CN109900889A - 一种自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种可自动过滤红细胞，同时检测肝功三项指标：谷丙转氨酶(简称ALT)，谷草转氨酶(AST)和谷氨酰转肽酶(γ‑GT或GGT)的光化学——透射光度法检测卡，属于干式化学分析技术领域。本发明的自动滤血干式光化学法微通道肝功检测卡由5层膜结构组成，结构中含有加样、检测及镶嵌滤血膜的孔和微通道；检测过程中，全血经滤血膜过滤，滤出的血清通过微通道进入检测孔，通过测试检测孔透射光的强度变化，定量分析样品中的检测项目。本发明提供的光化学法微通道肝功多项检测卡，可实现自动滤血，无需分离血清，使用全血即可快速灵敏的检测生化多项指标。本发明的测试结果线性,CV等指标，均能满足临床检验要求。

Description

一种自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡

技术领域：

本发明涉及一种干式化学分析领域，特别是涉及一种光化学透射法微通道，可实现多个生化指标同时检测的检测卡。

背景技术：

γ-GT或GGT是磷酸酶的一种，分布在肝病是一种常见的危害性极大的疾病，对其及时诊断、治疗对于疾病的预防和诊断具有重要意义。转氨酶是反映肝脏功能的一项指标，谷丙转氨酶(简称ALT)是最常用的敏感指标，1％的肝细胞发生坏死时，血清ALT水平即可升高1倍；当血清AST活性增高持续超过ALT活性时，往往提示肝实质损害严重，是慢性化程度加重的标志，特别是>2时，表明主要是坏死型的严重肝脏内胆管的上皮层，此类酶的异常，可反映出人体肝脏胆汁分泌功能异常。

目前ALT、AST和GGT(γ-GT)肝功等生化项目的检测，普遍采用各种大型生化分析仪，但是生化分析仪本身体积较大，配套条件要求较高，需配备稳压电源，纯净水等；操作繁琐复杂，需要专业人员配置试剂或接受相应培训，通过预处理(离心等)，分离得到血清用于检测，样本检测时间长，操作复杂；而且价格昂贵，因此基层医疗机构或家庭个人没有条件购买和使用。

即时检测(POCT)作为一项新的技术，它具有操作简单、快速出检测结果、污染少、容易使用和小型化等优点。随着人们对诊断治病诊断及医疗水平要求的提高，以及诊断和辅助技术的进步，POCT逐渐受到关注。干化学技术在POCT中应用较广泛。但是传统干化学方法制备的检测卡亦具有弊端：

(1)干化学试纸条，与传统方法相比，简便快速，能节省成本，但是多个项目联检受限。

(2)干化学检测板：虽然功能较为全面，检测效率相对于干化学试纸条高，但工艺过于复杂，成本较高。

发明内容：

1、为解决上述技术问题，本发明提供一种自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡。该检测卡的微通道与微流控芯片的微通道功能类似，通过微通道形成网络，可以控制流体贯穿整个系统。通过这种方法，检测卡能够实现自动滤血、多项目联检的目的；同时，检测卡具有的微通道能够给检测的样本提供流动的通道，避免检测过程中多项目之间的交叉感染。具有操作简单、速度快、效率高等优点。

2、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，包括底层单面胶夹层、上层单面胶夹层，依次位于底层和上层之间的结构还包括亲水膜、双面胶、高透光率盖板、滤血膜，以及加样孔、测试孔和排气孔。

3、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，通过切割双面胶形成镂空的微通道形状，双面胶为不透明材质，其厚度不低于0.1微米。

4、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，微通道由具有镂空微通道形状的双面胶贴合在亲水膜和高透光率盖板之间形成完整空间通道结构。亲水膜和盖板的全波长透光率优选不低于80％，其厚度均不低于0.1微米。亲水膜提供液体流动过程中的驱动力。

5、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，优选的微通道的宽度为0.1mm-1.5mm。

6、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，在微通道入口前端，形成贯穿亲水膜、双面胶、高透光率盖板的重叠孔，滤血膜放置于上述重叠孔，并且滤血膜与微通道入口紧密连接。

7、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，滤血膜尺寸与重叠孔尺寸一致，并与全血用量呈正相关。

8、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，滤血膜为单层，其厚度不低于亲水膜、双面胶和高透光率盖板三层的总厚度。

9、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，滤血膜与底层单面胶夹层紧密贴合，同时与上层单面胶夹层紧密贴合。

10、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，滤血膜上方的上层单面胶开有加样孔，加样孔尺寸小于滤血膜尺寸。

11、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，在微通道顶端为圆形的测试孔，其数量可以通过改变微通道的分支数目进行增减。

12、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，在测试孔前端，其上方的高透光率盖板开有微小排气孔。

13、本发明的自动滤血光化学法微通道肝功三项检测卡，在测试孔所在区域，其底层单面胶夹层和上层单面胶夹层均采用镂空结构。

14、与现有技术相比本发明的有益效果为：5层膜结构组成检测卡，上层和下层的双面胶为支持层，单层的滤血膜嵌在各个膜层之间，厚度不低于中间三个核心膜层(亲水膜、高透光率盖板和双面胶的总厚度)。滤血膜与底层单面胶夹层紧密贴合，同时与上层单面胶夹层紧密贴合，上层双面胶开有加样孔。亲水膜、双面胶和高透光率盖板三层组成封闭的空间微通道，用于ALT、AST和GGT(γ-GT)肝功等生化项目的测试。这样，待测血样可以通过加样过滤区的滤血膜自动滤血，全血在加样过滤区经过滤后，血清中的被测物质进入微通道，在亲水膜提供的驱动力作用下，被测物随着血清的流动，到达检测孔区域。血清中的被测物质与反应孔中的化学试剂接触以后即可发生显色反应，反应孔中的颜色变化，再通过特定检测仪上的光学检测原件(光源、传感器)，检测反应孔中的颜色变化，进而计算出被测项目中的物质浓度；此过程操作简单、效率高，可同时检测多个项目，有效避免待测物之间的交叉污染。且制作简单，耗时短，相对节省成本。

附图说明：

图1是本发明自动滤血干式光化学法微通道检测卡的俯视图

图2是自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡的膜层构成

图3实施例中微通道其它类似通道及检测卡外观

具体实施方式：

1、下面结合附图和实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明范围。

2、5层膜结构组成检测卡，包含上单面胶，开有小孔2-1，为加样孔；待测全血样本经加样孔里面镶嵌的滤血膜，自动滤血，滤血沫镶嵌区域为2-6；滤出的血清经微通道2-2和排气孔2-4共同作用提供的虹吸作用力，流动到前端的3个检测孔区域2-3。血清中的被测物质与反应孔中的化学试剂接触以后即可发生显色反应，反应孔中的颜色变化，再通过特定检测仪上的光学检测原件(光源、传感器)，检测镂空区域2-5里面反应孔中的颜色变化，进而计算出被测项目中的物质浓度。

3、如图1所示，为本发明自动滤血干式光化学法微通道检测卡的俯视图，总共有5层膜组成，最上层单面胶上面开有加样孔，全血从加样孔加入，经镶嵌在膜结构中的滤血膜自动过滤以后，血清沿着微通道，在亲水通道驱动力的作用下进入检测区域，检测区域中含有能够与血清中ALT/AST/GGT/反应的物质，当血清进入检测区域，与试剂发生反应，会有颜色的变化，通过仪器上光学元件检测颜色的差异，从而计算出血清中ALT/AST/GGT/的浓度。

4、如图2所示，最上层为检测卡的上单面胶，能够增加检测卡的整体厚度，同时提供加样孔，起到部分固定滤血膜的作用，其材料可采用AR，3M等公司透明单面胶，优选的是黑色单面胶。加样孔的直径比滤血膜直径小，优选的半径为1.7-2.3mm

5、如图2所示，第二层为亲水膜上面开有排气孔，经过滤血膜后的血清，在通道中流动过程将挤压的空气通过前端的排气孔排出。排气孔优选直径为0.2-0.3mm。

6、如图2所示，中间层为检测卡的微通道设计图，优选的微通道直线距离0.7-1.9mm，反应孔直径1.7-2.5mm,优选的反应孔直径应该大于2.5mm，三个反应孔从左到右依次点入肝功3种酶试剂(ALT,AST,GGT)，加入试剂的优选体积0.5-1.2微升。测试的线性相关系数均在0.95以上,CV在10％以内。测试数据见表1-3

表1.ALT测试数据汇总表

表2.AST测试数据汇总表

表3.GGT测试数据汇总表

7、图2所示，第4层为高透光盖板，可选用PC，PVA等材料的盖板，透光度高，优选的PC材料，透光度在95％左右。

8、如图2所示，最下层为检测卡的下单面胶，能够增加检测卡的整体厚度，同时含有镂空区域，加样孔显色以后可以通过镂空区域检测。其材料可采用AR，3M等公司透明单面胶，优选的是黑色单面胶。

9、图3中检测卡的外观及通道设计也在保护范围之内，图2及图3仅用于说明本发明，一切在图2和图3基础上进行的外观、通道结构，通道数量及反应通道多少的设计均在本发明保护范围之内。

Claims (13)

1.一种自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，干式光化学方法与微通道结合，实现自动滤血；该检测卡包括底层单面胶夹层、上层单面胶夹层，依次位于底层和上层之间的结构还包括亲水膜、双面胶、高透光率盖板、滤血膜，以及加样孔、测试孔和排气孔。

2.如权利要求1所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，通过切割双面胶形成镂空的微通道形状，将上述双面胶贴合在亲水膜和高透光率盖板之间形成完整的微通道。

3.如权利要求2所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，所述双面胶厚度不低于0.1微米，优选双面胶为不透明材质。

4.如权利要求2所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，所述亲水膜和盖板的全波长透光率不低于80％，亲水膜、盖板的两者厚度均不低于0.1微米。

5.如权利要求2所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，微通道的宽度为0.1mm-1.5mm。

6.如权利要求2所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，在微通道入口前端，形成贯穿亲水膜、双面胶、高透光率盖板的重叠孔，滤血膜放置于上述重叠孔，并且滤血膜与微通道入口紧密连接。

7.如权利要求6所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，滤血膜尺寸与重叠孔尺寸一致，并与全血用量呈正相关。

8.如权利要求7所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，滤血膜为单层，其厚度不低于亲水膜、双面胶和高透光率盖板三层的总厚度。

9.如权利要求8所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，滤血膜与底层单面胶夹层紧密贴合，同时与上层单面胶夹层紧密贴合。

10.如权利要求9所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，滤血膜上方的上层单面胶开有加样孔，加样孔尺寸小于滤血膜尺寸。

11.如权利要求2所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，在微通道顶端为圆形的测试孔，其数量可以通过改变微通道的分支数目进行增减。

12.如权利要求11所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，在测试孔前端，其上方的高透光率盖板开有微小排气孔。

13.如权利要求11所述的自动滤血干式光化学法微通道肝功三项检测卡，其特征在于，在测试孔所在区域，其底层单面胶夹层和上层单面胶夹层均采用镂空结构。