CN110132908A - 一种细胞检测试剂盒及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种细胞检测试剂盒及其应用，该细胞检测试剂盒包含有染色液和溶血剂。本发明的细胞检测试剂盒内的试剂同时使用时可以对有核红细胞、嗜碱粒细胞和其它四类白细胞进行区分，可以准确测定有核红细胞、嗜碱性粒细胞；单独使用溶血剂可以对嗜碱性粒细胞和其他四类白细胞进行区分，可以准确对嗜碱性粒细胞进行测定，因此本发明的细胞检测试剂盒可以自主选择模式对嗜碱性粒细胞和/或有核红细胞及其他白细胞进行分类和计数。

Description

一种细胞检测试剂盒及其应用
技术领域
本发明涉及体外诊断的技术领域，更具体地说，涉及一种细胞检测试剂盒及其应用。
背景技术
有核红细胞即幼稚红细胞，是红细胞的一种，正常时，1周之内婴幼儿血片中可见到少量有核红细胞，而成年有核红细胞均存在骨髓之中，如见于外周血血涂片则为病理现象，包括：原始红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞及晚幼红细胞。有核红细胞中还有细胞核存在，其核越大，细胞越幼稚。测定有核红细胞具有临床重要性。
传统有核红细胞的鉴别和计数方法是通过人工镜检计数100个白细胞区域内有核红细胞的个数，但是人工镜检问题在于样品制作繁琐，计数结果会因为检验医生对细胞的判断造成个人误差，同时，细胞计数少也会造成统计学上的误差。
现在常用的方法是利用仪器对有核红细胞进行测定及计数，主要利用荧光染料与有核红细胞中的核酸物质结合，当FCM发出的激光照射于细胞上时，细胞发射出特定颜色的荧光，根据白细胞和有核红细胞荧光强度的差异，将有核红细胞进行准确的测定；再根据散射光强度的差异，将嗜碱性粒细胞与其他四类白细胞群进行区分，从而准确测定嗜碱性粒细胞。一般来说，仪器法简单、快速、准确。传统方法，费时较长，效率低，成本较高，医生的个体差异较大。
目前，已有多家厂家的血细胞分析仪带有有核红细胞的检测项目，取得了相应的进展，现有相关技术如下：
现有技术一：专利号CN103975054 A公开了一种鉴别和计数有核红细胞的方法，该方法通过适用溶解剂溶解血样中的红细胞，在非聚焦血流孔中通过DC阻抗法测量有核血细胞，区分有核红细胞和其他细胞类型。以直方图的方式显示经过计算机处理有核红细胞鉴别结果，测定血样中的有核红细胞。然而，该方法通过试剂后的细胞大小的直方图区分有核红细胞和白细胞，所以容易造成有核红细胞计数不准确的缺点，而且该方法不能对嗜碱性粒细胞计数。
现有技术二：专利号CN101750476 A公开了一种溶血剂和染色液对有核红细胞及嗜碱细胞进行测定，该方法所用试剂与血样混合形成细胞悬液，通过散射光及荧光信号对细胞进行分类及计数。该方法得出的分类散点图嗜碱细胞区分不是特别明显，同时该方法不能选择仅用溶血剂测试嗜碱性粒细胞的模式，不够灵活，在医院不需要分析有核红细胞时造成染色液不必要的浪费，增加医院成本。
现有技术三：专利号CN101086473 A公开了一种可以将试样中有核红细胞和嗜碱性粒细胞与其他白细胞更明确区分并计数的试样测定用试剂。该发明是用溶血剂和荧光色素对血样进行处理，通过前向散射信号和侧向荧光信号测量有核红细胞和嗜碱性粒细胞。该方法也是不能选择仅测试嗜碱性粒细胞的模式，不够灵活，在医院不需要分析有核红细胞时造成染色液不必要的浪费，增加医院成本。
发明内容
本发明的目的在于提供一种细胞检测试剂盒及其应用，解决了现有技术中有核红细胞检测计数不准、浪费染料、不能灵活选择、试剂成本高的问题。
本发明解决技术问题所采用的技术方案是：一种细胞检测试剂盒，包含有染色液和溶血剂；
所述染色液包含有用于与核酸结合的核酸染料和用于溶解所述核酸染料的有机溶剂；所述核酸染料为式I所示的化合物：
其中R1、R2、R3分别为含1～4个碳原子的烷基，R4为含1～3个碳原子的烷基或者为氢原子，X为卤素原子，Z为O、S、N或C(CH3)2；所述溶血剂包含有缓冲剂、至少一种表面活性剂和水，并通过pH调节剂调节使溶血剂的pH＝2.0～3.5。
在本发明的细胞检测试剂盒中，所述表面活性剂选自两性表面活性剂、非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂中的至少一种；
