CN109971804A - 一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法 - Google Patents

一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109971804A
CN109971804A CN201910268420.0A CN201910268420A CN109971804A CN 109971804 A CN109971804 A CN 109971804A CN 201910268420 A CN201910268420 A CN 201910268420A CN 109971804 A CN109971804 A CN 109971804A
Authority
CN
China
Prior art keywords
hawthorn
oligogalacturonans
centrifuging
biocidal property
taking
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910268420.0A
Other languages
English (en)
Inventor
张平平
孟亚志
郝亚妮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin Agricultural University
Original Assignee
Tianjin Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tianjin Agricultural University filed Critical Tianjin Agricultural University
Priority to CN201910268420.0A priority Critical patent/CN109971804A/zh
Publication of CN109971804A publication Critical patent/CN109971804A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

本发明公开了一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法，本发明中一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法包括如下步骤：选择新鲜的山楂，清洗后切碎打浆，与盐酸溶液按一定的质量比混合，热水浸提，离心取上清液，旋转蒸发浓缩，用无水乙醇沉降，离心取沉淀，将沉淀冷冻干燥成山楂果胶粉，将所得山楂果胶粉在一定条件下酶解得到山楂果胶粗寡糖溶液，通过阴离子交换树脂分离纯化寡聚半乳糖醛酸，并通过牛津杯法进行抑菌实验检测，收集对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌具有抑菌性的寡聚半乳糖醛酸。

Description

一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法。
背景技术
随着社会的进步和人民生活水平的提高，人们对于食品保健意识日益增强。充分利用山楂资源，以山楂为原料制备山楂寡聚半乳糖醛酸，提高山楂加工利用率，为寡聚半乳糖醛酸在防腐剂等方面的开发利用打下良好基础。
目前，已公开的关于山楂加工相关的专利都主要集中在饮料、果酱、蜜饯等，并没有具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法。与半乳糖醛酸相关的专利比较少，CN103399147A公开了多聚半乳糖醛酸(PGA)的新应用，即PGA在制备检测类风湿性关节炎的物质中的应用以及检测类风湿性关节炎的方法及试剂盒。
本发明以山楂为原料，经过打浆、提取、果胶酶酶解、纯化得到寡聚半乳糖醛酸，并通过牛津杯抑菌试验检测制备具有抑菌活性的寡聚半乳糖醛酸。
发明内容
本发明目的是提供了一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法。
本发明采取的技术方案如下：
(1)原料的处理：选择新鲜的山楂，清洗后去核切碎，按2∶1山楂和水的比例打浆，放在冰箱中保存待用；
(2)提取果胶：取山楂浆与pH为2～3的盐酸按质量比1∶30～1∶40混合，70℃热水浸提50～90min，离心取上清液，旋转蒸发浓缩，用无水乙醇沉降，离心取沉淀，经过冷冻干燥得到山楂果胶粉；
(3)酶解：称取山楂果胶粉，溶于20～30倍质量的pH 7.4的PBS缓冲溶液中，加入0.1％～0.3％的果胶酶，50℃水浴2h，离心取上清液即为山楂果胶粗寡糖溶液，4℃冷藏待用；
(4)阴离子交换树脂预处理：取阴离子交换树脂，先用两倍体积的4％的氢氧化钠溶液浸泡2h，然后用两倍体积的4％的盐酸溶液浸泡2h，再用两倍体积的4％的氢氧化钠溶液浸泡2h，最后用蒸馏水反复冲洗直至中性；
(5)纯化：通过D201大孔强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂分离纯化寡聚半乳糖醛酸，将酶解后的山楂果胶粗寡糖上样，用多功能全自动部份收集器收集寡聚半乳糖醛酸；
(6)咔唑比色硫酸法测寡聚半乳糖醛酸含量：先用半乳糖醛酸标准品做标准曲线，再对样品进行测定，向试管中加入2mL硫酸，加入0.4mL待测样液，充分混匀，沸水加热10min，立即冷却，加入0.08mL咔唑，沸水加热15min，立即冷却，530nm比色测得吸光度值，对比标准曲线计算寡聚半乳糖醛酸含量；
(7)抑菌性研究：通过牛津杯法进行抑菌实验，将固体培养基倒入平板中，凝固之后放上牛津杯，将15～20mL有指示菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌)的半固体培养基倒入平板中，待半固体培养基完全凝固之后拔掉牛津杯，在孔中加入50μL不同浓度的半乳糖醛酸，并加氨苄做阳性对照，加蒸馏水做阴性对照。培养观察抑菌圈直径，分离得到对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌具有抑菌性的寡聚半乳糖醛酸。
本发明与现有产品相比具有以下优点：
本发明充分利用山楂制备具有抑菌活性的寡聚半乳糖醛酸，为山楂半乳糖醛酸作为天然防腐剂的研究奠定基础。
具体实施方式
通过以下具体实施例进一步详细说明本发明，但并不受限于此，可以在本发明权利要求限定的范围内进行各种改变。
实施例1：一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备
(1)原料的处理：选择新鲜的山楂，清洗后去核切碎，按2∶1山楂和水的比例打浆，放在冰箱中保存待用；
(2)提取果胶：取山楂浆与pH为2.5的盐酸按质量比1∶35混合，70℃热水浸提70min，离心取上清液，旋转蒸发浓缩至总体积的十分之一。用1.5倍体积的无水乙醇沉降5h，离心取沉淀，经过冷冻干燥得到山楂果胶粉；
(3)酶解：称取0.4g山楂果胶粉溶于10mL pH为7.4的PBS缓冲溶液中，加入0.2％的果胶酶，50℃水浴2h，离心取上清液即为山楂果胶粗寡糖溶液，4℃冷藏待用；
(4)阴离子交换树脂预处理：称取25g阴离子交换树脂，先用两倍体积的4％的氢氧化钠溶液浸泡2h，然后用两倍体积的4％的盐酸溶液浸泡2h，再用两倍体积的4％的氢氧化钠溶液浸泡2h，最后用蒸馏水反复冲洗直至中性；
(5)纯化：通过D201大孔强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂分离纯化寡聚半乳糖醛酸，将酶解后的山楂果胶粗寡糖上样，用多功能全自动部份收集器收集寡聚半乳糖醛酸；
(6)咔唑比色硫酸法测寡聚半乳糖醛酸含量：先用半乳糖醛酸标准品做标准曲线，再对样品进行测定，向试管中加入2mL硫酸，0.4mL待测样液，充分混匀，沸水加热10min，立即冷却，加入0.08mL咔唑，沸水加热15min，立即冷却，530nm比色测得吸光度值，对比标准曲线计算寡聚半乳糖醛酸含量；
(7)抑菌性研究：通过牛津杯法进行抑菌实验，将固体培养基倒入平板中，凝固之后放上牛津杯，将20mL有指示菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌)的半固体培养基倒入平板中，待半固体培养基完全凝固之后拔掉牛津杯，在孔中加入50μL不同浓度的半乳糖醛酸，并加氨苄做阳性对照，加蒸馏水做阴性对照，培养观察抑菌圈直径，分离得到对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌具有抑菌性的寡聚半乳糖醛酸。

Claims (2)

1.一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法，其特征在于以新鲜的山楂为原料，清洗后切碎打浆，与盐酸溶液按一定的质量比混合，热水浸提，离心取上清液，旋转蒸发浓缩，离心取沉淀，将沉淀冷冻干燥成山楂果胶粉，将所得山楂果胶粉在一定条件下酶解得到山楂果胶粗寡糖溶液，通过阴离子交换树脂分离纯化寡聚半乳糖醛酸，并通过牛津杯法进行抑菌实验，检测分离得到对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌具有抑菌性的寡聚半乳糖醛酸。
2.如权利要求1所述的一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法，包括以下步骤：
(1)原料的处理：选择新鲜的山楂，清洗后去核切碎，按2∶1山楂和水的比例打浆，放在冰箱中保存待用；
(2)提取果胶：取山楂浆与pH为2～3的盐酸按质量比1∶30～1∶40混合，70℃热水浸提50～90min，离心取上清液，旋转蒸发浓缩，用无水乙醇沉降，离心取沉淀，经过冷冻干燥得到山楂果胶粉；
(3)酶解：称取山楂果胶粉，溶于20～30倍质量的pH 7.4的PBS缓冲溶液中，加入0.1％～0.3％的果胶酶，50℃水浴2h，离心取上清液即为山楂果胶粗寡糖溶液，4℃冷藏待用；
(4)阴离子交换树脂预处理：取阴离子交换树脂，先用两倍体积的4％的氢氧化钠溶液浸泡2h，然后用两倍体积的4％的盐酸溶液浸泡2h，再用两倍体积的4％的氢氧化钠溶液浸泡2h，最后用蒸馏水反复冲洗直至中性；
(5)纯化：通过D201大孔强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂分离纯化寡聚半乳糖醛酸，将酶解后的山楂果胶粗寡糖上样，用多功能全自动部份收集器收集寡聚半乳糖醛酸；
(6)咔唑比色硫酸法测寡聚半乳糖醛酸含量：先用半乳糖醛酸标准品做标准曲线，再对样品进行测定，向试管中加入2mL硫酸，加入0.4mL待测样液，充分混匀，沸水加热10min，立即冷却，加入0.08mL咔唑，沸水加热15min，立即冷却，530nm比色测得吸光度值，对比标准曲线计算寡聚半乳糖醛酸含量；
(7)抑菌性研究：通过牛津杯法进行抑菌实验，将固体培养基倒入平板中，凝固之后放上牛津杯，将15～20mL有指示菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌)的半固体培养基倒入平板中，待半固体培养基完全凝固之后拔掉牛津杯，在孔中加入50μL不同浓度的半乳糖醛酸，并加氨苄做阳性对照，加蒸馏水做阴性对照。培养观察抑菌圈直径，证明分离得到的寡聚半乳糖醛酸对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌具有抑菌性。
CN201910268420.0A 2019-04-03 2019-04-03 一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法 Pending CN109971804A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910268420.0A CN109971804A (zh) 2019-04-03 2019-04-03 一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910268420.0A CN109971804A (zh) 2019-04-03 2019-04-03 一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109971804A true CN109971804A (zh) 2019-07-05

Family

ID=67082896

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910268420.0A Pending CN109971804A (zh) 2019-04-03 2019-04-03 一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109971804A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110724289A (zh) * 2019-11-28 2020-01-24 安阳工学院 一种制备富含山楂果胶、明胶的可食性膜的方法
CN116180333A (zh) * 2023-03-01 2023-05-30 湖北瑞康医用耗材有限公司 一种石墨烯无纺布及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20160022581A (ko) * 2014-08-20 2016-03-02 주식회사 비케이바이오 고미가 제거된 면역 증강용 감귤류 추출물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 건강기능식품
CN109221892A (zh) * 2018-09-11 2019-01-18 辽宁大学 果胶低聚糖及其制备方法和作为AGEs抑制剂的应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20160022581A (ko) * 2014-08-20 2016-03-02 주식회사 비케이바이오 고미가 제거된 면역 증강용 감귤류 추출물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 건강기능식품
CN109221892A (zh) * 2018-09-11 2019-01-18 辽宁大学 果胶低聚糖及其制备方法和作为AGEs抑制剂的应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
姚园: "山楂果胶和半乳糖醛酸寡糖的制备与应用研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *
宁正祥: "《食品成分分析手册》", 30 April 2001, 中国轻工业出版社 *
王巍: "山楂果胶寡糖制备及抑菌性能研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110724289A (zh) * 2019-11-28 2020-01-24 安阳工学院 一种制备富含山楂果胶、明胶的可食性膜的方法
CN116180333A (zh) * 2023-03-01 2023-05-30 湖北瑞康医用耗材有限公司 一种石墨烯无纺布及其制备方法
CN116180333B (zh) * 2023-03-01 2023-11-03 湖北瑞康医用耗材有限公司 一种石墨烯无纺布及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109971804A (zh) 一种具有抑菌性的山楂寡聚半乳糖醛酸的制备方法
CN107751389B (zh) 一种清爽型风味的功能性大豆乳清饮料及其生产方法
CN107163149B (zh) 一种莲子淀粉-蛋白复合物的制备方法
CN110358712B (zh) 一种乳酸菌组合物及其应用
CN104946564A (zh) 一株植物乳杆菌及其在低温青贮中的应用
CN109400752A (zh) 西番莲果皮中果胶的微波辅助酶法提取方法
CN105368689A (zh) 一种采用鲜苹果渣同时制备苹果醋和果醋酵素粉的方法
CN107058422A (zh) 一种植物乳杆菌高产胞外多糖的方法
CN109875009A (zh) 一种臭黄荆叶果冻的制备方法
Schellhaass CHARACTERIZATION OF EXOCELLULAR SLIME PRODUCED BY BACTERIAL STARTER CULTURES USED IN THE MANUFACTURE OF FERMENTED DAIRY PRODUCTS (YOGURT, SKIM MILK, ROPY)
CN106722943A (zh) 一种苹果酵素及其制备方法
CN105482955B (zh) 一种稠绵果酒的制备方法
CN104745664A (zh) 一种动物胎盘提取物的制备工艺
CN102002110A (zh) 海参多糖的制备方法
CN110055804A (zh) 一种耐水抗菌纸的制备方法
CN103211254B (zh) 一种山茱萸果肉饮料的加工方法
CN107455470A (zh) 一种紫薯炼乳
CN112493420A (zh) 一种家禽血豆腐的加工方法
CN102475346A (zh) 一种食用菌饮料的制备方法
CN110477403A (zh) 一种利用柑橘属果皮制备柑橘纤维的方法
CN106174281B (zh) 一种葡萄酒果冻及其制备方法
CN103070347B (zh) 一种阴米的制备方法
CN106359840B (zh) 一种低温酶解牡蛎肉制备低糖低盐牡蛎肽的方法
WO2010129153A2 (en) Random enzymatically modified pectin for use in fermented milk products
CN108850544A (zh) 一种安全利用种植于镉污染土壤的纤用苎麻副产物的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20190705

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication