CN109806201A - 一种玫瑰发酵液的制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种玫瑰发酵液的制备方法，包括以下步骤：将玫瑰干粉与米粉混均匀，经40℃热盐水浸湿后，置于水蒸气上加热，水浴保温18‑24小时，得发酵物；向所得发酵物中加入质量浓度为4％的葡萄糖水，搅拌均匀得发酵混合物，接入枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌菌液，得初始发酵液，经过滤等处理后，即得玫瑰发酵液。本发明采用枯草芽孢杆菌BS‑2和植物乳杆菌ZSM‑002对玫瑰进行发酵，发酵法成本低，效率高，可实现生产工业化；无化学试剂添加，安全性高，且稳定性好；富含蛋白质、多糖、黄酮等多种活性物质，与发酵菌胞液成分具有协同作用，具有显著地美白、抗皱及保湿作用。

Description

一种玫瑰发酵液的制备方法与应用

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种玫瑰发酵液的制备方法与应用。

背景技术

玫瑰是一种蔷薇科蔷薇属植物，它的花瓣为倒卵形，有重瓣与半重瓣，枝茎多刺且比较柔软，它在世界范围内广泛分布，种类丰富、香气浓郁，更多分布在在北半球。玫瑰是指能够提炼精油的香气较浓郁的蔷薇属花，其在我国各地有广泛分布。玫瑰长期被人们开发利用，只因其花中含有芳香的醇、醛、脂肪酸、黄酮、酚和含香精的油和脂等，此外还有倍半萜类、酯类、多糖、生物碱等物质，共有三百多种化学成分。用玫瑰花瓣以蒸馏法提炼而得的玫瑰精油，又称玫瑰露，可有效改善皮肤质地，促进血液循环及新陈代谢，同时它对对炎症、肿瘤、氧化、以及毒素积累还有抵抗功能，具有广泛的药理活性。

目前我国玫瑰花主要用于提炼精油、制作药品、制作玫瑰酱和花茶等，对于其中活性物质的提取常采用蒸馏法和浸提法，所得到的物质总量有限，并在生产过程中，产生大量的废渣、废水和废气。因此，需要加大玫瑰花的研究开发，充分利用玫瑰花的营养和药用特性，加大玫瑰花加工水平，利用现有技术提取出玫瑰花中对人体有益的活性成分，如多糖、黄酮类物质、芳香油等。

申请公布号为CN 105147586 A的发明专利公开了一种玫瑰发酵原浆及其制备方法与应用，其制备方法：将玫瑰干粉、水和酵母菌混合得到初始体系，并对初始体系进行发酵培养，得到玫瑰发酵原浆，其中，所用的酵母菌为巴氏酵母。与现行中国生物发酵产业协会酵素分会中所规定的植物酵素发酵标准工艺不符，不是标准的酵素生产工艺。申请公布号为CN 105147586 A的发明专利公开了具有美白、抗衰老、消炎功效的玫瑰酵素及其在化妆品中的应用，其制备方法为：(1)将玫瑰花瓣与水混合后加入适量的酵母、糖和柠檬片，控制温度在20～35℃的条件下发酵；(2)发酵产物固液分离后，向滤液中加入醋酸杆菌在10～40℃进行无醇化控温发酵；或者是发酵产物固液分离后，向滤液中加入由醋酸杆菌和益生菌组成的混合物在10～40℃进行无醇化控温发酵；(3)发酵产物过滤除菌，即得。而其所得发酵产物pH值为3.0，酸性较强，稳定性有待考证。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种具有美白、保湿、抗皱功效的玫瑰发酵液的制备方法与应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种玫瑰发酵液的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，将新鲜采摘的玫瑰花冷链保存，冻干粉碎，得到玫瑰干粉；

步骤二，将步骤一中所得的玫瑰干粉与米粉混均匀，经40℃热盐水浸湿后，置于水蒸气上加热20-30分钟，加热后冷却至30-50℃进行水浴保温，水浴保温18-24小时，得发酵物；

步骤三，向步骤二中所得的发酵物中加入质量浓度为4％的葡萄糖水，搅拌均匀得发酵混合物，再加入pH缓冲剂，将发酵混合物pH值调至6.0，接入枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌菌液，于35℃-38℃发酵48小时；

步骤四，将步骤三发酵后所得发酵产物过滤除渣，得初始发酵液，将初始发酵液灌入高压均浆器中，得溶胞液，经离心处理，取上清液，即得玫瑰发酵液。

具体地，步骤二中所述玫瑰干粉与米粉的质量比为(7-5):(1-2)。

具体地，步骤二中所述热盐水的质量浓度为10％-15％，热盐水的最佳质量浓度为12％。

具体地，所述步骤二中，加热后冷却至35-45℃，最佳温度为40℃。

具体地，所述步骤二中，水浴保温20-22小时，最佳水浴保温时间为21小时。

具体地，步骤三中所述发酵物、葡萄糖水与菌液的体积比为(100-200):(2000-4000):(3-5)。

具体地，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌BD-2,植物乳杆菌为植物乳杆菌ZSM-002,两种菌液浓度均为10⁶-10⁸CFU/mL。

具体地，所述离心处理的条件为：离心转速为2000-4000转/分钟，时间为20-30分钟，离心半径10cm。

一种玫瑰发酵液的制备方法制备的玫瑰发酵液。

一种玫瑰发酵液的应用，所述玫瑰发酵液应用于下述至少一种功能的化妆品中的应用或在直接作为具有下述至少一种功能的化妆品中的应用：(1)美白，(2)保湿，(3)抗皱。

具体地，上述应用中，所述化妆品具体可为面膜、面霜或精华液。

本发明的有益效果：(1)本发明采用枯草芽孢杆菌BS-2和植物乳杆菌ZSM-002对玫瑰进行发酵，在保留玫瑰原有功效成分的同时，进一步发酵，获得更多有效成分；(2)本发明所采用的发酵法成本低，效率高，可实现生产工业化；(3)本发明所得玫瑰发酵液无化学试剂添加，安全性高，且稳定性好；(4)本发明所得玫瑰发酵液富含蛋白质、多糖、黄酮等多种活性物质，与发酵菌胞液成分具有协同作用，具有显著地美白、抗皱及保湿作用。

具体实施方式

现在对本发明作进一步详细的说明。

一、制备方法实施例

实施例1

一种玫瑰发酵液的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，将新鲜采摘的玫瑰花冷链保存，冻干粉碎，得到玫瑰干粉；

步骤二，将步骤一所得玫瑰干粉与米粉混匀，玫瑰干粉与米粉的质量比为5:1，40℃热盐水浸湿后置于水蒸气上加热20分钟，热盐水的质量浓度为10％，加热后冷却至30℃时，水浴保温24小时，得发酵物；

步骤三，向步骤二中所得发酵物中加入质量浓度为4％葡萄糖水搅拌均匀得发酵混合物，再加入pH缓冲剂，将发酵混合物pH值调至6.0，接入枯草芽孢杆菌BS-2和植物乳杆菌ZSM-002菌液，菌液浓度为10⁶-10⁸CFU/ml，发酵物、葡萄糖水与菌液的体积比为200：2000：5，于35℃发酵48小时；

步骤四，将步骤三发酵后所得发酵产物过滤除渣，得初始发酵液，灌入高压匀浆器，得溶胞液，离心，离心转速为，4000转/分钟，时间为20分钟，离心半径10cm取上清液，即得玫瑰发酵液。

实施例2

一种玫瑰发酵液的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，将新鲜采摘的玫瑰花冷链保存，冻干粉碎，得到玫瑰干粉；

步骤二，将步骤一所得玫瑰干粉与米粉混匀，玫瑰干粉与米粉的质量比为5:2，40℃热盐水浸湿后置于水蒸气上加热30分钟，热盐水的质量浓度为13％，加热后冷却至35℃时，水浴保温23小时，得发酵物；

步骤三，向步骤二中所得发酵物中加入质量浓度为4％葡萄糖水搅拌均匀得发酵混合物，再加入pH缓冲剂，将发酵混合物pH值调至6.0，接入枯草芽孢杆菌BS-2和植物乳杆菌ZSM-002菌液，菌液浓度为10⁶-10⁸CFU/ml，发酵物、葡萄糖水与菌液的体积比为120：3500：4.5，于38℃发酵48小时；

步骤四，将步骤三发酵后所得发酵产物过滤除渣，得初始发酵液，灌入高压匀浆器，得溶胞液，离心，离心转速为，3500转/分钟，时间为27分钟，离心半径10cm取上清液，即得玫瑰发酵液。

实施例3

一种玫瑰发酵液的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，将新鲜采摘的玫瑰花冷链保存，冻干粉碎，得到玫瑰干粉；

步骤二，将步骤一所得玫瑰干粉与米粉混匀，玫瑰干粉与米粉的质量比为7:2，40℃热盐水浸湿后置于水蒸气上加热22分钟，热盐水的质量浓度为15％，加热后冷却至45℃时，水浴保温20小时，得发酵物；

步骤三，向步骤二中所得发酵物中加入质量浓度为4％葡萄糖水搅拌均匀得发酵混合物，再加入pH缓冲剂，将发酵混合物pH值调至6.0，接入枯草芽孢杆菌BS-2和植物乳杆菌ZSM-002菌液，菌液浓度为10⁶-10⁸CFU/ml，发酵物、葡萄糖水与菌液的体积比为100：4000：3.5，于36℃发酵48小时；

步骤四，将步骤三发酵后所得发酵产物过滤除渣，得初始发酵液，灌入高压匀浆器，得溶胞液，离心，离心转速为，2000转/分钟，时间为23分钟，离心半径10cm取上清液，即得玫瑰发酵液。

实施例4

一种玫瑰发酵液的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，将新鲜采摘的玫瑰花冷链保存，冻干粉碎，得到玫瑰干粉；

步骤二，将步骤一所得玫瑰干粉与米粉混匀，玫瑰干粉与米粉的质量比为7:1，40℃热盐水浸湿后置于水蒸气上加热27分钟，热盐水的质量浓度为14％，加热后冷却至50℃时，水浴保温18小时，得发酵物；

步骤三，向步骤二中所得发酵物中加入质量浓度为4％葡萄糖水搅拌均匀得发酵混合物，再加入pH缓冲剂，将发酵混合物pH值调至6.0，接入枯草芽孢杆菌BS-2和植物乳杆菌ZSM-002菌液，菌液浓度为10⁶-10⁸CFU/ml，发酵物、葡萄糖水与菌液的体积比为170：2500：3，于37℃发酵48小时；

步骤四，将步骤三发酵后所得发酵产物过滤除渣，得初始发酵液，灌入高压匀浆器，得溶胞液，离心，离心转速为，2500转/分钟，时间为30分钟，离心半径10cm取上清液，即得玫瑰发酵液。

实施例5

一种玫瑰发酵液的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，将新鲜采摘的玫瑰花冷链保存，冻干粉碎，得到玫瑰干粉；

步骤二，将步骤一所得玫瑰干粉与米粉混匀，玫瑰干粉与米粉的质量比为6:1.5，40℃热盐水浸湿后置于水蒸气上加热25分钟，热盐水的质量浓度为12％，加热后冷却至40℃时，水浴保温21小时，得发酵物；

步骤三，向步骤二中所得发酵物中加入质量浓度为4％葡萄糖水搅拌均匀得发酵混合物，再加入pH缓冲剂，将发酵混合物pH值调至6.0，接入枯草芽孢杆菌BS-2和植物乳杆菌ZSM-002菌液，菌液浓度为10⁶-10⁸CFU/ml，发酵物、葡萄糖水与菌液的体积比为150：3000：4，于36℃下发酵48小时；

步骤四，将步骤三发酵后所得发酵产物过滤除渣，得初始发酵液，灌入高压匀浆器，得溶胞液，离心，离心转速为，3000转/分钟，时间为25分钟，离心半径10cm取上清液，即得玫瑰发酵液。

二、玫瑰发酵成分及微生物指标试验测定

针对以上各实施例中的制备方法得到的玫瑰发酵液，进行以下试验检：

1、采用以下方法制得的玫瑰发酵液成分进行测定，得到的各成分含量见表1：

(1)总酚含量测定，采用Folin-Ciocalten法，计算实施例1-5所得玫瑰发酵液的多酚含量；

(2)总黄酮含量测定，采用分光光度法；

(3)总多糖含量测定，参照GB/T 5009.7-2008《食品中还原糖的测定》中测定方法；

(4)酒精度：采用密度瓶法；

(5)pH：使用上泰suntex便携式pH测定仪测定。

2、微生物指标：菌落总数，参照GB 4789.2—2010测定，大肠菌群，参照GB4789.3—2010测定；致病菌，参照GB 29921—2013测定。测定结果见表2。

三、应用实施例

将一种玫瑰发酵液的制备方法的实施例5中制得的玫瑰发酵液在化妆品中的应用：

一种含有玫瑰发酵液面膜的制备，包括以下步骤：

(1)按照以下用量配比称取各原料

A相:

去离子水：82份；甘油：7.5份；尿囊素：0.1份；黄原胶：0.2份；羟乙基纤维素：0.1份；丙二醇：7份；透明质酸钠:0.2份；羟苯甲酯：0.15份；氯苯甘醚：0.08份

B相:

苯氧乙醇：0.3份；泛醇：0.6份；柠檬酸：0.2份；甘草酸二钾：0.2份；柠檬酸钠：0.5份；实施例5制备的玫瑰发酵液：7份；

(2)制备方法：

①将A相投入主锅中后，搅拌升温至80-85℃，溶解完全后降温；

②降温至40-42℃，投入B相原料，搅拌均匀，灌装，制得含有玫瑰发酵液的面膜。

将上述制备方法中B相原料中的实施例5制备的玫瑰发酵液替换成高山火绒草提取物，其他组分及制备方法同上述面膜的制备，制得对照样品。

试验方法：选取志愿者264名，年龄23-30岁，所有志愿者无皮肤疾患，供试皮肤部位完全正常，且无服用任何皮质类固醇激素或抗组胺药物史。实验前对所有志愿者的前臂内侧皮肤进行斑贴试验。无皮肤反应者，随机分为两组，实验组和对照组，并对其脸部皮肤颜色和黑色素值进行评定，评定前，志愿者清洁面部，并在21±1℃，RH 50±5％中环境中静坐30分钟。试验采用半脸对照法，实验组志愿者左半边脸使用上述含有玫瑰发酵液的面膜，右半边脸不使用任何面膜，对照组左半边脸使用对照样品，右半边脸不使用任何面膜，每三天使用1次，使用30天后，再次对所有志愿者的皮肤颜色和黑色素值进行评定。试验期间所有志愿者停用任何外用药物，脸部皮肤只进行日常清洗和基本护理。

皮肤颜色数值越大表明皮肤越白，黑色素数值越高表明皮肤中黑色素含量越高。皮肤美白判断标准：实验前后，皮肤颜色差值≥20，黑色素差值≤-50，有显著美白效果；5≤实验前后皮肤颜色差值≤20，-50≤黑色素差值≤-20，有美白效果；0≤实验前后皮肤颜色差值≤5，-20≤黑色素差值≤0，无美白效果；实验前后，皮肤颜色差值≤0，黑色素差值≥0，有副作用。

由表3可知，含有本发明玫瑰发酵液的面膜，相对于含有高山火绒草提取物美白成分的面膜而言，具有显著的美白功效，优于现有市售美白原料。且使用30天后，实验组志愿者的左脸状态明显较右脸好，经皮肤水分测试仪测得，其左脸表皮综合营养水分率相比对照组更高。实验组有102名志愿者表示使用含有本发明玫瑰发酵液的面膜30天后，左脸皮肤较右脸光滑、柔软而有弹性，且眼角外侧浅表细小的皱纹明显减少或消失不见，对照组仅有25名志愿者表示使用30天后左眼角外侧细纹有明显减少或消失的效果。可见，含有本发明玫瑰发酵液的面膜有保湿、美白和抗皱的作用。

本发明不局限于所述实施方式，任何人应得知在本发明的启示下作出的结构变化，凡是与本发明具有相同或相近的技术方案，均落入本发明的保护范围之内。

本发明未详细描述的技术、形状、构造部分均为公知技术。

Claims (10)

1.一种玫瑰发酵液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一，将新鲜采摘的玫瑰花冷链保存，冻干粉碎，得到玫瑰干粉；

步骤二，将步骤一中所得的玫瑰干粉与米粉混均匀，经40℃热盐水浸湿后，置于水蒸气上加热20-30分钟，加热后冷却至30-50℃进行水浴保温，水浴保温18-24小时，得发酵物；

步骤三，向步骤二中所得的发酵物中加入质量浓度为4％的葡萄糖水，搅拌均匀得发酵混合物，再加入pH缓冲剂，将发酵混合物pH值调至6.0，接入枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌菌液，于35-38℃发酵48小时；

步骤四，将步骤三发酵后所得发酵产物过滤除渣，得初始发酵液，将初始发酵液灌入高压均浆器中，得溶胞液，经离心处理，取上清液，即得玫瑰发酵液。

2.根据权利要求1所述的一种玫瑰发酵液的制备方法，其特征在于：步骤二中所述玫瑰干粉与米粉的质量比为(7-5):(1-2)。

3.根据权利要求1所述的一种玫瑰发酵液的制备方法，其特征在于：步骤二中所述热盐水的质量浓度为10％-15％，热盐水的最佳质量浓度为12％。

4.根据权利要求1所述的一种玫瑰发酵液的制备方法，其特征在于：所述步骤二中，加热后冷却至35-45℃，最佳温度为40℃，水浴保温20-22小时，最佳水浴保温时间为21小时。

5.根据权利要求1所述的一种玫瑰发酵液的制备方法，其特征在于：步骤三中所述发酵物、葡萄糖水与菌液的体积比为(100-200):(2000-4000):(3-5)。

6.根据权利要求1所述的一种玫瑰发酵液的制备方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌BD-2,植物乳杆菌为植物乳杆菌ZSM-002,两种菌液浓度均为10⁶-10⁸CFU/mL。

7.根据权利要求1所述的一种玫瑰发酵液的制备方法，其特征在于：所述离心处理的条件为：离心转速为2000-4000转/分钟，时间为20-30分钟，离心半径10cm。

8.根据权利要求1-7中任意一个所述的一种玫瑰发酵液的制备方法制备的玫瑰发酵液。

9.如权利要求8所述的一种玫瑰发酵液的应用，其特征在于：所述玫瑰发酵液应用于下述至少一种功能的化妆品中的应用或在直接作为具有下述至少一种功能的化妆品中的应用：(1)美白，(2)保湿，(3)抗皱。

10.如权利要求9所述的一种玫瑰发酵液的应用，其特征在于：上述应用中，所述化妆品具体可为面膜、面霜或精华液。