CN110101908A - 一种可降解组织修复材料和制备方法 - Google Patents

一种可降解组织修复材料和制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供的可降解组织修复材料,所述可降解组织修复材料的原料包括重组蛛丝蛋白;所述重组蛛丝蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述重组蛛丝蛋白,通过在相邻的两个蛛丝蛋白结构域单体之间插入蛋白酶酶切位点,当重组蛛丝蛋白在人体内使用时,由于重组蛛丝蛋白上的蛋白酶酶切位点可以被人体内的酶酶解,可以使得由重组蛛丝蛋白制成的生物材料在人体内可以渐渐降解,因此利用上述的重组蛛丝蛋白为原料制备组织修复材料,可以在保证原有的蛛丝蛋白的机械性能或生物学品质的同时,还可以保证其具有降解性能,满足临床要求。

Description

一种可降解组织修复材料和制备方法
技术领域
本发明属于生物医药材料领域,具体涉及一种可降解组织修复材料和制备方法。
背景技术
组织工程技术是一项用于治疗组织和器官缺损的新手段,由生物支架、细胞、生长因子等元素组成。其中,生物支架作为细胞生长、增殖以及新组织形成的物理支撑,在组织工程中起着重要作用。在医学领域中,需要大量的人工合成材料来对组织损伤进行修复和治疗。具体地,针对骨缺损材料方向,目前组织替代材料主要由磷酸钙材料,羟基磷灰石等组成,然而,这些材料的固有缺点限制了他们的应用。磷酸钙材料具有良好的生物活性和骨传导性,但力学性能差,限制了磷酸钙的应用范围。羟基磷灰石是生物相容性很好的骨修复材料,然而体内降解的速度慢,不利于新骨的生长。羟基磷灰石通常需要与其他生物材料复合,增加其适用性。
中国专利文献CN107029289A中公开的一种蜘蛛丝蛋白组织修复材料,根据蜘蛛丝蛋白具有优良的生物相容性、可降解性、机械性能好和生物相容性好,可以作为组织修复材料这一点,将蜘蛛丝蛋白作为组织修复材料的原料。然而,天然的蜘蛛丝蛋白降解非常缓慢,通常情况下需要微生物的协助,如将其制成可降解的塑料袋埋在土壤里需要微生物长达几年时间的发酵降解,降解时间过长,不宜应用于需要降解时间较短的材料中,如植入人体内的组织修复材料,因此,对于组织修复材料来说,天然的蜘蛛丝蛋白不宜作为可降解的组织修复材料的原料。
发明内容
因此,本发明要解决的技术问题在于提供一种可降解组织修复材料,所述可降解组织修复材料中包括重组蛛丝蛋白,在保证所述组织修复材料可以利用所述重组蛛丝蛋白原有的机械性能或生物学品质的基础上,还可以具有较高的降解性能,满足临床要求。
为此,本发明提供了如下技术方案:
一种可降解组织修复材料,所述可降解组织修复材料的原料包括重组蛛丝蛋白;所述重组蛛丝蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
所述的可降解组织修复材料,所述可降解组织修复材料的原料包括如下重量份的原料:
所述的可降解组织修复材料,还包括干酪素12-20重量份。
所述的可降解组织修复材料,还包括鱼精蛋白硫酸盐10-20重量份。
所述的可降解组织修复材料,所述可降解组织修复材料包括如下重量份的原料:
一种制备所述的可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、取重组蛛丝蛋白加入溶剂中溶解,然后加入壳聚糖和醋酸溶液,加热搅拌,得A混合物;
S2、向A混合物中加入称取的肌醇六磷酸,加热搅拌,得B混合物;
S3、向B混合物中加入碳纤维,搅拌,然后静置,除去上清液,过滤,烘干。
所述的可降解组织修复材料的方法,在S1步骤中,所述加热搅拌步骤中,加热的温度为60-80℃。
所述的可降解组织修复材料的方法,在S2步骤中,在加入所述肌醇六磷酸前,调节A混合物的pH值为6.5-6.8。
所述的可降解组织修复材料的方法,在S2步骤中,所述加热搅拌步骤中,先控制加热的温度为60-80℃,保持1-2h,然后降温至35-45℃,保持恒温,备用。
所述的可降解组织修复材料的方法,还包括在S1步骤中,在加热搅拌之前,加入称取的鱼精蛋白硫酸盐和干酪素的步骤。
本发明技术方案,具有如下优点:
1.本发明提供的可降解组织修复材料,所述可降解组织修复材料的原料包括重组蛛丝蛋白;所述重组蛛丝蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述重组蛛丝蛋白,通过在相邻的两个蛛丝蛋白结构域单体之间插入蛋白酶酶切位点,当重组蛛丝蛋白在人体内使用时,由于重组蛛丝蛋白上的蛋白酶酶切位点可以被人体内的酶酶解,可以使得由重组蛛丝蛋白制成的生物材料在人体内可以渐渐降解,因此利用上述的重组蛛丝蛋白为原料制备组织修复材料,可以在保证原有的蛛丝蛋白的机械性能或生物学品质的同时,还可以保证其具有降解性能,满足临床要求。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例2中的重组蛛丝蛋白MaSp1的SDS-PAGE鉴定图,图中1为M1,2为重组蛛丝蛋白MaSp1;
图2是本发明实施例2中的重组蛛丝蛋白MaSp1的Western blotting鉴定图,图中1为M1,2为重组蛛丝蛋白MaSp1;
图3是本发明实验例1中重组蛛丝蛋白MaSp1纤维的电镜图;
图4是本发明实验例1中重组蛛丝蛋白MaSp1薄膜的电镜图;
具体实施方式
下述实施例中的表达载体pET-28a、大肠杆菌BL21、LB培养基、工具酶TEV酶酶液为市售产品。本发明的重组蛛丝蛋白可以委托生物技术公司合成,也可以按照下述的实施例的方法进行制备。
实施例1人工合成重组蛛丝蛋白的基因MaSp1
本实施例所述的重组蛛丝蛋白序列如SEQ ID NO.1所示,根据上述选择的重组蛛丝蛋白序列和大肠杆菌偏爱密码子的使用原则,设计编码与重组蛛丝蛋白氨基酸序列一致的重组蛛丝蛋白的核苷酸序列,见序列表中SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
实施例2、人工合成重组蛛丝蛋白的基因MaSp1在大肠杆菌中的高效表达
(1)由基因合成公司合成MaSp1基因,将其克隆至含有T7强启动子的原核生物表达载体pET-28a+中,构建成含有人工合成的MaSp1基因的重组质粒pET-28a+-MaSp1;
(2)制备大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用热休克法(42℃热激45秒)将重组质粒pET-28a+-MaSp1转化至宿主细胞BL21(DE3)中,得到含有重组质粒的工程菌株;
(3)将工程菌株接种到LB培养基溶液中,37℃,220rpm摇床培养,当工程菌培养液浓度OD600达到0.6-0.8时,加入0.5mmol/L IPTG,37℃诱导表达6小时,然后进行裂解,将所得的细胞裂解液进行SDS-PAGE鉴定,结果见图1,取所述细胞裂解液进行重组蛛丝蛋白MaSp1的提取、纯化,将纯化后的重组蛛丝蛋白MaSp1进行Western blotting鉴定,结果见图2。
实施例3可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白5g加入80ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖20g和体积浓度为70%的醋酸溶液40ml,加热搅拌,加热的温度为60℃,得A混合物;
S2、调节A混合物的pH值为6.8,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸10g,加热搅拌,先控制加热的温度为80℃,保持1h,然后降温至45℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维5g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干,即得。
实施例4可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白7g加入120ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖30g和体积浓度为85%的醋酸溶液30ml,加热搅拌,加热的温度为80℃,得A混合物;
S2、调节A混合物的pH值为6.5,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸5g,加热搅拌,先控制加热的温度为60℃,保持2h,然后降温至35℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维1g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干。
实施例5可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白6g加入100ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖25g和体积浓度为75%的醋酸溶液35ml,加热搅拌,加热的温度为70℃,得A混合物;
S2、调节A混合物的pH值为6.6,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸8g,加热搅拌,先控制加热的温度为70℃,保持1.5h,然后降温至40℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维3g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干。
实施例6可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白5g加入80ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖20g、干酪素12g和体积浓度为70%的醋酸溶液50ml,加热搅拌,加热的温度为60℃,得A混合物;
S2、调节A混合物的pH值为6.8,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸10g,加热搅拌,先控制加热的温度为80℃,保持1h,然后降温至45℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维5g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干,即得。
实施例7可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白7g加入140ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖30g、干酪素20g和体积浓度为85%的醋酸溶液30ml,加热搅拌,加热的温度为80℃,得A混合物;
S2、调节A混合物的pH值为6.5,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸5g,加热搅拌,先控制加热的温度为60℃,保持2h,然后降温至35℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维1g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干。
实施例8可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白6g加入120ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖25g、干酪素16g和体积浓度为75%的醋酸溶液55ml,加热搅拌,加热的温度为70℃,得A混合物;
S2、调节A混合物的pH值为6.6,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸8g,加热搅拌,先控制加热的温度为70℃,保持1.5h,然后降温至40℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维3g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干。
实施例9可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白5g加入100ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖20g、干酪素12g、鱼精蛋白硫酸盐20g和体积浓度为70%的醋酸溶液70ml,加热搅拌,加热的温度为60℃,得A混合物;
S2、调节A混合物的pH值为6.8,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸10g,加热搅拌,先控制加热的温度为80℃,保持1h,然后降温至45℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维5g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干,即得。
实施例10可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白7g加入140ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖30g、干酪素20g、鱼精蛋白硫酸盐10g和体积浓度为85%的醋酸溶液30ml,加热搅拌,加热的温度为80℃,得A混合物;
S2、调整向A混合物的pH值为6.5,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸5g,加热搅拌,先控制加热的温度为60℃,保持2h,然后降温至35℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维1g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干。
实施例11可降解组织修复材料
本实施例提供了一种可降解组织修复材料,包括如下重量份的原料:
本实施例还提供了一种制备上述可降解组织修复材料的方法,包括如下步骤:
S1、称取重组蛛丝蛋白6g加入120ml的HFIP溶剂中溶解,然后加入壳聚糖25g、干酪素16g、鱼精蛋白硫酸盐15g和体积浓度为75%的醋酸溶液55ml,加热搅拌,加热的温度为70℃,得A混合物;
S2、调整向A混合物的pH值为6.6,然后向其中加入称取的肌醇六磷酸8g,加热搅拌,先控制加热的温度为70℃,保持1.5h,然后降温至40℃,保持恒温,得B混合物,备用;
S3、向B混合物中加入碳纤维3g,搅拌,降至室温,然后静置,除去上清液,过滤,烘干。
对比例1可降解组织修复材料
本对比例与实施例11基本相同,区别仅在于在制备上述可降解组织修复材料的方法中,在S2步骤中,在以70℃搅拌加热后,直接降温至室温。
对比例2可降解组织修复材料
本对比例与实施例11基本相同,区别仅在于在制备上述可降解组织修复材料的方法中,在S2步骤中,搅拌加热的温度为45℃。
对比例3可降解组织修复材料
本对比例与实施例11基本相同,区别仅在于,所述可降解组织修复材料包括如下重量份的原料中不包括重组蛛丝蛋白。
对比例4可降解组织修复材料
本对比例与实施例11基本相同,区别仅在于,所述可降解组织修复材料包括如下重量份的原料中不包括肌醇六磷酸。
对比例5可降解组织修复材料
本对比例与实施例11基本相同,区别仅在于,所述可降解组织修复材料包括如下重量份的原料中不包括壳聚糖。
对比例6可降解组织修复材料
本对比例与实施例11基本相同,区别仅在于,所述可降解组织修复材料包括如下重量份的原料中不包括碳纤维。
实验例1
将实施例2获得的重组蛛丝蛋白分别进行纯化,干燥,然后进行以下的试验
(1)韧性和强度检测
a、取干燥后的蛋白样品使用1,1,1,3,3,3-六氟异丙醇(HFIP)进行溶解,投料量为15%(wt%),60℃搅拌溶解12h,然后快速升温至120℃继续搅拌2h,至溶液均匀透亮。
b、取上述纺丝液2mL加入到注射器中,选择注射针为27G针头,设定注射速率为0.2mL/h,将纺丝液注入凝固浴(100%乙醇),然后制备成纤维和薄膜,然后电镜观察纤维及薄膜的形貌,如图3-4所示。
c、检测上述形成的纤维和薄膜的最大应力(stress(MPa))和最大应变系数(strain(%)),并检测使上述形成的纤维和薄膜断裂的能量大小(energy t o break(MJ/m3))结果如表1所示,
表1 MaSp1和MaSp2纤维和薄膜的最大应力、最大应变系数、断裂能量
stress(MPa) strain(%) energy to break(MJ/m<sup>3</sup>)
MaSp1纤维 306±51.26 67±10.54 54.64±21.26
MaSp1薄膜 266±44.59 79±8.27 69.26±14.33
由此可见,本发明的重组蛛丝蛋白可满足湿法纺丝对蛋白的要求,电镜显示,获得的蛋白丝结构均一,具有一定的韧性和强度。
(2)人体内可降解性检测
取上述制备的重组蛛丝蛋白MaSp1纤维加入人的血液中,其中所述血液(由医院提供)用量为0.5ml,所述重组蛛丝蛋白MaSp1纤维为0.5mg,于37℃降解4小时,观察降解情况。结果表明,本发明制备的重组蛛丝蛋白MaSp1纤维在4小时后完全降解。
实验例2
本实验例对本发明实施例5、实施例8、实施例11、对比例1-6制备的可降解组织修复材料作为待测的可降解组织修复材料进行常规的性能测试(1)降解性
取待测的可降解组织修复材料各5mg,加入人的血液中,其中所述血液(由医院提供)用量为50ml,每隔10-12小时更换一次等体积的所述血液,于37℃分别降解12小时、24小时、48小时和96小时,观察降解情况,检测各可降解组织修复材料的降解能够达到的百分比。试验结果见下表2,
表2可降解组织修复材料的试验结果
(2)机械性能
取待测的可降解组织修复材料进行最大应力(stress(MPa))和最大应变系数(strain(%))和断裂的能量大小(energy to break(MJ/m3))的检测。结果如表3所示,
表3可降解组织修复材料的最大应力、最大应变系数、断裂能量
stress(MPa) strain(%) energy to break(MJ/m<sup>3</sup>)
实施例5 338±40.37 90±5.10 75±11.55
实施例8 345±20.68 98±7.90 85±15.66
实施例11 367±85.21 105±3.80 95±12.33
对比例1 320±44.96 75±8.65 68±15.23
对比例2 315±90.52 72±3.08 64±14.55
对比例3 265±22.86 45±3.20 39±14.87
对比例4 310±32.74 71±4.56 59±10.69
对比例5 312±12.45 72±3.15 58±17.14
对比例6 315±78.36 74±8.19 61±19.63
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
SEQUENCE LISTING
<110> 苏州百源基因技术有限公司
<120> 一种可降解组织修复材料和制备方法
<130> SHA201900048
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 432
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 1
Gly Ala Gly Gln Gly Gly Tyr Gly Gly Leu Gly Ser Gln Gly Ala Gly
1 5 10 15
Arg Gly Gly Leu Gly Gly Gln Gly Ala Gly Ala Ala Ala Ala Ala Ala
20 25 30
Ala Ala Lys Lys Lys Lys Ser Ser Asp Ser Ser Glu Ser Ser Arg Ser
35 40 45
Ser Ser Ser Ser Ser Gly Gly Ala Gly Gln Gly Gly Tyr Gly Gly Leu
50 55 60
Gly Ser Gln Gly Ala Gly Arg Gly Gly Leu Gly Gly Gln Gly Ala Gly
65 70 75 80
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Lys Lys Lys Lys Ser Ser Asp
85 90 95
Ser Ser Glu Ser Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Ala Gly Gln
100 105 110
Gly Gly Tyr Gly Gly Leu Gly Ser Gln Gly Ala Gly Arg Gly Gly Leu
115 120 125
Gly Gly Gln Gly Ala Gly Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Lys Lys
130 135 140
Lys Lys Ser Ser Asp Ser Ser Glu Ser Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ser
145 150 155 160
Ser Gly Gly Ala Gly Gln Gly Gly Tyr Gly Gly Leu Gly Ser Gln Gly
165 170 175
Ala Gly Arg Gly Gly Leu Gly Gly Gln Gly Ala Gly Ala Ala Ala Ala
180 185 190
Ala Ala Ala Ala Ala Lys Lys Lys Lys Ser Ser Asp Ser Ser Glu Ser
195 200 205
Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Ala Gly Gln Gly Gly Tyr Gly
210 215 220
Gly Leu Gly Ser Gln Gly Ala Gly Arg Gly Gly Leu Gly Gly Gln Gly
225 230 235 240
Ala Gly Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Lys Lys Lys Lys Ser Ser
245 250 255
Asp Ser Ser Glu Ser Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Gly Ala
260 265 270
Gly Gln Gly Gly Tyr Gly Gly Leu Gly Ser Gln Gly Ala Gly Arg Gly
275 280 285
Gly Leu Gly Gly Gln Gly Ala Gly Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
290 295 300
Ala Lys Lys Lys Lys Ser Ser Asp Ser Ser Glu Ser Ser Arg Ser Ser
305 310 315 320
Ser Ser Ser Ser Gly Ala Gly Gln Gly Gly Tyr Gly Gly Leu Gly Ser
325 330 335
Gln Gly Ala Gly Arg Gly Gly Leu Gly Gly Gln Gly Ala Gly Ala Ala
340 345 350
Ala Ala Ala Ala Ala Ala Lys Lys Lys Lys Ser Ser Asp Ser Ser Glu
355 360 365
Ser Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ser Ser Gly Gly Ala Gly Gln Gly Gly
370 375 380
Tyr Gly Gly Leu Gly Ser Gln Gly Ala Gly Arg Gly Gly Leu Gly Gly
385 390 395 400
Gln Gly Ala Gly Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Lys Lys Lys
405 410 415
Lys Ser Ser Asp Ser Ser Glu Ser Ser Arg Ser Ser Ser Ser Ser Ser
420 425 430
<210> 2
<211> 1305
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 2
atgggtgctg gccaaggagg gtatggtggc ttaggatctc agggggccgg tcgtggcgga 60
ttggggggtc aaggcgcagg agcggctgcc gcagcggctg ccgcaaaaaa gaaaaagtcc 120
tcagattcga gtgaaagctc tcgctcctca tcgagtagct ctgggggtgc gggccaggga 180
gggtacggtg gccttggatc ccaaggggct ggtcgaggcg gactcggggg tcagggcgcc 240
ggagcagcgg ctgccgcagc ggctgccgca aaaaagaaaa agtcatcgga cagtagcgag 300
tcttcccggt catcgagtag ctcttccggg gcgggtcaag gcggatatgg gggtctaggc 360
tcacagggag ctgggagagg tggcctggga gggcaaggtg ccggcgcagc ggctgccgca 420
gcggctgcca aaaagaaaaa gtcgagtgat agctctgaat cctcaaggtc gagtagctct 480
tcctcaggag gggcaggtca gggcggatac gggggtttag gctcgcaagg agcggggcgt 540
ggtggcttgg gagggcaggg tgctggcgcc gcagcggctg ccgcagcggc tgccaaaaag 600
aaaaagagta gcgactcttc cgagtcatcg cgcagtagct cttcctcatc gggagcaggg 660
caaggtggct atggagggct tggtagtcag ggcgcgggac gagggggtct cggcggacaa 720
ggggctggtg ccgcagcggc tgccgcagcg gctaaaaaga aaaagagctc tgattcctca 780
gaatcgagtc ggagctcttc ctcatcgagt ggcggagccg ggcagggtgg ctacggaggg 840
ctaggtagcc aaggcgcagg aagagggggt ctgggcggac agggggcggg tgctgccgca 900
gcggctgccg cagcggctaa aaagaaaaag tcttccgact catcggagag tagcaggtct 960
tcctcatcga gtagcggcgc cggacaaggg ggttatggcg gattagggtc tcagggtgca 1020
ggccgtggag ggttgggtgg ccaaggagcg ggggctgccg cagcggctgc cgcagcgaaa 1080
aagaaaaagt cctcagattc gagtgaaagc tctcgctcct catcgagtag ctctggtggc 1140
gctggacagg ggggttacgg cggacttggg tcccaaggtg ccggccgagg agggctcggt 1200
ggccagggag caggggcggc tgccgcagcg gctgccgcag cgaaaaagaa aaagtcatcg 1260
gacagtagcg agtcttcccg gtcatcgagt agctcttcct aatag 1305

Claims (10)

1.一种可降解组织修复材料,其特征在于,所述可降解组织修复材料的原料包括重组蛛丝蛋白;所述重组蛛丝蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的可降解组织修复材料,其特征在于,所述可降解组织修复材料包括如下重量份的原料:
3.根据权利要求1或2所述的可降解组织修复材料,其特征在于,还包括干酪素12-20重量份。
4.根据权利要求1-3任一项所述的可降解组织修复材料,其特征在于,还包括鱼精蛋白硫酸盐10-20重量份。
5.根据权利要求1-4任一项所述的可降解组织修复材料,其特征在于,所述可降解组织修复材料的原料包括如下重量份的原料:
6.一种制备权利要求1-5任一项所述的可降解组织修复材料的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、取重组蛛丝蛋白加入溶剂中溶解,然后加入壳聚糖和醋酸溶液,加热搅拌,得A混合物;
S2、向A混合物中加入肌醇六磷酸,加热搅拌,得B混合物;
S3、向B混合物中加入碳纤维,搅拌,然后静置,除去上清液,过滤,烘干。
7.根据权利要求6所述的可降解组织修复材料的方法,其特征在于,在S1步骤中,所述加热搅拌步骤中,加热的温度为60-80℃。
8.根据权利要求6或7所述的可降解组织修复材料的方法,其特征在于,在S2步骤中,在加入所述肌醇六磷酸前,调节A混合物的pH值为6.5-6.8。
9.根据权利要求6-8任一项所述的可降解组织修复材料的方法,其特征在于,在S2步骤中,所述加热搅拌步骤中,先控制加热的温度为60-80℃,保持1-2h,然后降温至35-45℃,保持恒温,备用。
10.根据权利要求6-9任一项所述的可降解组织修复材料的方法,其特征在于,还包括在S1步骤中,在加热搅拌之前,加入称取的鱼精蛋白硫酸盐和干酪素的步骤。
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