CN109983344A - 糖化血红蛋白比例的测量方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种糖化血红蛋白比例的测量方法。根据本发明的糖化血红蛋白比例的测量方法，试剂由于其在盒旋转期间的顺序泄漏而易于使用，通过旋转将试剂全部排出而没有任何剩余试剂，并且试剂不相互混合。因此，测量结果准确，所使用的试剂和血液样本在量上几乎没有误差。

Description

糖化血红蛋白比例的测量方法
技术领域
本发明涉及糖化血红蛋白比例的测量方法。
背景技术
在医学诊断或基于药物治疗的领域，麻醉剂或有害化学物质的分析物的浓度测量最近已使用在医学或环境领域中。尤其是，用于医学诊断和治疗领域的生物样本的浓度测量随着人们摆脱各种疾病的愿望的增加越来越引起人们的兴趣。特别地，对于糖尿病来说，能够测量血糖的糖化血红蛋白测试允许通过一次性测量来检测血糖的相对长期平均值，因此人们对其具有越来越大的兴趣。
血红蛋白A1c(HbA1c)也被称为糖化血红蛋白，并且作为血红蛋白的一部分存在于人类红细胞中。当血液中的血糖(葡萄糖)浓度升高时，血液中的葡萄糖部分与血红蛋白结合。这种与葡萄糖结合的血红蛋白称为糖化血红蛋白。血糖水平可以通过这种糖化血红蛋白测试来确定，这种测试的优点在于，其可以通过采集血液来进行，而不必考虑用餐时间。
同时，美国专利No.6,300,142公开了一种装置，该装置用于在第一入口中使测试样本与第一反应物反应，继而在第二入口中使反应后的测试样本与第二反应物反应，以测量测试样本中存在的分析物。在这种情况下，必须定期和顺序地进行分析物的测量。此外，用户必须以他或她顺序地注入测试样本以使测试样本与其它材料发生反应的方式干预测量工艺。此外，由于与糖化血红蛋白结合的珠(bead)必须过滤一次，因此测量工艺复杂且耗时较长。也就是说，由于传统的测量工艺要求用户直接干预各种处理步骤，用户可能会感到不方便。另外，用户的直接干预使测量工艺更加复杂，从而进一步增加了测量时间。
因此，需要对糖化血红蛋白比例的测量方法进行研究，该方法易于测量并且可以提供准确的测量结果。
[现有技术文献]
[专利文献]
韩国专利No.10-1069823，名称为“糖化血红蛋白浓度测量盒”。
韩国专利No.10-0799354，名称为“试剂容器”。
发明内容
技术问题
本发明的发明人基于以下理念完成本发明：当使用糖化血红蛋白比例测量盒测量糖化血红蛋白比例时，试剂在盒旋转过程中自动顺序地漏出，使得其易于使用，并且通过旋转将试剂完全排出而无任何残留试剂，从而输出准确的测量结果。
因此，本发明的一个目的是提供一种方法，该方法通过诱导各试剂根据盒的旋转顺序地漏出能够更有效地测量糖化血红蛋白比例。
技术方案
为了实现上述目的，本发明提供了一种糖化血红蛋白比例的测量方法，所述方法使用在糖化血红蛋白比例测量装置中所使用的盒(cassette)，
其中，所述盒包括：试剂盒(cartridge)，所述试剂盒包括用于存储第一试剂的第一存储区、用于存储第二试剂的第二存储区以及能够将血液样本注入所述盒中的血液采样单元，并且所述试剂盒插入所述盒中；第一测量区，所述血液样本与所述第一试剂在所述第一测量区中反应以测量总血红蛋白量；以及第二测量区，反应后的所述血液样本与所述第二试剂在所述第二测量区中反应以测量糖化血红蛋白量，
其中，当所述盒旋转预定角度或更大角度时，所述第一试剂或所述第二试剂从所述第一存储区或所述第二存储区漏出，或移动到所述第一测量区或所述第二测量区中，并且
其中，所述方法包括以下步骤：
a)在第一方向上旋转所述盒以使所述第一试剂从所述第一存储区漏出；
b)在第二方向上旋转所述盒以使所述第一试剂在所述第一测量区中与所述血液样本反应，并测量总血红蛋白量；
c)在所述第一方向上旋转所述盒以将通过所述第一试剂与所述血液样本反应形成的血液样本混合物移动到所述第二测量区；
d)在所述第二方向上旋转所述盒以使所述第二试剂从所述第二存储区漏出；
e)在所述第一方向上旋转所述盒以将漏出的所述第二试剂移动到所述第二测量区，并用所述第二试剂洗涤所述血液样本混合物以测量糖化血红蛋白量；以及
f)将所测得的糖化血红蛋白量除以所测得的总血红蛋白量，以计算所述血液样本中的糖化血红蛋白比例。
在本发明的实施例中，所述方法在步骤a)之前还可以包括以下步骤：
1)识别所述盒的信息；以及
2)确认所述盒中是否存在第一试剂和第二试剂。
在本发明的实施例中，所述第一试剂包括溶血液(hemolysate)和糖化血红蛋白结合材料-珠(glycated hemoglobin binding material-bead)，所述糖化血红蛋白结合材料-珠选择性地与所述糖化血红蛋白反应，其中，所述珠可以包括选自由琼脂糖珠(agarosebead)、琼脂糖凝胶珠(sepharose bead)、乳胶珠、玻璃珠和磁珠组成的组中的一种或多种。
在本发明的实施例中，所述糖化血红蛋白结合材料可以包括选自由硼酸、伴刀豆球蛋白A和抗体组成的组中的一种或多种。
在本发明的实施例中，在步骤a)中所述盒可以在所述第一方向上旋转60°-130°，步骤b)中所述盒可以在所述第二方向上旋转60°-130°，步骤c)中所述盒可以在所述第一方向上旋转60°-130°，步骤d)中所述盒可以在所述第二方向上旋转150°-240°，并且在步骤e)中所述盒可以在所述第一方向上旋转150°-220°。
在本发明的实施例中，在步骤a)至步骤c)中所述第二试剂可以不从所述第二存储区漏出。
在本发明的实施例中，步骤b)可以包括如下步骤：摇动所述盒以促进所述血液样本与所述第一试剂反应。
在本发明的实施例中，步骤b)可以包括如下步骤：通过光学传感器由光学反射技术(optical reflectometry technique)测量所述血液样本中的所述总血红蛋白量。
在本发明的实施例中，步骤e)可以包括以下步骤：
e1)在所述第一方向上旋转所述盒以将第二试剂移动到所述第二测量区；以及
e2)用移动到所述第二测量区的所述第二试剂洗涤所述血液样本混合物以去除非特异性血红蛋白，并测量所述血液样本中的所述糖化血红蛋白量。
在本发明的实施例中，步骤e)可以包括如下步骤：通过所述光学传感器由所述光学反射技术测量所述血液样本中的所述糖化血红蛋白量。
有益效果
根据本发明的糖化血红蛋白比例的测量方法易于使用，因为试剂在盒的旋转过程中顺序地漏出，通过旋转将试剂完全排出而没有任何残留试剂，并且试剂不相互混合。因此，测量结果准确，因为所使用的试剂量和血液样本量几乎没有误差。
附图说明
图1是示出糖化血红蛋白比例的示例性测量装置的示意图，其中可以使用本发明的方法中使用的测量糖化血红蛋白比例的可分离盒。
图2是示出根据本发明的糖化血红蛋白比例测量方法的流程图。
图3示出根据本发明的方法中使用的盒的实施例的(a)外部外观和(b)内部外观。
图4示出根据本发明的方法中使用的盒的实施例的外部外观的(a)前视图、(b)后视图和(c)侧视图。
图5示出在将本发明的方法中使用的试剂盒插入到盒(a)之前和(b)之后的外部外观。
图6至图12是示出本发明的方法中使用的盒旋转以测量糖化血红蛋白比例的工艺的示例性图。
具体实施方式
下文将参照附图详细描述根据本发明的优选示例。然而，本发明不限于本文所描述的示例，并且可以以其它形式进行修改。
如本文所使用的，术语“在第一方向上的旋转”和“在第二方向上的旋转”是指在相互相反的方向上的旋转。例如，如果第一方向是顺时针方向，则第二方向自动表示逆时针方向，反之亦然。
术语“盒的原始状态”是指盒直立在平坦地面上而不旋转或倾斜，并且可以根据盒的形状包括相对于地面倾斜约-35°至30°的状态。
此外，本发明的方法中使用的盒具有在测量糖化血红蛋白比例之前试剂盒与盒分离的形式。在糖化血红蛋白比例的测量中，在将试剂盒插入包括第一试剂、第二试剂和血液样本的盒中时进行测量。
本发明提供了一种使用在糖化血红蛋白比例测量装置中使用的盒来测量糖化血红蛋白比例的方法，
其中，盒10包括：试剂盒20，试剂盒20包括用于存储第一试剂的第一存储区210、用于存储第二试剂的第二存储区220以及能够将血液样本注入到盒10内的血液采样单元200，并且试剂盒20插入盒10内；第一测量区120，血液样本与第一试剂在第一测量区120中反应以测量总血红蛋白量；以及第二测量区130，反应后的血液样本与第二试剂在第二测量区130中反应以测量糖化血红蛋白量，
其中，当盒10旋转预定角度或更大角度时，第一试剂或第二试剂从第一存储区210或第二存储区220漏出，或移动到第一测量区120或第二测量区130中，并且该方法包括以下步骤：
a)在第一方向上旋转盒10以使第一试剂从第一存储区210漏出；
b)在第二方向上旋转盒10以使第一试剂在第一测量区120中与血液样本反应，并测量总血红蛋白量；
c)在第一方向上旋转盒10以将由第一试剂与血液样本反应形成的血液样本混合物移动到第二测量区130；
d)在第二方向上旋转盒10以使第二试剂从第二存储区220漏出；
e)在第一方向上旋转盒10以将漏出的第二试剂移动到第二测量区130，并用第二试剂洗涤血液样本混合物以测量糖化血红蛋白量；以及
f)将所测得的糖化血红蛋白量除以所测得的总血红蛋白量，以计算血液样本中的糖化血红蛋白比例。
在本发明的实施例中，该方法在步骤a)之前还可以包括以下步骤：
1)识别盒的信息；以及
2)确认盒中是否存在第一试剂和第二试剂。
首先，将参照图1描述根据本发明的糖化血红蛋白比例的示例性测量装置30，该装置可以用于测量糖化血红蛋白比例的方法中。
参照图1，插入有试剂盒20的盒10用于糖化血红蛋白比例测量装置30中。此时，糖化血红蛋白比例测量装置30可根据特定图案(pattern)顺时针或逆时针旋转盒10。盒10的旋转使第一试剂或第二试剂顺序地分别漏到盒10中，以与血液样本一起搅拌，并移动到第一测量区120或第二测量区130中以便可以进行测量。糖化血红蛋白比例测量装置30可以使用光学反射技术测量糖化血红蛋白的量。
例如，当测量血液样本中糖化血红蛋白的量时，利用血红蛋白特异性地吸收特定频率的光信号的特性。此时，优选地，糖化血红蛋白比例测量装置30使用光接收元件和发光元件(例如光电二极管)来测量糖化血红蛋白的量。
参照图1，糖化血红蛋白比例测量装置30可以包括：盒10容纳部300、盒10检查传感器312、测量传感器314、驱动单元320、信号转换单元330和控制器340。
盒10容纳部300具有供盒10插入的空间。优选地，盒10容纳部300具有足够的空间，使得盒10可以顺时针或逆时针旋转而不会受到干扰。
盒10检查传感器312可以确认盒10中含有试剂(如第一试剂和第二试剂)的溶液是否恰当地存在于第一存储区210和第二存储区220中。盒检查传感器312通过使用光学传感器的吸收光度法(absorption photometry method)来确认试剂的检测，该光学传感器通过发光元件发射光信号，并通过光接收元件接收穿过盒10的光信号。也就是说，盒10检查传感器312将发光控制信号输出到发光元件，并将从光接收元件接收的光信号转换为电信号，从而能够检测第一试剂和第二试剂是否恰当地存在。
换句话说，发光元件发射具有特定波长的光信号。例如，当要测量糖化血红蛋白的量时，血液样本的血红蛋白可以发射波长约为400nm-600nm的光信号，该光信号特定地显示吸收。光接收元件接收从发光元件发出并穿过盒10的光信号。
测量传感器314测量盒10的第二测量区130中含有的总血红蛋白量和糖化血红蛋白量。此时，通过将发光控制信号输出到发光元件并将从光接收元件输入的光信号转换为电信号，可以测量盒10中所含有的总血红蛋白量和糖化血红蛋白量。
驱动单元320向盒10提供外部电源。例如，驱动单元320可以是电机。盒10可以通过外部电源根据预定规则旋转，并且旋转角度可以从-270°至270°自由选择。
信号转换单元330是通用的模拟-数字(A/D)转换器。
控制器340控制整个系统，并且优选地体现为其中集成了ROM、RAM和外围设备的微处理器。控制器340可以识别盒10，检测样本溶液的注射，或测量糖化血红蛋白的量。
也就是说，控制器340将发光控制信号输出到发光元件，并通过A/D转换器将从光接收元件输入的光信号转换为电信号，从而检测第一试剂和第二试剂是否恰当地存在于盒10中。以这种方式，能够测量盒10的第二测量区130中含有的糖化血红蛋白量。
接下来，将参照图3描述可以用于根据本发明的糖化血红蛋白比例的测量方法中的盒10。
第一存储区210和第二存储区220可以各存储至少一种试剂。
第一存储区210可以存储第一试剂。其中，第一试剂可以与血液样本反应。例如，第一试剂可以包括用于溶血血液样本的溶血液和选择性地与糖化血红蛋白反应的糖化血红蛋白结合材料-珠。
例如，溶血液可以是含有表面活性剂(例如N-2-羟乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸(N-2-Hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic Acid)(HEPES；pH8.1))的缓冲溶液。被溶血液溶血的血液样本可包括非糖化血红蛋白和糖化血红蛋白。
糖化血红蛋白结合材料可以是能够特异性结合糖化血红蛋白的材料。例如，糖化血红蛋白结合材料可以包括选自由硼酸(BA)、伴刀豆球蛋白A(凝集素)和抗体组成的组中的一种或多种。
珠(bead)可以包括选自由聚合物多糖载体(例如琼脂糖、纤维素或琼脂糖凝胶)、乳胶珠(例如聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯或聚乙烯甲苯(polyvinyltolune))、玻璃珠和磁珠组成的组中的一种或多种。
优选地，考虑反应后与糖化血红蛋白结合的糖化血红蛋白结合材料-珠的沉淀时间以及与糖化血红蛋白的反应性来选择糖化血红蛋白结合材料-珠的粒径。
总之，第一试剂可以包括用于溶血血液样本的溶血液和选择性地与糖化血红蛋白反应的糖化血红蛋白结合材料-珠。第一试剂使血液样本溶血，然后在约10秒-20秒后测量总血红蛋白量，并且第一试剂与糖化血红蛋白进行反应约30秒-100秒。
第二存储区220可存储第二试剂。第二试剂可以是包括能够洗掉第一试剂与血液样本的混合物的洗涤液的试剂。
血液样本的红细胞中存在的大多数血红蛋白(Hb)是非糖化血红蛋白(Ao)。只有4％-15％的非糖化血红蛋白与葡萄糖反应生成糖化血红蛋白(HbA1c)。因此，与血液样本反应的第一试剂中的糖化血红蛋白结合材料-珠包括非糖化血红蛋白以及糖化血红蛋白。因此，为了仅测量血液样本中的糖化血红蛋白，需要从糖化血红蛋白结合材料-珠中去除非糖化血红蛋白。为此，优选地，第二试剂包括能够洗掉非糖化血红蛋白以便能够测量糖化血红蛋白的洗涤液。
当盒10旋转预定角度或更大角度时，第一试剂或第二试剂从第一存储区210或第二存储区220漏出，或移动到第一测量区120或第二测量区130。如果在步骤a)和d)中，盒10不以第一试剂或第二试剂可以漏出的方向和角度旋转，则第一试剂或第二试剂可能不会从第一存储区210或第二存储区220漏出。
第一存储区210和第二存储区220可以形成为使得第一试剂或第二试剂直到盒10旋转超过预定角度前不会漏出。根据本发明的方法中使用的盒10，即使包括第一存储区210和第二存储区220的试剂盒20插入盒10中，第一试剂和第二试剂在盒10不旋转的原始状态下也不会漏出。仅当插入有试剂盒20的盒10旋转预定角度或更大角度时，第一试剂或第二试剂可以顺序地漏出。因此，可以在第一存储区210和第二存储区220的上侧形成泄漏孔，该泄漏孔是供试剂漏出的通道。另外，每个泄漏孔可以彼此反向形成在每个存储区的上端，以便当盒10在相反的方向上旋转时，第一试剂和第二试剂可以独立地漏出。
根据盒10的旋转而漏入盒10内的血液样本、第一试剂和第二试剂也可以根据盒10的旋转独立地从盒10移动到测量区。
第一测量区120是血液样本与第一试剂反应的区域，并同时测量与第一试剂反应的血液样本中的总血红蛋白量。在第一测量区120中，可通过光学反射技术测量血液样本中的总血红蛋白量。例如，光学反射技术利用血红蛋白特异性地吸收特定频率的光信号的特性。可以通过血红蛋白的特性相对地测量光的强度或色调来测量总血红蛋白的浓度。
第二测量区130是在将血液样本与第一试剂混合并在第一测量区120中测量总血红蛋白量之后，与第一试剂反应的血液样本混合物根据盒10的旋转移动的区域，也是血液样本混合物与第二试剂反应并且测量糖化血红蛋白量的区域。测量原理可以与第一测量区120的测量原理相同。这里，术语“反应”是指一种综合反应，不仅包括化学反应，而且包括洗涤、结合、搅拌等。
血液采样单元200收集并包含血液样本，并将血液样本注入盒10中，并且可以是毛细管的形式。
这样，通过血液采样单元200的毛细管的形式吸入(suck)待测血液样本。特别地，血液采样单元200的端部(tip)的内径小于其余部分的内径，使得容易产生毛细现象。
另一方面，当血液样本从血液采样单元200注入盒10中时，如果要采样的血液样本量不恒定或超过测量限制量，则可能导致结果值的误差。如果血液采样单元200中含有过量的血液，则测量装置可能偏离可测量范围从而提供过量的值。例如，在从Infopia有限公司获得的Clover A1c的情况下，可测量的总血红蛋白水平为7g/dl-20g/dl，如果注入过量血液，则装置会识别为血红蛋白水平超出可测量范围，从而导致显示的测量值高于正常值。
因此，血液采样单元200的形式很重要。血液采样单元200的端部包括平行于中心形成的间隙，端部的宽度朝向端部的末端变窄，并且内部形成的间隙可以形成靠近曲线的凹槽。
测量所需的血液量优选为2.5ul-5.5ul。根据本发明的血液采样单元200可以包含约3ul的血液，并且其具体形式防止过量的血液一起粘附到血液采样单元200。
盒10还可以包括插入引导单元110，插入引导单元110用于当试剂盒20插入盒10中时引导插入方向。
第一存储区210优选地插入盒10中，以便比第二存储区220更接近第一测量区120和第二测量区130。插入引导单元110可以是形成在盒10的内表面上的凹凸形状，优选地，试剂盒20可以通过插入引导单元110仅在一个方向上插入盒10中，但不限于此。
试剂盒20还包括防漏单元230，防漏单元230分别设置在第一存储区210和第二存储区220的一端，以防止第一试剂和第二试剂漏出，并且当试剂盒20插入盒10中时可以从试剂盒20移除。
防漏单元230可以分别形成于第一存储区210和第二存储区220的一端(优选上侧)，并可以从外部密封存储在存储区中的第一试剂和第二试剂。当试剂盒20插入盒10中时，防漏单元230可以被移除部100抓住、移除或损坏。防漏单元230可以是箔盖或箔片，并且可以是未被试剂腐蚀或损坏的部件。
通过移除部100移除防漏单元230，移除部100设置在盒10的入口中，并可以具有突出部，以便能够抓住和移除防漏单元230。
当试剂盒20插入盒10中时，通过移除部100自动移除防漏单元230，并且移除部100可具有合适的突出形状，以便抓住和移除防漏单元230。
当盒10基于原始状态在第一方向上旋转60°-130°时，第一试剂可以从第一存储区210漏出。
当盒10基于原始状态在第二方向上旋转60°-130°时，第二试剂可以从第二存储区220漏出。
第一方向上的旋转和第二方向上的旋转指在相互相反的方向上的旋转。即使移除了防漏单元230，第一试剂或第二试剂也可能不会泄漏，直到盒10旋转。当在移除防漏单元230后，盒10在第一方向或第二方向上旋转60°-130°时，第一试剂或第二试剂可以通过在每个存储区的上侧形成的泄漏孔漏出。例如，当盒10在第一方向上旋转60°-130°时，只有第一试剂可以漏出，而第二试剂不会漏出。相反，当盒10在第二方向上旋转60°-130°时，只有第二试剂可以漏出，而第一试剂不会漏出。
盒10还可以包括用于引导血液样本、第一试剂或第二试剂移动到第一测量区120或第二测量区130的传送引导单元140。
传送引导单元140是形成在盒10内的凹凸形状，并引导使得根据盒10的旋转，从第一存储区210漏出的第一试剂可以移动到第一测量区120，来自第一测量区120的血液样本和第一试剂的混合物可以移动到第二测量区130，并且从第二存储区220漏出的第二试剂可以移动到第二测量区130。
盒10还可以包括位于第二测量区130的一端的样本吸收单元150，以吸收测量的血液样本和样本。样本吸收单元150吸收测量的血液样本混合物，以防止血液样本混合物漏出。例如，为了测量糖化血红蛋白的量，样本吸收单元150可以吸收存在于第二测量区130中的除了与糖化血红蛋白结合的糖化血红蛋白结合材料-珠之外的非糖化血红蛋白和其余物质。样本吸收单元150可以设置在第二测量区130的侧面。在本发明的实施例中，样本吸收单元150可以包括但不限于吸收垫。
盒10还可以包括光学窗口160，从光学窗口160反射从外部光学传感器接收的光。此时，优选地，外部光学传感器位于糖化血红蛋白比例测量装置上，反应盒10插入该装置内。
之后，将参照图2详细描述使用用于测量糖化血红蛋白比例的盒10的根据本发明的糖化血红蛋白比例的测量方法。
图2是示出使用盒10测量糖化血红蛋白比例的方法的流程图。如图2所示，糖化血红蛋白比例测量装置30识别接合在其中的盒10的信息(S100)。
然后，糖化血红蛋白比例测量装置30确认盒10中是否存在第一试剂和第二试剂(S110)。这可以通过盒10检查传感器312确认。
从人体采集的血液样本可以从外部直接注入盒10中，或者可以通过根据本发明的实施例的血液采样单元200注入，但不限于此。
然后，糖化血红蛋白比例测量装置30在第一方向上旋转盒10以使第一试剂从第一存储区210漏出(S120)。
接下来，盒10旋转至其原始状态，在第一测量区120中用第一试剂对血液样本中的红细胞溶血，测量总血红蛋白量，然后振动盒10以使第一试剂与糖化血红蛋白反应(S130)。由此，血液样本和第一试剂反应以形成血液样本混合物。这里，可以顺时针和逆时针将盒10振动或摇动预定的一段时间，例如约1分钟，以便溶血的血液样本能与糖化血红蛋白结合材料-珠充分反应。这是为了使血液采样单元200的血液样本被第一试剂溶血，并同时与糖化血红蛋白结合材料-珠特异性地反应。当测量血液样本中的总血红蛋白量时，优选通过光学传感器利用光学反射技术测量血液样本中的总血红蛋白量。此外，盒10可旋转约1°-5°，以便在测量期间血液样本混合物可以靠近第一测量区120聚集。
然后，当糖化血红蛋白比例测量装置30沿第一方向旋转盒10时，血液样本在第一测量区120中与第一试剂混合，测量总血红蛋白量，并将与第一试剂反应后的血液样本混合物移到第二测量区130(S140)。存在于第二测量区130中的除了与糖化血红蛋白结合的糖化血红蛋白结合材料-珠之外的非糖化血红蛋白和其余物质可以被吸收到样本吸收单元150中。
然后，糖化血红蛋白比例测量装置30在第二方向上旋转盒10以使第二试剂从第二存储区220漏出(S150)。
然后，糖化血红蛋白比例测量装置30在第一方向上旋转盒10以将漏出的第二试剂移动到第二测量区130，并用第二试剂洗涤血液样本混合物以测量糖化血红蛋白量(S160)。这里，当含有洗涤液的第二试剂洗涤血液样本混合物时，非特异性存在于血液样本中的非糖化血红蛋白(Ao)可以与第二试剂一起被去除并被吸收到样本吸收单元150中。当在测量与第一试剂反应的血液样本混合物中的总血红蛋白量的情况下时，可以通过光学传感器由光学反射技术测量血液样本中的糖化血红蛋白量。
然后，通过将测得的糖化血红蛋白量除以测得的总血红蛋白量来计算血液样本中的糖化血红蛋白比例(S170)。此时，由以下等式1计算糖化血红蛋白比例。
[等式1]
糖化血红蛋白比例(％)＝糖化血红蛋白/总血红蛋白×100
在本发明的实施例中，在步骤a)中所述盒可以在第一方向上旋转60°-130°，步骤b)中所述盒可以在第二方向上旋转60°-130°，步骤c)中所述盒可以在第一方向上旋转60°-130°，步骤d)中所述盒可以在第二方向上旋转150°-240°，并且在步骤e)中所述盒可以在第一方向上旋转150°-220°。
优选地，在步骤a)中所述盒可以在第一方向上旋转60°-110°，步骤b)中所述盒可以在第二方向上旋转60°-110°，步骤c)中所述盒可以在第一方向上旋转80°-120°，步骤d)中所述盒可以在第二方向上旋转180°-220°，并且在步骤e)中所述盒可以在第一方向上旋转170°-210°。
更优选地，在步骤a)中所述盒可以在第一方向上旋转80°-100°，步骤b)中所述盒可以在第二方向上旋转80°-100°，步骤c)中所述盒可以在第一方向上旋转90°-110°，步骤d)中所述盒可以在第二方向上旋转180°-200°，并且在步骤e)中所述盒可以在第一方向上旋转180°-200°。
旋转角度的范围可以是任何范围，只要第一试剂或第二试剂在有效范围内漏出和移动并且可以测量血红蛋白量即可，并且不必局限于该范围。
图3示出可以用于根据本发明的糖化血红蛋白比例测量方法中的盒10的实施例的(a)外部外观和(b)内部外观。盒10可以用于测量血液中糖化血红蛋白(HbA1c)的量。此时，试剂盒20可以插入盒10中，盒10接合在糖化血红蛋白比例测量装置30中以相对于水平轴可顺时针或逆时针旋转。盒10包括入口中的移除部100，用于试剂盒20插入，使得在试剂盒20插入装置中时可以抓住和移除试剂盒20的防漏单元。此外，盒10在内部中包括插入引导单元110，用于引导试剂盒20仅在一个方向上插入盒10中。盒10还在内部的底部上包括第一测量区120，在第一测量区120中，第一试剂与血液样本反应，并测量总血红蛋白量；在右侧的中间包括第二测量区130，在第二测量区130中，第二试剂洗涤反应后的血液样本，并测量糖化血红蛋白量。盒10还在右侧包括样本吸收单元150，样本吸收单元150吸收除了与糖化血红蛋白结合的糖化血红蛋白结合材料-珠之外的非糖化血红蛋白和其余物质。盒10还在外部包括光学窗口160，通过外部光学传感器接收的光从光学窗口160反射。
图4示出根据本发明的糖化血红蛋白比例测量方法中可以使用的试剂盒20的外部外观的(a)前视图、(b)后视图和(c)侧视图。试剂盒20包括：用于存储第一试剂的第一存储区210；用于存储第二试剂的第二存储区220；用于收集、容纳和漏出血液样本的血液采样单元200；以及防漏单元230，防漏单元230用于防止第一试剂和第二试剂漏出，直到试剂盒20插入盒10中。防漏单元230分别形成在试剂盒20的上侧。由于试剂盒20具有直立的菱形，即使去除了防漏单元230，第一试剂和第二试剂也可以以菱形形状积聚在试剂盒20的底部。因此，只要试剂盒20处于其原始状态而不旋转，试剂就不会从存储区漏出。防漏单元230可以是箔盖或箔片。
图5示出在将试剂盒20插入盒10中(a)之前和(b)之后的状态。在盒10中形成插入防止单元，以使试剂盒20可以仅沿一个方向插入，并且在插入时通过试剂盒20的移除部100可以移除盒20的防漏单元230。
下文将参照图6至图12描述根据插入有试剂盒20的盒10的旋转的糖化血红蛋白的测量工艺。
图6示出旋转前包括第一试剂、第二试剂和血液样本的盒10的准备状态。试剂盒20插入盒10中，第一试剂包含在试剂盒20的第一存储区210中，第二试剂包含在第二存储区220中。当试剂盒20插入盒10中时，通过移除部100来抓住和移除防漏单元230，因此防漏单元230不存在。即使盒10处于其没有旋转角度的原始状态下，并且防漏单元230不存在，第一试剂和第二试剂也不会从存储区漏出。在开始测量之前，可以摇动盒10约30秒，以使盒10中的试剂很好地混合。
预先，如图7所示，盒10可以顺时针旋转约90°，由此，第一储存区210中包含的第一试剂可以通过重力从第一储存区210的泄漏孔漏出。此时，第二试剂不会通过第二储存区220泄漏。
接下来，如图8所示，当盒10逆时针旋转约90°以处于其原始状态时，第一试剂通过传送引导单元140移动到第一测量区120。此时，从人体采集并容纳在血液采样单元200中的血液样本通过血液采样单元200的末端漏出，以与第一测量区120中的第一试剂反应。具体而言，使用糖化血红蛋白测量装置30可以将盒10摇动约1分钟，以使血液样本与第一试剂的反应更容易发生。此时，在第一测量区120中的反应完全结束之前，可以通过光学传感器由光学反射技术测量血液样本中的总血红蛋白量。
如图9所示，盒10可以顺时针旋转约110°，由此血液样本在第一测量区120中与第一试剂反应以测量总血红蛋白，然后反应后的血液样本混合物移动到第二测量区130。此时，存在于第二测量区130中的除了与糖化血红蛋白结合的糖化血红蛋白结合材料-珠之外的非糖化血红蛋白和其余物质可以被吸收到样本吸收单元150内。
如图10所示，当盒10再次逆时针旋转约200°时，基于其原始状态，盒10处于逆时针旋转约90°的状态，由此第二试剂可以在重力下通过第二存储区220的泄漏孔漏出。
之后，当如图11所示盒10再次顺时针旋转约90°，然后如图12所示顺时针旋转约90°时，第二试剂沿着传送引导单元140移动到存在血液样本混合物的第二测量区130。接下来，当第二试剂和血液样本反应时，即，第二试剂洗涤血液样本混合物时，可以从已去除了非糖化血红蛋白的血液样本混合物中测量糖化血红蛋白量。此时，可以通过光学传感器由光学反射技术测量血液样本中的糖化血红蛋白量。存在于第二测量区130中的除了与糖化血红蛋白结合的糖化血红蛋白结合材料-珠之外的非糖化血红蛋白和其余物质可以被吸收到样本吸收单元150内。
总之，如图6至图12所示，糖化血红蛋白比例测量装置30可以自动顺时针或逆时针旋转盒10。也就是说，第一试剂或第二试剂根据盒10的旋转顺序地从第一存储区210或第二存储区220漏出以与血液样本反应。也就是说，至少一种试剂根据旋转自动与血液样本反应。此外，图6至图12是示出盒10旋转过程的一个示例，并且可以体现各种其它旋转。在盒10的每个区域与上述实施例相比对称地放置的实施例的情况下，盒10可以以与上述旋转过程相反的方式旋转。
已经参照优选实施例描述了本发明。然而，本领域技术人员将理解，在不脱离本发明的精神或范围的情况下，可以在本发明中进行各种变化和修改。因此，所公开的实施例应被视为是示例性的而非限制性的。本发明的范围由权利要求限定，而不是由详细的描述限定，并且等同范围内的所有差别应被解释为包括在本发明中。
[附图说明]
10：盒 20：试剂盒
30：糖化血红蛋白比例测量装置 100：移除部
110：插入引导单元 120：第一测量区
130：第二测量区 140：传送引导单元
150：样本吸收单元 160：光学窗口
200：血液采样单元 210：第一存储区
220：第二存储区 230：防漏单元
300：盒容纳部 312：盒检查传感器
314：测量传感器 320：驱动单元
330：信号转换单元 340：控制器

Claims (10)

1.一种糖化血红蛋白比例的测量方法，所述方法使用在糖化血红蛋白比例测量装置中所使用的盒，
其中，所述盒包括：试剂盒，所述试剂盒包括用于存储第一试剂的第一存储区、用于存储第二试剂的第二存储区以及能够将血液样本注入所述盒中的血液采样单元，并且所述试剂盒插入所述盒中；第一测量区，所述血液样本与所述第一试剂在所述第一测量区中反应以测量总血红蛋白量；以及第二测量区，反应后的所述血液样本与所述第二试剂在所述第二测量区中反应以测量糖化血红蛋白量，
其中，当所述盒旋转预定角度或更大角度时，所述第一试剂或所述第二试剂从所述第一存储区或所述第二存储区漏出，或移动到所述第一测量区或所述第二测量区中，并且
其中，所述方法包括以下步骤：
a)在第一方向上旋转所述盒以使所述第一试剂从所述第一存储区漏出；
b)在第二方向上旋转所述盒以使所述第一试剂在所述第一测量区中与所述血液样本反应，并测量总血红蛋白量；
c)在所述第一方向上旋转所述盒以将通过所述第一试剂与所述血液样本反应形成的血液样本混合物移动到所述第二测量区；
d)在所述第二方向上旋转所述盒以使所述第二试剂从所述第二存储区漏出；
e)在所述第一方向上旋转所述盒以将漏出的所述第二试剂移动到所述第二测量区，并用所述第二试剂洗涤所述血液样本混合物以测量糖化血红蛋白量；以及
f)将测得的所述糖化血红蛋白量除以测得的所述总血红蛋白量，以计算所述血液样本中的糖化血红蛋白比例。
2.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，其中，所述方法在步骤a)之前还包括以下步骤：
1)识别所述盒的信息；以及
2)确认所述盒中是否存在第一试剂和第二试剂。
3.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，其中，所述第一试剂包括溶血液和糖化血红蛋白结合材料-珠，所述糖化血红蛋白结合材料-珠选择性地与所述糖化血红蛋白反应，其中，所述珠包括选自由琼脂糖珠、琼脂糖凝胶珠、乳胶珠、玻璃珠和磁珠组成的组中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，其中，所述糖化血红蛋白结合材料包括选自由硼酸、伴刀豆球蛋白A和抗体组成的组中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，其中，在步骤a)中所述盒在所述第一方向上旋转60°-130°，步骤b)中所述盒在所述第二方向上旋转60°-130°，步骤c)中所述盒在所述第一方向上旋转60°-130°，步骤d)中所述盒在所述第二方向上旋转150°-240°，并且在步骤e)中所述盒在所述第一方向上旋转150°-220°。
6.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，其中，在步骤a)至步骤c)中所述第二试剂不从所述第二存储区漏出。
7.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，其中，步骤b)包括如下步骤：摇动所述盒以促进所述血液样本与所述第一试剂反应。
8.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，其中，步骤b)包括如下步骤：通过光学传感器由光学反射技术测量所述血液样本中的所述总血红蛋白量。
9.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，
其中，步骤e)包括以下步骤：
e1)在所述第一方向上旋转所述盒以将第二试剂移动到所述第二测量区；以及
e2)用移动到所述第二测量区的所述第二试剂洗涤所述血液样本混合物以去除非特异性血红蛋白，并测量所述血液样本中的所述糖化血红蛋白量。
10.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白比例的测量方法，其中，步骤e)包括如下步骤：通过光学传感器由光学反射技术测量所述血液样本中的所述糖化血红蛋白量。
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