CN110072863B - Rip1激酶抑制剂及使用方法 - Google Patents

Rip1激酶抑制剂及使用方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110072863B
CN110072863B CN201780077539.9A CN201780077539A CN110072863B CN 110072863 B CN110072863 B CN 110072863B CN 201780077539 A CN201780077539 A CN 201780077539A CN 110072863 B CN110072863 B CN 110072863B
Authority
CN
China
Prior art keywords
dihydro
oxo
triazole
methyl
carboxamide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201780077539.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110072863A (zh
Inventor
S·帕特尔
G·汉密尔顿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of CN110072863A publication Critical patent/CN110072863A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110072863B publication Critical patent/CN110072863B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Abstract

本发明提供具有RIP1激酶抑制活性的新型化合物、包含该化合物的药物组合物及使用该化合物的方法。

Description

RIP1激酶抑制剂及使用方法
发明领域
本发明涉及可用于在哺乳动物中治疗和/或预防的有机化合物，尤其是RIP1激酶抑制剂，其可用于治疗与炎症、细胞死亡和其它相关的疾病和障碍。
发明背景
受体相互作用蛋白-1(“RIP1”)激酶是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。RIP1是细胞信号的调节剂，其尤其涉及程序性细胞死亡途径，例如坏死性凋亡(necroptosis)。坏死性细胞死亡的最好研究形式是由TNFα(肿瘤坏死因子)引发，但坏死性凋亡还可由TNFα死亡配体家族的其它成员(Fas和TRAIL/Apo2L)、干扰素、Toll样受体(TLRs)信号及通过DNA传感器DAI的病毒性感染(干扰素调节因子的DNA依赖性激活剂)诱发[1-3]。TNFα与TNFR1(TNF受体1)的结合促使TNFR1三聚化并形成细胞内络合物，即络合物-I。TRADD(TNF受体相关死亡结构域蛋白)至TNFR1细胞内死亡结构域，并通过两种蛋白质中存在的死亡结构域募集蛋白激酶RIP1(受体相互作用蛋白1)[4]。在初始募集到TNFR1相关信号络合物后，RIP1易位至次级胞质复合物，复合物-II[5-7]。复合物-II由包含死亡结构域的蛋白质FADD(Fas相关蛋白)、RIP1、caspase-8和cFLIP形成。如果caspase-8未被完全激活或其活性被阻断，蛋白激酶RIP3即被募集到复合物中，形成坏死体(necrosome)，其将导致坏死性细胞死亡引发[8-10]。一旦坏死体形成，RIP1和RIP3将参与一系列对坏死性细胞死亡至关重要的自体和交叉磷酸化事件。坏死性凋亡可通过两种激酶中任意一种的激酶失活突变而被完全阻断，或通过RIP1激酶抑制剂(坏死稳定素(necrostatins))或RIP3激酶抑制剂以化学方式完全阻断[11-13]。RIP3的磷酸化允许假性激酶MLKL(混合谱系激酶结构域样)的结合与磷酸化，其为坏死性细胞死亡的关键组分[14,15]。
坏死性凋亡在心肌梗死、中风、动脉粥样硬化、缺血再灌注损伤、炎性肠道疾病、视网膜变性和许多其它常见临床障碍中具有重要的病理生理学相关性[16]。因此，需要RIP1激酶活性的选择性抑制剂作为由该途径介导的且与炎症和/或坏死性细胞死亡相关疾病的潜在治疗。
RIP1激酶抑制剂此前已有描述。第一个被发表的RIP1激酶活性抑制剂是坏死稳定素1(Nec-1)[17]。在该最初发现之后的是Nec-1的修饰版本，其具有阻断RIP1激酶活性的各种能力[11,18]。最近其它的RIP1激酶抑制剂已有描述，其在结构上与坏死稳定素类化合物不同[19,20,21]。
前文所引参考文献：
1)Vanden Berghe,T.,Linkermann,A.,Jouan-Lanhouet,S.,Walczak,H.andVandenabeele,P.(2014)Regulated necrosis:the expanding network of non-apoptotic cell death pathway.Nature reviews.Molecular cell biology.15,135-147.
2)Newton,K.(2015)RIPK1 and RIPK3:critical regulators of inflammationand cell death.Trends in cell biology.25,347-353.
3)de Almagro,M.C.and Vucic,D.(2015)Necroptosis:Pathway diversity andcharacteristics.Semin Cell Dev Biol.39,56-62.
4)Chen,Z.J.(2012)Ubiquitination in signaling to and activation ofIKK.Immunological reviews.246,95-106.
5)O'Donnell,M.A.,Legarda-Addison,D.,Skountzos,P.,Yeh,W.C.and Ting,A.T.(2007)Ubiquitination of RIP1 regulates an NF-kappaB-independent cell-death switch in TNF signaling.Curr Biol.17，418-424.
6)Feoktistova,M.,Geserick,P.,Kellert,B.,Dimitrova,D.P.,Langlais,C.,Hupe,M.,Cain,K.,MacFarlane,M.,Hacker,G.and Leverkus,M.(2011)cIAPs blockRipoptosome formation,a RIP1/caspase-8 containing intercellular cell deathcomplex differentially regulated by cFLIP isoforms.Molecular cell.43,449-463.
7)Bertrand,M.J.,Milutinovic,S.,Dickson,K.M.,Ho,W.C.,Boudreault,A.,Durkin,J.,Gillard,J.W.,Jaquith,J.B.,Morris,S.J.and Barker,P.A.(2008)cIAP1 andcIAP2 facilitate cancer cell survival by functioning as E3 ligases thatpromote RIP1 ubiquitination.Mol Cell.30,689-700.
8)Wang,L.,Du,F.and Wang,x.(2008)TNF-alpha induces two distinctcaspase-8 activation pathways.Cell.133,693-703.
9)He,S.,Wang,L.,Miao,L.,Wang,T.,Du,F.,Zhao,L.and Wang,x.(2009)Receptor interacting protein kinase-3 determines cellular necrotic responseto TNF-alpha.Cell.137,1100-1111.
10)Cho,Y.S.,Challa,S.,Moquin,D.,Genga,R.,Ray,T.D.,Guildford,M.andChan,F.K.(2009)Phosphorylation-driven assembly of the RIP1-RIP3 complexregulates programmed necrosis and virus-induced inflammation.Cell.137,1112-1123.
11)Degterev,A.,Hitomi,J.,Germscheid,M.,Ch'en,I.L.,Korkina,O.,Teng,x.,Abbott,D.,Cuny,G.D.,Yuan,C.,Wagner,G.,Hedrick,S.M.,Gerber,S.A.,Lugovskoy,A.and Yuan,J.(2008)Identification of RIP1 kinase as a specific cellulartarget of necrostatins.Nat Chem Biol.4,313-321.
12)Newton,K.,Dugger,D.L.,Wickliffe,K.E.,Kapoor,N.,de Almagro,M.C.,Vucic,D.,Komuves,L.,Ferrando,R.E.,French,D.M.,Webster,J.,Roose-Girma,M.,Warming,S.and Dixit,V.M.(2014)Activity of protein kinase RIPK3 determineswhether cells die by necroptosis or apoptosis.Science.343,1357-1360.
13)Kaiser,W.J.,Sridharan,H.,Huang,C.,Mandal,P.,Upton,J.W.,Gough,P.J.,Sehon,C.A.,Marquis,R.W.,Bertin,J.and Mocarski,E.S.(2013)Toll-like receptor 3-mediated necrosis via TRIF,RIP3,and MLKL.The Journal of biologicalchemistry.288,31268-31279.
14)Zhao,J.,Jitkaew,S.,Cai,Z.,Choksi,S.,Li,Q.,Luo,J.and Liu,Z.G.(2012)Mixed lineage kinase domain-like is a key receptor interacting protein 3downstream component of TNF-induced necrosis.Proceedings of the NationalAcademy of Sciences of the United States of America.109,5322-5327.
15)Sun,L.,Wang,H.,Wang，Z.,He,S.,Chen,S.,Liao,D.,Wang,L.,Yan,J.,Liu,W.,Lei,x.and Wang,x.(2012)Mixed Lineage Kinase Domain-like Protein MediatesNecrosis Signaling Downstream of RIP3 Kinase.Cell.148,213-227.
16)Linkermann,A.and Green,D.R.(2014)Necroptosis.The New Englandjournal of medicine.370,455-465.
17)Degterev,A.,Huang,Z.,Boyce,M.,Li,Y.,Jagtap,P.,Mizushima,N.，Cuny，G.D.,Mitchison，T.J.,Moskowitz,M.A.and Yuan,J.(2005)Chemical inhibitor ofnonapoptotic cell death with therapeutic potential for ischemic braininjury.Nat Chem Biol.1,112-119.
18)Takahashi,N.,Duprez,L.,Grootjans,S.,Cauwels,A.,Nerinckx,W.,DuHadaway,J.B.,Goossens,V.,Roelandt,R.,Van Hauwermeiren,F.,Libert,C.,Declercq,W.,Callewaert,N.,Prendergast,G.C.,Degterev,A.,Yuan,J.andVandenabeele,P.(2012)Necrostatin-1analogues:critical issues on thespecificity,activity and in vivo use in experimental disease models.CellDeath Dis.3,e437.19)Harris,P.A.,Bandyopadhyay,D.,Berger,S.B.,Campobasso,N.,Capriotti,C.A.,Cox,J.A.,Dare,L.，Finger,J.N.,Hoffman，S.J.，Kahler，K.M.,Lehr,R.,Lich,J.D.,Nagilla,R.,Nolte,R.T.,Ouellette,M.T.,Pao,C.S.,Schaeffer,M.C.,Smallwood,A.,Sun,H.H.,Swift,B.A.,Totoritis,R.D.,Ward,P.,Marquis,R.W.,Bertin,J.and Gough,P.J.(2013)Discovery of Small Molecule RIP1Kinase Inhibitors forthe Treatment of Pathologies Associated with Necroptosis.ACS medicinalchemistry letters.4,1238-1243.
20)Najjar,M.,Suebsuwong,C.,Ray,S.S.,Thapa,R.J.,Maki,J.L.,Nogusa,S.,Shah,S.,Saleh,D.,Gough,P.J.,Bertin,J.,Yuan,J.,Balachandran,S.,Cuny,G.D.andDegterev,A.(2015)Structure Guided Design of Potent and Selective Ponatinib-Based Hybrid Inhibitors for RIPK1.Cell Rep.
21)International Patent Publication No.WO 2014/125444.
发明简述
本文提供化合物选自：
(5R)-5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000041
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(4R)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000042
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000043
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000044
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000045
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000046
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺；
1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000047
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺；
(5R)-5-苯基-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000051
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R)-5-苯基-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000052
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000053
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000054
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000055
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S)-5-(2-氟代苯基)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000056
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S)-5-(2-氟代苯基)-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000057
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R)-5-(2-氟代苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000058
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000059
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺；
(4S)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA00020945937700000510
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
4-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA00020945937700000511
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA00020945937700000512
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺；
1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA00020945937700000513
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺；
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700000514
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(7S)-7-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700000515
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S)-5-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700000516
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000061
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000062
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000063
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000064
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000065
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
7,7-二氟-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000066
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
7，7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2，3-二氢-1，5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000067
-3-基]-5，6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-7，9-二氟-2-氧代基-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000068
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000069
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA00020945937700000610
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA00020945937700000611
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA00020945937700000612
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700000613
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
1-苄基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700000614
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700000615
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
1-苄基-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000071
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
1-苄基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000072
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000073
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000074
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000075
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000076
-6-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000077
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000078
-6-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；和
5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000079
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
或其对映异构体、或其药学上可接受的盐。
本文还提供药物组合物，其包含本文提供化合物或其药学上可接受的盐，和一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。具体实施方案包括适合静脉内或口服递送的药物组合物。
本文还提供本文提供化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种适用于口服递送的药学上可接受的载体或赋形剂的口服制剂。
本文还提供本文提供化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种适用于胃肠外递送的药学上可接受的载体或赋形剂的胃肠外制剂。
在一些实施方案中，本文提供本文提供化合物或其药学上可接受的盐用于治疗疾病和障碍的用途。在一些实施方案中，所治疗的疾病和障碍选自肠激惹障碍(irritablebowel disorders)(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肾、肝和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎、视网膜变性、慢性肾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、慢性阻塞性肺病(COPD)。
在一些实施方案中，所治疗的疾病或障碍选自炎性肠道疾病(包括局限性回肠炎和溃疡性结肠炎)、银屑病、视网膜脱离、色素性视网膜炎、黄斑变性、胰腺炎、特应性皮炎、关节炎(包括类风湿性关节炎、骨关节炎、椎关节炎、痛风、系统性幼年型特发性关节炎(systematic onset juvenile idiopathic arthritis)(SoJIA)、银屑病关节炎)、系统性红斑狼疮(SLE)、舍格伦综合征、系统性硬皮病、抗磷脂综合征(APS)、血管炎、肝损伤/疾病(非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪性肝炎、自身免疫性肝炎自身免疫性肝胆疾病、原发性硬化性胆管炎(PSC)、对乙酰氨基酚毒性、肝毒性)、肾损伤/伤害(肾炎、肾移植、手术、施用肾毒性药物例如顺铂、急性肾损伤(AKI))、乳糜泻、自身免疫性特发性血小板减少性紫癜、移植排斥、实体器官缺血再灌注损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、脑血管意外(CVA、中风)、心肌梗死(MI)、动脉粥样硬化、亨廷顿舞蹈病、阿尔兹海默症、帕金森病、肌萎缩侧索硬化(ALS)、脊髓性肌萎缩(SMA)、变应性疾病(包括哮喘和特应性皮炎)、多发性硬化、I型糖尿病、韦格纳肉芽肿、肺结节病、贝赫切特病、白细胞介素-1转换酶(ICE，也称为caspase-1)相关热症(fever syndrome)、慢性阻塞性肺病(COPD)、肿瘤坏死因子受体相关周期综合征(TRAPS)、牙周炎、NEMO缺乏综合征(F-κ-B必需调节基因(也称为IKKγ或IKKG)缺乏综合征)、HOIL-1缺乏症((也称为RBCKl)血红素氧化IRP2泛素连接酶-1缺乏症)、线性泛素链组装复合物(linear ubiquitin chain assembly complex)(LUBAC)缺乏综合征、血液和实体器官恶性肿瘤、细菌感染和病毒性感染(如结核病和流感)和溶酶体贮积症(尤其是戈谢病，并且包括GM2、神经节苷脂症、α-甘露糖苷贮积症、天冬氨酰葡萄糖胺尿、胆固醇酯贮积病、慢性己糖胺酶A缺乏症、胱氨酸贮积症、达农病(Danon disease)、法布里病、法伯病、岩藻糖苷贮积症、半乳糖唾液酸贮积病、GM1神经节苷脂症、粘脂贮积症、婴儿游离唾液酸贮积症(infantile free sialic acid storage disease)、幼年型己糖胺酶A缺乏症、克拉伯病、溶酶体酸性脂肪酶缺乏症、异染色性脑白质营养不良、粘多糖病症(mucopolysaccharidoses disorder)、多种硫酸酯酶缺乏症、尼皮(Niemann-Pick)病、神经细胞蜡样质脂褐素病、庞皮(Pompe)病、致密性成骨不全(Pycnodysostosis)、桑德霍夫病、Schindler病、唾液酸贮积病、家族黑矇性白痴(Tay-Sachs disease)和沃尔曼病)。
在一些实施方案中，所治疗的疾病和障碍选自肠激惹障碍(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肾、肝和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎和视网膜变性。
在一些实施方案中，本文提供了用治疗上有效量的本文提供的化合物或其药学上可接受的盐治疗或预防疾病或障碍的方法，其中所述疾病或障碍与炎症和/或坏死性凋亡相关。在一些实施方案中，所述疾病或障碍选自本文所述的特定疾病和障碍。
在一些实施方案中，本文提供了通过使细胞与本文提供的化合物或其药学上可接受的盐接触以抑制RIP1激酶活性的方法。
发明详述
本发明提供新化合物，选自：
(5R)-5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000091
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(4R)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000092
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000093
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000094
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000095
-3-基]-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-b][1，2，4]三唑-2-甲酰胺；
1-(2，2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2，3-二氢-1，5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000096
-3-基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酰胺；
1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000097
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺；
(5R)-5-苯基-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000101
-3-基]-6，7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2，4]三唑-2-甲酰胺；
(5R)-5-苯基-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000102
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1，2-b][1，2，4]三唑-2-甲酰胺；
5-(1，1-二氟丙基)-N-[(3S)-7，9-二氟-2-氧代基-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000103
-3-基]-6，7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000104
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000105
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000106
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000107
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R)-5-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000108
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000109
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺；
(4S)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA00020945937700001010
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
4-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA00020945937700001011
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA00020945937700001012
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺；
1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA00020945937700001013
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺；
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700001014
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(7S)-7-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700001015
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S)-5-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000111
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000112
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000113
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000114
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000115
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000116
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
7,7-二氟-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000117
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000118
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000119
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA00020945937700001110
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA00020945937700001111
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA00020945937700001112
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA00020945937700001113
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700001114
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
1-苄基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700001115
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000121
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
1-苄基-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000122
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
1-苄基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000123
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000124
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000125
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000126
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000127
-6-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000128
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000129
-6-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；和
5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA00020945937700001210
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
或其对映异构体或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供选自下表1中化合物的化合物。
本文还提供用于治疗或预防人类疾病或障碍的方法，该方法包括向人类施用有效量的本文提供的化合物，其中所述疾病或障碍选自肠激惹障碍(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肾、肝和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎、视网膜变性、慢性肾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、慢性阻塞性肺病(COPD)。
本文还提供用于治疗人类疾病或障碍的方法，该方法包括向人类施用有效治疗量的本文提供的化合物，其中所述疾病或障碍选自肠激惹障碍(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肾、肝和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎、视网膜变性、慢性肾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、慢性阻塞性肺病(COPD)。
定义
如本文所提供所有的化学式和通用化学结构应解释为在原子之间提供适当的价态和化学稳定的键，如本领域技术人员所理解。在适当情况下，取代基可以与多于一个相邻原子键合(例如烷基包含存在两个键的亚甲基)。
如本文所用的术语“手性”意指具有镜像配对物不可重合性质的分子，而术语“非手性”意指其镜像配对物可重合的分子。
如本文所用的术语“立体异构体”意指具有相同化学组成但原子或基团空间排列不同的化合物。
如本文所用的与化学结构中的键相交的波浪线
Figure BDA0002094593770000131
表示波状键在化学结构中相交的键与分子其余部分的连接点。
“非对映异构体”意指具有两个或多个手性中心且其分子非彼此镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱性质和反应性。非对映异构体的混合物可在高分辨分析方法如电泳和色谱下分离。
“对映体”意指彼此为非重叠镜像的化合物的两个立体异构体。
本文所用的立体化学定义和惯例一般遵循S.P.Parker,Ed.,McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；和Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,NewYork,1994。本发明的化合物可包含非对称或手性中心，并由此存在不同的立体异构形式。旨在本发明化合物的所有立体异构形式、包括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体及其混合物如外消旋混合物形成本发明的一部分。许多有机化合物以光学活性形式存在，即其具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描述光学活性化合物时，前缀D和L或R和S被用于表示分子关于其手性中心的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)被用于表明化合物对平面偏振光的旋转，(-)或1表示化合物为左旋。以(+)或d为前缀的化合物为右旋。对已给定的化学结构，除非彼此呈镜像外，其立体异构体是相同的。特定的立体异构体也可被称为对映体，这种异构体的混合物常称为对映体混合物。50:50的对映体混合物被称为外消旋混合物或外消旋物，这在当化学反应或过程中没有立体选择性或立体特异性时可出现。术语“外消旋混合物”和“外消旋物”意指两种对映体的等摩尔混合物，没有光学活性。
当本文化合物结构式中的键以非立体化学方式(例如平面)绘制时，键所连接的原子包括所有立体化学可能性。当本文化合物结构式的键以限定立体化学方式(例如粗体、粗体楔形、虚线或虚线楔形)绘制时，除非另有说明，应理解立体化学键所连接的原子富含所描述的绝对立体异构体。在一个实施方案中，化合物可以是至少51％的所描述的绝对立体异构体。在另一个实施方案中，化合物可以是至少80％所描述的绝对立体异构体。在另一个实施方案中，化合物化合物可以是至少90％所描述的绝对立体异构体。在另一个实施方案中，化合物化合物可以是至少95％所描述的绝对立体异构体。在另一个实施方案中，化合物可以是至少97％所描述的绝对立体异构体。在另一个实施方案中，化合物可以是至少98％所描述的绝对立体异构体。在另一个实施方案中，化合物可以是至少99％所描述的绝对立体异构体。
如本文所用的术语“互变异构体”或“互变异构形式”意指可经由低能垒互换的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子性互变异构体)包括经由质子迁移的相互转换，如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构。价键互变异构体包括某些键合电子的重组导致的相互转换。
如本文所用的术语“溶剂化物”意指一个或多个溶剂分子与本发明化合物的缔合或复合。形成溶剂化物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。术语“水合物”意指其中溶剂分子为水的复合物。
如本文所用的术语“保护基”意指常用以阻断或保护化合物上特定功能基的取代基。例如，“氨基-保护基”是与氨基相连以阻断或保护化合物中氨基功能性的取代基。合适的氨基-保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、t-丁氧羰基(BOC)、苄氧羰基(CBZ)和9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)。类似地，“羟基-保护基”意指阻断或保护羟基功能性的羟基取代基。合适的保护基包括乙酰基和甲硅烷基。“羧基-保护基”意指阻断或保护羧基功能性的羧基取代基。常用的羧基-保护基包括苯基磺酰乙基、氰基乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、2-(对甲苯磺酰基)乙基、2-(p-硝基苯亚磺酰基(sulfenyl))乙基、2-(二苯基膦基)-乙基、硝基乙基等。保护基的一般说明及其使用参见P.G.M.Wuts和T.W.Greene,Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis第4版，Wiley-Interscience,New York,2006.中。
如本文所用的术语“哺乳动物”包括但不限于人、小鼠、大鼠、豚鼠、猴、狗、猫、马、牛、猪和羊。
如本文所用的术语“药学上可接受的盐”旨在包括以相对无毒酸或碱制备的活性化合物的盐，取决于本文描述化合物上的特定取代基。当本发明化合物含有相对酸性的功能基，可将该化合物中性形式与足量所需碱直接或在合适的惰性溶剂中接触而得到碱加成盐。衍生自药学上可接受无机碱的盐的实例包括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、三价锰、二价锰、钾、钠、锌等。衍生自药学上可接受有机碱的盐包括以下的盐：伯胺、仲胺和叔胺，包括取代的胺、环胺和天然胺等，如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺(glucamine)、氨基葡糖(glucosamine)、组氨酸、海巴明(hydrabamine)、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙基胺、三甲基胺、三丙基胺、氨丁三醇等。当本发明化合物含有相对碱性功能基时，酸加成盐可由该化合物中性形式与足量所需酸直接或在合适惰性溶剂中接触而得到。药学上可接受酸加成盐的实例包括衍生自无机酸如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、碳酸氢酸、磷酸、磷酸一氢酸、磷酸二氢酸、硫酸、硫酸一氢酸、氢碘酸或亚磷酸等的盐，以及衍生自相对无毒有机酸如乙酸、丙酸、异丁酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等的盐。同样包括氨基酸等的盐如精氨酸盐，及有机酸如葡萄糖醛或半乳糖醛酸等的盐(参见如Berge，S.M.，等人，“Pharmaceutical Salts”，Journal ofPharmaceutical Science，1977，66，1-19.中)。某些具体的本发明化合物同时具有碱性和酸性功能基，使得化合物可转换为碱加成盐或酸加成盐。
化合物的中性形式可通过使其盐与碱或酸接触且以常规方式分离母体化合物而再生。化合物的母体形式与各种盐形式在某些物理性质方面不同，如极性溶剂中的溶解度，但就本发明的目的而言盐形式与化合物的母体形式是等同的。
除盐形式外，本发明还提供化合物的前药形式。如此文所用的术语“前药”意指在生理条件下易于经历化学变化以提供本发明化合物的那些化合物。此外，前药可在离体环境中经化学或生化方法手段转换为本发明化合物。例如，当被置于具有适合的酶或化学试剂的透皮贴剂储库中时，前药可被缓慢转换为本发明化合物。
本发明的前药包括这样的化合物，其中氨基酸残基或含有2个或更多(如2、3或4)氨基酸残基的多肽链通过酰胺或酯键与本发明化合物上的游离氨基、羟基或羧酸基团基共价相连。氨基酸残基包括但不限于20种天然氨基酸，常用三个字母符号命名指代，且同样包括磷酸丝氨酸、磷酸苏氨酸、磷酸酪氨酸、4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链赖氨酸(demosine)、异锁链赖氨酸(isodemosine)、γ-羧基谷氨酸、马尿酸、八氢吲哚-2-羧酸、抑胃酶氨酸(statine)、1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸、青霉胺、鸟氨酸、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、甲基-丙氨酸、对-苯甲酰基苯丙氨酸、苯基甘氨酸、炔丙基甘氨酸、肌氨酸、蛋氨酸砜和叔丁基甘氨酸。
也包括其它类型的前药。例如，本发明化合物的游离羧基可衍生为酰胺或烷基酯。在另一个实例中，包括游离羟基的本发明化合物可通过将羟基转换为例如但不限于磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或磷酰氧基甲氧基羰基等而衍生为前药，如Fleisher,D.等人,(1996)Improved oral drug delivery:solubility limitations overcome bythe use of prodrugs Advanced Drug Delivery Reviews，19:115.中概述。同样包括羟基和氨基的氨基甲酸酯前药，如同羟基的碳酸酯前药、磺酸酯和硫酸酯。还包括将羟基衍生化为(酰氧基)甲基和(酰氧基)乙基醚，其中酰基可为烷基酯，任选被包括但不限于醚、胺和羧酸功能基的基团取代，或其中酰基为前文所述的氨基酸酯。这种类型的前药描述在J.Med.Chem.,(1996),39:10.中。更多具体实例包括醇基上的氢原子被置换为基团如(C1-6)烷酰氧基甲基、1-((C1-6)烷酰氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-6)烷酰氧基)乙基、(C1-6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C1-6)烷酰基、α-氨基(C1-4)烷酰基、芳基酰基和α-氨基酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中每个α-氨基酰基独立地选自天然L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-6)烷基)2或糖基(除去碳水化合物的半缩醛形式的羟基得到的基团)。
前药衍生物的另外实例参见如a)Design of prodrugs,H.Bundgaard编辑(Elsevier,1985)和Methods in Enzymology,Vol.42,p.309-396,K.Widder等人编辑(Academic Press,1985)；b)A Textbook of Drug Design and Development,Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard编辑，H.Bundgaard的第5章“Design and Application ofProdrugs”p.113-191(1991)；c)H.Bundgaard,Advanced Drug Delivery Reviews,8:1-38(1992)；d)H.Bundgaard,等人,Journal of Pharmaceutical Sciences,77:285(1988)；和e)N.Kakeya,等人,Chem.Pharm.Bull.,32:692(1984)。
此外，本发明提供本发明化合物的代谢物。如本文所用，“代谢物”意指特定化合物或其盐经由体内代谢得到的产物。这类产物可例如源自所施用化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、去酯化、酶促剪切等。
代谢物产物典型地如下鉴定：制备本发明化合物的放射性标记的同位素(例如14C或3H)，以可检测剂量(例如大于约0.5mg/kg)胃肠外施用于动物如大鼠、小鼠、豚鼠、猴或人，给予足够时间供代谢发生(通常约30秒至30小时)并从尿、血或其它生物样本中分离其转换产物。这些产物因被标记而易于分离(其余产物通过使用能够结合在代谢物中存活的表位的抗体进行分离)。代谢物结构以常规方式测定，例如MS、LC/MS或NMR分析。通常，代谢物分析以与本领域技术人员熟知的常规药代研究相同的方式进行。代谢物产物，只要以其它方式在体内不被发现，即可用于本发明化合物治疗给药的诊断测定。
某些本发明化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式、包括水合形式存在。通常，溶剂化形式与未溶剂化形式等同，也意欲包括在本发明范围内。某些本发明化合物可以以多晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式对于本发明所考虑的用途而言是等同的，且意欲包括在本发明范围内。
某些本发明化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；外消旋物、非对映异构体、几何异构体、区域异构体和单独的异构体(例如单独的对映异构体)均包含在本发明范围内。
术语“组合物”如本文所用旨在涵盖包括指定量的指定成分的产品，以及直接或间接由指定量的指定成分的组合产生的任何产品。“药学上可接受”意指载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂的其它成分相容并对接受者无害。
