CN110092821B - OsABCB1蛋白及其编码基因和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了OsABCB1蛋白及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质，命名为OsABCB1蛋白，获自水稻(Oryza sativa)，为序列表中序列1所示的蛋白质。编码OsABCB1蛋白的核酸分子也属于本发明的保护范围。本发明还保护一种制备转基因植物的方法，包括如下步骤：在受体植物中导入抑制所述核酸分子表达的物质，得到转基因植物；与所述受体植物相比，所述转基因植株株高降低和/或叶夹角变小。本发明可用于植物的多种性状改良，对于植物育种具有重大的应用推广价值。

Description

OsABCB1蛋白及其编码基因和应用

技术领域

本发明涉及OsABCB1蛋白及其编码基因和应用。

背景技术

水稻原产于中国和印度。是世界主要粮食作物之一。中国水稻播种面占全国粮食作物的1/4，而产量则占一半以上。栽培历史已有14000～18000年。为重要粮食作物；除食用颖果外，可制淀粉、酿酒、制醋，米糠可制糖、榨油、提取糠醛，供工业及医药用；稻秆为良好饲料及造纸原料和编织材料，谷芽和稻根可供药用。

近年来，生物技术的迅速发展大大地推动了植物育种研究手段的革新与研究水平的不断提高，植物抗病虫、抗除草剂生物技术育种已开始进入实用化阶段。利用生物技术手段将外源杀虫、抗除草剂基因导入植物基因组内，打破了植物种属甚至物种之间难以杂交的天然屏障，实现了抗虫、抗除草剂基因的转移，从而使植物迅速地、定向地获得抗虫性及机械化除草，同时又能保留原有的良好农艺性状。由于转基因玉米的每株植株都具有相当程度的抗性，因而其抗虫、抗除草剂效果比人工防治防治效果要好且稳定，还能够节省人力和物力的投入，有效的节约社会资源。其他农艺性状改良转基因植物进展及应用不如抗虫、抗除草剂性状理想，主要是由于没有优良的性状改良基因，大多农艺性状主要是有一些微效的多基因控制所致，一直没有理想的基因进行操作。

发明内容

本发明的目的是提供OsABCB1蛋白及其编码基因和应用。

本发明提供的蛋白质，命名为OsABCB1蛋白，获自水稻(Oryza sativa)，为如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)：

(a1)序列表中序列1所示的蛋白质；

(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

(a3)将(a1)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与植物发育相关的蛋白质；

(a4)来源于水稻且与(a1)具有98％以上同一性且与植物发育相关的蛋白质。

所述植物发育体现为株高和/或叶夹角。

标签具体如表1所示。

表1标签的序列

编码OsABCB1蛋白的核酸分子也属于本发明的保护范围。

所述核酸分子具体可为如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)：

(b1)编码区如序列表中序列2所示的DNA分子；

(b2)序列表中序列3所示的DNA分子；

(b3)来源于水稻且与(b1)或(b2)具有95％以上同一性且编码所述蛋白质的DNA分子；

(b4)在严格条件下与(b1)或(b2)限定的核苷酸序列杂交且编码所述蛋白质的DNA分子。

上述严格条件可为用6×SSC，0.5％SDS的溶液，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。

含有所述核酸分子的表达盒、重组载体或重组微生物均属于本发明的保护范围。

本发明还保护OsABCB1蛋白的应用，为如下(c1)或(c2)：

(c1)调控植物的株高性状；

(c2)调控植物的叶夹角性状。

(c1)中，所述调控为正调控，即使植物株高增加。

(c2)中，所述调控为正调控，即使植物叶夹角变大。

本发明还保护所述核酸分子的应用，为如下(d1)或(d2)：

(d1)培育株高性状改变的转基因植物；

(d2)培育叶夹角性状改变的转基因植物。

(d1)中，所述株高性状改变为株高增加。

(d2)中，所述叶夹角性状改变为叶夹角变大。

本发明还保护抑制OsABCB1蛋白的物质在植物育种的应用，所述育种的目标为如下(e1)或(e2)：

(e1)培育株高降低的植物；

(e2)培育叶夹角变小的植物。

本发明还保护抑制所述核酸分子的物质的应用，为如下(f1)或(f2)：

(f1)培育株高降低的转基因植物；

(f2)培育叶夹角变小的转基因植物。

本发明还保护一种制备转基因植物的方法，包括如下步骤：在受体植物中导入抑制所述核酸分子表达的物质，得到转基因植物；与所述受体植物相比，所述转基因植株株高降低和/或叶夹角变小。

抑制所述核酸分子的物质具体可为通过基因编辑抑制所述核酸分子的物质。抑制所述核酸分子的物质具体可为Cas9系统。Cas9系统中，sgRNA中的靶序列结合区如序列表的序列6所示。Cas9系统中，sgRNA的编码序列如序列表的序列5所示。抑制所述核酸分子的物质具体可为具有Cas9蛋白的编码序列和特异sgRNA的编码序列的重组质粒。特异sgRNA中的靶序列结合区如序列表的序列6所示。特异sgRNA具体为序列表的序列5所示DNA对应的RNA。Cas9蛋白的编码序列具体如序列表的序列4中第2697-6968位核苷酸所示。抑制所述核酸分子的物质具体可为重组质粒SG2027。

本发明还保护一种植物育种方法，包括如下步骤：降低目的植物中OsABCB1蛋白的含量和/或活性，从而使目的植物株高降低和/或叶夹角变小。

以上任一所述株高为成株株高。

以上任一所述植物为单子叶植物或双子叶植物。以上任一所述植物为禾本科植物。以上任一所述植物为稻属植物。以上任一所述植物为水稻，例如水稻日本晴。

本发明可用于植物的多种性状改良，对于植物育种具有重大的应用推广价值。

附图说明

图1为重组质粒SG2027的结构示意图。

图2为突变位点及其周边核苷酸的测序结果。

图3为成熟期植株的照片。

图4为成熟期植株的株高。

图5为成熟稻穗的照片。

图6为成熟稻穗的穗长。

图7为成熟籽粒的照片。

图8为千粒重的结果。

图9为粒长和粒宽的结果。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。

实施例、

OsABCB1蛋白如序列表的序列1所示。水稻日本晴的cDNA中，编码OsABCB1蛋白的CDS如序列表的序列2所示。水稻日本晴的基因组DNA中，编码OsABCB1蛋白的基因如序列表的序列3所示。

一、构建重组质粒

构建重组质粒SG2027。重组质粒SG2027的结构示意图见图1。经全质粒测序，重组质粒SG2027如序列表的序列4所示。序列表的序列4中，第2697-6968位核苷酸编码Cas9蛋白。重组质粒SG2027中，sgRNA的编码区如序列表的序列5所示(96bp)。sgRNA中的靶序列结合区如序列表的序列6所示。

二、进行遗传转化并获得再生植株

将重组质粒SG2027导入农杆菌EHA105，得到重组农杆菌。采用农杆菌浸染法，将重组农杆菌对水稻日本晴的胚性愈伤组织进行遗传转化，然后筛选抗性愈伤组织(抗性筛选采用100mg/L潮霉素)，然后进行分化再生培养，然后进行生根培养，得到再生植株。

三、获得转基因植株及其后代植株

将步骤二得到的再生植株进行如下鉴定：取叶片，提取基因组DNA，采用引物GP2027-2018-F和引物GP2027-2018-R组成的引物对进行PCR扩增，然后将PCR扩增产物进行测序。

GP2027-2018-F：5’-GTGGAGTTCTCGTACCCGTC-3’；

GP2027-2018-R：5’-TTGACGATGAAGGAGTGGGC-3’。

通过以上鉴定，从步骤二得到的再生植株中筛选得到两个纯合突变型植株(即两条染色体发生的突变一致)，分别命名为Osabcb1-4植株和Osabcb1-7植株。

经测序鉴定，与水稻日本晴(用Nip表示)的基因组DNA相比，Osabcb1-4植株的差异仅在于在编码OsABCB1蛋白的基因中发生了一个核苷酸的插入，该突变位点及其周边核苷酸的测序结果见图2。

经测序鉴定，与水稻日本晴(用Nip表示)的基因组DNA相比，Osabcb1-7植株的差异仅在于在编码OsABCB1蛋白的基因中发生了两个核苷酸的缺失，该突变位点及其周边核苷酸的测序结果见图2。

Osabcb1-4植株自交并收获种子，将种子培育为植株，即为T1代植株。T1代植株自交并收获种子，将种子培育为植株，即为T2代植株。Osabcb1-4植株及其自交后代，称为Osabcb1-4株系。

Osabcb1-7植株自交并收获种子，将种子培育为植株，即为T1代植株。T1代植株自交并收获种子，将种子培育为植株，即为T2代植株。Osabcb1-7植株及其自交后代，称为Osabcb1-7株系。

四、性状比较

供试植株为：水稻日本晴(用Nip表示)、Osabcb1-4株系的T2代植株、Osabcb1-7株系的T2代植株。

在平行条件下培养供试植株。

成熟期植株的照片见图3。成熟期植株的株高见图4(每个株系取10株植株的平均值)。与水稻日本晴相比，Osabcb1-4株系植株和Osabcb1-7株系植株均株高显著降低。Osabcb1-4株系植株和Osabcb1-7株系植株的株高无显著差异。与水稻日本晴相比，Osabcb1-4株系植株和Osabcb1-7株系植株均叶夹角显著变小。Osabcb1-4株系植株和Osabcb1-7株系植株的叶夹角无显著差异。

成熟稻穗的照片见图5。成熟稻穗的穗长见图6(每个株系取10株植株的平均值)。水稻日本晴、Osabcb1-4株系植株和Osabcb1-7株系植株的穗长均无显著差异。

成熟籽粒的照片见图7(上图为未脱壳籽粒，下图为脱壳籽粒)。千粒重的结果见图8。粒长和粒宽的结果见图9(每个株系取10株植株的平均值)。水稻日本晴、Osabcb1-4株系植株和Osabcb1-7株系植株的粒长均无显著差异。水稻日本晴、Osabcb1-4株系植株和Osabcb1-7株系植株的千粒重均无显著差异。水稻日本晴、Osabcb1-4株系植株和Osabcb1-7株系植株的粒宽均无显著差异。

以上各个性状的数据结果见表2。

表2

	水稻日本晴	Osabcb1-4株系植株	Osabcb1-7株系植株
				株高	72.55cm	53.45cm	52.98cm
穗长	17.53cm	16.71cm	16.80cm
				粒长	0.68cm	0.66cm	0.67cm
粒宽	0.32cm	0.32cm	0.33cm
				千粒重	20.92g	20.89g	20.91g

