CN110178734A - 一种山兰萌发种子的定向培养基及定向培养成苗方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及组织培养技术领域，特别涉及一种山兰萌发种子的定向培养基及定向培养成苗方法。该定向培养基包括，增殖培养基：含有蔗糖、琼脂粉、6‑BA、NAA的MS培养基；分化培养基：含有蔗糖、琼脂粉、KT、IBA的MS培养基；生根培养基：含有蔗糖、琼脂粉、6‑BA、IAA的MS培养基。本申请试验以山兰萌发种子为试验材料，研究不同分裂素和生长素及配比对山兰从萌发种子到种苗发育过程中的调节和促进作用，结果表明6‑BA和NAA利于原球茎的增殖，KT和IBA利于原球茎分化为球茎，6‑BA和IAA利于球茎生根。本发明方法使山兰萌发种子定向发育，缩短成苗时间，提高成苗效率。

Description

一种山兰萌发种子的定向培养基及定向培养成苗方法
技术领域
本发明涉及组织培养技术领域，特别涉及一种山兰萌发种子的定向培养基及定向培养成苗方法。
背景技术
山兰Oreorchis patens(Lindl.)Lindl.是兰科山兰属多年生阴生草本植物，广泛分布于我国西南、华中、西北及东北各地，朝鲜半岛至西伯利亚地区、日本等地也有少量分布。其干燥球茎入药，甘、辛，寒，有小毒。具有滋阴清肺、化痰止咳的功效，用于痈疳疮肿，瘰疬，无名肿毒。但长期以来山兰的药用价值并未受到重视，而是被当做山慈菇伪品对待或者作为习用品入药。
随着近些年山兰需求量增加，价格暴涨，导致其野生资源遭到毁灭性破坏，被列为吉林省三级保护植物，关于其资源开发、药效成分、药理活性、野生驯化以及菌根真菌等的相关研究较多，但制约山兰大面积人工栽培的种苗繁育关键技术研究报道极少。
山兰种子直接产生的原球茎体积小、重量轻、球茎分化系数低。组织培养技术是在人为创造的无菌条件下将生活的离体器官(如根、茎、叶、茎段、原生质体)、组织或细胞置于培养基内，并放在适宜的环境中，进行连续培养以获得细胞、组织或个体的技术。这种技术已广泛应用于农业和生物、医药的研究。
在山兰组织培养技术中，常采用假鳞茎或叶片作为外植体进行原球茎的增殖培养，如公开号为CN107736245A的中国专利公开了一种山兰无性快繁技术，该技术用山兰假鳞茎或叶片或花序梗作外植体大量生产山兰试管苗。由于山兰种子细小、数量巨大，如果以种子做繁殖材料，进行人工定向培养，可在短时间内获得大量种苗。目前，还未见采用山兰萌发种子为外植体进行定向培养成苗的技术。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种山兰萌发种子的定向培养基及定向培养成苗方法。该发明以种子做繁殖材料，进行人工定向培养，可在短时间内获得大量种苗。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种山兰萌发种子的定向培养基，包括：
增殖培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.5～5.0g/L、6-BA 4.0～6.0mg/L、NAA7.0～9.0mg/L的MS培养基；
分化培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、KT 2.0～3.0mg/L、IBA2.0～3.0mg/L的MS培养基；
生根培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 0.08～0.12mg/L、IAA 2.0～3.0mg/L的MS培养基。
作为优选，该定向培养基包括：
增殖培养基：含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、6-BA 5.0mg/L、NAA 8.0mg/L的MS培养基；
分化培养基：含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、KT 2.5mg/L、IBA 2.5mg/L的MS培养基；
生根培养基：含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、6-BA 0.1mg/L、IAA 2.5mg/L的MS培养基。
本发明还提供了一种山兰萌发种子定向培养成苗的方法，包括：
采用增殖培养基对山兰萌发种子外植体进行增殖培养，得到原球茎；增殖培养基为含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 4.0～6.0mg/L、NAA 7.0～9.0mg/L的MS培养基；
采用分化培养基对原球茎进行分化培养，得到球茎；分化培养基为含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、KT 2.0～3.0mg/L、IBA 2.0～3.0mg/L的MS培养基；
采用生根培养基对球茎进行生根培养；生根培养基为含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 0.08～0.12mg/L、IAA 2.0～3.0mg/L的MS培养基。
作为优选，该定向培养基中，增殖培养基为含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、6-BA5.0mg/L、NAA 8.0mg/L的MS培养基；
分化培养基为含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、KT 2.5mg/L、IBA 2.5mg/L的MS培养基；
生根培养基为含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、6-BA 0.1mg/L、IAA 2.5mg/L的MS培养基。
作为优选，外植体的大小为(0.5～1.5)×(0.5～1.5)×(0.5～1.5)mm。
优选地，外植体的大小为1×1×1mm。
作为优选，增殖培养的条件为：培养温度为22～24℃，光暗周期为13～15h光期/9～11h暗期，光照强度为1400～1600lx，培养时间50～60d。
优选地，增殖培养的条件为：培养温度为23℃，光暗周期为14h光期/10h暗期，光照强度为1500lx，培养时间55d。
作为优选，分化培养的条件为：培养温度为22～24℃，光暗周期为13～15h光期/9～11h暗期，光照强度为1400～1600lx，培养时间50～60d。
优选地，分化培养的条件为：培养温度为23℃，光暗周期为14h光期/10h暗期，光照强度为1500lx，培养时间55d。
作为优选，生根培养的条件为：培养温度为22～24℃，光暗周期为13～15h光期/9～11h暗期，光照强度为1400～1600lx，培养时间50～60d。
优选地，生根培养的条件为：培养温度为23℃，光暗周期为14h光期/10h暗期，光照强度为1500lx，培养时间55d。
本发明提供了一种山兰萌发种子的定向培养基及定向培养成苗方法。该定向培养基包括，增殖培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 4.0～6.0mg/L、NAA7.0～9.0mg/L的MS培养基；分化培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、KT 2.0～3.0mg/L、IBA 2.0～3.0mg/L的MS培养基；生根培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 0.08～0.12mg/L、IAA 2.0～3.0mg/L的MS培养基。本发明具有的技术效果为：
本申请试验以山兰萌发种子为试验材料，研究不同分裂素和生长素及配比对山兰从萌发种子到种苗发育过程中的调节和促进作用，结果表明6-BA和NAA利于原球茎的增殖，在6-BA5.0mg/L+NAA8.0mg/L时原球茎增殖效果最好，达到106.9mg/原球茎；KT和IBA利于原球茎分化为球茎，在KT2.5mg/L+IBA2.5mg/L时原球茎分化为球茎效果最好，分化系数为1.3；6-BA0.1mg/L+IAA2.5mg/L时球茎生根数最多，达到6.6条/球茎。本发明方法使山兰萌发种子定向发育，缩短成苗时间，提高成苗效率。
自然条件下，山兰种子萌发时间长，萌发率极低。但是，由于山兰种子细小、数量巨大，因此以种子做繁殖材料，进行人工定向培养，可在短时间内获得大量种苗。本发明要解决的主要问题是让萌发的种子以最直接和最快的速度成苗，而不是原球茎、球茎、地下茎同时发育。
附图说明
图1为萌发种子增殖产生的原球茎；
图2为原球茎分化产生的球茎；
图3示球茎生根。
具体实施方式
本发明公开了一种山兰萌发种子的定向培养基及定向培养成苗方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供的山兰萌发种子的定向培养基及定向培养成苗方法中所用种子、培养基组分、试剂均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1
1试验材料和方法
1.1试验材料
以肉眼可分辨的萌发种子为原球茎增殖试验的外植体(约1*1*1mm)，以增殖的原球茎为球茎分化外植体，以原球茎分化产生的球茎为生根试验外植体。
1.2分裂素对原球茎增殖的影响
以MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L为基本培养基，添加分裂素为TDZ、Zt、6-BA、KT，添加量分别为0.1mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L，培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d，每处理3重复，每重复15个外植体，统计指标为外植体均重。
1.3生长素对原球茎增殖的影响
以MS+6-BA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L为基本培养基，添加生长素为2,4-D、NAA、IBA、IAA，添加量分别为0.1mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L，培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d，每处理3重复，每重复15个外植体，统计指标为外植体均重。
1.4 6-BA和NAA组合对原球茎增殖的影响
以MS+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L为基本培养基，以对原球茎增殖效果最好的6-BA和NAA进行组合，6-BA浓度为2.0mg/L、3.0mg/L、4.0mg/L、5.0mg/L、6.0mg/L，NAA浓度为6.0mg/L、7.0mg/L、8.0mg/L、9.0mg/L、10.0mg/L，培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d，每处理3重复，每重复15个外植体，统计指标为外植体均重。
1.5 6-BA、KT和ZT对原球茎分化为球茎的影响
以MS+IBA6.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L为基本培养基，添加分裂素为6-BA、KT、ZT，添加量分别为0.1mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L，培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d，每处理3重复，每重复15个外植体，统计指标原球茎分化为球茎系数，原球茎分化为球茎系数＝分化球茎数/接种原球茎数，下同。
1.6 IBA和IAA对原球茎分化为球茎的影响
以MS+6-BA 4.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L为基本培养基，添加生长素为IBA、IAA，添加量分别为0.1mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L，培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d，每处理3重复，每重复15个外植体，统计指标为原球茎分化为球茎系数。
1.7 KT和IBA组合对原球茎分化为球茎的影响
以MS+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L为基本培养基，以对原球茎分化为球茎效果最好的KT和IBA进行组合，KT浓度为2.0mg/L、2.5mg/L、3.0mg/L、3.5mg/L、4.0mg/L，IBA浓度为2.5mg/L、3.0mg/L、3.5mg/L、4.0mg/L、4.5mg/L，培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d，每处理3重复，每重复15个外植体，统计指标为原球茎分化为球茎系数。
1.8 6-BA和IAA组合对球茎生根的影响
以MS+蔗糖30g/L+琼脂粉4.5g/L为基本培养基，以6-BA和IAA进行组合，6-BA浓度为0.1mg/L、2.5mg/L、5.0mg/L、7.5mg/L、10.0mg/L，IAA浓度为0.1mg/L、2.5mg/L、5.0mg/L、7.5mg/L、10.0mg/L，培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d，每处理3重复，每重复15个外植体，统计指标为球茎生根数。
1.9数据分析
试验数据用SAS 8.01进行方差分析。
2结果与分析
2.1分裂素对原球茎增殖的影响
分裂素对原球茎增殖的影响如表1所示，各分裂素对原球茎增殖效果差异不显著，但6-BA的增殖效果较好，且随6-BA浓度增加呈先增加后降低的趋势，在6-BA4.0mg/L时达到最大值39.62mg/原球茎。
表1分裂素对原球茎增殖的影响(mg/原球茎)
注：小写字母表示差异显著(P<0.05)，下同。
2.2生长素对原球茎增殖的影响
生长素对原球茎增殖影响如表2所示，对原球茎增殖效果显著的生长素是NAA，增殖效果呈先降后增再降低的趋势，在NAA 8.0mg/L时达到最大值78.05mg/原球茎。
表2生长素对原球茎增殖的影响(mg/原球茎)
2.3 6-BA和NAA组合对原球茎增殖的影响
6-BA和NAA组合对原球茎增殖的影响如表3所示，在6-BA5.0mg/L时原球茎增殖效果较好，且随NAA浓度增大呈先增加后降低的趋势，在6-BA5.0mg/L+NAA8.0mg/L时达到最大值106.88mg/原球茎，如图1所示。
表3 6-BA和NAA组合对原球茎增殖的影响(mg/原球茎)
2.4 6-BA、KT和ZT对原球茎分化为球茎的影响
6-BA、KT和ZT对原球茎分化为球茎的影响如表4所示，对原球茎分化为球茎效果较好的分裂素是KT，分化系数随KT浓度增加呈先增加后降低趋势，在KT 4.0mg/L时达到最大值0.40。
表4 6-BA、KT和ZT对原球茎分化为球茎的影响
2.5 IBA和IAA对原球茎分化为球茎的影响
IBA和IAA对原球茎分化为球茎的影响如表5所示，IBA和IAA对原球茎分化为球茎效果差异不显著，IBA对原球茎分化为球茎效果较好，分化系数随着IBA浓度增加而降低，在IBA0.1mg/L时分化系数达到最大值1.00。
表5 IBA和IAA对原球茎分化为球茎的影响
2.6 KT和IBA组合对原球茎分化为球茎的影响
KT和IBA组合对原球茎分化为球茎的影响如表7所示，在KT2.5mg/L时原球茎分化为球茎效果较好，原球茎分化为球茎效果随IBA浓度增加呈降低趋势，在KT2.5mg/L+IBA2.5mg/L时分化系数达到最大值1.30，如图2所示。
表6 KT和IBA组合对原球茎分化为球茎的影响
2.7 6-BA和IAA对球茎生根的影响
6-BA和IAA对球茎生根的影响如表7所示，在6-BA0.1mg/L时球茎生根效果较好，球茎生根数随IAA浓度增大呈先增后减趋势，在6-BA0.1mg/L+IAA2.5mg/L时球茎生根数达到最大值6.6条/球茎，如图3所示。
表7 6-BA和IAA对球茎生根的影响(条/球茎)
3讨论
3.1由于山兰种子非常细小，刚萌发的种子继代操作极不方便，可以将种子直接播种在原球茎增殖培养基中进行培养，当原球茎体积增加到一定大小时再进行继代，即方便操作又减少培养环节，由于原球茎体积不容易测量，本研究以原球茎重量变化来代替体积变化。
3.2当原球茎体积达到一定标准后转入球茎分化培养基，在球茎分化培养时，低浓度IBA有利于球茎分化，但是低浓度IBA条件下分化出的球茎重量小，影响移栽成活率，因此选择有利于球茎重量增加的IBA浓度范围与KT进行组合；在而近缘植物杜鹃兰种子萌发研究表明适宜浓度的IBA与KT组合有利于种子萌发，这可能与植物种类及激素配比有关，也对减少山兰种苗繁育环节有启示作用。
3.3种子直接产生的原球茎体积小、重量轻、球茎分化系数低，但由于山兰种子细小、数量巨大，因此以种子做繁殖材料，进行人工定向培养，可在短时间内获得大量种苗。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种山兰萌发种子的定向培养基，其特征在于，包括：
增殖培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 4.0～6.0mg/L、NAA 7.0～9.0mg/L的MS培养基；
分化培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、KT 2.0～3.0mg/L、IBA 2.0～3.0mg/L的MS培养基；
生根培养基：含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 0.08～0.12mg/L、IAA2.0～3.0mg/L的MS培养基。
2.根据权利要求1所述的定向培养基，其特征在于，包括：
增殖培养基：含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、6-BA 5.0mg/L、NAA 8.0mg/L的MS培养基；
分化培养基：含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、KT 2.5mg/L、IBA 2.5mg/L的MS培养基；
生根培养基：含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、6-BA 0.1mg/L、IAA 2.5mg/L的MS培养基。
3.一种山兰萌发种子定向培养成苗的方法，其特征在于，包括：
采用增殖培养基对山兰萌发种子外植体进行增殖培养，得到原球茎；所述增殖培养基为含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 4.0～6.0mg/L、NAA 7.0～9.0mg/L的MS培养基；
采用分化培养基对原球茎进行分化培养，得到球茎；所述分化培养基为含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、KT 2.0～3.0mg/L、IBA 2.0～3.0mg/L的MS培养基；
采用生根培养基对球茎进行生根培养；所述生根培养基为含有蔗糖28～32g/L、琼脂粉4.0～5.0g/L、6-BA 0.08～0.12mg/L、IAA 2.0～3.0mg/L的MS培养基。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述增殖培养基为含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、6-BA 5.0mg/L、NAA 8.0mg/L的MS培养基；
所述分化培养基为含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、KT 2.5mg/L、IBA 2.5mg/L的MS培养基；
所述生根培养基为含有蔗糖30g/L、琼脂粉4.5g/L、6-BA 0.1mg/L、IAA 2.5mg/L的MS培养基。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述外植体的大小为(0.5～1.5)×(0.5～1.5)×(0.5～1.5)mm。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述增殖培养的条件为：培养温度为22～24℃，光暗周期为13～15h/9～11h，光照强度为1400～1600lx，培养时间50～60d。
7.根据权利要求3至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述增殖培养的条件为：培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d。
8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述分化培养的条件为：培养温度为22～24℃，光暗周期为13～15h/9～11h，光照强度为1400～1600lx，培养时间50～60d。
9.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述分化培养的条件为：培养温度为23℃，光暗周期为14h/10h，光照强度为1500lx，培养时间55d。
10.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述生根培养的条件为：培养温度为22～24℃，光暗周期为13～15h/9～11h，光照强度为1400～1600lx，培养时间50～60d。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113508747A (zh) * 2021-07-19 2021-10-19 云南农业大学 一种诱导芒果种苗根系健壮生长的方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1817110A (zh) * 2006-01-18 2006-08-16 贵州省农业科学院生物技术研究所 杜鹃兰的组织培养与快速繁殖方法
CN103371100A (zh) * 2012-04-17 2013-10-30 上海市农业科学院 春石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法
CN103651122A (zh) * 2013-11-19 2014-03-26 安徽振扬农林生态开发有限公司 一种白及原球茎诱导培养基
CN103651137A (zh) * 2013-12-06 2014-03-26 徐州生物工程职业技术学院 狐狸尾兰原球茎快速繁殖方法
CN103688860A (zh) * 2013-12-18 2014-04-02 南京师范大学 一种由铁皮石斛类原球茎快速繁殖成苗的培养基及组培方法
CN105941145A (zh) * 2016-05-04 2016-09-21 中国农业科学院特产研究所 一种山兰种子的萌发方法
CN107736245A (zh) * 2017-10-25 2018-02-27 吉林农业大学 一种山兰无性快繁技术
CN109122325A (zh) * 2018-11-09 2019-01-04 翁源县天下泽雨农业科技有限公司 一种建兰种子的无菌播种快繁方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1817110A (zh) * 2006-01-18 2006-08-16 贵州省农业科学院生物技术研究所 杜鹃兰的组织培养与快速繁殖方法
CN103371100A (zh) * 2012-04-17 2013-10-30 上海市农业科学院 春石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法
CN103651122A (zh) * 2013-11-19 2014-03-26 安徽振扬农林生态开发有限公司 一种白及原球茎诱导培养基
CN103651137A (zh) * 2013-12-06 2014-03-26 徐州生物工程职业技术学院 狐狸尾兰原球茎快速繁殖方法
CN103688860A (zh) * 2013-12-18 2014-04-02 南京师范大学 一种由铁皮石斛类原球茎快速繁殖成苗的培养基及组培方法
CN105941145A (zh) * 2016-05-04 2016-09-21 中国农业科学院特产研究所 一种山兰种子的萌发方法
CN107736245A (zh) * 2017-10-25 2018-02-27 吉林农业大学 一种山兰无性快繁技术
CN109122325A (zh) * 2018-11-09 2019-01-04 翁源县天下泽雨农业科技有限公司 一种建兰种子的无菌播种快繁方法

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DEB, C. R.,ET AL.: "Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Cymbidium aloifolium (L.) Sw.: a multipurpose orchid", 《JOURNAL OF PLANT BIOCHEMISTRY AND BIOTECHNOLOGY》 *
丁兰等: "濒危植物佛手参种子的非共生萌发及种苗的快速繁殖 ", 《植物生理学报》 *
孙崇波等: "蕙兰种子无菌萌发及植株再生 ", 《浙江农业学报》 *
张正海等: "山兰林下种植 ", 《特种经济动植物》 *
张正海等: "山兰种子无菌萌发及形态变化研究 ", 《特产研究》 *
张莉等: "兰花组织培养研究进展 ", 《安徽农业科学》 *
张铁等: "纹瓣兰无菌播种快繁技术研究 ", 《西南农业学报》 *
罗虹等: "墨兰的组织培养和快速繁殖 ", 《植物生理学通讯》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113508747A (zh) * 2021-07-19 2021-10-19 云南农业大学 一种诱导芒果种苗根系健壮生长的方法

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