培养基
在灭菌容器中加入步骤S1中的基础培养基，然后再加入步骤S2制备的补充剂2，121℃下灭菌30-35min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入补充剂1，补充剂1和补充剂2的添加量均为基础培养基量的0.5%-1%；搅拌均用，得到混合培养基，将混合培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。制备得到的混合培养基即为本发明促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基。
进一步地，步骤S1中所述基础培养基包含以下组分，蛋白胨5g/L、酵母提取粉为12g/L、葡萄糖为15g/L、磷酸二氢钾0.5 g/L、硫酸镁为0.5 g/L、琼脂20 g/L，即每1L蒸馏水中加入蛋白胨5g、酵母提取粉为12g、葡萄糖为15g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁为0.5g、琼脂20g。
进一步地，步骤S2中所述补充剂1包含以下组分，维生素B1100g/L、维生素B1250g/L和维生素B950g/L，即每1L蒸馏水中加入维生素B1100g、维生素B1250g和维生素B950g。
进一步地，骤S2中所述补充剂2包含以下组分，硫酸亚铁10g/L、硝酸钙100g/L和氯化钠50g/L，即每1L蒸馏水中硫酸亚铁、硝酸钙和氯化钠的添加量分别为10g、100g和50g。
与现有技术相比，本发明一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法具有以下有益效果：
1.原料容易得到，成本低；
2.制备方法简单，制备得到的培养基可有效促进冬虫夏草菌种快速生长，为生产提供大量的发酵菌种。
实施方式
为使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步详细描述，以下实施例仅用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例
本实施例提供一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括以下步骤：
S1：制备基础培养基
取蛋白胨5g、酵母提取粉为12g、葡萄糖为15g、磷酸二氢钾为0.5g、硫酸镁为0.5g、琼脂20g，加入1000ml蒸馏水，搅拌溶解制成溶液，在121℃下灭菌30min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
S2：制备补充剂
补充剂1：取维生素B11g、维生素B120.5g、维生素B90.5g，加入10ml蒸馏水，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤溶液，将滤液在无菌带盖三角瓶中密封保存备用；
补充剂2：将硫酸亚铁0.1g、硝酸钙1g、氯化钠0.5g、蒸馏水10ml加入带盖三角瓶中，配置成溶液保存备用；
S3：制备本发明培养基
在灭菌容器中加入步骤S1制备好的基础培养基1L，然后再加入10ml补充剂2， 121℃下灭菌30min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入10ml补充剂1，并搅拌均用，得到混合培养基，将混合培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。制备得到的混合培养基即为本发明促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基。
实施例
本实施例提供一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括以下步骤：
S1：制备基础培养基
取蛋白胨3g、酵母提取粉为5g、葡萄糖为5g、磷酸二氢钾为0.5g、硫酸镁为0.5g、琼脂20g，加入1000ml蒸馏水，搅拌溶解制成溶液，在121℃下灭菌30min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
S2：制备补充剂
补充剂1：将维生素B10.5g、维生素B120.1g、维生素B90.1g，蒸馏水10ml加入三角瓶中，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤溶液，将滤液在无菌带盖三角瓶中密封保存备用。
补充剂2：依次将硫酸亚铁0.05g、硝酸钙0.5g、氯化钠0.5g、蒸馏水10ml加入带盖三角瓶中，配置成溶液保存备用；
S3：制备本发明培养基
在灭菌的三角瓶中加入步骤S1制备好的基础培养基1L，然后再加入5ml补充剂2，盖好棉塞，121℃下灭菌30min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入5ml补充剂1，并搅拌均用，得到混合培养基，该培养基即为本发明促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基。将培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
实施例
本实施例提供一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，包括以下步骤：
S1：制备基础培养基
蛋白胨10g、酵母提取粉为20g、葡萄糖为20g、磷酸二氢钾为0.5g、硫酸镁为0.5g、琼脂20g、蒸馏水1000ml，将上述配方依次加入三角瓶中，盖好棉塞，在121℃下灭菌35min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
S2：制备补充剂
补充剂1：取维生素B12g、维生素B121g、维生素B91g、蒸馏水10ml加入三角瓶中，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤溶液，将滤液在无菌带盖三角瓶中密封保存备用。
补充剂2：取硫酸亚铁0.3g、硝酸钙2g、氯化钠1.5g、蒸馏水10ml加入带盖三角瓶中，配置成溶液保存备用；
S3：制备本发明培养基
在灭菌容器中加入步骤S1制备好的基础培养基1L，然后再加入8ml补充剂2，盖好棉塞，121℃下灭菌35min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入8ml补充剂1，并搅拌均用，得到混合培养基，该培养基即为本发明促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基。将培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
实施例
本实施例以实施例1的配方和制备方法为依据，制备得到基础培养基和本发明培养基，然后将提前分离的冬虫夏草菌种在无菌环境中分别接入基础培养基和本发明培养基中，菌块直径为5mm，其他所有条件均相同，培养90天，每10天进行观察记录，测定菌落直径，计算菌落平均值，观察其生长速度，具体见表1。
培养天数 基础培养基菌落直径平均值mm 本发明培养基菌落直径平均值mm
0天 5 5
10天 5.5 6.3
20天 5.7 7.2
30天 7.4 9.5
40天 7.7 12.6
50天 7.9 13.3
60天 8.3 20.1
70天 8.5 24.7
80天 8.8 25.3
90天 8.8 25.5
综上，通过本发明制备得到的培养基其培养的冬虫夏草菌种生长状况明显优于基础培养基中菌种繁殖速度。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种变换，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：制备基础培养基
该基础培养基包含以下组分：蛋白胨3-10g/L、酵母提取粉为5-20g/L、葡萄糖为5-20g/L、磷酸二氢钾 0.5g/L、硫酸镁为0.5g/L、琼脂20g/L；按配方依次加入上述组分和蒸馏水，搅拌溶解制成溶液，121℃下灭菌30-35min，取出灭菌溶液，在无菌环境下分装至培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用；
S2：制备补充剂
补充剂1：包含以下组分，维生素B150-200g/L、维生素B1210-100g/L、维生素B910-100g/L，按配方加入上述组分和蒸馏水，充分搅拌溶解配制成溶液，在无菌环境下通过细菌过滤器过滤上述溶液，将滤液密封保存备用；
补充剂2：包含以下组分，硫酸亚铁5-30g/L、硝酸钙50-200g/L、氯化钠50-150g/L，按配方加入上述组分和蒸馏水配制成溶液，保存备用；
S3：制备本发明培养基
在灭菌容器中加入步骤S1制备好的基础培养基，然后再加入步骤S2制备得到的补充剂2，121℃下灭菌30-35min后取出灭菌溶液，在无菌环境下快速加入补充剂1，补充剂1和补充剂2的添加量均为基础培养基添加量的0.5%-1%，搅拌均用，得到混合培养基，将混合培养基分装至灭菌后的培养皿中，每皿分装量为培养皿1/3高度，凉至室温，待凝固后备用。
2.根据权利要求1所述的一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，其特征在于：步骤S1中所述基础培养基包含以下组分，蛋白胨5g/L、酵母提取粉为12g/L、葡萄糖为15g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸镁为0.5g/L、琼脂20 g/L。
3.根据权利要求1所述的一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，其特征在于：步骤S2中所述补充剂1包含以下组分，维生素B1100g/L、维生素B1250g/L和维生素B950g/L。
4.根据权利要求1所述的一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法，其特征在于：步骤S2中所述补充剂2包含以下组分，硫酸亚铁10g/L、硝酸钙100g/L和氯化钠50g/L。
CN202310236878.4A 2023-03-13 2023-03-13 一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法 Pending CN116240116A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310236878.4A CN116240116A (zh) 2023-03-13 2023-03-13 一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310236878.4A CN116240116A (zh) 2023-03-13 2023-03-13 一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116240116A true CN116240116A (zh) 2023-06-09