术语“治疗(treat)”和“治疗(treatment)”意指治疗性治疗和/或预防性治疗或防止性措施，其中目的是防止或减缓(减轻)不希望的生理变化或障碍，如例如癌症的发展或传播。出于本发明目的，有益的或期望的临床结果包括但不限于减轻症状、减轻疾病或障碍程度、稳定(即不恶化)疾病或障碍状态、延迟或减缓疾病进展、减轻或缓解疾病状态或障碍和缓解(不论部分或全部)、不论是可检测的还是不可检测的。“治疗(Treatment)”还可意指与不接受治疗的预期存活期相比延长的存活期。需要治疗的那些包括已经患有疾病或障碍的那些，以及倾向于具有疾病或障碍的那些，或需要预防疾病或障碍的那些。
术语“治疗有效量”或“有效量”表示本发明化合物的量，其(i)治疗或预防特定疾病、病症或障碍，(ii)减弱、减轻或消除特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状，或(iii)预防或延迟本文所述特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作。对癌症治疗，功效可例如通过评估疾病发展时间(TTP)和/或测定响应率(RR)来测量。
术语“生物利用度”意指施用于患者的给定量药物的系统可利用率(即血/血浆水平)。生物利用度是一个绝对术语，表示从施用剂型到达一般循环的药物的时间(速率)和总量(程度)的量度。
药物组合物及施用
本文提供药物组合物或药剂，包含本发明化合物(或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物、同位素、药学上可接受的盐或前药)和治疗惰性的载体、稀释剂或赋形剂，以及使用本发明化合物制备该组合物和药剂的方法。在一个实例中，本文提供的化合物可通过在环境温度、在适合的pH和所需纯度下与生理上可接受的载体混合而配制为盖伦施用形式，即所述载体在所用剂量和浓度下对接受者无毒。制剂的pH主要取决于具体用途及化合物浓度，但优选处于约3至约8的范围的任何数值。在一个实例中，本文提供的化合物被配制在pH 5的乙酸盐缓冲液中。在另一个实施方案中，本文提供的化合物是无菌的。所述化合物可被储存例如作为固体或无定型组合物、作为冻干制剂或作为水溶液。
以符合良好医学实践的方式配制、给药和施用组合物。在此背景下需考虑的因素包括所治疗的特定障碍、所治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床情况、障碍的起因、药剂递送位置、施用方式和施用方案以及医生从业者熟知的其它因素。在一些实施方案中，待施用的化合物的“有效量”受这些因素限制，且是为所治疗哺乳动物提供治疗效果的抑制RIP1激酶活性必须的最小量。此外，该有效量可低于对正常细胞或哺乳动物整体的有毒量。
在一个实例中，经静脉内或胃肠外施用的本发明化合物的治疗有效量将在每剂范围约0.1至100mg/kg，或约0.1至20mg/kg患者体重每天，或约0.3至15mg/kg/天。
在另一个实施方案中，口服单位剂型如片剂和胶囊优选包含约1至约1000mg(例如1mg、5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、40mg、50mg、100mg、200mg、250mg、400mg、500mg、600mg、700mg、800mg、900mg或1000mg)本发明化合物。在某些实施方案中，日剂量以单次日剂量或以每日2至6次的分剂量或以持续释放形式给药。对于70kg成年人，总日剂量通常为约7mg至约1,400mg。该给药方案可调整以提供最佳治疗响应。化合物可以按每天1至4次方案给药，优选为每日一次或两次。
在一些实施方案中，施用低剂量的本发明化合物以提供治疗益处，同时最小化或预防不良反应。
本发明化合物可采取任意合适方式给药，包括口服、局部(包括颊和舌下)、直肠、阴道、透皮、胃肠外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内和硬膜外和鼻内，且如需局部治疗，也可采用病灶内给药。胃肠外输注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。在具体实施方案中，本文提供化合物是口服施用。在另一些具体实施方案中，本文提供化合物是静脉内施用。
本发明化合物可以以任意便捷的施用形式给药，例如片剂、粉末、胶囊、溶液、分散剂、混悬剂、糖浆、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳剂、贴剂等。这些组合物可含有药物制剂中的常规成分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、填充剂和其它活性剂。
典型的制剂通过混合本发明化合物和载体或赋形剂而制备。合适的载体和赋形剂为本领域技术人员熟知并详述于例如Ansel,Howard C.等人,Ansel’s PharmaceuticalDosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.,等人Remington:The Science and Practice ofPharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；和Rowe,RaymondC.Handbook of Pharmaceutical Excipients.Chicago,Pharmaceutical Press,2005中。制剂也可包括一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、加香剂、调味剂、稀释剂和其它已知添加剂以提供药物(即本发明的化合物或其药物组合物)的优雅外形或有助于药物产品(即药剂)的生产。
合适的载体、稀释剂和赋形剂为本领域技术人员熟知，且包括材料如碳水化合物、蜡、水溶和/或可溶胀聚合物、亲水或疏水材料、明胶、油、溶剂、水等。所用特定载体、稀释剂或赋形剂将取决于本发明化合物所使用的方式和目的。溶剂的选择通常基于本领域内技术人员认可为对哺乳动物施用安全(GRAS)的溶剂。通常，安全的溶剂为无毒含水溶液如水，和其它在水中可溶或混溶的无毒溶剂。合适的水性溶剂包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG400、PEG300)等及其混合物。制剂还可包括一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、加香剂、调味剂和其它已知添加剂以提供药物(即本发明化合物或其药物组合物)的优雅外形或有助于药物产品(即药剂)的生产。
可接受的稀释剂、载体、赋形剂和稳定剂在所用剂量及浓度下对接受者无毒，且包括缓冲剂如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂(如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯己双铵；苯扎氯铵、氯化苄乙铵；苯酚、丁基或苯甲醇；对羟基苯甲酸烷基酯如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯；邻苯二酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇和间甲酚)；低分子量(少于约10残基)多肽；蛋白质，如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水聚合物如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸如甘氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、双糖和其它碳水化合物包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂如EDTA；糖如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子如钠；金属络合物(例如Zn-蛋白络合物)；和/或非离子表面活性剂如TWEENTM、PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。本发明活性药物成分(例如本文提供化合物)也可以例如通过凝聚技术或界面聚合反应被包埋在微囊中，分别例如在胶体药物递送系统(如脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米粒子和纳米胶囊)或在粗乳液(macroemulsion)中的羟甲基纤维素或明胶微囊和聚-(甲基丙烯酸甲酯)微囊。此类技术公开在Remington:The Science and Practice of Pharmacy:Remington the Science andPractice of Pharmacy(2005)第21版，Lippincott Williams&Wilkins,Philidelphia,PA中。
可以制备本发明化合物(例如本文提供化合物)的持续释放制剂。持续释放制剂的合适实例包括固体疏水聚合物的半透性基质，其包含本文提供化合物，该基质可以为成形物品例如薄膜或微囊形式。持续释放基质的实例包括聚酯、水凝胶(如聚(2-羟基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(U.S.专利号3,773,919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸共聚物(Sidman等人,Biopolymers 22:547,1983)、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯(Langer等人，J.Biomed.Mater.Res.15:167,1981)、可降解乳酸-乙醇酸共聚物如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)和聚-D-(-)-3-羟基丁酸(EP133,988A)。持续释放组合物还包括以脂质体方式包埋的化合物，其可以通过本身已知的方法制备(Epstein等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.82:3688,1985；Hwang等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.77:4030,1980；U.S.专利号4,485,045和4,544,545；和EP102,324A)。通常，脂质体是小的(约200-800埃)单层类型，其中脂质含量大于约30mol％胆固醇，该选择比例依据最佳治疗调整。
在一个实例中，本文提供的化合物可通过在环境温度、在适合的pH和所需纯度下与生理上可接受的载体混合而配制成盖伦施用形式，即所述载体在所用剂量和浓度下对接受者无毒。制剂的pH主要取决于具体用途及化合物浓度，但优选处于约3至约8的范围的任何数值。在一个实例中，本文提供的化合物被配制在pH5的乙酸盐缓冲液中。在另一个实施方案中，本文提供的化合物是无菌的。化合物可被储存例如作为固体或无定型组合物、作为冻干制剂或作为水溶液。
本文提供的合适的口服剂型的实例是片剂，其包含约1至约500mg(例如约1mg、5mg、10mg、25mg、30mg、50mg、80mg、100mg、150mg、250mg、300mg和500mg)本发明化合物，混合有合适量的无水乳糖、交联羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和硬脂酸镁。首先将粉末状成分混合在一起，然后与PVP溶液混合。可将所得组合物干燥、制粒、与硬脂酸镁混合并使用常规设备压制成片剂形式。
本发明化合物的制剂(例如本文提供化合物)可以为无菌可注射配制物的形式，如无菌可注射水性或油性混悬液。该混悬液可依据本领域已知方法、使用那些合适的前文所述的分散剂或润湿剂和悬浮剂配制。无菌可注射制剂也可以为在无毒胃肠外可接受稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液，如在1,3-丁二醇中的溶液，或制成冻干粉末。可以使用的可接受媒介物和溶剂有水、Ringer氏液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌固定油可通常用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何温和固定油(bland fixed oil)，包括合成甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸也可用于制备可注射配制物。
可以与载体材料组合以生产单一剂型的活性成分的量将依据所治疗宿主及特定给药方式而改变。例如，用于人类口服的时间释放制剂可含有约1至1000mg活性材料，该活性成分与适当便捷量的载体材料掺和，其中载体的量可为总组合物约5至约95％(重量:重量)。可将药物组合物制备成以提供易于测量的施用量。例如，用于静脉内输液的水溶液的每毫升溶液可含有约3至500μg活性成分，以可以实现以约30mL/hr的速率输注适合的体积。
适于胃肠外施用的制剂包括水性和非水性无菌注射溶液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期接受者血液等渗的溶质；以及水性和非水性无菌混悬液，其可含有悬浮剂和增稠剂。
制剂可包装在单剂或多剂容器中，如密封安瓿瓶和小瓶，且可保存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需在使用前立即加入注射用无菌液体载体如水。临时注射溶液和悬液可由前述种类的无菌粉末、颗粒和片剂制备。
因此，实施方案包括药物组合物，其包含本文提供的化合物或其药学上可接受的盐。进一步的实施方案包括药物组合物，其包含本文提供的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或赋形剂。
当结合靶点位于脑中时，本发明的某些实施方案提供本文提供的化合物以穿过血脑屏障。在这些实施方案中，本文提供的化合物显示出作为神经疾病的潜在治疗的足够的脑渗透。在一些实施方案中，脑渗透通过评价在啮齿动物中体内药代动力学研究测量的游离脑/血浆比(Bu/Pu)或本领域技术人员已知的其它方法来评估(参见例如Liu,x.等人，J.Pharmacol.Exp.Therap.,325:349-56,2008)。
某些神经疾病与血脑-屏障的渗透性增加有关，使得本文提供的化合物可被容易地引入脑中。当血脑-屏障保持完整时，存在若干本领域已知的方法以运输分子通过所述血脑-屏障，包括但不限于物理方法、基于脂质的方法及基于受体和通道的方法。运输本文提供的化合物通过血脑-屏障的物理方法包括但不限于完全绕开血脑-屏障或通过在血脑-屏障中制造开口。
绕开的方法包括但不限于直接注射入大脑(参见例如Papanastassiou等人，GeneTherapy 9:398-406,2002)、间质输注/对流增强递送(参见例如Bobo等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.91:2076-2080,1994)和将递送装置植入脑中(参见例如Gill等人，Nature Med.9:589-595,2003；和Gliadel WafersTM,Guildford)。
在屏障中产生开口的方法包括但不限于超声(参见例如U.S.专利公开号2002/0038086)、渗透压(例如通过施用高渗甘露醇(Neuwelt,E.A.,Implication of the Blood-Brain Barrier and its Manipulation,第1卷和第2卷,Plenum Press,N.Y.,1989))以及通过例如缓激肽或透化剂A-7的透化(参见例如U.S.专利号5,112,596、5,268,164、5,506,206和5,686,416)。
运输本文提供化合物通过血脑-屏障的基于脂质的方法包括但不限于将本文提供化合物包封在脂质体中，所述脂质体偶联至与血脑-屏障血管内皮上受体结合的抗体结合片段(参见例如U.S.专利公开号2002/0025313)，以及将本文提供化合物包衣在低密度脂蛋白颗粒(参见例如U.S.专利公开号2004/0204354)或载脂蛋白E中(参见例如U.S.专利公开号2004/0131692)。
运输本文提供化合物通过血脑-屏障的基于受体和通道的方法包括但不限于使用糖皮质激素阻断剂增加血脑-屏障的渗透性(参见例如U.S.专利公开号2002/0065259、2003/0162695和2005/0124533)；激活钾通道(参见例如U.S.专利公开号2005/0089473)、抑制ABC药物转运蛋白(参见例如U.S.专利公开号2003/0073713)；以转铁蛋白包被本文提供化合物并调节一种或多种转铁蛋白受体的活性(参见例如U.S.专利公开号2003/0129186)，以及使抗体阳离子化(参见例如U.S.专利号5,004,697)。
对于脑内使用，在某些实施方案中，所述化合物可通过输注连续施用至CNS流体贮库中，尽管推注是可接受的。所述抑制剂可施用至脑室中或以其它方式引入CNS或脊髓液中。施用可采取使用留置导管和连续施用手段如泵进行，或施用可通过移植、例如脑内移植缓释载体。更具体地，所述抑制剂可通过长期植入的套管注射或在渗透性微型泵的帮助下长期注入。可以使用皮下泵，通过小管输送蛋白质至脑室。高度精密的泵可通过皮肤重新填充且其递送速率无需外科手术即可设置。涉及皮下泵设备或通过完全植入药物输送系统的连续脑室内输注的合适的施用方案和输送系统的实例是用于向阿尔兹海默症患者和帕金森症动物模型施用多巴胺、多巴胺激动剂和胆碱能激动剂的那些，如Harbaugh,J.NeuralTransm.Suppl.24:271,1987；和DeYebenes等人，Mov.Disord.2:143,1987中描述。
适应症及治疗方法
本发明化合物抑制RIP1激酶活性。由此，本发明化合物可用于治疗由该途径介导和与炎症和/或坏死性细胞死亡相关的疾病和障碍。本发明化合物因此可用于治疗或预防选自以下的疾病或障碍：肠激惹障碍(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肾、肝和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎、视网膜变性、慢性肾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和慢性阻塞性肺病(COPD)。
在另一个实施方案中，本发明化合物可用于治疗上述疾病和障碍的一种或多种症状。在一些实施方案中，所述疾病或障碍是肠激惹障碍。在一些实施方案中，所述疾病或障碍是肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎或溃疡性结肠炎。在一些实施方案中，所述疾病或障碍是肾、肝和肺的缺血再灌注损伤。在一些实施方案中，所述疾病或障碍是慢性肾病。在一些实施方案中，所述疾病或障碍是急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。在一些实施方案中，所述疾病或障碍是慢性阻塞性肺病(COPD)。
在一些实施方案中，所治疗的疾病或障碍选自炎性肠道疾病(包括局限性回肠炎和溃疡性结肠炎)、银屑病、视网膜脱离、色素性视网膜炎、黄斑变性、胰腺炎、特应性皮炎、关节炎(包括类风湿性关节炎、骨关节炎、椎关节炎、痛风、系统性幼年型特发性关节炎(SoJIA)、银屑病关节炎)、系统性红斑狼疮(SLE)、舍格伦综合征、系统性硬皮病、抗磷脂综合征(APS)、血管炎、肝损伤/疾病(非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪性肝炎、自身免疫性肝炎自身免疫性肝胆疾病、原发性硬化性胆管炎(PSC)、对乙酰氨基酚毒性、肝毒性)、肾损伤/伤害(肾炎、肾移植、手术、施用肾毒性药物例如顺铂、急性肾损伤(AKI))、乳糜泻、自身免疫性特发性血小板减少性紫癜、移植排斥、实体器官缺血再灌注损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、脑血管意外(CVA、中风)、心肌梗死(MI)、动脉粥样硬化、亨廷顿舞蹈病、阿尔兹海默症、帕金森病、肌萎缩侧索硬化(ALS)、脊髓性肌萎缩(SMA)、变应性疾病(包括哮喘和特应性皮炎)、多发性硬化、I型糖尿病、韦格纳肉芽肿、肺结节病、贝赫切特病、白细胞介素-1转换酶(ICE，也称为caspase-1)相关热症(fever syndrome)、慢性阻塞性肺病(COPD)、肿瘤坏死因子受体相关周期综合征(TRAPS)、牙周炎、NEMO缺乏综合征(F-κ-B必需调节基因(也称为IKKγ或IKKG)缺乏综合征)、HOIL-1缺乏症((也称为RBCKl)血红素氧化IRP2泛素连接酶-1缺乏症)、线性泛素链组装复合物(linear ubiquitin chain assembly complex)(LUBAC)缺乏综合征、血液和实体器官恶性肿瘤、细菌感染和病毒性感染(如结核病和流感)和溶酶体贮积症(尤其是戈谢病，并且包括GM2、神经节苷脂症、α-甘露糖苷贮积症、天冬氨酰葡萄糖胺尿、胆固醇酯贮积病、慢性己糖胺酶A缺乏症、胱氨酸贮积症、达农病、法布里病、法伯病、岩藻糖苷贮积症、半乳糖唾液酸贮积病、GM1神经节苷脂症、粘脂贮积症、婴儿游离唾液酸贮积症、幼年型己糖胺酶A缺乏症、克拉伯病、溶酶体酸性脂肪酶缺乏症、异染色性脑白质营养不良、粘多糖病症、多种硫酸酯酶缺乏症、尼皮病、神经细胞蜡样质脂褐素病、庞皮病、致密性成骨不全、桑德霍夫病、Schindler病、唾液酸贮积病、家族黑矇性白痴和沃尔曼病)。
本文还提供本发明化合物在治疗中的用途。在一些实施方案中，本文提供本发明化合物在治疗或预防上述疾病和障碍中的用途。本文还提供本发明化合物在制备用于治疗或预防上述疾病和障碍的药物中的用途。
本文还提供在需要该疗法的哺乳动物中治疗疾病或障碍的方法，所述疾病或障碍选自肠激惹障碍(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肝、肾和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎、视网膜变性、慢性肾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和慢性阻塞性肺病(COPD)，其中所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的本文提供的化合物或其药学上可接受的盐。
本文还提供在需要该疗法的哺乳动物中治疗疾病或障碍的症状的方法，所述疾病或障碍选自肠激惹障碍(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肾、肝和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎、视网膜变性、慢性肾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和慢性阻塞性肺病(COPD)，其中所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的本文提供的化合物或其药学上可接受的盐。
本文还提供在需要该疗法的哺乳动物中治疗疾病或障碍的方法，所述疾病或障碍选自肠激惹障碍(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、局限性回肠炎和溃疡性结肠炎，其中所述方法包括向所述哺乳动物口服施用治疗有效量的本文提供的化合物或其药学上可接受的盐，作为口服可接受的药物组合物。
组合疗法
在本文提供的疾病和障碍的治疗中，本发明化合物可与一种或多种本发明其它化合物或一种或多种其它治疗剂组合作为其任意组合。如，本发明化合物可与其它熟知可用于治疗选自前文所述那些的疾病或障碍的治疗剂组合，同时、相继或分开施用。
在一些实施方案中，本文提供的化合物可与WO2016/027253中所述另一种治疗活性剂组合。在这些实施方案中，WO2016/027253所述组合中抑制RIP1激酶的化合物被本公开内容所提供的化合物置换。
如本文所用的“组合”意指一种或多种本发明化合物和一种或多种本发明其它化合物或一种或多种另外的治疗剂的任意混合物或排列。除非上下文另有清楚说明，“组合”可包括同时或相继递送本发明化合物及一种或多种治疗剂。除非上下文另有清楚说明，“组合”可包括本发明化合物与另一种治疗剂的剂型。除非上下文另有清楚说明，“组合”可包括本发明化合物与另一种治疗剂的施用途径。除非上下文另有清楚说明，“组合”可包括本发明化合物与另一种治疗剂的制剂。剂型、施用途径和药物组合物包括但不限于本文所述的那些。
实施例
通过参考以下实施例将更好地理解本发明。然而，它们不应被解释为限制本发明的范围。
这些实施例用于为技术人员提供制备和使用本发明化合物、组合物和方法的指导。虽然描述了本发明的特定实施方案，技术人员将理解，在不脱离本发明的精神和范围的情况下可以进行各种改变和修改。
所述实施例中的化学反应可易于调整以制备一些本发明其它化合物，且制备本发明化合物的备选方法被视为在本发明范围内。例如，根据本发明的非示例化合物的合成可通过本领域技术人员显而易见的修改而成功进行，例如适当保护干扰基团、使用本领域已知的其它合适试剂，例如使用除本文所述外本领域熟知的其它合适试剂保护干扰基团，和/或对反应条件进行常规修改。
在下面的实施例中，除非另有说明，所有的温度均以摄氏度表示。市售试剂购自如Aldrich Chemical Company,Lancaster,TCI或Maybridge等供应商，且除非另有说明，否则无需进一步纯化即使用。下述反应通常在氮气或氩气的正压力下或用干燥管(除非另有说明)在无水溶剂中完成，反应烧瓶典型地装有橡胶隔垫以通过注射器引入底物和试剂。将玻璃器皿在烘箱干燥和/或加热干燥。使用三甲基硅烷(TMS)或残留的非氘代溶剂峰作为参考标准，在氚代CDCl3、d6-DMSO、CH3OD或d6-丙酮溶剂溶液(以ppm为单位报告)中获得1H NMR光谱。当报告峰多重性时，使用以下缩写：s(单峰)、d(双峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、br(宽峰)、dd(双重双峰)、dt(双重三重峰)。当给定时，耦合常数以Hz(Hertz)为单位计。
在下面的实施例中，LCMS方法依据以下条件进行10或30分钟：
Agilent 10分钟LCMS方法：在Agilent 1290UHPLC偶联以ESI为电离源的AgilentMSD(6140)质谱仪上进行实验。LC分离使用Phenomenex×B-C18，1.7mm，50×2.1mm柱，流速为0.4ml/min。溶剂A是含有0.1％FA的水且溶剂B是含有0.1％FA的乙腈。梯度为历经7分钟2-98％溶剂B并在平衡1.5分钟后保持98％B 1.5分钟。LC柱温度是40℃。在220nm和254nm处收集UV吸收度，同时质谱全扫描应用于所有实验中。
Agilent 30分钟LCMS方法：在Agilent 1100HPLC偶联以ESI为电离源的AgilentMSD质谱仪上进行实验。LC分离使用Agilent Eclipse×DB-C18，3.5mm，100×3.0mm柱，流速为0.7ml/min。溶剂A是含有0.1％FA的水且溶剂B是含有0.1％FA的乙腈。梯度为历经25.5分钟2-98％溶剂B并在平衡1.5分钟后保持98％B 2.5分钟。在220nm和254nm处收集UV吸收度，同时质谱全扫描应用于所有实验中。
所有用于描述试剂、反应条件或设备的缩写旨在与以下缩写列表中列出的定义一致。本发明的具体化合物名称通常使用ChemDraw命名程序的结构命名功能获得。
缩写
ACN 乙腈
Boc 叔-丁氧羰基
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
HPLC 高压液相色谱
LCMS 液相色谱质谱仪
RP 反相
RT或RT 保留时间
SEM 2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基
THF 四氢呋喃
实施例#1
Figure BDA0002094593770000281
1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000284
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000282
步骤1：1-环丙基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯
将1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯(50mg，0.28mmol)、2,2’-联吡啶(44mg，0.28mmol)、碳酸钠(60mg，0.56mmol)、环丙基硼酸(48mg，0.56mmol)和双乙酸铜(51mg，0.28mmol)在1,2-二氯乙烷(10mL)中的混合物在70℃搅拌4小时。将混合物倒入水(10mL)中并以二氯甲烷萃取(3×20mL)。将合并的有机层以水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物以制备型TLC(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状的1-环丙基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯(50mg，82％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000283
步骤2：1-环丙基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸
向1-环丙基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯(110mg，0.5mmol)在四氢呋喃(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入一水合氢氧化锂(212mg，5.1mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时后减压浓缩。加入盐酸(2N)将残留物调至pH＝5。将所得混合物以乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色固体粗1-环丙基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸(25mg，24％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000291
步骤3：1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000294
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺
将1-环丙基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸(25mg，0.12mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(28mg，0.15mmol)、1-羟基苯并三唑(20mg，0.15mmol)和(S)-3-氨基-5-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]氧氮杂
Figure BDA0002094593770000295
-4(5H)-酮(28mg，0.15mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中的混合物在25℃搅拌16小时，然后减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈30-60％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000296
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺(8.7mg，19％)。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.10(s,1H),8.34(s,1H),8.26(s,1H),7.49–7.42(m,1H),7.38–7.30(m,2H),7.28–7.23(m,1H),5.10–5.05(m,1H),4.74–4.67(m,1H),4.45–4.42(m,1H),3.79–3.76(m,1H),3.44(s,3H),1.24–1.21(m,4H).LCMS RT＝0.822min，m/z＝378.0[M+H]+。LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间：0.822min，ESI+实测值[M+H]＝378.0。
实施例#2
Figure BDA0002094593770000292
1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000297
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000293
步骤1：三氟甲磺酸2,2-二氟丙基酯
在-50℃向2,2-二氟丙醇(500mg，5.2mmol)和三乙胺(632mg，6.2mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入三氟甲磺酸酐(1.76g，6.2mmol)。将反应混合物在-50℃搅拌2小时，然后以二氯甲烷(20mL)稀释。将有机层用水(10mL)、1M柠檬酸(10mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩(0℃水浴)，得到粉色油状粗三氟甲磺酸2,2-二氟丙基酯(600mg，51％)，不经进一步纯化即用于下一步。
Figure BDA0002094593770000301
步骤2：1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯
在室温向1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯(50mg，0.28mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(138mg，0.42mmol)和三氟甲磺酸2,2-二氟丙基酯(129mg，0.56mmol)。将混合物在100℃搅拌2小时后减压浓缩。使残留物在乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)中分配。将分离的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色油状粗1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯(22mg，31％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.15(s,1H)，8.47(s,1H)，8.43(d,J＝14.8Hz,1H)，5.01(t,J＝13.2Hz,2H)，4.02(s,3H)，1.74-1.63(m,3H)。
Figure BDA0002094593770000302
步骤3：1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸
向1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯(192mg，0.75mmol)在四氢呋喃(10mL)和水(4mL)中的溶液中加入氢氧化锂(180mg，7.52mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，然后减压浓缩。将残留物通过加入盐酸(2N)调至pH＝5。将所得混合物以二氯甲烷(3×20mL)萃取。合并的有机层以水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到白色固体1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸(75mg，41％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000303
步骤4：1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000304
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺
在30℃将(3S)-3-氨基-5-甲基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000305
-4-酮(14mg，0.07mmol)、1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸(17mg，0.07mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(16mg，0.08mmol)和1-羟基苯并三唑(11mg，0.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物搅拌12小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈40-70％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000313
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺(15.0mg，51％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.13(s,1H)，8.38(s,1H)，8.28(s,1H)，7.47–7.41(m,1H)，7.35–7.29(m,2H)，7.27–7.20(m,1H)，5.07–5.05(m,1H)，4.94(t,J＝13.2Hz,2H)，4.70–4.66(m,1H)，4.42–4.39(m，1H)，3.44(s，3H)，1.65(t，J＝18.8Hz，3H)。LCMS RT＝1.858min，m/z＝416.1[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.858min，ESI+实测值[M+H]＝416.1。
实施例#3
Figure BDA0002094593770000311
1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000314
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000312
步骤1：6-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶
向6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(2.0g，12.9mmol)、碳酸钾(3.6g，25.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物中加入2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(2.6g，15.5mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时并倒入水(100mL)中。将所得混合物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层以水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物以柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状6-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(2.8g，76％)。LCMSRT＝2.112min，m/z＝285.2[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2分钟)保留时间2.112min，ESI+实测值[M+H]＝285.2.
Figure BDA0002094593770000321
步骤2：
1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯
将6-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(2.80g，9.83mmol)、乙酸钯(II)(0.44g，1.97mmol)、1,3-双(二苯基膦基)丙烷(0.81g，1.97mmol)、三乙胺(13.63mL，98.31mmol)在1-丁醇(20mL)和甲醇(10mL)中的混合物在120℃、CO(3.5MPa)氛围中搅拌24小时。冷却后，将反应混合物过滤并将滤液减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(750mg，25％)和黄色油状1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸丁酯(1.10g，32％)。LCMS RT＝0.861min，m/z＝308.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.861min，ESI+实测值[M+H]＝308.9。
Figure BDA0002094593770000322
步骤3：1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯
在0℃向1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(800mg，2.59mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中加入2,2,2-三氟乙酸(3.0mL)。将混合物在0℃搅拌2小时，并在减压下移除溶剂。将残留物溶解于乙酸乙酯(50mL)中，以饱和碳酸钾水溶液(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到浅黄色固体粗1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(300mg，65％)，在下一步中按原样使用。
LCMS RT＝0.772min，m/z＝179.1[M+H]+。
LCMS(0至30％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2分钟)保留时间0.772min，ESI+实测值[M+H]＝179.1。
Figure BDA0002094593770000331
步骤4：1-(2,2-二氟丙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯
向1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(200mg，1.12mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的搅拌溶液中加入碳酸铯(1.10g，3.37mmol)和三氟甲磺酸2,2-二氟丙基酯(1.28g，5.61mmol)。将反应混合物在80℃搅拌3小时并倒入水(20mL)中。将所得混合物以乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层以盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物以柱色谱(硅胶，100-200目，0至30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色固体1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(120mg，42％)。LCMS RT＝0.538min，m/z＝256.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时1.5分钟)保留时间0.538min，ESI+实测值[M+H]＝256.9。
Figure BDA0002094593770000332
步骤5：1-(2,2-二氟丙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸
将1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(115mg，0.45mmol)和一水合氢氧化锂(28mg，0.67mmol)在四氢呋喃(6mL)和水(3mL)中的混合物在25℃搅拌3小时。将混合物减压浓缩。向残留物加入盐酸(2N)调至pH＝5。将所得混合物用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。合并的有机层以水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到浅黄色固体粗1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸(70mg，64％)，在下一步中按原样使用。LCMSRT＝0.804min，m/z＝243.2[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2分钟)保留时间0.804min，ESI+实测值[M+H]＝243.2。
Figure BDA0002094593770000341
步骤6：1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2，3-二氢-1，5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000344
-3-基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-6-甲酰胺
将1-(2,2-二氟丙基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸(30mg，0.12mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(36mg，0.19mmol)、1-羟基苯并三唑(25mg，0.19mmol)和(3S)-3-氨基-5-甲基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000345
-4-酮(24mg，0.12mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)中的混合物在25℃搅拌4小时，然后减压蒸发。将残留物经RP-HPLC(乙腈25-55％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000346
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺(13.0mg，25％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.43(s,1H)，8.47(s,1H)，7.48–7.28(m,4H)，5.10–5.01(m,3H)，4.74–4.69(m,1H)，4.51–4.45(m,1H)，3.46(s,3H)，1.71(t,J＝18.8Hz,3H)。
LCMS RT＝1.625min，m/z＝417.1[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.625min，ESI+实测值[M+H]＝417.1。
实施例#4
Figure BDA0002094593770000342
1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000347
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000343
步骤1：6-氯-1-环丙基-吡唑并[3,4-d]嘧啶
将6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(300mg，1.94mmol)、环丙基硼酸(333mg，3.88mmol)、乙酸酮(II)(353mg，1.94mmol)、2,2’-联吡啶(303mg，1.94mmol)和碳酸钠(411mg，3.88mmol)在1,2-二氯乙烷(20mL)中的混合物在70℃搅拌4小时。将反应混合物用水(10mL)稀释并以二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层以水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物以柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体6-氯-1-环丙基-吡唑并[3,4-d]嘧啶(70mg，19％)。LCMS RT＝0.631min，m/z＝194.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间0.631min，ESI+实测值[M+H]＝194.9。
Figure BDA0002094593770000351
步骤2：1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲腈
向6-氯-1-环丙基-吡唑并[3,4-d]嘧啶(70mg，0.36mmol)在二甲基亚砜(3mL)中的搅拌溶液中加入1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(40mg，0.36mmol)和氰化钠(35mg，0.72mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时并用水(10mL)稀释。将所得混合物用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层以水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并在压力下浓缩，得到黄色油状粗1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲腈(60mg，90％)。LCMS RT＝0.674min，m/z＝185.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间0.674min，ESI+实测值[M+H]＝185.9。
Figure BDA0002094593770000352
步骤3：1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯
向1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲腈(50mg，0.27mmol)在甲醇(2mL)中的搅拌溶液中加入盐酸(4N的甲醇溶液，2.5mL，10.0mmol)。将混合物在70℃搅拌4小时并减压浓缩，得到白色油状粗1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(50mg，85％)。LCMS RT＝0.574min，m/z＝219.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间0.574min，ESI+实测值[M+H]＝219.1。
Figure BDA0002094593770000353
步骤4：1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸
向1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(50mg，0.23mmol)在四氢呋喃(5mL)和水(1mL)中的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(48mg，1.15mmol)。将混合物在25℃搅拌2小时并减压浓缩，得到黄色固体粗1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸(50mg，99％)。
Figure BDA0002094593770000361
步骤5：1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000363
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺
将1-环丙基吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酸(30mg，0.15mmol)、(3S)-3-氨基-5-甲基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000364
-4-酮(31mg，0.16mmol)、1-羟基苯并三唑(22mg，0.16mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(31mg，0.16mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在25℃搅拌15小时并减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈25-55％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000365