SEQUENCE LISTING

<110> 中国农业科学院生物技术研究所

<120> OsABCB1蛋白及其编码基因和应用

<130> GNCYX191204

<160> 6

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1344

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 1

Met Glu Glu Glu Ile Lys Gly Arg Val Val Val Leu Gly Ala Asp Ala

1 5 10 15

Ala Ala Asp Pro Glu Leu Glu Ala Phe His Leu Pro Ser Ala Asp Gln

20 25 30

Pro Pro His Ser His Leu Leu His His His His Ser Pro Gln Ser His

35 40 45

Pro Gln Pro Asp Ala Pro Ala Ala Ala Ala Pro Pro Pro Pro Ala Pro

50 55 60

Leu Thr Pro Pro Pro Pro Lys Ser Pro Pro Pro Pro Pro His Ile Gln

65 70 75 80

Thr Thr Asp Leu Pro Pro Pro Lys Pro Leu Pro Pro Ala Pro Leu Arg

85 90 95

Gln Leu Phe Ser Phe Ala Asp Gly Leu Asp Tyr Val Leu Met Thr Leu

100 105 110

Gly Thr Leu Gly Ala Leu Val His Gly Cys Ser Leu Pro Val Phe Leu

115 120 125

Arg Phe Phe Ala Asp Leu Val Asp Ser Phe Gly Ser His Ala Ala His

130 135 140

Pro Asp Thr Met Leu Arg Leu Val Val Lys Tyr Ala Phe Tyr Phe Leu

145 150 155 160

Val Val Gly Ala Ala Ile Trp Ala Ser Ser Trp Ala Glu Ile Ser Cys

165 170 175

Trp Met Trp Thr Gly Glu Arg Gln Ser Thr Arg Met Arg Ile Arg Tyr

180 185 190

Leu His Ala Ala Leu His Gln Asp Val Ser Phe Phe Asp Thr Asp Val

195 200 205

Arg Thr Ser Asp Val Ile His Ala Ile Asn Ala Asp Ala Val Val Val

210 215 220

Gln Asp Ala Ile Ser Glu Lys Leu Gly Asn Leu Ile His Tyr Leu Ala

225 230 235 240

Thr Phe Val Ser Gly Phe Val Val Gly Phe Thr Ala Ala Trp Gln Leu

245 250 255

Ala Leu Val Thr Leu Ala Val Val Pro Leu Ile Ala Val Ile Gly Gly

260 265 270

Leu Ser Ala Ala Ala Leu Ala Lys Leu Ser Ser Arg Ser Gln Asp Ala

275 280 285

Leu Ser Asp Ala Ser Gly Ile Ala Glu Gln Ala Leu Ala Gln Ile Arg

290 295 300

Ile Val Gln Ser Phe Val Gly Glu Glu Arg Val Met Arg Ala Tyr Ser

305 310 315 320

Ala Ala Leu Ala Val Ala Gln Arg Ile Gly Tyr Arg Ser Gly Phe Ala

325 330 335

Lys Gly Ile Gly Leu Gly Gly Thr Tyr Phe Thr Val Phe Cys Cys Tyr

340 345 350

Ala Leu Leu Leu Trp Tyr Gly Gly His Leu Val Arg Arg Ala His Thr

355 360 365

Asn Gly Gly Leu Ala Ile Ala Thr Met Phe Ser Val Met Ile Gly Gly

370 375 380

Leu Ala Leu Gly Gln Ser Ala Pro Ser Met Ala Ala Phe Ala Lys Ala

385 390 395 400

Arg Val Ala Ala Ala Lys Ile Phe Arg Met Met Glu His Lys Pro Ser

405 410 415

Met Glu Arg Glu Gly Gly Val Glu Leu Glu Ala Val Thr Gly Arg Val

420 425 430

Glu Leu Arg Asp Val Glu Phe Ser Tyr Pro Ser Arg Pro Asp Val Gly

435 440 445

Ile Leu Arg Gly Leu Ser Leu Ser Val Pro Ala Gly Lys Thr Ile Ala

450 455 460

Leu Val Gly Ser Ser Gly Ser Gly Lys Ser Thr Val Val Ser Leu Ile

465 470 475 480

Glu Arg Phe Tyr Glu Pro Asn Ala Gly Thr Ile Leu Leu Asp Gly His

485 490 495

Asp Leu Arg Asp Leu Asn Leu Arg Trp Leu Arg Arg Gln Ile Gly Leu

500 505 510

Val Ser Gln Glu Pro Ala Leu Phe Ala Thr Thr Ile Arg Glu Asn Leu

515 520 525

Leu Leu Gly Arg Asp Gly Ala Thr Gln Glu Glu Leu Glu Glu Ala Ala

530 535 540

Arg Val Ala Asn Ala His Ser Phe Ile Val Lys Leu Pro Asp Ala Tyr

545 550 555 560

Asn Thr Gln Val Gly Glu Arg Gly Leu Gln Leu Ser Gly Gly Gln Lys

565 570 575

Gln Arg Ile Ala Ile Ala Arg Ala Met Leu Arg Asn Pro Ala Ile Leu

580 585 590

Leu Leu Asp Glu Ala Thr Ser Ala Leu Asp Ser Glu Ser Glu Lys Leu

595 600 605

Val Gln Glu Ala Leu Asp Arg Phe Met Ile Gly Arg Thr Thr Leu Val

610 615 620

Ile Ala His Arg Leu Ser Thr Ile Arg Lys Ala Asp Leu Val Ala Val

625 630 635 640

Leu Gln Gly Gly Ala Ile Ser Glu Val Gly Thr His Asp Glu Leu Met

645 650 655

Ala Arg Gly Asp Gly Thr Tyr Ala Arg Leu Ile Arg Met Gln Glu Gln

660 665 670

Ala His Glu Ala Ala Leu Val Ala Ala Arg Arg Ser Ser Ala Arg Pro

675 680 685

Ser Ser Ala Arg Asn Ser Val Ser Ser Pro Ile Ile Thr Arg Asn Ser

690 695 700

Ser Tyr Gly Arg Ser Pro Tyr Ser Arg Arg Leu Ser Asp Ala Asp Phe

705 710 715 720

Ile Thr Gly Leu Gly Leu Gly Val Asp Ser Lys Gln Gln Gln Gln Gln

725 730 735

His Tyr Phe Arg Val Gln Ala Ser Ser Phe Trp Arg Leu Ala Lys Met

740 745 750

Asn Ser Pro Glu Trp Gly Tyr Ala Leu Val Ala Ser Leu Gly Ser Met

755 760 765

Val Cys Gly Ser Phe Ser Ala Ile Phe Ala Tyr Val Leu Ser Ala Val

770 775 780

Leu Ser Val Tyr Tyr Ala Pro Asp Ala Ala Tyr Met Asp Arg Gln Ile

785 790 795 800

Ala Lys Tyr Cys Tyr Leu Leu Ile Gly Met Ser Ser Ala Ala Leu Leu

805 810 815

Phe Asn Thr Val Gln His Leu Phe Trp Asp Thr Val Gly Glu Asn Leu

820 825 830

Thr Lys Arg Val Arg Glu Arg Met Leu Ala Ala Val Leu Arg Asn Glu

835 840 845

Ile Ala Trp Phe Asp Met Glu Asp Asn Ser Ser Ala Arg Ile Ala Ala

850 855 860

Arg Leu Ala Leu Asp Ala Gln Asn Val Arg Ser Ala Ile Gly Asp Arg

865 870 875 880

Ile Ser Ile Ile Val Gln Asn Ser Ala Leu Met Leu Val Ala Cys Thr

885 890 895

Ala Gly Phe Val Leu Gln Trp Arg Leu Ala Leu Val Leu Leu Ala Val

900 905 910

Phe Pro Leu Val Val Ala Ala Thr Val Leu Gln Lys Met Phe Leu Lys

915 920 925

Gly Phe Ser Gly Asp Leu Glu Arg Ala His Ala Arg Ala Thr Gln Ile

930 935 940

Ala Gly Glu Ala Val Ala Asn Val Arg Thr Val Ala Ala Phe Gly Ser

945 950 955 960

Glu Ala Lys Ile Val Gly Leu Phe Glu Ala Asn Leu Ala Gly Pro Leu

965 970 975

Arg Arg Cys Phe Trp Lys Gly Gln Ile Ala Gly Ser Gly Tyr Gly Val

980 985 990

Ala Gln Phe Leu Leu Tyr Ala Ser Tyr Ala Leu Gly Leu Trp Tyr Ala

995 1000 1005

Ala Trp Leu Val Lys His Gly Val Ser Asp Phe Ser Lys Thr Ile

1010 1015 1020

Arg Val Phe Met Val Leu Met Val Ser Ala Asn Gly Ala Ala Glu

1025 1030 1035

Thr Leu Thr Leu Ala Pro Asp Phe Val Lys Gly Gly Arg Ala Met

1040 1045 1050

Gln Ala Val Phe Glu Ala Met Asp Arg Arg Thr Glu Ile Glu Pro

1055 1060 1065

Asp Asp Val Asp Ala Ala Ala Val Pro Glu Arg Pro Arg Gly Glu

1070 1075 1080

Val Glu Leu Lys His Val Asp Phe Ala Tyr Pro Ser Arg Pro Glu

1085 1090 1095

Val Gln Val Phe Arg Asp Leu Ser Leu Arg Ala Arg Ala Gly Arg

1100 1105 1110

Thr Leu Ala Leu Val Gly Ala Ser Gly Cys Gly Lys Ser Ser Val

1115 1120 1125

Leu Ala Leu Val Gln Arg Phe Tyr Glu Pro Asn Ser Gly Arg Val

1130 1135 1140

Leu Leu Asp Gly Arg Asp Leu Arg Lys Phe Asn Leu Arg Ser Leu

1145 1150 1155

Arg Arg Ala Met Ala Leu Val Pro Gln Glu Pro Phe Leu Phe Ala

1160 1165 1170

Ala Thr Ile His Asp Asn Ile Ala Tyr Gly Arg Glu Gly Ala Thr

1175 1180 1185

Glu Ala Glu Val Val Glu Ala Ala Thr Ala Ala Asn Ala His Lys

1190 1195 1200

Phe Ile Ser Ala Leu Pro Glu Gly Tyr Gly Thr Leu Val Gly Glu

1205 1210 1215

Arg Gly Val Gln Leu Ser Gly Gly Gln Arg Gln Arg Ile Ala Ile

1220 1225 1230

Ala Arg Ala Leu Val Lys Gln Ala Pro Ile Leu Leu Leu Asp Glu

1235 1240 1245

Ala Thr Ser Ala Leu Asp Ala Glu Ser Glu Arg Ser Val Gln Glu

1250 1255 1260

Ala Leu Ala Ser Ser Ser Gly Ser Gly Arg Thr Thr Ile Val Val

1265 1270 1275

Ala His Arg Leu Ala Thr Val Arg Asn Ala His Thr Ile Ala Val

1280 1285 1290

Ile Asp Asp Gly Lys Val Ala Glu Gln Gly Ser His Ser His Leu

1295 1300 1305

Leu Asn His His Pro Asp Gly Cys Tyr Ala Arg Met Leu Gln Leu

1310 1315 1320

Gln Arg Leu Ser His Ser His Val Ala Pro Gly Pro Ser Ser Ser

1325 1330 1335

Thr Thr Thr His Gly Thr

1340

<210> 2

<211> 4035

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 2

atggaggagg agataaaggg ccgcgtcgtc gtcctcggcg ccgatgccgc cgccgacccg 60

gagctcgagg ccttccatct cccctccgcc gaccagcccc cgcactcgca cctcctccac 120

caccaccatt ctccacaatc ccatcctcaa cctgatgcac cagcagcagc agcgccaccg 180

ccacctgctc cccttactcc tcctcctcct aagtcgccgc cgccgcctcc ccacatccaa 240

accaccgacc ttccaccgcc caagcccctc ccgccggccc cgctccgtca actcttcagc 300

ttcgccgacg gcctcgacta cgtcctcatg accctgggca cgctgggcgc cctcgtccac 360

ggctgctccc tcccggtctt cctccgcttc ttcgccgacc tcgtcgactc cttcggctcc 420

cacgccgccc acccggacac catgctccgc ctcgtcgtca agtacgcctt ctacttcctc 480

gtcgtcggcg ccgccatctg ggcctcctcc tgggccgaga tctcctgctg gatgtggacc 540

ggcgagcggc agtccacccg gatgcgcatc cgctacctcc acgccgccct ccaccaggac 600

gtctccttct tcgacaccga cgtccgcacc tccgacgtca tccacgccat caacgccgac 660

gctgtcgtcg tccaggacgc catcagcgag aagctcggca acctcatcca ctacctcgcc 720

accttcgtct ccggcttcgt cgtcggattc accgccgcct ggcagctcgc cctcgtcacc 780

ctcgccgtcg tcccgctcat cgccgtcatc ggcggcctca gcgccgccgc gctcgccaag 840

ctctcctcca ggagccagga cgcgctgtcc gacgccagcg gcatcgcgga gcaggcgctg 900

gcgcagatac gcatcgtgca gtcgttcgtg ggcgaggagc gggtgatgcg ggcctactcg 960

gcggcgctgg ccgtggcgca gcggatcggc taccgctccg gcttcgccaa gggcatcgga 1020

ctgggcggca cctacttcac cgtcttctgc tgctacgcgc tgctcctctg gtacgggggt 1080

cacctcgtcc gacgcgccca caccaacgga ggcctcgcca tcgccaccat gttctcagta 1140

atgataggcg gcctggctct tgggcagtcg gctccgagca tggcggcgtt cgccaaggcg 1200

cgggtggcgg cggcgaagat attccggatg atggagcaca agccgagcat ggagcgggag 1260

ggcggggtgg agctggaggc ggtgacgggg cgggtggagc tgcgggatgt ggagttctcg 1320

tacccgtcgc ggccagacgt ggggatcctg cgggggttgt cgctgagcgt gccggcgggg 1380

aagacgatcg cgctggtggg gagctccggg tcagggaaga gcacggtggt gtcgctgatc 1440

gagaggttct acgagcccaa cgccgggacc atcctgctgg acggccacga cctgagggac 1500

ctcaacctgc ggtggctgcg ccgccagatt ggtctggtga gccaggagcc ggcgctgttc 1560

gccaccacca tccgggagaa cctgctgctg gggagggacg gcgccacgca ggaggagttg 1620

gaggaggccg ccagggtcgc caacgcccac tccttcatcg tcaagctccc cgacgcctac 1680

aacacgcagg ttggggagcg cgggctgcag ttgtcgggcg ggcagaagca gcggatcgcc 1740

atcgcgcgcg ccatgctccg gaacccggcc atcctgctgc tggacgaggc caccagcgcg 1800

ctggactcgg agtcggagaa gctggtgcag gaggcgctgg accgcttcat gatcgggcgc 1860

accacgctgg tgatcgcgca ccgcctctcc accatccgca aggccgacct cgtggccgtc 1920

ctccagggcg gggccatctc cgaggtgggc acgcacgacg agctcatggc ccgcggggat 1980

ggcacctacg ccaggctcat ccgaatgcag gagcaggcgc acgaggccgc gctcgtcgcc 2040

gctcgccgga gcagcgcgcg accatccagc gcccgcaact ccgtcagctc gcccatcatc 2100

acgcgtaact cctcctacgg ccgttccccc tactcccgcc gcctctccga cgccgacttc 2160

atcaccggcc tcggcctcgg agtcgacagc aagcagcagc agcagcagca ctacttccgc 2220

gtgcaggcca gctccttctg gcggctggcc aagatgaact cgcccgagtg ggggtacgcg 2280

ctcgtcgcgt cgctgggctc catggtgtgc ggctccttca gcgccatctt cgcctacgtc 2340

ctcagcgccg tgctcagcgt gtactacgcc cccgacgccg cctacatgga ccgccagatc 2400

gccaagtact gctacctcct catcggcatg tcctccgccg ccctgctctt caacactgtc 2460

cagcacctct tctgggacac cgtcggcgag aacctcacca agcgcgtccg cgagaggatg 2520

ctcgccgccg tgctccgcaa cgagatcgcc tggttcgaca tggaggacaa ctccagcgcc 2580

cgcatcgccg ccaggctggc gctggacgcc cagaacgtgc gctccgccat cggcgaccgc 2640

atctccatca tcgtccagaa ctcggcgctc atgctggtgg cctgcaccgc cggcttcgtc 2700

ctgcagtggc gcctcgcgct ggtgctgctg gccgtcttcc cgctggtggt ggccgccacc 2760

gttctgcaga agatgttcct caaggggttc tcgggcgacc tggagcgggc gcacgcgagg 2820

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agctgaccaa agtgaaatac gtgaccgagg gaatgagaaa gcccgccttc ctgagcggcg 4440

agcagaaaaa ggccatcgtg gacctgctgt tcaagaccaa ccggaaagtg accgtgaagc 4500

agctgaaaga ggactacttc aagaaaatcg agtgcttcga ctccgtggaa atctccggcg 4560

tggaagatcg gttcaacgcc tccctgggca cataccacga tctgctgaaa attatcaagg 4620

acaaggactt cctggacaat gaggaaaacg aggacattct ggaagatatc gtgctgaccc 4680

tgacactgtt tgaggacaga gagatgatcg aggaacggct gaaaacctat gcccacctgt 4740

tcgacgacaa agtgatgaag cagctgaagc ggcggagata caccggctgg ggcaggctga 4800

gccggaagct gatcaacggc atccgggaca agcagtccgg caagacaatc ctggatttcc 4860

tgaagtccga cggcttcgcc aacagaaact tcatgcagct gatccacgac gacagcctga 4920

cctttaaaga ggacatccag aaagcccagg tgtccggcca gggcgatagc ctgcacgagc 4980

acattgccaa tctggccggc agccccgcca ttaagaaggg catcctgcag acagtgaagg 5040

tggtggacga gctcgtgaaa gtgatgggcc ggcacaagcc cgagaacatc gtgatcgaaa 5100

tggccagaga gaaccagacc acccagaagg gacagaagaa cagccgcgag agaatgaagc 5160

ggatcgaaga gggcatcaaa gagctgggca gccagatcct gaaagaacac cccgtggaaa 5220

acacccagct gcagaacgag aagctgtacc tgtactacct gcagaatggg cgggatatgt 5280

acgtggacca ggaactggac atcaaccggc tgtccgacta cgatgtggac catatcgtgc 5340

ctcagagctt tctgaaggac gactccatcg acaacaaggt gctgaccaga agcgacaaga 5400

accggggcaa gagcgacaac gtgccctccg aagaggtcgt gaagaagatg aagaactact 5460

ggcggcagct gctgaacgcc aagctgatta cccagagaaa gttcgacaat ctgaccaagg 5520

ccgagagagg cggcctgagc gaactggata aggccggctt catcaagaga cagctggtgg 5580

aaacccggca gatcacaaag cacgtggcac agatcctgga ctcccggatg aacactaagt 5640

acgacgagaa tgacaagctg atccgggaag tgaaagtgat caccctgaag tccaagctgg 5700

tgtccgattt ccggaaggat ttccagtttt acaaagtgcg cgagatcaac aactaccacc 5760

acgcccacga cgcctacctg aacgccgtcg tgggaaccgc cctgatcaaa aagtacccta 5820

agctggaaag cgagttcgtg tacggcgact acaaggtgta cgacgtgcgg aagatgatcg 5880

ccaagagcga gcaggaaatc ggcaaggcta ccgccaagta cttcttctac agcaacatca 5940

tgaacttttt caagaccgag attaccctgg ccaacggcga gatccggaag cggcctctga 6000

tcgagacaaa cggcgaaacc ggggagatcg tgtgggataa gggccgggat tttgccaccg 6060

tgcggaaagt gctgagcatg ccccaagtga atatcgtgaa aaagaccgag gtgcagacag 6120

gcggcttcag caaagagtct atcctgccca agaggaacag cgataagctg atcgccagaa 6180

agaaggactg ggaccctaag aagtacggcg gcttcgacag ccccaccgtg gcctattctg 6240

tgctggtggt ggccaaagtg gaaaagggca agtccaagaa actgaagagt gtgaaagagc 6300

tgctggggat caccatcatg gaaagaagca gcttcgagaa gaatcccatc gactttctgg 6360

aagccaaggg ctacaaagaa gtgaaaaagg acctgatcat caagctgcct aagtactccc 6420

tgttcgagct ggaaaacggc cggaagagaa tgctggcctc tgccggcgaa ctgcagaagg 6480

gaaacgaact ggccctgccc tccaaatatg tgaacttcct gtacctggcc agccactatg 6540

agaagctgaa gggctccccc gaggataatg agcagaaaca gctgtttgtg gaacagcaca 6600

agcactacct ggacgagatc atcgagcaga tcagcgagtt ctccaagaga gtgatcctgg 6660

ccgacgctaa tctggacaaa gtgctgtccg cctacaacaa gcaccgggat aagcccatca 6720

gagagcaggc cgagaatatc atccacctgt ttaccctgac caatctggga gcccctgccg 6780

ccttcaagta ctttgacacc accatcgacc ggaagaggta caccagcacc aaagaggtgc 6840

tggacgccac cctgatccac cagagcatca ccggcctgta cgagacacgg atcgacctgt 6900

ctcagctggg aggcgacaaa aggccggcgg ccacgaaaaa ggccggccag gcaaaaaaga 6960

aaaagtaagg atcctgattg atcgatagag ctcgaatttc cccgatcgtt caaacatttg 7020

gcaataaagt ttcttaagat tgaatcctgt tgccggtctt gcgatgatta tcatataatt 7080

tctgttgaat tacgttaagc atgtaataat taacatgtaa tgcatgacgt tatttatgag 7140

atgggttttt atgattagag tcccgcaatt atacatttaa tacgcgatag aaaacaaaat 7200

atagcgcgca aactaggata aattatcgcg cgcggtgtca tctatgttac tagatcggga 7260

attcgtaatc atggtcatag ctgtttcctg tgtgaaattg ttatccgctc acaattccac 7320

acaacatacg agccggaagc ataaagtgta aagcctgggg tgcctaatga gtgagctaac 7380

tcacattaat tgcgttgcgc tcactgcccg ctttccagtc gggaaacctg tcgtgccagc 7440

tgcattaatg aatcggccaa cgcgcgggga gaggcggttt gcgtattggc tagagcagct 7500

tgccaacatg gtggagcacg acactctcgt ctactccaag aatatcaaag atacagtctc 7560

agaagaccaa agggctattg agacttttca acaaagggta atatcgggaa acctcctcgg 7620

attccattgc ccagctatct gtcacttcat caaaaggaca gtagaaaagg aaggtggcac 7680

ctacaaatgc catcattgcg ataaaggaaa ggctatcgtt caagatgcct ctgccgacag 7740

tggtcccaaa gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag acgttccaac 7800

