CN109939026A - 含冬虫夏草的抗皮肤衰老组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及防治皮肤衰老的组合物，属于药品、化妆品领域。本发明所要解决的技术问题是提供防治皮肤衰老的组合物，该组合物是活性成分包括乙酰基六肽‑8、μ‑芋螺肽和冬虫夏草的产品。人群试用结果表明，将本发明组合物制备成精华液、面霜、乳液等形式的化妆品，涂抹于皮肤，即可发挥减少皱纹、修复皮肤角质层屏障功能的作用，从而达到防治皮肤衰老的目的，使用方便、安全；而且，该组合物起效迅速，效果显著。相较于目前通过注射肉毒素、玻尿酸及胶原蛋白等侵入式手段防治皮肤衰老的方法，本发明具有使用方便、安全性好、效果持久等优点，应用前景广阔。

Description

含冬虫夏草的抗皮肤衰老组合物

技术领域

本发明涉及防治皮肤衰老的组合物，属于药品、化妆品领域。

背景技术

面部、颈部以及其它部位的皮肤细纹和皱纹是通过老化、遗传、肌肉动作、阳光损害和重力的合力而形成，伴随着时间流逝，产生诸如抬头纹、鱼尾纹、川字纹等皮肤皱纹。从生理学上讲，皮肤的衰老表现在胶原蛋白和弹性蛋白的减少。目前，防治皮肤衰老的方法主要有：

1、使用添加了抗氧化物质如植物提取物、维他命、胶原蛋白、氨基酸等的化妆品，但这类化妆品作用不明显，起效很慢；

2、采用侵入式的方法进行治疗：

1)注射肉毒毒素Botox(由病原性微生物肉毒杆菌生产的肉毒毒素A)

Botox通过抑制乙酰胆碱释放而起作用，这种毒素使面部表情肌麻痹松弛而达到迅速祛皱的功效，然而，皮下注射Botox必须由医师进行，成本高，有效性持续3至6个月，因此治疗必须重复，还伴随了很大的风险如感染、疼痛、注射不当引起面瘫等；

2)注射胶原蛋白或者玻尿酸来填充皱纹

同样地，有效性仅能持续3-6个月，治疗必须重复，成本高昂，且伴随了很大的风险如感染、疼痛、注射不当引起面瘫等；

3)应用微针的方式结合表皮生长因子或成纤维细胞生长因子

这种方式主要是先破坏皮肤表皮然后再应用生长因子进行修复，也属于侵入式治疗的范畴，同样存在感染、疼痛等风险。

由于现有抗皮肤衰老的化妆品、药物分别具有上述缺陷，开发出一种效果显著、安全性佳的替代产品，成为了一个亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供防治皮肤衰老的组合物。

本发明提供了防治皮肤衰老的组合物，是活性成分包括乙酰基六肽-8、μ-芋螺肽和冬虫夏草的产品。

进一步地，所述活性成分的重量配比为：乙酰基六肽-863～6993份、μ-芋螺肽7份、冬虫夏草63～6993份。

进一步地，所述活性成分的重量配比为：乙酰基六肽-8400～1400份、μ-芋螺肽7份、冬虫夏草3000～3500份。

进一步地，所述活性成分的重量配比为：

乙酰基六肽-8400份、μ-芋螺肽7份、冬虫夏草3000份；或，

乙酰基六肽-81400份、μ-芋螺肽7份、冬虫夏草3500份。

进一步地，所述μ-芋螺肽为氨基酸序列为

pGlu-Gly-Cys-Cys-Asn-Gly-Pro-Lys-Gly-Cys-Ser-Ser-Lys-Trp-Arg-Asp-His-Ala-Arg-Cys-Cys-酰胺的肽、其生物活性片段、其盐或其变体。

