CN110101812A - 一种具有抗抑郁功效的藏药组方及其制备方法 - Google Patents

一种具有抗抑郁功效的藏药组方及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种具有抗抑郁功效的藏药组方，该藏药组方由下列重量份的原料组成：铁棒锤5~10份、槟榔1~20份、阿魏20~40份、沉香10~40份、广枣2~30份、毕茇3~20份、肉豆蔻5~40份、丁香2~20份、山奈8~30份。本发明还公开了该藏药组方的制备方法。本发明采用藏药原料，经过提取、萃取、包合等工艺，得到的具有具有抗抑郁功效的活性成分，能显著减少小鼠TST和FST实验中不动时间，小鼠血清中CORT含量显著降低，显著增加小鼠血清中5‑HT和NE含量。

Description

一种具有抗抑郁功效的藏药组方及其制备方法
技术领域
本发明涉及藏药组合物及其制备技术领域，尤其涉及一种具有抗抑郁功效的藏药组方及其制备方法。
背景技术
抑郁症是一类情感障碍或心境障碍的疾病，临床症状为情感低落、焦虑、思维和运动迟缓、精力缺乏、食欲减退、体重下降、睡眠障碍等，重症抑郁患者甚至会多次出现自伤和自杀行为。抑郁症已经成为世界第四大疾病，是世界性的问题。预计到2020年可能为仅次于心脏病第二大疾患。
抑郁症的发病机制很复杂，目前存在着单胺类神经递质、下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴、脑源性神经营养因子（BDNF）等多种假说。抑郁症促使HPA轴亢进，5-HT、NE含量降低，海马组织BDNF含量降低。
悬尾实验（tail suspension test, TST）与强迫游泳实验（forced swimmingtest, FST）是抗抑郁药物评价的经典方法，利用动物无法逃逸环境而导致绝望行为，常用这两种方法来评筛抗抑郁药物。
5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）是一种单胺类神经递质，以色氨酸为前体合成。5-羟色胺能神经元在调节情绪、情感行为和睡眠的脑系统中有重要的作用。研究表明中枢5-HT降低与抑郁心境有关。5-HT代谢产物5-羟基吲哚乙酸（5-hydroxy-3-indoleacetic acid，5-HIAA）低水平与自杀和冲动行为有关，自杀者和抑郁症患者脑脊液中5-HIAA含量显著降低，且5-HIAA浓度与抑郁严重程度有关，浓度越低，抑郁越严重。
去甲肾上腺素（norepinephrine, NE）为儿茶酚胺类神经递质，以酪氨酸为前体合成。儿茶酚胺能神经元分布于参与运动、情绪、注意力及内脏功能调节的神经系统的脑区。临床上，三环类抗抑郁药抑制NE的回收，可以治疗抑郁症。
随着当前医学界对抑郁症越来越深入的研究，从传统药物中挖掘更加有效的抗抑郁药物，已成为一个重要的研究方向。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种效果显著的具有抗抑郁功效的藏药组方。
本发明所要解决的另一个技术问题是提供该藏药组方的制备方法。
为解决上述问题，本发明所述的一种具有抗抑郁功效的藏药组方，其特征在于：该藏药组方由下列重量份的原料组成：铁棒锤5~10份、槟榔1~20份、阿魏20~40份、沉香10~40份、广枣2~30份、毕茇3~20份、肉豆蔻5~40份、丁香2~20份、山奈8~30份。
如上所述的一种具有抗抑郁功效的藏药组方的制备方法，包括以下步骤：
⑴按配比称重；
⑵将阿魏、沉香、广枣、毕茇、肉豆蔻、丁香、山奈粉碎后，置挥发油提取器中提取挥发油，分别收集挥发油和药渣，密闭备用；
⑶所述药渣经超临界萃取，得到萃取液；
⑷将铁棒锤、槟榔混合后，经体积浓度为75~95%的乙醇醇提得到滤液，回收乙醇，该滤液减压浓缩后采用高速逆流色谱分离制备，得到生物碱；
⑸在磁力搅拌转速为500~800转/分的条件下，将所述挥发油加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌1~6小时，得到包合物A，该包合物A置1~10℃冰箱冷藏2~24小时后过滤，经蒸馏水洗涤、干燥，即得挥发油包合物；所述挥发油与所述溶解好的β-环湖精溶液的质量比为1：5~1：30；
⑹在磁力搅拌转速为600~1000转/分的条件下，将所述萃取液加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌1~8小时，得到包合物B，该包合物B置1~10℃冰箱冷藏2~24小时后过滤，经蒸馏水洗涤、干燥，即得萃取液包合物；所述萃取液与所述溶解好的β-环湖精溶液的质量比为1：3~1：20；
⑺将所述生物碱、所述挥发油包合物和所述萃取液包合物按1：0.2：5~2：2.5：10.0的质量比混合均匀，按常规方法制剂即得。
所述步骤⑶中超临界萃取条件是指萃取压力为15~20MPa、温度为20~50℃、萃取时间为1~5小时。
所述步骤⑷中醇提的条件是指乙醇的添加量为混合物重量的10~15倍，温度为70~100℃，提取1~3次，每次1~8小时。
所述步骤⑷中减压浓缩的条件是指压力为0.06~0.08MPa，温度为30~60℃。
所述步骤⑷中高速逆流色谱分离制备的条件是指流动相为氯仿：甲醇：水=6~9：4~7：2~6，转速500~1000rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速为1～8 mL／min，检测波长为220～260nm。
所述步骤⑸与所述步骤⑹中干燥的条件是指温度为30~55℃，时间为0.5~1小时。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明以藏药材为原料，经过提取、分离、包合，采用了现代工艺，保留了生物活性成分，改变了传统藏药的外观形象，为民族药治疗难治性疾病用药提供了开发思路。
2、本发明经药理实验检测，具有抗抑郁功效。
取健康昆明小白鼠雄性，体重20 ~ 22 g，购买于甘肃中医学院实验动物中心，许可证号SCXK（甘）2008-006-0000405。自由饮食、饮水，通过行为绝望模型小鼠悬尾实验和强迫游泳实验，评价药物抗抑郁效果，并检测小鼠血清中5-HT、NE和CORT含量，阳性药物为丙咪嗪，小鼠随后随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组、藏药低、中高剂量组、丙咪嗪组。每天灌胃给药1次，给药体积为10 mL·kg-1，连续给药14 d，第13 ~ 14 d进行开场实验，第15 d进行小鼠悬尾实验和强迫游泳实验，第16 d前禁食不禁水12 h，取血检测。
（1）行为绝望模型实验——悬尾实验
将小鼠尾巴固定悬挂在实验架上，实验持续6 min，记录过程，统计后4 min内小鼠不动时间。
表1 小鼠悬尾实验不动时间影响(x±s, n=10)
与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01
表1所示，与空白组相比，藏药3个给药组均有统计学差异（P<0.05），藏药中高剂量组和丙咪嗪组小鼠悬尾不动时间相同。
（2）行为绝望模型实验——强迫游泳实验
将小鼠置水深10 cm、直径14 cm、水温22±2 ℃的圆柱形玻璃容器之中，实验持续6min，记录实验过程，统计后4 min内小鼠不动时间。
表2 小鼠强迫游泳实验不动时间影响(x±s, n=10)
与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
如表2所示，与空白组相比，藏药3个给药组均有统计学差异（P<0.05），藏药中高剂量组和丙咪嗪组小鼠FST实验中游泳不动时间相近，藏药低剂量组显著减少。
（3）皮质酮含量检测
小鼠禁食不禁水12h后，于第16d取血检测CORT含量。
表3 小鼠血清CORT含量影响 (x±s, n=10)
与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001
如表3所示，与空白组相比，藏药3个给药组均有统计学差异（P<0.05），藏药中高剂量组和丙咪嗪组小鼠血清中CORT含量显著降低。
（4）五-羟色胺（5-HT）和去甲肾上腺素（NE）含量检测
小鼠禁食不禁水12 h后，于第16 d取血，离心10 min，取血清检测5-HT含量。
表4 小鼠血清中5-HT和NE含量的影响（x±s, n=10）
与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01
如表4所示，藏药中高给药组5-HT含量显著增加，与空白组相比均有统计学差异（P<0.05），藏药中高剂量组和丙咪嗪组小鼠血清中5-HT含量相近；藏药中高给药组NE含量显著增加，与空白组相比均有统计学差异（P<0.05），藏药中高剂量组和丙咪嗪组小鼠血清中NE含量相同。
综上所述，本发明产品能显著减少小鼠TST和FST实验中不动时间，小鼠血清中CORT含量显著降低，显著增加小鼠血清中5-HT和NE含量。
具体实施方式
实施例1 一种具有抗抑郁功效的藏药组方，该藏药组方由下列重量份（g）的原料组成：铁棒锤5份、槟榔1份、阿魏20份、沉香10份、广枣2份、毕茇3份、肉豆蔻10份、丁香2份、山奈10份。
该藏药组方的制备方法，包括以下步骤：
⑴按配比称重。
⑵将阿魏、沉香、广枣、毕茇、肉豆蔻、丁香、山奈粉碎后，置挥发油提取器中提取挥发油，分别收集挥发油和药渣，密闭备用。
⑶药渣在萃取压力为20MPa、温度为20℃、萃取时间为1小时的条件下经超临界萃取，得到萃取液。
⑷将铁棒锤、槟榔混合后，按混合物重量的10倍加体积浓度为75%的乙醇，在温度为70℃、提取1次、每次1小时的条件下醇提得到滤液，回收乙醇，该滤液于压力0.06MPa，温度30℃条件下减压浓缩后采用高速逆流色谱分离制备，得到生物碱。
其中：高速逆流色谱分离制备的条件是指流动相为氯仿：甲醇：水=6mL：4 mL：2mL，转速500rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速为1 mL／min，检测波长为220nm。
⑸在磁力搅拌转速为500转/分的条件下，将挥发油加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌1小时，得到包合物A，该包合物A置1℃冰箱冷藏2小时后过滤，经蒸馏水洗涤、30℃干燥0.5小时，即得挥发油包合物。
其中：挥发油与溶解好的β-环湖精溶液的质量比（g/g）为1：5。
⑹在磁力搅拌转速为600转/分的条件下，将萃取液加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌1小时，得到包合物B，该包合物B置1℃冰箱冷藏2小时后过滤，经蒸馏水洗涤、30℃干燥0.5小时，即得萃取液包合物。
其中：萃取液与溶解好的β-环湖精溶液的质量比（g/g）为1：3。
⑺将生物碱、挥发油包合物和萃取液包合物按1：0.2：5的质量比（g/g）混合均匀，按常规方法压片即得。
实施例2 一种具有抗抑郁功效的藏药组方，该藏药组方由下列重量份（g）的原料组成：铁棒锤10份、槟榔20份、阿魏40份、沉香40份、广枣30份、毕茇20份、肉豆蔻40份、丁香20份、山奈30份。
该藏药组方的制备方法，包括以下步骤：
⑴按配比称重。
⑵将阿魏、沉香、广枣、毕茇、肉豆蔻、丁香、山奈粉碎后，置挥发油提取器中提取挥发油，分别收集挥发油和药渣，密闭备用。
⑶药渣在萃取压力为20MPa、温度为50℃、萃取时间为5小时的条件下经超临界萃取，得到萃取液。
⑷将铁棒锤、槟榔混合后，按混合物重量的15倍加体积浓度为95%的乙醇，在温度为100℃、提取3次、每次8小时的条件下醇提得到滤液，回收乙醇，该滤液于压力0.08MPa，温度60℃条件下减压浓缩后采用高速逆流色谱分离制备，得到生物碱。
其中：高速逆流色谱分离制备的条件是指流动相为氯仿：甲醇：水=9mL：7 mL：6mL，转速1000rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速为8 mL／min，检测波长为260nm。
⑸在磁力搅拌转速为800转/分的条件下，将挥发油加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌6小时，得到包合物A，该包合物A置10℃冰箱冷藏24小时后过滤，经蒸馏水洗涤、55℃干燥1小时，即得挥发油包合物。
其中：挥发油与溶解好的β-环湖精溶液的质量比（g/g）为1：30。
⑹在磁力搅拌转速为1000转/分的条件下，将萃取液加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌8小时，得到包合物B，该包合物B置10℃冰箱冷藏24小时后过滤，经蒸馏水洗涤、55℃干燥1小时，即得萃取液包合物。
其中：萃取液与溶解好的β-环湖精溶液的质量比（g/g）为1：20。
⑺将生物碱、挥发油包合物和萃取液包合物按2：2.5：10.0的质量比（g/g）混合均匀，按常规方法制成胶囊即得。
实施例3 一种具有抗抑郁功效的藏药组方，该藏药组方由下列重量份（g）的原料组成：铁棒锤8份、槟榔10份、阿魏30份、沉香20份、广枣10份、毕茇15份、肉豆蔻5份、丁香10份、山奈25份。
该藏药组方的制备方法，包括以下步骤：
⑴按配比称重。
⑵将阿魏、沉香、广枣、毕茇、肉豆蔻、丁香、山奈粉碎后，置挥发油提取器中提取挥发油，分别收集挥发油和药渣，密闭备用。
⑶药渣在萃取压力为15MPa、温度为30℃、萃取时间为3小时的条件下经超临界萃取，得到萃取液。
⑷将铁棒锤、槟榔混合后，按混合物重量的12倍加体积浓度为85%的乙醇，在温度为80℃、提取2次、每次6小时的条件下醇提得到滤液，回收乙醇，该滤液于压力0.07MPa，温度50℃条件下减压浓缩后采用高速逆流色谱分离制备，得到生物碱。
其中：高速逆流色谱分离制备的条件是指流动相为氯仿：甲醇：水=7mL：5 mL：3mL，转速800rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速为2 mL／min，检测波长为230nm。
⑸在磁力搅拌转速为600转/分的条件下，将挥发油加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌3小时，得到包合物A，该包合物A置4℃冰箱冷藏12小时后过滤，经蒸馏水洗涤、45℃干燥0.6小时，即得挥发油包合物。
其中：挥发油与溶解好的β-环湖精溶液的质量比（g/g）为1：25。
⑹在磁力搅拌转速为800转/分的条件下，将萃取液加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌2小时，得到包合物B，该包合物B置8℃冰箱冷藏8小时后过滤，经蒸馏水洗涤、35℃干燥0.7小时，即得萃取液包合物。
其中：萃取液与溶解好的β-环湖精溶液的质量比（g/g）为1：8。
⑺将生物碱、挥发油包合物和萃取液包合物按1.5：0.8：8的质量比（g/g）混合均匀，按常规方法制丸即得。
实施例4 一种具有抗抑郁功效的藏药组方，该藏药组方由下列重量份（g）的原料组成：铁棒锤5份、槟榔18份、阿魏35份、沉香28份、广枣16份、毕茇4份、肉豆蔻10份、丁香3份、山奈8份。
该藏药组方的制备方法，包括以下步骤：
⑴按配比称重。
⑵将阿魏、沉香、广枣、毕茇、肉豆蔻、丁香、山奈粉碎后，置挥发油提取器中提取挥发油，分别收集挥发油和药渣，密闭备用。
⑶药渣在萃取压力为16MPa、温度为38℃、萃取时间为2小时的条件下经超临界萃取，得到萃取液。
⑷将铁棒锤、槟榔混合后，按混合物重量的13倍加体积浓度为80%的乙醇，在温度为90℃、提取2次、每次3小时的条件下醇提得到滤液，回收乙醇，该滤液于压力0.06MPa，温度55℃条件下减压浓缩后采用高速逆流色谱分离制备，得到生物碱。
其中：高速逆流色谱分离制备的条件是指流动相为氯仿：甲醇：水=6mL：6 mL：4mL，转速850rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速为3.5 mL／min，检测波长为255nm。
⑸在磁力搅拌转速为700转/分的条件下，将挥发油加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌2小时，得到包合物A，该包合物A置6℃冰箱冷藏4小时后过滤，经蒸馏水洗涤、45℃干燥0.5小时，即得挥发油包合物。
其中：挥发油与溶解好的β-环湖精溶液的质量比（g/g）为1：15。
⑹在磁力搅拌转速为750转/分的条件下，将萃取液加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌5小时，得到包合物B，该包合物B置8℃冰箱冷藏6小时后过滤，经蒸馏水洗涤、40℃干燥1小时，即得萃取液包合物。
其中：萃取液与溶解好的β-环湖精溶液的质量比（g/g）为1：17。
⑺将生物碱、挥发油包合物和萃取液包合物按2：2.5：10.0的质量比（g/g）混合均匀，按常规方法制剂即得。

Claims (7)

1.一种具有抗抑郁功效的藏药组方，其特征在于：该藏药组方由下列重量份的原料组成：铁棒锤5~10份、槟榔1~20份、阿魏20~40份、沉香10~40份、广枣2~30份、毕茇3~20份、肉豆蔻5~40份、丁香2~20份、山奈8~30份。
2.如权利要求1所述的一种具有抗抑郁功效的藏药组方的制备方法，包括以下步骤：
⑴按配比称重；
⑵将阿魏、沉香、广枣、毕茇、肉豆蔻、丁香、山奈粉碎后，置挥发油提取器中提取挥发油，分别收集挥发油和药渣，密闭备用；
⑶所述药渣经超临界萃取，得到萃取液；
⑷将铁棒锤、槟榔混合后，经体积浓度为75~95%的乙醇醇提得到滤液，回收乙醇，该滤液减压浓缩后采用高速逆流色谱分离制备，得到生物碱；
⑸在磁力搅拌转速为500~800转/分的条件下，将所述挥发油加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌1~6小时，得到包合物A，该包合物A置1~10℃冰箱冷藏2~24小时后过滤，经蒸馏水洗涤、干燥，即得挥发油包合物；所述挥发油与所述溶解好的β-环湖精溶液的质量比为1：5~1：30；
⑹在磁力搅拌转速为600~1000转/分的条件下，将所述萃取液加入到溶解好的β-环湖精溶液中，搅拌1~8小时，得到包合物B，该包合物B置1~10℃冰箱冷藏2~24小时后过滤，经蒸馏水洗涤、干燥，即得萃取液包合物；所述萃取液与所述溶解好的β-环湖精溶液的质量比为1：3~1：20；
⑺将所述生物碱、所述挥发油包合物和所述萃取液包合物按1：0.2：5~2：2.5：10.0的质量比混合均匀，按常规方法制剂即得。
3.如权利要求1所述的一种具有抗抑郁功效的藏药组方的制备方法，其特征在于：所述步骤⑶中超临界萃取条件是指萃取压力为15~20MPa、温度为20~50℃、萃取时间为1~5小时。
4.如权利要求1所述的一种具有抗抑郁功效的藏药组方的制备方法，其特征在于：所述步骤⑷中醇提的条件是指乙醇的添加量为混合物重量的10~15倍，温度为70~100℃，提取1~3次，每次1~8小时。
5.如权利要求1所述的一种具有抗抑郁功效的藏药组方的制备方法，其特征在于：所述步骤⑷中减压浓缩的条件是指压力为0.06~0.08MPa，温度为30~60℃。
6.如权利要求1所述的一种具有抗抑郁功效的藏药组方的制备方法，其特征在于：所述步骤⑷中高速逆流色谱分离制备的条件是指流动相为氯仿：甲醇：水=6~9：4~7：2~6，转速500~1000rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速为1～8 mL／min，检测波长为220～260nm。
7.如权利要求1所述的一种具有抗抑郁功效的藏药组方的制备方法，其特征在于：所述步骤⑸与所述步骤⑹中干燥的条件是指温度为30~55℃，时间为0.5~1小时。
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