CN110041239A - N-(苯甲酰基)-l-半胱氨酸甲酯类衍生物及其制备方法和用途 - Google Patents

N-(苯甲酰基)-l-半胱氨酸甲酯类衍生物及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种N‑(苯甲酰基)‑L‑半胱氨酸甲酯类衍生物及其制备方法和用途，其中具体地，公开了一种化合物及其药学上可接受的盐，其结构如式I所示；公开了式I所示化合物或其药学上可接受的盐在制备TLR2选择性抑制剂、抗炎药物或抗肿瘤药物中的用途。

Description

N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生物及其制备方法和 用途
技术领域
本发明涉及医药卫生和化工领域，具体涉及N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生物及其制备方法和在制备选择性抑制TLR2以及抗炎、肿瘤免疫的药物中的用途。
背景技术
Toll样受体(TLRs)是一类高度保守的跨膜蛋白，它们通过选择识别微生物保守的病原相关分子模式(PAMPs)来触发免疫应答反应以抵抗病原体的入侵，包括固有性免疫与获得性免疫。TLR家族成员可与其自身或其他TLR二聚化以形成同型或异型二聚体，连同衔接蛋白介导下游信号传导，例如TLR1-TLR2和TLR2-TLR6。
TLR的调节剂可用于人体免疫调节或肿瘤免疫治疗，目前，以TLR4、TLR7为作用靶点，已有药物上市；以TLR2为靶点的药物还处于临床研究阶段，其结构为大分子化合物或提取物，尚未有小分子调节剂的研究。如TLR2的激活剂云芝多糖在临床II期，用于乳腺癌的治疗；TLR1-TLR2的激动剂细菌性脂蛋白(BLP)可以抑制肺癌，白血病，黑色素瘤等。
选择性抑制TLR2的大分子化合物都有分子量大，合成困难，难以大量生产等弊端进而限制了其成药的可能性，研发能够选择性抑制TLR2的小分子化合物具有广阔的前景。然而，目前为止，文献报道的选择性抑制TLR1-TLR2的小分子化合物只有1个(CU-CPT22)且尚未有一个进入临床前研究。因此开发出结构新颖，具有较好TLR2抑制活性，无毒性的小分子化合物提供一种成药的可能性充满研究意义。本发明涉及的式I所示化合物结构新颖，不存在由于其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于肿瘤的免疫治疗和防治具有显著的进步，对开发出新型的抗炎和抗肿瘤药物提供了可能。本发明涉及的式I所示化合物在选择性抑制TLR2及其用于制备抗炎、肿瘤免疫药物中的用途属于首次公开。
发明内容
本发明的目的在于提供N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类化合物及其制备方法和在制备选择性抑制TLR2以及抗炎和肿瘤药物中的应用，具有重要的研发价值和开发意义。
本发明一个方面提供了一种N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐，其结构如式I所示，
其中：R1选自烯丙基、1-丁烯基、1-戊烯基、炔丙基、苄基、4-氟苄基中任意一个；R2，R3，R4，R5独立选自氢、卤素、甲氧基、羟基或三氟甲基；R6选自氢或烷基。
进一步地，R2，R3，R4，R5中的卤素独立地选自F、Cl、Br或I；R6中的烷基优选为甲基。
本发明另一个方面提供了式I所示化合物的制备方法，其中式I化合物中R2、R3、R4、R5均不含有羟基，制备方法如下：
1)将与氯化亚砜反应至完全；
2)加入至反应完全得到式I所示化合物。
实验方法详述如下：
其中A优选为：
1)将A溶于氯化亚砜(SOCl2)中，在70～80℃下回流反应(rf)至完全，薄层色谱跟踪反应至结束，减压旋干溶剂，得到中间产物B，A与氯化亚砜的添加量比例为1mmoL：40～45mmoL；
2)将B溶于二氯甲烷(DCM)中，然后加入三乙胺(TEA)在冰浴条件下搅拌反应10～30分钟，之后加入C，继续搅拌至反应结束，减压旋干溶剂，残留物用硅胶柱层析分离，得目标产物，中间产物B、二氯甲烷、三乙胺、的添加量比例为1mmoL：45～50mmoL：2～3mmoL：1mmoL。
式I所示化合物的制备方法，其中式I化合物中R2、R3、R4、R5至少含有一个羟基，制备方法如下：
1)将与乙酸酐反应至完全；
2)向1)中加入氯化亚砜至反应完全；
3)向2)中加入至反应完全；
4)将3)中产物与碳酸氢钠在甲醇和四氢呋喃混合溶液中反应至完全得到式I所示化合物。
实验方法详述如下：
其中A优选为：
1)将A溶于乙酸酐(Acetic anhydride)中，在100～150℃下回流反应(rf)至完全，薄层色谱跟踪反应至结束，冷却至室温，减压旋干溶剂，得到中间产物B，A与乙酸酐的添加量比例为1mmoL：30～35mmoL；
2)将B溶于氯化亚砜中，在70～80℃回流反应至完全，薄层色谱跟踪反应至结束，减压旋干溶剂，得到中间产物C，B与氯化亚砜的添加量比例为1mmoL：40～45mmoL；
3)将C溶于二氯甲烷中，然后加入三乙胺在冰浴条件下搅拌反应10～30分钟，之后加入D，继续搅拌至反应结束，减压旋干溶剂，残留物用硅胶柱层析分离，得到中间产物E，C、二氯甲烷、三乙胺、D的添加量比例为1mmoL：45～50mmoL：2～3mmoL：1mmoL；
4)将E用混合溶剂溶解后加入1～2mol/L的碳酸氢钠溶液，室温搅拌反应至完全，薄层色谱跟踪反应至结束，减压旋干溶剂，残留物用硅胶柱层析分离得目标产物，混合溶剂为四氢呋喃(THF)(mL)：甲醇(CH3OH)(mL)＝1：1～1.5的混合溶液，E、混合溶剂、碳酸氢钠的添加量比例为1mmoL：40～75mmoL：2～6mmoL。
本发明另一个方面提供了上述N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐在制备抑制TLR2的抑制剂中的应用。其中：R1选自烯丙基、1-丁烯基、1-戊烯基、炔丙基、苄基、4-氟苄基中任意一个；R2，R3，R4，R5独立选自氢、卤素、甲氧基、羟基或三氟甲基；R6选自氢或烷基。R2，R3，R4，R5中的卤素独立地选自F、Cl、Br、I；R6中的烷基优选为甲基。
本发明另一个方面提供了上述N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。其中：R1选自烯丙基、1-丁烯基、1-戊烯基、炔丙基、苄基、4-氟苄基中任意一个；R2，R3，R4，R5独立选自氢、卤素、甲氧基、羟基或三氟甲基；R6选自氢或烷基。R2，R3，R4，R5中的卤素独立地选自F、Cl、Br、I；R6中的烷基优选为甲基。肿瘤选自乳腺癌、肺癌、黑素瘤、肾癌、肝癌、前列腺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、甲状腺癌、头颈癌、子宫内膜癌、脑癌、鼻咽癌、卵巢癌、膀胱癌、淋巴瘤、血液学癌或癌的转移性病变。
本发明另一个方面提供了上述N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐在制备抗炎药物中的应用。其中：R1选自烯丙基、1-丁烯基、1-戊烯基、炔丙基、苄基、4-氟苄基中任意一个；R2，R3，R4，R5独立选自氢、卤素、甲氧基、羟基或三氟甲基；R6选自氢或烷基。R2，R3，R4，R5中的卤素独立地选自F、Cl、Br、I；R6中的烷基优选为甲基。
在本发明的技术方案中，所述式I化合物优选自以下化合物中的一种：
本发明另一个方面提供了一种用于抑制TLR2以及抗炎、抗肿瘤用途的药物组合物，其包含作为活性物质的式I所示化合物或其药学上可接受的盐。
在本发明的技术方案中，药物组合物为注射制剂、口服制剂或外用制剂。
在本发明的技术方案中，药物组合物为片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、注射剂或乳剂。
目前为止，文献报道的选择性抑制TLR1-TLR2的小分子化合物只有1个(CU-CPT22)，本发明涉及的式I所示化合物结构新颖，不存在由于其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于选择性抑制TLR2、抗炎、肿瘤的免疫治疗和防治具有显著的进步，对开发出新型的抗炎和抗肿瘤药物提供了可能。本发明涉及的式I所示化合物在选择性抑制TLR2及其用于制备抗炎、肿瘤免疫药物中的用途属于首次公开。
附图说明
图1为SMU-8c对RAW264.7细胞中以200ng/ml Pam3CSK4作为TLR2阳性激活时NO信号(OD560)的抑制作用图；
图2为SMU-8c对TLR2的选择性抑制实验结果图，图A为SMU-8c对HEK-Blue hTLR2细胞中分别以20ng/ml Pam3CSK4，20ng/ml Pam2CSK4作为TLR1-TLR2，TLR2-TLR6阳性激活时SEAP信号(OD620)的抑制作用图，图B为SMU-8c对HEK-Blue hTLR3细胞中以20ug/ml Poly:IC作为TLR3阳性激活时SEAP信号(OD620)的抑制作用图，图C为SMU-8c对HEK-Blue hTLR4细胞中以20ng/ml LPS作为TLR4阳性激活时SEAP信号(OD620)的抑制作用图。
具体实施方式
为了更好地理解本发明的内容，下面结合具体实施方式对本发明内容作进一步说明，但本发明的保护内容不局限以下实施例。
实施例1
化合物的制备：
S-烯丙基-N-(3,4,5-三甲氧基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
将1mmoL溶于3mL氯化亚砜中，78℃回流反应2小时，薄层色谱(TLC)跟踪反应至结束，减压旋干溶剂得到中间产物。将中间产物用3mL二氯甲烷溶解，然后加入3mmoL三乙胺在冰浴条件下搅拌反应30分钟后再加入1mmoL继续搅拌至反应结束，减压旋干溶剂，残留物用硅胶柱层析分离，得目标产物281mg,产率为76％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.06(s,2H),6.91(d,1H),5.83–5.70(m,1H),5.14(m,1H),5.12(m,1H),4.99(m,1H),3.91(d,9H),3.83(s,3H),3.16(m,3H),3.13–2.98(m,1H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ171.45,166.61,153.19,141.31,133.45,128.96,117.96,104.54,60.85,56.30,52.69,52.12,35.10,32.60.ESI-MS:m/z 370.4([M+H]+).
实施例2
化合物的制备：
S-烯丙基-N-(3,4,5-三羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
将1mmoL溶于3mL乙酸酐中，140℃回流反应4小时，薄层色谱跟踪反应至结束。冷却至室温，减压旋干溶剂，得到中间产物向中间产物中加入3mL氯化亚砜，78℃回流反应2小时，薄层色谱(TLC)跟踪反应至结束，减压旋干溶剂，得到中间产物将中间产物用3mL二氯甲烷溶解，然后加入3mmoL三乙胺在冰浴条件下搅拌30分钟后再加入1mmoL继续搅拌至反应结束，减压旋干溶剂，残留物用硅胶柱层析分离，得到中间产物向中间产物中加入3mL四氢呋喃mL：甲醇mL＝1：1的混合溶剂溶解后加入1mol/L碳酸氢钠溶液2mL，室温搅拌反应2小时，薄层色谱跟踪反应至结束，减压旋干溶剂，残留物用硅胶柱层析分离，得目标产物272mg,产率为83％。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.13(s,2H),8.73(s,1H),8.44(d,J＝7.7Hz,1H),6.87(s,2H),5.76(m,1H),5.18–5.04(m,2H),4.53(m,1H),3.64(s,3H),3.17(m,2H),2.96–2.81(m,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ171.93,166.97,145.82,137.05,134.58,124.24,117.81,107.41,52.67,52.43,34.30,31.45.ESI-MS:m/z 328.6([M+H]+).
实施例3
化合物的制备：
S-(丁-3-烯-1-基)-N-(3,4,5-三甲氧基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例1的方法制备，仅将替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.05(d,J＝1.7Hz,2H),6.97(d,J＝7.2Hz,1H),5.78(m,1H),5.09–4.96(m,3H),3.89(d,9H),3.81(s,3H),3.20–3.07(m,2H),2.61(m,2H),2.33(q,2H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ171.40,166.66,153.17,141.32,136.07,128.95,116.21,104.57,60.82,56.28,52.68,52.32,34.12,33.66,31.95.ESI-MS:m/z 384.5([M+H]+).
实施例4
化合物的制备：
S-(戊-4-烯-1-基)-N-(3,4,5-三甲氧基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例1的方法制备，仅将替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.06(d,J＝1.7Hz,2H),6.94(d,J＝7.3Hz,1H),5.75(m,1H),5.04–4.95(m,3H),3.91(d,9H),3.82(s,3H),3.19–3.06(m,2H),2.55(t,2H),2.13(q,2H),1.66(q,2H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ171.42,166.62,153.19,141.34,137.32,128.97,115.34,104.57,60.83,56.30,52.67,52.31,34.11,32.52,32.01,28.58.ESI-MS:m/z 398.9([M+H]+).
实施例5
化合物的制备：
S-(丁-3-烯-1-基)-N-(3,4,5-三羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例2的方法制备，仅将替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.09(s,2H),8.73(s,1H),8.43(d,J＝7.7Hz,1H),6.87(s,2H),5.83–5.75(m,1H),5.09–4.99(m,2H),4.53(m,1H),3.65(s,3H),3.01–2.90(m,2H),2.60(t,2H),2.29(m,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ171.97,166.90,145.81,137.27,137.01,124.20,116.44,107.37,53.03,52.43,33.70,32.61,31.04.ESI-MS:m/z 342.9([M+H]+).
实施例6
化合物的制备：
S-(戊-4-烯-1-基)-N-(3,4,5-三羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例2的方法制备，仅将替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.09(s,2H),8.82–8.63(m,1H),8.43(d,J＝7.7Hz,1H),6.87(s,2H),5.84–5.74(m,1H),5.05–4.95(m,2H),4.52(m,1H),3.65(s,3H),3.00–2.90(m,2H),2.54(d,2H),2.09(m,2H),1.59(q,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ171.98,166.90,145.81,138.26,137.01,124.21,115.72,107.37,53.07,52.42,32.56,31.13,28.55.ESI-MS:m/z356.3([M+H]+).
实施例7
化合物的制备：
S-烯丙基-N-(3,5-二羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例2的方法制备，仅将替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.49(s,2H),8.63(d,J＝7.7Hz,1H),6.71(d,J＝2.1Hz,2H),6.38(t,J＝2.2Hz,1H),5.77(m,1H),5.17–5.09(m,2H),4.55(m,1H),3.66(s,3H),3.20–3.17(m,2H),2.94(m,1H),2.86(m,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ171.70,167.07,158.66,136.19,134.63,117.82,106.05,105.84,52.65,52.49,34.27,31.39.ESI-MS:m/z312.6([M+H]+).
实施例8
化合物的制备：
S-(丁-3-烯-1-基)-N-(3,5-二羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例2的方法制备，将替换为将替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,2H),8.63(d,J＝7.7Hz,1H),6.71(d,J＝2.1Hz,2H),6.38(t,J＝2.2Hz,1H),5.80(m,1H),5.11(m,1H),4.98(m,1H),4.55(m,1H),3.66(s,3H),3.04–2.89(m,2H),2.61(t,2H),2.28(m,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ171.74,167.05,158.66,137.25,136.19,116.45,106.03,105.80,53.02,52.49,33.69,32.54,31.02.ESI-MS:m/z326.8([M+H]+).
实施例9
化合物的制备：
S-(戊-4-烯-1-基)-N-(3,5-二羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例2的方法制备，将替换为替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.50(s,2H),8.62(d,J＝7.7Hz,1H),6.71(d,J＝2.1Hz,2H),6.38(t,J＝2.2Hz,1H),5.79(m,1H),5.05(m,1H),4.95(m,1H),4.54(m 1H),3.66(s,3H),2.95(m,2H),2.55(d,2H),2.13–2.05(m,2H),1.60(m,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ171.75,167.04,158.66,138.25,136.19,115.72,106.03,105.79,53.06,52.48,32.56,32.50,31.11,28.55.ESI-MS:m/z 340.3([M+H]+).
实施例10
化合物的制备：
S-烯丙基-N-(4-羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例2的方法制备，仅将替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.03(s,1H),8.60(d,J＝7.7Hz,1H),7.76(d,J＝8.3Hz,2H),6.83(d,J＝8.3Hz,2H),5.83–5.71(m,1H),5.12(m,2H),4.58(m,1H),3.66(s,3H),3.19(d,2H),2.98–2.82(m,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ171.91,166.43,160.85,134.65,129.84,124.63,117.81,115.23,52.68,52.45,34.30,31.51.ESI-MS:m/z 296.5([M+H]+).
实施例11
化合物的制备：
S-(丁-3-烯-1-基)-N-(4-羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施2的方法制备，将替换为将替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77–7.69(m,2H),7.01–6.96(m,1H),6.93–6.86(m,2H),5.79(m,1H),5.10–4.99(m,3H),3.82(s,3H),3.20–3.10(m,2H),2.62(t,2H),2.37–2.30(m,2H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ171.50,167.14,159.75,136.07,129.17,125.12,116.27,115.51,52.76,52.27,34.21,33.64,31.98.ESI-MS:m/z 296.5([M+H]+).
实施例12
化合物的制备：
S-(戊-4-烯-1-基)-N-(4-羟基苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯
按实施例2的方法制备，将替换为替换为其它条件和参数一样。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74–7.70(m,2H),6.99(d,J＝7.4Hz,1H),6.91–6.87(m,2H),5.75(m,1H),5.00(m,3H),3.82(s,3H),3.19–3.08(m,2H),2.60–2.50(m,2H),2.17–2.09(m,2H),1.67(m,2H).13C NMR(101MHz,CDCl3)δ171.52,167.18,159.84,137.35,129.16,125.04,115.52,115.36,52.75,52.30,34.16,32.52,32.03,28.54.ESI-MS:m/z325.3([M+H]+).
实施例13
SMU-8c对TLR2的抑制活性实验：
实验中的RAW264.7细胞为本科室所有；胎牛血清购自美国GIBICO公司；细胞培养板购自美国康宁公司；DMEM培养基购自美国GIBICO公司；Griess分析试剂按照标准操作流程配制；Pam3CSK4购自美国InvivoGen公司；SMU-8c为本科室合成。
实验步骤如下：
1、接种RAW264.7细胞：用含10％胎牛血清(60℃加热30分钟)的DMEM培养基配成单个细胞悬液，以每孔80000个细胞接种到96孔细胞培养板，每孔接种体积100μL；
2、加入SMU-8c和200ng/ml Pam3CSK4(阳性对照)，培养：向各个孔先后加入100μL用含10％胎牛血清(60℃加热30分钟)的DMEM培养基稀释成相应浓度的SMU-8c和1μL的200ng/ml Pam3CSK4，在37℃，5％CO2培养条件下培养24小时；
3、呈色：培养24小时后，每孔取出50μL上清液加入Griess A底物溶液(将6mL85％浓磷酸、70ml去离子水和1.0g无水对氨基苯磺酸充分溶解后，定容至100mL)50μL，避光放置10分钟后加入Griess B底物溶液(将0.1g N-1-萘乙二胺盐酸盐溶于去离子水中，定容至100mL)50μL，避光摇匀处理10分钟；
4、测量与计算：在560nm吸光度下5分钟为单位读数4次，以检测细胞上清中NO的信号(OD560)强度。IC50通过Growth/Sigmoidal中的Hill1进行非线性拟合。
实验结果如图1所示，其中Vehicle为阴性对照，证明25μM(μmoL/L)的SMU-8c对TLR2的抑制已超过50％，50μM时几乎完全抑制，其IC50为22.54±2.60μM。抑制率＝阳性对照OD值-SMU-8c相应浓度下OD值/阳性对照OD值-阴性对照OD值。
实施例14
化合物1-24对TLR2的抑制活性实验：
实验方法参考实施例13。实验结果如表1所示：
表1化合物对TLR2的抑制活性
化合物 IC<sub>50</sub>/μM 化合物 IC<sub>50</sub>/μM
1 49.28±0.62 13 58.47±2.88
2 27.32±4.77 14 35.82±7.80
3 22.54±2.60 15 57.75±18.70
4 53.22±0.46 16 41.81±3.59
5 32.65±2.14 17 50.52±3.2
6 28.57±0.92 18 38.35±1.14
7 52.12±6.06 19 40.47±7.74
8 57.75±1.87 20 54.91±43.7
9 39.22±8.57 21 53.04±7.46
10 71.46±3.37 22 54.76±11.73
11 60.67±1.50 23 52.13±3.21
12 50.21±1.68 24 37.30±2.65
从表1中可知，该系列化合物具有较好的TLR2抑制的活性，具有良好的抗炎、肿瘤免疫药物开发潜力。
实施例15
SMU-8c抑制TLR2的选择性实验：
实验中的HEK BLUE TLR2、3、4细胞为本科室所有；胎牛血清购自美国GIBICO公司；细胞培养板购自美国康宁公司；DMEM培养基购自美国GIBICO公司；Quanti-blue购自美国GIBICO公司；Pam3CSK4，Pam2CSK4，PolyI:C，LPS购自美国InvivoGen公司；SMU-8c为本科室合成。
1、接种HEK BLUE TLR2、3、4细胞：用含10％胎牛血清(60℃加热30分钟)的DMEM培养基配成单个细胞悬液，以每孔40000个细胞接种到96孔细胞培养板，每孔接种体积100μL；
2、加入SMU-8c，20ng/ml Pam3CSK4、20ng/ml Pam2CSK4、20ug/ml PolyI:C、20ng/mlLPS分别作为HEK-Blue hTLR1-2、2-6、3、4的阳性激活剂，培养：向相应的各个孔先后加入100μL用含10％胎牛血清(60℃加热30分钟)的DMEM培养基稀释成相应浓度的SMU-8c和1μL的20ng/ml Pam3CSK4、20ng/ml Pam2CSK4、20ug/ml PolyI:C或20ng/ml LPS，在37℃，5％CO2培养条件下培养24小时；
3、呈色：培养24小时后，从培养过后的96孔细胞培养板中每孔取出上清液50μL至一新的96孔细胞培养板中，然后每孔避光加50μL的Quanti-blue溶液；
4、测量与计算：在620nm吸光度下15分钟为单位读数4次，以检测细胞上清中SEAP的信号(OD620)强度。
实验结果如图2所示，其中Vehicle代表阴性对照，结果显示，SMU-8c能够特异性抑制TLR2，而对TLR3，TLR4没有影响。图A，在HEK-Blue hTLR2细胞中随着SMU-8c浓度增高，以20ng/ml Pam3CSK4、20ng/ml Pam2CSK4分别为TLR1-TLR2，TLR2-TLR6阳性激活的SEAP的信号(OD620)强度也随之减弱，说明SMU-8c能够特异性抑制TLR2；图B、C中，在HEK-Blue hTLR3、4细胞中随着SMU-8c浓度增高，以20ug/ml PolyI:C，20ng/ml LPS分别为TLR3，TLR4阳性激活的SEAP的信号(OD620)强度没有随之发生变化，说明SMU-8c对TLR3，TLR4没有影响。
上述实施例的说明只是用于理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也将落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (10)

1.一种N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐，其结构如式I所示，
其中：R1选自烯丙基、1-丁烯基、1-戊烯基、炔丙基、苄基、4-氟苄基中任意一个；R2，R3，R4，R5独立选自氢、卤素、甲氧基、羟基或三氟甲基；R6选自氢或烷基。
2.如权利要求1所述的N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述R2，R3，R4，R5中的卤素独立地选自F、Cl、Br或I；所述R6中的烷基选自甲基。
3.如权利要求1或2所述的N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其中式I化合物中R2、R3、R4、R5均不含有羟基，其特征在于，制备方法如下：
1)将与氯化亚砜反应至完全；
2)向1)中加入至反应完全得到式I所示化合物。
4.如权利要求3所述的N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其中式I化合物中R2、R3、R4、R5均不含有羟基，其特征在于，包括如下步骤：
1)将溶于氯化亚砜中，在70～80℃下回流反应至完全，得到中间产物，所述与氯化亚砜的添加量比例为1mmoL：40～45mmoL；
2)将1)所得中间产物溶于二氯甲烷中，然后加入三乙胺在冰浴条件下搅拌反应10-30分钟，之后加入继续搅拌至反应结束，得目标产物，所述中间产物、二氯甲烷、三乙胺、的添加量比例为1mmoL：45～50mmoL：2～3mmoL：1mmoL。
5.如权利要求1或2所述的N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其中式I化合物中R2、R3、R4、R5至少含有一个羟基，制备方法如下：
1)将与乙酸酐反应至完全；
2)向1)中加入氯化亚砜至反应完全；
3)向2)中加入至反应完全；
4)将3)所得物与碳酸氢钠在甲醇和四氢呋喃混合溶液中反应至完全得到式I所示化合物。
6.如权利要求5所述的N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其中式I化合物中R2、R3、R4、R5至少含有一个羟基，其特征在于，包括如下步骤：
1)将溶于乙酸酐中，在100～150℃下回流反应至完全，得到中间产物，所述与乙酸酐的添加量比例为1mmoL：30～35mmoL；
2)将1)所得中间产物溶于氯化亚砜中，在70～80℃回流反应至完全，得到中间产物，1)所得所述中间产物与氯化亚砜的添加量比例为1mmoL：40～45mmoL；
3)将2)所得中间产物溶于二氯甲烷中，然后加入三乙胺在冰浴条件下搅拌反应10～30分钟，之后加入继续搅拌至反应结束，得到中间产物，2)所得所述中间产物、二氯甲烷、三乙胺、的添加量比例为1mmoL：45～50mmoL：2～3mmoL：1mmoL；
4)将3)所得中间产物用混合溶剂溶解后加入1～2mol/L的碳酸氢钠溶液，室温搅拌反应至完全，得目标产物，所述混合溶剂为四氢呋喃与甲醇的体积比为1mL：1～1.5mL的混合溶液，3)所得所述中间产物、混合溶剂、碳酸氢钠的添加量比例为1mmoL：40～75mmoL：2～6mmoL。
7.权利要求1或2中的N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐在制备TLR2选择性抑制剂、抗炎药物或抗肿瘤药物中的用途。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述肿瘤选自乳腺癌、肺癌、黑素瘤、肾癌、肝癌、前列腺癌、结直肠癌、胃癌、胰腺癌、甲状腺癌、头颈癌、子宫内膜癌、脑癌、鼻咽癌、卵巢癌、膀胱癌、淋巴瘤、血液学癌或癌的转移性病变。
9.一种TLR2选择性抑制剂药物组合物、抗炎药物组合物或抗肿瘤药物组合物，其中包含作为活性物质的权利要求1或2中的N-(苯甲酰基)-L-半胱氨酸甲酯类衍生化合物或其药学上可接受的盐。
10.如权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为注射制剂、口服制剂或外用制剂。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110776448A (zh) * 2019-07-11 2020-02-11 广州大学 一种硫化氢的供体及其制备方法和用途

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5541080A (en) * 1991-11-01 1996-07-30 Wisconsin Alumni Research Fdn. Method for preparing L-alpha-amino acids
CN102757477A (zh) * 2011-04-27 2012-10-31 首都医科大学 烯丙基半胱氨酰氨基酸甲酯衍生物及其合成方法和应用
CN103284987A (zh) * 2012-02-24 2013-09-11 复旦大学 炔丙基半胱氨酸及其类似物在制备防治心血管系统炎症相关疾病药物中的用途
KR20150002123A (ko) * 2013-06-28 2015-01-07 한밭대학교 산학협력단 신규한 ｓ-알릴 시스테인 유도체 및 그의 용도

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5541080A (en) * 1991-11-01 1996-07-30 Wisconsin Alumni Research Fdn. Method for preparing L-alpha-amino acids
CN102757477A (zh) * 2011-04-27 2012-10-31 首都医科大学 烯丙基半胱氨酰氨基酸甲酯衍生物及其合成方法和应用
CN103284987A (zh) * 2012-02-24 2013-09-11 复旦大学 炔丙基半胱氨酸及其类似物在制备防治心血管系统炎症相关疾病药物中的用途
KR20150002123A (ko) * 2013-06-28 2015-01-07 한밭대학교 산학협력단 신규한 ｓ-알릴 시스테인 유도체 및 그의 용도

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NAHOKO SAKAGUCHI 等: "Cell Death-Inducing Activity by Gallic Acid Derivatives", 《BIO.PHARM.BULL.》 *
靳贝贝: "219121-84-3", 《STN ON THE WEB 检索报告》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110776448A (zh) * 2019-07-11 2020-02-11 广州大学 一种硫化氢的供体及其制备方法和用途
CN110776448B (zh) * 2019-07-11 2021-06-29 广州大学 一种硫化氢的供体及其制备方法和用途

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