CN110179127B - 一种促铁锌钙吸收的营养强化剂及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促铁锌钙吸收的营养强化剂及其制备方法，所述的促进铁锌钙吸收的营养强化剂为丝胶磷酸肽二十八烷醇酯，其制备方法是以丝胶蛋白为原料，在冻融酵母的蛋白酶和蛋白激酶的共同作用下，利用葡萄糖作为能量供体，将丝胶蛋白降解为小肽并磷酸化为丝胶磷酸肽，丝胶磷酸肽与二十八烷醇在脂肪酶的作用下反应，酯化后形成丝胶磷酸肽二十八烷醇酯。丝胶磷酸肽二十八烷醇酯常温下呈固态的浅黄色粉末，无味，可溶于水。本发明丝胶磷酸肽二十八烷醇酯能够螯合无机二价阳离子，包括铁、钙、锌等，强化这些微量元素的吸收，丝胶磷酸肽二十八烷醇酯可作为一种新型营养强化剂在食品中应用。
Description
技术领域
本发明涉及生物化工及食品添加剂领域，具体涉及一种促铁锌钙吸收的营养强化剂及制备方法。
背景技术
被覆于丝素外围的丝胶层，约占茧层质量的25％，对丝素起到保护和胶粘作用，除含少量蜡质、碳水化合物、色素和无机成分外，主要成分为丝胶蛋白。但传统的丝绸行业，主要是利用蚕丝的内层丝素部分，而对蚕丝的外层丝胶部分，由于制丝及纺织工艺的需要，没有加以利用。丝胶蛋白是一种球状蛋白，相对分子质量为1.4～31.4万，由18种氨基酸组成，其中丝氨酸、天冬氨酸和甘氨酸含量较高，含有人体所必需的氨基酸达17％以上，高于一般食品，且90％以上能被人体吸收，因此将部分降解的丝胶添加到食品中，是很好的氨基酸补充途径。由于丝胶能抑制多酚氧化酶的活性，在食品中加入丝胶蛋白，可以起抗氧化剂的作用。
钙、铁、锌是人体容易缺乏的矿物质，特别是处于生长发育阶段的少年儿童。缺钙除了会导致佝偻病、骨质疏松症外，钙还是多种酶的激活剂；是细胞膜中重要成分，维持细胞膜的完整性，神经、肝、红细胞和心肌等的细胞膜上都有钙结合部位；钙参与神经和肌肉的活动，神经递质的释放、神经肌肉的兴奋、神经冲动的传导、激素的分泌、血液的凝固、细胞粘附、肌肉收缩等活动都需要钙。钙助于预防高血压。缺铁除导致贫血外，还会使运动能力低下、怕冷、智能障碍、免疫力下降等。铁参与血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及许多酶的合成，在氧的运输及呼吸链电子传递、氧化－还原等许多代谢中起重要作用，铁与机体能量代谢密切相关，也与机体防御反应有关。锌缺乏时会出现生长发育迟缓、身材矮小、性器官发育不良等异常。
通过食物强化解决铁、锌、钙等微营养不良问题是国际公认的最经济、有效的方法。铁、锌、钙的效价、溶解度决定了食品中铁、锌、钙的生物利用率，有机铁、锌、钙比无机铁、锌、钙对肠胃刺激性小且易于吸收。为此，研究者一直在致力于新型营养强化材料的开发，利用生物技术开发新型高效铁、锌、钙营养强化剂为重要方向。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种促铁锌钙吸收的营养强化剂及制备方法，本发明提供的促铁锌钙吸收的营养强化剂可溶于水，且有利于促进食品中铁、锌、钙的生物利用率。
本发明提供了一种促铁锌钙吸收的营养强化剂，所述促铁锌钙吸收的营养强化剂为丝胶磷酸肽二十八烷醇酯。
本发明还提供了一种上述技术方案所述的促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，包括如下步骤：
S1：将啤酒发酵副产物废酵母反复冻融数次，制得酵母酶液；
S2：向所述酵母酶液中加入丝胶蛋白、葡萄糖、磷酸二氢钾、无水硫酸镁和水，充分搅拌，加入盐酸溶液调节pH值至6.0得到第一反应液，搅拌反应，得到转化液；
S3：将所述转化液沸水浴处理15min灭酶，再在10000r/min条件下离心30min，取清液，用截留分子量为10000的超滤膜对所述清液进行超滤，收集滤过液，经纳滤脱盐后喷雾干燥得丝胶磷酸肽；