其中，两性表面活性剂为式II所示的烷基甜菜碱型表面活性剂或式III所示的氨基酸型表面活性剂：
R5为8～16个碳原子的烷基；R6为8～18个碳原子的烷基；
其中，非离子表面活性剂为式IV所示的聚氧乙烯型的非离子表面活性剂：
R7为碳原子数8～12的烷基或者烯基；R8为氧原子或者n是8～15的整数；
其中，阳离子表面活性剂为季铵盐型或者吡啶翁型的阳离子表面活性剂；
其中，阴离子表面活性剂为硫酸盐型的阴离子表面活性剂。
在本发明的细胞检测试剂盒中，所述缓冲剂为醋酸-醋酸钠缓冲液、磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液、甲酸-甲酸钠缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、丁二酸-丁二酸钠缓冲液或甘氨酸钠-盐酸缓冲液。
在本发明的细胞检测试剂盒中，所述有机溶剂选自乙二醇、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一种。
在本发明的细胞检测试剂盒中，所述核酸染料在所述有机溶剂中的浓度为0.02-0.40mmol/L；每一种所述表面活性剂在水中的浓度为2.0-10.0g/L，所述缓冲剂在水中的浓度为1.0-8.0g/L。
在本发明的细胞检测试剂盒中，所述核酸染料在所述有机溶剂中的浓度为0.04-0.30mmol/L；每一种所述表面活性剂在水中的浓度为3.0-8.0g/L，所述缓冲剂在水中的浓度为2.0-6.0g/L；并通过pH调节剂调节使溶血剂的pH＝2.2～3.0。
在本发明的细胞检测试剂盒中，所述溶血剂中还包含防腐剂，所述防腐剂在水中的浓度为0.2-3.0g/L。
在本发明的细胞检测试剂盒中，所述防腐剂为Proclin300、苯氧乙醇、山梨酸、山梨酸盐、甲醛、苯甲酸或苯甲酸盐。
在本发明的细胞检测试剂盒中，所述防腐剂在水中的浓度为0.5-2.0g/L。
本发明还涉及了上述的细胞检测试剂盒在制备用于同时检测有核红细胞和嗜碱性粒细胞以及单独检测嗜碱性粒细胞的医疗器械中的应用。
实施本发明的细胞检测试剂盒及其应用，具有以下有益效果：本发明的细胞检测试剂盒内的试剂同时使用时可以对有核红细胞、嗜碱粒细胞和其它四类白细胞进行区分，可以准确测定有核红细胞、嗜碱性粒细胞；单独使用溶血剂可以对嗜碱性粒细胞和其他四类白细胞进行区分，可以准确对嗜碱性粒细胞进行测定，因此本发明的细胞检测试剂盒可以自主选择模式对嗜碱性粒细胞和/或有核红细胞及其他白细胞进行分类和计数。
附图说明
图1为本发明的实施例4中的细胞检测试剂盒在配套血细胞分析仪上的散点图；
图2为单独使用实施例4中的细胞检测试剂盒中的溶血剂在配套血细胞分析仪上的散点图；
图3为本发明的实施例1中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC％对照结果；
图4为本发明的实施例1中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC#对照结果；
图5为本发明的实施例1中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图6为本发明的实施例2中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC％对照结果；
图7为本发明的实施例2中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC#对照结果；
图8为本发明的实施例2中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图9为本发明的实施例3中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC％对照结果；
图10为本发明的实施例3中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC#对照结果；
图11为本发明的实施例3中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图12为本发明的实施例4中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC％对照结果；
图13为本发明的实施例4中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC#对照结果；
图14为本发明的实施例4中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图15为本发明的实施例5中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC％对照结果；
图16为本发明的实施例5中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC#对照结果；
图17为本发明的实施例5中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图18为本发明的实施例6中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC％对照结果；
图19为本发明的实施例6中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000NRBC#对照结果；
图20为本发明的实施例6中的细胞检测试剂盒与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图21为本发明的实施例1中的细胞检测试剂盒单独使用溶血剂与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图22为本发明的实施例2中的细胞检测试剂盒单独使用溶血剂与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图23为实施例3中的细胞检测试剂盒单独使用溶血剂与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图24为实施例4中的细胞检测试剂盒单独使用溶血剂与希森美康XN-1000BASO％对照结果；
图25为实施例5中的细胞检测试剂盒单独使用溶血剂与希森美康XN-1000BASO％对照结果。
具体实施方式
下面结合附图和实施例，对本发明的细胞检测试剂盒及其应用作进一步说明：
本发明涉及一种细胞检测试剂盒，该细胞检测试剂盒包含有彼此独立的染色液和溶血剂，染色液包含有用于与核酸结合的核酸染料。由于所用的核酸染料为特异性核酸染料，能与分子内部核酸物质进行特异性结合；同时，所用溶血剂溶血效果好，与染色液配套使用可以测定有核红细胞、嗜碱性粒细胞；单独使用溶血剂，利用前向散射光和侧向散射光的差异可以对嗜碱性粒细胞和其他四分类群白细胞进行区分，并且可以对白细胞总数进行修正，给用户一个自由选择的空间，节约了医疗成本，适合不同的人群需求。
其中，染色液包含有用于与核酸结合的核酸染料和用于溶解核酸染料的有机溶剂。核酸染料为式I所示的化合物：
其中R1、R2、R3分别为含1～4个碳原子的烷基，R4为含1～3个碳原子的烷基或者为氢原子，X为卤素原子，Z为O、S、N或C(CH3)2；有机溶剂选自乙二醇、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一种。
核酸染料在有机溶剂中的浓度为0.02-0.40mmol/L；优选地，核酸染料在有机溶剂中的浓度为0.04-0.30mmol/L；更优选地，核酸染料在有机溶剂中的浓度为0.095mmol/L。
溶血剂包含有缓冲剂、至少一种表面活性剂和水，并通过pH调节剂调节使溶血剂的pH＝2.0～3.5。
其中，表面活性剂选自两性表面活性剂、非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂中的至少一种。每一种表面活性剂在水中的浓度为2.0-10.0g/L；优选地，每一种表面活性剂在水中的浓度为3.0-8.0g/L；更优选地，两性表面活性剂在水中的浓度为3.0g/L，非离子表面活性剂在水中的浓度为4.0g/L，阳离子表面活性剂在水中的浓度为5.0g/L，阴离子表面活性剂在水中的浓度为2.0g/L。
两性表面活性剂为式II所示的烷基甜菜碱型表面活性剂或式III所示的氨基酸型表面活性剂：
R5为8～16个碳原子的烷基；R6为8～18个碳原子的烷基。
非离子表面活性剂为式IV所示的聚氧乙烯型的非离子表面活性剂：
R7为碳原子数8～12的烷基或者烯基；R8为氧原子或者n是8～15的整数。
阳离子表面活性剂为季铵盐型或者吡啶翁型的阳离子表面活性剂。
阴离子表面活性剂为硫酸盐型的阴离子表面活性剂。
缓冲剂为醋酸-醋酸钠缓冲液、磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液、甲酸-甲酸钠缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、丁二酸-丁二酸钠缓冲液或甘氨酸钠-盐酸缓冲液。
缓冲剂在水中的浓度为1.0-8.0g/L；优选地，缓冲剂在水中的浓度为2.0-6.0g/L；更优选地，缓冲剂的浓度为5.0g/L。
pH值调节使用的是酸碱调节剂，主要选自盐酸、硝酸、氢氧化钠、氢氧化钾中的至少一种。通过pH调节剂调节使溶血剂的pH＝2.0～3.5；优选地，pH＝2.2～3.0；更优选地，pH＝2.5。
其中，溶血剂中还可以包含有防腐剂，防腐剂为Proclin300、苯氧乙醇、山梨酸、山梨酸盐、甲醛、苯甲酸或苯甲酸盐。不同的防腐剂可以选择不同浓度，一般保证试剂盒在有效期内功能正常即可。防腐剂在水中的浓度可以为0.2-3.0g/L。优选地，防腐剂在水中的浓度为0.5-2.0g/L。更优选地，防腐剂在水中的浓度为0.8g/L。
本发明的细胞检测试剂盒为血细胞分析仪配套试剂，处理后的细胞在激光的照射下，发射出特定波长的荧光，通过散射光和荧光强度的不同，将细胞进行区分及计数，得出有核红细胞、嗜碱性粒细胞的比例，从而得出测试结果。
本发明的细胞检测试剂盒可以用于各种临床样本的有核红细胞含量的测定。本发明的细胞检测试剂盒可以整套使用，单独使用本发明细胞检测试剂盒中的溶血剂可以单独对嗜碱性粒细胞进行检测。将下述实施例4中的试剂盒整套使用在配套的血液分析仪上进行测定，散点图如图1所示；将下述实施例4中的试剂盒中的溶血剂单独使用在配套的血液分析仪上进行测定，散点图如图2所示。
下面通过具体实施例作进一步详细说明。
实施例1：
按照下列组分配制溶液：
染色液：
式V所示的化合物的核酸染料0.12mmol；
乙二醇1000mL；
溶血剂：
十二烷基二羟甲基甜菜碱2.0g；
十烷基聚氧乙烯醚3.0g；
八烷基三甲基溴化铵1.0g；
甲酸3.0g；
甲酸钠3.5g
Proclin300 0.2g；
水1L；
pH值调至2.2。
其中X-为Cl-。
将式V的核酸染料用乙二醇按上述比例混合，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，密封避光保存。
将十二烷基二羟甲基甜菜碱、十烷基聚氧乙烯醚、八烷基三甲基溴化铵、甲酸、甲酸钠、Proclin300按上述比例混合，加去离子水至1L，室温下搅拌至溶解完全，用酸或者碱调节pH值至2.2，用0.2μm滤膜进行过滤。将上述染色液和溶血剂在血细胞分析仪上进行测试，空白值满足要求，并计算有核红细胞和嗜碱性粒细胞百分比与希森美康XN-1000测定结果的相关系数，其中测试样本量在100份以上。如图3～5所示，测定结果有高度的相关性。其中，图21所示为单独使用本实施例中的溶血剂对嗜碱性粒细胞进行检测的结果，测定结果有高度的相关性。
实施例2：
按照下列组分配制溶液：
染色液：
式VI核酸染料0.095mmol；
甲醇1000mL；
溶血剂：
十四烷基二甲基甜菜碱0.3g；
脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO-9)4.0g；
十烷基三甲基溴化铵5.0g；
柠檬酸2.5g；
柠檬酸钠3.0g；
苯氧乙醇0.5g；
水1L；
pH值调至2.5。
其中X-为Br-。
将上述核酸染料用甲醇按上述比例混合，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，密封避光保存。
将十四烷基二甲基甜菜碱、脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO-9)、十烷基三甲基溴化铵、柠檬酸、柠檬酸钠、苯氧乙醇按上述比例混合，加去离子水至1L，室温下搅拌至溶解完全，用酸或者碱调节pH值至2.5，用0.2μm滤膜进行过滤。将上述染色液和溶血剂在血细胞分析仪上进行测试，空白值满足要求，并计算有核红细胞和嗜碱性粒细胞百分比与希森美康XN-1000测定结果的相关系数，其中测试样本量在100份以上。如图6～8所示，测定结果有高度的相关性。其中，图22所示为单独使用本实施例中的溶血剂对嗜碱性粒细胞进行检测的结果，测定结果有高度的相关性。
实施例3：
按照下列组分配制溶液：
染色液：
式VII核酸染料0.250mmol；
乙二醇900mL；
丙醇100mL。
溶血剂：
羟甲基甘氨酸钠3.5g；
月桂基聚氧乙烯醚2.8g；
十二烷基硫酸钠1.3g；
甲酸2.5g；
甲酸钠2.0g；
山梨酸0.5g；
水1L；
pH值调至2.8。
其中X-为Br-。
将式VII核酸染料用乙二醇、丙醇按上述比例混合，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，密封避光保存。
将羟甲基甘氨酸钠、月桂基聚氧乙烯醚、十二烷基硫酸钠、甲酸、甲酸钠、山梨酸按上述比例混合，加去离子水至1L，室温下搅拌至溶解完全，用酸或者碱调节pH值至2.8，用0.2μm滤膜进行过滤。将上述染色液和溶血剂在血细胞分析仪上进行测试，空白值满足要求，并计算有核红细胞和嗜碱性粒细胞百分比与希森美康XN-1000测定结果的相关系数，其中测试样本量在100份以上。如图9～11所示，测定结果有高度的相关性。其中，图23所示为单独使用本实施例中的溶血剂对嗜碱性粒细胞进行检测的结果，测定结果有高度的相关性。
实施例4：
按照下列组分配制溶液：
染色液：
式VIII所示的化合物的核酸染料0.190mmol；
乙二醇900mL；
丁醇100mL。
溶血剂：
十二烷基氨基丙酸钠3.0g；
月桂基聚氧乙烯醚4.0g；
十烷基三甲基氯化铵5.0g；
甘氨酸3.75g；
甘氨酸钠1.25g；
Proclin300 0.8g；
水1L；
pH值调至2.5。
其中X-为Cl-。
将式VIII的核酸染料用乙二醇、丁醇按上述比例混合，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，密封避光保存。
将十二烷基氨基丙酸钠、月桂基聚氧乙烯醚、十烷基三甲基氯化铵、甘氨酸、甘氨酸钠、Proclin300按上述比例混合，加去离子水至1L，室温下搅拌至溶解完全，用酸或者碱调节pH值至2.5，用0.2μm滤膜进行过滤。将上述染色液和溶血剂在血细胞分析仪上进行测试，空白值满足要求，并计算有核红细胞和嗜碱性粒细胞百分比与希森美康XN-1000测定结果的相关系数，其中测试样本量在100份以上。如图12～14所示，测定结果有高度的相关性。其中，图24所示为单独使用本实施例中的溶血剂对嗜碱性粒细胞进行检测的结果，测定结果有高度的相关性。
实施例5：
按照下列组分配制溶液：
染色液：
式VIII所示的化合物的核酸染料0.02mmol；
乙二醇900mL；
丁醇100mL。
溶血剂：
十二烷基氨基丙酸钠3.0g；
月桂基聚氧乙烯醚4.0g；
十烷基三甲基氯化铵8.0g；
甘氨酸4.75g；
甘氨酸钠3.25g；
Proclin300 3.0g；
水1L；
pH值调至2.0。
其中X-为Cl-。
将式VIII的核酸染料用乙二醇、丁醇按上述比例混合，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，密封避光保存。
将十二烷基氨基丙酸钠、月桂基聚氧乙烯醚、十烷基三甲基氯化铵、甘氨酸、甘氨酸钠、Proclin300按上述比例混合，加去离子水至1L，室温下搅拌至溶解完全，用酸或者碱调节pH值至2.0，用0.2μm滤膜进行过滤。将上述染色液和溶血剂在血细胞分析仪上进行测试，空白值满足要求，并计算有核红细胞和嗜碱性粒细胞百分比与希森美康XN-1000测定结果的相关系数，其中测试样本量在100份以上。如图15～17所示，测定结果有高度的相关性。其中，图25所示为单独使用本实施例中的溶血剂对嗜碱性粒细胞进行检测的结果，测定结果有高度的相关性。
实施例6：
按照下列组分配制溶液：
染色液：
式VII核酸染料0.40mmol；
乙二醇900mL；
丙醇100mL。
溶血剂：
羟甲基甘氨酸钠10g；
月桂基聚氧乙烯醚6g；
十二烷基硫酸钠3g；
甲酸0.6g；
甲酸钠0.4g；
山梨酸2.0g；
水1L；
pH值调至3.5。
其中X-为Br-。
将式VII核酸染料用乙二醇、丙醇按上述比例混合，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，密封避光保存。
将羟甲基甘氨酸钠、月桂基聚氧乙烯醚、十二烷基硫酸钠、甲酸、甲酸钠、山梨酸按上述比例混合，加去离子水至1L，室温下搅拌至溶解完全，用酸或者碱调节pH值至3.5，用0.2μm滤膜进行过滤。将上述染色液和溶血剂在血细胞分析仪上进行测试，空白值满足要求，并计算有核红细胞和嗜碱性粒细胞百分比与希森美康XN-1000测定结果的相关系数，其中测试样本量在100份以上。如图18～20所示，测定结果有高度的相关性。
应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进或变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种细胞检测试剂盒，其特征在于，包含有染色液和溶血剂；
所述染色液包含有用于与核酸结合的核酸染料和用于溶解所述核酸染料的有机溶剂；所述核酸染料为式I所示的化合物：
其中R1、R2、R3分别为含1～4个碳原子的烷基，R4为含1～3个碳原子的烷基或者为氢原子，X为卤素原子，Z为O、S、N或C(CH3)2；所述溶血剂包含有缓冲剂、至少一种表面活性剂和水，并通过pH调节剂调节使溶血剂的pH＝2.0～3.5。
2.根据权利要求1所述的细胞检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂选自两性表面活性剂、非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂中的至少一种；
其中，两性表面活性剂为式II所示的烷基甜菜碱型表面活性剂或式III所示的氨基酸型表面活性剂：
R5为8～16个碳原子的烷基；R6为8～18个碳原子的烷基；
其中，非离子表面活性剂为式IV所示的聚氧乙烯型的非离子表面活性剂：
R7为碳原子数8～12的烷基或者烯基；R8为氧原子或者n是8～15的整数；
其中，阳离子表面活性剂为季铵盐型或者吡啶翁型的阳离子表面活性剂；
其中，阴离子表面活性剂为硫酸盐型的阴离子表面活性剂。
3.根据权利要求1所述的细胞检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲剂为醋酸-醋酸钠缓冲液、磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液、甲酸-甲酸钠缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、丁二酸-丁二酸钠缓冲液或甘氨酸钠-盐酸缓冲液。
4.根据权利要求1所述的细胞检测试剂盒，其特征在于，所述有机溶剂选自乙二醇、甲醇、乙醇、丙醇、丁醇中的至少一种。
5.根据权利要求1所述的细胞检测试剂盒，其特征在于，所述核酸染料在所述有机溶剂中的浓度为0.02-0.40mmol/L；每一种所述表面活性剂在水中的浓度为2.0-10.0g/L，所述缓冲剂在水中的浓度为1.0-8.0g/L。
6.根据权利要求5所述的细胞检测试剂盒，其特征在于，所述核酸染料在所述有机溶剂中的浓度为0.04-0.30mmol/L；每一种所述表面活性剂在水中的浓度为3.0-8.0g/L，所述缓冲剂在水中的浓度为2.0-6.0g/L；并通过pH调节剂调节使溶血剂的pH＝2.2～3.0。
7.根据权利要求1所述的细胞检测试剂盒，其特征在于，所述溶血剂中还包含防腐剂，所述防腐剂在水中的浓度为0.2-3.0g/L。
8.根据权利要求7所述的细胞检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为Proclin300、苯氧乙醇、山梨酸、山梨酸盐、甲醛、苯甲酸或苯甲酸盐。
9.根据权利要求7所述的细胞检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂在水中的浓度为0.5-2.0g/L。
10.一种权利要求1-9任一项权利要求所述的细胞检测试剂盒在制备用于同时检测有核红细胞和嗜碱性粒细胞以及单独检测嗜碱性粒细胞的医疗器械中的应用。
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