Family

ID=86634845

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310236878.4A Pending CN116240116A (zh) 2023-03-13 2023-03-13 一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116240116A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112342145A (zh) * 2020-11-04 2021-02-09 青海久实虫草生物科技有限公司 一种蝙蝠蛾被毛孢真菌的复壮方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112342145A (zh) * 2020-11-04 2021-02-09 青海久实虫草生物科技有限公司 一种蝙蝠蛾被毛孢真菌的复壮方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108504621B (zh) 用于蝙蝠蛾拟青霉Cs-4的培养基及其制备方法
CN103304278B (zh) 一种含有海藻浸提液的海藻菌肥及其制备方法
CN101565689B (zh) 丛枝菌根真菌孢子的高密度纯种生产方法
CN102154407B (zh) 北冬虫夏草多糖两阶段发酵合成工艺
CN103194410B (zh) 一种胶冻样类芽孢杆菌以及利用其生产复合微生物菌剂的方法
CN110184200B (zh) 一种高产绣球菌菌丝体发酵培养基及制备方法
CN110249912B (zh) 一种桑黄工厂化瓶栽的方法
CN103483040B (zh) 冬虫夏草规模化液体深层发酵用培养基及其发酵生产方法
US20210079339A1 (en) Fermentation production process of paecilomyces hepialis cs-4
CN108401794A (zh) 一种天麻蜜环菌液体菌种生产方法及栽培种专用培养基
CN102845225A (zh) 海鲜菇液体菌种发酵工艺方法
CN104893983A (zh) 液态发酵低桔霉素、高色价红曲红色素的制备方法及制品
CN116240116A (zh) 一种促进冬虫夏草菌种快速生长的培养基的制备方法
CN110218656B (zh) 利用空气压力脉动的灵芝-药渣双向固体发酵方法及应用
CN107354071A (zh) 一种保健养生牛樟芝原浆药酒及其制备方法
CN102911871A (zh) 一种应用于发酵大生产的菌种保存方法
CN110669678A (zh) 一种灰黄霉素菌种固体培养基
CN103553755A (zh) 一种冬虫夏草菌粉、其生产方法及专用培养基
CN103497896B (zh) 一种脱水窖泥功能菌保护剂及其应用
CN100412186C (zh) 木蹄层孔菌及液体深层发酵制备木蹄层孔菌菌体的方法
CN101659970B (zh) 阿维菌素发酵废水和侧耳素发酵废水循环处理方法
CN110628648B (zh) 一种产液化型淀粉酶的根毛霉菌及应用
CN105779312B (zh) 一种提高冬虫夏草菌的单位质量固体培养基发酵效率的方法
CN111937676A (zh) 一种羊肚菌菌丝体培养基及其制备方法
CN116200276A (zh) 一种促进冬虫夏草菌种产生孢子、增加菌落总数的培养基

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination