CN110151842A - 一种枇杷花黄酮提取物的应用及含有该提取物的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种枇杷花黄酮提取物的应用及含有该提取物的组合物,该应用是指枇杷花黄酮提取物在治疗肠道障碍疾病的应用,该枇杷花黄酮提取物中黄酮的含量按质量百分比不少于1.03%,该枇杷花黄酮提取物的最佳有效剂量是黄酮含量为200mg/kg。本发明的枇杷花黄酮提取物是缓解肠道运动障碍的的主要功效成分之一,可以有效润肠通便,而且对体重正常发育无影响。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,具体涉及一种枇杷花黄酮提取物在治疗肠道障碍疾病的应用,以及含有该枇杷花黄酮提取物的组合物及其在治疗肠道运动障碍疾病方面的应用。
背景技术
社会经济快速发展中,人们生活水平和饮食习惯发生较大改变,便秘等肠道运动障碍因严重影响现代人生活质量而越来越受到重视。其中,慢性功能性肠道障碍主要是以大便排出困难、排便不适感及排便时间延长为主要症状,其病因不明、无特征性病理改变,治疗较困难,经常引起肠道微生态失衡,增加诱发肠癌的概率。目前的治疗以泻药为主,但副作用明显,长期服用甚至出现依赖性及顽固性便秘。
植物源食物含有丰富的生物活性物质,能有效抵抗高血压、肠胃疾病、癌症等多种疾病的发生,促使机体保持良好的代谢状态,已成为园艺学、食品营养学和医学等学科交叉的新领域,逐步形成园艺学发展新的学科增长点。近年来低聚木糖、膳食纤维、低聚麦芽糖、阿拉伯糖等生物活性物质越来越多的应用于改善功能性便秘研究。
植物类黄酮属于实际无毒级,具有降压、活血化瘀、止咳、祛痰、抗氧化等多种功效,开发利用前景广阔。枇杷是起源于我国的亚热带特色果树,其花作为传统中草药,味淡、性平,入肺经,具有润五脏利肺气之功效。已有的研究表明,枇杷花含有丰富的黄酮、三萜类物质等多种功效成分,在抗氧化、抑菌、消炎等方面具有显著功效,如何利用枇杷花中的功效成分——黄酮来实现促进肠蠕动、改善排便的功能,尤其在于治疗慢性功能性肠道障碍,从而促进枇杷花的功能化开发,就成了本领域技术人员所要解决的技术问题了。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供了一种枇杷花黄酮提取物和含有该枇杷花黄酮提取物的组合物,以及它们在润肠通便,尤其是治疗慢性功能性肠道障碍疾病方面的应用。
具体方案如下:
一种枇杷花黄酮提取物在治疗肠道障碍疾病的应用。
进一步的,所述枇杷花黄酮提取物中黄酮的含量按质量百分比不少于1.03%。
进一步的,所述枇杷花黄酮提取物的有效剂量是黄酮含量为100-400mg/kg。
进一步的,所述枇杷花黄酮提取物的有效剂量是黄酮含量为200mg/kg。
进一步的,所述肠道障碍疾病是指慢性功能性肠道障碍疾病。
本发明还提供一种治疗肠道障碍疾病的组合物,所述组合物含有枇杷花黄酮提取物。
进一步的,所述枇杷花黄酮提取物中黄酮的含量按质量百分比不少于1.03%。
进一步的,所述肠道障碍疾病是指慢性功能性肠道障碍疾病。
本发明还提供一种枇杷花黄酮提取物在制备治疗肠道障碍疾病的组合物的应用。
进一步的,所述枇杷花黄酮提取物中黄酮的含量按质量百分比不少于1.03%。
有益效果:
本发明的枇杷花黄酮提取物是缓解肠道运动障碍的的主要功效成分之一,可以有效润肠通便,而且对体重正常发育无影响。
本发明的枇杷花黄酮改善便秘的最佳有效剂量为200mg/kg,明显低于低聚麦芽糖400mg/kg、山楂膳食纤维500mg/kg、阿拉伯糖1500mg/kg等功效成分的有效剂量。
本发明的枇杷花黄酮提取物可以作为制备治疗肠道运动障碍疾病组合物的有效成分,应用于治疗肠道运动障碍疾病中。
附图说明
图1是枇杷花黄酮对小鼠小肠蠕动的试验结果其中,与模型组比较:*表示P<0.05,**表示P<0.01;
图2是复方地芬诺酯模型小鼠结肠SY含量变化的试验结果其中,与模型组比较:*表示P<0.05,**表示P<0.01。
图中,是平均数,s是标准差,n是每个试验组别的样本数(即每个试验组别有12只小鼠),P代表差异性大小。
具体实施方式
下面结合附图详细描述本发明的实施例,所述实施例的示例旨在用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
以下通过动物试验证明本发明的技术效果。
1.材料
昆明种小鼠:清洁级,雄性,体重18~22g。购自上海斯莱克实验动物有限公司,许可证号SCXK(沪)2012-0002,常规饲养。
复方地芬诺酯片:长春长江制药有限公司,国药准字H22022037,批号20130901。
小鼠突触素(SY)ELISA试剂盒:购买于北京安迪华泰生物科技有限公司,批号20170209。
枇杷花:试验用枇杷采用枇杷属普通枇杷种[Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl],品种是白肉枇杷新品种“贵妃”。枇杷花样品来源于国家果树种质福州龙眼枇杷圃(编号GPPP0260),盛花期采集无病虫害、发育正常花序。
2.试验方法
2.1枇杷花黄酮提取物的制备
枇杷花70℃烘干至恒重,粉碎后密封保存备用。
采用70%乙醇提取3次,提取物合并后减压真空浓缩至1mL/g,获得浓缩的枇杷花黄酮提取物。
分光光度计法测定:在获得的枇杷花黄酮提取物中,黄酮含量为1.03%。
受试样品为上述所提取浓缩的枇杷花黄酮提取物用蒸馏水稀释后的枇杷花黄酮提取物。
2.2复方地芬诺酯便秘模型组小鼠造模
选用成年雄性小鼠,共设5个试验组别:3个剂量组、1个阴性对照组和1个模型组,每组12只。
其中:3个剂量组是以人体推荐量的10倍为中剂量组,另设低、高两个剂量组,即以枇杷花黄酮提取物中黄酮的含量为指标设置低剂量组(100mg/kg)、中剂量组(200mg/kg)、高剂量组(400mg/kg)
试验准备阶段:
3个剂量组分别灌胃给予复方地芬诺酯5mg/kg(按小鼠体重,下同),0.5h后,3个剂量组分别给予含相应受试样品的墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯树胶,下同),试验时间为15天。
阴性对照组灌胃给予复方地芬诺酯5mg/kg,0.5h后,给予墨汁灌胃,试验时间为15天。
模型组给予蒸馏水,0.5h后,给予墨汁灌胃,试验时间为15天。
试验过程中,各试验组的小鼠均单笼饲养,正常饮水进食。
2.3排便功能试验
在上述建模后,从灌墨汁开始,记录每只小鼠的首粒排黑便时间、5h内排便粒数和排便重量。
2.4小肠推进试验
参考《一种中草药组方保健食品润肠通便功能的研究》(金鑫,高擎,葛亚中,现代食品科技,2016,32(1):77-81,76)的方法,测量肠管长度为“小肠总长度”和“墨汁推进长度”。
计算墨汁推进率:
墨汁推进率%=墨汁推进长度(cm)/小肠总长度(cm)×100%。
上述任何一项指标显阳性,可判定该受试样品具有润肠通便的功能。
2.5小鼠结肠小鼠突触素(SY)含量测定
小肠推进试验结束后另分离大肠,参考《一种中草药组方保健食品润肠通便功能的研究》(金鑫,高擎,葛亚中,现代食品科技,2016,32(1):77-81,76)的方法,测定小鼠突触素(SY)含量。
小鼠突触素(SY)是一种特异性蛋白质,在神经传导中有重要的连通细胞骨架作用。SY抗体能选择性标记结肠肠壁肌层的神经肌肉接头和肌间神经丛的突触,是评价结肠动力功能单元的一个重要指标。
2.6数据统计分析
使用DPS 7.05软件进行数据统计分析,计算平均值、标准偏差,采用“Duncan新复极差法”进行差异显著性分析(P),比较组间差异。
3.试验结果分析
3.1枇杷花黄酮提取物对试验小鼠体重的影响
灌胃给予受试样品及对照药物后,各试验组小鼠体重变化见表l(其中,x代表平均值、SD代表标准偏差、n代表每个试验组别的样本数,下同)。
分析表明:
各组小鼠的初始体重分别与阴性对照组比较,均无显著性差异(P>0.05),说明试验前的小鼠分组结果随机均衡。
经灌胃处理15d后,各组的小鼠体质量与阴性对照组比较,差异也不显著(P>0.05),说明各受试物不影响小鼠体重的正常增加,这与枇杷花黄酮提取物的试验结果一致。
结果表明,枇杷花黄酮提取物对便秘小鼠的体重增长没有不良影响。
表l试验前、后小鼠体重的比较表(x±SD,n=12)
组别 | 试验前体重/g | 试验后体重/g |
对照 | 21.73±1.06 | 36.23±4.04 |
模型组 | 21.17±1.17 | 35.26±2.61 |
低剂量组 | 21.40±0.90 | 35.23±2.60 |
中剂量组 | 21.28±0.81 | 34.52±2.65 |
高剂量组 | 20.97±1.04 | 33.38±4.22 |
3.2枇杷花黄酮提取物对模型组小鼠排便的影响
灌胃给予受试样品及对照药物后,各试验组小鼠排便试验结果见表2。由表2可知:
与阴性对照组相比,模型组小鼠排便时间延长72.79%(P<0.05),5h内的粪便粒数和粪便重量分别减少13.67%(P<0.01)、30.56%(P<0.05),表明便秘模型构建成功。
与模型组相比,枇杷花黄酮提取物的低、中、高剂量组均能够不同程度地缩短给予复方地芬诺酯小鼠的排便时间,增加5h小鼠排出的粪便粒数和重量。
分析表明:中、高剂量组枇杷花黄酮提取物显著缩短模型组小鼠排便时间(P<0.05),高剂量组枇杷花黄酮提取物显著增加排便量(P<0.05),低、中、高剂量组枇杷花黄酮均能显著增加排数量(P<0.05)。
结果表明,枇杷花黄酮提取物对便秘小鼠具有很好的润肠通便作用。
表2复方地芬诺酯便秘模型小鼠的排便试验结果(x±SD,n=12)
组别 | 首便时间/min | 5h排便重量/g | 5h排便数量/粒 |
对照 | 61.88±27.26* | 0.36±0.11** | 30.0±8.2* |
模型组 | 106.92±58.22 | 0.25±0.18 | 25.9±8.8 |
低剂量组 | 78.50±57.57 | 0.29±0.07 | 33.5±8.8* |
中剂量组 | 68.42±35.29* | 0.32±0.12 | 33.8±7.8* |
高剂量组 | 60.75±26.16* | 0.35±0.07* | 33.3±7.3* |
注:与模型组比较,*表示P<0.05,**表示P<0.01。
3.3枇杷花黄酮提取物对模型组小鼠的小肠推进效果
参照附图1,不同剂量枇杷花黄酮提取物均可以提高模型组小鼠的小肠推进率。其中:
模型对照组小鼠给予复方地芬诺酯后,墨汁推进率为52.26%,与空白对照组相比,具有显著性差异(P<0.01),表明小鼠便秘模型构建成功。
枇杷花黄酮提取物低、中、高剂量组的墨汁推进率分别为63.47%、71.62%、78.08%,与同期模型组相比,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。
结果表明,枇杷花黄酮提取物具有良好的推进肠蠕动作用。
2.4枇杷花黄酮对模型组小鼠的结肠SY的影响
Ellsa试剂盒测试结果显示,SY含量在合适浓度范围内与吸光度具有良好的线性关系,SY含量在15~180pg/mL之间回归方程为y=27.322x+0.4172(R2=0.9969)。
参照附图2,模型组小鼠结肠SY含量比对照空白组降低25.78%,具有极显著差异(P<0.01),表明便秘模型制备成功。与模型组相比,枇杷花黄酮提取物低、中、高剂量组小鼠结肠中SY含量分别提高14.26%、18.77%、23.72%,其中中、高剂量组与模型组差异显著(P<0.05)。
以上试验结果说明:
本发明以黄酮为目标因子,通过小鼠排便、肠推动等证实枇杷花黄酮提取物是缓解肠道运动障碍的的主要功效成分之一,而且对试验小鼠体重正常发育无影响。
本发明表明枇杷花黄酮改善便秘最佳有效剂量为200mg/kg,明显低于低聚麦芽糖400mg/kg、山楂膳食纤维500mg/kg、阿拉伯糖1500mg/kg等功效成分有效剂量。
本发明发现枇杷花黄酮提取物可以提高试验小鼠结肠中SY含量14.26%-23.72%,与模型组差异显著(P<0.05),这与提高小肠蠕动率和促进排便等作用一致,表明枇杷花黄酮可能是通过激活SY达到肠管收缩和蠕动增强从而改善便秘的效果。
可见,枇杷花黄酮提取物可以作为制备治疗肠道运动障碍疾病药物的有效成分,应用于治疗肠道运动障碍疾病中。
尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明,但所属领域的技术人员应该明白,在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围内,在形式上和细节上可以对本发明做出各种变化,均为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种枇杷花黄酮提取物在治疗肠道障碍疾病的应用。
2.根据权利要求1所述的枇杷花黄酮提取物在治疗肠道障碍疾病的应用,其特征在于:所述枇杷花黄酮提取物中黄酮的含量按质量百分比不少于1.03%。
3.根据权利要求1所述的枇杷花黄酮提取物在治疗肠道障碍疾病的应用,其特征在于:所述枇杷花黄酮提取物的有效剂量是黄酮含量为100-400mg/kg。
4.根据权利要求3所述的枇杷花黄酮提取物在治疗肠道障碍疾病的应用,其特征在于:所述枇杷花黄酮提取物的有效剂量是黄酮含量为200mg/kg。
5.根据权利要求1-4任一所述的枇杷花黄酮提取物在治疗肠道障碍疾病的应用,其特征在于:所述肠道障碍疾病是指慢性功能性肠道障碍疾病。
6.一种治疗肠道障碍疾病的组合物,其特征在于:所述组合物含有枇杷花黄酮提取物。
7.根据权利要求6所述的治疗肠道障碍疾病的组合物,其特征在于:所述枇杷花黄酮提取物中黄酮的含量按质量百分比不少于1.03%。
8.根据权利要求6或7任一所述的治疗肠道障碍疾病的组合物,其特征在于:所述肠道障碍疾病是指慢性功能性肠道障碍疾病。
9.一种枇杷花黄酮提取物在制备治疗肠道障碍疾病的组合物的应用。
10.根据权利要求9所述的枇杷花黄酮提取物在制备治疗肠道障碍疾病的组合物的应用,其特征在于:所述枇杷花黄酮提取物中黄酮的含量按质量百分比不少于1.03%。
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Non-Patent Citations (2)
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姜帆等: "枇杷花黄酮提取液缓解小鼠肠道运动障碍的作用", 《厦门大学学报(自然科学版)》 * |
百子乐天的店: "枇杷花黄酮提取液缓解小鼠肠道运动障碍的作用", 《百度文库》 * |
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