CN110016083A - 一种fgf-1融合蛋白及其在脊髓损伤治疗中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明的目的是提供一种FGF‑1融合蛋白及其在脊髓损伤治疗中的应用，本发明的融合蛋白包括细胞穿膜肽和FGF‑1，所述融合肽保留了FGF‑1的活性，对神经元的自身修复和再生有重要作用；细胞穿膜肽能够高效地使融合蛋白克服血‑脊髓屏障，从而可通过静脉注射和或肌肉注射给予所述融合蛋白并达到治疗或辅助治疗脊髓损伤的效果。

Description

一种FGF-1融合蛋白及其在脊髓损伤治疗中的用途
技术领域
本发明属于细胞生长因子领域，特别涉及一种FGF-1融合蛋白及其在脊髓损伤治疗中的用途。
背景技术
人酸性成纤维细胞生长因子(hFGF-1)是一种介导细胞间传递的多肽类物质，是一种广谱促有丝分裂源，可促进多种组织如脑、垂体、神经组织、视网膜、心脏等的生长和分化，亦可促进神经组织修复、神经突起的生长等，对源于中胚层和神经外胚层类细胞具有强烈的促分裂和增殖的作用。
脊髓损伤(SCI)可引起患者脊髓损伤节段水平以下身体的感觉和运动功能的部分或全部丧失，脊髓损伤后脊髓神经元细胞的修复、再生及其功能恢复的进一步研究具有非常重要的医疗价值和社会意义。
脊髓损伤后，受损神经元的保护与存活是近年来神经科学界研究的热点。脊髓损伤后，FGF-1和bFGF均明显增高并持续一段时间，对急性脊髓损伤后神经元的自身修复和再生起重要作用。因此，使用FGF-1或bFGF、尤其是使用FGF-1来治疗脊髓损伤是一种潜在的可行途径。
然而由于血脑、血-脊髓屏障的存在，静脉或肌肉注射FGF-1存在难以突破血脑、血-脊髓屏障的缺陷，导致对脊髓损伤的治疗效果大打折扣。
细胞穿膜肽(CPPs)是一类具有穿透细胞膜能力的短肽，分子整体带正电荷，一般由不超过30个氨基酸残基构成，其主要以非受体依赖方式穿过细胞膜，转导效率高且不易造成细胞损伤，目前常用的CPPs有TAT、聚精氨酸、穿膜素等，利用这些CPPs已成功地将蛋白质、核酸、纳米粒、脂质体等多种生物大分子或纳米制剂递送到细胞中。
基于上述问题，本发明提供一种新型的穿膜肽-FGF-1融合蛋白，其能够有效促进神经元再生，对治疗和或改善脊髓损伤具有显著的效果。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明提供了一种新型的穿膜肽-FGF-1融合蛋白，所述穿膜肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述FGF-1多肽片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
进一步地，所述穿膜肽位于融合蛋白的N末端。
进一步地，所述穿膜肽位于融合蛋白的C末端。
更进一步地，在融合蛋白的N末端和C末端均具有穿膜肽。
进一步地，所述FGF-1多肽片段如SEQ 1D NO：2的第20-154位所示。
本发明还提供一种编码核苷酸，其编码穿膜肽-FGF-1融合蛋白。
本发明还提供一种重组载体，其包括穿膜肽-FGF-1融合蛋白的编码核苷酸。
进一步地，所述重组载体还包括启动子、增强子等调控元件。
本发明还提供穿膜肽-FGF-1融合蛋白在制备治疗或辅助治疗脊髓损伤药物中的应用。
进一步地，所述穿膜肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。
更进一步地，所述FGF-1多肽片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
更进一步地，所述药物中还包括药学上可接受的载体。
所述载体可以为佐剂、稀释剂、赋形剂。
有益效果
本发明提供的穿膜肽-FGF-1融合蛋白具有神经元再生功能，能够用于脊髓损伤的治疗或辅助治疗，其能够在静脉注射或肌肉注射给药的情况下穿透血-脊髓屏障，从而达到促进脊髓损伤中神经恢复的作用。
本发明提供一种新的穿膜肽，其适用于引导FGF-1多肽穿透血-脊髓屏障从而对脊髓损伤中神经起到治疗作用。
附图说明
图1：融合蛋白促神经元再生功能。
具体实施方式
在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。
应当理解的是，在说明书和权利要求书中使用的术语或词语不应当理解为具有在字典中限定的含义，而应理解为在以下原则的基础上具有与其在本发明上下文中的含义一致的含义：术语的概念可以适当地由发明人为了对本发明的最佳说明而限定。
下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1：穿膜肽对神经元细胞的穿膜效果
TAT-PTD(YGRKKRRQRRR)是常见的细胞穿膜肽，其可有效携带比其相对分子质量大100倍的外源疏水大分子进入细胞，且对宿主细胞没有明显毒副作用。
但对于TAT-PTD的穿膜效率还存在改进的空间，本实验室通过前期实验对TAT-PTD进行了改造，获得了新的穿膜肽TAT’(YRRKKRRKRRR，SEQ ID NO：1)，在以NIH 3T3细胞作为转染宿主时其具有更高的穿膜效率，但对于神经细胞，由于其结构的特殊性，穿膜肽对其转染效率是未知的，因此，本实施例验证了TAT-PTD和TAT’对神经元细胞的转染效率。
利用常规分子生物学实验手段构建TAT-PTD-GFP融合蛋白和TAT'-GFP融合蛋白以及单独的GFP蛋白。
神经干细胞的解剖分离
麻醉孕鼠，对其腹部皮肤进行消毒，取出子宫浸泡在盛有4℃预冷PBS的无菌培养皿中，无菌条件下冰下操作剥离子宫取出胎鼠，将其浸泡于盛有4℃预冷PBS培养基的无菌培养皿中；体式显微镜下仔细剥离含血管的硬脑膜及软脑膜，转移分离出的脑皮质至另一个盛有4℃预冷的PBS培养基的无菌培养皿中；用显微镊与显微剪将培养皿中的组织剪切成1立方毫米大小，收集至离心管中，离心弃去上清，加入5ml 0.1％胰酶及20单位/mL DnaseI，转移至35mm无菌培养皿，在37℃中细胞培养箱中消化30分钟；收集消化后液体至离心管总，静置2分钟以分离细胞悬液与未充分消化组织，吸取细胞悬液，使用100μm筛网过滤至含有PBS溶液的离心管中，1200转离心5分钟，弃去上清，沉淀重悬于20mL新鲜配制的无血清培养基；将细胞以1-2×105个/mL密度在37℃，5％CO2条件下进行传代培养，连续传代培养至形成规则的神经球。
将传代培养获得的神经球分为4组进行神经球分化测试，分别测试空白对照组、100μg/mL GFP对照组、添加100μg/mL TAT-PTD-GFP融合蛋白、添加100μg/mL TAT'-GFP融合蛋的四个实验组。所选用的培养基为DMEM/F12，在加入上述试剂后立刻测定其荧光浓度；在培养12小时后，将上述4组神经球分别利用PBS洗涤3次后合并PBS洗涤液，测定PBS洗涤液中荧光浓度。所用的荧光测定显微镜为Olympus Microscope BX51倒置荧光显微镜，激发波长为488nm，发生波长为510nm条件下进行观察，以GFP组在加入时的荧光浓度为标准(100)进行测试。根据两次测定荧光浓度的差值推定穿膜肽转染神经元的效率。
结果如表1所示：
结果显示，TAT'相对于TAT-PTD对于神经元细胞而言有更佳的穿膜效率，其能够有效的介导外源多肽转染到神经元细胞内发挥功能。
对上述实验进行重复三次，重复获得的结果均与表1的结果类似。
实施例2：TAT'-FGF-1融合蛋白的活性
为了验证TAT'-FGF-1融合蛋白是否具有促进神经细胞再生的作用，进行了以下实验：
TAT'-FGF-1融合蛋白的构建
FGF-1全长蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示(154aa)，其N端第1-19位氨基酸残基包括了信号肽序列，截短N端第1-19位氨基酸残基不会影响FGF-1的活性和功能，因此，本实施例构建的融合蛋白包括FGF-120-154。
由于FGF-1的N端序列一般不会影响其活性，因此将TAT’置于融合蛋白的N端从而获得TAT'-FGF-1融合蛋白，其包括146个氨基酸残基。
通过重叠PCR构建上述融合蛋白的嵌合基因，将获得的嵌合基因构建到真核细胞表达载体pGAPZαA中，并在酵母中进行重组表达、纯化获得TAT'-FGF-1融合蛋白。
FGF-1蛋白也根据上述方法重组表达获得。
神经干细胞的解剖分离
参见实施例1对神经干细胞进行解剖分离以及传代培养从而获得神经球。
将传代培养获得的神经球分为3组进行神经球分化测试，分别测试空白对照组、添加100μg/mL TAT-PTD-FGF-1融合蛋白、添加100μg/mL TAT'-FGF-1融合蛋白的3个实验组的神经元再生能力。所选用的培养基为DMEM/F12，在培养约5-6天后，将上述3组神经球分别通过DAPE和β-tubulin荧光染色来确定神经球分化情况。
结果显示，TAT'-FGF-1融合蛋白(图1右图)相较于TAT-PTD-FGF-1融合蛋白(图1左图)具有更佳的促神经元再生功能，其能显著促进神经球分化为神经元，结果见图1。经统计分析可知，TAT'-FGF-1融合蛋白能够使得约71％的神经元的突起长度达到150微米以上，而TAT-PTD-FGF-1融合蛋白仅能够使得约48％的神经元的突起长度达到150微米以上。
实施例3：TAT'-FGF-1融合蛋白促进脊髓损伤小鼠的恢复
脊髓损伤小鼠模型的制备
小鼠称重后氯胺酮、咪唑安定腹腔麻醉，待麻醉完全后，将小鼠固定于解剖板上，碘消毒后，于小鼠肩胛骨下缘约一横指处，在背部后正中作一长约2.5cm的纵行切口，切开皮肤及皮下组织，显露深筋膜；背部脂肪垫的下缘为中心，切开腰背筋膜及附着在棘突、椎板上的肌肉并向两侧分离，直至显露小关节突；定位准确后，用薄口持针器咬除T9棘突及全椎板，以脊髓为中心显露直径约2.8mm圆形区，在硬膜表面垫一弯曲度与脊髓表面一致的塑料垫片；以T8、T9相对区域为损伤区，后正中血管为中心，打击面积为2×3mm2：用直径2.4mm，重10g的圆柱状金属棒在细玻璃管的引导下从2.5cm高处垂直落下，打击垫片至脊髓急性挫伤，从L5、L6棘突间隙蛛网膜下腔留置导管，导管(PE-10聚乙烯管(内径0.28mm，外径0.61mm))向损伤侧蛛网膜下腔缓慢插入约4.0cm至T10-T11水平，导管妥善固定于L6棘突及皮下软组织，依次缝合胸、腰段组织及皮肤；术后次日起手工挤压膀胱帮助排尿，一日两次，并保持小鼠身体干燥，直到建立自主排尿反射，观察体重状况，自由摄食与饮水。
实验分组
将108只小鼠随机分为3组，即对照组：脊髓打击损伤埋管后，术后1周内隔天经小鼠尾静脉注入生理盐水20μL；TAT-PTD-FGF-1融合蛋白组：脊髓打击损伤后于损伤即刻及术后10天内，隔天经小鼠尾静脉注入TAT-PTD-FGF-1融合蛋白20μL(200μg/mL)；TAT'-FGF-1融合蛋白组：脊髓打击损伤后于损伤即刻及术后10天内，隔天经小鼠尾静脉注入TAT'-FGF-1融合蛋白20μL(200μg/mL)。
行为学评价
每组随机选取6只小鼠分别于术前、术后3d、1w、3w、5w、8w进行斜板实验和BBB运动神经功能评分。
IP实验是将大鼠头朝左横放在改良的Rivlin斜板上，从水平位置起逐渐增大角度，以动物能够在板上停留5秒而不跌落的最大角度作为评分标准，重复3次取平均值。
BBB是指将动物置于7cm高，直径90cm的平坦不滑的塑胶模板上，观察4min，对动物后肢功能进行评分。
评分结果见表2：
表2脊髓损伤后，IP实验和BBB评分评价小鼠下肢功能恢复情况
结果显示：脊髓损伤后，小鼠在短时间内双下肢的功能丧失，肌力降为零，膀胧出现尿储留，呈现出脊髓休克的表现。大约在3-6天左右，小鼠的下肢肌力开始逐渐恢复。
TAT'-FGF-1融合蛋白组虽比bFGF组恢复早，但在lw前的差别无统计学意义，3周时，各组实验动物行为功能的恢复幅度加大，TAT'-FGF-1融合蛋白组后肢大多能负重，并可用足背行走，而对照组只有关节的明显活动，TAT'-FGF-1融合蛋白组PI评分和BBB评分均显著高于对照组。
在功能恢复后期约8周时，TAT'-FGF-1融合蛋白组行为学评分值仍较对照组高。
即，结果表明，TAT'-FGF-1融合蛋白组小鼠的后肢功能，无论是静态肌力还是动态活动都好于对照组，TAT'-FGF-1融合蛋白的应用对小鼠后肢功能的恢复有一定的促进作用，其能够用于治疗或辅助治疗脊髓损伤。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 温州医科大学
<120> 一种FGF-1融合蛋白及其在脊髓损伤治疗中的用途
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Tyr Arg Arg Lys Lys Arg Arg Lys Arg Arg Arg
1 5 10
<210> 2
<211> 154
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Ala Glu Gly Glu Ile Thr Thr Phe Thr Ala Leu Thr Glu Lys Phe Asn
1 5 10 15
Leu Pro Pro Gly Asn Tyr Lys Lys Pro Lys Leu Leu Tyr Cys Ser Asn
20 25 30
Gly Gly His Phe Leu Arg Ile Leu Pro Asp Gly Thr Val Asp Gly Thr
35 40 45
Arg Asp Arg Ser Asp Gln His Ile Gln Leu Gln Leu Ser Ala Glu Ser
50 55 60
Val Gly Glu Val Tyr Ile Lys Ser Thr Glu Thr Gly Gln Tyr Leu Ala
65 70 75 80
Met Asp Thr Asp Gly Leu Leu Tyr Gly Ser Gln Thr Pro Asn Glu Glu
85 90 95
Cys Leu Phe Leu Glu Arg Leu Glu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ile
100 105 110
Ser Lys Lys His Ala Glu Lys Asn Trp Phe Val Gly Leu Lys Lys Asn
115 120 125
Gly Ser Cys Lys Arg Gly Pro Arg Thr His Tyr Gly Gln Lys Ala Ile
130 135 140
Leu Phe Leu Pro Leu Pro Val Ser Ser Asp
145 150

Claims (10)

1.一种穿膜肽-FGF-1融合蛋白，其特征在于：所述穿膜肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述FGF-1多肽片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
2.根据权利要求1的融合蛋白，其特征在于：所述穿膜肽位于融合蛋白的N末端。
3.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述穿膜肽位于融合蛋白的N末端。
4.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白的N末端和C末端均具有穿膜肽。
5.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所FGF-1多肽片段的氨基酸序列如SEQID NO：2的第20-154位所示。
6.一种编码核苷酸，其特征在于：所述编码核苷酸编码权利要求1-5任一项所述的融合蛋白。
7.一种重组载体，其特征在于：所述重组载体包括权利要求6所述的编码核苷酸。
8.根据权利要求7所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体还包括启动子、增强子等调控元件。
9.权利要求1-5任一项所述的融合蛋白在制备治疗或辅助治疗脊髓损伤药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述药物中还包括药学上可接受的载体，优选地，所述载体为佐剂、稀释剂和或赋形剂。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003097671A1 (en) * 2002-03-29 2003-11-27 Creagene Inc. Cytoplasmic transduction peptides and uses thereof
CA2747220A1 (en) * 2008-12-17 2010-06-24 Richard Beliveau Membrane type-1 matrix metalloprotein inhibitors and uses thereof
CN103372199A (zh) * 2012-04-16 2013-10-30 广州暨南大学医药生物技术研究开发中心 一种预防和治疗神经退行性疾病的新型脑部靶向制剂
WO2014114023A1 (zh) * 2013-01-25 2014-07-31 北京银杏德济生物技术有限公司 一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003097671A1 (en) * 2002-03-29 2003-11-27 Creagene Inc. Cytoplasmic transduction peptides and uses thereof
CA2747220A1 (en) * 2008-12-17 2010-06-24 Richard Beliveau Membrane type-1 matrix metalloprotein inhibitors and uses thereof
CN102300987A (zh) * 2008-12-17 2011-12-28 安吉奥开米公司 膜型-1基质金属蛋白抑制剂及其用途
CN103372199A (zh) * 2012-04-16 2013-10-30 广州暨南大学医药生物技术研究开发中心 一种预防和治疗神经退行性疾病的新型脑部靶向制剂
WO2014114023A1 (zh) * 2013-01-25 2014-07-31 北京银杏德济生物技术有限公司 一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YADONG HUANG: "High-level expression and purification of Tat-haFGF19-154", 《APPL MICROBIOL BIOTECHNOL》 *

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