cacgtcttca aagcaagtgg attgatgtga taacatggtg gagcacgaca ctctcgtcta 7860

ctccaagaat atcaaagata cagtctcaga agaccaaagg gctattgaga cttttcaaca 7920

aagggtaata tcgggaaacc tcctcggatt ccattgccca gctatctgtc acttcatcaa 7980

aaggacagta gaaaaggaag gtggcaccta caaatgccat cattgcgata aaggaaaggc 8040

tatcgttcaa gatgcctctg ccgacagtgg tcccaaagat ggacccccac ccacgaggag 8100

catcgtggaa aaagaagacg ttccaaccac gtcttcaaag caagtggatt gatgtgatat 8160

ctccactgac gtaagggatg acgcacaatc ccactatcct tcgcaagacc ttcctctata 8220

taaggaagtt catttcattt ggagaggaca cgctgaaatc accagtctct ctctacaaat 8280

ctatctctct cgagctttcg cagatcccgg ggggcaatga gatatgaaaa agcctgaact 8340

caccgcgacg tctgtcgaga agtttctgat cgaaaagttc gacagcgtct ccgacctgat 8400

gcagctctcg gagggcgaag aatctcgtgc tttcagcttc gatgtaggag ggcgtggata 8460

tgtcctgcgg gtaaatagct gcgccgatgg tttctacaaa gatcgttatg tttatcggca 8520

ctttgcatcg gccgcgctcc cgattccgga agtgcttgac attggggagt ttagcgagag 8580

cctgacctat tgcatctccc gccgtgcaca gggtgtcacg ttgcaagacc tgcctgaaac 8640

cgaactgccc gctgttctac aaccggtcgc ggaggctatg gatgcgatcg ctgcggccga 8700

tcttagccag acgagcgggt tcggcccatt cggaccgcaa ggaatcggtc aatacactac 8760

atggcgtgat ttcatatgcg cgattgctga tccccatgtg tatcactggc aaactgtgat 8820

ggacgacacc gtcagtgcgt ccgtcgcgca ggctctcgat gagctgatgc tttgggccga 8880

ggactgcccc gaagtccggc acctcgtgca cgcggatttc ggctccaaca atgtcctgac 8940

ggacaatggc cgcataacag cggtcattga ctggagcgag gcgatgttcg gggattccca 9000

atacgaggtc gccaacatct tcttctggag gccgtggttg gcttgtatgg agcagcagac 9060

gcgctacttc gagcggaggc atccggagct tgcaggatcg ccacgactcc gggcgtatat 9120

gctccgcatt ggtcttgacc aactctatca gagcttggtt gacggcaatt tcgatgatgc 9180

agcttgggcg cagggtcgat gcgacgcaat cgtccgatcc ggagccggga ctgtcgggcg 9240

tacacaaatc gcccgcagaa gcgcggccgt ctggaccgat ggctgtgtag aagtactcgc 9300

cgatagtgga aaccgacgcc ccagcactcg tccgagggca aagaaataga gtagatgccg 9360

accggatctg tcgatcgaca agctcgagtt tctccataat aatgtgtgag tagttcccag 9420

ataagggaat tagggttcct atagggtttc gctcatgtgt tgagcatata agaaaccctt 9480

agtatgtatt tgtatttgta aaatacttct atcaataaaa tttctaattc ctaaaaccaa 9540

aatccagtac taaaatccag atcccccgaa ttaattcggc gttaattcag tacattaaaa 9600

acgtccgcaa tgtgttatta agttgtctaa gcgtcaattt gtttacacca caatatatcc 9660

tgccaccagc cagccaacag ctccccgacc ggcagctcgg cacaaaatca ccactcgata 9720

caggcagccc atcagtccgg gacggcgtca gcgggagagc cgttgtaagg cggcagactt 9780

tgctcatgtt accgatgcta ttcggaagaa cggcaactaa gctgccgggt ttgaaacacg 9840

gatgatctcg cggagggtag catgttgatt gtaacgatga cagagcgttg ctgcctgtga 9900

tcaccgcggt ttcaaaatcg gctccgtcga tactatgtta tacgccaact ttgaaaacaa 9960

ctttgaaaaa gctgttttct ggtatttaag gttttagaat gcaaggaaca gtgaattgga 10020

gttcgtcttg ttataattag cttcttgggg tatctttaaa tactgtagaa aagaggaagg 10080

aaataataaa tggctaaaat gagaatatca ccggaattga aaaaactgat cgaaaaatac 10140

cgctgcgtaa aagatacgga aggaatgtct cctgctaagg tatataagct ggtgggagaa 10200

aatgaaaacc tatatttaaa aatgacggac agccggtata aagggaccac ctatgatgtg 10260

gaacgggaaa aggacatgat gctatggctg gaaggaaagc tgcctgttcc aaaggtcctg 10320

cactttgaac ggcatgatgg ctggagcaat ctgctcatga gtgaggccga tggcgtcctt 10380

tgctcggaag agtatgaaga tgaacaaagc cctgaaaaga ttatcgagct gtatgcggag 10440

tgcatcaggc tctttcactc catcgacata tcggattgtc cctatacgaa tagcttagac 10500

agccgcttag ccgaattgga ttacttactg aataacgatc tggccgatgt ggattgcgaa 10560

aactgggaag aagacactcc atttaaagat ccgcgcgagc tgtatgattt tttaaagacg 10620

gaaaagcccg aagaggaact tgtcttttcc cacggcgacc tgggagacag caacatcttt 10680

gtgaaagatg gcaaagtaag tggctttatt gatcttggga gaagcggcag ggcggacaag 10740

tggtatgaca ttgccttctg cgtccggtcg atcagggagg atatcgggga agaacagtat 10800

gtcgagctat tttttgactt actggggatc aagcctgatt gggagaaaat aaaatattat 10860

attttactgg atgaattgtt ttagtaccta gaatgcatga ccaaaatccc ttaacgtgag 10920

ttttcgttcc actgagcgtc agaccccgta gaaaagatca aaggatcttc ttgagatcct 10980

ttttttctgc gcgtaatctg ctgcttgcaa acaaaaaaac caccgctacc agcggtggtt 11040

tgtttgccgg atcaagagct accaactctt tttccgaagg taactggctt cagcagagcg 11100

cagataccaa atactgtcct tctagtgtag ccgtagttag gccaccactt caagaactct 11160

gtagcaccgc ctacatacct cgctctgcta atcctgttac cagtggctgc tgccagtggc 11220

gataagtcgt gtcttaccgg gttggactca agacgatagt taccggataa ggcgcagcgg 11280

tcgggctgaa cggggggttc gtgcacacag cccagcttgg agcgaacgac ctacaccgaa 11340

ctgagatacc tacagcgtga gctatgagaa agcgccacgc ttcccgaagg gagaaaggcg 11400

gacaggtatc cggtaagcgg cagggtcgga acaggagagc gcacgaggga gcttccaggg 11460

ggaaacgcct ggtatcttta tagtcctgtc gggtttcgcc acctctgact tgagcgtcga 11520

tttttgtgat gctcgtcagg ggggcggagc ctatggaaaa acgccagcaa cgcggccttt 11580

ttacggttcc tggccttttg ctggcctttt gctcacatgt tctttcctgc gttatcccct 11640

gattctgtgg ataaccgtat taccgccttt gagtgagctg ataccgctcg ccgcagccga 11700

acgaccgagc gcagcgagtc agtgagcgag gaagcggaag agcgcctgat gcggtatttt 11760

ctccttacgc atctgtgcgg tatttcacac cgcatatggt gcactctcag tacaatctgc 11820

tctgatgccg catagttaag ccagtataca ctccgctatc gctacgtgac tgggtcatgg 11880

ctgcgccccg acacccgcca acacccgctg acgcgccctg acgggcttgt ctgctcccgg 11940

catccgctta cagacaagct gtgaccgtct ccgggagctg catgtgtcag aggttttcac 12000

cgtcatcacc gaaacgcgcg aggcagggtg ccttgatgtg ggcgccggcg gtcgagtggc 12060

gacggcgcgg cttgtccgcg ccctggtaga ttgcctggcc gtaggccagc catttttgag 12120

cggccagcgg ccgcgatagg ccgacgcgaa gcggcggggc gtagggagcg cagcgaccga 12180

agggtaggcg ctttttgcag ctcttcggct gtgcgctggc cagacagtta tgcacaggcc 12240

aggcgggttt taagagtttt aataagtttt aaagagtttt aggcggaaaa atcgcctttt 12300

ttctctttta tatcagtcac ttacatgtgt gaccggttcc caatgtacgg ctttgggttc 12360

ccaatgtacg ggttccggtt cccaatgtac ggctttgggt tcccaatgta cgtgctatcc 12420

acaggaaaga gtccttttcg acctttttcc cctgctaggg caatttgccc tagcatctgc 12480

tccgtacatt aggaaccggc ggatgcttcg ccctcgatca ggttgcggta gcgcatgact 12540

aggatcgggc cagcctgccc cgcctcctcc ttcaaatcgt actccggcag gtcatttgac 12600

ccgatcagct tgcgcacggt gaaacagaac ttcttgaact ctccggcgct gccactgcgt 12660

tcgtagatcg tcttgaacaa ccatctggct tctgccttgc ctgcggcgcg gcgtgccagg 12720

cggtagagaa aacggccgat gccgggatcg atcaaaaagt aatcggggtg aaccgtcagc 12780

acgtccgggt tcttgccttc tgtgatctcg cggtacatcc aatcagctag ctcgatctcg 12840

atgtactccg gccgcccggt ttcgctcttt acgatcttgt agcggctaat caaggcttca 12900

ccctcggata ccgtcaccag gcggccgttc ttggccttct tcgtacgctg catggcaacg 12960

tgcgtggtgt ttaaccgaat gcaggtttct accaggtcgt ctttctgctt tccgccatcg 13020

gctcgccggc agaacttgag tacgtccgca acgtgtggac ggaacacgcg gccgggcttg 13080

tctcccttcc cttcccggta tcggttcatg gattcggtta gatgggaaac cgccatcagt 13140

accaggtcgt aatcccacac actggccatg ccggccggcc ctgcggaaac ctctacgtgc 13200

ccgtctggaa gctcgtagcg gatcacctcg ccagctcgtc ggtcacgctt cgacagacgg 13260

aaaacggcca cgtccatgat gctgcgacta tcgcgggtgc ccacgtcata gagcatcgga 13320

acgaaaaaat ctggttgctc gtcgcccttg ggcggcttcc taatcgacgg cgcaccggct 13380

gccggcggtt gccgggattc tttgcggatt cgatcagcgg ccgcttgcca cgattcaccg 13440

gggcgtgctt ctgcctcgat gcgttgccgc tgggcggcct gcgcggcctt caacttctcc 13500

accaggtcat cacccagcgc cgcgccgatt tgtaccgggc cggatggttt gcgaccgtca 13560

cgccgattcc tcgggcttgg gggttccagt gccattgcag ggccggcaga caacccagcc 13620

gcttacgcct ggccaaccgc ccgttcctcc acacatgggg cattccacgg cgtcggtgcc 13680

tggttgttct tgattttcca tgccgcctcc tttagccgct aaaattcatc tactcattta 13740

ttcatttgct catttactct ggtagctgcg cgatgtattc agatagcagc tcggtaatgg 13800

tcttgccttg gcgtaccgcg tacatcttca gcttggtgtg atcctccgcc ggcaactgaa 13860

agttgacccg cttcatggct ggcgtgtctg ccaggctggc caacgttgca gccttgctgc 13920

tgcgtgcgct cggacggccg gcacttagcg tgtttgtgct tttgctcatt ttctctttac 13980

ctcattaact caaatgagtt ttgatttaat ttcagcggcc agcgcctgga cctcgcgggc 14040

agcgtcgccc tcgggttctg attcaagaac ggttgtgccg gcggcggcag tgcctgggta 14100

gctcacgcgc tgcgtgatac gggactcaag aatgggcagc tcgtacccgg ccagcgcctc 14160

ggcaacctca ccgccgatgc gcgtgccttt gatcgcccgc gacacgacaa aggccgcttg 14220

tagccttcca tccgtgacct caatgcgctg cttaaccagc tccaccaggt cggcggtggc 14280

ccatatgtcg taagggcttg gctgcaccgg aatcagcacg aagtcggctg ccttgatcgc 14340

ggacacagcc aagtccgccg cctggggcgc tccgtcgatc actacgaagt cgcgccggcc 14400

gatggccttc acgtcgcggt caatcgtcgg gcggtcgatg ccgacaacgg ttagcggttg 14460

atcttcccgc acggccgccc aatcgcgggc actgccctgg ggatcggaat cgactaacag 14520

aacatcggcc ccggcgagtt gcagggcgcg ggctagatgg gttgcgatgg tcgtcttgcc 14580

tgacccgcct ttctggttaa gtacagcgat aaccttcatg cgttcccctt gcgtatttgt 14640

ttatttactc atcgcatcat atacgcagcg accgcatgac gcaagctgtt ttactcaaat 14700

acacatcacc tttttagacg gcggcgctcg gtttcttcag cggccaagct ggccggccag 14760

gccgccagct tggcatcaga caaaccggcc aggatttcat gcagccgcac ggttgagacg 14820

tgcgcgggcg gctcgaacac gtacccggcc gcgatcatct ccgcctcgat ctcttcggta 14880

atgaaaaacg gttcgtcctg gccgtcctgg tgcggtttca tgcttgttcc tcttggcgtt 14940

cattctcggc ggccgccagg gcgtcggcct cggtcaatgc gtcctcacgg aaggcaccgc 15000

gccgcctggc ctcggtgggc gtcacttcct cgctgcgctc aagtgcgcgg tacagggtcg 15060

agcgatgcac gccaagcagt gcagccgcct ctttcacggt gcggccttcc tggtcgatca 15120

gctcgcgggc gtgcgcgatc tgtgccgggg tgagggtagg gcgggggcca aacttcacgc 15180

ctcgggcctt ggcggcctcg cgcccgctcc gggtgcggtc gatgattagg gaacgctcga 15240

actcggcaat gccggcgaac acggtcaaca ccatgcggcc ggccggcgtg gtggtgtcgg 15300

cccacggctc tgccaggcta cgcaggcccg cgccggcctc ctggatgcgc tcggcaatgt 15360

ccagtaggtc gcgggtgctg cgggccaggc ggtctagcct ggtcactgtc acaacgtcgc 15420

cagggcgtag gtggtcaagc atcctggcca gctccgggcg gtcgcgcctg gtgccggtga 15480

tcttctcgga aaacagcttg gtgcagccgg ccgcgtgcag ttcggcccgt tggttggtca 15540

agtcctggtc gtcggtgctg acgcgggcat agcccagcag gccagcggcg gcgctcttgt 15600

tcatggcgta atgtctccgg ttctagtcgc aagtattcta ctttatgcga ctaaaacacg 15660

cgacaagaaa acgccaggaa aagggcaggg cggcagcctg tcgcgtaact taggacttgt 15720

gcgacatgtc gttttcagaa gacggctgca ctgaacgtca gaagccgact gcactatagc 15780

agcggagggg ttggatcaaa gtactttgat cccgagggga accctgtggt tggcatgcac 15840

atacaaatgg acgaacggat aaaccttttc acgccctttt aaatatccgt tattctaa 15898

<210> 5

<211> 96

<212> DNA

<213> Artificial sequence

<400> 5

gctggacggc cacgacctga gttttagagc tagaaatagc aagttaaaat aaggctagtc 60

cgttatcaac ttgaaaaagt ggcaccgagt cggtgc 96

<210> 6

<211> 20

<212> RNA

<213> Artificial sequence

<400> 6

gcuggacggc cacgaccuga 20

Claims (6)

1.OsABCB1蛋白在植物育种的应用，所述育种的目标为如下（e1）或（e2）：

（e1）培育株高降低的植物；

（e2）培育叶夹角变小的植物；

所述OsABCB1蛋白为如下（a1）或（a2）：

（a1）序列表中序列1所示的蛋白质；

（a2）在（a1）所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

所述植物为水稻；

所述应用为通过抑制所述OsABCB1蛋白表达实现。

2.编码OsABCB1蛋白的核酸分子的应用，为如下（f1）或（f2）：

（f1）培育株高降低的转基因植物；

（f2）培育叶夹角变小的转基因植物；

所述OsABCB1蛋白为如下（a1）或（a2）：

（a1）序列表中序列1所示的蛋白质；

（a2）在（a1）所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

所述植物为水稻；

所述应用为通过抑制编码OsABCB1蛋白的核酸分子的表达实现。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：

所述编码OsABCB1蛋白的核酸分子为如下（b1）或（b2）：

（b1）编码区如序列表中序列2所示的DNA分子；

（b2）序列表中序列3所示的DNA分子。

4.一种制备转基因植物的方法，包括如下步骤：在受体植物中导入抑制编码OsABCB1蛋白的核酸分子表达的物质，得到转基因植物；与所述受体植物相比，所述转基因植株株高降低和/或叶夹角变小；

所述OsABCB1蛋白为如下（a1）或（a2）：

（a1）序列表中序列1所示的蛋白质；

（a2）在（a1）所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

所述植物为水稻。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：

所述编码OsABCB1蛋白的核酸分子为如下（b1）或（b2）：

（b1）编码区如序列表中序列2所示的DNA分子；

（b2）序列表中序列3所示的DNA分子。

6.一种植物育种方法，包括如下步骤：降低目的植物中OsABCB1蛋白的含量和/或活性，从而使目的植物株高降低和/或叶夹角变小；

所述OsABCB1蛋白为如下（a1）或（a2）：

（a1）序列表中序列1所示的蛋白质；

（a2）在（a1）所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

所述植物为水稻。

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