S4：将脂肪酶、二十八烷醇和所述丝胶磷酸肽加入有机溶剂，充分搅拌得到第二反应液，所述第二反应液进行酯化反应后得酯化液；
S5：将所述酯化液用等体积的水洗涤三次，收集水相，喷雾干燥得丝胶磷酸肽二十八烷醇酯，即促铁锌钙吸收的营养强化剂。
优选的，所述第一反应液中各组分含量为：丝胶蛋白20～25g/L、酵母酶液200～400g/L、葡萄糖100～200g/L、磷酸二氢钾40～60g/L、无水硫酸镁30～50g/L。
优选的，步骤S2中，反应温度30℃～40℃，反应时间24h～48h。
优选的，步骤S3中，超滤压力为0.3～0.4MPa，超滤温度为4～10℃；纳滤压力为0.4～0.5MPa，纳滤温度为15～25℃，喷雾干燥的流速为10～20mL/min，喷雾干燥的进风温度130～160℃。
优选的，所述第二反应液中各组分含量为：丝胶磷酸肽100～200g/L、脂肪酶1～5g/L、二十八烷醇10g～20g/L。
优选的，所述有机溶剂为正己烷、环己烷、正辛烷中的一种或多种。
优选的，步骤S4中，酯化反应温度为30℃～40℃，酯化反应时间3h～8h。
优选的，步骤S5中，喷雾干燥的流速为20～30mL/min，喷雾干燥的进风温度150℃～180℃。
优选的，所述脂肪酶活力为1000U/g。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明制备丝胶磷酸肽二十八烷醇酯时的主要原料为丝绸工业的副产物丝胶蛋白制备，催化剂为啤酒工业的副产物废酵母，生产成本很低。
(2)本发明通过酯化解决了二十八烷醇水溶性不佳的问题，丝胶磷酸肽二十八烷醇酯常温下呈固态的浅黄色粉末，无味，可溶于水。
(3)本发明将丝胶蛋白降解为小分子肽并磷酸化其丝氨酸残基，使得其携带钙离子、亚铁离子和锌离子等二价金属阳离子的效率大大提高，将钙、铁、锌转变为有机钙、有机铁和有机锌，有利于生物体对钙铁锌的吸收，提高了钙、铁、锌的生物利用度。
(4)本发明提供的制备方法操作简单、方便，适于工业化生产。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种促铁锌钙吸收的营养强化剂，该促铁锌钙吸收的营养强化剂为丝胶磷酸肽二十八烷醇酯。
本发明还提供了一种上述技术方案所述的促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，包括如下步骤：
S1：将啤酒发酵副产物废酵母反复冻融数次，制得酵母酶液；
S2：向所述酵母酶液中加入丝胶蛋白、葡萄糖、磷酸二氢钾、无水硫酸镁和水，充分搅拌，加入盐酸溶液调节pH值至6.0得到第一反应液，搅拌反应，得到转化液；
S3：将所述转化液沸水浴处理15min灭酶，再在10000r/min条件下离心30min，取清液，用截留分子量为10000的超滤膜对所述清液进行超滤，收集滤过液，经纳滤脱盐后喷雾干燥得丝胶磷酸肽；
S4：将脂肪酶、二十八烷醇和所述丝胶磷酸肽加入有机溶剂，充分搅拌得到第二反应液，所述第二反应液进行酯化反应后得酯化液；
S5：将所述酯化液用等体积的水洗涤三次，收集水相，喷雾干燥得丝胶磷酸肽二十八烷醇酯，即所述促铁锌钙吸收的营养强化剂。
本发明首先将啤酒发酵副产物废酵母在-20℃放置12小时，然后在25℃放置12小时，如此重复多次，得到酵母酶液。
得到酵母酶液后，向酵母酶液中加入丝胶蛋白、葡萄糖、磷酸二氢钾、无水硫酸镁和水，充分搅拌，加入盐酸溶液调节pH值至6.0得到第一反应液，搅拌反应，得到转化液；在本发明中，第一反应液各组分的含量优选为丝胶蛋白20～25g/L、酵母酶液200～400g/L、葡萄糖100～200g/L、磷酸二氢钾40～60g/L、无水硫酸镁30～50g/L。盐酸溶液优选采用0.5mol/L的盐酸溶液。反应温度优选为30℃～40℃，反应时间24h～48h。
得到转化液后，将转化液沸水浴处理15min灭酶，再在10000r/min条件下离心30min，取清液，用截留分子量为10000的超滤膜对所述清液进行超滤，收集滤过液，经纳滤脱盐后喷雾干燥得丝胶磷酸肽；在本发明中，超滤压力优选为0.3～0.4MPa，超滤温度优选为4～10℃；纳滤压力优选为0.4～0.5MPa，纳滤温度优选为15～25℃，喷雾干燥的流速优选为10～20mL/min，喷雾干燥的进风温度优选魏130～160℃。
得到丝胶磷酸肽后，将脂肪酶、二十八烷醇和丝胶磷酸肽加入有机溶剂，充分搅拌得到第二反应液，第二反应液进行酯化反应后得酯化液；在本发明中，第二反应液中各组分含量优选为：丝胶磷酸肽100～200g/L、脂肪酶1～5g/L、二十八烷醇10g～20g/L。脂肪酶活力优选为1000U/g。有机溶剂优选为正己烷、环己烷、正辛烷中的一种或多种。酯化反应温度优选为30℃～40℃，酯化反应时间优选为3h～8h。
得到酯化液后，将酯化液用等体积的水洗涤三次，收集水相，喷雾干燥得丝胶磷酸肽二十八烷醇酯，即促铁锌钙吸收的营养强化剂。本发明中，喷雾干燥的流速优选为20～30mL/min，喷雾干燥的进风温度优选为150℃～180℃。
实施例1
S1：将啤酒发酵副产物废酵母在-20℃放置12小时，然后在25℃放置12小时，如此重复4次，得到酵母酶液，于0℃保存；
S2：称取丝胶蛋白22g，酵母酶液300g，葡萄糖150g，磷酸二氢钾50g，无水硫酸镁40g，加入到1000mL水中，充分搅拌，用0.5mol/L的盐酸溶液将上述溶液pH值调至6.0，在60r/min搅拌条件下37℃反应40h，得到转化液；
S3：将步骤S2得到的转化液沸水浴处理15min灭酶，再在10000r/min条件下离心30min，取清液。清液在超滤压力为0.35MPa，温度5℃下用截留分子量为10000的超滤膜对其进行超滤，收集滤过液，再在20℃，0.45Mpa压力下纳滤脱盐后喷雾干燥，喷雾干燥的流速为15mL/min，进风温度为150℃，即得丝胶磷酸肽；
S4：称取丝胶磷酸肽15g，脂肪酶(酶活1000U/g)0.3g，二十八烷醇1.5g，加入到100mL环己烷中，在37℃酯化反应6h反应，制得酯化液；
S5：将步骤S4得到的酯化液用等体积的水洗涤三次，收集水相，喷雾干燥，喷雾干燥的流速为25mL/min，进风温度为160℃，得丝胶磷酸肽二十八烷醇酯，即促铁锌钙吸收的营养强化剂。
实施例2：
S1：将啤酒发酵副产物废酵母在-20℃放置12小时，然后在25℃放置12小时，如此重复4次，得到酵母酶液，于0℃保存；
S2：称取丝胶蛋白20g，酵母酶液200g，葡萄糖100g，磷酸二氢钾40g，无水硫酸镁30g，加入到1000mL水中，充分搅拌，用0.5mol/L的盐酸溶液将上述溶液pH值调至6.0，在60r/min搅拌条件下30℃反应24h，得到转化液；
S3：将步骤S2得到的转化液沸水浴处理15min灭酶，再在10000r/min条件下离心30min，取清液。清液在超滤压力为0.3MPa，温度4℃下用截留分子量为10000的超滤膜对其进行超滤，收集滤过液，再在15℃，0.4Mpa压力下纳滤脱盐后喷雾干燥，喷雾干燥的流速为10mL/min，进风温度为130℃，即得丝胶磷酸肽；
S4：称取丝胶磷酸肽10g，脂肪酶(酶活1000U/g)0.1g，二十八烷醇1.0g，加入到100mL正己烷中，在30℃酯化反应3h反应，制得酯化液；
S5：将步骤S4得到的酯化液用等体积的水洗涤三次，收集水相，喷雾干燥，喷雾干燥的流速为20mL/min，进风温度为150℃，得丝胶磷酸肽二十八烷醇酯，即促铁锌钙吸收的营养强化剂。
实施例3：
S1：将啤酒发酵副产物废酵母在-20℃放置12小时，然后在25℃放置12小时，如此重复4次，得到酵母酶液，于0℃保存；
S2：称取丝胶蛋白25g，酵母酶液400g，葡萄糖200g，磷酸二氢钾60g，无水硫酸镁50g，加入到1000mL水中，充分搅拌，用0.5mol/L的盐酸溶液将上述溶液pH值调至6.0，在60r/min搅拌条件下40℃反应48h，得到转化液；
S3：将步骤S2得到的转化液沸水浴处理15min灭酶，再在10000r/min条件下离心30min，取清液。清液在超滤压力为0.4MPa，温度10℃下用截留分子量为10000的超滤膜对其进行超滤，收集滤过液，再在25℃，0.5Mpa压力下纳滤脱盐后喷雾干燥，喷雾干燥的流速为20mL/min，进风温度为160℃，即得丝胶磷酸肽；
S4：称取丝胶磷酸肽20g，脂肪酶(酶活1000U/g)0.5g，二十八烷醇2.0g，加入到100mL正辛烷中，在40℃酯化反应8h反应，制得酯化液；
S5：将步骤S4得到的酯化液用等体积的水洗涤三次，收集水相，喷雾干燥，喷雾干燥的流速为30mL/min，进风温度为180℃，得丝胶磷酸肽二十八烷醇酯，即促铁锌钙吸收的营养强化剂。
本发明经动物试验证实安全无毒，实验结果与结论如下：
1)急性毒性实验表明：根据急性毒性剂量分级标准，属实际无毒性级；
2)骨髓细胞微核试验、精子畸形试验、Ames试验结果为阴性；
3)30天喂养试验：实验动物生长情况良好，血液学检查，生化学检查，主要脏体比及组织学检查结果与对照组相比，均未见异常，证明本发明安全无毒。
实验例1
本发明促铁钙锌吸收的营养强化剂对营养性锌缺乏小鼠的影响。
1)试验样品：本发明实施1、实施例2、实施例3、市售葡萄糖酸锌口服液、市售钙铁锌咀嚼片、市售childlife钙镁锌。
2)试验动物：21日龄雄性断奶小白鼠138只，体重10～15g，健康状况良好。小白鼠在SPF级动物实验室实验环境下饲养，采用塑料笼，实验过程避免微量元素污染，小白鼠自由饮去离子水和采食，自然光照。
3)试验方法：将所用小白鼠预饲玉米淀粉-酪蛋白半纯合缺锌日粮(按AOAC配方配制，基本组成：玉米淀粉63％、酪蛋白20％、玉米油8％、纤维素3％、矿物质添加剂5％和复合维生素1％，其中，矿物质添加剂中不添加锌盐)7天，使小白鼠体内锌耗竭。从所有小白鼠中任取10只，摘除眼球采血，制备血清，并取出小白鼠肝脏，采用原子吸收分光光度-火焰法测定血清锌、肝脏锌含量。将以上测定结果作为这一批小白鼠体内锌耗竭后各指标的测定结果，记为各指标初始值。
将剩余112只小白鼠随机分为7组，分别为对照组(A)、实施例1组(B)、实施例2组(C)，实施例3组(D)、市售葡萄糖酸锌口服液组(E)、市售钙铁锌咀嚼片组(F)、市售childlife钙镁锌组(G)，每组设2个重复，每个重复8只。玉米淀粉-酪蛋白半纯合缺锌日粮中添加硫酸锌(ZnSO4·7H2O)，添加量为11.67mg/kg(以锌计)，作为基础日粮，各组小白鼠从实验第8天起饲喂基础日粮，同时，对照组小白鼠灌胃给予纯水，实施例1组、实施例2组，实施例3组、市售葡萄糖酸锌口服液组、市售钙铁锌咀嚼片组、市售childlife钙镁锌组小白鼠分别灌胃给予相应的口服液或咀嚼片，按5mg/kg(以锌计)的补锌量(相当于人推荐用量的10倍)计算口服液或咀嚼片的使用剂量，并通过添加纯化水的方式使各组的灌胃体积一致。
实验第8天记为补锌第1天。于补锌第4天、第7天，摘除眼球采血，制备血清，并取出小白鼠肝脏，测定小白鼠血清锌和肝脏锌的含量。
试验结果见表1。
表1本发明促铁钙锌吸收的营养强化剂对营养性锌缺乏小鼠的影响
注：与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01。
由表1的结果可知，补锌第4天，本发明实施例小白鼠的血清锌、肝脏锌含量与对照组相比，显著提高，说明本发明促铁钙锌吸收的营养强化剂促进锌的吸收效果好，生物利用度高。而市售3组(E组、F组和G组)小白鼠的血清锌和肝脏锌含量，与对照组相比，补锌第7天才达到显著水平，且值普遍低于实施例组。钙、铁、锌的性质相似，因此，可以预见丝胶磷酸肽二十八烷醇酯也能够促进铁和钙的吸收。因此，本发明的促铁钙锌吸收的营养强化剂与市售锌强化剂相比有更快更好的促进锌吸收作用。