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺(10mg，17％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.34(s,1H)，8.31(s,1H)，7.49–7.43(m,1H)，7.37–7.30(m,2H)，7.30–7.24(m,1H)，5.08–5.06(m,1H)，4.74–4.70(m,1H)，4.49–4.43(m,1H)，4.15–4.10(m,1H)，3.45(s,3H)，1.40–1.31(m,2H)，1.26–1.18(m,2H)。LCMS RT＝0.785min，m/z＝379.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间0.785min，ESI+实测值[M+H]＝379.0。
实施例#5
Figure BDA0002094593770000362
4-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000366
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000371
步骤1：3-溴-1-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙基)-1H-吡唑
向3-溴-1H-吡唑(5.0g，34.0mmol)在乙腈(100mL)中的溶液中加入碳酸铯(16.6g，51.0mmol)和2-(2-溴乙氧基)四氢-2h-吡喃(7.5g，35.7mmol)。将混合物在30℃搅拌2小时并加入水(80mL)猝灭。将所得混合物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层以水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物用柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状3-溴-1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑(5.5g，59％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40(d,J＝2.4Hz,1H)，6.24(d,J＝1.2Hz,1H)，4.55–4.29(m,1H)，4.30–4.22(m,2H)，4.06–4.02(m,1H)，3.75–3.68(m,1H)，3.65–3.60(m,1H)，3.46–3.45(m,1H)，1.76–1.49(m,6H)。
Figure BDA0002094593770000372
步骤2：(3-溴-1-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙基)-1H-吡唑-5-基)(苯基)甲醇
在-78℃向二异丙基氨基锂(10.9mL，21.8mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液中加入含3-溴-1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑(4.0g，14.5mmol)的四氢呋喃(2mL)。将所得混合物在-78℃搅拌30分钟并加入含苯甲醛(1.8g，17.5mmol)的四氢呋喃(2mL)。允许反应混合物历时18个小时升至室温并加入饱和氯化铵水溶液(20mL)猝灭。将混合物以乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层以水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，10至80％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到无色油状[5-溴-2-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-3-基]-苯基-甲醇(3.5g，63％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000373
步骤3：2-溴-4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪
向[5-溴-2-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-3-基]-苯基-甲醇(3.5g，9.18mmol)溶液中加入对甲苯磺酸(870mg，5.05mmol)。将反应混合物加热回流5分钟并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到无色油状2-溴-4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪(1.1g，43％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43–7.34(m,5H)，5.83(d,J＝1.0Hz,1H)，5.71(s,1H)，4.36–4.28(m,2H)，4.24–4.17(m,1H)，4.15–4.08(m,1H)。
Figure BDA0002094593770000381
步骤4：4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸丁酯
将2-溴-4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪(110mg，0.39mmol)、乙酸钯(II)(9mg，0.04mmol)、1,3-双(二苯基膦基)丙烷(16mg，0.04mmol)和三乙胺(0.55mL，3.94mmol)在1-丁醇(5mL)中的混合物在100℃、一氧化碳氛围下(3.2Mpa)搅拌48小时。将混合物过滤并将滤液减压浓缩。将残留物用制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯＝3:1，Rf＝0.3)纯化，得到4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸丁酯(50mg，42％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000382
步骤5：4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸
向4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸丁酯(50mg，0.17mmol)在四氢呋喃(4mL)/水(2mL)中的溶液中加入一水合氢氧化锂(50mg，1.2mmol)。将反应混合物在30℃搅拌12小时并随后减压浓缩。将水性残留物用水(10mL)稀释并加入盐酸(1N)调至pH＝5。将所得混合物用二氯甲烷(3×10mL)萃取。将合并的有机层减压浓缩，得到白色固体粗4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸(25mg，62％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMS RT＝0.867min，m/z＝245.1[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0分钟)保留时间0.867min，ESI+实测值[M+H]＝245.1。
步骤6：4-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000383
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺
将(3S)-3-氨基-7,9-二氟-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000393
-2-酮(10mg，0.05mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(11mg，0.06mmol)、1-羟基苯并三唑(8mg，0.06mmol)和4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸(12mg，0.05mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在30℃搅拌15小时。将混合物减压浓缩并将残留物用RP-HPLC(乙腈38-48％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体4-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000394
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺(6mg，29％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.37(s,5H)，7.02–6.96(m,2H)，6.18(s,1H)，5.80(s,1H)，4.53(dd,J＝8.0,11.6Hz,1H)，4.40–4.27(m,3H)，4.21–4.14(m,1H)，2.98–2.94(m,1H)，2.83–2.78(m,1H)，2.62–2.59(m,1H)，2.23–2.15(m,1H)。LCMS RT＝1.838min，m/z＝439.1[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.838min，ESI+实测值[M+H]＝439.1。
实施例#6
Figure BDA0002094593770000391
4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000395
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺和
(4S)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000396
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000392
步骤1：4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000397
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺
将(3S)-3-氨基-5-甲基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000398
-4-酮(24mg，0.13mmol)、1-羟基苯并三唑(17mg，0.13mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(24mg，0.13mmol)和4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酸(31mg，0.13mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌3小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈35-65％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000402
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺(18.1mg，32％)。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ7.40–7.37(m,1H)，7.34(s,5H)，7.29–7.25(m,2H)，7.20–7.17(m,1H)，6.15(s,1H)，5.77(s,1H)，4.54–4.50(m,1H)，4.37–4.33(m,2H)，4.31–4.21(m,2H)，4.21–4.08(m,2H)，3.37(s,3H)。LCMS RT＝1.889min，m/z＝419.1[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.889min，ESI+实测值[M+H]＝419.1。
Figure BDA0002094593770000401
步骤2：(4S)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000403
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺
将外消旋N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000404
-3-基]-4-苯基-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺(60mg，0.14mmol)通过手性SFC分离，得到任意指定的：
棕色固体(4S)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000405
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺(峰1，保留时间＝3.856min)(17.4mg，29％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.43–7.40(m,1H)，7.37(s,5H)，7.33–7.26(m,2H)，7.23–7.19(m,1H)，6.18(s,1H)，5.80(s,1H)，4.97–4.94(m,1H)，4.57–4.53(m,1H)，4.41–4.34(m,3H)，4.32–4.26(m,1H)，4.21–4.14(m,1H)，3.40(s,3H)。LCMS RT＝1.899min，m/z＝419.2[M+H]+
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.899min，ESI+实测值[M+H]＝419.1。
SFC条件：柱：Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)；梯度：4.5分钟内B从5％至40％并保持40％2.5min，之后保持B 5％1分钟；流速：2.8mL/min；柱温：40℃。
实施例#7
Figure BDA0002094593770000411
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000415
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000412
步骤1：4-氯-2-(2-氟苯基)丁酸
在-78℃向2-(2-氟苯基)乙酸(10.0g，64.9mmol)在四氢呋喃(300mL)中的搅拌溶液中逐滴加入正丁基锂(2.5M的己烷溶液，51.9mL，129.8mmol)。将所得混合物在-78℃搅拌20分钟并在0℃搅拌1小时，然后加入1-溴-2-氯乙烷(5.59mL，64.9mmol)。允许反应混合物历时15个小时升至25℃并加入盐酸(1N，100mL)猝灭。将混合物用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机层以盐水(200mL)洗涤并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，二氯甲烷)纯化，得到黄色油状4-氯-2-(2-氟苯基)丁酸(9.5g，68％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.41–7.24(m,2H)，7.21–6.98(m,2H)，4.18–4.08(m,1H)，3.63–3.55(m,1H)，3.46–3.38(m,1H)，2.58–2.47(m,1H)，2.25–2.10(m,1H)。
Figure BDA0002094593770000413
步骤2：4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰氯
向4-氯-2-(2-氟苯基)丁酸(1.0g，4.62mmol)在二氯甲烷(6mL)中的混合物中逐滴加入一滴N,N-二甲基甲酰胺和乙二酰氯(1.97mL，23.2mmol)。将混合物在25℃搅拌1.5小时并减压浓缩(低于30℃)，得到黄色油状粗4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰氯(1.08g，99％)，不经进一步纯化即用于下一步。
Figure BDA0002094593770000414
步骤3：2-(4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰基)肼甲酸叔丁酯
在0℃向三乙胺(0.81mL，13.78mmol)和肼甲酸叔丁酯(1.21g，9.19mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中加入含4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰氯(1.08g，4.59mmol)的四氢呋喃(3mL)。将所得混合物在0℃搅拌2小时，随后用水(150mL)和乙酸乙酯(200mL)稀释。将分离的有机层用1N盐酸(2×30mL)和盐水(30mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100–200目，0至4％甲醇的二氯甲烷溶液)纯化，得到黄色油状2-(4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰基)肼甲酸叔丁酯(1.07g，70％)。LCMS RT＝0.741min，m/z＝230.8[M-100+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.741min，ESI+实测值[M-100+H]＝230.8。
Figure BDA0002094593770000421
步骤4：4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰肼
向N-[[4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰基]氨基]氨基甲酸叔丁基酯(1.07g，3.2mmol)在乙酸乙酯(2.0mL)中的溶液中加入盐酸(4.0N的乙酸乙酯溶液，10.0mL，40.0mmol)。将混合物搅拌1.5小时并减压浓缩。将残留物用乙酸乙酯(60mL)稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤，以硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色油状粗4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰肼(740mg，100％)。LCMS RT＝0.591min，m/z＝230.8[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.591min，ESI+实测值[M+H]＝230.8。
Figure BDA0002094593770000422
步骤5：(Z)-2-氨基-2-(2-(4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰基)亚肼基)乙酸乙酯
向4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰肼(746mg，3.23mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中加入2-乙氧基-2-亚氨基-乙酸乙酯(469mg，3.23mmol)。将混合物在25℃搅拌2小时，随后过滤。将固体真空干燥，得到白色固体粗(Z)-2-氨基-2-(2-(4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰基)亚肼基)乙酸乙酯(650mg，61％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMS RT＝0.786min，m/z＝329.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.786min，ESI+实测值[M+H]＝329.9。
Figure BDA0002094593770000431
步骤6：5-(3-氯-1-(2-氟苯基)丙基)-1H-1，2，4-三唑-3-甲酸乙酯
将(2E)-2-氨基-2-[[4-氯-2-(2-氟苯基)丁酰基]亚肼基]乙酸乙酯(650mg，1.97mmol)和三氯氧磷(8.0mL，85.57mmol)的混合物在120℃搅拌1.5小时并随后加入水(50mL)猝灭。将所得混合物以乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到无色油状粗5-[3-氯-1-(2-氟苯基)丙基]-1H-1，2，4-三唑-3-甲酸乙酯(614mg，100％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMS RT＝0.716min，m/z＝311.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.716min，ESI+实测值[M+H]＝311.9。
Figure BDA0002094593770000432
步骤7：7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
向5-[3-氯-1-(2-氟苯基)丙基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸乙酯(614mg，1.97mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中的溶液中加入碳酸钾(272mg，1.97mmol)。将反应混合物在25℃搅拌15小时并过滤。将滤液减压浓缩并将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至3％甲醇的二氯甲烷溶液)纯化，得到黄色油状7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(450mg，83％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.41–7.25(m,2H)，7.22–7.08(m,2H)，4.76–4.72(m,1H)，4.49–4.28(m,4H)，3.38–3.33(m,1H)，2.84–2.66(m,1H)，1.38(t,J＝7.2Hz,3H)。
Figure BDA0002094593770000433
步骤8：7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸
向7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(450mg，1.63mmol)和一水合氢氧化锂(141mg，3.37mmol)在四氢呋喃(30mL)/水(7mL)中的混合物在25℃搅拌2小时并减压浓缩。将水性残留物用水(10mL)稀释并加入1N HCl调至pH＝5。将所得混合物用二氯甲烷(4×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(200mg，50％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMSRT＝0.658min，m/z＝247.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.658min，ESI+实测值[M+H]＝247.9。
步骤9：(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000441
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将1-羟基苯并三唑(11mg，0.08mmol)、(6S)-6-氨基-4-甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000442
-5-酮(73mg，0.40mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(116mg，0.61mmol)和7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(100mg，0.40mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在20℃搅拌15小时。将混合物减压浓缩并将残留物经制备型TLC(二氯甲烷:甲醇＝20:1)纯化，得到7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000443
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(50mg，30％)。
将上述外消旋材料进一步经手性SFC分离，得到任意指定的：
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000444
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰1，保留时间＝3.582min)(10.5mg，20％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.51(s,1H)，7.35–7.27(m,2H)，7.19–7.15(m,2H)，6.29(d,J＝2.0Hz,1H)，4.75–4.72(m,1H)，4.52–4.47(m,1H)，4.43–4.30(m,2H)，4.28–4.20(m,2H)，3.31(s,3H)，2.88–2.74(m,2H)，2.70–2.65(m,1H)，2.28–2.24(m,1H)。LCMS RT＝0.758min，m/z＝410.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2分钟)保留时间0.758min，ESI+实测值[M+H]＝410.0。
SFC条件：柱：Chiralcel OJ 250×30mm I.D.，5um，流动相：A：CO2B：乙醇(0.1％NH3H2O)。梯度：4.5分钟内B从25％至75％并保持75％2.5min，之后保持B 5％1分钟。流速：2.8mL/min；柱温：38℃。
实施例#8
Figure BDA0002094593770000451
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000452
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将(6S)-6-氨基-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000453
-5-酮(78mg，0.4mmol)、1-羟基苯并三唑(11mg，0.08mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(116mg，0.61mmol)和7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(100mg，0.40mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌15小时。将混合物减压浓缩并将残留物经RP-HPLC(乙腈20-50/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到黄色油状N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000454
-6-基]-7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(70mg，41％)。LCMS RT＝0.659min，m/z＝424.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.659min，ESI+实测值[M+H]＝424.1。
将上述外消旋材料通过手性SFC进一步分离，得到任意指定的：
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000455
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰1，保留时间＝3.582min)(19.5mg，28％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.39–7.26(m,2H)，7.20–7.10(m,2H)，6.11(s,1H)，4.77–4.69(m,1H)，4.56–4.49(m,1H)，4.46–4.37(m,1H)，4.35–4.26(m,2H)，4.25–4.15(m,1H)，3.32(s,3H)，2.91–2.64(m,3H)，2.30–2.19(m,4H)。LCMS RT＝0.764min，m/z＝424.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.764min，ESI+实测值[M+H]＝424.1。
SFC条件：柱：Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D.，3μm流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)。梯度：4.5分钟内B从5％至40％并保持40％2.5min，之后保持B 5％1分钟。流速：2.8mL/min；柱温：40℃。
实施例#9
Figure BDA0002094593770000461
5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000464
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺和
(5R)-5-(1，1-二氟丙基)-N-[(3S)-7，9-二氟-2-氧代基-1，3，4，5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000465
-3-基]-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-b][1，2，4]三唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000462
步骤1：1，5-二(丙酰基)吡咯烷-2-酮
将D-谷氨酸(17.0g，115.5mmol)和4-二甲基氨基吡啶(847mg，6.9mmol)和丙酸酐(51.2g，392.9mmol)在三乙胺(51.0mL，366.3mmol)中的混合物在60℃搅拌15小时并随后减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至40％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状1,5-二(丙酰基)吡咯烷-2-酮(6.0g，26％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000463
步骤2：5-(1，1-二氟丙基)-1-丙酰基-吡咯烷-2-酮
将1，5-二(丙酰基)吡咯烷-2-酮(1.0g，5.1mmol)在二乙氨基三氟化硫(1.2g，7.6mmol)中的溶液在50℃搅拌16小时，随后加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)猝灭。将反应混合物用二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层以盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经制备型TLC(10％乙酸乙酯的石油醚溶液，Rf＝0.4)纯化，得到黄色油状5-(1,1-二氟丙基)-1-丙酰基-吡咯烷-2-酮(200mg，18％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000471
步骤3：5-(1,1-二氟丙基)吡咯烷-2-酮
向5-(1,1-二氟丙基)-1-丙酰基-吡咯烷-2-酮(200mg，0.91mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入氢化钠(60％，9mg，0.23mmol)。将反应混合物在25℃搅拌12小时并减压浓缩，得到黄色油状粗5-(1,1-二氟丙基)吡咯烷-2-酮(200mg，81％，60％纯度)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000472
步骤4：1-氨基-5-(1,1-二氟丙基)吡咯烷-2-酮
在0℃向5-(1,1-二氟丙基)吡咯烷基-2-酮(200mg，0.74mmol，60％纯度)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入氢化钠(60％，44mg，1.10mmol)。将混合物在0℃搅拌30分钟并加入邻-(二苯基磷酰基)羟胺(257mg，1.10mmol)。加入后将反应混合物在0℃搅拌16小时并随后过滤。将滤液减压浓缩，得到黄色油状粗1-氨基-5-(1,1-二氟丙基)吡咯烷-2-酮(120mg，92％)。LCMS RT＝1.146min，m/z＝179.1[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时3.0分钟)保留时间1.146min，ESI+实测值[M+H]＝179.1。
Figure BDA0002094593770000473
步骤5：2-[[2-(1,1-二氟丙基)-5-氧代基-吡咯烷-1-基]氨基]-2-亚氨基-乙酸乙酯
向1-氨基-5-(1,1-二氟丙基)吡咯烷-2-酮(120mg，0.67mmol)在乙醇(5mL)中的溶液中加入2-乙氧基-2-亚氨基-乙酸乙酯(489mg，3.37mmol)。将反应混合物在60℃搅拌16小时并随后减压浓缩，得到黄色油状2-[[2-(1,1-二氟丙基)-5-氧代基-吡咯烷-1-基]氨基]-2-亚氨基-乙酸乙酯(600mg，80％，40％纯度)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000481
步骤6：5-(1,1-二氟丙基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
将2-[[2-(1，1-二氟丙基)-5-氧代基-吡咯烷基-1-基]氨基]-2-亚氨基-乙酸乙酯(600mg，0.43mmol，40％纯度)在三氯氧磷(2.5mL，4.33mmol)中的溶液在120℃搅拌1小时。冷却后，向混合物加入水(20mL)猝灭并以二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层以饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈32-62/0.05％盐酸水溶液)纯化，得到浅黄色油状5-(1，1-二氟丙基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1，2，4]三唑-2-甲酸乙酯(35mg，31％)。LCMS RT＝1.090min，m/z＝260.2[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间1.090min，ESI+实测值[M+H]＝260.2。
Figure BDA0002094593770000482
步骤7：5-(1，1-二氟丙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-b][1，2，4]三唑-2-甲酸
向5-(1，1-二氟丙基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(25mg，0.1mmol)在四氢呋喃(1.0mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入一水合氢氧化锂(20mg，0.5mmol)。将混合物在25℃搅拌12小时并减压浓缩。向残留物中加入盐酸(1N)调至pH＝4。将所得混合物减压浓缩，得到黄色固体粗5-(1,1-二氟丙基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(20mg，90％)。LCMS RT＝1.322min，m/z＝232.1[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时3.0分钟)保留时间1.322min，ESI+实测值[M+H]＝232.1。
Figure BDA0002094593770000483
步骤8：5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000484
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将5-(1,1-二氟丙基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(20mg，0.09mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(25mg，0.13mmol)、(3S)-3-氨基-7,9-二氟-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000492
-2-酮(18mg，0.09mmol)和1-羟基苯并三唑(17mg，0.13mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在25℃搅拌4小时。将反应混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈24-54％/0.05％氢氧化铵的水溶液)纯化，得到白色固体5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000493
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(13.1mg，35％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.02–6.99(m,2H)，4.86–4.82(m,1H)，4.65–4.54(m,1H)，3.10–2.79(m,6H)，2.77–2.63(m,1H)，2.31–2.03(m,3H)，1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS RT＝0.989min，m/z＝426.2[M+H]+。LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0分钟)保留时间0.989min，ESI+实测值[M+H]＝426.2。
Figure BDA0002094593770000491
步骤9：(5R)-5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000494
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将外消旋5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000495
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(50mg，0.12mmol)经手性SFC分离，得到任意指定的：
白色固体的(5R)-5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000496
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰2，RT＝3.630min)(25mg，49％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.04–6.98(m,2H)，4.60–4.55(m,2H)，3.01–2.95(m,3H)，2.89–2.79(m,2H)，2.71–2.64(m,1H)，2.29–2.18(m,2H)，2.18–2.02(m,2H)，1.10(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS RT＝1.747min，m/z＝426.3[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时3.0分钟)保留时间1.747min，ESI+实测值[M+H]＝426.3。
SFC条件：柱：Chiralcel OD-3 100×4.6mm I.D.，3μm流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％乙酸乙酯)，梯度：4.5分钟内B从5％至40％并保持40％2.5min，然后保持B 5％1min。流速：2.8mL/min柱温：40℃。
实施例#10
Figure BDA0002094593770000501
4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000504
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺和
(4R)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000505
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000502
步骤1：(2-溴乙氧基)(叔-丁基)二苯基硅烷
在0℃向2-溴乙醇(2.0g，16.0mmol)和咪唑(3.27g，48.0mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入叔-丁基二苯基氯硅烷(4.4g，16.01mmol)。加入后，将反应混合物在25℃搅拌16小时并随后减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，石油醚)纯化，得到无色油状2-溴乙氧基-叔-丁基-二苯基-硅烷(3.1g，53％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(m,4H)，7.47–7.37(m,6H)，3.93(t,J＝6.4Hz,2H)，3.43(t,J＝6.5Hz,2H)，1.08(s,9H)。
Figure BDA0002094593770000503
步骤2：5-((叔-丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-3-苯基戊基-2-酮
在0℃向苯基丙酮(10.0g，74.5mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液中加入氢化钠(60％，4.5g，111.8mmol)。加入后，将混合物在25℃搅拌15分钟并加入2-溴乙氧基-叔-丁基-二苯基-癸烷(32.5g，89.4mmol)。将所得混合物在25℃搅拌18小时并随后加入水(100mL)猝灭。将混合物以乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层以水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状5-[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-3-苯基-戊-2-酮(6.0g，19％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65–7.55(m,4H)，7.44–7.26(m,9H)，7.22–7.15(m,2H)，3.99(t,J＝7.2Hz,1H)，3.65–3.58(m,1H)，3.65–3.75(m,1H)，2.40–2.28(m,1H)，2.05(s,3H)，1.90–1.80(m,1H)，1.05(s,9H)。
Figure BDA0002094593770000511
步骤3：7-((叔-丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-2,4-二氧代基-5-苯基庚酸乙酯
在0℃向5-[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-3-苯基-戊-2-酮(5.75g，13.8mmol)在四氢呋喃(60mL)中的溶液中加入叔丁醇钾(1.0M的四氢呋喃溶液，20.7mL，20.7mmol)。加入后，将混合物在25℃搅拌30分钟并加入草酸二乙酯(3.0g，20.7mmol)。将所得混合物在25℃搅拌2小时并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到棕色油状7-[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,4-二氧代基-5-苯基-庚酸乙酯(6.0g，84％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000512
步骤4：3-(3-((叔-丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-苯基丙基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯
将一水合肼(684mg，11.6mmol)和7-[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-2,4-二氧代基-5-苯基-庚酸乙酯(6.0g，11.6mmol)在乙醇(120mL)中的混合物在25℃搅拌5小时并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状3-[3-[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-1-苯基-丙基]-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(1.8g，30％)。LCMS RT＝1.036min，m/z＝513.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间1.036min，ESI+实测值[M+H]＝513.1。
Figure BDA0002094593770000521
步骤5：3-(3-羟基-1-苯基丙基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯
向3-[3-[叔-丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基-1-苯基-丙基]-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(1.80g，3.5mmol)在四氢呋喃(40mL)中的溶液加入四丁基氟化铵(1.0N的四氢呋喃溶液，3.9mL，3.9mmol)。将混合物在25℃搅拌5小时，然后减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状3-(3-羟基-1-苯基-丙基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(800mg，83％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000522
步骤6：3-(3-溴-1-苯基丙基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯
将三溴氧化磷(815mg，2.84mmol)和5-(3-羟基-1-苯基-丙基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(650mg，2.37mmol)在乙腈(20mL)中的混合物在50℃加热15小时并随后减压浓缩，得到棕色油状粗5-(3-溴-1-苯基-丙基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(790mg，98％)。该粗产物不经进一步纯化即用于下一步。
Figure BDA0002094593770000523
步骤7：4-苯基-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸乙酯
将5-(3-溴-1-苯基-丙基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(790mg，2.34mmol)和碳酸钾(2.59g，18.74mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物在25℃搅拌5小时并过滤。将滤液减压浓缩并将残留物经制备型TLC(50％乙酸乙酯的石油醚溶液，Rf＝0.5)纯化，得到棕色油状4-苯基-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸乙酯(400mg，67％)。LCMS RT＝0.850min，m/z＝257.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.850min，ESI+实测值[M+H]＝257.0。
Figure BDA0002094593770000531
步骤8：4-苯基-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸
将4-苯基-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸乙酯(400mg，1.56mmol)和一水合氢氧化锂(196mg，4.68mmol)在四氢呋喃(8mL)/水(2mL)中的混合物在25℃搅拌2小时并减压浓缩。向残留物加入盐酸(2N)调至pH＝5。将所得混合物用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到棕色固体粗4-苯基-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸(340mg，95％)，不经进一步纯化即用于下一步。
Figure BDA0002094593770000532
步骤9：4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000533
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺
将4-苯基-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酸(25mg，0.11mmol)、1-羟基苯并三唑(15mg，0.11mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(21mg，0.11mmol)和(3S)-3-氨基-5-甲基-2，3-二氢-1，5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000534
-4-酮(21mg，0.11mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌15小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈45-75/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000535
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺(13mg，29％)。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.50–7.40(m,1H)，7.37–7.20(m,8H)，6.38(s.1H)，5.02–4.96(m,1H)，4.65–4.56(m,1H)，4.55–4.46(m,1H)，4.45–4.27(m,2H)，4.25–4.18(m,1H)，3.42(s,3H)，3.15–3.09(m,1H)，2.56–2.52(m,1H)。LCMS RT＝0.875min，m/z＝403.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.875min，ESI+实测值[M+H]＝403.1。
步骤10：(4R)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000536
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000541
将N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000544
-3-基]-4-苯基-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺(120mg，0.3mmol)经手性SFC分离，得到任意指定的：黄色固体(4R)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000545
-3-基]-5,6-二氢-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺(峰2，保留时间＝5.106min)(32.3mg，26％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.45–7.42(m,1H)，7.35–7.29(m,4H)，7.25–7.20(m,4H)，6.37(s,1H)，4.99–4.96(m,1H)，4.59–4.56(m,1H)，4.52–4.48(m,1H)，4.42–4.34(m,2H)，4.25–4.20(m,1H)，3.42(s,3H)，3.15–3.10(m 1H)，2.56–2.51(m,1H)。LCMS RT＝1.960min，m/z＝403.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.960min，ESI+实测值[M+H]＝403.2。
SFC条件：柱：Lux Cellulose-2 150×4.6mm I.D.，3μm，流动相：CO2中含40％的甲醇(0.05％DEA)，流速：2.5mL/min，柱温：40℃。
实施例#11
Figure BDA0002094593770000542
(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000546
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000543
步骤1：3-碘-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000547
-2-酮
在-15℃向7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000548
-2-酮(150mg，0.73mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中加入N1,N1,N2,N2-四甲基乙基-1,2-二胺(845mg，7.27mmol)，然后缓慢加入三甲基碘硅烷(1.49g，7.27mmol)。将混合物在-15℃搅拌2小时并加入碘(738mg，2.91mmol)。将所得混合物在0℃搅拌2小时并加入硫代硫酸钠水溶液(10mL)猝灭。将混合物用二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至5％甲醇的二氯甲烷溶液)纯化，得到黄色油状3-碘-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000553
-2-酮(220mg，91％)。LCMS RT＝0.696min，m/z＝332.8[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.696min，ESI+实测值[M+H]＝332.8。
Figure BDA0002094593770000551
步骤2：3-叠氮基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000554
-2-酮
向3-碘-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000555
-2-酮(220mg，0.66mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中加入叠氮化钠(140mg，2.15mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时并用水(20mL)稀释。将混合物用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色油状粗3-叠氮基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000556
-2-酮(150mg，92％)，在下一步中按原样使用。LCMS RT＝0.667min，m/z＝248.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.667min，ESI+实测值[M+H]＝248.0。
Figure BDA0002094593770000552
步骤3：(S)-3-氨基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000557
-2-酮和(R)-3-氨基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000558
-2-酮
将3-叠氮基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000559
-2-酮(150mg，0.61mmol)和钯(10％于碳上，129mg)在甲醇(20mL)中的混合物在25℃氢化(15psi)2小时并过滤。将滤液减压浓缩，得到无色油状粗3-氨基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA00020945937700005510
-2-酮(120mg，89％)。LCMS RT＝1.342min，m/z＝222.2[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.342min，ESI+实测值[M+H]＝222.2。
将外消旋3-氨基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000563
-2-酮经手性SFC分离，得到任意指定的：
黄色油状(S)-3-氨基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000564
-2-酮(峰1，保留时间＝5.1566.794min)(45.0mg，38％)。
黄色油状(R)-3-氨基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000565
-2-酮(峰2，保留时间＝6.794min)(45.0mg，38％)。
SFC条件：柱：ChiralPak AD-3 150×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A：CO2B：甲醇(0.05％DEA)；梯度：5.5分钟内B从5％至40％并保持40％3min，然后保持5％B 1.5分钟；流速：2.5mL/min；柱温：40℃。
Figure BDA0002094593770000561
步骤4：4-(4-溴-2-氟苯基)-4-氧代丁酸甲酯
向1-溴-3-氟苯(5.0g，28.57mmol)在1,2-二氯乙烷(100mL)中的溶液中加入氯化铝(15.2g，114.29mmol)和4-氯-4-氧代丁酸甲酯(8.6g，57.14mmol)。将混合物在70℃加热12小时并冷却。反应通过加入水(20mL)缓慢猝灭并用二氯甲烷(2×100mL)萃取。将合并的有机层减压浓缩并将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色固体4-(4-溴-2-氟代-苯基)-4-氧代基-丁酸甲酯(2.0g，24％)。LCMS RT＝0.995min，m/z＝291.1[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0分钟)保留时间0.995min，ESI+实测值[M+H]＝291.1。
Figure BDA0002094593770000562
步骤5：(2-(4-溴-2-氟苯基)-5-氧代吡咯烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯
向4-(4-溴-2-氟代-苯基)-4-氧代基-丁酸甲酯(2.0g，6.91mmol)在四氢呋喃(10mL)和乙酸(5mL)中的溶液中加入肼基甲酸叔丁酯(1.3g，10.38mmol)。将混合物在40℃搅拌12小时，然后加入氰基硼氢化钠(652mg，10.38mmol)。搅拌持续另外6小时并将混合物减压浓缩。将残留物以乙酸乙酯(50mL)稀释，并用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至100％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状N-[2-(2-氟苯基)-5-氧代基-吡咯烷-1-基]氨基甲酸叔丁酯(800mg，78％)。LCMS RT＝1.067min，m/z＝319.0[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0分钟)保留时间1.067min，ESI+实测值[M-55]＝319.0。
Figure BDA0002094593770000571
步骤6：(2-(2-氟苯基)-5-氧代基吡咯烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯
将N-[2-(4-溴-2-氟代-苯基)-5-氧代基-吡咯烷-1-基]氨基甲酸叔丁酯(800mg，2.14mmol)和Pd/C(10％，228mg，0.21mmol)在甲醇(10mL)中的混合物在25℃氢化(15psi)4小时，然后过滤。将滤液减压浓缩，得到白色固体粗N-[2-(2-氟苯基)-5-氧代基-吡咯烷-1-基]氨基甲酸叔丁酯(500mg，79％)。LCMS RT＝0.972min，m/z＝239.1[M+H]+.
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0分钟)保留时间0.972min，ESI+实测值[M-55]＝239.1。
Figure BDA0002094593770000572
步骤7：1-氨基-5-(2-氟苯基)吡咯烷-2-酮盐酸盐
向(2-(2-氟苯基)-5-氧代基吡咯烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.36mmol)在乙酸乙酯(5mL)中的溶液中加入HCl(4N的乙酸乙酯溶液，1.0mL，4.0mmol)。将混合物在25℃搅拌4小时，然后减压浓缩，得到白色固体粗1-氨基-5-(2-氟苯基)吡咯烷-2-酮盐酸盐(400mg，100％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000581
步骤8：(Z)-2-氨基-2-((2-(2-氟苯基)-5-氧代基吡咯烷-1-基)亚氨基)乙酸乙酯
向1-氨基-5-(2-氟苯基)吡咯烷-2-酮盐酸盐(400mg，2.06mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中加入2-乙氧基-2-亚氨基-乙酸乙酯(1.8g，12.36mmol)。将混合物在40℃搅拌12小时并减压浓缩，得到黄色油状粗(2Z)-2-氨基-2-[2-(2-氟苯基)-5-氧代基-吡咯烷-1-基]亚氨基-乙酸乙酯(500mg，82％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000582
步骤9：7-甲基-5,6,7,8-四氢咪唑并[1,5-a]吡啶-1-甲酸甲酯
将(2Z)-2-氨基-2-[2-(2-氟苯基)-5-氧代基-吡咯烷-1-基]亚氨基-乙酸乙酯(500mg，1.7mmol)在三氯氧磷(5.0mL，135.9mmol)中的溶液在120℃加热1小时。冷却后，向混合物中加入水(20mL)缓慢猝灭并以二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层用20％碳酸氢钠(20mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至60％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(400mg，85％)。LCMS RT＝0.760min，m/z＝275.9[M+H]+.
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.760min，ESI+实测值[M+H]＝275.9。
Figure BDA0002094593770000583
步骤10：(R)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯和(S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
将外消旋5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(7.1g，25.79mmol)经手性SFC分离，得到任意指定的：
黄色油状(R)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(峰1，保留时间＝3.325min)(3.0g，42％)。
黄色油状(S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(峰2，保留时间＝3.560min)(2.8g，39％)。
SFC条件：柱：ChiralPak AD-3 150×4.6mm I.D.，3μm流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)梯度：5.5分钟内B从5％至40％并保持40％3min，然后保持B 5％1.5min，流速：2.5mL/min，柱温：40℃。
Figure BDA0002094593770000591
步骤11：(S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸
向(5S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(2.0g，7.27mmol)在四氢呋喃(50mL)/水(10mL)中的溶液中分批加入氢氧化锂水合物(870mg，36.33mmol)。将反应混合物在25℃搅拌12小时，然后减压浓缩。将水性残留物以冰水(20mL)稀释并加入盐酸(1N)调至pH＝3。过滤收集固体产品并真空干燥，得到白色固体粗(5S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(1.6g，89％)，在下一步中按原样使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19(br s,1H)，7.48–7.40(m,1H)，7.31–7.20(m,3H)，5.80–5.76(m,1H)，3.25–3.17(m,1H)，3.11–2.97(m,2H)，2.64–2.58(m,1H)。LCMS RT＝0.586min，m/z＝248.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.586min，ESI+实测值[M+H]＝248.0。
Figure BDA0002094593770000592
步骤12：(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000593
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将(S)-3-氨基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000594
-2-酮(15mg，0.07mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(16mg，0.08mmol)、1-羟基苯并三唑(11mg，0.08mmol)和(5S)-5-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(20mg，0.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈30-60％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000603
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(9.2mg，30％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.14(s,1H)，7.43–7.36(m,1H)，7.22–7.13(m,3H)，6.78(s,1H)，5.79–5.74(m,1H)，4.56–4.50(m,1H)，3.93(s,3H)，3.40(s,3H)，3.34–3.29(m,1H)，3.13–3.08(m,2H)，2.85–2.81(m,1H)，2.76–2.70(m,2H)，2.54–2.48(m,1H)，2.18–2.13(m,1H)。LCMS RT＝0.818min，m/z＝451.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.1％甲酸历时1.5分钟)保留时间：0.818min，ESI+实测值[M+H]＝451.0。
实施例#12
Figure BDA0002094593770000601
(5R)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000605
-3-基]-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000602
步骤1：1-氨基-5-苯基-吡咯烷-2-酮
向N-(2-氧代基-5-苯基-吡咯烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，1.3mmol)在乙酸乙酯(3mL)中的溶液加入HCl(4N的乙酸乙酯溶液，3.0mL，12.0mmol)。将混合物在20℃搅拌1小时并减压浓缩。将残留物加入饱和碳酸氢钠(10mL)猝灭并以乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(3×20mL)、盐水(2×20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到白色固体粗1-氨基-5-苯基-吡咯烷-2-酮(190mg，85％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.42–7.32(m,3H)，7.24(d,J＝7.6Hz,2H)，4.66–4.62(m,1H)，3.95(br.s.,2H)，2.63–2.45(m,3H)，1.91–1.88(m,1H)。
Figure BDA0002094593770000611
步骤2：(2Z)-2-氨基-2-(2-氧代基-5-苯基-吡咯烷-1-基)亚氨基-乙酸乙酯
向1-氨基-5-苯基-吡咯烷-2-酮(270mg，1.53mmol)在乙醇(8.0mL)中的搅拌溶液中加入氨基(硫代)乙酸乙酯(224mg，1.69mmol)。将混合物在90℃搅拌4小时并冷却至室温。将溶液以乙酸乙酯(15mL)稀释，用水(2×5mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色油状粗(2Z)-2-氨基-2-(2-氧代基-5-苯基-吡咯烷-1-基)亚氨基-乙酸乙酯(400mg，95％)。LCMS RT＝0.581min，m/z＝275.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.581min，ESI+实测值[M+H]＝275.9.
Figure BDA0002094593770000612
步骤3：(S)-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯和(R)-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
将(2Z)-2-氨基-2-(2-氧代基-5-苯基-吡咯烷-1-基)亚氨基-乙酸乙酯(400mg，1.45mmol)在POCl3(2mL)中的溶液在120℃搅拌1小时。冷却后，向混合物加入饱和碳酸氢钠(15mL)猝灭。将所得溶液以乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层以盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0-70％乙酸乙酯的石油溶液)纯化，得到黄色油状5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(310mg，81％)。将外消旋材料以手性SFC分离，得到：
黄色油状(S)-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(峰1，保留时间＝4.063min)(130mg，42％)。LCMS RT＝0.629min，m/z＝257.8[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.629min，ESI+实测值[M+H]＝257.8。
黄色油状(R)-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(峰1，保留时间＝5.844min)(135mg，43％)。LCMS RT＝0.631min，m/z＝257.8[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.631min，ESI+实测值[M+H]＝257.8。
SFC条件：柱：Lux Cellulose-2 150×4.6mm I.D.，3μm流动相：A：CO2；B：MeOH(0.05％DEA)梯度：4.5分钟内B从5至40％并保持40％2.5min，然后保持B 5％1分钟。流速：2.8mL/min。柱温：40℃。
步骤4：(5R)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000623
-3-基]-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将(S)-3-氨基-7-甲氧基-1-甲基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000624
-2-酮(15mg，0.07mmol)、(5R)-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(19mg，0.08mmol)、1-羟基苯并三唑(11mg，0.08mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(16mg，0.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌2小时并减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈30-60％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体(5R)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000625
-3-基]-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(20mg，68％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.13(s,1H)，7.40–7.34(m,3H)，7.21–7.20(m,2H)，6.77(s,1H)，5.55–5.51(m,1H)，4.54–4.49(m,1H)，3.92(s,3H)，3.39(s,3H)，3.30–3.24(m，1H)，3.06–3.04(m，2H)，2.81–2.70(m，3H)，2.50–2.48(m，1H)，2.15–2.13(m,1H)。LC-MS RT＝0.731min，m/z＝433.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.731min，ESI+实测值[M+H]＝433.0。
实施例#13
Figure BDA0002094593770000621
(5R)-5-苯基-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8，9-四氢吡啶并[3，2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000626
-7-基]-6，7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000622
步骤1：(E)-7,8-二氢喹啉-5(6H)-酮肟
向5,6,7,8-四氢喹啉酮-5(5.0g，34.0mmol)在甲醇(30mL)和水(9mL)中的溶液中加入盐酸羟胺(7.1g，101.9mmol)和乙酸钠(8.4g，101.9mmol)。将混合物在80℃搅拌4小时并减压浓缩。将水性残留物用水(80mL)稀释并通过过滤收集形成的固体。将固体用己烷(20mL)研磨并真空干燥，得到浅绿色固体粗7,8-二氢-6H-喹啉-5-酮肟(4.80g，87％)，不经进一步纯化即用于下一步。
Figure BDA0002094593770000631
步骤2：(E)-7,8-二氢喹啉-5(6H)-酮O-对甲苯磺酰肟(O-tosyl oxime)
向7,8-二氢-6H-喹啉-5-酮肟(4.8g，29.6mmol)在丙酮(220mL)和水(90mL)中的溶液中加入4-甲基苯-1-磺酰氯(8.5g，44.4mmol)和氢氧化钾(1.7g，29.6mmol)。将混合物回流加热1小时并减压浓缩。将所得固体用水(50mL)洗涤并真空干燥，得到浅红色固体粗(E)-7,8-二氢喹啉-5(6H)-酮O-对甲苯磺酰肟(8.4g，90％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMS：RT＝0.661min，m/z＝317.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.1％甲酸历时1.5分钟)保留时间：0.661min，ESI+实测值[M+H]＝317.0
Figure BDA0002094593770000632
步骤3：8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000634
-6(7H)-酮
将[(E)-7,8-二氢-6H-喹啉-5-亚基氨基]4-甲基苯磺酸酯(8.40g，26.6mmol)和乙酸钾(7.82g，79.7mmol)在乙醇(120mL)和水(240mL)中的混合物回流加热17小时并减压浓缩。将所剩水溶液加入氢氧化钠水溶液(10N)调至pH＝10，然后以氯仿(3×150mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至100％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到棕色固体5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000635
-6-酮(2.30g，53％)，在下一步中按原样使用。1H NMR(400MHz,CD3Cl)δ8.38–8.35(m,1H)，8.27(br.s,1H)，7.32–7.29(m,1H)，7.22–7.20(m,1H)，3.23–3.04(m,2H)，2.44–2.36(m,4H)。
Figure BDA0002094593770000633
步骤4：7-碘-8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000643
-6(7H)-酮
在N2下、0℃向5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000644
-6-酮(2.25g，13.87mmol)在二氯甲烷(40mL)中的溶液中加入四甲基乙二胺(6.24mL，41.62mmol)和三甲基碘硅烷(5.92mL，41.62mmol)。将混合物在0℃搅拌2小时，然后加入碘(5.28g，20.8mmol)。将混合物在室温搅拌另外2小时，然后加入饱和亚硫酸钠水溶液(50mL)猝灭。将溶液以二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色固体粗7-碘-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000645
-6-酮(3.50g，88％)，不经进一步纯化即用于下一步。
Figure BDA0002094593770000641
步骤5：7-叠氮基-8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000646
-6(7H)-酮
向7-碘-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000647
-6-酮(3.50g，12.2mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中的溶液中加入叠氮化钠(2.37g，36.5mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时并倒入冰水(20mL)。将溶液以乙酸乙酯(4×20mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色固体粗7-叠氮基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000648
-6-酮(2.20g，89％)，不经进一步纯化即用于下一步。
Figure BDA0002094593770000642
步骤6：(S)-7-氨基-8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000649
-6(7H)-酮和(R)-7-氨基-8，9-二氢-5H-吡啶并[3，2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700006410
-6(7H)-酮
将7-叠氮基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3，2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700006411
-6-酮(2.20g，10.8mmol)和钯(10％于碳上，114mg)在乙醇(100mL)中的混合物在25℃氢化(15psi)1小时，然后过滤。将滤液减压浓缩并将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％甲醇的乙酸乙酯溶液)纯化，得到棕色固体7-氨基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700006412
-6-酮(1.70g，89％)。LCMS：RT＝0.763min，m/z＝178.2[M+H]+。
LCMS(0至30％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间：0.763min，ESI+实测值[M+H]＝178.2.
将外消旋7-氨基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700006413
-6-酮(950mg，5.36mmol)经手性SFC分离，得到任意指定的：
黄色固体(7S)-7-氨基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700006414
-6-酮(峰1，保留时间2.832min)(390mg，41％)。
黄色固体(7R)-7-氨基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000653
-6-酮(峰2，保留时间：3.628min)(380mg，40％)。
SFC条件：柱：Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)；梯度：4.5分钟内B从5％至40％并保持40％；保持2.5min，然后保持B 5％1min；流速：2.8mL/min；柱温：40℃。
Figure BDA0002094593770000651
步骤7：(5R)-5-苯基-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000654
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将(7S)-7-氨基-5,7，8，9-四氢吡啶并[3，2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000655
-6-酮(25mg，0.14mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(41mg，0.21mmol)、(5R)-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(实施例#12中所得，32mg，0.14mmol)和1-羟基苯并三唑(6mg，0.04mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在25℃搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈15-45％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体(5R)-5-苯基-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000656
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(43mg，77％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43–8.35(m,1H)，8.17(s,1H)，7.95(d,J＝2.0Hz,1H)，7.40–7.29(m,4H)，7.23–7.17(m,1H)，7.13–7.06(m,2H)，5.50–5.40(m,1H)，4.82–4.73(m,1H)，3.27–3.08(m,3H)，3.06–2.90(m,3H)，2.72–2.61(m,1H)，2.22–2.09(m,1H)。LCMS RT＝1.314min，m/z＝389.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.314min，ESI+实测值[M+H]＝389.2。
实施例#14
Figure BDA0002094593770000652
(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000657
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#13中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈15-45％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000663
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(28.9mg，70％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.33(d,J＝4.8Hz,1H)，7.51(dd,J＝1.6,8.0Hz,1H)，7.39–7.37(m,2H)，7.20–7.15(m,3H)，5.77(dd,J＝5.6,8.8Hz,1H)，4.56(dd,J＝8.0,11.8Hz,1H)，3.30–3.25(m,1H)，3.23–3.06(m,3H)，3.02–2.90(m,1H)，2.79–2.66(m,2H)，2.36–2.26(m,1H).LCMS RT＝1.384min，m/z＝407.2[M+H]+.
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时3.0分钟)保留时间1.384min，ESI+实测值[M+H]＝407.2。
实施例#15
Figure BDA0002094593770000661
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000664
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000662
步骤1：5-甲基-8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000665
-6(7H)-酮
在N2下向5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000666
-6-酮(1.60g，9.86mmol)在四氢呋喃(50mL)中的搅拌和冷却(-78℃)溶液中逐滴加入正丁基锂(4.74mL，11.84mmol)。加入后，将反应混合物在0℃搅拌30分钟并重新冷却至-78℃。通过注射器加入碘甲烷(1.68g，11.84mmol)并将混合物在25℃搅拌17小时。通过加入饱和氯化铵(100mL)猝灭混合物并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至100％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到棕色固体5-甲基-8，9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000667
-6-酮(1.60g，92％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38–8.36(m，1H)，7.48–7.45(m，1H)，7.28–7.24(m，1H)，3.34(s，3H)，3.04–2.91(m,2H)，2.39–2.24(m,4H)。
Figure BDA0002094593770000671
步骤2：7-碘-5-甲基-8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000674
-6(7H)-酮
在-15℃向5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000675
-6-酮(1.45g，8.23mmol)在二氯甲烷(40mL)中的溶液中加入四甲基乙二胺(5.74g，49.37mmol)，然后逐滴加入三甲基碘硅烷(9.88g，49.37mmol)。将反应混合物在-15℃搅拌2小时，加入碘(25.06g，98.74mmol)。将混合物在-15℃搅拌另外2小时并通过加入饱和亚硫酸钠水溶液(150mL)猝灭。将所得混合物用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到棕色固体粗7-碘-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000676
-6-酮(2.40g，97％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000672
步骤3：7-叠氮基-5-甲基-8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000677
-6(7H)-酮
向7-碘-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000678
-6-酮(2.40g，7.94mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(40mL)中的溶液中加入叠氮化钠(1.55g，23.83mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时并倒入冰水(200mL)。将所得溶液以二氯甲烷(4×200mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到棕色油状粗7-叠氮基-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000679
-6-酮(1.72g，99％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000673
步骤4：(S)-7-氨基-5-甲基-8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700006710
-6(7H)-酮和(S)-7-氨基-5-甲基-8,9-二氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700006711
-6(7H)-酮
将7-叠氮基-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA00020945937700006712
-6-酮(1.72g，7.92mmol)和钯(10％于碳上，339mg)在乙醇(200mL)中的混合物在25℃氢化(15psi)1小时，然后过滤。将滤液减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％甲醇的乙酸乙酯溶液)纯化，得到棕色油状7-氨基-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000682
-6-酮(1.3g，86％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39–8.37(m,1H)，7.48–7.44(m,1H)，7.29–7.22(m,1H)，3.43–3.36(m,4H)，3.07–2.94(m,1H)，2.92–2.85(m,1H)，2.60–2.55(m,1H)，2.04–1.92(m,1H)。
将外消旋7-氨基-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000683
-6-酮(900mg，4.71mmol)经由手性SFC分离，得到任意指定的：
浅蓝色油状(7S)-7-氨基-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000684
-6-酮(峰1，保留时间＝2.328min)(400mg，44％)。
浅蓝色油状(7R)-7-氨基-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000685
-6-酮(峰2，保留时间＝2.767min)(450mg，50％)。
SFC条件：柱：AS(250mm×30mm，5um)；流动相：A：CO2B：0.1％NH3H2O/EtOH；梯度：B从20％至20％；流速：60mL/min。
Figure BDA0002094593770000681
步骤5：(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000686
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将7-(2-氟苯基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(71mg，0.29mmol)、1-羟基苯并三唑(42mg，0.31mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(60mg，0.31mmol)和(7S)-7-氨基-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000687
-6-酮(50mg，0.26mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在30℃搅拌18小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈30-60％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体7-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000688
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(60mg，55％)。LCMS RT＝1.451min，m/z＝421.2[M+H]+。LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％碳酸氢铵历时3分钟)保留时间1.451min，ESI+实测值[M+H]＝421.2。
将外消旋7-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000689
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(60mg，0.14mmol)经手性SFC分离，得到任意指定的：
白色固体(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000692
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰1，保留时间＝4.467min)(16.5mg，27％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.39(d,J＝4.8Hz,1H)，7.85(d,J＝8.0Hz,1H)，7.48(dd,J＝4.8,8.0Hz,1H)，7.39–7.25(m,2H)，7.22–7.08(m,2H)，4.77–4.69(m,1H)，4.55–4.49(m,1H)，4.45–4.35(m,1H)，4.34–4.24(m,1H)，3.41(s,3H)，3.20–3.09(m,1H)，2.95–2.88(m,1H)，2.78–2.57(m,2H)，2.33–2.24(m,1H)。LCMS RT＝1.473min，m/z＝421.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％碳酸氢铵历时3分钟)保留时间1.473min，ESI+实测值[M+H]＝421.2。
SFC条件：柱：AD(250mm×30mm，5um)；流动相：A：CO2B：IPA(0.1％NH3H2O)；梯度：从40％至40％；流速：60mL/min。
实施例#16
Figure BDA0002094593770000691
(5R)-5-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000693
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#15中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈15-45％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体(5R)-5-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000694
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(18mg，32％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.39(d,J＝5.2Hz,1H)，7.83(d,J＝8.0Hz,1H)，7.48–7.44(m,1H)，7.43–7.36(m,1H)，7.20–7.15(m,3H)，5.79–5.74(m,1H)，4.51(dd,J＝8.0,11.6Hz,1H)，3.41(s,3H)，3.29–3.24(m,1H)，3.20–3.03(m,3H)，2.95–2.87(m,1H)，2.76–2.67(m,1H)，2.66–2.57(m,1H)，2.33–2.22(m,1H).LCMS RT＝1.454min，m/z＝421.2[M+H]+。LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.454min，ESI+实测值[M+H]＝421.2。
实施例#17
Figure BDA0002094593770000701
(7S)-7-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000705
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000702
步骤1：1-氨基-3-苯基吡咯烷-2-酮
向N-(2-氧代基-3-苯基-吡咯烷-1-基)氨基甲酸叔丁酯(1.4g，5.1mmol)在乙酸乙酯(20mL)中的溶液中加入HCl(4N的乙酸乙酯溶液，12.0mL，48.0mmol)。将混合物在20℃搅拌3小时并减压浓缩。向残留物中加入饱和碳酸氢钠(30mL)缓慢猝灭。将所得溶液以乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并浓缩，得到白色固体粗1-氨基-3-苯基-吡咯烷-2-酮(590mg，66％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000703
步骤2：2-亚氨基-2-((2-氧代基-3-苯基吡咯烷-1-基)氨基)乙酸乙酯
向1-氨基-3-苯基-吡咯烷-2-酮(590mg，3.35mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中加入2-乙氧基-2-亚氨基-乙酸乙酯(1458mg，10.04mmol)。将混合物在40℃搅拌12小时并减压浓缩，得到粗(2Z)-2-氨基-2-(2-氧代基-3-苯基-吡咯烷-1-基)亚氨基-乙酸乙酯(1370mg，100％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000704
步骤3：7-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
将(2Z)-2-氨基-2-(2-氧代基-3-苯基-吡咯烷-1-基)亚氨基-乙酸乙酯(1370mg，4.98mmol)在三氯氧磷(5mL)中的溶液在120℃搅拌1小时。冷却后，向混合物中加入饱和碳酸氢钠(20mL)缓慢猝灭并以二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层以盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色固体7-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(390mg，31％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40–7.14(m,5H)，4.45(q,J＝8.0Hz,4H)，4.40–4.36(m,1H)，4.26–4.23(m,1H)，3.29–3.22(m,1H)，2.78–2.70(m,1H)，1.40(t,J＝7.2Hz,3H).LCMS RT＝1.95min，m/z＝258.1[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.95min，ESI+实测值[M+H]＝258.1。
Figure BDA0002094593770000711
步骤4：7-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸
将(7S)-7-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(340mg，1.32mmol)和氢氧化锂水合物(555mg，13.22mmol)在四氢呋喃(5mL)和水(5mL)中的混合物在20℃搅拌12小时。减压蒸发有机溶剂并向水性残留物中加入20％HCl调至pH＝2-3。将混合物以二氯甲烷(5×30mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色固体粗7-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(260mg，85％)，在下一步中按原样使用。
步骤5：(7S)-7-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000712
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将(7S)-7-氨基-5-甲基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000713
-6-酮(30mg，0.16mmol)、1-羟基苯并三唑(7mg，0.05mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(45mg，0.24mmol)和7-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(36mg，0.16mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌15小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈15-45％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色外消旋产物，将其进一步经手性SFC分离，得到任意指定的：
白色固体(7S)-7-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000714
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰1，保留时间＝4.375min)(12.6mg，19％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.39(d,J＝4.8Hz,1H)，7.84(d,J＝8.0Hz,1H)，7.47(dd,J＝4.0,4.0Hz,1H)，7.39–7.32(m,2H)，7.31–7.25(m,3H)，4.56–4.48(m,2H)，4.43–4.36(m,1H)，4.30–4.22(m,1H)，3.40(s,3H)，3.29–3.22(m,1H)，3.18–3.08(m,1H)，2.95–2.87(m,1H)，2.67–2.58(m,2H)，2.33–2.21(m,1H)。LCMS RT＝0.698min，m/z＝403.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.698min，ESI+实测值[M+H]＝403.1。
SFC条件：柱：ChiralpakAD-3 100×4.6mm I.D.，3μm流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)梯度：4.5分钟内B从5％至40％并保持40％2.5min，然后保持B 5％1min，流速：2.8mL/min，柱温：40℃。
实施例#18
Figure BDA0002094593770000721
(5S)-5-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000723
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#15中类似方法制备。将残留物经RP-HPLC(乙腈15-45％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体(5S)-5-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000724
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(22mg，66％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.37(d,J＝4.0Hz,1H)，7.82(d,J＝7.6Hz,1H)，7.47–7.45(m,1H)，7.40–7.31(m,3H)，7.21–7.19(m,2H)，5.55–5.50(m,1H)，4.52–4.47(m,1H)，3.40(s,3H)，3.26–3.20(m,1H)，3.17–3.09(m,2H)，3.08–3.00(m,1H)，2.91–2.90(m,1H)，2.70–2.56(m,2H)，2.30–2.21(m,1H).LCMS RT＝1.417min，m/z＝403.1[M+H]+.
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.417min，ESI+实测值[M+H]＝403.1.
实施例#19
Figure BDA0002094593770000731
1-苄基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000735
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000732
步骤1：2-(四氢呋喃-3-基)乙酸丁酯
在0℃向1-碘丁烷(12.4g，67.9mmol)在乙腈(100mL)中的溶液中加入1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(9.36g，61.1mmol)，然后加入(四氢-呋喃-3-基)-乙酸(8.0g，61.1mmol)。将所得混合物在25℃搅拌12小时并倒入水(100mL)中。将混合物以乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色油状粗2-四氢呋喃-3-基乙酸丁酯(11.0g，96％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000733
步骤2：3-氧代基-4-(四氢呋喃-3-基)丁腈
在-78℃向乙腈(2.67g，65.0mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中加入正丁基锂(26.0mL，65.0mmol)。将所得混合物在同样温度搅拌30min，并逐滴加入2-四氢呋喃-3-基乙酸丁酯(11.0g，59.1mmol)。加入后，将反应混合物在25℃搅拌另2小时，然后加入饱和氯化铵水溶液(20mL)缓慢猝灭。将混合物以乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色油状粗3-氧代基-4-四氢呋喃-3-基-丁腈(7.8g，86％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000734
步骤3：5-((四氢呋喃-3-基)甲基)-1H-吡唑-3-胺
将3-氧代基-4-四氢呋喃-3-基-丁腈(7.8g，50.9mmol)和肼(10mL)在2-丙醇(20mL)中的混合物在80℃加热12小时并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至10％甲醇的二氯甲烷溶液)纯化，得到黄色固体5-(四氢呋喃-3-基甲基)-1H-吡唑-3-胺(2.8g，33％)。LC-MS RT＝0.875min，m/z＝168.2[M+H]+。LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间0.875min，ESI+实测值[M+H]＝168.2。
Figure BDA0002094593770000741
步骤4：N-(5-((四氢呋喃-3-基)甲基)-1H-吡唑-3-基)甲酰胺
将5-(四氢呋喃-3-基甲基)-1H-吡唑-3-胺(2.8g，16.7mmol)在甲酸(10mL)中的溶液在110℃加热12小时，然后减压浓缩除去。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至5％二氯甲烷的甲醇溶液)纯化，得到黄色固体N-[5-(四氢呋喃-3-基甲基)-1H-吡唑-3-基]甲酰胺(2.5g，77％)。LC-MS RT＝1.083min，m/z＝196.1[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.083min，ESI+实测值[M+H]＝196.1。
Figure BDA0002094593770000742
步骤5：N-甲基-5-((四氢呋喃-3-基)甲基)-1H-吡唑-3-胺
在0℃向N-[5-(四氢呋喃-3-基甲基)-1H-吡唑-3-基]甲酰胺(2.0g，20.0mmol)在四氢呋喃(40mL)中的溶液加入硼烷-二甲基硫醚络合物(10N，4.0mL，40.0mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时，然后加入甲醇(20mL)和盐酸(1N，10mL)缓慢猝灭。将所得混合物搅拌30分钟然后减压浓缩至干。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至5％二氯甲烷的甲醇溶液)纯化，得到无色油状N-甲基-5-(四氢呋喃-3-基甲基)-1H-吡唑-3-胺(1.2g，65％)。LC-MS RT＝1.229min，m/z＝182.2[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.229min，ESI+实测值[M+H]＝182.2。
Figure BDA0002094593770000743
步骤6：4-氯-N-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)甲基)-1H-吡唑-3-基)丁酰胺
将4-氯丁酰氯(18.7g，132.2mmol)和N-甲基-5-(四氢呋喃-3-基甲基)-1H-吡唑-3-胺(1.2g，6.6mmol)的混合物在60℃加热30分钟。冷却至室温后，向混合物中缓慢加入甲醇(10mL)并搅拌另外30分钟。将混合物减压浓缩至干。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至5％二氯甲烷的甲醇溶液)纯化，得到黄色油状4-氯-N-甲基-N-[5-(四氢呋喃-3-基甲基)-1H-吡唑-3-基]丁酰胺(1.3g，67％)。LCMS RT＝0.797min，m/z＝285.8[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.797min，ESI+实测值[M+H]＝285.8。
Figure BDA0002094593770000751
步骤7：4-甲基-2-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000753
-5(6H)-酮
将4-氯-N-甲基-N-[5-(四氢呋喃-3-基甲基)-1H-吡唑-3-基]丁酰胺(1.3g，4.5mmol)和碳酸铯(3.0g，9.1mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在25℃搅拌12小时，然后过滤。将滤液减压浓缩并将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至5％二氯甲烷的甲醇溶液)纯化，得到黄色油状4-甲基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000754
-5-酮(850mg，75％)。LC-MS RT＝1.050min，m/z＝250.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.050min，ESI+实测值[M+H]＝250.2。
Figure BDA0002094593770000752
步骤8：6-碘-4-甲基-2-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000755
-5(6H)-酮
在-15℃向4-甲基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000756
-5-酮(420mg，1.68mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中加入N1,N1,N2,N2-四甲基乙基-1,2-二胺(1.96g，16.8mmol)，随后加入三甲基碘硅烷(3.37g，16.8mmol)。加入后，将混合物在-15℃搅拌另外1.5小时，并加入碘(1.28g，5.05mmol)。将反应混合物再搅拌3小时并加入饱和亚硫酸钠水溶液(10mL)猝灭。将所得混合物以二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至5％二氯甲烷的甲醇溶液)纯化，得到浅黄色油状6-碘-4-甲基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000763
-5-酮(220mg，35％)。LCMS RT＝1.399min，m/z＝375.9[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.399min，ESI+实测值[M+H]＝375.9。
Figure BDA0002094593770000761
步骤9：6-叠氮基-4-甲基-2-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000764
-5(6H)-酮
向6-碘-4-甲基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000765
-5-酮(220mg，0.59mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液中加入叠氮化钠(720mg，11.0mmol)。将反应混合物在25℃搅拌12小时，然后以乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层以盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色油状粗6-叠氮基-4-甲基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000766
-5-酮(160mg，94％)，在下一步中按原样使用。LC-MS RT＝1.348min，m/z＝291.1[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.348min，ESI+实测值[M+H]＝291.1。
Figure BDA0002094593770000762
步骤10：6-氨基-4-甲基-2-((四氢呋喃-3-基)甲基)-7,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000767
-5(6H)-酮
向6-叠氮基-4-甲基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000768
-5-酮(160mg，0.55mmol)在四氢呋喃(2.5mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入80％聚合物结合的三苯基膦(867mg)。将反应混合物在25℃搅拌12小时并过滤。将滤液减压浓缩并将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至5％二氯甲烷的甲醇溶液)纯化，得到浅黄色油状6-氨基-4-甲基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000772
-5-酮(100mg，69％)。LC-MSRT＝1.283min，m/z＝265.2[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.283min，ESI+实测值[M+H]＝265.2.
Figure BDA0002094593770000771
步骤11：1-苄基-N-((6S)-4-甲基-5-氧代基-2-((四氢呋喃-3-基)甲基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000773
-6-基)-1H-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
将1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(35mg，0.18mmol)、6-氨基-4-甲基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000774
-5-酮(40mg，0.15mmol)、1-羟基苯并三唑(25mg，0.18mmol)和1-苄基-1,2,4-三唑-3-甲酸(34mg，0.17mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(甲醇40％-70％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体1-苄基-N-[4-甲基-5-氧代基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000775
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(30mg，43％)。
将外消旋苄基-N-[4-甲基-5-氧代基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000776
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(30mg，0.07mmol)经手性SFC分离，得到任意指定的：
白色固体1-苄基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000777
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(峰1&2，保留时间＝1.698&1.732min)(10mg，33％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.56(s,1H)，7.38–7.32(m,5H)，6.17(s,1H)，5.47(s,2H)，4.53–4.49(m,1H)，4.37–4.30(m,1H)，4.26–4.18(m,1H)，3.91–3.84(m,2H)，3.79–3.72(m,1H)，3.50–3.46(m,1H)，3.33(s,3H)，2.87–2.81(m,1H)，2.71–2.66(m,2H)，2.63–2.56(m,1H)，2.30–2.21(m,1H)，2.12–2.05(m,1H)，1.70–1.66(m,1H)。LC-MS RT＝1.486min，m/z＝450.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.05％氢氧化铵历时3分钟)保留时间1.486min，ESI+实测值[M+H]＝450.2。
实施例#20
Figure BDA0002094593770000781
1-苄基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000784
-6-基]-
1,2,4-三唑-3-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000782
步骤1：3-氨基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
在-10℃向3-氨基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(30.0g，193.4mmol)在50％硫酸(300mL)中的溶液中加入硝酸钠(24.0g，348.1mmol)在水(45mL)中的溶液。将混合物搅拌1小时，然后加入碘化钾(102.7g，618.8mmol)在水(50mL)中的溶液。将反应在-10℃搅拌6小时并倒入水(200mL)中。将所得混合物以二氯甲烷(3×100mL)萃取。将合并的有机层以饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)、饱和硫代硫酸钠水溶液(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体3-碘-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(19.0g，37％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000783
步骤2：3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯和5-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
将3-碘-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(17.0g，63.9mmol)、碳酸铯(41.6g，127.8mmol)和甲基碘(6.0mL，95.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(200mL)中的混合物在60℃加热15小时并过滤。将滤液减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体3-碘-1-甲基-吡唑-4-甲酸乙酯(7.5g，42％)和白色固体5-碘-1-甲基-吡唑-4-甲酸乙酯(7.5g，42％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000791
步骤3：3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
将3-碘-1-甲基-吡唑-4-甲酸乙酯(5.0g，17.8mmol)和氢氧化锂(4.3g，178mmol)在四氢呋喃(30mL)和水(30mL)中的混合物在25℃搅拌15小时并减压浓缩。向残留物加入盐酸(2N)调至pH＝5。过滤收集所形成的固体，以水(20mL)洗涤并减压干燥，得到白色固体粗3-碘-1-甲基-吡唑-4-甲酸(3.0g，67％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000792
步骤4：(3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯
向3-碘-1-甲基-吡唑-4-甲酸(3.0g，11.9mmol)在叔丁醇(100mL)中的搅拌溶液中加入三乙胺(1.8g，17.9mmol)、二苯基磷酰基叠氮化物(3.6g，13.1mmol)。加入后，将混合物在100℃搅拌15小时。将反应混合物冷却然后用冰水(200mL)稀释。将所得溶液以二氯甲烷(2×200mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体N-(3-碘-1-甲基-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g，47％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(s,1H)，7.63(br s,1H)，3.79(s,3H)，1.43(s,9H)。
Figure BDA0002094593770000793
步骤5：4-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)丁-3-烯酸甲酯
将N-(5-碘-1-甲基-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.50g，4.64mmol)、3-丁烯酸甲酯(1.39g，13.9mmol)、碳酸氢钠(1.17g，13.9mmol)和二氯钯；双环己基-[2-(2，4，6-三异丙基-3-苯基-苯基)苯基]膦(phosphane)(298mg，0.2mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物在120℃加热24小时。冷却后，将混合物倒入水(20mL)中并以乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体4-[4-(叔-丁氧基羰基氨基)-2-甲基-吡唑-3-基]丁-3-烯酸甲酯(700mg，51％)。LCMS RT＝0.710min，m/z＝296.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.710min，ESI+实测值[M+H]＝296.0。
Figure BDA0002094593770000801
步骤6：4-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)丁酸甲酯
将4-[4-(叔-丁氧基羰基氨基)-1-甲基-吡唑-3-基]丁-3-烯酸甲酯(700mg，2.38mmol)和钯(10％于碳上，100mg)在甲醇(60mL)中的混合物在25℃氢化(15psi)4小时，然后过滤。将滤液减压浓缩，得到黄色油状粗4-[4-(叔-丁氧基羰基氨基)-1-甲基-吡唑-3-基]丁酸甲酯(700mg，99％)，在下一步中按原样使用。LCMS RT＝0.719min，m/z＝298.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.719min，ESI+实测值[M+H]＝298.1。
Figure BDA0002094593770000802
步骤7：4-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-3-基)丁酸甲酯
向4-[4-(叔-丁氧基羰基氨基)-1-甲基-吡唑-3-基]丁酸甲酯(600mg，2.02mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(230mg)。将反应混合物在25℃搅拌15小时并减压浓缩，得到黄色油状粗4-(4-氨基-1-甲基-吡唑-3-基)丁酸甲酯(300mg，75％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000803
步骤8：2-甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000804
-5(2H)-酮
将4-(4-氨基-1-甲基-吡唑-3-基)丁酸甲酯(300mg，1.52mmol)和碳酸钾(420mg，3.04mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在25℃搅拌24小时并过滤。将滤液减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至100％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到浅黄色油状2-甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000814
-5-酮(229mg，80％)。LC-MS RT＝1.102min，m/z＝204.1[M+K]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.102min，ESI+实测值[M+K]＝204.1。
Figure BDA0002094593770000811
步骤9：2,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000815
-5(2H)-酮
向2-甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000816
-5-酮(229mg，1.39mmol)和碳酸铯(542mg，1.66mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物加入碘甲烷(217mg，1.53mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时并倒入水(20mL)中。将混合物用二氯甲烷/异丙醇(3:1，2×20mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到棕色固体粗2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000817
-5-酮(200mg，80％)，在下一步中按原样使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.19(s,1H)，3.84(s,4H)，3.23(s,3H)，2.85(t,J＝7.4Hz,2H)，2.55–2.47(m,2H)，2.22–2.12(m,2H)。
Figure BDA0002094593770000812
步骤10：6-碘-2,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000818
-5(2H)-酮
在-15℃向2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000819
-5-酮(200mg，1.10mmol)在二氯甲烷(40mL)中的溶液中加入N1,N1,N2,N2-四甲基乙烷-1,2-二胺(1.56g，13.39mmol)和三甲基碘硅烷(1.34g，6.70mmol)。将混合物在-15℃搅拌2小时并加入碘(3.4g，13.40mmol)。加入后，将混合物搅拌2小时并加入饱和亚硫酸钠水溶液(50mL)猝灭。将所得混合物用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经制备型TLC(100％乙酸乙酯)纯化，得到浅黄色固体6-碘-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700008110
-5-酮(200mg，59％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000813
步骤11：6-叠氮基-2,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000822
-5(2H)-酮
向6-碘-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000823
-5-酮(200mg，0.66mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液中加入叠氮化钠(128mg，1.97mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时并用冰水(5mL)稀释。将所得溶液用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层减压浓缩。将残留物经制备型TLC(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状6-叠氮基-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000824
-5-酮(140mg，97％)。LCMS RT＝0.534min，m/z＝221.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.534min，ESI+实测值[M+H]＝221.0。
Figure BDA0002094593770000821
步骤12：(S)-6-氨基-2,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000825
-5(2H)-酮和(R)-6-氨基-2,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000826
-5(2H)-酮
将6-叠氮基-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000827
-5-酮(140mg，0.64mmol)和钯(10％于碳上，68mg)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物在25℃氢化(15psi)1小时并过滤。将滤液减压浓缩，得到浅黄色油状粗6-氨基-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000828
-5-酮(100mg，81％)。LC-MS RT＝1.050min，m/z＝195.2[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％碳酸氢铵历时3.0分钟)保留时间1.050min，ESI+实测值[M+H]＝195.2。
将外消旋6-氨基-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000829
-5-酮(100mg，0.51mmol)经手性SFC分离，得到任意指定的：黄色油状(6S)-6-氨基-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700008210
-5-酮(峰1，保留时间＝2.604min)(35mg，35％)。
黄色油状(6R)-6-氨基-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700008211
-5-酮(峰2，保留时间＝3.285min)(35mg，35％)。
SFC条件：柱：Chiralpak AS-3 150×4.6mm I.D.，3μm，流动相：A：CO2
B：乙醇(0.05％DEA)，梯度：5分钟内B从5％至40％并保持40％2.5min，然后保持B5％2.5min，流速：2.5mL/min，柱温：35℃。
Figure BDA0002094593770000831
步骤13：1-苄基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000833
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
将1-苄基-1,2,4-三唑-3-甲酸(16mg，0.08mmol)、(6S)-6-氨基-2,4-二甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000834
-5-酮(15mg，0.08mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(15mg，0.08mmol)和1-羟基苯并三唑(10mg，0.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在30℃搅拌2小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈22-50％/0.05％盐酸水溶液)纯化，得到白色固体1-苄基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000835
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(16.3mg，56％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.81(s,1H)，7.84(s,1H)，7.38–7.33(m,5H)，5.51(s,2H)，4.73–4.68(m,1H)，3.93(s,3H)，3.31(s,3H)，3.00–2.90(m,2H)，2.50–2.45(m,1H)，2.27–2.22(m,1H)。LCMS RT＝1.088min，m/z＝380.2[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间1.088min，ESI+实测值[M+H]＝380.2.
实施例#21
Figure BDA0002094593770000832
1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000836
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
采用与实施例#20中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈22-50％/0.05％盐酸水溶液)纯化，得到白色固体1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000837
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(13.9mg，45％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.84(s,1H)，7.88(s,1H)，7.42–7.40(m,2H)，7.23–7.16(m,2H)，5.59(s,2H)，4.72–4.68(m,1H)，3.93(s,3H)，3.32(s,3H)，3.06–2.89(m,2H)，2.53–2.43(m,1H)，2.32–2.21(m,1H).LCMSRT＝1.095min，m/z＝398.3[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间1.095min，ESI+实测值[M+H]＝398.3。
实施例#22
Figure BDA0002094593770000841
1-苄基-N-[(6S)-1，4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000844
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
Figure BDA0002094593770000842
步骤1：5-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
将5-碘-1-甲基-吡唑-4-甲酸乙酯(7.5g，26.8mmol)和氢氧化锂(6.4g，268.0mmol)在四氢呋喃(100mL)和水(100mL)中的混合物在25℃搅拌15小时并减压浓缩。向残留物加入盐酸(2N)调至pH＝5。通过过滤收集形成的固体，以水(20mL)洗涤并真空干燥，得到白色固体粗5-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(6.0g，89％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000843
步骤2：(5-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯
向5-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(3.0g，11.9mmol)在叔-丁醇(120mL)中的搅拌溶液中加入三乙胺(1.8g，17.9mmol)和二苯基磷酰基叠氮化物(3.6g，13.1mmol)。将反应混合物在100℃加热15小时并冷却。将混合物用冰水(200mL)稀释并以二氯甲烷(2×200mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干杂并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体(5-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g，47％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H)，7.42(br s,1H)，3.79(s,3H)，1.43(s,9H)。
Figure BDA0002094593770000851
步骤3：(E)-4-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)丁-3-烯酸甲酯
将(5-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g，5.57mmol)、3-丁烯酸甲酯(1.67g，16.7mmol)、碳酸氢钠(1.4g，16.7mmol)和二氯钯双环己基-[2-(2,4,6-三异丙基-3-苯基-苯基)苯基]膦(178mg，0.14mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(33mL)中的混合物在110℃、微波条件下加热40分钟。将混合物倒入水(20mL)中并以乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至70％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体(E)-4-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)丁-3-烯酸甲酯(990mg，60％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40(br s,1H)，3.77(s,3H)，3.65(s,3H)，2.70–2.65(m,2H)，2.38–2.34(m,2H)，1.89–1.81(m,2H)，1.49(s,9H)。
Figure BDA0002094593770000852
步骤4：4-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)丁酸甲酯
将(E)-4-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)丁-3-烯酸甲酯(990mg，3.35mmol)和钯(10％于碳上，100mg)在甲醇(50mL)中的混合物在25℃氢化(15psi)4小时并过滤。将滤液减压浓缩，得到黄色油状粗4-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)丁酸甲酯(970mg，97％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000853
步骤5：1-甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000854
-5(1H)-酮
向4-(4-((叔-丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)丁酸甲酯(970mg，3.26mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(1mL)。将反应混合物在25℃搅拌15分钟并减压浓缩，得到黄色油状粗4-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)丁酸甲酯。
将上述粗产物溶解于甲醇(15mL)中并加入碳酸钾(4.5g，32.62mmol)。将混合物在25℃搅拌18小时，然后过滤。将滤液减压浓缩。将残留物经制备型TLC(10％甲醇的二氯甲烷溶液，Rf＝0.4)纯化，得到白色固体1-甲基-4，6，7，8-四氢吡唑并[4，3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000863
-5-酮(330mg，61％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000861
步骤6：1，4-二甲基-4，6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000864
-5(1H)-酮
向1-甲基-4,6，7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000865
-5(1H)-酮(290mg，1.76mmol)和碳酸铯(686mg，2.10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物加入碘甲烷(274mg，1.93mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时，然后倒入水(20mL)中。将混合物用二氯甲烷/异丙醇(3:1，2×20mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到棕色固体粗1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000866
-5(1H)-酮(216mg，69％)，在下一步中按原样使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31(s,1H)，3.75(s,3H)，3.28(s,3H)，2.82–2.80(m,2H)，2.61–2.54(m,2H)，2.18–2.10(m,2H)。
Figure BDA0002094593770000862
步骤7：6-碘-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000867
-5(1H)-酮
在-15℃向1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000868
-5(1H)-酮(216mg，1.2mmol)在二氯甲烷(40mL)中的溶液中加入N1,N1,N2,N2-四甲基乙烷-1,2-二胺(840mg，7.2mmol)和三甲基碘硅烷(1.44g，7.2mmol)。将混合物在-15℃搅拌2小时，然后加入碘(3.7g，14.6mmol)。将混合物在-15℃搅拌另外2小时，然后加入饱和亚硫酸钠水溶液(50mL)猝灭。将所得混合物用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并减压浓缩。将残留物经制备型TLC(100％乙酸乙酯)纯化，得到浅黄色固体6-碘-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000869
-5(1H)-酮(250mg，68％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31(s,1H)，5.06–5.03(m,1H)，3.78(s,3H)，3.33(s,3H)，3.00–2.93(m,2H)，2.33–2.30(m,1H)，2.08–2.30(m,1H)。
Figure BDA0002094593770000871
步骤8：6-叠氮基-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000874
-5(1H)-酮
向6-碘-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000875
-5(1H)-酮(250mg，0.82mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入叠氮化钠(160mg，2.46mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时并用冰水(5mL)稀释。将混合物以乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层减压浓缩。将残留物经制备型TLC(50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色油状6-叠氮基-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000876
-5(1H)-酮(180mg，99％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000872
步骤9：(S)-6-氨基-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000877
-5(1H)-酮和(R)-6-氨基-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000878
-5(1H)-酮
将6-叠氮基-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000879
-5(1H)-酮(180mg，0.82mmol)和钯(10％于碳上，9mg)在乙醇(10mL)中的混合物在25℃氢化(15psi)1小时，然后过滤。将滤液减压浓缩，得到粗6-氨基-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700008710
-5(1H)-酮。
将上述粗产物经手性SFC分离，得到任意指定的：黄色油状(S)-6-氨基-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700008711
-5(1H)-酮(峰1，保留时间＝3.123min)(52mg，33％)。
黄色油状(R)-6-氨基-1,4-二甲基-4,6,7,8-四氢吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA00020945937700008712
-5(1H)-酮(峰2，保留时间＝6.449min)(53mg，33％)。
SFC条件：柱：Lux Cellulose-2 150×4.6mm I.D.，3μm，流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)，梯度：CO2中40％的乙醇(0.05％DEA)，流速：2.5mL/min，柱温：35℃。
Figure BDA0002094593770000873
步骤10：1-苄基-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7，8-二氢-6H-吡唑并[4，3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000882
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
将(6S)-6-氨基-1，4-二甲基-7，8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000883
-5-酮(15mg，0.08mmol)、1-羟基苯并三唑(10mg，0.08mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(22mg，0.12mmol)和1-[(2-氟苯基)甲基]-1,2,4-三唑-3-甲酸(17mg，0.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的混合物在30℃搅拌2小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈24-54％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体1-苄基-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000884
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(8.32mg，27％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.56(s,1H)，7.48(s,1H)，7.35–7.31(m,5H)，5.46(s,2H)，4.59–4.55(m,1H)，3.77(s,3H)，3.28(s,3H)，3.13–3.10(m,1H)，2.95–2.92(m,1H)，2.41–2.40(m,1H)，2.19–2.16(m,1H).LCMS RT＝1.875min，m/z＝380.2[M+H]+。LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间1.875min，ESI+实测值[M+H]＝380.2。
实施例#23
Figure BDA0002094593770000881
1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000885
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
采用与实施例#22中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈24-54％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure BDA0002094593770000886
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(8.32mg，27％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.57(s,1H)，7.48(s,1H)，7.37(t,J＝6.8Hz,2H)，7.22–7.09(m,2H)，5.54(s,2H)，4.59–4.55(m,1H)，3.77(s,3H)，3.33(s,3H)，3.18–3.07(m,1H)，2.97–2.86(m,1H)，2.47–2.36(m,1H)，2.23–2.10(m,1H).LCMS RT＝1.433min，m/z＝398.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间1.433min，ESI+实测值[M+H]＝398.1。
实施例#24
Figure BDA0002094593770000891
步骤1：(E)-苯甲醛肟
Figure BDA0002094593770000892
向苯甲醛(45.0g，424.1mmol)在乙醇(100mL)中的溶液中加入碳酸钠(112.3g，1060.1mmol)和盐酸羟胺(35.3g，508.9mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时并过滤。将滤液减压浓缩并将残留物用水(50mL)稀释。将所得混合物以乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机层以盐水(60mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到无色油状粗(E)-苯甲醛肟(51.0g，99％)，不经进一步纯化即用于下一步。
Figure BDA0002094593770000893
步骤2：3-苯基-4,5-二氢异噁唑-5-甲酸甲酯
向(E)-苯甲醛肟(20.0g，165.1mmol)在1,4-二噁烷(500mL)中的溶液中加入丙烯酸甲酯(14.2g，165.1mmol)、碘化钠(24.7g，165.1mmol)、2,6-二甲基吡啶(17.6g，165.1mmol)和次氯酸(hypochlorous acid)叔丁酯(17.9g，165.1mmol)。将反应混合物在25℃搅拌24小时并随后减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至20％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到黄色固体3-苯基-4,5-二氢异噁唑-5-甲酸甲酯(25.0g，74％)。LCMSRT＝0.871min，m/z＝206.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0分钟)保留时间0.871min，ESI+实测值[M+H]＝206.2。
Figure BDA0002094593770000894
步骤3：3-羟基-5-苯基-吡咯烷-2-酮
将3-苯基-4,5-二氢异噁唑-5-甲酸甲酯(25.0g，121.8mmol)和钯(10％于碳上，2.5g)在乙醇(800mL)中的混合物在25℃氢化(50psi)2小时，然后过滤并将滤液减压浓缩，得到黄色固体粗3-羟基-5-苯基-吡咯烷-2-酮(18.0g，83％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMS RT＝0.270min，m/z＝177.8[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.270min，ESI+实测值[M+H]＝177.8。
Figure BDA0002094593770000901
步骤4：顺-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-吡咯烷-2-酮和反式-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-吡咯烷-2-酮
向3-羟基-5-苯基-吡咯烷-2-酮(15.0g，84.6mmol)在二氯甲烷(300mL)中的溶液中加入叔-丁基二甲基氯硅烷(19.1g，126.9mmol)和咪唑(11.5g，169.3mmol)。将反应混合物在25℃搅拌16小时并随后减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至30％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到顺-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-吡咯烷基-2-酮(12.4g，51％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37–7.25(m,5H)，4.88–4.53(m,1H)，4.54–4.46(m,1H)，2.89–2.79(m,1H)，1.80–1.71(m,1H)，0.93–0.90(m,9H)，0.19–0.12(m,6H)和
无色油状反式-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-吡咯烷基-2-酮(9.3g，38％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.44–7.34(m,2H)，7.29–7.24(m,3H)，4.87–4.80(m,1H)，4.44–4.41(m,1H)，2.45–2.37(m,1H)，2.27–2.22(m,1H)，0.93–0.90(m,9H)，0.16–0.13(m,6H)。
Figure BDA0002094593770000902
步骤5：顺-1-氨基-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-吡咯烷-2-酮
在0℃向顺-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-吡咯烷基-2-酮(12.4g，42.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(400mL)中的溶液中缓慢加入氢化钠(60％，2.6g，64.1mmol)。加入后，将混合物在0℃搅拌20分钟并随后加入O-(二苯基磷酰基)羟胺(O-(diphenylphosphoryl)hydroxylamine)(14.9g，64.1mmol)。将反应混合物在25℃搅拌16小时，然后过滤。将滤液减压浓缩，得到黄色油状粗顺-1-氨基-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-吡咯烷-2-酮(9.5g，73％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMS RT＝0.877min，m/z＝307.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.877min，ESI+实测值[M+H]＝307.0。
Figure BDA0002094593770000911
步骤6：2-[[顺-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-氧代基-5-苯基-吡咯烷-1-基]氨基]-2-亚氨基-乙酸乙酯
向顺-1-氨基-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-吡咯烷-2-酮(9.5g，31.0mmol)在乙醇(250mL)中的溶液中加入2-乙氧基-2-亚氨基-乙酸乙酯(6.7g，46.5mmol)。将反应混合物在60℃搅拌6小时并随后减压浓缩，得到黄色油状粗2-[[顺-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-氧代基-5-苯基-吡咯烷基-1-基]氨基]-2-亚氨基-乙酸乙酯(10.6g，84％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMS RT＝2.106min，m/z＝406.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.1％氨水历时3.0分钟)保留时间2.106min，ESI+实测值[M+H]＝406.2。
Figure BDA0002094593770000912
步骤7：顺-7-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
向2-[[顺-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-氧代基-5-苯基-吡咯烷-1-基]氨基]-2-亚氨基-乙酸乙酯(10.6g，26.1mmol)在甲苯(200mL)中的溶液中加入对甲苯磺酸(4.5g，26.1mmol)。将反应混合物在120℃加热24小时并随后减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至80％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体顺-7-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(6.5g，64％)，在下一步中按原样使用。
Figure BDA0002094593770000921
步骤8：顺-7-羟基-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
将2-[[顺-3-[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-氧代基-5-苯基-吡咯烷-1-基]氨基]-2-亚氨基-乙酸乙酯(3.1g，7.6mmol)和叔-丁基氟化铵(1.0M的THF溶液，7.6mL，7.6mmol)在四氢呋喃(60mL)中的混合物在60℃加热18小时并随后减压浓缩。将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至100％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到白色固体顺-7-羟基-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(1.4g，69％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39–7.32(m,5H)，5.73(d,J＝3.5Hz,1H)，5.50(m,1H)，4.41(q,J＝7.1Hz,2H)，3.73–3.65(m，1H)，2.76(td，J＝4.5Hz，13.9Hz，1H)，1.35(t，J＝7.1Hz，3H)。
Figure BDA0002094593770000922
步骤9：7-氧代基-5-苯基-5,6-二氢吡咯并[1，2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
向顺-7-羟基-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(1.0g，3.6mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中加入二氧化锰(0.9g，10.9mmol)。将混合物加热回流3小时并随后过滤。将滤液减压浓缩并将残留物经柱色谱(硅胶，100-200目，0至50％乙酸乙酯的石油醚溶液)纯化，得到粉色固体7-氧代基-5-苯基-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(350mg，35％)。LCMS RT＝0.725min，m/z＝271.9[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.725min，ESI+实测值[M+H]＝271.9。
Figure BDA0002094593770000931
步骤10：7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯
在0℃向7-氧代基-5-苯基-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(300mg，1.1mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入二乙氨基三氟化硫(1.78g，11.1mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时并随后加入冰水(20mL)猝灭。将混合物以二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色油状粗7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(280mg，86％)，不经进一步纯化即用于下一步。LCMS RT＝0.834min，m/z＝294.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.834min，ESI+实测值[M+H]＝294.1。
Figure BDA0002094593770000932
步骤11：7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸
向7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸乙酯(280mg，0.95mmol)在四氢呋喃(10mL)和水(2mL)中的溶液中加入一水合氢氧化锂(200mg，4.8mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时并随后减压浓缩。向残留物加入盐酸(2N)调至pH＝5。将所得混合物以乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到黄色固体粗7,7-二氟-5-苯基-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(240mg，95％)，不经进一步纯化即用于下一步。
步骤12：7,7-二氟-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000933
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将7,7-二氟-5-苯基-5，6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2，4]三唑-2-甲酸(30mg，0.11mmol)、1-羟基苯并三唑(23mg，0.17mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(33mg，0.17mmol)和(3S)-3-氨基-7,9-二氟-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000942
-2-酮(29mg，0.14mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈42-72％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体7,7-二氟-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000943
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(32.0mg，62％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.44–7.38(m,3H)，7.27–7.25(m，2H)，7.02–6.97(m,2H)，5.57–5.53(m，1H)，5.02–5.97(m,1H)，3.88–3.80(m,1H)，3.30–3.20(m,1H)，2.98–2.96(m,1H)，2.84–2.80(m,1H)，2.65–2.61(m,1H)，2.26–2.23(m,1H)。LCMS：RT＝0.736min，m/z＝460.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.736min，ESI+实测值[M+H]＝460.1.
实施例#25
Figure BDA0002094593770000941
7,7-二氟-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000944
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#24中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈44-74％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体7,7-二氟-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000945
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(29.5mg，59％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.44–7.41(m,4H)，7.31–7.21(m,5H)，5.91–5.87(m,1H)，5.02–5.97(m,1H)，4.57–4.54(m,1H)，4.47–4.44(m,1H)，3.87–3.81(m,2H)，3.41(s,3H)。LCMS：RT＝0.749min，m/z＝440.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.1％甲酸历时1.5分钟)保留时间：0.749min，ESI+实测值[M+H]＝440.1。
实施例#26
Figure BDA0002094593770000951
7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1，5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000953
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1，2，4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#24中类似方法制备。将7-氟代-5-苯基-6，7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(20mg，0.08mmol)、1-羟基苯并三唑(16mg，0.12mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(23mg，0.12mmol)和(6S)-6-氨基-4-甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000954
-5-酮(17mg，0.10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈22-52％/0.05％氢氧化铵)纯化，得到白色固体7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000955
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(15mg，45％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.52(d,J＝4.0Hz,1H)，7.41–7.39(m,3H)，7.28–7.25(m,2H)，6.30(d,J＝2.0Hz,1H)，6.26–6.24(m,0.5H),6.12–6.10(m,0.5H)，5.85–5.82(m,1H)，5.51–4.48(m,1H)，4.43–4.39(m,1H)，4.31–4.25(m,1H)，3.41–3.35(m,1H)，3.31(s,3H)，3.17–3.09(m,1H)，2.84–2.79(m,1H)，2.30–2.25(m,1H)。LCMS RT＝0.763min，m/z＝410.0[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间：0.763min，ESI+实测值[M+H]＝410.0。
实施例#27
Figure BDA0002094593770000952
7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000956
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#26中类似方法制备。将7-氟代-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(20mg，0.08mmol)、1-羟基苯并三唑(16mg，0.12mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(23mg，0.12mmol)和(3S)-3-氨基-7,9-二氟-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000962
-2-酮(20mg，0.10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈35-65％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000963
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(13mg，36％)。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ7.41–7.38(m,3H)，7.28–7.25(m,2H)，7.02–6.97(m,2H)，6.26–6.24(m,0.5H)，6.12–6.10(m,0.5H)，5.86–5.82(m,1H)，4.59–4.54(m,1H)，3.46–3.36(m,1H)，2.99–2.96(m,1H)，2.84–2.82(m,1H)，2.81–2.78(m,1H)，2.66–2.62(m,1H)，2.24–2.18(m,1H)。LCMS RT＝0.832min，m/z＝442.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间：0.832min，ESI+实测值[M+H]＝442.1。
实施例#28
Figure BDA0002094593770000961
7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000964
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#26中类似方法制备。将7-氟代-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(20mg，0.08mmol)、1-羟基苯并三唑(16mg，0.12mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(23mg，0.12mmol)和(3S)-3-氨基-5-甲基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000965
-4-酮(19mg，0.10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈37-67％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000966
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(15mg，44％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.41–7.38(m,4H)，7.32–7.23(m,5H)，6.26–6.24(m,0.5H)，6.12–6.10(m,0.5H)，5.86–5.82(m,1H)，5.03–4.97(m,1H)，4.61–4.56(m,1H)，4.42–4.39(m,1H)，3.43–3.35(m,4H)，3.17–3.06(m,1H)。LCMS RT＝0.855min，m/z＝422.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间：0.855min，ESI+实测值[M+H]＝422.1。
实施例#29
(顺式混合物)
Figure BDA0002094593770000971
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000972
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#26中类似方法制备。将(6S)-6-氨基-4-甲基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000973
-5-酮(13mg，0.07mmol)、1-羟基苯并三唑(12mg，0.09mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(17mg，0.09mmol)和外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(18mg，0.07mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌15小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈25-55％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770000974
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(14.7mg，48％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.52(t,J＝2.0Hz,1H)，7.42–7.34(m,3H)，7.26(d,J＝6.4Hz,2H)，6.30(d,J＝2.0Hz,1H)，6.17–6.01(m,1H)，5.70–5.61(m,1H)，4.52–4.48(m,1H)，4.45–4.39(m,1H)，4.31–4.24(m,1H)，3.80–3.69(m,1H)，3.35(s,3H)，2.87–2.75(m,2H)，2.32–2.24(m,1H)。LCMS RT＝1.659min，m/z＝410.3[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时3分钟)保留时间1.659min，ESI+实测值[M+H]＝410.3。
实施例#30
(顺式混合物)
Figure BDA0002094593770000981
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000983
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#29中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈40-70％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到白色固体外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000984
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(15mg，48％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.45–7.34(m,4H)，7.33–7.16(m,5H)，6.17–6.00(m,1H)，5.70–5.60(m,1H)，4.99(dd,J＝7.6,11.2Hz,1H)，4.56–4.54(m,1H)，4.44–4.40(m,1H)，3.81–3.67(m,1H)，3.39(s,3H)，2.85–2.73(m,1H)。LCMS RT＝1.886min，m/z＝422.2[M+H]+。
LCMS(0至60％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时3分钟)保留时间1.886min，ESI+实测值[M+H]＝422.2。
实施例#31
(反式混合物)
Figure BDA0002094593770000982
外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000985
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#29中类似方法制备。将反式-7-氟代-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(60mg，0.24mmol)、1-羟基苯并三唑(34mg，0.25mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(70mg，0.36mmol)和(3S)-3-氨基-7,9-二氟-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000986
-2-酮(77mg，0.36mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在25℃搅拌15小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈50至60％/0.05％氢氧化铵)纯化，得到白色固体外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770000992
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(5.5mg，5％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.42–7.34(m,3H)，7.26–7.23(m,2H)，7.01–6.92(m,2H)，6.23(d,J＝5.6Hz,0.5H)，6.09(d,J＝5.2Hz,0.5H)，5.84–5.79(m,1H)，4.59–4.52(m,1H)，3.45–3.31(m,1H)，3.17–3.01(m,1H)，3.00–2.89(m,1H)，2.82–2.76(m,1H)，2.67–2.55(m,1H)，2.25–2.16(m,1H)。LCMS RT＝1.009min，m/z 442.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0min)保留时间1.009min，ESI+实测值[M+H]＝442.2。
实施例#32
(反式混合物)
Figure BDA0002094593770000991
外消旋-(5R,7S)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1，5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000993
-3-基]-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-b][1，2，4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#31中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈46-56％/0.225％甲酸的水溶液)纯化，得到白色固体外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2，3-二氢-1，5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770000994
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1，2-b][1，2,4]三唑-2-甲酰胺(7.8mg，8％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.42–7.36(m,4H)，7.31–7.24(m,4H)，7.22–7.18(m,1H)，6.23(d,J＝6.0Hz,0.5H)，6.10(d,J＝6.4Hz,0.5H)，5.87–5.80(m,1H)，5.05–4.96(m,1H)，4.56–4.53(m,1H)，4.43–4.34(m,1H)，3.45–3.30(m,4H)，3.17–3.02(m,1H)。LCMS：RT＝1.042min，m/z 422.2[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0min)保留时间1.042min，ESI+实测值[M+H]＝422.2。
实施例#33
Figure BDA0002094593770001001
(5R,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770001002
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
将顺-7-氟代-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酸(50mg，0.20mmol)、(3S)-3-氨基-7,9-二氟-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770001003
-2-酮(52mg，0.24mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(58mg，0.30mmol)和1-羟基苯并三唑(29mg，0.21mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在25℃搅拌15小时。将混合物减压浓缩。将残留物经RP-HPLC(乙腈35-65％/0.05％氢氧化铵水溶液)纯化，得到外消旋-(5R,7R)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770001004
-3-基]-7-氟代-5-苯基-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺，其进一步经手性SFC分离，得到任意指定的：白色固体(5R,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770001005
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰1，保留时间＝2.128min)(4.9mg，5％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.44–7.30(m,3H)，7.29–7.18(m,2H)，7.02–6.92(m,2H)，6.14(dd,J＝2.0,7.2Hz,0.5H)，6.00(dd,J＝2.0,7.2Hz,0.5H)，5.64–5.52(m,1H)，4.57–4.52(m,1H)，3.81–3.62(m,1H)，3.02–2.89(m,1H)，2.86–2.71(m,2H)，2.68–2.53(m,1H)，2.26–2.17(m,1H)。LCMS RT＝1.031min，m/z＝442.3[M+H]+。
LCMS(10至80％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时2.0min)保留时间1.031min，ESI+实测值[M+H]＝442.3。
SFC条件：柱：Chiralpak AS-H 150*4.6mm I.D.，5um，流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)，梯度：保持5％0.5min，然后在3.5分钟内B从5％至40％并保持40％2.5min，然后保持5％的B 1.5min，流速：3mL/min柱温：40℃.
实施例#34
Figure BDA0002094593770001011
(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770001013
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#31中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈35至65％/0.05％氢氧化铵)纯化，得到白色固体外消旋-(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770001014
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(50mg，47％)。将外消旋混合物进一步经手性SFC分离，得到任意指定的：
白色固体(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure BDA0002094593770001015
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰1，保留时间＝1.220)(13.5mg，27％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.41–7.38(m,3H)，7.28–7.25(m,2H)，7.02–6.97(m,2H)，6.26–6.24(m,0.5H)，6.12–6.10(m,0.5H)，5.86–5.82(m,1H)，4.59–4.54(m,1H)，3.46–3.36(m,1H)，2.99–2.96(m,1H)，2.84–2.82(m,1H)，2.81–2.78(m,1H)，2.66–2.62(m,1H)，2.24–2.18(m,1H)。LCMS RT＝0.821min，m/z＝442.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5min)保留时间：0.821min，ESI+实测值[M+H]＝442.1.
SFC条件：柱：Chiralcel OJ-350*4.6mm I.D.，3μm；流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)；梯度：保持5％0.2min，然后在1.4分钟内B从5％升至40％并保持40％1.05min，然后保持B 5％0.35分钟；流速：4mL/min；柱温：40℃。
实施例#35
Figure BDA0002094593770001012
(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770001016
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#31中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈37至67％/0.05％氢氧化铵)纯化，得到白色固体外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770001022
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(50mg，49％)。将外消旋混合物进一步经手性SFC分离，得到任意指定的：
白色固体(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2，3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770001023
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰1，保留时间＝1.188)(18.6mg，38％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.41–7.38(m,4H)，7.32–7.23(m,5H)，6.26–6.24(m,0.5H)，6.12–6.10(m,0.5H)，5.86–5.82(m,1H)，5.03–4.97(m,1H)，4.61–4.56(m,1H)，4.42–4.39(m,1H)，3.43–3.35(m,4H)，3.17–3.06(m,1H)。LCMS RT＝0.849min，m/z＝422.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间：0.849min，ESI+实测值[M+H]＝422.1.
SFC条件：柱：Chiralcel OJ-350*4.6mm I.D.，3μm；流动相：A：CO2B：乙醇(0.05％DEA)梯度：保持B 5％0.2min，然后1.4分钟内B从5％至40％并保持40％1.05min，然后保持5％B 0.35分钟；流速：4mL/min；柱温：40℃。
实施例#36
Figure BDA0002094593770001021
(5R，7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001024
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1，2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#31中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈22至52％/0.05％氢氧化铵)纯化，得到白色固体外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7，8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001025
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(50mg，50％)。将外消旋混合物进一步经SFC分离，得到任意指定的：
白色固体(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001026
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰2，保留时间＝1.274min)(18mg，38％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.51(d,J＝2.0Hz,1H)，7.45–7.38(m,3H)，7.35–7.25(m,2H)，6.29(d,J＝2.4Hz,1H)，6.26–6.23(m,0.5H)，6.12–6.10(m,0.5H)，5.85–5.83(m,1H)，4.52–4.46(m,1H)，4.46–4.38(m,1H)，4.33–4.20(m,1H)，3.48–3.32(m,1H)，3.31(s,3H)，3.19–3.04(m,1H)，2.88–2.72(m,1H)，2.98–2.26(m,1H)。LCMS RT＝0.765min，m/z＝410.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间0.765min，ESI+实测值[M+H]＝410.1.
SFC条件：柱：Chiralcel OJ-3 50×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A：CO2B：甲醇(0.05％DEA)；梯度：保持5％0.2min，然后在1.4分钟内B从5％至40％并保持40％1.05min，然后保持5％B 0.35min；流速：4mL/min；柱温：40℃。
实施例#37
Figure BDA0002094593770001031
(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001032
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
采用与实施例#31中类似方法制备。将粗产物经RP-HPLC(乙腈28至58％/0.05％氢氧化铵)纯化，得到白色固体外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001033
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1，2，4]三唑-2-甲酰胺(50mg，49％)。将外消旋混合物进一步经手性SFC分离，得到任意指定的：
白色固体(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001034
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(峰2，保留时间＝1.238min)(16mg，31％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.41–7.38(m,3H)，7.28–7.25(m,2H)，6.26–6.24(m,0.5H)，6.12–6.10(m,1.5H)，5.86–5.82(m,1H)，4.51–4.48(m,1H)，4.31–4.27(m,1H)，4.24–4.20(m,1H)，3.50–3.42(m,1H)，3.31(s,3H)，3.17–3.09(m,1H)，2.84–2.79(m,1H)，2.29–2.20(m,4H)。LCMS RT＝0.783min，m/z＝424.1[M+H]+。
LCMS(5至95％乙腈水溶液+0.03％三氟乙酸历时1.5分钟)保留时间：0.783min，ESI+实测值[M+H]＝424.1。
实施例#38(SFC 1)
Figure BDA0002094593770001041
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001043
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(3.17mg，收率22％)
手性分析
样品名称：82008679SP pk1采集方法7_Isocratic 20％MeOH样品组名称：SP82008679_26_31 PURITY UV波长：PDA Single 254.0nm项目名：2016 Projects\October2016柱：Cellulose-3采集日期：10/27/20169:20:42 AM运行时间：2.5分钟；共溶剂：MeOHw/0.1％NH4OH；注射量：2.00ul；柱温：40.0℃
实施例#39(SFC 2)
Figure BDA0002094593770001042
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7，8-二氢-6H-吡唑并[1，5-a][1，3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001044
-6-基]-6，7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
(3.7mg，收率23％)
手性分析
样品名称：82008726 SP pk1采集方法7_Isocratic 20％MeOH样品组名称：SP82008679_26_31 PURITY UV波长：PDA Single 254.0nm项目名称：2016 Projects\October2016
柱：Cellulose-3；采集日期：10/27/2016 9:26:42 AM；运行时间：2.5分钟；共溶剂：MeOH w/0.1％NH4OH；注射量：2.00ul；柱温：40.0℃
实施例#40(SFC 3)
Figure BDA0002094593770001051
(7.12mg，收率29％)
手性分析
样品名称：82010931 SP pk1采集方法7_Isocratic 20％MeOH样品组名称：SP82008679_26_31 PURITY UV波长：PDA Single 254.0nm；项目名称：2016 Projects\October 2016
柱：Cellulose-3；采集日期：10/27/2016 9:32:39 AM；运行时间：2.5分钟；共溶剂：MeOH w/0.1％NH4OH；注射量：2.00ul；柱温：40.0℃
实施例#41(SFC 4)
Figure BDA0002094593770001052
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001053
-6-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(8.4mg，收率29％)
手性分析
样品名称：81888549 SP PK2采集方法8_Isocratic 30％MeOH样品组名称：SP81888548_9 PURITY UV波长：PDA Single 254.0nm项目名称：2016 Projects\August2016；柱：Chiralpak IC；采集日期：8/30/2016 4:05:13 PM；运行时间：2.5分钟；共溶剂：MeOH w/0.1％NH4OH；注射量：2.00ul；柱温：40.0℃
实施例#42(SFC 5)
Figure BDA0002094593770001061
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770001063
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
(10.8mg，收率36％)
手性分析
样品名称：81888728 SP PK2采集方法8_Isocratic 30％MeOH样品组名称：SP81888727_8 PURITY UV波长：PDA Single 254.0nm项目名称：2016 Projects\August2016；柱：Chiralpak IC；采集日期：8/30/2016 4:19:41 PM；运行时间：2.5分钟；共溶剂：MeOH w/0.1％NH4OH；注射量：2.00ul；柱温：40.0℃
实施例#43(SFC 6)
Figure BDA0002094593770001062
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure BDA0002094593770001064
-6-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺(8mg，收率26％)
手性分析
样品名称：81886337 SP PK2采集方法9_Isocratic 35％MeOH样品组名称：SP81886336_7 PURITY UV波长：PDA Single 254.0nm项目名称：2016Projects\August2016；柱：Chiralpak IC；采集日期：8/29/2016 11:15:50 AM；运行时间：2.5分钟；共溶剂：MeOH w/0.1％NH4OH；注射量：2.00ul；柱温：40.0℃
实施例#44(SFC 7)
Figure BDA0002094593770001071
5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure BDA0002094593770001073
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺
(9.7mg，收率41％)
手性分析
样品名称：81822625 GH pk2采集方法1_Isocratic 15％MeOH样品组名称：GH81822624_5 PURITY UV波长：PDA Single 254.0nm项目名称：2016 Projects\June2016；柱：AD；采集日期：6/20/2016 4:17:34 PM；运行时间：2.5分钟；共溶剂：MeOH w/0.1％NH4OH；注射量：2.00ul；柱温：40.0℃
实施例45：RIP1激酶抑制测定法(生物化学测定法)
如下所述检测本发明化合物抑制RIP1K活性的能力。
酶测定法：使用Transcreener ADP(腺苷-5’-二磷酸)测定法(BellBrook Labs)监测受体相互作用蛋白激酶(RIPK1)催化腺苷-5’-三磷酸(ATP)水解的能力。将衍生自杆状病毒感染的昆虫细胞表达系统的纯化的人类RIP1激酶结构域(2-375)(50nM)与测试化合物在含有30mM MgCl2、1mM二硫苏糖醇、50μM ATP、0.002％Brij-35和0.5％二甲基亚砜(DMSO)的50mM Hepes缓冲液(pH7.5)中孵育2小时。反应通过加入1×Bell Brooks Stop缓冲液B(20mM Hepes(ph7.5)、40mM乙二胺四乙酸和0.02％Brij-35)猝灭，所述缓冲液B包含另外的12mM EDTA和55μg/mL ADP2抗体及4nM
Figure BDA0002094593770001074
633示踪剂。与抗体相连的示踪剂被RIP1K反应中产生的ADP置换，这导致荧光偏振的降低，其通过FP微板读数器M1000在633nm处激光激发而测量。将分步活性(Fractional activity)对测试品浓度作图。使用Genedata Screener软件(Genedata；Basel,Switzerland)将数据拟合至紧密结合表观抑制常数(Ki app)Morrison方程[Williams,J.W.和Morrison,J.F.(1979)The kinetics ofreversible tight-binding inhibition.Methods Enzymol 63:437-67]。将下述方程用于计算分步活性及Ki app：
Figure BDA0002094593770001072
其中[E]T和[I]T分别是活性酶和测试品的总浓度。
示例性本发明化合物提供在下表中，及其生理化学特征和体外RIP1激酶抑制活性数据。每个表第一列中的“方法”意指用于制备上述实施例中展示的每个化合物的合成方法。在某些实例中，提供某些立体异构体的手性柱保留时间(min)。
表1
Figure BDA0002094593770001081
Figure BDA0002094593770001091
Figure BDA0002094593770001101
Figure BDA0002094593770001111
Figure BDA0002094593770001121
Figure BDA0002094593770001131
Figure BDA0002094593770001141
Figure BDA0002094593770001151
Figure BDA0002094593770001161
Figure BDA0002094593770001171
Figure BDA0002094593770001181
Figure BDA0002094593770001191
尽管本发明已经详述以便理解，但显而易见的是可在所附权利要求范围内实施某些改变和修改。所描述实施例应被认为是说明性而非限制性的，且本发明不限于本文给出的细节，而是可以在所附权利要求的范围和等同物之内进行修改。

Claims (6)

1.选自下列的化合物：
Figure FDA0003663613840000011
(5R)-5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure FDA0003663613840000015
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000012
外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000016
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000013
外消旋-(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure FDA0003663613840000017
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000014
(5R,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure FDA0003663613840000018
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000021
1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000026
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000022
1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000027
-3-基]吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000023
(5R)-5-苯基-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000028
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000024
(5R)-5-苯基-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000029
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000025
5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure FDA00036636138400000210
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000031
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000035
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000032
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000036
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000033
(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代基-4,5-二氢-3H-吡啶并[3,4-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000037
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000034
(5S)-5-(2-氟苯基)-N-[(7S)-6-氧代基-5,7,8,9-四氢吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000038
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000041
(5R)-5-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000045
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000042
(4S)-4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000046
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000043
4-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure FDA0003663613840000047
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000044
1-(2,2-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000048
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000051
1-环丙基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000055
-3-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000052
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000056
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000053
(7S)-7-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000057
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000054
(5S)-5-苯基-N-[(7S)-5-甲基-6-氧代基-8,9-二氢-7H-吡啶并[3,2-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000058
-7-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000061
(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure FDA0003663613840000065
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000062
(5S,7R)-7-氟代-5-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000066
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000063
(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000067
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000064
(5R,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000068
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000071
4-苯基-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000075
-3-基]-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000072
7,7-二氟-5-苯基-N-[(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure FDA0003663613840000076
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000073
7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000077
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000074
7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-7,9-二氟-2-氧代基-1,3,4,5-四氢-1-苯并氮杂
Figure FDA0003663613840000078
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000081
7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000086
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000082
7-氟代-5-苯基-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000087
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000083
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000088
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000084
(7S)-7-(2-氟苯基)-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000089
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000085
1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000096
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000091
1-苄基-N-[(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000097
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000092
1-[(2-氟苯基)甲基]-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000098
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000093
1-苄基-N-[(6S)-1,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[4,3-b]氮杂
Figure FDA0003663613840000099
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000094
1-苄基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-2-(四氢呋喃-3-基甲基)-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA00036636138400000910
-6-基]-1,2,4-三唑-3-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000095
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000105
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000101
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000106
-6-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000102
外消旋-(5S,7S)-7-氟代-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000107
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000103
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-2,4-二甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000108
-6-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000104
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000113
-3-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
Figure FDA0003663613840000111
外消旋-(5R)-7,7-二氟-5-苯基-N-[外消旋-(6S)-4-甲基-5-氧代基-7,8-二氢-6H-吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂
Figure FDA0003663613840000114
-6-基]-5,6-二氢吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；和
Figure FDA0003663613840000112
5-(1,1-二氟丙基)-N-[(3S)-5-甲基-4-氧代基-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂
Figure FDA0003663613840000115
-3-基]-6,7-二氢-5H-吡咯并[1,2-b][1,2,4]三唑-2-甲酰胺；
或其药学上可接受的盐。
2.药物组合物，包含权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，及治疗惰性载体。
3.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防疾病或障碍的药物中的用途，其中所述疾病或障碍选自炎症性肠病(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肾、肝和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎、视网膜变性、慢性肾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和慢性阻塞性肺病(COPD)。
4.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防选自局限性回肠炎或溃疡性结肠炎的疾病或障碍的药物中的用途。
5.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗或预防疾病或障碍，其中所述疾病或障碍选自炎症性肠病(IBD)、肠易激惹综合征(IBS)、心肌梗死、中风、创伤性脑损伤、动脉粥样硬化、肾、肝和肺的缺血再灌注损伤、顺铂诱导的肾损伤、败血症、全身炎症反应综合征(SIRS)、胰腺炎、银屑病、色素性视网膜炎、视网膜变性、慢性肾病、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和慢性阻塞性肺病(COPD)。
6.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗或预防选自局限性回肠炎或溃疡性结肠炎的疾病或障碍。
CN201780077539.9A 2016-12-16 2017-12-14 Rip1激酶抑制剂及使用方法 Active CN110072863B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662435567P 2016-12-16 2016-12-16
US62/435,567 2016-12-16
PCT/EP2017/082851 WO2018109097A1 (en) 2016-12-16 2017-12-14 Inhibitors of rip1 kinase and methods of use thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110072863A CN110072863A (zh) 2019-07-30
CN110072863B true CN110072863B (zh) 2022-08-30

Family

ID=60702777

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201780077539.9A Active CN110072863B (zh) 2016-12-16 2017-12-14 Rip1激酶抑制剂及使用方法

Country Status (7)

Country Link
US (1) US11072607B2 (zh)
EP (2) EP3555093B1 (zh)
JP (1) JP7209625B2 (zh)
CN (1) CN110072863B (zh)
AR (1) AR110368A1 (zh)
TW (1) TW201827431A (zh)
WO (1) WO2018109097A1 (zh)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ737297A (en) 2015-07-02 2024-03-22 Hoffmann La Roche Bicyclic lactams and methods of use thereof
JP7349359B2 (ja) 2016-10-17 2023-09-22 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 二環式ピリドンラクタム及びその使用方法。
US11071721B2 (en) * 2016-12-02 2021-07-27 Genentech, Inc. Bicyclic amide compounds and methods of use thereof
US11072607B2 (en) 2016-12-16 2021-07-27 Genentech, Inc. Inhibitors of RIP1 kinase and methods of use thereof
CA3185865A1 (en) 2017-07-14 2019-01-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic ketone compounds and methods of use thereof
PE20211247A1 (es) 2017-10-31 2021-07-13 Hoffmann La Roche Sulfonas y sulfoxidos biciclicos y metodos de usos de los mismos
CN112074519A (zh) * 2018-04-20 2020-12-11 豪夫迈·罗氏有限公司 作为rip1激酶抑制剂用于治疗e.g.肠易激综合征（ibs）的n-[4-氧代-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂-3-基]-5,6-二氢-4h-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺衍生物和有关化合物
CA3099037A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Rip1 inhibitory compounds and methods for making and using the same
PT3788045T (pt) 2018-05-03 2023-06-26 Rigel Pharmaceuticals Inc Compostos inibidores de rip1 e métodos para fazer e usar os mesmos
CN110642874B (zh) * 2018-06-26 2023-03-28 中国科学院上海有机化学研究所 一类细胞坏死抑制剂及其制备方法和用途
US20210292340A1 (en) * 2018-06-26 2021-09-23 Shanghai Institute Of Organic Chemistry, Chinese Academy Of Sciences Cell necrosis inhibitor, preparation method therefor and use thereof
EP3851436A4 (en) 2018-09-10 2022-05-18 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. HETEROAROMATIC AMIDE DERIVATIVE AND MEDICINE CONTAINING THE SAME
EP3908586B1 (en) * 2019-01-11 2022-12-21 F. Hoffmann-La Roche AG Bicyclic pyrrolotriazolr ketone compounds and methods of use thereof
CA3127701C (en) * 2019-01-25 2023-08-15 Beijing Scitech-Mq Pharmaceuticals Limited Acylamino bridged heterocyclic compound, and composition and application thereof
SG11202110376XA (en) 2019-03-19 2021-10-28 Voronoi Inc Heteroaryl derivative, method for producing the same, and pharmaceutical composition comprising same as effective component
CN114761398A (zh) 2019-09-06 2022-07-15 里格尔药品股份有限公司 杂环rip1激酶抑制剂
TW202122397A (zh) 2019-09-06 2021-06-16 美商雷傑製藥公司 Ｒｉｐ１抑制性化合物及用於製備和使用其之方法
US11718612B2 (en) 2019-09-06 2023-08-08 Board Of Regents, The University Of Texas System Inhibitors of receptor interacting protein kinase I for the treatment of disease
AU2020353663A1 (en) 2019-09-27 2022-04-07 Board Of Regents, The University Of Texas System Inhibitors of Receptor Interacting Protein Kinase I for the treatment of disease
JP7395730B2 (ja) 2019-11-07 2023-12-11 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ヘテロ環式ｒｉｐ１阻害化合物
WO2021108198A1 (en) 2019-11-26 2021-06-03 Board Of Regents, The University Of Texas System Inhibitors of receptor interacting protein kinase i for the treatment of disease
TWI824259B (zh) 2020-07-01 2023-12-01 美商雷傑製藥公司 Rip1k抑制劑
WO2023020486A1 (zh) * 2021-08-17 2023-02-23 广州市恒诺康医药科技有限公司 Rip1激酶抑制剂类化合物及其组合物和用途
EP4209213A1 (en) 2022-01-05 2023-07-12 Universität zu Köln Signalling-pathway inhibitor combinations for use in the treatment of cancer diseases

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105121432A (zh) * 2013-02-15 2015-12-02 葛兰素史密斯克莱知识产权发展有限公司 作为激酶抑制剂的杂环酰胺
WO2016027253A1 (en) * 2014-08-21 2016-02-25 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterocyclic amides as rip1 kinase inhibitors as medicaments
WO2017109724A1 (en) * 2015-12-21 2017-06-29 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterocyclic amides as kinase inhibitors
WO2017136727A2 (en) * 2016-02-05 2017-08-10 Denali Therapeutics Inc. Compounds, compositions and methods
CN107849023A (zh) * 2015-07-02 2018-03-27 豪夫迈·罗氏有限公司 二环内酰胺和其应用方法

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
EP0102324A3 (de) 1982-07-29 1984-11-07 Ciba-Geigy Ag Lipide und Tenside in wässriger Phase
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
US5004697A (en) 1987-08-17 1991-04-02 Univ. Of Ca Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier
US5112596A (en) 1990-04-23 1992-05-12 Alkermes, Inc. Method for increasing blood-brain barrier permeability by administering a bradykinin agonist of blood-brain barrier permeability
US5268164A (en) 1990-04-23 1993-12-07 Alkermes, Inc. Increasing blood-brain barrier permeability with permeabilizer peptides
US5206234A (en) 1990-10-22 1993-04-27 Merck & Co., Inc. Benzolactam analogs as antagonists of cck
AU677216B2 (en) 1992-07-27 1997-04-17 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The Targeting of liposomes to the blood-brain barrier
JP4094066B2 (ja) 1996-12-06 2008-06-04 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド インターロイキン−１β変換酵素のインヒビター
US6514221B2 (en) 2000-07-27 2003-02-04 Brigham And Women's Hospital, Inc. Blood-brain barrier opening
WO2002017930A2 (en) 2000-08-30 2002-03-07 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Glucocorticoid blocking agents for increasing blood-brain barrier permeability
GB0021831D0 (en) 2000-09-06 2000-10-18 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US7034036B2 (en) 2000-10-30 2006-04-25 Pain Therapeutics, Inc. Inhibitors of ABC drug transporters at the blood-brain barrier
DE10121982B4 (de) 2001-05-05 2008-01-24 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Nanopartikel aus Protein mit gekoppeltem Apolipoprotein E zur Überwindung der Blut-Hirn-Schranke und Verfahren zu ihrer Herstellung
AU2002322720B2 (en) 2001-07-25 2008-11-13 Raptor Pharmaceutical Inc. Compositions and methods for modulating blood-brain barrier transport
WO2003046222A1 (en) 2001-11-26 2003-06-05 Exelixis, Inc. MAP4Ks AS MODIFIERS OF BRANCHING MORPHOGENESIS AND METHODS OF USE
US20030162695A1 (en) 2002-02-27 2003-08-28 Schatzberg Alan F. Glucocorticoid blocking agents for increasing blood-brain barrier permeability
US7057046B2 (en) 2002-05-20 2006-06-06 Bristol-Myers Squibb Company Lactam glycogen phosphorylase inhibitors and method of use
WO2004037991A2 (en) 2002-10-23 2004-05-06 Exelixis, Inc. Prkcb1 as modifier of branching morphogenesis and methods of use
KR101111477B1 (ko) 2002-12-03 2012-02-23 블랜체트 록펠러 뉴로사이언시즈 인스티튜트 치료제와 연결된 콜레스테롤을 포함하는 접합체
EP1663239A4 (en) 2003-09-10 2008-07-23 Cedars Sinai Medical Center KALIUM CHANNEL-MEDIATED FEEDING OF MEDICINES BY THE BLOOD BRAIN BARRIER
US7390798B2 (en) 2004-09-13 2008-06-24 Merck & Co., Inc. Carboxamide spirolactam CGRP receptor antagonists
JP2009521909A (ja) 2005-12-30 2009-06-11 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ＩＬ−６とＩＬ−６Ｒαの複合体のｇｐ１３０への結合を阻害する抗ＩＬ−６抗体
WO2008011190A1 (en) 2006-07-21 2008-01-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Cgrp receptor antagonists
WO2009140128A2 (en) 2008-05-13 2009-11-19 Irm Llc Compounds and compositions as kinase inhibitors
CA2888805C (en) 2011-10-21 2020-07-14 Massachusetts Eye And Ear Infirmary Methods and compositions for promoting axon regeneration and nerve function
US9611224B2 (en) 2012-07-13 2017-04-04 Hoffmann-La Roche Inc. Antiproliferative benzo [B] azepin-2-ones
CN104470905B (zh) 2012-08-09 2017-09-12 霍夫曼-拉罗奇有限公司 取代的杂‑氮杂*酮化合物
JP2016514693A (ja) 2013-03-15 2016-05-23 プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ ハイブリッド型ネクロトーシス阻害剤
EP2986317A4 (en) 2013-04-15 2016-10-05 Yeda Res & Dev INHIBITION OF RIP KINASES FOR THE TREATMENT OF LYSOSOMAL STORAGE DISEASES
KR20170004814A (ko) 2015-07-02 2017-01-11 주식회사 녹십자 헌터증후군 치료제
US10875876B2 (en) 2015-07-02 2020-12-29 Janssen Sciences Ireland Uc Cyclized sulfamoylarylamide derivatives and the use thereof as medicaments for the treatment of hepatitis B
MA42293A (fr) 2015-07-02 2018-05-09 Janssen Sciences Ireland Uc Composés antibactériens
CN107873032B (zh) 2015-07-02 2020-07-17 豪夫迈·罗氏有限公司 苯并氧氮杂*噁唑烷酮化合物及其使用方法
US10709692B2 (en) 2015-12-04 2020-07-14 Denali Therapeutics Inc. Isoxazolidine derived inhibitors of receptor interacting protein kinase 1 (RIPK1)
KR20180095580A (ko) 2015-12-17 2018-08-27 아스텍스 테라퓨틱스 리미티드 H-pgds 억제제로서의 퀴놀린-3-카르복스아미드
SG11201805092WA (en) 2015-12-23 2018-07-30 Harvard College Cortistatin analogs and uses thereof
JP7349359B2 (ja) 2016-10-17 2023-09-22 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 二環式ピリドンラクタム及びその使用方法。
US11072607B2 (en) 2016-12-16 2021-07-27 Genentech, Inc. Inhibitors of RIP1 kinase and methods of use thereof
CN112074519A (zh) 2018-04-20 2020-12-11 豪夫迈·罗氏有限公司 作为rip1激酶抑制剂用于治疗e.g.肠易激综合征（ibs）的n-[4-氧代-2,3-二氢-1,5-苯并氧氮杂-3-基]-5,6-二氢-4h-吡咯并[1,2-b]吡唑-2-甲酰胺衍生物和有关化合物

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105121432A (zh) * 2013-02-15 2015-12-02 葛兰素史密斯克莱知识产权发展有限公司 作为激酶抑制剂的杂环酰胺
WO2016027253A1 (en) * 2014-08-21 2016-02-25 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterocyclic amides as rip1 kinase inhibitors as medicaments
CN107849023A (zh) * 2015-07-02 2018-03-27 豪夫迈·罗氏有限公司 二环内酰胺和其应用方法
WO2017109724A1 (en) * 2015-12-21 2017-06-29 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterocyclic amides as kinase inhibitors
WO2017136727A2 (en) * 2016-02-05 2017-08-10 Denali Therapeutics Inc. Compounds, compositions and methods
CN109071504A (zh) * 2016-02-05 2018-12-21 戴纳立制药公司 受体相互作用蛋白激酶1的抑制剂

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Discovery of a First-in-Class Receptor Interacting Protein 1 (RIP1) Kinase Specific Clinical Candidate (GSK2982772) for the Treatment of Inflammatory Diseases;Philip A. Harris等;《J. Med. Chem.》;20170202;第60卷;第1247-1261页 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP3555093B1 (en) 2022-09-21
AR110368A1 (es) 2019-03-20
JP2020502146A (ja) 2020-01-23
CN110072863A (zh) 2019-07-30
JP7209625B2 (ja) 2023-01-20
TW201827431A (zh) 2018-08-01
EP3555093A1 (en) 2019-10-23
US20180170927A1 (en) 2018-06-21
EP4095138A1 (en) 2022-11-30
US11072607B2 (en) 2021-07-27
WO2018109097A1 (en) 2018-06-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110072863B (zh) Rip1激酶抑制剂及使用方法
CN109843886B (zh) 二环吡啶酮内酰胺及其使用方法
EP3781571B1 (en) N-[4-oxo-2,3-dihydro-pyrido[3,2-b][1,4]oxazepin-3-yl]-5,6-dihydro-4h-pyrrolo[1,2-b]pyrazole-2-carboxamide derivatives and related compounds as rip1 kinase inhibitors for treating e.g. irritable bowel syndrome (ibs)
US11607396B2 (en) Bicyclic amide compounds and methods of use thereof
TWI805595B (zh) 二環酮化合物及其使用方法
EP3694858B1 (en) Bicyclic compounds for use as rip1 kinase inhibitors
EP3908586B1 (en) Bicyclic pyrrolotriazolr ketone compounds and methods of use thereof
RU2797922C2 (ru) Бициклические кетоны и способы их применения

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40011755

Country of ref document: HK

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant