CN110057930A - 一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法 - Google Patents

一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110057930A
CN110057930A CN201910205407.0A CN201910205407A CN110057930A CN 110057930 A CN110057930 A CN 110057930A CN 201910205407 A CN201910205407 A CN 201910205407A CN 110057930 A CN110057930 A CN 110057930A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mobile phase
veterinary drug
detection method
multiple groups
fresh milk
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201910205407.0A
Other languages
English (en)
Inventor
刘军伟
类兴梅
王冰
季加才
侯新贵
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong Da Da Detection Technology Co Ltd
Original Assignee
Shandong Da Da Detection Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong Da Da Detection Technology Co Ltd filed Critical Shandong Da Da Detection Technology Co Ltd
Priority to CN201910205407.0A priority Critical patent/CN110057930A/zh
Publication of CN110057930A publication Critical patent/CN110057930A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明涉及食品安全检测领域，具体为一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法；先取提取液，将提取液通过活化后的固相萃取柱，收集洗脱液，将洗脱液烘干加入甲酸水‑甲醇溶液充分旋转后进行滤膜过滤得到过滤液，将过滤液采用液相色谱‑串联质谱进行定性、定量测定；本发明提供的方法，方法灵敏度高，检出限相比国际同类兽药检测方法更低。

Description

一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法
技术领域
本发明涉及食品安全检测领域，具体为一种生鲜乳中多组类兽药 残留的高通量检测方法。
背景技术
生鲜乳中兽药残留直接影响人体健康，目前常用的ELISA法、 Delvo法等试剂盒，虽然具有快速、方便、易于实现等优点，但其仅 能作出生鲜乳中是否有兽药残留，残留是否超标或者有哪类兽药残留 的判断，而对生鲜乳中实际存在的成份、含量难以定论。
超高效液相色谱串联质谱技术(UPLC-MS/MS)是以质谱检测器 为主要识别手段，集高效液相色谱分离过程与质谱高灵敏度、高选择 过程于一体的定量分析方法。近年来，该项技术在动物性食品中多兽 药残留分析过程中越来越受到重视和应用，不断出现一批新型多残留 分析技术。但是现有检测方法中存在兽药种类单一、前处理复杂、定 量难的技术难题，亟待开发一种多组类兽药残留同时定量分析方法。
发明内容
为了解决以上的技术问题，本发明提供一种生鲜乳中多组类兽药 残留的高通量检测方法；
本发明是这样实现的：
一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，先取提取液， 将提取液通过活化后的固相萃取柱，收集洗脱液，将洗脱液烘干加入 甲酸水-甲醇溶液充分旋转后进行滤膜过滤得到过滤液，将过滤液采 用液相色谱-串联质谱进行定性、定量测定。
进一步的，提取液的提取方法包括：将待检测样品加入乙腈水溶 液，所述待检测样品与所述乙腈水溶液的质量比为1：6，混合，涡 旋，离心后取上清液。
进一步的，洗脱液的收集方法为将所述提取液以每3～4秒1滴 的流速通过PRIMEHLB固相萃取柱。
进一步的，洗脱液的烘干方法为用40～50℃氮气进行吹干。
进一步的，甲酸水-甲醇溶液体积比为1:1，含量为1.00ml0.2％。
进一步的，乙腈水溶液为乙腈与实验室用一级水按照体积比4:1 进行混合均匀的药品溶液。
进一步的，色谱条件为：色谱柱：1.7μm，2.1*50mm；流速： 0.3ml/min；进样体积：2μl；柱温：40℃。
进一步的，流动相与度洗脱时间为：流动相A：0.1％甲酸水溶液； 流动相B：甲醇；洗脱时间0～3.0min，流动相B从10％线性增长至 80％；洗脱时间3.0～4.0min，流动相B保持80％；洗脱时间4.0～ 4.1min，流动相B从80％降至10％；洗脱时间4.1～5.0min，流动 相B保持10％。
进一步的，流动相与度洗脱时间为：流动相A：水，流动相B： 甲醇；洗脱时间为流动相B从10％线性增长至80％；洗脱时间3.0～ 4.0min，流动相B保持80％；洗脱时间4.0～4.1min，流动相B从80％ 降至10％；洗脱时间4.1～5.0min，流动相B保持10％。
进一步的，质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描方式： 正离子扫描；检测方式：多反应监测；毛细管电压：3.0KV；离子源 温度：150℃；脱溶剂气温度：350℃；脱溶剂气流量：800L/h。
上述方案的有益效果：
本发明提供的方法，方法灵敏度高，检出限相比国际同类兽药检 测方法更低。
具体实施方式
下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描 述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发 明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所 获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
1.试剂与材料
1.1标准品
本发明中所有37种兽药都属于兽药标准品，标准品为以下：
磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、 磺胺二甲嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉、环丙沙星、 达氟沙星恩诺沙星、沙拉沙星、氧氟沙星、二氟沙星、培氟沙星、诺 氟沙星、金刚烷胺、金刚乙胺、甲氧苄啶、阿奇霉素、多西环素、喹乙醇、乙酰甲喹、呋喃他酮、呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃西林、氯霉 素、氟苯尼考、地塞米松、阿莫西林、氨苄西林、林可霉素、替米考 星、红霉素、甲硝唑、地美硝唑、洛硝达唑
1.2试剂
乙腈(Acetonitrile，99.9％)、甲醇(Methanol，99.9％)、乙腈-水溶 液，其中乙腈、甲醇均为色谱级。
1.3标准溶液配制
分别准确称取适量标准品(精确至0.1mg)，用乙腈溶解，配制 成浓度为100μg/mL的标准储备溶液，-18℃冷冻避光保存。
中间标准溶液配制：分别移取1mL标准储备溶液(4.5)与10mL 容量瓶中，用乙腈定容至刻度，配制成浓度为10μg/mL的中间标准 溶液，0℃～4℃冷藏避光保存。
1.4固相萃取柱
固相萃取柱PRIME HLB，规格为6CC,200mg。
实施例一
生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法的建立
2.实验方法
2.1样品提取与净化
称取5g试样于50mL离心管中，加乙腈水溶液15ml,充分混合， 涡旋,10000r/min离心5min。
取上述上清液5ml，以每3～4秒1滴的流速通过PRIME HLB 固相萃取柱。收集洗脱液4ml，40℃氮气吹干加入1.00ml0.2％甲酸水 -甲醇(1:1)溶液，充分涡旋，用0.2μm滤膜过滤，滤液供高效液相 色谱-串联质谱仪测定。
2.2色谱条件
A组色谱柱：BEH C18柱，2.1×50mm，1.7μm；柱温：40℃； 进样量：2μL；流动相：A：0.1％甲酸水溶液(含5mmol/L乙酸铵)； 流动相B：甲醇；流速：0.30mL/min；洗脱梯度：0～1.0min，90％A， 1.0～3.0min，90％A，3.0～4.0min，20％，4.0～4.1min，90％A，4.1～5.0min， 90％A。
B组色谱柱：BEH C18柱，2.1×50mm，1.7μm；柱温：40℃； 进样量：2μL；流动相：A：水；B：甲醇；流速：0.30mL/min；洗 脱梯度：0～1.0min，90％A，1.0～3.0min，90％A，3.0～4.0min，20％， 4.0～4.1min，90％A，4.1～5.0min，90％A。
2.3质谱条件
A组质谱条件：离子化模式：ESI+；毛细管电压：3.0KV；锥孔 电压：30～90V；去溶剂温度：350℃；去溶剂气流速：800L/h；载气， 高纯氮(>99.999％)。
B组质谱条件：电离模式：电喷雾负离子；毛细管电压：2.0kV； 离子源温度：150℃；去溶剂温度：350℃；载气，高纯氮(>99.999％)。
检测方式：多反应监测.
3.定性、定量离子条件
3.1.A组定性、定量离子对
3.2.B组定性、定量离子对
4.定性方法
通过试样色谱图的保留时间与相应标准标准溶液的保留时间、各色谱 峰的特征离子与相应浓度标准溶液各色谱峰的特征离子相对照定性。试样 与标准溶液保留时间的相对偏差不大于1.5％；试样特征例子的相对离子 丰度与标准溶液的相对离子丰度一致，相对离子丰度偏差不超过下表的规 定，则可判断试样中待测组分的存在。
5.定量方法
取试样溶液、标准溶液上机测定，外标法定量，标准溶液及试样中峰 面积应在仪器检测的线性范围内。
6.结果计算
用数据处理软件中的外标法，或绘制标准曲线，按照式(1)计算样 品中残留量
式中：
x——试样中的待测组分的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；
C——由标准曲线而得的样液中待测组分的浓度，单位为纳克每毫 升(ng/mL)；
V——样液最终定容体积，单位为毫升(mL)；
m——样品称样量，单位为克(g)。

Claims (10)

1.一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，先取提取液，将提取液通过活化后的固相萃取柱，收集洗脱液，将洗脱液烘干加入甲酸水-甲醇溶液充分旋转后进行滤膜过滤得到过滤液，将过滤液采用液相色谱-串联质谱进行定性、定量测定。
2.根据权利要求1所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，所述提取液的提取方法包括：将待检测样品加入乙腈水溶液，所述待检测样品与所述乙腈水溶液的质量比为1：6，混合，涡旋，离心后取上清液。
3.根据权利要求1所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，所述洗脱液的收集方法为将所述提取液以每3～4秒1滴的流速通过PRIME HLB固相萃取柱。
4.根据权利要求1所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，所述洗脱液的烘干方法为用40～50℃氮气进行吹干。
5.根据权利要求1所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，所述甲酸水-甲醇溶液体积比为1:1，含量为1.00ml0.2％。
6.根据权利要求2所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，所述乙腈水溶液为乙腈与实验室用一级水按照体积比4:1进行混合均匀的药品溶液。
7.根据权利要求1所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，所述色谱条件为：色谱柱：1.7μm，2.1*50mm；流速：0.3ml/min；进样体积：2μl；柱温：40℃。
8.根据权利要求1所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，所述流动相与度洗脱时间为：流动相A：0.1％甲酸水溶液；流动相B：甲醇；洗脱时间0～3.0min，流动相B从10％线性增长至80％；洗脱时间3.0～4.0min，流动相B保持80％；洗脱时间4.0～4.1min，流动相B从80％降至10％；洗脱时间4.1～5.0min，流动相B保持10％。
9.根据权利要求1所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，所述流动相与度洗脱时间为：流动相A：水，流动相B：甲醇；洗脱时间为流动相B从10％线性增长至80％；洗脱时间3.0～4.0min，流动相B保持80％；洗脱时间4.0～4.1min，流动相B从80％降至10％；洗脱时间4.1～5.0min，流动相B保持10％。
10.根据权利要求1所述的生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法，其特征在于，质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；毛细管电压：3.0KV；离子源温度：150℃；脱溶剂气温度：350℃；脱溶剂气流量：800L/h。
CN201910205407.0A 2019-03-18 2019-03-18 一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法 Withdrawn CN110057930A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910205407.0A CN110057930A (zh) 2019-03-18 2019-03-18 一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910205407.0A CN110057930A (zh) 2019-03-18 2019-03-18 一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110057930A true CN110057930A (zh) 2019-07-26

Family

ID=67317053

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910205407.0A Withdrawn CN110057930A (zh) 2019-03-18 2019-03-18 一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110057930A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112255325A (zh) * 2020-09-09 2021-01-22 石家庄君乐宝乳业有限公司 乳制品中残留兽药含量的检测方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112255325A (zh) * 2020-09-09 2021-01-22 石家庄君乐宝乳业有限公司 乳制品中残留兽药含量的检测方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103713056B (zh) 一种同时分析检测动物组织中残留兽药组分的方法
CN103048401B (zh) 化妆品中15种禁用硝基咪唑类抗生素的测定方法
CN101571526B (zh) 同时测定蜂王浆中多种硝基咪唑类药物残留量的检测方法
CN108663471A (zh) 一种测定河口沉积物中多种内分泌干扰物含量的方法
CN106855545A (zh) 同时检测饲料中的脂溶性维生素和水溶性维生素的方法
CN109884207A (zh) 一种快速准确分析菜籽油中多酚含量的方法
CN107782824A (zh) 一种pet塑料瓶中多种紫外稳定剂的快速检测方法
CN108072712B (zh) 一种sd大鼠血浆中新化合物wsj-557的血药浓度定量分析方法
CN108760920B (zh) 一种基于hplc-msms法测定氰霜唑及其代谢物残留量的方法
CN106645518A (zh) 一种蜂胶原胶中氯霉素残留量的测定方法
CN110057930A (zh) 一种生鲜乳中多组类兽药残留的高通量检测方法
CN108181393B (zh) 一种塑料制品中羟乙基六氢均三嗪的检测方法
CN113466356A (zh) 牛乳中农药残留含量测定的样品前处理及检测方法
CN110057929A (zh) 一种饲料及饲料添加剂中违禁药物的高通量检测方法
CN103278586A (zh) 乳制品中双氰胺成分的提取及检测方法
CN107422056B (zh) 一种特戊酸碘甲酯的气相色谱检测方法及其制备方法
CN111060612B (zh) 一种液质联用测定血浆中泼尼松、醋酸泼尼松及其活性代谢产物泼尼松龙浓度的方法
CN115541789A (zh) 烟草及烟草制品中烟碱盐含量的测定方法
CN104849383A (zh) 快速溶剂萃取-凝胶色谱净化-lc/ms/ms结合测定蜂花粉中硝基咪唑类药物的方法
CN111198235B (zh) 一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法
CN108956795B (zh) 用于刑侦目的生物体液中咪唑啉类药物的检测方法
CN109324140A (zh) 一种烟叶中玉米素核苷固相萃取-液相色谱-串联质谱的测定方法
CN109324139A (zh) 一种烟叶中玉米素核苷液液萃取-液相色谱-串联质谱的测定方法
CN113138238A (zh) 一种亚麻荠种子中8种黄酮及酚酸类成分含量的检测方法
CN106324169A (zh) 葡萄酒中酰胺类杀菌剂的固相萃取‑气相色谱‑串联质谱检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20190726

WW01 Invention patent application withdrawn after publication