进一步地，所述产品中冬虫夏草以原生粉或提取物的形式添加。

进一步地，所述提取物为水提物。

进一步地，所述提取物中，多糖≥1mg/L，甘露醇≥1mg/L，腺苷≥1mg/L。

进一步地，所述提取物中，多糖≥500mg/L，甘露醇≥700mg/L，腺苷≥5mg/L。符合上述含量标准的冬虫夏草提取物，防治皮肤衰老的作用明显。

进一步地，所述产品是由各重量配比的活性成分，加入药品、化妆品中可接受的辅料或者辅助性成分，制备而成的外用制剂。

进一步地，所述外用制剂为化妆品。

进一步地，所述化妆品是精华液、乳液、冻干粉、霜剂、啫喱、面膜、粉底、粉饼、洗面奶或水剂。

进一步地，所述霜剂为面霜或眼霜。

进一步地，所述辅助性成分选自美白剂、润肤剂、抗粉刺剂、紫外线吸收剂、肌肤调理剂中一种或两种以上的成分。

本发明提供了所述组合物的制备方法，包括如下步骤：取各重量配比的活性成分，加入药品、化妆品中可接受的辅料或者辅助性成分，即得。

本发明提供了所述组合物在制备防治皮肤衰老的产品中的用途。

进一步地，所述产品是防治脸部、颈部皮肤衰老的产品。

进一步地，所述产品具有减少和/或淡化皮肤细纹、皱纹、修复皮肤角质层屏障功能的功效。

进一步地，所述产品具有减少水分经皮肤流失、改善皮肤弹性、光泽度、干燥度、脱屑的功效。

本发明所述冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordycepssinensis(BerK.)Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体，也可以是冬虫夏草菌发酵菌丝体。其中，活性成分的重量配比以冬虫夏草干品重量计。

优选地，所述冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordycepssinensis(BerK.)Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。

本发明所述乙酰基六肽-8为[SEQIDNo：1]：N-Acetyl-L-alpha-glutamyl-L-alpha-glutamyl-L-methionyl-L-glutaminyl-L-arginyl-L-argininamide。CAS号：616204-22-9，分子式:C₃₄H₆₀N₁₄O₁₂S，摩尔质量为888g/mol。

本发明所述μ-芋螺肽为专利CN104334155A记载的μ-芋螺毒素肽或其变体。具体地，所述μ-芋螺肽是包含以下氨基酸序列、其生物活性片段、其盐、其组合和/或其变体的至少一种μ-芋螺毒素肽：

Xaa1-Xaa2-Cys-Cys-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Cys-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Cys-Xaa12-Xaa13-Xaa14-Xaa15-Xaal6-Cys-Cys-Xaa17，其中，

Xaa1为任一N修饰的氨基酸，

Xaa2为甘氨酸，

Xaa3为任一酸性氨基酸或其酰胺形式的任一种，

Xaa4为甘氨酸，

Xaa5为脯氨酸或3-羟基-脯氨酸，

Xaa6为任一碱性氨基酸，

Xaa7为甘氨酸，

Xaa8为任一非芳族羟基氨基酸，

Xaa9为任一非芳族羟基氨基酸，

Xaa10为任一碱性氨基酸，

Xaa11为任一芳族氨基酸，

Xaa12为任一碱性氨基酸，

Xaa13为任一酸性氨基酸或其酰胺形式的任一种，

Xaa14为任一碱性氨基酸，或任一含硫氨基酸，

Xaa15为任一疏水性或非极性氨基酸，或任一非芳族羟基氨基酸，

Xaa16为任一碱性氨基酸，

Xaa17不存在或为任一非极性氨基酸，或酰胺基团。

在本发明组合物的一个实施方式中，所述μ-芋螺毒素肽不包含由氨基酸Xaa3、Xaa4、Xaa5、Xaa6和Xaa7组成的组中的至少一种氨基酸，或其任意组合。

在本发明组合物的一个实施方式中，所述μ-芋螺毒素肽不包含由氨基酸Xaa8、Xaa9、Xaa10和Xaa11组成的组中的至少一种氨基酸，或其任意组合。

在本发明组合物的一个实施方式中，所述μ-芋螺毒素肽不包含由氨基酸Xaa12、Xaa13、Xaa14、Xaa15和Xaa16组成的组中的至少一种氨基酸，或其任意组合。

在本发明组合物的一个实施方式中，所述μ-芋螺毒素肽中的氨基酸Xaa1的N-修饰选自包含乙酰化、甲酰化、豆蔻酰化或酰胺化的组；

Xaa3和Xaa13独立地选自包含天冬氨酸(Asp)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)和焦谷氨酸(pGlu或Z)组中；

Xaa6、Xaa10、Xaa12和Xaa16独立地选自包含精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)和组氨酸(His)的组中；

Xaa8和Xaa9独立地选自包含丝氨酸(Ser)和苏氨酸(Thr)的组中；

Xaa11选自包含苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)和色氨酸(Trp)的组中；

Xaa14选自包含精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)和组氨酸(His)、半胱氨酸(Cys)和蛋氨酸(Met)的组中；

Xaa15选自包含甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)和异亮氨酸(Ile)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、蛋氨酸(Met)、半胱氨酸(Cys)和脯氨酸(Pro)的组中；

Xaa17选自包含甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)、苏氨酸(Thr)、蛋氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)和脯氨酸(Pro)的组中。

在本发明组合物的一个实施方式中，在所述μ-芋螺毒素肽中，Xaa1为焦谷氨酸(pGlu)。

进一步地，所述μ-芋螺肽为氨基酸序列为pGlu-Gly-Cys-Cys-Asn-Gly-Pro-Lys-Gly-Cys-Ser-Ser-Lys-Trp-Arg-Asp-His-Ala-Arg-Cys-Cys-酰胺的肽、其生物活性片段、其盐或其变体。

术语“变体”是指具有在某种程度上与天然序列肽不同的氨基酸序列(即通过保守性氨基酸取代而与天然序列不同的氨基酸序列)的肽，由此一个或多个氨基酸被另一个具有相同特征和构象作用的氨基酸取代。氨基酸序列变体在天然氨基酸序列的氨基酸序列中的某些位点具有取代、缺失、侧链修饰和/或插入。

本发明组合物可以复配乳化剂、助乳化剂、皮肤调理剂、美白剂、增白剂、着色剂、保湿剂、增溶剂、表面活性剂、防腐剂、芳香剂、润肤剂、抗粉刺剂、成膜剂、增稠剂、pH调节剂、缓冲剂、稳定剂、紫外线吸收剂等化妆品中可接受的辅料，制备成水剂、乳液、精华液、面霜、眼霜、面膜、冻干粉、啫喱、粉底、粉饼、洗面奶等化妆品。

本发明组合物的各种产品可以用于人体脸部、颈部、手脚和全身皮肤，具有抵御脸部(包括眼部)、颈部以及其它部位皮肤细纹和皱纹的产生，并快速淡化细纹和皱纹的功效。优选地，这些细纹和皱纹是位于孔口外周的纹沟，即鼻(鼻梁纹)、口腔(口角纹和唇部竖纹)、面部肌肉位于其周围的前额(抬头纹、川字纹)、眼睛(鱼尾纹)、面颊(颊部斜纹)、下颌等。

本发明提供了防治皮肤衰老的组合物，将其制备成精华液、面霜、乳液等形式的化妆品，涂抹于皮肤，即可发挥减少皱纹、修复皮肤角质层屏障功能的作用，从而达到防治皮肤衰老的目的，使用方便、安全；而且，该组合物起效迅速，效果显著。相较于目前通过注射肉毒素、玻尿酸及胶原蛋白等侵入式手段防治皮肤衰老的方法，本发明具有使用方便、安全性好、效果持久等优点，应用前景广阔。

具体实施方式

本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。

本发明提供了防治皮肤衰老的组合物，该组合物是活性成分包括乙酰基六肽-8、μ-芋螺肽和冬虫夏草的化妆品。

神经递质乙酰胆碱是在神经元胞体中合成的，并贮存在突触小泡内，当受到外界刺激时一种对钙有依赖性的胞外分泌物(称为SNARE蛋白质组合体)使突触小泡向神经肌肉突触区域释放出神经递质乙酰胆碱，乙酰胆碱刺激肌肉细胞形成生物电信号，生物电信号穿过肌肉细胞膜上的钠离子阀门通道(人细胞表达重组钠通道Nav1.4)和烟碱型乙酰胆碱通道进入肌肉细胞，引起肌肉收缩。SNARE蛋白质组合体是由三种蛋白质VAMP、Syntaxin和SNAP-25结合而成的。如果SNARE复合物失去平衡，那么突触囊泡不能有效地释放乙酰胆碱。

本发明组合物中，乙酰基六肽-8具有类肉毒素抑制乙酰胆碱释放的作用，而没有Botox的细胞毒性，它的结构类似于SNAP-25，与SNAP-25竞争占有SNARE组合体中SNAP-25的位置，从而抑制了SNARE的形成，使突触小泡向神经肌肉突触区域释放出的神经递质乙酰胆碱减少。μ-芋螺肽靶向多种电压敏感性钠通道，产生静电作用，阻断Nav1.4钠离子通道，减少生物电信号的通过。本发明将乙酰基六肽-8和μ-芋螺肽组合使用，两者在机理上可以起到互补作用，既减少了乙酰胆碱的释放，又减少了乙酰胆碱刺激产生的生物电信号的通过，从而松弛参与表情皱纹产生的皮肤收缩，消除微张力对皮肤的作用，减少皮肤细纹和皱纹。

人群试用试验中观察到，乙酰基六肽-8和μ-芋螺肽组合使用，其减少皮肤细纹和皱纹的作用并不是两种成分效果的简单叠加，而是能够发挥协同增效的作用。

此外，本发明组合物中还添加了活性成分冬虫夏草。

皮肤为人体的第一道生理屏障，由于外界环境刺激、紫外伤害、年龄老化、劣质护肤品及药物滥用、各种压力等因素引起皮肤屏障功能破坏，同时由于理化因素及微生物入侵诱发加重炎症反应导致多种皮肤疾病：敏感、瘙痒、干燥、脱屑、晦暗、皱纹、炎症老化等。恢复皮肤角质层的屏障功能,对于保持皮肤健康，缓解及预防皮肤疾病至关重要。屏障功能完好的皮肤角质层，起到保护皮肤、抵御外界侵袭的作用。

冬虫夏草中富含多糖、甘露醇、腺苷以及多种氨基酸，试验结果表明，添加冬虫夏草后所得组合物能提高肌肤免疫能力，快速修复皮肤角质层屏障功能，减少外界对肌肤的伤害，从而从皮肤本质上发挥延缓皮肤衰老的作用。

以下实施例中使用的μ-芋螺肽氨基酸序列为：pGlu-Gly-Cys-Cys-Asn-Gly-Pro-Lys-Gly-Cys-Ser-Ser-Lys-Trp-Arg-Asp-His-Ala-Arg-Cys-Cys-酰胺[SEQIDNo：2]，其中，pGlu表示焦谷氨酸，酰胺表示-CONH₂。它被称为精氨酸、赖氨酸多肽，CAS号：937286-43-6，分子式：C₉₂H₁₃₉N₃₅O₂₈S₆乙酸盐，摩尔质量2376g/mol。

以下实施例中使用的冬虫夏草提取物由下述方法制备得到：

1、清洗：

采集高质量冬虫夏草，用蒸馏水清洗冬虫夏草，去除冬虫夏草表面泥沙杂质。

2、干燥：

清洗后的冬虫夏草在15℃以下低温干燥，控制水分含量在10％以内。

3、粉碎：

将冬虫夏草粉碎。

4、提取：

4.1提取配料比例：

原料	质量百分比(wt％)
		冬虫夏草粉末	1％
蒸馏水	99％

4.2将冬虫夏草粉水混合溶液加热到30-35℃，开启超声波25-30KHZ辅助提取20-25min，得到冬虫夏草粗提取液。

5、过滤：

把得到的冬虫夏草粗提取液用微孔滤膜(孔径0.2-0.4μm)进行过滤，除去固体杂质，所得的滤液即为所需要的冬虫夏草提取液。

下列实施例中，采用的是冬虫夏草：水为1:99的提取液，含有多糖、甘露醇、腺苷等成分；其中，多糖：555mg/L、甘露醇：762mg/L、腺苷：5.3mg/L。

实施例1本发明精华液的制备

配制方法：

1、准确称取水、甘油、丁二醇加热沸腾后降温至60-70℃加入卡波姆，搅拌溶解均匀；

2、确认1中的卡波姆完全溶解均匀的情况下，在搅拌下缓缓加入透明质酸钠，使其完全溶解，充分溶胀；

3、准确称量PEG-75牛油树脂甘油酯类、双-PEG-18甲基醚二甲基硅烷加入2中搅拌均匀；

4、搅拌下加入氢氧化钠溶液中和，并测试pH值，确定pH范围在5.0-7.0；

5、冷却至40℃以下，准确称量冬虫夏草提取物、μ-芋螺肽、乙酰基六肽-8加入4中，搅拌均匀；

6、将准确称量并混合好的苯氧乙醇、香精和PEG-40氢化蓖麻油加入5中，搅拌均匀出料。

实施例2本发明爽肤水的制备

配制方法：

1、准确称取水、甘油、丁二醇、甘油聚醚-26加热沸腾后降温至60-70℃；

2、准确称量PEG-75牛油树脂甘油酯类加入1中搅拌均匀；

3、冷却至40℃以下，准确称量冬虫夏草提取物、μ-芋螺肽、乙酰基六肽-8下加入2中搅拌均匀；

4、将准确称量并混合好的苯氧乙醇、香精和PEG-40氢化蓖麻油加入3中，搅拌均匀出料。

实施例3本发明面贴膜的制备

配制方法：

1、准确称取水、甘油、丁二醇、甘油聚醚-26加热沸腾后降温至60-70℃加入卡波姆，搅拌溶解均匀；

2、确认1中的卡波姆完全溶解均匀的情况下，在搅拌下缓缓加入透明质酸钠，使其完全溶解，充分溶胀；

3、准确称量PEG-75牛油树脂甘油酯类加入2中搅拌均匀；

4、搅拌下加入氢氧化钠溶液中和，并测试pH值，确定pH范围在5.0-7.0；

5、冷却至40℃以下，准确称量冬虫夏草提取物、μ-芋螺肽、乙酰基六肽-8、海藻糖、生物糖胶-1、硅烷二醇水杨酸酯加入4中，搅拌均匀；

6、将准确称量并混合好的苯氧乙醇、甘油辛酸酯、辛酰羟肟酸、1,2-戊二醇、香精和PEG-40氢化蓖麻油加入5中，搅拌均匀出料。

实施例4本发明乳液的制备

配制方法：

1、准确称取C12-20烷基葡糖苷、甘油硬脂酸酯、C14-22醇、PEG-100硬脂酸酯、聚二甲基硅氧烷、甘油三(乙基己酸)酯、辛酸/癸酸甘油三酯、霍霍巴籽油于油相锅内，加热到80-85℃待用；

2、准确称取水、甘油、丁二醇、1,2-戊二醇、卡波姆于水相锅内，搅拌使物料完全溶解，加热到80-85℃；

3、在搅拌下将油相锅物料加入水相锅中，待油相物料加完后均质5min,降温到45℃，加入μ-芋螺肽、乙酰基六肽-8、冬虫夏草提取物、苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯、香精搅拌混合均匀，加入氢氧化钠(10％)中和，，并测试pH值，确定pH范围在5.0-7.0，搅拌10min，出料。

实施例5本发明面霜的制备

配制方法：

1、准确称取C20-22醇磷酸酯、甘油硬脂酸酯、C20-22醇、PEG-100硬脂酸酯、聚二甲基硅氧烷、甘油三(乙基己酸)酯、辛酸/癸酸甘油三酯、霍霍巴籽油、牛油果树果脂于油相锅内，加热到80-85℃待用；

2、准确称取水、甘油、双丙甘醇、1,2-戊二醇、卡波姆于水相锅内，搅拌使物料完全溶解，加热到80-85℃；

3、在搅拌下将油相锅物料加入水相锅中，待油相物料加完后均质5min,降温到45℃，加入冬虫夏草提取物、μ-芋螺肽、乙酰基六肽-8、苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯、花草香精搅拌混合均匀，加入氢氧化钠(10％)，搅拌10min；

4、冷却，降温至室温出料。

以下通过试验例证明本发明的有益效果。

试验例1本发明精华液抗皮肤衰老的效果

一、样品的制备：根据实施例1方法分别制备对照组、Y-A组用精华液。

二、试验方法：

1、含有冬虫夏草提取物、μ-芋螺肽和乙酰基六肽-8的样品(Y-A样品)与对照品单次使用。

2、35名试用者，均半脸涂抹Y-A样品，半脸涂抹对照品，Y-A样品和对照品均只涂抹一次，随机双盲，于2小时、8小时评估抗皱效果；另35名试用者，全脸涂抹Y-A样品，每天使用两次(早晚)，于使用前和使用后28天评估抗皱效果。

3、评估两个区域：鱼尾纹(眼睛尾部)和抬头纹(前额)

4、生物评价，条纹投影

A、主要皱纹深度

B、平均粗糙度

C、粗糙度与二次变化

D、皱纹区域全分析，针对4至5条皱纹进行

5、临床评估：在每个评估区域都利用巴赞分组分析法进行(由0--100)；每个区域依据皱纹由浅至深的程度按照1至6进行评级。

三、试验结果：

表1使用2小时后眼角鱼尾纹改变情况

表2使用2小时后抬头纹(前额皱纹)改变情况

表3使用8小时后眼角鱼尾纹改变情况

表4使用8小时后抬头纹(前额皱纹)改变情况

表5使用28天后眼角鱼尾纹改变情况

表6使用28天后抬头纹(前额皱纹)改变情况

根据以上试验结果可以得知，本发明精华液减少细纹、皱纹起效快速，使用后2小时即可收到效果，皮肤皱纹较对照组显著改善；长期使用效果更好，连续使用28天后，具有明显的淡化皱纹、抗皮肤衰老的效果。

试验例2本发明面霜抗皮肤衰老的效果

一、样品的制备：根据实施例5方法制备面霜对照组、Y-B组。

二、试验方法

1、30名20-50岁干性皮肤女性试用者，平均年龄37岁，随机分为两组，每天早晚各使用一次对照组和Y-B组面霜；

2、仪器设备：芬兰DelfinVapoMeterVapoMeter水分蒸发测量仪测试TEWL值。

TEWL值表示角质层水分散失的情况，TEWL值越高，表示经皮肤丢失的水分越多，角质层的屏障功能越差；单位g/m²h，也就是每小时每平方米面积丢失多少克水。

3、使用前和使用后7天、14天、28天进行测试；

4、测试部位：右手手腕内侧(最接近面部皮肤，且每次使用容易定位)；

5、测试流程：洁面——实验室静坐20分钟——测试。

三、试验结果

表7TEWL(g/m²h)平均值

以上试验结果表明，添加冬虫夏草提取物的Y-B组面霜能显著降低经皮肤水分流失，此外，使用者自评弹性、光泽度、干燥度、脱屑均有显著改善。说明本发明面霜具有较好的修复皮肤屏障功能的作用。

试验例3μ-芋螺肽和乙酰基六肽-8的相互作用

一、样品的制备：

根据实施例4方法分别制备A、B、C、D组用乳液，其中，样品A未添加活性成分μ-芋螺肽和乙酰基六肽-8，样品B未添加活性成分μ-芋螺肽，样品C未添加活性成分乙酰基六肽-8，样品D添加了μ-芋螺肽和乙酰基六肽-8，具体配方如下：

二、试验方法：

1、剂量分组及受试样品给予时间

60名20-50岁女性，平均年龄37岁，随机分为A、B、C、D组，每组15人，分别涂抹A、B、C、D四种乳液。每天早晚取0.5g，均匀涂于面部皮肤，连续涂布28天。

2、测试方法

测试部位：右眼角；

测试流程：洁面——实验室静坐20分钟——测试(使用前)

洁面——实验室静坐20分钟——涂抹样品30分钟——测试

测试数据：初次使用前、30min、24h、7天、28天数据。

皱纹减少率(％)＝(使用前平均皱纹值-样品使用后平均皱纹值)/使用前平均皱纹值*100％。

3、实验仪器：芬兰Antera3DCS(3D成像分析仪)。

三、试验结果：

使用乳液后皱纹改变情况统计结果，见下表：

表7使用乳液后皱纹改变情况统计结果

从测试的数据看出，样品A不具有抗衰老减少皱纹的作用；样品C、D组在30min就能快速起效，皱纹分别减少5.01％和5.32％；样品B、C、D在使用24h后，皱纹分别减少1.52％、5.81％、6.83％；样品B、C、D在使用7天后，皱纹分别减少11.63％、8.32％、22.14％；样品B、C、D在使用28天后，皱纹分别减少15.63％、13.27％、32.14％。

合并用药分析中，金正均等提出的Q值法是一种常用的评价合并用药效果的方法。评价两药合并效果是协同、叠加还是拮抗，应求出：Q＝实际合并效果/理论单纯相加预期效果，Q采用以下数字反映结果性质：0.85～1.15为单纯相加，>1.15为协同，<0.85为拮抗(参见：金正均等.用Q值估计合并用药效果的新方法—“双30法”[J].上海第二医学院学报，1985，5：353～354)。

为评价本发明组合物中μ-芋螺肽和乙酰基六肽-8的相互作用，分别计算试用7天和28天后皱纹减少率的Q值：

样品B的P值为P_A，样品C的P值为P_B，样品D的P值为P_C：

7天：P_(A+B)＝P_A+P_B－P_A·P_B＝11.63％+8.32％-11.63％×8.32％＝18.98％

Q＝P_C/P_(A+B)＝22.14％÷18.98％＝1.17﹥1.15

28天：P_(A+B)＝P_A+P_B-P_A·P_B＝15.63％+13.27％-15.63％×13.27％＝26.83％

Q＝P_C/P_(A+B)＝32.14％÷26.83％＝1.20﹥1.15

上述试验结果表明，μ-芋螺肽和乙酰基六肽-8复配使用的D样，30min、24h、7d、28d均表现出减少皱纹的作用，而且，以皱纹减少率为评价指标，Q值大于1.15，说明本发明组合物中μ-芋螺肽和乙酰基六肽-8两种成分在抗皮肤衰老方面发挥了协同增效的作用。

序列表

<110> 隐纱化妆品有限公司

<120> 含冬虫夏草的抗皮肤衰老组合物

<130> A171518K

<160> 2

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> ACETYLATION

<222> (1)..(1)

<220>

<221> AMIDATION

<222> (6)..(6)

<400> 1

Glu Glu Met Gln Arg Arg

1 5

<210> 2

<211> 21

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Xaa=焦谷氨酸(pGlu)

<220>

<221> AMIDATION

<222> (21)..(21)

<220>

<221> UNSURE

<222> (1)..(1)

<223> The 'Xaa' at location 1 stands for Gln, Arg, Pro, or Leu.

<400> 2

Xaa Gly Cys Cys Asn Gly Phe Lys Gly Cys Ser Ser Lys Trp Arg Asp

1 5 10 15

His Ala Arg Cys Cys

20

Claims (20)

1.防治皮肤衰老的组合物，其特征是：是活性成分包括乙酰基六肽-8、μ-芋螺肽和冬虫夏草的产品。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征是：所述活性成分的重量配比为：乙酰基六肽-863～6993份、μ-芋螺肽7份、冬虫夏草63～6993份。

3.如权利要求2所述的组合物，其特征是：所述活性成分的重量配比为：乙酰基六肽-8400～1400份、μ-芋螺肽7份、冬虫夏草3000～3500份。

4.如权利要求3所述的组合物，其特征是：所述活性成分的重量配比为：

乙酰基六肽-8 400份、μ-芋螺肽7份、冬虫夏草3000份；或，

乙酰基六肽-8 1400份、μ-芋螺肽7份、冬虫夏草3500份。

5.如权利要求1～4任意一项所述的组合物，其特征是：所述μ-芋螺肽为氨基酸序列为pGlu-Gly-Cys-Cys-Asn-Gly-Pro-Lys-Gly-Cys-Ser-Ser-Lys-Trp-Arg-Asp-His-Ala-Arg-Cys-Cys-酰胺的肽、其生物活性片段、其盐或其变体。

6.如权利要求1～4任意一项所述的组合物，其特征是：所述冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis(BerK.)Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。

7.如权利要求1～4任意一项所述的组合物，其特征是：所述产品中冬虫夏草以原生粉或提取物的形式添加。

8.如权利要求7所述的组合物，其特征是：所述提取物为水提物。

9.如权利要求7所述的组合物，其特征是：所述提取物中，多糖≥1mg/L，甘露醇≥1mg/L，腺苷≥1mg/L。

10.如权利要求9所述的组合物，其特征是：所述提取物中，多糖≥500mg/L，甘露醇≥700mg/L，腺苷≥5mg/L。

11.如权利要求1～10任意一项所述的组合物，其特征是：所述产品是由各重量配比的活性成分，加入药品、化妆品中可接受的辅料或者辅助性成分，制备而成的外用制剂。

12.如权利要求11所述的组合物，其特征是：所述外用制剂为化妆品。

13.如权利要求12所述的组合物，其特征是：所述化妆品是精华液、乳液、冻干粉、霜剂、啫喱、面膜、粉底、粉饼、洗面奶或水剂。

14.如权利要求13所述的组合物，其特征是：所述霜剂为面霜或眼霜。

15.如权利要求11所述的组合物，其特征是：所述辅助性成分选自美白剂、润肤剂、抗粉刺剂、紫外线吸收剂、肌肤调理剂中一种或两种以上的成分。

16.权利要求1～15任意一项所述组合物的制备方法，其特征是：包括如下步骤：取各重量配比的活性成分，加入药品、化妆品中可接受的辅料或者辅助性成分，即得。

17.权利要求1～15任意一项所述组合物在制备防治皮肤衰老的产品中的用途。

18.如权利要求17所述的用途，其特征是：所述产品是防治脸部、颈部皮肤衰老的产品。

19.如权利要求17或18所述的用途，其特征是：所述产品具有减少和/或淡化皮肤细纹、皱纹、修复皮肤角质层屏障功能的功效。

20.如权利要求19所述的用途，其特征是：所述产品具有减少水分经皮肤流失、改善皮肤弹性、光泽度、干燥度、脱屑的功效。