CN110003130B - 一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法 - Google Patents
一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110003130B CN110003130B CN201910349139.XA CN201910349139A CN110003130B CN 110003130 B CN110003130 B CN 110003130B CN 201910349139 A CN201910349139 A CN 201910349139A CN 110003130 B CN110003130 B CN 110003130B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hypochlorous acid
- reaction
- fluorescent probe
- dichloromethane
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N hypochlorous acid Chemical compound ClO QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 61
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 title claims abstract description 49
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 29
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 12
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N ethyl (e)-3-[3-amino-2-cyano-1-[(e)-3-ethoxy-3-oxoprop-1-enyl]sulfanyl-3-oxoprop-1-enyl]sulfanylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\SC(=C(C#N)C(N)=O)S\C=C\C(=O)OCC NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N 0.000 claims description 10
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 9
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims description 9
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 9
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 claims description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 9
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 6
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 6
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 6
- WFQDTOYDVUWQMS-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-4-nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(F)C=C1 WFQDTOYDVUWQMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- FKLJPTJMIBLJAV-UHFFFAOYSA-N Compound IV Chemical compound O1N=C(C)C=C1CCCCCCCOC1=CC=C(C=2OCCN=2)C=C1 FKLJPTJMIBLJAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- FZZQNEVOYIYFPF-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1,6-diol Chemical compound OC1=CC=CC2=CC(O)=CC=C21 FZZQNEVOYIYFPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 3
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 abstract description 9
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 12
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 7
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 6
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 6
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 5
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 2
- WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N hypochlorite Chemical compound Cl[O-] WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000003869 coulometry Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N methanol-d1 Chemical compound [2H]OC OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000007344 nucleophilic reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D265/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
- C07D265/28—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines
- C07D265/34—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines condensed with carbocyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
- C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
- G01N21/643—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" non-biological material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6447—Fluorescence; Phosphorescence by visual observation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
- C09K2211/1007—Non-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
- C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
- C09K2211/1029—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom
- C09K2211/1033—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom with oxygen
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
本发明公开了一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法。所述探针的结构为
。该荧光探针本身的荧光很弱，加至水或有机溶剂后所得溶液为淡紫色，当与次氯酸作用后，溶液的颜色加深，并且显示出荧光增强。本发明检测次氯酸的荧光探针对次氯酸检测的选择性高，检测灵敏度高，而且现象明显，便于识别。本发明检测次氯酸的荧光探针的制备方法简单，制备的产品产率高，适合大规模推广应用。
Description
技术领域
本发明属于分析检测领域，具体涉及一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法。
背景技术
次氯酸是生物体内重要的活性氧（ROS）之一，与动物和人类的健康密切相关。次氯酸在生物体内主要以次氯酸根形式存在。有研究表明，次氯酸在细胞的分化、迁移、传导和免疫等生理过程中发挥着及其重要的作用，但是，当其浓度较高时却能引起一系列的疾病，甚至中毒。所以实现对于次氯酸的实时可视化检测能够对这些疾病进行监控。
随着现代生活水平的提高，人们对健康的关注度也日益提高。近年来，次氯酸对人类健康的重要性，己经受到越来越多的关注，快速定量检测生物体内次氯酸的浓度具有十分重要的意义。因此，开发有效的对于次氯酸在食物定量安全检测和安全监管、临床和环境应用的方法是非常重要的。传统的检测方法有很多，比如有碘还原滴定法，分光光度法，化学发光分析法和库仑法等。但上述方法大多操作手续繁琐，给实际操作带来一定的困难。
近年来，作为卓越的检测技术，荧光探针因为它的高选择性、高敏感性及实时成像性，已经越来越引起人们的高度关注，被广泛应用于各种物质的检测。通常情况下，荧光探针检测物质是依靠于荧光强度的增加或消减，因此探针的浓度、仪器的效率、环境等因素都会影响信号的输出。但是对于比率型荧光探针来说，利用两个不同波长处荧光强度的变化，可以很好地消除这些因素。
目前检测次氯酸的荧光探针很少，已经报道过的探针大都是基于对双键的亲核反应，这些探针往往需要较长的反应时间，大大限制了它们的应用。因此，开发新型的荧光探针检测次氯酸是非常重要的。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供了一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法。该荧光探针灵敏度高、反应时间短，颜色变化及荧光增强效果明显，且专一性较强。
本发明通过以下技术方案实现：
一种检测次氯酸的荧光探针，其分子结构式如下：
该荧光探针 I本身的荧光很弱，加至水或有机溶剂后所得溶液为浅紫色，当与次氯酸作用后，荧光探针苯胺上的氨基与次氯酸作用，作用后氨基被次氯酸氧化，然后连着氨基的苯环脱离出来，导致下颜色明显加深，并且显示出荧光增强的现象。
本发明中，一种检测次氯酸的荧光探针的制备方法，包括以下步骤：
（1）将化合物Ⅳ和1,6二羟基萘加入到DMF中反应，反应结束后，分离提纯，得化合物Ⅲ；
（2）将化合物Ⅲ、对硝基氟苯和碳酸钾加入DMF中反应，反应结束后，分离提纯，得到化合物Ⅱ；
（3）将化合物Ⅱ和铁粉加入到冰醋酸中反应，反应结束后，分离提纯，得到检测次氯酸的荧光探针I。
优选地，步骤（1）中所述的化合物Ⅳ和 1,6二羟基萘的摩尔比为1：1~1.5。
优选地，步骤（2）中所述的化合物Ⅲ与对硝基氟苯的摩尔比为1：2~2.5。
优选地，步骤（3）中所述的化合物Ⅱ与铁粉的摩尔比为1：25~30。
优选地，步骤（1）中所述的反应条件为140℃下反应10h；所述的分离提纯的方法为将反应完成得到的溶液用去离子水洗涤，除去DMF，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，将固体用二氯甲烷溶解，用体积比50:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得到化合物Ⅲ。
优选地，步骤（2）中所述的反应条件为40℃下反应5h；所述的分离提纯的方法为将反应完成得到的溶液用去离子水洗涤，除去DMF，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，将固体用二氯甲烷溶解，用体积比100:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得到化合物Ⅱ。
优选地，步骤（3）中所述的反应条件为室温反应24h；所述的分离提纯的方法为向反应完成得到的溶液中加入饱和碳酸氢钠，消耗掉其中的冰醋酸，然后用二氯甲烷萃取，饱和食盐水干燥，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，将固体用二氯甲烷溶解，用体积比50:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得到检测次氯酸的荧光探针I。
本发明中，所述的检测次氯酸的荧光探针在定性或定量分析中的应用。
优选地，所述的检测次氯酸的荧光探针应用于水、有机溶剂和生物体中的一种。
以荧光增强、颜色发生明显改变的方式检测次氯酸。该荧光探针在水体系、有机溶剂体系或生物体中能够高选择性识别次氯酸，该探针本身的荧光在650nm处荧光较弱，加入到水或有机溶剂后所得溶液为浅紫色，当与次氯酸作用后，溶液的荧光在650nm处显著增强，颜色变成紫色。
有益效果
（1）本发明检测次氯酸的荧光探针对次氯酸检测的选择性高，专一性好。经过荧光分光光度仪检测可以发现，该荧光探针对次氯酸检测灵敏度高，颜色变化及荧光增强效果明显，便于识别。
（2）本发明检测次氯酸的荧光探针的制备方法简单，制备的产品产率高，适合大规模推广应用。
附图说明
图1为实施例2中不同浓度次氯酸条件下荧光探针的荧光光谱；其中最下面的曲线为不加入次氯酸条件下的荧光曲线，曲线从下往上次氯酸的浓度依次增加。
图2为实施例2中，不同浓度次氯酸条件下荧光探针的荧光强度变化的线性拟合曲线；其中荧光检测的激发波长为560nm、发射波长在650nm处的荧光强度。
图3为实施例3中加入不同生物小分子之后的荧光强度变化的对比图；其中荧光检测的激发波长为560nm，发射波长糟650nm处的荧光强度；1-16分别代表生物活性小分子(CH3)3COOH, Glu, Cys，S2O3 2-, S2-, SO3 2-, SO4 2-，HSO3 2-,ClO-, NO2 -,H2O2, Vc-, Zn2+,Fe3+，Mg2+,Ca2+。
图4为检测次氯酸的荧光探针I的1H NMR图。
图5为检测次氯酸的荧光探针I的质谱图。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
一种检测次氯酸的荧光探针，结构式如 I所示：
所述的检测次氯酸的荧光探针的制备方法包括以下步骤：
（1）将0.194g化合物Ⅳ和0.176g 1,6二羟基萘加至10ml DMF中，140℃温度下反应10h后，得到的溶液用去离子水洗涤，除去DMF，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，固体用二氯甲烷溶解，用体积比50:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得化合物Ⅲ，收率为54%。1HNMR (400 MHz, MeOD) δ 8.04 (dd, J = 15.4, 7.5 Hz, 2H), 7.96 (d, J = 2.4 Hz,1H), 7.59 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.11 – 7.03 (m, 2H), 6.81 (dd, J = 9.1, 2.6Hz, 1H), 6.59 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 6.21 (s, 1H), 1.31 – 1.26 (m, 4H), 1.23(d, J = 7.1 Hz, 6H)。
（2）将0.065g化合物Ⅲ与0.06g对硝基氟苯和0.06g碳酸钾加入10ml DMF中，于40℃反应5h后，得到的溶液用去离子水洗涤，除去DMF，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，将固体用二氯甲烷溶解，用体积比100:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得到化合物Ⅱ，收率为50%。13C NMR (101 MHz, DMSO) δ 162.34 (s), 157.79 (s), 151.66 (s), 147.12(s), 131.63 (s), 128.66 (d, J = 13.5 Hz), 126.81 (s), 124.68 (s), 122.33 (s),119.03 (s), 113.62 (s), 110.93 (s), 104.75 (s), 96.47 (s), 44.98 (s), 12.92(s)。
（3）将0.038g化合物Ⅱ和0.132g铁粉加入到10ml冰醋酸中，室温反应24h，得到的溶液中加入饱和碳酸氢钠，消耗掉其中的冰醋酸，然后用二氯甲烷萃取，饱和食盐水干燥，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，将固体用二氯甲烷溶解，用体积比50:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得到检测次氯酸的荧光探针I，收率为60%。1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 8.24 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 9.0Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.76 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 6.65 (dd, J = 9.1, 2.4 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.33(s, 1H), 3.50 – 3.44 (m, 4H), 1.25 (s, 6H)。
实施例2
检测次氯酸的荧光探针I与次氯酸的滴定实验：
在PBS缓冲液（pH=7.4）中，加入初始浓度为1mM的荧光探针，使溶液中荧光探针的浓度为10μM。然后，依次加入不同量的初始浓度为1.00mM的次氯酸钠，使得溶液中次氯酸钠的浓度分别为5μM、10μM、15μM、20μM、25μM、30μM、35μM、40μM、50μM、60μM、70μM、80μM、100μM、140μM、180μM、250μM、300μM，不加入次氯酸钠作为对照，静置0.5h使次氯酸钠与荧光探针充分反应。
用荧光光谱仪测试不同浓度次氯酸条件下的荧光光谱，荧光光谱的激发波长为560nm，发射波长为650nm，检测波长为650nm，结果分别如图1和图2所示。由图1可知，随着次氯酸的浓度的增加，在560nm波长下的荧光强度逐渐增强，说明本发明制备的荧光探针能够对次氯酸进行响应。
次氯酸荧光探针与次氯酸的荧光变化时间实验：
用荧光光谱仪测试不同时间条件下的荧光光谱，荧光光谱的激发波长为560nm，发射波长为650nm，检测波长为650nm，结果如图2所示。由图2可知，随着时间的增加，在560nm激发波长下的荧光强度逐渐增强，说明本发明制备的荧光探针能够对次氯酸进行响应。
实施例3
荧光探针检测次氯酸的选择性测试
如实施例2所述，在同样测试条件下，向溶液中加入过量的其它生物活性小分子（物种），测试加入不同生物活性小分子之后的荧光光谱，激发波长为560nm，发射波长为650nm，检测波长为650nm，结果如图3所示。由图3可知，1-16分别代表生物活性小分子(CH3)3COOH, Glu, Cys，S2O3 2-, S2-, SO3 2-, SO4 2-，HSO3 2-,ClO-, NO2 -,H2O2, Vc-, Zn2+,Fe3+，Mg2+,Ca2+。650nm处荧光强度只有次氯酸明显增强，其它生物活性小分子不对检测结果产生干扰，说明本发明制备的荧光探针对次氯酸具有较高的选择性，具有较好的专一性。
以上所述仅是本专利的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和替换，这些改进和替换也应视为本专利的保护范围。
Claims (10)
1.一种检测次氯酸的荧光探针，其特征在于，其分子结构式如下：
2.一种权利要求1所述检测次氯酸的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将化合物Ⅳ和1,6二羟基萘加入到DMF中反应，反应结束后，分离提纯，得化合物Ⅲ；
（2）将化合物Ⅲ、对硝基氟苯和碳酸钾加入DMF中反应，反应结束后，分离提纯，得到化合物Ⅱ；
（3）将化合物Ⅱ和铁粉加入到冰醋酸中反应，反应结束后，分离提纯，得到检测次氯酸的荧光探针I。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的化合物Ⅳ和 1,6二羟基萘的摩尔比为1：1~1.5。
4.根据权利要求 2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述的化合物Ⅲ与对硝基氟苯的摩尔比为1：2~2.5。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述的化合物Ⅱ与铁粉的摩尔比为1：25~30。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的反应条件为140℃下反应10h；所述的分离提纯的方法为将反应完成得到的溶液用去离子水洗涤，除去DMF，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，将固体用二氯甲烷溶解，用体积比50:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得到化合物Ⅲ。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述的反应条件为40℃下反应5h；所述的分离提纯的方法为将反应完成得到的溶液用去离子水洗涤，除去DMF，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，将固体用二氯甲烷溶解，用体积比100:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得到化合物Ⅱ。
8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述的反应条件为室温反应24h；所述的分离提纯的方法为向反应完成得到的溶液中加入饱和碳酸氢钠，消耗掉其中的冰醋酸，然后用二氯甲烷萃取，饱和食盐水干燥，后将有机层旋转蒸馏除去溶剂，将固体用二氯甲烷溶解，用体积比50:1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂柱层析分离，得到检测次氯酸的荧光探针I。
9.一种权利要求1所述的检测次氯酸的荧光探针在制备次氯酸定性或定量分析试剂中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的检测次氯酸的荧光探针应用于水、有机溶剂和生物体中的一种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910349139.XA CN110003130B (zh) | 2019-04-28 | 2019-04-28 | 一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910349139.XA CN110003130B (zh) | 2019-04-28 | 2019-04-28 | 一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110003130A CN110003130A (zh) | 2019-07-12 |
| CN110003130B true CN110003130B (zh) | 2022-06-10 |
Family
ID=67174672
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910349139.XA Active CN110003130B (zh) | 2019-04-28 | 2019-04-28 | 一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110003130B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107056774A (zh) * | 2017-04-06 | 2017-08-18 | 济南大学 | 一种次氯酸荧光探针及其制备方法和应用 |
| CN108641713A (zh) * | 2018-08-07 | 2018-10-12 | 济南大学 | 一种检测次氯酸根离子的荧光探针及其制备方法和应用 |
-
2019
- 2019-04-28 CN CN201910349139.XA patent/CN110003130B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107056774A (zh) * | 2017-04-06 | 2017-08-18 | 济南大学 | 一种次氯酸荧光探针及其制备方法和应用 |
| CN108641713A (zh) * | 2018-08-07 | 2018-10-12 | 济南大学 | 一种检测次氯酸根离子的荧光探针及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| A long-wavelength-emitting fluorescent turn-on probe for imaging hydrogen sulfide in living cells;Changquan Tang等;《Sensors and Actuators, B: Chemical》;20140523;第202卷;第99-104页 * |
| Real-time monitoring of intracellular nitric oxide using a long-wavelength-emitting probe via one-photon or two-photon excitation;Changquan Tang等;《Journal of Materials Chemistry C: Materials for Optical and Electronic》;20190213;第7卷;第3246-3252页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110003130A (zh) | 2019-07-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111205280B (zh) | 一种检测次氯酸的比率型荧光探针及其制备方法和应用 | |
| Chen et al. | A two-photon ESIPT based fluorescence probe for specific detection of hypochlorite | |
| Wang et al. | A fast-responsive fluorescent probe based on BODIPY dye for sensitive detection of hypochlorite and its application in real water samples | |
| CN108003869B (zh) | 一种高灵敏检测次氯酸根的荧光探针及其合成方法与应用 | |
| CN104447421B (zh) | 一种新型半胱氨酸和同型半胱氨酸荧光探针的制备与应用 | |
| CN110540837A (zh) | 一种过氧化氢近红外荧光探针的制备和应用 | |
| CN110590753B (zh) | 一种靶向线粒体的近红外so2衍生物比率荧光探针及其应用 | |
| CN111423423A (zh) | 一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用 | |
| CN113801105B (zh) | 线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针 | |
| CN105802606A (zh) | 一种含巯基氨基酸的荧光探针的制备和应用 | |
| CN106810561A (zh) | 一种溶酶体靶向次氯酸比率荧光探针及其制备方法与应用 | |
| CN110526908B (zh) | 基于2-苯乙烯基吲哚盐类衍生物长波发射可区分检测Cys/Hcy荧光探针及其应用 | |
| CN102391150B (zh) | 一种铁离子荧光探针化合物及其制备方法 | |
| CN105985769B (zh) | 一种苯硫酚荧光探针的制备及应用 | |
| CN108641713A (zh) | 一种检测次氯酸根离子的荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN109776369A (zh) | 一种超灵敏高选择性实时分析次氯酸的荧光探针 | |
| CN111518066B (zh) | 用于识别次氯酸根和亚硫酸氢根的双功能荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN105838352A (zh) | 一种基于苯并吡喃腈的可视化检测汞离子的探针的合成方法及应用 | |
| CN111138431B (zh) | 一种检测苯硫酚的反应型荧光探针及其合成方法与应用 | |
| CN110003130B (zh) | 一种检测次氯酸的荧光探针及制备方法 | |
| CN109160916B (zh) | 一种快速识别苯硫酚的荧光探针 | |
| CN111635354B (zh) | 一种咔唑Schiff碱为识别受体的多离子差异性检测荧光探针 | |
| CN103497189A (zh) | 1-羟基-3,4:9,10-苝四羧酸二酰亚胺、其合成方法及在氟含量测定中的应用 | |
| CN109503443B (zh) | 一种超灵敏高选择性实时分析次氯酸的荧光探针 | |
| CN108949159B (zh) | 一种检测钯离子的荧光探针及其合成方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 250399 No. 3501 University Road, Changqing District, Jinan City, Shandong Province Patentee after: Qilu University of Technology (Shandong Academy of Sciences) Country or region after: China Address before: 250399 No. 3501 University Road, Changqing District, Jinan City, Shandong Province Patentee before: Qilu University of Technology Country or region before: China |
|
| CP03 | Change of name, title or address |