实验例2
本发明促铁钙锌吸收的营养强化剂对大鼠钙吸收的影响
1)试验样品：本发明实施1、实施例2、实施例3、市售葡萄糖酸锌口服液、市售钙铁锌咀嚼片、市售childlife钙镁锌。
2)试验动物：出生21d断奶SD大鼠140只，雌雄各半，健康状况良好。
3)试验方法：将所用SD大鼠适应性喂养4d后，随机分成7组。实验I组：基础低钙饲料+实施例1；实验II组：基础低钙饲料+实施例2；实验III组：基础低钙饲料+实施例3；实验IV组：基础低钙饲料+市售钙铁锌咀嚼片(含钙量为9.48％)；实验V组：基础低钙饲料+市售childlife钙镁锌(含钙量为1.68％)；实验VI组：基础低钙饲料+市售骨粉(含钙量为25％)；实验VII组：基础低钙饲料(含钙量为0.15％)；
实验各组20只大鼠，雌雄各半。I～VII组SD大鼠按组别、性别分别饲养在聚乙烯塑料盒内，动物自由进食2周基础低钙饲料，自由饮用去离子水，作为空耗期。空耗期后，进行4周的生长实验，最后3d进行代谢实验，测定饲料钙、粪钙、尿钙，计算钙的吸收率及存留率。
粪钙、尿钙及饲料钙的含量测定均按GB12398-90方法，采用原子吸收分光光度计测定。
试验结果见表2。
表2本发明促铁钙锌吸收的营养强化剂对大鼠钙吸收的影响
| 营养强化剂 | 钙吸收率(％) | 钙存留率(％) | |
| 实验I组 | 实施例1 | 98.5±0.8 | 95.2±3.3 |
| 实验II组 | 实施例2 | 97.4±1.2 | 94.5±1.9 |
| 实验III组 | 实施例3 | 95.9±2.5 | 92.7±4.6 |
| 实验IV组 | 市售钙铁锌咀嚼片 | 52.5±4.7 | 44.9±6.1 |
| 实验V组 | 市售childlife钙镁锌 | 48.6±6.8 | 46.5±10.2 |
| 实验VI组 | 市售骨粉 | 56.8±9.4 | 48.2±4.4 |
| 实验VII组 | 低钙饲喂对照 | 22.9±1.6 | 24.0±2.9 |
如表2结果所示，本发明实施例的促铁钙锌吸收的营养强化剂能够强化钙的吸收和体内存留，且比市售补钙制剂效果更佳明显。
实验例3
本发明促铁钙锌吸收的营养强化剂对缺铁性贫血大鼠模型铁吸收利用影响
1)试验样品：本发明实施1、实施例2、实施例3、市售硫酸亚铁片、市售富血铁片、市售力蜚能多糖铁复合物。
2)试验动物及造模：体重180-210g SD大鼠200只，雌雄各半，健康状况良好。造模前取血测动物血细胞正常值。除雌雄各留5只作为正常对照，喂普通饲料外，其余均进行缺铁性贫血模型的制备。缺铁性贫血模型：大鼠饲喂低铁饲料(玉米淀粉5％，全脂奶粉39％，豆油5％，食盐1％，含铁量为4.42mg/kg)，并辅以每3天放尾血l次，放血量为每次120滴/千克体重，共放血4次。动物均雌雄分置饲养于不锈钢网盖的塑料笼内，自由进食。20天后，造模动物全部取血测Hb与全血铁含量。取Hb在90g/L、全血铁含量在430μg/ml以下的造模动物共160只(雌雄各半)。
3)试验方法：将造模动物随机分成7组，每组20只，雌雄各半。实验I组：普通饲料(含铁127.4mg/kg)+实施例1；实验II组：普通饲料+实施例2；实验III组：普通饲料+实施例3；实验IV组：普通饲料+市售硫酸亚铁片(含铁量为20％)；实验V组：普通饲料+市售富血铁片(含铁量为32.8％)；实验VI组：普通饲料+市售力蜚能多糖铁复合物(含铁量为46％)；实验VII组：低铁饲料。
分组后，进行4周的生长实验，取血测Hb与全血铁含量。
试验结果见表3。
表3本发明促铁钙锌吸收的营养强化剂对缺铁性贫血大鼠模型铁吸收利用影响
| 营养强化剂 | Hb(g/L) | 全血铁含量(μg/ml) | |
| 实验I组 | 实施例1 | 128.5±5.2 | 558.3±24.5 |
| 实验II组 | 实施例2 | 126.5±4.3 | 503.0±57.6 |
| 实验III组 | 实施例3 | 127.5±2.7 | 499.8±31.4 |
| 实验IV组 | 市售硫酸亚铁片 | 101.1±5.0 | 399.7±30.9 |
| 实验V组 | 市售富血铁片 | 105.4±4.2 | 412.9±34.5 |
| 实验VI组 | 市售力蜚能多糖铁复合物 | 118.3±4.9 | 423.4±40.4 |
| 实验VII组 | 模型对照 | 78.2±7.2 | 307.1±58.4 |
如表3结果所示，本发明实施例的促铁钙锌吸收的营养强化剂能够强化缺铁性贫血大鼠对铁的吸收和利用，大鼠体内血红蛋白(Hb)和全血铁含量都有显著提高，且比市售补铁制剂效果更佳明显。
以上所述仅仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：将啤酒发酵副产物废酵母反复冻融数次，制得酵母酶液；
S2：向所述酵母酶液中加入丝胶蛋白、葡萄糖、磷酸二氢钾、无水硫酸镁和水，充分搅拌，加入盐酸溶液调节pH值至6.0得到第一反应液，搅拌反应，得到转化液，所述第一反应液中各组分含量为：丝胶蛋白20~25g/L、酵母酶液200~400g/L、葡萄糖100~200g/L、磷酸二氢钾40~60g/L、无水硫酸镁30~50g/L；
S3：将所述转化液沸水浴处理15min灭酶，再在10000r/min条件下离心30min，取清液，用截留分子量为10000的超滤膜对所述清液进行超滤，收集滤过液，经纳滤脱盐后喷雾干燥得丝胶磷酸肽；
S4：将脂肪酶、二十八烷醇和所述丝胶磷酸肽加入有机溶剂，充分搅拌得到第二反应液，所述第二反应液进行酯化反应后得酯化液，所述第二反应液中各组分含量为：丝胶磷酸肽100~200g/L、脂肪酶1~5g/L、二十八烷醇10g~20g/L；
S5：将所述酯化液用等体积的水洗涤三次，收集水相，喷雾干燥得丝胶磷酸肽二十八烷醇酯，所述丝胶磷酸肽二十八烷醇酯为促铁锌钙吸收的营养强化剂。
2.根据权利要求1所述的促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，其特征在于，步骤S2中，反应温度30℃~40℃，反应时间24h~48h。
3.根据权利要求1所述的促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，其特征在于，步骤S3中，超滤压力为0.3~0.4MPa，超滤温度为4~10℃；纳滤压力为0.4~0.5MPa，纳滤温度为15~25℃，喷雾干燥的流速为10~20mL/min，喷雾干燥的进风温度130~160℃。
4.根据权利要求1所述的促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为正己烷、环己烷、正辛烷中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，其特征在于，步骤S4中，酯化反应温度为30℃~40℃，酯化反应时间3h~8h。
6.根据权利要求1所述的促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，其特征在于，步骤S5中，喷雾干燥的流速为20~30mL/min，喷雾干燥的进风温度为150℃~180℃。
7.根据权利要求1所述的促铁锌钙吸收的营养强化剂的制备方法，其特征在于，所述脂肪酶活力为1000U/g。
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